Made available in DSpace on 2015-03-26T13:54:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 108218 bytes, checksum: df61a2c6afdaedf6a12bdaee5a6b2ca1 (MD5) Previous issue date: 2010-07-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This experiment was conducted to evaluate levels of inclusion of zeolite in diets for growing-finishing pigs on performance, feed intake, carcass characteristics, blood and hepatic parameters and the bone concentration of calcium and phosphorous. Eighty four barrows from commercial hybrids of high genetic potential for meat deposition, with 70 days of age and initial weight of 30.34 ± 1.14 kg were distributed, on the basis of weight, in randomized blocks design, with seven sequences levels of adsorbent (0.0-0.0; 1.0-0.5; 1.0-1.0; 2.0-1.0; 2.0-2.0; 3.0-1.5 and 3.0-3.0, respectively, on growing phase and finishing phase), six replicates with two animals per pen, which was considered the experimental unit. The experimental diets for the growing (70 to 105 days) and finishing (106 to 135 days) phases were formulated with corn, sorghum and soybean meal, supplied with minerals, vitamins and amino acids. The sorghum was used as naturally contaminated source of mycotoxins. The different levels of adsorbent in the diets were obtained by the supplementation of zeolita in the basal diet. The inclusion of zeolite in the diet did not affect the daily feed intake, daily weight gain, feed conversion and the carcass characteristics of the pigs. In the same way blood and hepatic parameters and the bone concentration of calcium and phosphorous were not affect by the different levels of zeolita. Due to the good performance and carcass characteristics as well the normality of the others analyzed parameters of the animals fed the diets without adsorbents, it can be inferred that the diets had low levels of mycotoxin contamination. It can be concluded that the levels of zeolite do not affect the performance, feed intake, carcass characteristics, blood and hepatic parameters and the bone concentration of calcium and phosphorous in growing-finishing pigs fed diets with low level of mycotoxin contamination. / Este experimento foi realizado com o objetivo de avaliar níveis de zeolita em dietas para suínos em fase de crescimento e terminação sobre o desempenho, o consumo de ração, as características de carcaça, os parâmetros sanguíneos e histológicos do parênquima hepático e os teores ósseos de cálcio e fósforo. Foram utilizados 84 suínos machos castrados, híbridos comerciais, de alto potencial genético para deposição de carne, com 70 dias de idade e peso inicial de 30,34 ± 1,14 kg, distribuídos em delineamento experimental de blocos ao acaso, com sete seqüências de níveis de zeolita (0,0-0,0; 1,0-0,5; 1,0-1,0; 2,0-1,0; 2,0-2,0; 3,0-1,5 e 3,0-3,0), respectivamente, nas fases de crescimento e terminação, com seis repetições, com dois animais por baia que foi considerada a unidade experimental. Na formação dos blocos levou-se em consideração o peso inicial dos animais. As dietas experimentais para as fases de crescimento (70 aos 105 dias) e terminação (106 aos 135 dias) foram formuladas à base de milho, sorgo baixo tanino e farelo de soja, suplementadas com minerais, vitaminas e aminoácidos com base no conceito de proteína ideal. Utilizou-se o sorgo como fonte de contaminação natural por micotoxinas. Os níveis de adsorvente das dietas experimentais foram obtidos a partir da inclusão de zeolita em substituição a areia lavada. Não houve efeito dos níveis de zeolita nas dietas sobre o consumo de ração diário, ganho de peso diário, conversão alimentar e sobre as características quantitativas de carcaça avaliadas dos animais. Os níveis de zeolita nas dietas também não influenciaram os parâmetros sanguíneos, histológicos do parênquima hepático e os teores ósseos de cálcio e fósforo dos suínos. Devido ao elevado desempenho e características de carcaça bem como a normalidade dos demais parâmetros estudados dos animais que receberam dieta sem adsorvente, pode-se inferir que as dietas continham baixo grau de contaminação por micotoxinas. Conclui-se que os níveis de zeolita não influenciam o desempenho, o consumo de ração, as características de carcaça, os parâmetros sanguíneos e histológicos do parênquima hepático e os teores ósseos de cálcio e fósforo de suínos em fase de crescimento e terminação recebendo dietas com baixo nível de contaminação por micotoxinas.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-17T12:26:34Z No. of bitstreams: 1 Victor Hugo de Vasconcelos Calado.pdf: 593050 bytes, checksum: ab20bdddfa55a2c22cb9e115c16dbb93 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-17T12:26:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Victor Hugo de Vasconcelos Calado.pdf: 593050 bytes, checksum: ab20bdddfa55a2c22cb9e115c16dbb93 (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Mycotoxins have been a problem in poultry production to be present in the major ingredients (corn and soybean meal) that make up the poultry feed, leading to problems such as an inadequate use of food and reduction of animal front immunity to various pathogens. Thus it aimed to evaluate the effects of adding mycotoxin adsorbents in broiler diets naturally contaminated with aflatoxin and fumonisin, on the parameters: histopathology, biometric and serological. The experiment was conducted with 60 birds, seven-day-old Cobb commercial line in three treatments: T1 - control (not including mycotoxin adsorbents in diet); T2 - adding 0.5 kg / t. of adsorbent A and T3 inclusion of 1.5 kg / t of adsorbent B. The broilers receive in all treatments, isonutritives diets naturally contaminated by mycotoxins. These broilers were raised up to 60 days old when was made serology tests for NDV and IBDV, and after were sacrificed for histopathologic and biometric analysis. The results were submitted to analysis of variance (ANOVA) with significance level of 5% probability and Tukey test. There were significant differences between treatments (P <0.05) in body weight. The body weight was significantly different between T1 and T2 (P = 0.01400), with a higher weight of the broilers receiving the adsorbent (4.26 ± 0.37). Among the organs analyzed, only the weight of the cecal tonsil significant difference between T1 and T2 (P <0.05; P = 0.03008), and T1 (5,20g ± 1.239) had an average weight slightly higher than average weight of T2 (4,05g ± 1.208). The amounts of immunoglobulins to IBDV showed significantly higher concentrations in T2 (P = 0.041). This contamination of broilers aflatoxin and fumonisin caused histopathological lesions in immune organs, liver and kidneys. However adsorbents used A and B reversed in parts of the lesions, especially in the liver, bursa and thymus. This reversal of lesions led to improved serological tests for IBD (Gumboro bursal-infectious disease) in the group treated with the adsorbent, resulting in broilers with better performance, suggesting that this adsorbent showed better effect on broilers in field conditions. / As micotoxinas têm sido um problema na produção avícola por estarem presentes nos principais ingredientes (milho e farelo de soja) que compõem a ração para aves, levando a problemas como: inadequado aproveitamento dos alimentos e diminuição de imunidade animal frente a patógenos diversos. Assim, objetivou-se avaliar os efeitos da adição de adsorventes de micotoxinas, em dietas de frangos de corte contaminadas naturalmente com aflatoxinas e fumonisinas, sobre os parâmetros: biométricos, sorológicos e histopatológicos. O experimento foi realizado com 60 aves, com sete dias de idade, da linhagem comercial Cobb distribuídas em três tratamentos: T1 – Controle (sem inclusão de adsorventes de micotoxinas na dieta); T2 – inclusão de 0,5 kg/t do adsorvente A (composto por aluminossilicato de sódio e cálcio modificado industrialmente) e T3- inclusão de 1,5 kg/t do adsorvente B(composto por aluminossilicato de sódio e cálcio). As aves receberam, em todos os tratamentos, dietas isonutritivas, feitas com milho sabidamente contaminado, em campo por micotoxinas. Essas aves foram criadas até 60 dias de idade, quando foi realizada sorologia para NDV(vírus da doença de Newcastle) e IBDV(vírus da doença infecciosa bursal) e preparadas para eutanásia para posteriores análises histopatológicas e biométricas. Ao final, o peso vivo foi significativamente diferente entre os tratamentos T1 e T2 (P=0,01400), observando-se maior peso das aves que receberam o adsorvente A (4,26 ± 0,37). Entre os órgãos analisados, apenas o peso da tonsila cecal apresentou diferença significativa entre os tratamentos T1 e T2 (P<0,05; P=0,03008), sendo que T1 (5,20g ± 1,239) apresentou peso médio levemente superior ao peso médio do T2 (4,05g ± 1,208). No teste sorológico, as quantidades de imunoglobulinas para IBDV apresentaram concentrações significativamente maiores no T2 (P=0,041). A intoxicação das aves com aflatoxinas e fumonisinas provocou lesões histopatológicas nos órgãos linfóides (bolsa cloacal, baço, timo e tonsilas cecais), fígado e rins. Contudo os adsorventes usados A e B minimizou as lesões, principalmente no fígado, bursa, e timo. A menor intensidade das lesões proporcionou melhores resultados sorológicos para IBDV no grupo tratado com o adsorvente A, resultando em aves com melhor desempenho, conclui-se sugerindo que este adsorvente produz melhor efeito nas aves em condições de campo.

O aumento da demanda, a falta de fiscalização sanitária efetiva e de especificações adequadas para verificar a qualidade de drogas vegetais são fatores que contribuem para o acesso a produtos sem garantia da qualidade e segurança. Embora sejam consideradas seguras por sua origem natural, as drogas vegetais apresentam elevadas cargas microbianas e podem oferecer riscos potenciais aos usuários, tanto pela presença de microrganismos potencialmente patogênicos, quanto pela contaminação com toxinas. O objetivo deste estudo foi avaliar a contaminação microbiana presente em 91 amostras de drogas vegetais, o potencial toxigênico de fungos isolados e a presença de aflatoxinas, ocratoxina A e citrinina nestas amostras. Os resultados obtidos demonstraram que 73,6% das amostras apresentaram populações microbianas superiores a 2X103 UFC de bactérias aeróbias/g e 2X102 UFC de bolores e leveduras/g e que 81,3% apresentaram ao menos um dos microrganismos considerados indicadores de risco. Com relação à contaminação fúngica, observou-se o predomínio dos gêneros Aspergillus e Penicillium, sendo que a análise micotoxicológica revelou que 21,49% apresentaram capacidade para produção de aflatoxinas, ocratoxina A e citrinina. Apesar de fungos toxigênicos terem sido detectados em 35 amostras de drogas vegetais, a análise micotoxicológica, realizada conforme Farmacopéia Americana, não revelou a presença de aflatoxinas, ocratoxina A e citrinina em nenhuma das amostras de drogas vegetais, indicando que os microrganismos podem não terem sido submetidos a condições favoráveis à expressão de sua capacidade toxigênica. / The increase in the demand, the lack of effective sanitary fiscalization and adjusted specifications to verify the quality of crude herbal drugs are factors that contribute for accessing products without guarantee of the quality and safety. Although they are considered safe by their natural origin, herbal drugs present high microbial loads and can offer potential risks to the users, as much for the presence of potencially pathogenic microorganisms, how much for the contamination with toxins. The goal of this study was evaluated the microbial contamination present in 91 samples of crude herbal drugs, the toxigenic potencial of fungal isolates and the presence of aflatoxins, ochratoxin A and citrinin in these samples. The obtained results demonstrated 73.6% of the samples presented microbial populations higher than 2X103 CFU of aerobic bacteria/g and 2X102 CFU of yeast and molds/g and 81.3% presented at least one of the microorganisms considered as risk indicators. With regard to the fungal contamination, the Aspergillus and Penicillium genera were predominant and the mycotoxicological analysis revealed that 21.49% of these isolates presented ability for aflatoxins, ochratoxin A and citrinin production. Although toxigenic fungi have been detected in 35 samples of herbal drugs, the mycotoxicological analysis, carried through as The United States Pharmacopeia, showed no detection of aflatoxins, ochratoxin A or citrinin in any samples of herbal drugs, indicating that these fungi can not have been submitted a favorable conditions to the expression of their toxigenic ability.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fungi can be found everywhere in nature and are known occur in maize. Those which have the ability to produce substances toxic to humans and animals, from its secondary metabolism, are named toxigenic fungi and the metabolites produced are called mycotoxins. Due to the presence of various toxigenic fungal species in maize crop, the occurrence of a large number of metabolites is expected. Besides occur in native forms, mycotoxins can occur in the form called masked, a result of changes in structure or chemical reactions with constituents of plants, making them undetectable to the analytical methodologies conventionally employed. Due to the damage that mycotoxins can cause to human and animal health, laws establishing maximum permitted levels of contamination in food has been proposed, but restricted to a small number of mycotoxins, partly due to analytical limitations and partly in consequence of the lack of database of natural occurrence of these contaminants in the native and masked forms. To evaluate the occurrence of fungal metabolites in maize, 148 samples were collected in the South region of Brazil. All samples were contaminated with at least 10 fungal metabolites and the higher co-occurrence detected in the same sample was 51 metabolites. In all maize samples analyzed were detected at least two mycotoxins adressed by Brazilian law (fumonisin B1 and fumonisin B2). Besides the research of the native forms of mycotoxins, analysis for masked fumonisin were performed. Seventy two maize samples were analyzed and masked fumonisin concentration was found up to two times greater than the concentration of fumonisins in native form. Furthermore, a positive correlation (R = 0.97) was found between the concentration of native and masked fumonisin. Based on this correlation, a mathematical prediction model to estimate the concentration of total fumonisins, based on the concentration of native fumonisins was generated. After knowing the co-occurence of several fungal metabolites in maize, the performance of broilers chickens submitted to diets with fungal culture material was evaluated. Body weight and feed conversion were significantly altered after 21 days of experiment in the group receiving diet containing higher concentrations of fusaric acid. The analytical methodologies enabled a first approach to study the co-occurrence of mycotoxins in their native and masked forms in maize naturally contaminated, collected in the South region of Brazil. The negative effect on the performance of broilers chickens, demonstrating that the co-occurrence of Fusarium mycotoxins have real impact in poultry and requires greater attention of the parties involved. / Fungos podem ser encontrados em toda a natureza e são de conhecida ocorrência na cultura do milho. Aqueles que possuem a capacidade de produzir substâncias tóxicas para humanos e animais, a partir de seu metabolismo secundário, denominam-se fungos toxígenos e os metabólitos produzidos são denominados micotoxinas. Devido a presença de diversas espécies fúngicas toxígenas na lavoura de milho, a ocorrência de um grande número de metabólitos é esperada. Além de ocorrerem em sua forma nativa, micotoxinas podem ocorrer na forma designada mascarada, resultado de alterações em sua estrutura ou de reações químicas com constituintes de plantas, tornando-as indetectáveis para as metodologias de análise convencionalmente empregadas. Em consequência aos prejuízos que as micotoxinas podem causar a saúde humana e animal, legislações estabelecendo limites máximos permitidos de contaminação em alimentos tem sido propostas, porém restritas a um pequeno número de micotoxinas, em parte devido a limitações analíticas e parte em decorrência da escassez de dados de ocorrência natural destes contaminantes na forma nativa e mascarada. Para avaliar a ocorrência de micotoxinas no milho, 148 amostras de milho foram coletadas nos estados pertencentes a região sul do Brasil. Todas as amostras estavam contaminadas com pelo menos 10 metabólitos fúngicos e a maior co-ocorrência detectada em uma mesma amostra foi 51 de compostos. Em todas as amostras de milho analisadas, foram detectadas pelo menos duas micotoxinas listadas na legislação brasileira (fumonisina B1 e fumonisina B2). Além da pesquisa das formas nativas de micotoxinas, foram realizadas análises para determinação de fumonisinas na forma mascarada. Setenta e duas amostras de milho foram analisadas e a concentração de fumonisinas mascaradas encontrada foi até duas vezes maior do que a concentração de fumonisinas na forma nativa. Ademais, uma correlação positiva (R=0.97) foi encontrada entre a concentração de fumonisinas na forma nativa e mascaradas. Baseado nesta correlação, foi gerado um modelo matemático de predição para estimativa da concentração de fumonisinas totais, baseado na medida de fumonisinas na forma nativa. Como consequência a constatação da co-ocorrência a diversas micotoxinas, o desempenho de frangos de corte submetidos a dietas contaminadas com materiais de cultivo fúngico foi avaliado. Peso corporal e conversão alimentar foram significativamente alterados aos 21 dias de experimento no grupo que recebeu dieta contendo maiores concentrações de ácido fusárico. As metodologias analíticas aplicadas permitiram uma primeira abordagem para estudo da co-ocorrência de micotoxinas na sua forma nativa e na forma mascarada em amostras de milho naturalmente contaminadas, coletadas na região sul do Brasil. O efeito negativo sobre o desempenho de frangos de corte observado, demonstrando que a co-ocorrência de micotoxinas do gênero Fusarium tem real impacto na avicultura e requer maior atenção das partes envolvidas.

Natto and sprout soybeans are produced using small-seeded soybeans and their production is a high value alternative to grow grain soybeans for food in U.S. The development of soybean cultivars with improved natto and sprout quality is crucial for maintaining and increasing the soyfood market. However, there is insufficient information on sprout soybean characteristics. Therefore, the first objective of this study was to evaluate seed and sprout traits as potential selection criteria and study the storage effect on sprout quality. Seeds can be a vehicle for transmission of pathogens capable of causing human illness. That is why, the second objective was to identify seed-borne pathogens on a commercial soybean cultivar and to evaluate different seed decontamination treatments. Finally, seed coat deficiency is an undesirable trait for natto soybean seeds because it causes inferior appearance of the product. Thus, the third objective was to identify quantitative trait loci (QTL) underlying seed coat deficiency (SCD) and associated markers. Results showed that seed size, high-, average- and low-quality sprout percentage, hypocotyl thickness and length and sprout yield are the most important variables for breeding sprout cultivars; and one-year seed storage at room temperature reduced sprout quality. Fusarium, Alternaria and Diaphorte were the most frequent genera isolated from soybean seeds, and 2% calcium hypochlorite and 5% acetic acid were promising seed disinfection treatments. A stable QTL, qSCD20_1, was identified across two years explaining up to 25% of the variation of SCD; and eight molecular markers tightly linked and nearby qSCD20_1 were identified. Information presented will be helpful for sprout and natto soybean cultivar development. / Master of Science / Natto and sprout soybeans are produced using by small-seeded soybeans and their production is a high value alternative to grow grain soybeans for feed in U.S. The development of soybean cultivars with improved natto and sprout quality is crucial for maintaining and increasing the soyfood market. However, there is insufficient information on sprout soybean characteristics. Therefore, the first objective of this study was to evaluate important seed and sprout traits as potential selection criteria of soybean cultivars and study the storage effect on sprout quality. Seeds can be contaminated with fungi capable of causing human illness. So, the second objective was to identify fungus species associated with seeds of a sprout soybean cultivar and evaluate different seed disinfection treatments. Finally, seed coat deficiency is an undesirable trait for natto soybean seeds because it causes inferior appearance of the product. Thus, the third objective was to identify molecular markers associated with seed coat deficiency. Results showed that seed size, high-, average- and low-quality sprout percentage, hypocotyl thickness and length and sprout yield are the most important variables for breeding sprout cultivars; and one-year seed storage at room temperature reduced sprout quality. Fungal species that may cause human illness were isolated from sprout soybean seeds and calcium hypochlorite and acetic acid are promising seed disinfection treatment for reducing fungus incidence. Finally, eight molecular markers associated with seed coat deficiency were identified which may be potentially used in selecting natto soybean cultivars with low seed coat deficiency. Information presented will be helpful for sprout and natto soybean cultivar development.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2017-01-04T11:32:19Z No. of bitstreams: 1 2016 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1613295 bytes, checksum: 957f0b025def400e446f7c3176c76b4c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-04T11:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1613295 bytes, checksum: 957f0b025def400e446f7c3176c76b4c (MD5) Previous issue date: 2016-03-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Mycotoxins are natural contaminants produced by filamentous fungi and they are widely present in food. In wheat grains, the presence of trichothecenes produced by Fusarium spp. and also aflatoxins, produced by Aspergillus spp. are a serious public health problem because they are toxic metabolites to man and animals that remain stable during the industrial processes to which wheat is subjected when manufacturing derived products. One way to reduce such contaminants is to use ozone (O3) in food processing. Due to its high potential as an oxidant, O3 may react with mycotoxins and reduce their toxicity due to molecular degradation. This research aimed to evaluate the effects of different conditions of ozonation on the i) reduction in mycotoxins levels (deoxynivalenol and total aflatoxins); ii): reduction in total fungal count; iii) the effects on chemical, mineral and technological profiles and; iv) the possible differences sensorial profile of the flour obtained from the ozonized grains. In a second phase of this project, a methodology for determination of D3G (deoxynivalenol-3-glucoside), a masked form of DON, using High Performance Liquid Chromatography with photodiode array detector (HPLC-PDA) was optimized and in-house validated. Results obtained from ozonation study showed that O3 reduced total fungal count in approximately 3.0 cycles log CFU/g of wheat grain and deoxynivalenol and total aflatoxins contamination up to 64.3% and 48.0%, respectively. The gaseous ozonation can be applied without negatively changing the chemical, technological and sensory characteristics of the grains and can be considered an excellent method for remediation of fungal and mycotoxin contaminations. Also, the method optimized and in-house validated for determination of D3G by HPLC-PDA showed adequate results and, it could be considered an alternative to mass spectrometry determination of D3G in wheat grains. / Micotoxinas s?o contaminantes naturais, produzidos por fungos filamentosos e, podem ocorrer em altos n?veis nos alimentos. Nos gr?os de trigo, a presen?a de tricotecenos, um grupo de micotoxinas produzidas por Fusarium spp. e, aflatoxinas, produzidas por Aspergillus spp., representam um importante problema de sa?de p?blica por serem t?xicas ao homem e animais e muito est?veis aos processos no qual o trigo ? submetido para obten??o de produtos industrializados. Uma forma de reduzir a contamina??o dos alimentos por micotoxinas ? atrav?s do uso do oz?nio (O3) no processamento do alimento. Devido ao alto potencial oxidante do O3, esse pode degradar as mol?culas das micotoxinas, tendo como consequ?ncia a elimina??o ou redu??o de seus efeitos t?xicos. Essa pesquisa teve como objetivos principais avaliar os efeitos de diferentes condi??es de ozoniza??o na i) redu??o de micotoxinas (desoxinivalenol e aflatoxinas) em gr?os de trigo; ii) redu??o nos n?veis de fungos filamentosos; iii) influ?ncia nos par?metros qu?micos, perfil de minerais e par?metros tecnol?gico dos gr?os e da farinha obtida ap?s o processamento e; iv) influ?ncia nas caracter?sticas sensoriais da farinha elaborada a partir dos gr?os ozonizados. Em uma segunda etapa do projeto, um m?todo para determina??o de uma forma modificada do desoxinivalenol (DON), o desoxinivalenol-3-glicos?deo (D3G) foi otimizada e validada intralaboratorialmente, utilizando cromatografia l?quida de alta efici?ncia com detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). Os resultados obtidos dos ensaios de ozoniza??o demonstraram que o O3, nas condi??es experimentais utilizadas, reduziu a contagem de fungos totais em cerca 3,0 logs UFC/g de gr?os e a contamina??o por desoxinivalenol e aflatoxinas totais em at? 64,3 % e 48,0 %, respectivamente. O processo de ozoniza??o n?o influenciou de modo negativo a qualidade qu?mica, tecnol?gica e sensorial dos gr?os de trigo, podendo ser utilizado como um excelente m?todo para remedia??o da contamina??o dos gr?os por fungos e micotoxinas. Resultados adequados tamb?m foram obtidos na valida??o do m?todo de determina??o de D3G por CLAE-DAD, demonstrando que o m?todo ? confi?vel para a determina??o dessa forma mascarada do DON em gr?os e trigo e, pode ser utilizado como um m?todo alternativo a espectrometria de massas para tal an?lise.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-04-18T19:29:49Z No. of bitstreams: 1 2012 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1177577 bytes, checksum: 5ad9ebc406a8cd78d15ebfdc7acb27ff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T19:29:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1177577 bytes, checksum: 5ad9ebc406a8cd78d15ebfdc7acb27ff (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / CAPES / The grated parmesan cheese is a food commonly consumed in Brazil and, in the last decade, few studies evaluated their quality. The aim of this research was to evaluate the adequacy and the levels of aflatoxin M1 in the grated parmesan cheese marketed in the Metropolitan Region of Rio de Janeiro in relation to the recommendations of current legislation. For this, were analyzed 30 samples representing 10 major brands sold in the region. In the evaluation of quality, were analyzed the levels of moisture, water activity, pH, acidity, sorbic acid and indicator microorganisms of hygienic quality and sanitary. The research of AFM1 was carried out by high performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-DFL) preceded by purification by immunoaffinity chromatography. Only 14 of the 30 samples analyzed (46.7%) were in accordance with the legislation that regulates the product quality. Beyond the lack of uniformity in production, the major irregularities were due to excessive moisture content and also by the abusive addition of the preservative sorbic acid. These results suggest the occurrence of faults on Good Manufacturing Practices by the industries responsible for the brands tested, which represents beyond economic fraud, risks to consumers health, even if indirectly. With relation to research of AFM1, all samples showed satisfactory values with the national legislation. However, the existing limit for aflatoxin in this product is excessively high when compared with those established by others countries. If compared with the regulation prevailing in the European Union, 8 samples (26.7%) could be considered contaminated. / O queijo parmes?o ralado ? um alimento popularmente consumido no Brasil e, na ?ltima d?cada poucos trabalhos objetivaram estudar sua qualidade. Esta pesquisa objetivou avaliar a adequa??o do queijo parmes?o ralado comercializado na Regi?o Metropolitana do Rio de Janeiro em rela??o ao preconizado pela legisla??o atual e tamb?m pesquisar os ?ndices de aflatoxina M1 (AFM1) no produto. Para tal, foram analisadas 30 amostras representativas das 10 principais marcas comercializadas na regi?o. Na pesquisa da qualidade, foram analisados os teores de umidade, atividade de ?gua, pH, acidez titul?vel, conservante ?cido s?rbico e microrganismos indicadores da qualidade higi?nica e sanit?ria. J? a pesquisa de AFM1 foi realizada por cromatografia l?quida de alta efici?ncia com detec??o por fluoresc?ncia (CLAE-DF), precedida de purifica??o por Cromatografia de Imunoafinidade. Apenas 14 amostras das 30 analisadas (46,7%) estavam em acordo com a legisla??o que regulamenta a qualidade do produto. Al?m da falta de uniformidade na produ??o, as principais irregularidades constatadas foram referentes ao excessivo teor de umidade e tamb?m pela adi??o abusiva do conservante ?cido s?rbico. Tais resultados sugerem a ocorr?ncia de falhas nas Boas Pr?ticas de Fabrica??o pelas ind?strias respons?veis pelas marcas analisadas, o que representa al?m de fraude econ?mica, riscos ? sa?de do consumidor, mesmo que de forma indireta. Com rela??o a pesquisa de AFM1, todas as amostras se adequaram a legisla??o nacional. No entanto, o limite existente para a presen?a da toxina neste produto ? excessivamente alto quando comparado com os estabelecidos por outros pa?ses. Se comparado com a regulamenta??o predominante na Uni?o Europ?ia, 8 amostras (26,7%) poderiam ser consideradas contaminadas.

La fusariosi della spiga è tra le malattie del grano più distruttive e diffuse al mondo. Alcune specie responsabili di questa malattia sono micotossigene. Ci sono state segnalazioni della presenza di nivalenolo (NIV) e tossine T-2 e HT-2 nel nord Italia, micotossine prodotte da Fusarium poae, F. sporotrichioides e F. langsethiae. I limiti massimi di T-2 e HT-2 ammessi nei cereali non trasformati e nei prodotti a base di cereali non sono ancora stati individuati (Regolamento CE 856/2005). Il programma di dottorato del candidato è inserito in questa linea di ricerca. Sono stati condotti studi in vitro sulla biologia ed ecologia dei funghi produttori di NIV, T-2 e HT-2, considerando quattro isolati di F. poae, due di F. sporotrichioides e due di F. langsethiae. Le prove hanno riguardato la crescita delle colonie, la produzione di spore, la loro germinazione e la produzione di micotossine. La gravità dell'infezione, l'invasione (quantità di DNA nelle spighe), la resa in granella e la produzione di tossine sono state misurate a diversi tempi, temperature (in planta) e stadi fenologici (in campo) dopo l'inoculazione artificiale. Al fine di verificare l'attendibilità dei dati, tutti gli esperimenti in planta e in campo sono stati ripetuti per due anni. / The Fusarium head blight is one of the most destructive diseases of wheat in different parts of the world. Some of the species responsible for Fusarium head blight are potentially mycotoxigenic. There are reports of nivalenol (NIV), T-2 toxin and HT-2 in northern Italy. These are metabolites produced by F. poae, F. sporotrichioides, and F. langsethiae. The maximum limits of T-2 and HT-2 permitted in unprocessed cereals and cereal-based products, included in EC Regulation 856/2005 has not been identified. The PhD program of the candidate is placed in this line of the research. In vitro studies conducted on the biological and ecological of pathogenic fungi producer NIV, T-2 and HT-2 including four isolates of F. poae, two of F. sporotrichioides and two isolate of F. langsethiae. Tests were carried out to investigate the conidia germination, colony growth, spore production and mycotoxins production. The infection severity, invasion (amount of DNA in spikes), grain yield and toxin production were measured at different temperatures, different time (in planta) and different growth stages (in field) after artificial inoculation.

Philosophiae Doctor - PhD / A highly dispersive gold nanoparticle-dotted 4-nitrophenylazo functionalised graphene nanocomposite (AuNp/G/PhNO2) was successfully synthesised and applied in enhancing sensing platform signals. Three label-free electrochemical immunosensors for the detection of deoxynivalenol mycotoxin (DON) based on the systematic modification of glassy carbon electrodes (GCE) with AuNp/G/PhNO2 was effectively achieved. General electrochemical impedance method was employed for the sensitive and selective detection of DON in standard solutions and reference material samples. A significant increase in charge transfer resistance (Rct) of the sensing interface was observed due to the formation of insulating immune-complexes by the binding of deoxynivalenol antibody (DONab) and deoxynivalenol antigen (DONag). Further attachments of DONab and DONag resulted in increases in the obtained Rct values, and the increases were linearly proportional to the concentration of DONag. The three immunosensors denoted as GCE/PDMA/AuNp/G/PhNH2/DONab, GCE/Nafion/[Ru(bpy)3]2+/AuNp/G/PhNH2/DONab and GCE/Nafion/[Ru(bpy)3]2+/G/PhNH2/DONab have detection range of 6 – 30 ng/mL for DONag in standard samples. Their sensitivity and detection limits were 43.45 ΩL/ng and 1.1 pg/L; 32.14ΩL/ng and 0.3 pg/L; 9.412 ΩL/ng and 1.1 pg/L respectively. This result was better than those reported in the literature and compares reasonably with Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) results. The present sensing methodology represents an attractive alternative to the existing methods for the detection of deoxynivalenol mycotoxin and other big biomolecules of interest due to its simplicity, stability, sensitivity, reproducibility, selectivity, and inexpensive instrumentation. And they could be used to develop high-performance, ultra-sensitive electrochemiluminescence, voltammetric or amperometric sensors as well.

Fungal growth on food and subsequent contamination with mycotoxins is a public health problem. Ochratoxin A (OTA) is a important mycotoxin, with nephrotoxic effects and carcinogenic properties. Decreasing the fungal contamination and consequently preventing toxin development is the most efficient action to reduce human exposure through the diet. The use of organic acids as preservatives in foods is an excellent alternative. The aim of this study was to investigate the influence of acetic, citric and sorbic acid on the growth of Aspergillus species at different acidic pH values, and the influence of these organic acids on OTA production. To evaluate the susceptibility of the isolates in the analyzed acids a factorial arrangement was used with nine fungi, four pH levels (4.5, 5.0, 5.5, and 6.0) and three types of acids in different concentrations: acetic acid (0, 12.5, 25, 50, 100, 200, 400 and 800mm), citric acid (0, 50, 100, 200, 400 and 800mm) and sorbic acid (0, 0.5, 1, 2, 4, 8, 16 and 32mm). The experiments were incubated for six days and conducted in triplicate. The inhibitory concentrations (IC) were the lowest acid concentration tested where the fungi was not able to grow. To determine the influence of these acids on mycotoxin production, a factorial arrangement was used with two fungi (A. carbonarius and A. niger) and two pH (4.5 and 5.0). The acid concentrations were the same as those used in the susceptibility experiments. The experiment was carried out in duplicate by incubation for seven days at 25°C for the determination of IC for each isolate. Controls and two concentrations below the IC (0, 25 and 50% IC) were selected for the analysis of OTA. OTA quantification was performed by high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection. Differences were found on the sensitivity of the species tested between the analyzed acids. A. flavus, A. parasiticus and A. carbonarius were more sensitive to acetic and sorbic acids whereas A. niger and A. tubingensis were the most resistant. A direct correlation between pH and the inhibitory concentration was observed. Generally, for every increase in pH by 0.5 the level of acetic acid and sorbic acid required to inhibit the growth of the same isolate doubled. In the other side, citric acid did not show an important antifungal power. It was also observed that sub-lethal dosages of sorbic acid did not prevent fungal growth, and in addition can stimulate the production of ochratoxin A on A. carbonarius and A. niger isolates. The result shows the importance of considering both the pH and the predominant fungal species in the product, when calculating the acid dosages for prevention of fungal food spoilage. / O desenvolvimento de fungos em alimentos e a subsequente possibilidade de contaminação destes por micotoxinas constituem um problema de saúde pública. Dentre as micotoxinas mais importantes temos a ocratoxina A (OTA), com ação nefrotóxica e propriedades carcinogênicas. Diminuir a contaminação fúngica e consequentemente prevenir a formação desta toxina é a medida mais eficiente para reduzir a exposição dos seres humanos através da dieta. O uso de ácidos orgânicos como conservante em alimentos representa uma alternativa frente a este problema. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar a influência dos ácidos acético, cítrico e sórbico sobre o crescimento de espécies do gênero Aspergillus em meio de cultura sob diferentes valores de pH, além de determinar a influência destes ácidos orgânicos na produção de OTA. Para avaliar a suscetibilidade dos isolados aos ácidos testados foi utilizado um arranjo fatorial com nove cepas de Aspergillus, quatro níveis de pH (4,5; 5,0; 5,5; e 6,0) e três tipos de ácidos nas concentrações: ácido acético (0; 12,5; 25; 50; 100; 200; 400 e 800 mM), ácido cítrico (0; 50; 100; 200; 400 e 800mM) e ácido sórbico (0; 0,5; 1; 2; 4; 8; 16; 32 mM). Os experimentos foram conduzidos em triplicata, incubados por seis dias. As concentrações inibitórias (CI) foram as menores concentrações de ácido testadas onde não houve crescimento fúngico. Para determinar a influência destes ácidos na produção de micotoxinas, utilizou-se um arranjo fatorial com dois fungos ocratoxigênicos (A. carbonarius e A. niger), dois valores de pH (4,5 e 5,0), sendo as concentrações de ácido as mesmas utilizadas para o ensaio de suscetibilidade. O experimento foi conduzido em duplicata, incubando-se por sete dias à 25 ºC e determinando-se as CI para cada isolado selecionado-se para a análise de OTA os controles e duas concentrações abaixo da CI (ou seja, 0; 25 e 50% da CI). A quantificação da OTA foi realizada através de cromatografia líquida de alta eficiência com detector de fluorescência. Houve diferença quanto à sensibilidade das espécies testadas para os ácidos avaliados. A. carbonarius, A. parasiticus e A. flavus foram mais sensíveis aos ácidos acético e sórbico e os mais resistentes foram A. niger e A. tubingensis quando comparados com os demais isolados. Por outro lado, o ácido cítrico não exibiu poder antifúngico importante. Foi verificada uma relação direta entre os valores de pH e a concentração inibitória observou-se, de maneira geral, que a cada acréscimo de 0,5 no valor de pH dobram as concentrações de ácido acético e sórbico necessárias para inibir o crescimento de um mesmo isolado. Também foi observado que dosagens sub-letais de ácido sórbico além de não impedirem o crescimento fúngico podem estimular a produção de OTA em isolados de A. carbonarius e A. niger. Demonstra-se assim a importância de se considerar tanto o pH quanto as espécies fúngicas predominantes no produto ao se calcular a dosagens destes ácidos a ser aplicada para garantir a estabilidade dos alimentos frente à deterioração fúngica e segurança toxicológica.