Made available in DSpace on 2015-06-12T02:08:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000470271-Texto+Completo-0.pdf: 601264 bytes, checksum: 631a8bec7a15cd2f97fae4e0bb07768a (MD5) Previous issue date: 2015 / The esophageal and oral tumors are classified as the most frequent malignancies in Brazil. Esophageal cancer is the eighth most common in the world and oral cancer is ranked as the 5th among malignant neoplasms affecting man in Brazil. The lipopolysaccharide (LPS) are characteristic compounds of the cell wall of gram-negative bacteria. They are able to regulate gene expression of pro-inflammatory cytokines by binding to toll-like receptor 4 (TLR4) via NF-kB pathway. Recent studies show that LPS can increase the migration ability of cell lines of human esophageal cancer HKESC-2 by increasing its binding properties. In the meantime, it has not been tested the effect of LPS on esophageal cancer cells OE19 and OE21 and human oral carcinoma HN30. Thus, this study aimed to determine the action of LPS compounds on the proliferation and viability of cell lines of human esophageal cancer and human oral carcinoma HN30.Were used as treatment LPS for OE19 and OE21 cell lines and the PgLPS (lipopolysaccharide of Porphyromonas gingivalis) for HN30 cell line. Cell viability was assessed using the MTT assay and cell counting. The TLR4 expression by real-time PCR was also evaluated. LPS at higher concentrations decreased significantly cell viability in both cell lines, adenocarcinoma (OE19) and squamous esophageal carcinoma (OE21) at different times of treatment. In addition, both cell lines, OE19 and OE21, expressed TLR4 receptor. Taken together, our data demonstrated that LPS at high concentrations might contribute to tumor death, in agreement with previously data. / Os tumores de esôfago e de boca estão classificados como as neoplasias malignas mais frequentes no Brasil. O câncer de esôfago é o oitavo mais comum no mundo e o câncer de boca é classificado como o 5º dentre as neoplasias malignas que afetam o homem no Brasil. Os lipopolissacáridos (LPS) são compostos característicos da parede celular de bactérias gram-negativas. Eles são capazes de regular a expressão de genes de citocinas pró-inflamatórias, através da ligação ao receptor toll-like 4 (TLR4) via NF-kB. Estudos recentes mostram que o LPS pode aumentar a habilidade de migração de linhagens célulares de câncer de esôfago humano HKESC-2 através do aumento de suas propriedades de adesão. Entretanto, ainda não foi testado o efeito do LPS sobre as células de câncer de esôfago e de carcinoma oral humano HN30. Deste modo, este estudo teve como objetivo determinar a ação dos compostos de LPS (derivado de bactérias) sobre a proliferação e viabilidade de linhagens celulares de câncer de esôfago humano, e de carcinoma oral humano. Foram utilizados como tratamento o LPS para as linhagens OE19 e OE21 e o PgLPS (lipopolissacarídeo da Porphyromonas gingivalis) para a linhagem HN30.A viabiliadade celular foi avaliada utilizando o ensaio MTT e contagem celular. Também foi avaliada a expressão do receptor TLR4 por PCR em tempo real. LPS em concentrações mais elevadas reduziu significativamente a viabilidade celular em ambas as linhagens celulares de câncer de esôfago, o adenocarcinoma (OE19) e o carcinoma de células escamosas (OE21) em diferentes tempos de tratamento. Além disso, ambas as linhagens celulares, OE19 e OE21, expressaram o receptor TLR4. Avaliados em conjunto, os nossos dados demonstram que o LPS em concentrações elevadas pode contribuir para a morte tumoral, de acordo com dados prévios.

Made available in DSpace on 2015-07-11T02:06:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000471993-Texto+Completo-0.pdf: 2126269 bytes, checksum: f86f75c4cb3e97d7b63c12ed82e07361 (MD5) Previous issue date: 2015 / Head and neck cancer represents a group of diseases affecting the face and upper aerodigestive tract. Early diagnosis of these neoplasms and their etiologic factors is crucial for patient’s survival and treatment. In the last decades, cause-and-effect relationship between some viruses and malignancies has been widely accepted. Recently, the role of Human papillomavirus (HPV) and Epstein-Barr virus (EBV) has been shown in the pathogenesis of oropharyngeal carcinoma, undifferentiated nasopharyngeal carcinoma and lymphomas. Nevertheless, the role of such viral agents in oral squamous cell carcinoma (OSCC) is still controversial. This study aimed to investigate HPV, EBV, p53 and Ki-67 in OSCC and oral lymphoma, considering clinical and histological features. The sample was composed of archived material (medical records and paraffin blocks of biopsied specimens) from patients with OSCC, oral lymphoma, and oral traumatic fibrous hyperplasia. The biopsied specimens and medical records were allocated into five groups: (1) 16 samples from patients with OSCC grade I (well-differentiated); (2) 16 samples from patients with OSCC grade II (moderately-differentiated); (3) 19 samples from patients with OSCC grade III (poorly-differentiated); (4) 14 samples from patients with oral non-Hodgkin lymphoma; and (5) 19 samples from patients with oral traumatic fibrous hyperplasia. Biopsied specimens were analyzed for HPV, EBV, p53 and Ki-67 expression by immunohistochemistry, and clinical data concerning age and gender of the patients, size and duration of the lesion as well as habits and comorbidities were collected. Marker expression was evaluated according to clinical features and histological grade of the tumors. There was no association of HPV and EBV with the tumors analyzed. Ki-67 expression was significantly lower in the fibrous hyperplasia group with no other significant differences. p53 expression was significantly lower in the lymphoma and fibrous hyperplasia groups than the OSCC groups, with no other significant differences. OSCC grade II and III were associated with male gender and tobacco smoking, while grade III was also associated with alcohol consumption. There was no association of the tumors with either chimarrão or comorbidities. Duration of the lesion was inversely correlated to lesion size, which in turn was inversely correlated to HPV. EBV and HPV were positively correlated to each other, as was Ki-67 to lesion size and p53, which was correlated to HPV. / Os tumores malignos da região de cabeça e pescoço constituem um grupo de doenças que afeta a face e o trato aerodigestivo superior. O diagnóstico precoce dessas neoplasias e de seus fatores etiológicos é de extrema importância para a sobrevida e para o tratamento do paciente. Nas últimas décadas, a relação de causa e efeito entre certos vírus e tumores malignos tem sido amplamente aceita. Recentemente, foi relatado o papel do Human papillomavirus (HPV) e do Epstein-Barr virus (EBV) na patogenia do carcinoma espinocelular de orofaringe, no carcinoma indiferenciado de nasofaringe e em linfomas, sendo ainda controverso o papel desses agentes virais no carcinoma de células escamosas oral (CCEO). O presente estudo teve por objetivo investigar, por meio de exame imunoistoquímico, os vírus HPV e EBV, bem como os marcadores Ki-67 e p53 em carcinomas e linfomas orais considerando fatores clínicos e histológicos. Espécimes de biópsia arquivados em blocos de parafina e prontuários de pacientes portadores de lesões orais de CCEO, linfoma e hiperplasia fibroepitelial foram distribuídos em cinco grupos: (1) 16 amostras de CCEO grau I (bem diferenciado); (2) 16 amostras de CCEO grau II (moderadamente diferenciado); (3) 19 amostras de CCEO grau III (pobremente diferenciado); (4) 14 amostras de linfoma não-Hodgkin e (5) 19 amostras de hiperplasia fibroepitelial. Os espécimes de biópsia foram submetidos a processamento imunoistoquímico para HPV, EBV, p53 e Ki-67.Dados clínicos referentes a idade e sexo dos pacientes, tamanho e duração da lesão, comorbidades e hábitos foram coletados dos prontuários. A expressão dos marcadores foi analisada de acordo com os aspectos clínicos e grau histológico dos tumores. Não houve associação entre HPV e EBV com os tumores analisados. A expressão do Ki-67 foi significativamente menor no grupo hiperplasia fibroepitelial, não havendo outras diferenças significativas entre os demais grupos. Os linfomas e as hiperplasias fibroepiteliais exibiram expressão de p53 significativamente menor que os carcinomas, sem outras significâncias. CCEO grau II e III foram associados ao sexo masculino e ao tabagismo, enquanto o CCEO grau III foi também associado ao consumo de álcool. Não houve associação dos tumores avaliados com chimarrão ou comorbidades. Houve correlação negativa entre duração e tamanho da lesão, bem como entre tamanho da lesão e HPV. EBV e HPV exibiram correlação positiva, assim como o Ki-67 foi correlacionado ao tamanho da lesão e à p53, que por sua vez exibiu correlação positiva com o HPV.

Orientador: Marlus Chorilli / Coorientador: Maria Palmira Daflon Gremião / Banca: Jorge Fernando Brandão Pereira / Banca: Nádia Araci Bou-Chacra / Resumo: O câncer bucal é uma doença altamente incidente na população mundial, podendo provocar deformidades faciais e morte. O tratamento de escolha envolve a administração de quimioterápicos, que podem apresentar ação citotóxica também sobre células saudáveis, diminuindo significativamente a qualidade e sobrevida dos pacientes. A curcumina, composto de ocorrência natural isolado dos rizomas da Curcuma longa, tem apresentado atividade no tratamento do câncer bucal, atuando sobre o fator nuclear kappa-beta (NF-kB), que medeia a expressão de genes que estão envolvidos na promoção de tumores, angiogênese e metástases. No entanto, seu uso clínico enfrenta muitos desafios devido às suas características físico-químicas e baixa biodisponibilidade oral. Assim, sua incorporação em sistemas nanoestruturados precursores de cristais líquidos (SPCL) acrescidos de adjuvantes poliméricos mucoadesivos para administração bucal demonstra ser uma opção interessante para viabilizar o seu uso, uma vez que estes sistemas conseguem proteger o fármaco da degradação e aumentar o tempo de permanência da formulação no ambiente bucal, possibilitando uma liberação controlada no local específico de ação. O objetivo deste trabalho foi desenvolver SPCL contendo curcumina para a administração bucal visando a otimização do tratamento câncer bucal. O delineamento dos sistemas se baseou na construção de diagramas ternários de fases pela mistura de PPG-5-CETETH-20, ácido oleico e utilizando fase aquosa adicionadas de dispersões de quitosana, poloxâmero e uma mistura binária de quitosana e poloxâmero. Entretanto, a utilização de dispersão de quitosana na fase aquosa gerou sistemas instáveis e essa estabilidade pôde ser melhorada com a adição de poloxâmero juntamente com a quitosana. As formulações foram caracterizadas macroscopicamente, por microscopia de luz polarizada, espalhamento de raio-x à baixo ângulo (SAXS),... / Abstract: Oral cancer is a highly incident disease in the world population and it can causes facial deformities and death. The choice treatment is costly and usually involves the administration of chemotherapy, which may have cytotoxic action also on healthy cells, which affects significantly the quality and survival of patients. Curcumin, naturally occurring compound isolated from the rhizomes of Curcuma longa, it has shown activity in the treatment of oral cancer, it acts on the nuclear factor kappa beta (NF-kB), which it mediates expression of genes that are involved in promoting tumors, angiogenesis and metastasis. However, its clinical use shows several challenges, mainly due to its physicochemical characteristics and low oral bioavailability. Thus, when incorporated in nanostructured systems precursors of liquid crystas (SPLC) added of a mucoadhesive polymer adjuvants, shows to be an interesting option to enable its use in the treatment of oral cancer, since these systems can protect the drug against degradation and to increase the residence time of the formulation in the oral environment, allowing a controlled release on an specific site of action. The aim of this study was to develop LCSP containing curcumin for oral administration in order to optimize the oral cancer treatment. The design of the systems was based on the construction of ternary phase diagrams by mixing PPG-5-CETETH-20, oleic acid and using aqueous dispersions added chitosan, poloxamer and a binary mixture of chitosan and poloxamer. However, the use of chitosan dispersion in the aqueous phase produced unstable systems and the stability can be improved with the addition of poloxamer with chitosan. The formulations were characterized by macroscopic appearance, polarized light microscopy (PLM), small angle X-ray scattering (SAXS), oscillatory rheology, texture analysis and analysis of in vitro mucoadhesion. The MLP show ... / Mestre

Made available in DSpace on 2013-10-29T16:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000451795-Texto+Completo-0.pdf: 9844032 bytes, checksum: abd171b9947156a56d52eef795138daf (MD5) Previous issue date: 2013 / In this study we investigated the immunodetection of VEGF, ANG-1 and ANG-2, as well as the number of blood vessels in specimens of reticular (ROLP) and atrophic-erosive oral lichen planus (AEOLP). In addition, were included the control groups oral epithelial hyperplasia (OFH), oral epithelial dysplasia (OED) and oral squamous cell carcinoma (OSCC) in order to find a relation between those angiogenics growth factors and biological behavior. Biopsy specimens diagnosed at the Oral Medicine Division of PUCRS, Brazil, were selected and distributed into the following groups ROLP (n=21); AEOLP (n=11); OFH (n=10); OED (n=10); and OSCC (n=10). They were subjected to immunohistochemical processing with primary antibodies anti-VEGF, anti-ANG-1 and anti-ANG-2. The results do not revelead significant difference in the immunodetection of ANG-1 and ANG-2 between the OLP groups. The ROLP group showed significantly higher immunodetection of VEGF (P=0. 01) compared with the AEOLP group. There was no significant difference in the number of blood vessels between the OLP groups (P=0. 393).In comparative analysis of OLP with control groups, ROLP and AEOLP cases were considered together, forming the OLP group (n=32). The comparison of immunodetection of those growth factors between the OLP group and each control group showed significantly higher values of ANG-1 in the OLP group compared to the OFH group (P=0. 043) and no significant difference in ANG-2. VEGF immunodetection in the OLP group was significantly higher than in the OFH group (P=0. 003) and significantly lower compared to the OSCC group (P=0. 032). No correlation was observed between growth factors evaluated in the different groups studied. The results of immunodetection of VEGF, ANG-1 and ANG-2 and the lack of significant difference in the number of blood vessels between ROLP and AEOLP groups indicate that angiogenesis in OLP can not be associated to the different clinical forms of this disease. The lack of correlation between the growth factors in the different lesions indicates the involvement of other pro-angiogenic agents in vascular neoformation and reflects the complexity of this process. Furthermore, immunodetection of growth factors evaluated was similar between OLP and OED, suggesting that angiogenesis in OLP may behave similarly to the epithelial dysplastic lesions. / Neste estudo foi investigada a imunodetecção do VEGF e das angiopoietinas (ANG) 1 e 2, bem como o número de vasos sanguíneos em espécimes de líquen plano oral reticular (LPOR) e atrófico-erosivo (LPOAE). Além disso, foram incluídos os grupos-controle hiperplasia fibroepitelial (HFO), displasia epitelial (DEO) e carcinoma espinocelular (CEO) orais, a fim de encontrar uma relação entre esses fatores de crescimento angiogênicos e comportamento biológico. Foram obtidos espécimes de biópsias do arquivo do Serviço de Estomatologia e Prevenção do Câncer Bucomaxilofacial do Hospital São Lucas da PUCRS, os quais foram distribuídos nos grupos LPOR (n=21); LPOAE (n=11); HFO (n=10); DEO (n=10); CEO (n=10) e, posteriormente, submetidos ao processamento imunoistoquímico com os anticorpos primários anti-VEGF, anti-ANG-1 e anti-ANG-2. Os resultados não revelaram diferença significativa na imunodetecção da ANG-1 e ANG-2 entre os grupos líquen plano oral (LPO). No entanto, o grupo LPOR apresentou imunodetecção significativamente superior do VEGF (p=0,01) comparado ao grupo LPOAE. Com relação ao número de vasos sanguíneos, a comparação entre os grupos LPO não mostrou diferença significativa entre ambos (p=0,393).Na análise comparativa com os grupos-controle, os casos de LPOR e LPOAE foram considerados em conjunto, formando o grupo LPO (n=32). A comparação da imunodetecção dos fatores de crescimento entre o grupo LPO com cada grupocontrole revelou valores significativamente superiores da ANG-1 no grupo LPO em relação ao grupo HFO (p=0,043) e ausência de diferença significativa nos valores da ANG-2. A imunodetecção do VEGF foi significativamente superior no grupo LPO em relação ao grupo HFO (p=0,003) e inferior quando comparada ao grupo CEO (p=0,032). Não foi observada correlação entre os fatores de crescimento avaliados nos diferentes grupos estudados. Os resultados observados na imunodetecção do VEGF, ANG-1 e ANG-2 e a falta de diferença significativa no número de vasos entre os grupos LPOR e LPOAE indicam que a angiogênese no LPO possa não estar associada às diferentes formas clínicas desta doença. A falta de correlação entre estes fatores de crescimento nos diferentes tipos de lesões estudadas indica o envolvimento de outras citocinas pró-angiogênicas, além daquelas avaliadas neste estudo, na neoformação vascular e reflete a complexidade deste processo. Por outro lado, a imunodetecção dos fatores de crescimento avaliados foi semelhante entre os grupos LPO e DEO, sugerindo que a angiogênese no LPO possa comportar-se de modo semelhante ao de lesões displásicas epiteliais.

Made available in DSpace on 2014-04-09T02:01:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000456587-Texto+Completo-0.pdf: 4329153 bytes, checksum: 3b1fcb08380fd20462af2db313e93f52 (MD5) Previous issue date: 2014 / Oral squamous cell carcinoma is among the six most common cancers in the world. For half of the diagnosed cases, oral cancer is a fatal disease, and those who survive often are disfigured and life quality becomes highly compromised. In this sense, one of the main allies for possible pharmacological therapy testing is the animal model, in this case, the hamster buccal pouch carcinogenesis model. This experimental model has been used with great success over the last 60 years. However the different protocols found in the literature sometimes have incomplete information. Thus, in the first part of this work we conducted a review of the animal model over the last 60 years, analyzing important technical parameters, such as: 1 - The hamster strains used;2 - The gender of animals; 3 - The age of the animals at the beginning of the induction protocol; 4 - The buccal pouch that was used for induction; 5 – The different types of carcinogens used; 6 – The concentrations of these carcinogens; 7 – The solvents used to dilute the carcinogen; 8 - The number of applications per week; 9 - The different applying systems; and 10 - The length of the exposure protocol used to induce carcinogenic lesions or cancer. After this study, we used a modified carcinogenic model to induce precancerous lesions in the hamster buccal pouch mucosa. In this experimental model we tested a novel pharmacological alternative used to treat different types of cancers. Sunitinib is a multiple tyrosine kinase inhibitor that acts on endothelial cells and pericytes inhibiting the process of angiogenesis which is essential for tumor growth. The second study evaluated qualitatively and quantitatively the morphological effects that sunitinib had in precancerous lesions induced by DMBA in the hamster buccal pouch mucosa. Moreover we evaluate different clinical parameters of these animals. Our main results with respect to the second study were: 1 - Sunitinib was not able to reverse the decrease in body weight gain induced by DMBA; - 2 Sunitinib was able to inhibit tumor growth and ulceration induced by DMBA; 3 - Sunitinib was able to reverse the increase in epithelial rete ridges induced by DMBA. Thus, sunitinib can be considered an effective agent for chemoprevention, being an interesting alternative for further studies in a more advanced stage of oral cancer in the hamster buccal pouch or similar model. / O câncer bucal de células escamosas está entre os seis cânceres mais comuns no mundo. Para metade dos casos diagnosticados, o câncer bucal é uma doença fatal, e para aqueles que sobrevivem geralmente trata-se de uma patologia mutiladora, na qual a qualidade de vida torna-se bastante comprometida. Neste sentido, um dos principais aliados para o teste de possíveis terapias farmacológicas para o tratamento desta patologia é o uso de modelos animais, destacando-se o modelo de indução de câncer bucal na mucosa da bolsa jugal de hamster sírio dourado. Este modelo experimental tem sido utilizado com bastante sucesso ao longo dos últimos 60 anos. Contudo os diferentes protocolos encontrados na literatura científica apresentam informações muitas vezes incompletas. Deste modo, na primeira parte deste trabalho realizamos uma revisão deste modelo animal ao longo dos últimos 60 anos, analisando importantes parâmetros técnicos deste modelo, como por exemplo: 1 - As linhagens de hamsters utilizadas; 2 - O gênero dos animais utilizados; 3 - A idade dos animais no início do tratamento com agente carcinogênico; 4 - A hemiface do animal que é predominantemente utilizada para a indução de câncer bucal;5 - Os diferentes tipos de agentes carcinogênicos utilizados neste modelo experimental; 6 - As diferentes concentrações destes agentes carcinogênicos; 7 - Os solventes utilizados para diluição dos agentes carcinogênicos; 8 - O número de aplicações por semana; 9 - Os diferentes sistemas de aplicação do agente carcinogênico; e 10 - A determinação da extensão do período de exposição ao carcinógeno, que é responsável pela produção de lesões cancerizáveis ou indução tumoral. Após esta revisão de metodologia sistemática, utilizamos um modelo experimental modificado para a indução de lesões cancerizáveis. Neste modelo experimental testamos uma nova alternativa farmacológica utilizada para o tratamento de diferentes tipos de cânceres, o sunitinib, um inibidor múltiplo de tirosina quinase, que age nas células endoteliais e nos pericitos inibindo o processo de angiogênese que é essencial para o crescimento tumoral. Neste segundo estudo avaliamos qualitativamente e quantitativamente os efeitos morfológicos do sunitinib nas lesões cancerizáveis induzidas por DMBA na mucosa da bolsa jugal de hamster sírio dourado. Ademais avaliamos diferentes parâmetros clínicos destes animais. Nossos principais achados relativos ao segundo estudo foram: 1 - O sunitinib não foi capaz de reverter o decréscimo de ganho de peso corpóreo, induzido por DMBA; 2 - O sunitinib foi capaz de inibir o crescimento tumoral e a presença de ulcerações induzidas pelo DMBA; 3 - O sunitinib foi capaz de reverter o aumento de cristas epiteliais induzido por DMBA. Deste modo, o sunitinib pode ser considerado um agente efetivo para a quimioprevenção destes tumores, constituindo uma alternativa interessante para novos estudos, em estágios mais avançados desta patologia, utilizando o modelo de câncer bucal em bolsa jugal de hamster ou modelos similares.

Made available in DSpace on 2014-08-20T02:02:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000460424-Tese+Parcial-0.pdf: 208542 bytes, checksum: c614e57b83b06eea8ef4c11836bbd946 (MD5) Previous issue date: 2014 / Oral cancer is among the six most common types of cancer worldwide, considered as the seventh most frequent in the Brazil. Tumor angiogenesis has become a promising target for the treatment of malignancies. Methods that allow three-dimensional evaluation of the vascular network of tumors have a great importance to assess the effects of antiangiogenic treatments in tumors. The objective of this study was to evaluate the effect of sunitinib maleate and the metronomic chemotherapy with cyclophosphamide on the vascular network of the oral squamous cell carcinoma by scanning electron microscopy (SEM) of corrosion casts. 24 Syrian hamsters (Mesocricetus auratus) were divided into three groups of eight animals each and had their right buccal pouches submitted to tumor induction with dimethylbenzanthracene and carbamide peroxide for 55 days. Following, the animals were maintained without treatment (group I) or receiving sunitinib (group II), or cyclophosphamide (group III) for a period of 4 weeks. After the treatment, six animals of each group had their vascular networks casted by Mercox® resin and analyzed qualitatively and quantitatively by SEM. The two remaining animals of each group had their buccal pouches prepared for qualitative analysis by light microscopy. It was observed changes in the angioarchitecture of the pouches that were treated with these two drugs, suggesting an improvement in the tumors vascularization. The main changes caused by the treatments were the reduction of vessel tortuosity, the reestablishment of vascular hierarchy, besides the decrease of sprouting and intussusception images, compressed vessels, saccular dilations, and other vascular figures. Quantitative analysis of the samples exhibited a statistically significant reduction in vascular diameter and intervascular distances ofthe pouches treated with cyclophosphamide, when compared with the pouches no treated and those treated with sunitinb. The findings of the present study suggest that these two drugs may act in the vascular normalization of squamous cell carcinomas induced in hamster buccal pouch, however the metronomic chemotherapy exhibited superior results. / O câncer oral está entre os seis tipos mais comuns de câncer no mundo, sendo o sétimo mais encontrado entre a população brasileira. O processo de angiogênese tumoral tem-se tornado um alvo promissor para o tratamento de neoplasias malignas. Os métodos que permitem a avaliação tridimensional da angioarquitetura dos tumores são de grande importância na análise dos efeitos de tratamentos antiangiogênico. Este trabalho visou avaliar o efeito do maleato de sunitinibe e da quimioterapia metronômica com ciclofosfamida na vasculatura do carcinoma oral de células escamosas, através de microscopia eletrônica de varredura (MEV) de réplicas vasculares. Assim, 24 hamsters sírios (Mesocricetus auratus) divididos em três grupos de oito animais cada, tiveram suas bolsas jugais direitas submetidas à indução tumoral com dimetilbenzantraceno e peróxido de carbamida por 55 dias, sendo mantidos por mais 4 semanas sem tratamento (grupo I), ou recebendo sunitinibe (grupo II), ou ciclofosfamida (grupo III). Após o tratamento, seis animais de cada grupo tiveram suas redes vasculares moldadas pela resina Mercox® e analisadas qualitativa e quantitativamente em MEV. Os dois animais restantes de cada grupo tiveram suas bolsas qualitativamente analisadas em microscopia de luz. Foram observadas modificações na angioarquitetura das bolsas que receberam tratamento com os dois fármacos, o que gerou uma normalização da vascularização dos tumores. As principais modificações provocadas pelos tratamentos foram a redução da tortuosidade dos vasos, o reestabelecimento da hierarquia vascular, além da diminuição de imagens de sprouting e intussuscepções, vasos comprimidos, dilatações saculares e outras figuras vasculares. A análise quantitativa das amostras evidenciou uma redução estatisticamente significativa do diâmetro vascular e das distâncias intervasculares nas bolsas tratadas com ciclofosfamida, quando comparadas com as bolsas que não receberam tratamento e com aquelas tratadas com sunitinibe. Os achados do presente estudo sugerem que essas duas drogas podem atuar na normalização da rede vascular no carcinoma de células escamosas induzido em bolsa jugal de hamster; no entanto a quimioterapia metronômica apresentou resultados superiores.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000419163-0.pdf: 7573936 bytes, checksum: cf99bdb6eeb8892e65fd4e0a5c3a15e2 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Objectives: This study investigated the expression of DNA methyltransferase (DNMT) 1, 3a, and 3b enzymes in oral squamous cell carcinoma (SCC) and leukoplakia, their relationship with histopathologic graduation and dysplasia, respectively, and with clinical parameters. Study design: Immunohistochemistry using antibodies anti-DNMT1, anti-DNMT3a, and anti-DNMT3b (dilution of 1:700, Imgenex, San Diego, USA) was carried out to detect the expression of the 3 DNMTs proteins in 21 oral leukoplakias with histopathologic diagnosis of acanthosis and/or hyperkeratosis (leukoplakia without dysplasia), 16 leukoplakias with histopathologic diagnosis of epithelial dysplasia, 20 oral well differentiated SCC (grade I), 20 oral moderately differentiated SCC (grade II), and 20 oral poorly differentiated SCC (grade III). Twenty samples of non-tumor oral tissues were obtained as control. The tissues were embedded in paraffin and obtained from the pathologic archive of Division of Stomatology and Prevention of Bucomaxillofacial Cancer, São Lucas Hospital, PUCRS. Statistical analysis was done using Analysis of Variance (ANOVA), Student-Newmann-Keuls test, Pearson correlation and t test. Results: The incidence of nuclear DNMT3a immunoreactivity in oral SCC groups (39. 9%) was significantly higher than in control (22. 6%) (P<0. 05), but not when compared to oral leukoplakias groups (28. 2%). For DNMT1 and DNMT3b, there were no statistically significant difference between oral SCC groups (65% and 74. 7%), oral leukoplakia groups (68. 3% and 70. 9%) and control (65. 4% and 76. 5%). DNMT protein expression exhibited no correlation with age and no association with gender and mate. There were a significant association between the DNMT3a and alcohol use (P = 0. 01), and an inverse association between DNMT1 and smoking (P = 0. 048).Conclusions: Although there was a higher level of DNMT3a immunopositivity in SCC groups, the three studied enzymes had no predictive capacity for SCC development in patients with oral leukoplakia, and exhibited no association with their histopathological features or the clinical parameters age, gender and mate consumption. Alcohol intake was associated with a higher DNMT3a expression and smoking with a lower DNMT1 expression. / Objetivos: Neste estudo foi investigada a expressão das enzimas DNA metiltransferases (DNMTs) 1, 3a e 3b em carcinomas escamocelulares (CEC) e leucoplasias bucais, relacionando-a com a graduação histopatológica e presença de displasia epitelial, respectivamente, bem como com os parâmetros clínicos dos pacientes. Metodologia: A técnica de imunoistoquímica utilizando anticorpos anti-DNMT1, anti-DNMT3a e anti-DNMT3b (diluição de 1:700) foi realizada para detectar a expressão das três DNMTs em 21 amostras de leucoplasias com diagnóstico histopatológico de acantose e/ou hiperceratose (leucoplasia sem displasia), 16 leucoplasias com diagnóstico histopatológico de displasia epitelial, 20 CEC bem diferenciados (grau I), 20 CEC moderadamente diferenciados (grau II) e 20 CEC pobremente diferenciados (grau III). Vinte amostras de tecidos orais não tumorais foram utilizadas como controles. O material, incluído em parafina, foi obtido do arquivo do Laboratório de Patologia do Serviço de Estomatologia e Prevenção do Câncer Bucomaxilofacial do Hospital São Lucas da PUCRS. A análise estatística foi realizada por meio da Análise de Variância (ANOVA), teste Student-Newman-Keuls, correlação de Pearson e teste t. Resultados: A incidência da imunorreatividade nuclear para DNMT3a nos grupos de CEC (39,9%) foi significativamente superior a do grupo-controle (22,6%) (p<0,05), mas não diferiu dos grupos de leucoplasias (28,2%). Para a DNMT1 e DNMT3b não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos de CEC (65% e 74,7%), de leucoplasias (68,3% e 70,9%) e controle (65,4% e 76,5%).A expressão imunoistoquímica das enzimas DNMTs não exibiu correlação com a idade dos pacientes nem associação com gênero e consumo de chimarrão. Houve uma significativa associação entre DNMT3a e uso de álcool (p = 0,01) e uma associação inversa entre DNMT1 e tabagismo (p = 0,048). Conclusões: Apesar do aumento do nível de imunorreatividade à enzima DNMT3a nos grupos de CEC, as três enzimas estudadas não possuem capacidade preditora de susceptibilidade ao CEC em pacientes com leucoplasia bucal, nem exibem associação com as características histopatológicas ou com os parâmetros clínicos idade, gênero e uso de chimarrão. O consumo de bebidas alcoólicas foi associado com uma maior expressão de DNMT3a e o uso de cigarro com uma menor expressão de DNMT1.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000425871-0.pdf: 1344859 bytes, checksum: dba6de98d2d3eb3cdbd945dc1cdefaf6 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Objectives: The present study aimed to verify if the salivary Endothelin-1 (ET-1) expression might represent an efficient biomarker to evaluate risk and prognosis from oral squamous cell carcinoma (OSCC).Methods: For the present study, saliva obtained from 20 healthy patients, 15 patients with oral leukoplakia (histopathologic diagnosis of hyperceratosis or severe dysplasia), 14 patients that had OSCC and were free of disease for more than 5 years, and from 20 patients with OSCC were collected. The ET-1 levels were quantified by means of ELISA. Results: No statistical differences were observed in the salivary ET-1 levels among the studied groups, even when patients with age superior to 65 years or with arterial hypertension were removed from the sample analysis. Likewise, when the sample was divided by sex, no statistical significance was observed among the four groups included in the study. Conclusions: Taking into account the present results, salivary ET-1 expression was not found to represent an efficient biomarker of either OSCC or oral leukoplakia. / Objetivos: Verificar se a Endotelina-1 (ET-1) salivar pode representar um biomarcador eficiente para avaliação de risco e prognóstico do carcinoma espinocelular bucal. Metodologia: Neste estudo, foi realizada coleta de saliva de 20 pacientes saudáveis, 15 pacientes portadores de leucoplasia oral (diagnóstico histopatológico de hiperceratose a displasia severa), 14 pacientes que já tiveram carcinoma espinocelular bucal (CEB) e estavam em um período pós-tratamento e livres de doença por, no mínimo cinco anos e, 20 pacientes portadores de CEB. A ET-1 foi quantificada na saliva através do método ELISA. Resultados: Não houve diferença estatisticamente significativa na expressão de ET-1 entre os grupos estudados, mesmo quando pacientes com idade superior a 65 anos ou hipertensos foram excluídos da análise. Da mesma forma, quando a amostra foi separada por sexo, também não houve diferença significativa. Conclusões: A ET-1 salivar não se mostrou um biomarcador eficiente do carcinoma espinocelular bucal.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:57:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000390283-Texto+Completo-0.pdf: 2534634 bytes, checksum: ab29f9d2768dd48a41b1c0f31f4c8fac (MD5) Previous issue date: 2006 / Squamous cell carcinoma (SCC) is the main malignant neoplasy of the oral cavity. The higher incidence of this tumor occurs between the fourth and seventh decade of life, and it has been found a raise in the number of young adults with this pathology in several regions of the world. The aim of this study was to compare anatomopathological characteristics and endoglin expression in the groups of adults (<60 years) and elderly (>/= 60 years). In this study, 27 samples of oral SCC were analisesd. Of the total, 14 specimens were from adult patients and 13 specimens were from elderly patientsThe results showed that a low grade of malignancy, a low pattern of invasion, The clinical, the anatomopathological aspects and the patterns of neoangiogenesis, through the expression of endoglin glycoprotein (CD105) in the groups of adults and elderly, were compared. a high degree of keratinization and a low number of mitosis in the elderly group were statistically significant at (p<0,03, p<0,04, p<0,04, p<0,04, respectively). Neoangiogenesis evaluated through of endoglin expression did not show statistically significant differences in both studied groups. Based on the presented results, in can be concluded that oral SCC of elderly patients show lower grade of malignancy and some anatomopathological characteristics that suggest lower tumoral aggressiveness when compared. However, quantitative alteration of endoglin expression in the analysed groups was not detected. / O carcinoma epidermóide (CEB) é a principal neoplasia maligna da cavidade bucal. A maior incidência desse tumor ocorre entre a quarta e sétima década de vida, sendo que tem sido constatado um aumento no número de adultos jovens com esta patologia em várias regiões do mundo. O objetivo deste estudo foi comparar as características anátomo-patológicas e a expressão da endoglina (CD105) em CEBS dos grupos etários adultos (< 60 anos) e idosos (>/= 60 anos). Foram utilizadas 27 amostras de CEBs, entre as quais 14 espécimens eram oriundas de pacientes adultos e 13 espécimens de pacientes idosos. Foram comparados os aspectos clínicos, anátomopatológicos e os padrões de neoangiogênese, através da expressão da glicoproteína endoglina (CD 105) entre os grupos de adultos e idosos.Os resultados mostraram que a baixa gradação de malignidade, o baixo padrão de invasão, o alto grau de queratinização e o baixo número de mitoses no grupo de idosos foram estatisticamente significantes para (p<0,03), (p<0,04), (p<0,04), (p<0,04), respectivamente, quando comparado com o grupo de adulto a neo-angiogênese avaliada através da quantificação da expressão da endoglina não apresentou diferenças estatisticamente significante para (p<0,05) em ambos grupos estudados. Considerando os resultados apresentados neste estudo, pode-se concluir que os CEBs de pacientes idosos apresentam menor gradação de malignidade e algumas características anátomo-patológicas que sugerem menor agressividade tumoral em relação aos adultos, entretanto, não houve alteração quantitativa da expressão da endoglina entre os grupos analisados.

A avaliação da presença de destruição óssea provocada por neoplasias malignas de boca e orofaringe é um fator de fundamental importância no estabelecimento da terapêutica adequada para o caso, como também, para a determinação do prognóstico do paciente. O presente estudo teve por objetivo determinar os aspectos clínicos (localização, forma de apresentação e estadiamento) que podem estar associadas com o potencial de infiltração do osso subjacente a lesão, como também determinar a sensibilidade e especificidade do exame físico. A população de estudo consistio de vinte e cinco pacientes (17 homens e 8 mulheres, média de idade de 57,88 anos) portadores de neoplasias malignas de boca e orofaringe atendidos no Ambulatório de Semiologia da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo – campus São Paulo, no período de agosto de 2003 a agosto de 2004, os quais foram submetidos ao exame clínico e a tomografia computadorizada (TC). A TC foi considerada o padrão ouro para a avaliação da presença de destruição óssea. Foi observada a presença de infiltração neoplásica para o tecido ósseo adjacente em 68% dos casos (17 pacientes). O exame físico dos pacientes revelou uma sensibilidade de 80% e especificidade de 87,50% na análise de comprometimento do osso, além de uma acurácia de 84%. As lesões que se apresentavam clinicamente como uma úlcera do tipo infiltrativa e lesões do tipo nodulares, não ulceradas, foram as que apresentaram maior potencial de infiltrar-se para o osso, 68,75% e 100% respectivamente. A localização do tumor em determinados sítios, também influenciou diretamente na presença de invasão óssea,principalmente lesões localizadas em região de gengiva, trígono retromolar, palato duro e orofaringe. O estadiamento das lesões revelou relação existente entre o tamanho do tumor e a presença de metástases à distância com a presença de infiltração da neoplasia para o tecido ósseo. Concluindo, observou-se que a identificação de determinados parâmetros clínicos como localização, forma de apresentação clinica, tamanho da lesão e a presença de metástases à distância, associado a um criterioso exame físico regional podem servir como valiosas ferramentas para a análise de envolvimento ósseo por neoplasias malignas de boca e orofaringe. / The assessment of bone destruction by oral and oropharynx malignant neoplasms is a critical factor in the therapeutic planning and to determine the patient prognostic. The aim of this study was to determine the clinical aspects (localization, clinical manifestation and stage) that can be associated with the potential of bone infiltration, and also determine the physical exam sensibility and specificity. The study population consisted of twenty five patients (17 men and 8 women, mean age 57.88 years-old), with malignant neoplasms of the mouth and oropharynx, of the Stomatology Clinic of the College of Dentistry at the Sao Paulo University - campus Sao Paulo, in the period of august 2003 to august 2004, who were submitted to a clinical and computed tomography (CT) examinations. CT was considered the gold standard to evaluate the presence of bone involvement. The presence of bone destruction by the tumor was observed in 68% of the cases (17 patients). The physical examination of the patients revealed 82% of sensibility, 87.50% of specificity, and 84% of accuracy in the assessment of bone invasion by these diseases. The lesions that were clinical considered to be infiltrative ulcer and nodular lesions, non-ulcerated, presented the highest potential to cause bone destruction, 68.75% and 100% respectively. The tumor localization in specific sites also influenced the presence of bone invasion, meanly with the lesions localized in the gingival, retromolar trigone, hard palate and oropharynx. The stage of the lesions revealed a relation between the size and the presence of distant metastasis, with the presence of invasion by the neoplasm. In conclusion, it was determined that the identification of some clinical parameters such localization, clinical presentation, lesion size and the presence of distant metastasis, associated with a perceptive regional physical exam must be use as a value tool is the assessment of bone destruction by oral and oropharynx malignant neoplasms.