A diminuição da sobrevida registrada para pacientes com câncer de laringe nas últimas décadas pode estar relacionada a mudanças nos padrões de tratamento. Na literatura recente, há uma polëmica sobre o tratamento de tumores laríngeos em estádio clínico T3 devido ao emprego disseminado de estratégias de preservação de orgãos (Hoffman, 2006). Embora os critérios de inclusão para o grupo de preservação de órgãos tendam a selecionar tumores de \"baixo volume\", a escolha de uma determinada estratégia depende também da formação profissional do médico, da experiência e da infraestrutura do hospital e dos desejos dos pacientes. Essa consideração pressupõe uma distribuição homogênea dos pacientes entre os grupos de tratamento. No entanto, deve-se destacar o papel prognóstico das variáveis relacionadas ao tumor, ao paciente e à opção terapêutica na prática clínica. Objetivo: Avaliar as características clínicas, patológicas e a expressão de biomarcadores ativados pela via do EGFR em uma série de casos em relação à evolução e ao prognóstico. Metodologia: No presente estudo, 145 pacientes consecutivos com diagnóstico de carcinomas avançados de laringe cT3N0-3M0 foram analisados retrospectivamente. Foram incluídos casos de carcinoma epidermoide de supraglote, glote, subglote e transglotte, tratados em uma única instituição por quatro diferentes estratégias de tratamento (cirurgia exclusiva; cirurgia mais terapia adjuvante; radioterapia exclusiva, e radioquimioterapia). Os dados foram obtidos a partir do Registro de Câncer do Hospital A.C. Camargo, São Paulo (1990-2007). Uma série de variáveis clínicas e patológicas foi avaliada pelo métodos de Kaplan-Meier e de regressão de Cox. Opções de tratamento também foram avaliadas como fator prognóstico. Associações entre características clínico-patológicas do tumor e sobrevida, sobrevida livre de doença e risco de morte, foram investigadas. Resultados: Três variáveis clínicas, as variáveis terapêuticas e cinco variáveis patológicas, foram estatisticamente significativas na estimativa de sobrevida específica em 5 anos (CS-5a). A sobrevida foi influenciada negativamente pela invasão do tumor primário do espaço pré-epiglótico (45,5%, P = 0,003), pescoço clínico (cN) positivo (37,6%, P = 0,031), invasão da área retrocricóide (0,0%, P = 0,009) , invasão linfática (44,1%, P = 0,015), extravasamento capsular (43,1%, P = 0,003), pescoço patológico (pN) positivo (42,9%, P = 0,001), linfonodos positivos nos níveis cervicais IV-VI (33,3%, P = 0,008), margens cirúrgicas positivas (22,2%, P = 0,001). O tratamento teve impacto na sobrevida (CS-5a): a taxa foi de 51,6%, quando houve tratamento adjuvante (devido a achado patológico positivo na peça operatória), diminuiu até 41,5% no grupo de radioterapia exclusiva (P = 0,039). Cirurgia exclusiva e radioquimioterapia influenciaram a sobrevida de maneira semelhante (74,0% ; 77,5%). Considerando variáveis clínicas e terapêuticas, resultaram ser fatores prognósticos independentes: invasão do espaço paraglótico (RR multivariado 1,92; IC 1,02-3,61), pescoço clínico (cN) positivo (RR multivariado 2,24; IC 1,11-4,50), invasão do espaço pré-epiglótico (RR multivariado 2,65; IC 1,46-4,81) e tratamento radioterapico exclusivo (RR multivariado 2,88; IC 1,31-6,30); incluindo as variáveis patológicas, resultaram ser fatores prognósticos independentes achados patológicos de extravasamento capsular (RR multivariado 3,09; IC 1,56-6,12) e margens cirúrgicas comprometidas (RR multivariado 3,45; IC 1,11-10,75). A investigação de expressão imunoistoquímica de dez biomarcadores das vias de transdução de sinal ativadas pelo receptor tirosina quinase Erb B (EGFR, Erb B2, Erb B3, Erb B4, RAS, MEK, ERK, mTOR, PTEN, p53) mostrou associação entre expressão imunoistoquímica positiva de ErbB3 e ErbB4 e expressão de biomarcadores da via MAPKs e AKT-PI3K (MEK e mTOR). A positividade desses biomarcadores, ou seja, a desregulação da rede ErbB foi associada à invasão linfática, ponto de partida do acometimento linfonodal que resultou ser fator prognóstico independente entre as variáveis clínicas e patológicas (extravamento capsular). Conclusões: Entre as variáveis clínicas e terapêuticas, resultaram ser fatores prognósticos independentes: invasão do espaço paraglótico, pescoço clínico (cN) positivo, invasão do espaço pré-epiglótico e tratamento radioterápico exclusivo. Quando foram incluídas as variáveis patológicas, resultaram ser fatores prognósticos independentes achados patológicos de extravasamento capsular e margens cirúrgicas comprometidas. A positividade dos biomarcadores estudados (desregulação da rede ErbB), foi associada a invasão linfática. / The decreased survival recorded for patients with laryngeal cancer in the last decades may be related to changes in patterns of management; in literature a recent debate has been dedicated to the management of clinical stage T3 due to the disseminated use of organ preservation strategies (Hoffman, 2006). Although inclusion criteria for organ preservation group tends to select \"low volume\" tumors, in clinical practice the choice of a determined strategy depends also to medical and hospital experience and infrastructure and on patients\' wishes. This consideration may suppose an homogenous distribution of the patients among the treatment groups, however in clinical practice several clinico-pathological and therapeutic prognostic factors are considered for therapeutic decision. Objectives: Evaluate clinical and pathological characteristics and expression of biomarkers activated by the EGFR cascade in a case series and analise the association with outcomes and prognosis. Materials and method: In the present study 145 consecutive patients with diagnosis of laryngeal advanced carcinomas, cT3N0-3M0, were retrospectively analyzed, including cancer of the supraglottis, glottis, subglottis and trans-glottis, treated in a single institution by four different treatment strategies (exclusive surgery, surgery and adjuvant therapy, radiotherapy alone, and radiochemotherapy). Data was obtained from the Cancer Registry, Hospital AC Camargo, São Paulo (1990-2007). A set of clinical and pathological variables were assessed by Kaplan-Meier and Cox regression methods. Treatment option was also assessed as prognostic factor. Associations between clinical-pathological features of the tumor and survival, disease free-survival and risk of death, were investigated. Results: Three clinical variables, the therapeutic variable and five pathological variables, were statistically significant in estimating cancer specific survival at 5 years (CS-5y). Survival was negatively influenced by primary tumour spreading as filling of pre-epiglottic space (45.5%, P = 0.003), clinical neck (cN) positive (37.6%, P = 0.031), invasion of retrocricoid area (0.0%, P = 0.009), lymphatic invasion (44.1%, P = 0.015), extra-capsular nodal spread (43.1%, P = 0.003), pathological neck (pN) positive (42.9%, P = 0.001), positive IV-VI levels cervical nodes (33.3%, P = 0.008), positive surgical margins (22.2%, P = 0.001); treatment impacted on CS-5y, it decreases at 51.6% if adjuvant treatment (positive pathological finding on operative specimen), up to 41.5% in exclusive radiotherapy group (P = 0.039); exclusive surgery and radio-chemotherapy influenced survival similarly (74.0%; 77.5%). Among clinical e therapeutic variables, invasion of paraglottic space (HR adjusted 1.92; IC 1.02-3.61), positive clinical neck (cN) (HR adjusted 2,24; IC 1,11-4,50), invasion of pre-epiglottic space (HR adjusted 2,65; IC 1,46-4,81) and exclusive radiotheraphy (RR adjusted 2,88; IC 1,31-6,30) resulted to be independent prognostic factors; including pathological variables, extracapsular node invasion (HR adjusted 3,09; IC 1,56-6,12) and positive resection margins (HR adjusted 3,45; IC 1,11-10,75) were independent prognostic factors. Exploration of immunohistochemical expression of ten biomarkers of the signal transduction pathways activated by tyrosine kinases receptor Erb B (EGFR, Erb B2, Erb B3, Erb B4, RAS, MEK, ERK, mTOR, pTEN, p53) showed association between positive immunohistochemical expression of ErbB3 and ErbB4 and biomarkers of MAPKs and AKT-PI3K pathways (MEK and mTOR); the dysregulation of the Erb B network was associated with lymphatic invasion, starting point for lymph-nodes involvement that resulted to be clinical independent prognostic factors. Conclusion: Among clinical and therapeutic variables, the identified independent prognostic factors were: invasion of paraglotic space, clinically positive neck, invasion of pre-epiglotic space and radiotherapy alone. When pathologic variables were included, extracapsular spread and positive surgical margins were identified as independent prognostic factors. Positive results of the studied biomarkers (dysregulation of Erb B network) was associated with lymphatic invasion.

O sarcoma de aplicação em felinos (SAF) é uma neoplasia rara de origem mesenquimal e com prognóstico desfavorável que se desenvolve em local previamente utilizado para aplicações de medicamentos injetáveis ou submetido a traumas. Poucos estudos foram encontrados na literatura descrevendo os aspectos imaginológicos do SAF. O objetivo dessa pesquisa foi descrever os aspectos das imagens de tomografia computadorizada e ultrassonografia do SAF (modo B e Doppler colorido e amplitude), verificando características comuns, particularidades da formação recidivante e correlações com variáveis clínicas. A pesquisa contemplou uma fase prospectiva e outra retrospectiva, totalizando 32 felinos. Ao exame tomográfico, observou-se com maior frequência formas neoplásicas irregulares (62,5%), com prolongamentos digitiformes (100%), realce periférico e heterogêneo (67,7%), borramento dos planos adiposos (68,8%) e áreas sugerindo necrose intratumoral (68,8%). Ao exame ultrassonográfico observou-se contornos irregulares, presença de halo hiperecogênico, ecotextura heterogênea, tecido hiperecogênico contíguo à formação e espessamento hipoecogênico do subcutâneo adjacente, além de ecogenicidade mista, devido à presença de áreas sugerindo necrose intratumoral (83,3%). Ao estudo Doppler, observou-se distribuição vascular mais evidente na região periférica (83,3%), com calibre homogêneo (83,3%), fluxo regular (50%) e misto (50%). A quantidade de vasos neoplásicos detectados pela TC foi maior do que por US Doppler (p=0,024). O volume e o tempo de evolução da formação apresentaram alta correlação nos casos não recidivantes (p<0,001). A presença de metástase salteada foi mais comum em formações recidivantes (p=0,001). O uso de meio de contraste intravenoso e do recurso MPR permitiu melhor delimitação das margens da formação pela TC e uma mensuração neoplásica mais criteriosa. Os histogramas revelaram uma quantidade representativa de gordura na composição do SAF, e foi observada quantidades superiores de músculos acometidos na presença de um espessamento da gordura adjacente à formação (p=0,003). Os exames de diagnóstico por imagem foram importantes para caracterização do SAF, especialmente no que se refere a delimitação de suas margens e na avaliação dos tecidos adjacentes, além de fornecerem informações relevantes para o estadiamento neoplásico e para terapêutica. / The feline injection-site sarcoma (FIIS) is a rare mesenchymal neoplasm and has poor prognosis. It develops in a site previously used for intravenous applications or undergone trauma. Few studies were found in the literature describing the imaging features of FIIS. The aim of this research was to describe computed tomographic (CT) and ultrasonographic (B mode, color and power Doppler) images of FIIS to find common characteristics, particularities of disease recurrence and correlations with clinical variables. The study had a prospective and a retrospective phases, totaling 32 cats. At the CT scan it was observed more frequently an irregular neoplastic forms (62,5%) with fingerlike projections (100%), peripheral and heterogeneous enhancements (67,7%), blurring of the adjacent fat (68,8%) and areas suggesting intratumoral necrosis (68,8%). At the ultrasound it was observed irregular outlines, with hyperechoic halo, heterogeneous echotexture, hyperechogenic tissue adjacent at the tumor and thickening of the adjacent hypoechogenic subcutaneous tissue. Mixed echogenicity with areas suggesting intratumoral necrosis was generally observed (83,3%). Doppler study showed more evident vascular distribution in the peripheral region (83,3%) with homogeneous diameter (83,3%), smooth (50%) and mixed (50%) flow. The quantity of tumor vessels was higher at CT than Doppler ultrasound (p=0,024). The presence of a vessel tumor coming from vessels of the abdominal cavity on CT may be an important finding for surgical planning. Tumor volume and time of presentation were correlated with non-recurrent cases (p<0,001). Skip metastasis showed high correlation with recurrent cases (p=0,001). The use of postcontrast phase at CT scans and MPR allowed better delineation of tumor margins and a more carreful measurement. Histograms revealed a representative amount of fat in tumor composition. A tendency of higher amounts of muscles being involved was observed with fat thickening near the tumor (p=0,003). Diagnostic imaging was important to characterization of FIIS, especially to delimitate tumor extension, evaluate compromised adjacent tissues providing relevant information for tumor staging and therapeutic planning.

O Sarcoma de Aplicação Felino (SAF) possui características específicas pouco estudadas. A agressividade, com invasão profusa de tecidos adjacentes, bem como a presença de células anaplásicas em sua composição fazem do SAF um obstáculo a ser transposto, para obtenção do melhor tratamento. Sua etiologia e etiopatogenia ainda permanecem obscuras. O objetivo deste estudo consistiu em determinar fatores prognósticos para o paciente portador de SAF, caracterizando-o quanto ao seu peso e escore de condição corporal (ECC), à origem e diferenciação da neoplasia por ele apresentada, bem como caracterizar o microambiente perineoplásico quanto à presença de células inflamatórias. Foram selecionados 46 casos de SAF, sendo 31 casos novos de pacientes e 22 casos reavaliados. Foi encontrada diferença significativa entre o ECC (p=0,001) e peso (p<0,001) de pacientes que apresentaram SAF e os do grupo controle. Não foram encontradas diferenças entre gênero e raça. A localização mais comumente acometida foi a tóraco-abdominal (78%). Quanto à origem, a maioria dos SAF apresentou-se como originada em células fibroblastos. Enquanto não houve marcação para componentes inflamatórios (CD3 e CD68), houve para receptor de quinase (c-kit), para Cox-2 e FelV. Não houve influencia dos parâmetros avaliados com as variáveis clínicas e com a sobrevida total. Houve influencia estatisticamente significante quando comparamos a invasão observada no exame de tomografia computadorizada e a escolha do tratamento instituído (p=0,019). / The feline injection-site sarcoma (FISS) has specific characteristics which are little studied. FISS treatment is a hurdle to getting because of their aggressiveness, with profuse invasion of adjacent tissue, as well as the presence of anaplastic cells in its composition. Its etiology and pathogenesis remain obscure. This research aims to determine prognostic factors for patients with FISS, characterizing it as their weight and body condition score (BCS) and by the origin and differentiation of the tumor presented, along with characterizing the microenvironment peri-neoplastic for the presence of inflammatory cells. 46 cases of cats that presented FISS were assisted, with 31 new cases and 22 cases of patients reassessed. Statistical difference was found between the BCS (p=0,001) and weight (p<0,001) of FISS group and control group. No differences were found between gender and race. The region most commonly affected was the toraco-abdominal (78%). The FISS majority presented as fibroblasts origin, while no marking for inflammatory components (CD3 and CD68). There was marking for kinases cascade (c-KIT), for COX-2, and for FelV. There was no influence of the parameters evaluated with clinical variables and overall survival. There was a statistically significant influence when comparing the invasion observed in computerized tomographic examination and choice of the treatment (p = 0.019).

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-05-31T13:39:32Z No. of bitstreams: 1 liviafabianasaco.pdf: 1876242 bytes, checksum: ce10c4b3fb80afca690072dcda3c42d6 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-02T12:29:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 liviafabianasaco.pdf: 1876242 bytes, checksum: ce10c4b3fb80afca690072dcda3c42d6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-02T12:29:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 liviafabianasaco.pdf: 1876242 bytes, checksum: ce10c4b3fb80afca690072dcda3c42d6 (MD5) Previous issue date: 2012-03-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Multiplicadas desordenadamente, as células cancerosas transformam-se e transformam o ser habitável – o câncer de mama é uma patologia que cada vez mais invade nosso tempo e nossos sentidos. O investimento, nesta pesquisa, refere-se à constituição físico-funcional/social e simbólica da mulher pós-diagnóstico de câncer à terapêutica e a produção de seus efeitos de sentidos do/no funcionamento físico discursivo do ser com câncer de mama. A partir da análise de materiais orais e funcionais, buscamos compreender a constituição do sujeito por meio da relação linguagem/câncer, ou seja, entender, discursivamente, de que maneira esse sujeito envolvido com a doença se significa e/ou é significado; em que medida a passagem pela doença produz novas formas de significação, novas organizações do dizer, novos processos de identificação, outras modalidades de subjetivação. A partir do contexto teórico da Análise de Discurso, situamos esta pesquisa em duas (principais) reflexões. A primeira versa sobre o que é o câncer e o processo de transformação físico-funcional que a clínica do tratamento pressupõe. A segunda reflexão diz respeito ao processo discursivo nas etapas do diagnóstico à terapêutica. Os resultados demonstram alterações físico-funcionais (limitação de movimentos e de força muscular) pós-procedimento cirúrgico, influenciando diretamente no processo de identificação e subjetivação na constituição dessa outra mulher, agora afetada pelo câncer de mama. Depreendemos também, nos discursos, o reconhecimento dos exercícios físicos como proposta de apoio terapêutico e mecanismo de reinserção social. O conhecimento reunido neste trabalho reforça a importância do entendimento das peculiaridades do tratamento representativo em cada mulher, necessário para a condução das atividades pela equipe dos profissionais que estão inseridos nesse contexto. / Randomly multiplicated, the cancer cells change themselves and change the habitable being – the breast cancer is a pathology that is growing bigger and getting more space in our time and on our senses. The goal in this paper refers to the physical-functional, social and symbolical constitution of the post-diagnostic women, until the treatment and the production of its effects on the breast cancer patients and their physical functions’ senses. Starting from the analysis of oral and functional materials, we try to understand the constitution of the subject through the relation language/cancer, that is, to understand discursively how this subject, involved with the disease, signifies and/or is signified; in which way the disease diagnostic produces new ways of signifying, new organizations of saying, new identification processes and other subjectivation modalities. From the historical context of Discourse Analysis, we situate our paper with two (main) reflections. The first one, on how the cancer acts and the physical-functional transformation process that the clinical treatment suggests. The second reflection is about the discursive process in the phases of the diagnosis to the treatment. The results demonstrate post-surgical procedure’s physical-functional alterations (such as low mobility and loss of muscular strength), which directly influences identification and subjectivation processes in this new woman, now affected by the disease. We also comprehend in these discourses the recognition of physical exercises as support proposal for the treatment and social reintegration mechanism. The knowledge reunited in this paper reinforces the meaning of understanding the peculiarities on each representative treatment for every woman, which is necessary for the professional team to conduct their activities in this context.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-17T12:26:00Z No. of bitstreams: 1 danieladealmeidapereiraduarte.pdf: 5018386 bytes, checksum: 2001bbe4faa42486b08909ddea53c944 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-13T14:34:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 danieladealmeidapereiraduarte.pdf: 5018386 bytes, checksum: 2001bbe4faa42486b08909ddea53c944 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T14:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 danieladealmeidapereiraduarte.pdf: 5018386 bytes, checksum: 2001bbe4faa42486b08909ddea53c944 (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / Os cânceres de mama e colo do útero são as neoplasias mais frequentes no sexo feminino; suas taxas de incidência e mortalidade apresentam-se de formas diferentes nas regiões do país, sendo observadas elevadas taxas de neoplasia da mama nos locais desenvolvidos e de colo do útero nos menos desenvolvidos. Este estudo tem como objetivo investigar a associação entre desigualdade social e mortalidade por estes dois tipos de cânceres no estado de Minas Gerais e suas microrregiões de saúde, no período de 2008 a 2012. Os métodos de investigação adotados foram: revisão integrativa de literatura e um estudo ecológico. Primeiramente, por meio de descritores, realizou-se levantamento sistemático das produções científicas sobre iniquidade social e mortalidade por câncer de mama e colo do útero. Em seguida, foram extraídos em bases de dados nacionais o número de óbitos pelas duas neoplasias e informações sobre variáveis que compõem os indicadores sociais e de saúde em Minas Gerais. Os óbitos foram corrigidos levando-se em conta as causas mal definidas; posteriormente foram calculadas as taxas de mortalidade específicas por idade e as taxas padronizadas por idade para MG e suas 77 microrregiões. Para o câncer de colo do útero esse método só foi adotado após a redistribuição dos óbitos classificados como neoplasia maligna do útero sem outra especificação. Resultados apontam que a mortalidade por câncer de mama ocorre principalmente entre as mulheres residentes em áreas mais desenvolvidas, já o câncer de colo do útero apresenta padrão inverso, sendo este fato também constatado nas microrregiões de saúde de Minas Gerais. Entre as neoplasias, o câncer de mama ocupou o primeiro lugar como causa de mortalidade da população feminina e as microrregiões com maiores taxas estão localizadas nas macrorregiões do Sudeste e Centro e as variáveis que explicam as taxas encontradas são: Índice de Vulnerabilidade na Saúde, taxa de fecundidade, distância percorrida para realização de mamografia e número de médicos/1000 habitantes. Já as menores taxas foram observadas no Norte e Nordeste, onde as microrregiões apresentaram alta vulnerabilidade na saúde, baixo índice de desenvolvimento humano e grau de urbanização além de elevadas taxas de mortalidade por Câncer de Colo do Útero. Este estudo demonstra que ao se avaliar as condições de saúde da população levando em conta a incidência e mortalidade por câncer de mama e colo do útero, deve-se considerar a influência dos fatores sociais e econômicos, assim será possível estabelecer políticas e ações de saúde que atendam a mulher de forma integral e que promovam a equidade a partir da estruturação de uma rede assistencial mais igualitária, regionalizada e hierarquizada. / The breast and cervical cancer are the most frequent neoplasms in women; its incidence and mortality rates are presented differently in regions of the country being observed elevated breast cancer rates in developed sites and cervix in less developed. This study aims to investigate the association between social inequality and mortality from these two types of cancers in Minas Gerais state and their health micro-regions, between 2008 and 2012. The adopted research methods were: integrative literature review and ecological study. First, through descriptors, there was a systematic survey of scientific production on social inequality and mortality from breast and cervical cancer. The number of deaths by both cancers and information about variables that compose the social and health indicators in Minas Gerais were taken in national databases. Deaths have been corrected considering the ill-defined causes; specific mortality rates were then calculated for age and standardized rates by age for MG and its 77 micro-regions. For cervical cancer this method was only adopted after the reallocation of deaths classified as malignant neoplasm of the uterus without another specification. Results indicate that mortality from breast cancer occurs mainly among women living in more developed areas, since cervical cancer presents reverse pattern, and this fact also observed in health micro-regions of Minas Gerais. Among the neoplasms, breast cancer ranked first as cause of death of the female population and micro-regions with the highest rates are located in the the Southeast and Center and the variables that explain the rates found are: Vulnerability Index in Health, Total fertility rate, distance to mammography and number of doctors / 1000 inhabitants.The lowest rates were observed in the North and Northeast, where the micro-regions showed high vulnerability in health, low human development index and degree of urbanization in addition to high mortality rates by breast cancer. This study demonstrates that when evaluating the health conditions of the population considering the incidence and mortality by breast and cervical cancer, it should be considered the influence of social and economic factors, then it is possible to establish health policies and health actions that comply with the woman full-time and promoting equity from the structuring of a more equitable, regionalized and hierarchical health care network.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / It is believed that papilloma formation is critical to pathogenesis of the upper digestive tract (UDT) squamous cell carcinomas (SCCs) in cattle, the so called papilloma-carcinoma syndrome. Due to the maintenance of papillomas for long periods of time in the UDT, due to immunosuppressive agents in bracken fern (Pteridium aquilinum), the keratinocytes of papilloma become target for carcinogens to promote carcinomatous transformation. Many evidences of the papilloma-carcinoma syndrome were observed in vitro. However, they have not been totally proved in vivo. The objectives of this study were therefore to assess key aspects of the pathogenesis of SCCs of the UDT in cattle naturally grazing in Pteridium aquilinum for long periods of time. For this, 168 initial epithelial lesions of the UDT were evaluated in 60 cattle with alimentary SCCs from areas with bracken fern. Developed papillomas had yielded more than 50% of the studied papillomas, with some in the growing phase (18.5%) and some carcinomatous transformation of papillomas (18.5%). A few papillomas were in regression (9%). The carcinomatous transformation of papillomas may represent morphological evidence of the need for papilloma formation in the development of alimentary SCCs. However, 72 squamous intraepithelial lesions (SILs) were also present in these bovines. Most SILs (70%) were moderate to severe dysplastic lesions and carcinomas in situ, with a significant amount of SCCs in an early stage of development. In humans, similar lesions are found in patients who chronically abuse of alcohol/tobacco. The SILs in the aerodigestive tract of humans are potentially malignant and can evolve to SCCs. The SILs of cattle in this study may therefore represent an alternative pathway for the development of SCCs in the UDT, without the necessity of carcinomatous transformation of papilloma to SCCs. The papillomatous origin of alimentary SCCs was also assessed by immunohistochemistry. Thirty SCCs of the cranial region of the UDT (including the base of tongue, pharynx/oropharynx and epiglottis) were evaluated about the acinar or ductal salivary origin using an anticytokeratin 7/8 antibody specific for simple epithelium. From the 30 SCCs examined, nine had morphological evidences of neoplastic transformation from a salivary duct. One of them was confirmed by immunohistochemistry to be of salivary origin. As papillomavirus requires a stratified epithelium for the formation of the papilloma, a confirmative SCCs from a simple salivary duct suggests that there is also no need of a papilloma to the development of SCCs of the UDT in cattle chronically grazing on bracken fern. In parallel, the degree of immunosuppression by lymphopenia, supposedly necessary for the maintenance of papillomas in the UDT, was evaluated in spontaneous cases of SCCs in the UDT of cattle. Alimentary papillomatosis was observed in all 40 cases studied. However, immunosuppression by lymphopenia was uncommon (three cases) and was not related to the degree of papillomatosis. The absence of lymphopenia in cattle with alimentary papillomatosis indicates that the mechanisms for maintenance of papilloma are not related to the amount of circulating lymphocytes. In conclusion, this study demonstrated an alternative route for the pathogenesis of SCCs in the UDT of cattle chronically poisoned by bracken fern and that the alimentary papillomatosis, observed in such cases, is not associated with lymphopenia. / Segundo a teoria da patogênese da síndrome papiloma-carcinoma, a formação do papiloma é o ponto crucial para o desenvolvimento dos carcinomas de células escamosas (CCEs) no trato alimentar superior (TAS) de bovinos. A partir da sua manutenção por longos períodos no TAS, devido aos imunossupressores presentes na samambaia (Pteridium aquilinum), os ceratinócitos do papiloma em constante multiplicação se tornariam alvos para os carcinógenos da planta promoverem a transformação carcinomatosa. Muitas evidências da síndrome papiloma-carcinoma foram observadas in vitro. No entanto, elas ainda não foram totalmente comprovadas in vivo. Os objetivos deste estudo foram, portanto, avaliar aspectos fundamentais da patogênese da formação dos CCEs no TAS em bovinos que pastoreiam naturalmente por longos períodos áreas altamente infestadas por Pteridium aquilinum. Para isso, 168 lesões epiteliais iniciais foram avaliadas no TAS de 60 bovinos com CCEs alimentares provenientes de áreas com samambaia. Papilomas desenvolvidos perfizeram mais de 50% dos papilomas estudados, com alguns em crescimento (18,5%), em transformação carcinomatosa (18,5%) e poucos em regressão (9%). A transformação carcinomatosa de papilomas pode representar a evidência morfológica da necessidade do papiloma para a formação de CCEs. No entanto, 72 lesões intra-epiteliais escamosas (SILs) também estavam presentes no TAS desses bovinos. A maior parte das SILs (70%) representava lesões displásicas moderadas, acentuadas e CCEs in situ, com quantidade significativa de CCEs em estágio inicial. Em humanos, lesões semelhantes estão presentes em pacientes que abusam cronicamente do álcool/tabaco. As SILs no trato aerodigestivo de humanos são potencialmente malignas e podem evoluir para CCEs. As SILs nos bovinos do presente estudo podem, portanto, representar uma via alternativa de formação de CCEs no TAS, sem a necessidade da transformação do papiloma em carcinoma. A necessidade do papiloma para a formação de CCEs alimentares em bovinos também foi avaliada através da imuno-histoquímica. Trinta CCEs da região cranial do TAS (incluindo base da lingual, faringe/orofaringe e epiglote) foram avaliados quanto à origem acinar ou ductal salivar utilizando-se o anticorpo anti-citoceratinas 7/8 para epitélio simples. Dos 30 CCEs analisados, nove tinham evidências morfológicas de transformação neoplásica proveniente de ducto salivar. Destes, um foi confirmado pela imuno-histoquímica. Como o papilomavírus necessita de estratificação epitelial para a formação do papiloma, a confirmação de CCE de origem ductal salivar simples sugere que também não haja a necessidade do papiloma para o desenvolvimento de CCEs no TAS de bovinos que pastoreiam em samambaia. Paralelamente, o grau de imunossupressão por linfopenia, supostamente necessária para a manutenção dos papilomas, também foi avaliada nos casos espontâneos de CCE no TAS de bovinos de áreas com samambaia. Papilomatose alimentar foi observada em todos os 40 casos estudados. No entanto, imunossupressão por linfopenia foi incomum (três casos) e não estava relacionada com o grau de papilomatose. A ausência de linfopenia em bovinos com papilomatose alimentar indica que os mecanismos para a manutenção dos papilomas não estejam relacionados com a quantidade de linfócitos circulantes. Em conclusão, o presente estudo demonstrou haver uma via alternativa para a patogênese dos CCEs do TAS de bovinos intoxicados cronicamente por samambaia e que a papilomatose alimentar, vista nesses casos, não está associada com linfopenia.

Orientador: Júlio César Teixeira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T00:35:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paes_ElianaFerreira_M.pdf: 2469476 bytes, checksum: 7fdb355ac120c70d0bffe635016ba6af (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Introdução: O agente etiológico do câncer do colo do útero é um HPV de alto risco (hrHPV) e testes biomoleculares para detecção deste vírus em amostras do colo do útero tendem a ter um papel cada vez mais importante no rastreamento de lesões pré-câncer para o futuro. No momento, estes testes são de alto custo e de execução complexa. Objetivo: desenvolver e padronizar um teste de PCR multiplex marcado com fluorescência para detecção de DNA de hrHPV em amostras obtidas do colo do útero e comparar com um teste de referência. Metodologia: foi realizado um estudo piloto para descrição e padronização de uma metodologia de detecção e genotipagem de HPV, tipo PCR multiplex, com primers desenhados com base na região E7 de seis hrHPV (16, 18, 31, 33, 45 e 52), o teste `E7-HPV¿. Foi seguido um guia internacional para desenvolvimento de novos testes de HPV para rastreamento, que orienta uma avaliação inicial de 50 ou mais amostras de mulheres com NIC2+, comparação com um teste referência validado, e alcançar um índice de concordância kappa de 0,7, com sensibilidade de 90% da sensibilidade do teste referência. O teste referência adotado foi o cobas® HPV Test da Roche Diagnostics, chamado `cobas®¿, que identifica em grupo 12 hrHPV e genotipa os tipos 16 e 18, separadamente. Neste estudo foram utilizadas amostras de 60 pacientes, 55 com citologia ASCH/HSIL, coletadas entre Agosto e Setembro de 2013, que foram avaliadas por cada teste com cálculo da concordância dos resultados pelo índice de kappa e comparação da sensibilidade, com poder estatístico de 90%. Resultados: o teste teve sua descrição e padronização finalizada. Houve alta concordância entre os testes `E7-HPV¿ e cobas® na detecção do HPV 16 com kappa 0,972, com apenas um caso discordante, de paciente com NIC3 com cobas® negativo e com o teste `E7-HPV¿ positivo. Para o HPV18, os resultados dos testes demonstraram concordância total, com índice kappa=1,0. Quando comparadas as detecções dos tipos hrHPV não 16 e 18, seis casos foram positivos para o cobas® e negativos para o teste `E7-HPV¿, podendo ser decorrente da detecção do cobas® de tipos de HPV não contemplados no teste `E7-HPV¿. Ao contrário, o teste `E7-HPV¿ detectou dois hrHPV adicionais, com cobas® negativo (HPV31 e 52). A sensibilidade de detecção de NIC2+ foi igual para os dois testes avaliados. Conclusão: Foi possível desenvolver e padronizar uma técnica de PCR multiplex com metodologia para detecção de seis hrHPV. O desempenho do teste `E7-HPV¿ foi, pelo menos, equivalente ao teste referência (cobas® HPV Test) com kappa=0,972 e 100% da sensibilidade do teste referência na detecção de NIC2+ em pacientes sabidamente com lesões, superando os pré-requisitos necessários. Assim, os resultados satisfatórios do `E7-HPV¿ na primeira fase de avaliação possibilita a continuidade do desenvolvimento do mesmo, visando futura aplicação em maior escala / Abstract: Introduction: the etiologic agent of cervical cancer is a high-risk HPV (hrHPV) and biomolecular tests for detection of this virus in cervical samples tend to have an increasingly important role in screening for precancerous lesions for the future. At present, these tests are expensive and complex procedure. Purpose: to develop and standardize a multiplex PCR test, 'E7-HPV' test, to detect and genotyping of 6 hr-HPV DNA, tested in samples obtained from the cervix and compared with a reference test. Methods: A pilot study was performed to develop and standardize a methodology of the multiplex PCR with primers designed on the basis of six hrHPV E7 region (16, 18, 31, 33, 45 and 52) and labeled with fluorochrome 6-FAM. Viral detection was performed by capillary electrophoresis in automated sequencer. It was followed an international guide to development of new HPV testing for screening, which guides an initial assessment of 50 or more samples from women with CIN2+, and the results compared to a validated reference test to achieve a kappa index of 0.7, and 90% sensitivity of reference sensitivity test. The reference test adopted was the cobas® HPV Test from Roche Diagnostics, called 'cobas®', which identifies 12 hrHPV pooled and genotype HPV 16 and 18 separately. In this study, cervix samples were obtained from 60 women, 55 with ASCH/HSIL cytology, collected between August to September 2013. The samples were evaluated by each test, and a non-inferiority analysis was conducted in relation to the cobas® HPV Test, following international guidelines for the development of new tests with kappa index and sensitivity, with a statistical power of 90%. Results: The methodology of E7-HPV test was described and standardized. The 'E7-HPV' test and cobas® Test had a high concordance rate in HPV16 detection (kappa=0.972), with only one discordant case (CIN3 with negative cobas® and `E7-HPV¿ HPV16 positive) and total concordance in HPV18 detection (kappa=1.0). When comparing the detection of hrHPV not 16/18, six cases were positive for cobas® and negative for 'E7-HPV', maybe due to the detection for cobas® of HPV types not included in the 'E7- HPV ' test. Others three cases were `E7-HPV¿ positive (HPV16, 31 and 52) with negative cobas®. For diagnosis of CIN2 or worse, both tests had the same sensitivity. Conclusion: It was possible to develop and standardize a multiplex PCR methodology for detection and genotyping 6 hrHPV in cervical samples. The performance of 'E7-HPV' test was at least equivalent to the reference test for the detection of CIN2+, fulfilling the clinical validation criteria requirements. Thus, the satisfactory initial results of the 'E7-HPV' test evaluation indicate that the development can be continued, aiming future application on a larger scale / Mestrado / Oncologia Ginecológica e Mamária / Mestra em Ciências da Saúde

A amplificação gênica mais freqüente em câncer de mama é a do oncogene ERBB-2, observada em aproximadamente 30% dos tumores de mama e que está relacionada com menor intervalo livre de doença e sobrevida total das pacientes com câncer de mama. O ERBB-2 ativa importantes vias de sinalização celular, incluindo as vias MAPK e PI3K. Utilizando PCR em tempo real analisou-se o efeito do EGF e da HRG na regulação da expressão dos genes ANP32B, MATR3, ATAD4, NDRG1, ACTN1, SPARC, TPM1 e CENPH, nas células HB4a, C5.2 e SKBr3, que expressam diferentes níveis de ERBB2. Avaliou-se também o perfil de expressão destes transcritos após a supressão do ERBB2 pela técnica de siRNA nas células C5.2. O tratamento com EGF modulou de forma diferente a expressão dos genes estudados nas células HB4a, C5.2 e SKBr3. Nas células HB4a e SKBr3 a HRG também regulou a expressão dos genes acima. Após a transfecção das células C5.2 com siERBB2 houve alteração na expressão dos genes ATAD4, NDRG1, ACTN1, SPARC, MATR3, CENPH e TPM1. / The more frequent genic amplification observed in breast cancer is that of the ERBB2 oncogene, which occurs in approximately 30% of the breast cancers, and is associated with lower disease-free interval and survival of all patients with breast cancer. The ERBB-2 protein activates important cell signaling pathways such as MAPK and PI3K. Using real time PCR, it was investigated the effect of EGF and HRG on ANP32B, MATR3, ATAD4, NDRG1, ACTN1, SPARC, TPM1 and CENPH transcripts regulation in the HB4a, C5.2 and SKBr3 cell, that express different levels of ERBB2. It was also evaluated the expression profile of these transcripts in the C5.2 cell line after the suppression of ERBB2 expression by the siRNA technique. The treatments with EGF modulate differently the expression of the analysed transcripts in HB4a, C5.2 and SKBr3 cells. In HB4a and SKBr3 cells the treatments with HRG also modulate the expression of the transcripts above. The C5.2 cells transfected with siERBB2 showed alteration in the expression of ATAD4, NDRG1, ACTN1, SPARC, MATR3, CENPH and TPM1 transcripts.

The adaptor protein Shb has been implicated in the signaling of several tyrosine kinase receptors and previous studies have suggested a role for Shb in the signal transduction of T cells. Shb associates with the T cell receptor (TCR) and partakes in the signal propagation of activated T lymphocytes. In order to explore Shb’s influence on TCR signaling in vivo, T cell development and function was studied in a Shb knockout mouse. The loss of Shb led to aberrant TCR signaling in both thymocytes and peripheral CD4+ TH cells, with elevated basal phosphorylation of key components in the signal cascade. Shb was found to be dispensable for thymocyte development, but its absence resulted in a TH2 bias in in vitro stimulated peripheral CD4+ TH cells. As imbalances in TH2 responses are linked to allergic diseases, we further explored Shb’s role in immune regulation in a mouse model of atopic dermatitis. Shb knockout mice exhibit more aggravated signs of atopic dermatitis, including increased immune cell recruitment to the affected areas and elevated mRNA levels of typical TH2 cytokines. The effect of Shb on hematopoiesis in general was determined by examining populations of long-term hematopoietic stem cells (LT-HSCs) and hematopoietic progenitor cells in bone marrow of Shb knockout and wild type mice. Shb deficient bone marrow was found to contain significantly fewer relative numbers of LT-HSCs due to a proliferative defect. The reduced cell cycle activity of Shb LT-HSCs could further be linked to an abnormal regulation of the focal adhesion kinase/Rac1/p21-activated kinase pathway. Since alterations in LT-HSC proliferative abilities may have implications for leukemia development, BCR-Abl induced myeloid neoplasia was investigated in the absence of Shb. Shb deficiency confers a more aggressive progression of BCR-Abl induced myeloid neoplasia characterized by an increased peripheral blood neutrophilia and a deregulated cytokine profile. In addition, focal adhesion kinase and STAT3 signaling is hyperactivated in Shb knockout leukemic cells. In conclusion, Shb appears to be a multifunctional signaling mediator that controls several responses in hematopoietic cells, under homeostatic as well as disease conditions.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La búsqueda de tratamientos alternativos para el cáncer es un gran desafío para la comunidad científica moderna, ya que la aparición de resistencia a los tratamientos utilizados, por parte de los diversos tipos de tumor, es un problema aún sin resolver. Se ha visto y comprobado que la angiogénesis (desarrollo de nuevos vasos a partir de vasos preexistentes) es un fenómeno estrechamente ligado al crecimiento tumoral y la capacidad metastásica del cáncer, por lo que su limitación es un nuevo camino de investigación en búsqueda de un tratamiento definitivo. Con el objetivo de estudiar el efecto angiogénico tumoral analizamos el efecto del implante intramuscular profundo de tumor TA3-MTX-R. en el modelo de ratón (Mus musculus) AJ hembras, clínicamente sanas. Para ello, se utilizaron 2 grupos de 8 ratones cada uno. Un grupo control (A) al cual se le aplicó suero fisiológico y un grupo experimental (B), al cual se le inoculó por vía intramuscular tumor el mismo día. A los ratones se les realizó mediciones del crecimiento tumoral y se esperó hasta la muerte natural de estos, debido al tumor primario y sus metástasis. Se realizó estudio histológico e inmunohistoquímico con conteo de los capilares en un área de estudio estándar, para evaluar angiogénesis, tanto en tumor como en tejidos blanco de metástasis. Los resultados se analizaron estadísticamente, mostrando un importante aumento en la angiogénesis de los ratones con tumor versus los controles. Se constató también que el tumor tiene la capacidad de sacar a las células endoteliales de su estado de reposo del ciclo celular (G0), para hacerlas entrar en una proliferación acelerada