Orientadores: Wander José da Silva, Altair Antoninha Del Bel Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-26T12:52:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cavalcanti_YuriWanderley_D.pdf: 36598802 bytes, checksum: f05687dd3da4ac323b62e27ca3d8816c (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A prevalência das infecções por Candida é elevada; logo, melhor compreensão dos mecanismos de desenvolvimento do biofilme é necessária para a redução da virulência e apropriado manejo clínico. Objetivou-se analisar a virulência de biofilmes de Candida albicans desenvolvidos sob diferentes condições. O papel das superfícies de biomateriais, da película salivar, e do estágio de desenvolvimento dos biofilmes foi avaliado no Capítulo 1. A influência da presença de outros microrganismos na virulência de C. albicans e na interação com o epitélio foi avaliada no Capítulo 2. O papel da atmosfera e da população bacteriana dos biofilmes foi investigado no Capítulo 3. No Capítulo 1, biofilmes de C. albicans foram desenvolvidos sobre discos de resina acrílica e titânio recobertos com película de saliva, ou de saliva com plasma. A superfície dos materiais foi analisada quanto a rugosidade e energia livre de superfície (ELS). Avaliou-se o número de microrganismos viáveis, a concentração de DNA, a atividade metabólica, a expressão de fatores de virulência e a estrutura dos biofilmes. Não houve diferenças quanto a rugosidade das superfícies. A película minimizou as diferenças entre a ELS dos materiais, sendo maior ELS observada para películas de saliva com plasma. O número de microrganismos viáveis, a concentração de DNA e a atividade metabólica aumentaram ao longo da maturação do biofilme. Maior atividade metabólica, maior expressão de ALS1, ALS3 e HWP1, e maior número de hifas foram verificados em biofilmes desenvolvidos na presença de película de saliva com plasma. Não houve diferenças entre os materiais. Concluiu-se que a presença de plasma na película salivar aumenta a virulência de C. albicans. No capítulo 2, biofilmes maduros (72 h) de C. albicans, e de C. albicans com bactérias, foram desenvolvidos sobre a superfície de resina acrílica. Esses biofilmes foram então analisados ou utilizados para infectar um modelo de epitélio oral humano reconstituído (RHOE). Avaliou-se o número de hifas e a expressão de fatores de virulência. A resposta epitelial foi avaliada por meio da expressão de IL-18 e Dectin1, da atividade da enzima lactato-desidrogenase (LDH), e a invasão epitelial. Maior número de hifas e maior expressão de HWP1, SAP4 e SAP6 foram verificados em biofilmes multi-espécie desenvolvidos sobre o acrílico. Biofilmes multi-espécies que infectaram o RHOE também apresentaram maior número de hifas e maior expressão de ALS3, EPA1, SAP6 e HWP1. Consequentemente, esses epitélios apresentaram maior invasão tecidual, maior atividade de LDH e maior expressão de IL-18. Concluiu-se que a presença de bactérias aumenta a virulência e patogenicidade de C. albicans. No capítulo 3, biofilmes de C. albicans e de C. albicans com estreptococos foram desenvolvidos sobre titânio em atmosfera de aerobiose e anaerobiose. Biofilmes de C. albicans (com ou sem estreptococos) também foram desenvolvidos na presença de Porphyromonas gingivalis, em anaerobiose. Avaliou-se a formação de hifas e a expressão de fatores de virulência. A atmosfera de anaerobiose e o co-cultivo com estreptococos geraram maior número de hifas e maior expressão de fatores de virulência. Embora P. gingivalis tenha inibido a virulência de C. albicans em biofilmes duo-espécies, esse efeito foi revertido na presença de estreptococos. Concluiu-se que a atmosfera de anaerobiose e a presença de estreptococos estimulam a virulência de C. albicans / Abstract: Candida infections have high prevalence; therefore, better understanding of the development mechanisms of biofilms is required for the reduction of virulence and for more appropriated clinical management. The aim of this study was to analyse the virulence of Candida albicans biofilms developed under different conditions. The role of biomaterial surfaces, salivary pellicle, and stage of biofilm development has been reported in Chapter 1. The influence of the presence of other microorganisms in virulence of C. albicans and on the interaction with the epithelium was evaluated in Chapter 2. The role of the atmosphere and of the biofilm¿s bacterial population was investigated in Chapter 3. In Chapter 1, C. albicans biofilms were developed on acrylic resin and titanium discs coated with saliva pellicle, or saliva with blood plasma pellicle. The materials¿ surfaces were analysed with regards to surface roughness and surface free energy (SFE). We evaluated the number of viable organisms, the DNA concentration, the metabolic activity, the expression of virulence factors and the architecture of the biofilms. There were no differences in the surface roughness of materials. The pellicles eliminated the differences between SFE of materials. Higher SFE was observed for discs coated with pellicles of saliva with plasma. The number of viable organisms, the DNA concentration and the metabolic activity increased throughout the biofilm maturation. Higher metabolic activity, increased expression of ALS1, ALS3 and HWP1, and more hyphae were observed in biofilms grown in the presence of saliva with plasma pellicle. There were no differences between the materials. In conclusion, the presence of saliva with plasma pellicle increases the C. albicans virulence. In chapter 2, mature biofilms (72 h) of C. albicans, or C. albicans with bacteria, were developed on the surface of acrylic resin discs. These biofilms were then analysed or used to infect a reconstituted human oral epithelium model (RHOE). Biofilms were evaluated according to the number of hyphae and the expression of virulence factors. The epithelial response was evaluated by the expression of IL-18 and Dectin1, by the activity of lactate dehydrogenase enzyme (LDH), and with regards the epithelial invasion. Increased number of hyphae and increased expression of HWP1, SAP4 and SAP6 were observed in multi-species biofilms developed on acrylic. Multi-species biofilms that have infected RHOE also had a greater number of hyphae and increased expression of ALS3, EPA1, SAP6 and HWP1. Consequently, these epithelia showed greater tissue invasion, higher LDH activity and higher IL-18 expression. We concluded, therefore, that the presence of bacteria promotes the virulence and pathogenicity of C. albicans. In Chapter 3, biofilms of C. albicans and C. albicans with streptococci were developed on titanium, aerobically and anaerobically. C. albicans biofilms (mixed or not-mixed with streptococci) were also grown in the presence Porphyromonas gingivalis, anaerobically. Biofilms were evaluated according to the formation of hyphae and expression of virulence factors. Anaerobic conditions and co-cultivation of streptococci produced higher number of hyphae and increased expression of virulence factors. Although P. gingivalis has inhibited the virulence of C. albicans, this effect was reversed in the presence of streptococci. We concluded that the anaerobic atmosphere and the presence of streptococci stimulate the C. albicans virulence / Doutorado / Protese Dental / Doutor em Clínica Odontológica

Resumo não disponível

INTRODUÇÃO: Embora a mortalidade geral tenha diminuído na era da terapia antirretroviral de alta potência (TARVAP), o envolvimento do Sistema Nervoso Central (SNC) ainda é elevado nos pacientes com infecção pelo HIV. O estudo sobre possíveis correlações entre neuroinfecções, a presença de déficts neurocognitivos e o uso da TARVAP é importante para se avaliar os efeitos de longo prazo do tratamento com drogas antirretrovirais em uma população. Desta forma, são necessários estudos para se avaliar a neuropatologia da infecção pelo HIV e os efeitos do tratamento bem como a adesão ao mesmo. OBJETIVOS: Analisar a frequência e o tipo de infecções oportunistas e da infecção crônica pelo HIV no SNC na era pós-TARVAP, de pacientes necropsiados em um hospital universitário, no período de 2007 a 2014. Nestes casos, avaliar o substrato neuropatológico de pacientes com Aids e histórico clínico de demência. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram analisados os achados dos exames neuropatológicos de 123 encéfalos de pacientes autopsiados com AIDS no Serviço de Patologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (HCFMRP/USP), seus dados clínicos e respectivos os laudos necroscópicos. RESULTADOS: Dos 123 casos analisados, 73 (59,3%) eram do sexo masculino e a média de idade foi de 40,56 anos. Destes, 69 (56,1%) tiveram neuroinfecções causadas por agentes oportunistas, sendo a neurotoxoplasmose a mais prevalente. Da correlação entre a contagem de células CD4 e o uso da TARVAP houve diferença significativa para uma delas, àquela que foi analisada como sendo a terceira mais próxima da data do óbito (p = 0,03). Apenas 6 pacientes fizeram uso regular da TARVAP no decorrer da doença e nenhum deles apresentaram neuroinfecções durante o tratamento. CONCLUSÕES: Podemos concluir que mesmo na era pós TARVAP as infecções no SNC causadas por agentes infecciosos permanecem presentes e no caso da população estudada podem estar correlacionadas com a baixa adesão ao tratamento. / RATIONALE: Although overall mortality has decreased in the era of highly active antiretroviral therapy (HAART), the involvement of the central nervous system (CNS) is still high in patients with HIV infection. The study of possible correlations between neuroinfections, the presence of neurocognitive payment deficits and the use of HAART is important to evaluate the long-term effects of treatment with antiretroviral drugs in a population. Thus, studies are needed to evaluate the neuropathology of infection by HIV and the treatment effects and it adhesion. OBJECTIVES: To analyze the changes caused by opportunistic infections and chronic HIV infection in the CNS in the post-HAART era of autopsied patients at a university hospital, from 2007 to 2014. In these cases, assess the neuropathologic of AIDS patients and clinical history of dementia. MATERIALS AND METHODS: The findings of neuropathological examinations of 123 brains of patients were analyzed autopsied AIDS in Hospital Pathology Service of the Clinics of Ribeirão Preto Medical School, University of São Paulo (HCFMRP / USP) clinical data and their postmortem reports. RESULTS: The 123 cases analyzed, 73 (59.3%) were male and the average age was 40.56 years. Of these 69 (56,1%) had neuroinfections caused by opportunistic agents, toxoplasmosis being the most prevalent. The correlation between CD4 cell count and use of HAART were no significant differences for one of them to that which was analyzed as being the closest third of the date of death (p = 0.03). Only 6 patients made regular use of HAART during the disease and none of them showed neuroinfections during treatment. CONCLUSIONS: We can conclude that even in the post HAART era CNS infections caused by infectious agents remain present and in the case of the studied population can be correlated with low adherence to the treatment.

As infecções virais são as maiores responsáveis pelas úlceras esofágicas no portador do HIV, sendo o Citomegalovírus (CMV) o agente mais observado, seguido pelo Herpes Vírus Simples (HSV). A abordagem clínica adequada e a utilização de métodos diagnósticos precisos são de grande relevância para o estabelecimento etiológico. Os objetivos deste trabalho foram: avaliar a prevalência de úlceras esofágicas em portadores do HIV; pesquisar os agentes etiológicos associados; verificar a acurácia dos métodos diagnósticos comparando as impressões obtidas pela endoscopia digestiva alta (EDA), histologia utilizando o método de Hematoxilina-Eosina (H&E) e Imuno-histoquímica (IH) para pesquisa de CMV e HSV; avaliar o impacto da coloração para fungos (Gomori metenamina prata- GMS) e bacilos álcool-ácidos resistentes [BAAR- Ziehl-Neelsen (ZN)] e a relevância numérica da amostragem tecidual na avaliação etiológica. Trata-se de um estudo descritivo, retrospectivo, do tipo transversal, baseado em levantamento de dados demográficos, clínico-laboratoriais, endoscópicos obtidos por revisão de prontuários e análise histológica às cegas de biópsias endoscópicas (H&E, IH, GMS e ZN) de úlceras esofágicas em 41 portadores do HIV, no período de agosto de 2002 a setembro de 2006. A IH foi considerada método padrão. No período avaliado, 399 portadores do HIV submeteram-se à EDA, detectando-se úlcera esofágica em 41 pacientes (23 homens, 25 a 56 anos) com uma prevalência de 10,27%. A mediana da contagem de CD4 foi 49 céls/mm3 e da carga viral 58869,5 cópias/ml. A EDA revelou 29/41úlceras esofágicas suspeitas de infecção pelo CMV; 7/41 pelo HSV; 2/41 relacionada ao refluxo gastroesofágico (DRGE); 1/41 por monilíase; 1/41 por paracoccidioidomicose (PCM) e 1/41 inespecífica. O H&E detectou: 25/41 úlceras com aspectos inflamatórios inespecíficos (61%); 6/41 associadas à monilíase (16%); 4/41 por infecção pelo CMV (10%); 2/41 HSV (5%); 1/41CMV e HSV (2%); 1/41 por PCM (2%); 1/41 devido a Histoplasmose (2%) e 1/41 infiltração neoplásica por Linfoma não Hodgkin (2%). A IH para CMV e HSV confirmou os achados do H&E e detectou mais um caso. A EDA revelou sensibilidade alta (100%) para a detecção da úlcera esofágica, especificidade baixa para a caracterização etiológica viral (15%) quando comparada ao H&E e a IH. O H&E mostrou-se um método adequado para avaliação etiológica com sensibilidade de 87% e especificidade de 100% quando comparada a IH. A pesquisa de BAAR pelo ZN foi negativa nas 34 amostras realizadas. O GMS confirmou a presença de fungos detectados ao H&E e foi fundamental na caracterização morfológica do Histoplasma capsulatum e do Paraccocidioides brasiliensis. O número de amostras não influenciou na avaliação etiológica final. Os nossos achados recomendam o H&E como método adequado na avaliação etiológica de úlceras esofágicas no portador do HIV e indicam a IH para pesquisa viral somente nos casos suspeitos, porém, não típicos ao H&E. / Viral infections are the main cause of esophageal ulcers in HIV carriers, cytomegalovirus (CMV) being the most frequently observed, followed by Herpes Simplex Virus (HSV). An appropriate clinical approach and the use of precise diagnostic methods are very important for etiological evaluation. The aim of this work has been: to evaluate the prevalence of esophageal ulcers in HIV carriers; to research the associated etiological agents; to check the accuracy of the diagnostic methods, comparing the impressions obtained by the upper gastrointestinal endoscopy (UGE), histology using the Hematoxiline-Eosin (H&E) method, and immunohistochemistry (IH) to investigate CMV and HSV; to evaluate the impact of the staining for fungus (Gomori methenamine silver GMS) and for resistant alcohol-acid bacillus (BAAR-Ziehl-Neelsen ZN), and the numerical relevance of tissue samples in the etiological characterization. This is a descriptive, retrospective, transversal study, based on demographic, clinic-laboratorial and endoscopic data, obtained by the review of medical charts and blind histological analysis of endoscopic biopsies (H&E, IH, GMS an ZN) of esophageal ulcers of 41 HIV carriers, from August 2002 to September 2006. The IH has been chosen as the standard method. Along the evaluated period, 399 HIV carriers were submitted to UGE, and esophageal ulcer was detected in 41 patients (25 to 56 years old, 23 males), with a prevalence of 10.27%. The median of the CD4 count was 49 cells/mm3, and the viral load 58869.5 copies/ml. UGE has revealed 29/41 esophageal ulcers under suspicion of infection by CMV; 7/41 by HSV; 2/41 related to gastroesophageal reflux (GER)/ 1/41 by moniliasis; 1/41 by paracoccidioidomycosis (PCM) and 1/41 non-specific. H&E has detected 25/41 ulcers with non-specific inflammatory aspects (61%); 6/41 associated with moniliasis (16%); 4/41 caused by CMV infection (10%); 2/41 by HSV (5%); 1/41 by CMV and HSV (2%); 1/41 by PCM (2%); 1/41 due to Hystoplasmosis (2%) and 1/41, to neoplastic infiltration by non-Hodgkin lymphoma (2%). IH for CMV and HSV has confirmed the H&E findings and has detected another case. UGE has revealed high sensitivity (100%) for the detection of esophageal ulcer and low specificity for the viral etiological characterization (15%), as compared to H&E and IH. H&E has shown to be an adequate method for the etiological evaluation, with 87% of sensitivity and 100% of specificity, as compared to IH. BAAR research by ZN was negative in the 34 samples studied. GMS has confirmed the presence of fungus detected by H&E and has been fundamental in the morphological characterization of Histoplasma capsulatum and Paraccocidioides brasiliensis. Our findings support the use of H&E as a suitable method for the etiological evaluation of esophageal ulcers in HIV carriers and indicate IH for viral search only in suspect cases that are non-typical under H&E.

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-04-06T14:56:02Z No. of bitstreams: 2 Tese - Edson Sidião de Souza Júnior - 2018.pdf: 4221627 bytes, checksum: 3ff22d97cfbda2b66f7ea55810e5e04c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-04-06T15:49:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Edson Sidião de Souza Júnior - 2018.pdf: 4221627 bytes, checksum: 3ff22d97cfbda2b66f7ea55810e5e04c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-06T15:49:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Edson Sidião de Souza Júnior - 2018.pdf: 4221627 bytes, checksum: 3ff22d97cfbda2b66f7ea55810e5e04c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2008-12-10 / The Coccidia (Phylum Microspora) and Microsporidia (Phylum Apicomplexa) are responsible for a range of clinical pictures, and with important mortality rate, usually in patients with compromising of the immunological system. Its occurrence has been underestimated in our milieu maybe for the lack of knowledge on the part of the professionals of the health, or, by existence of a few qualified laboratories for its identification. The recognition of the species causing the infection is fundamental to guide the therapeutic handling to be adopted and definition of the infected patient's prognostic. This recognition is only possible through electronic Microscopy and of biomolecular techniques, standing out the of the Polymerase Chain Reaction (PCR). The present study it is part of a longitudinal study, developed in the IPTSP/UFG, on the clinical profile, epidemiologist and laboratorial of these agents. It specifically aims at to describe the standartization and the use of the PCR in the laboratorial diagnosis of opportunist protozoa in clinical samples human beings and as instrument of study of consumption waters human being in the city of Goiânia-GO, basic instrument for the control of these protozoa. The study it was carried through between october 1999 and december 2007. In the total were appraised 994 patient: 1) 664 immunocompromissed patients (with immunossuppression or immunodepression) with diarrhea coming from the School Hospital of UFG and of reference units in attendance to the health of the Goiás State; 2) 330 individuals from the community, by aleatory selection seemingly without disturbances of immunological systems and coming of the health reference units (unique sample). All of the samples were submitted to techniques of HPJ, Rugai and specific colorations for the diagnosis of the Coccidia (Hot Kinyoun) and intestinal Microsporidia (Hot-Chromotrope-Kokoskin), with previous coprological concentration through the ethyl formalin-acetate technique. The suggestive laboratorial infections were confirmed by the PCR technique, when the sample was enough. The confirmation and the identification of the species for PCR indicated the presence of the Encephalitozoon intestinalis, Enterocytozoon bieneusi, Cryptosporidium parvum/hominis in the analyzed samples. The standardization of the technique of PCR for ambient samples (water) was made from a survey carried through in the rivers and lakes of the city of Goiânia-GO. Inside of this quantitative one was found of Cryptosporidium parvum/hominis, demonstrating the viability of the PCR for ambient analyses that search the presence of opportunist protozoa in the water. These findings reveal, on one side, that these agents are present in ours milieu causing infections isolated or associated (co-infections), among them or with other infect-parasitic agents, being constituted in a risk for the populations of immunocompromised patients; and for other hand, they suggest in the need of implanting, more improvement diagnosis techniques, to define the clinical and epidemiological aspects of opportunistic protozoa species circulating in the Goiás State. / Os Coccídios do gênero Cryptosporidium, Cyclospora (Filo Apicomplexa) e os Microsporídios (Filo Microspora) são responsáveis por quadros clínicos com expressivos índices de morbi-mortalidade, preferencialmente em pacientes com comprometimento do Sistema Imunológico. A ocorrência desses agentes tem sido subestimada em nosso meio, seja pelo desconhecimento por parte dos profissionais da saúde, como por existirem poucos laboratórios qualificados para sua identificação. O reconhecimento da espécie desses protozoários que está causando a infecção é fundamental para guiar a terapêutica a ser adotada e definição do prognóstico do indivíduo infectado. Este reconhecimento só é possível através da Microscopia eletrônica e de técnicas biomoleculares, destacando-se a técnica da Reação da Polimerase em Cadeia (PCR). Considerando importância da água na veiculação destes agentes, o monitoramento ambiental, realizado com técnicas viáveis e eficientes, é de extrema importância epidemiológica. O presente estudo faz parte de um estudo longitudinal, desenvolvido no IPTSP/UFG, sobre o perfil clínico, epidemiológico e laboratorial destes agentes. Visa especificamente descrever a padronização e o uso do PCR no diagnóstico laboratorial das enteroparasitoses oportunistas em amostras clínicas humanas e como instrumento de monitoramento de águas de consumo humana, no município de Goiânia-GO, além de conter uma revisão sistemática da literatura que aborada tal uso deste instrumento na identificação destes parasitos em populações com déficit imunitário e imunocompetentes. O estudo foi realizado entre outubro 1999 e dezembro 2007. No total foram avaliados 994 pacientes: sendo 664 pacientes com diarréia e/ou com algum tipo de imunossupressão e/ou imunodepressão procedentes dos hospitais-escola da UFG e de unidades referências em assistência à Saúde de Goiás; e 330 indivíduos da comunidade, selecionados aleatoriamente, aparentemente imunocompetentes, e provenientes de Unidades de Saúde de referência (amostra única). Todas as amostras (2526 amostras de fezes) foram submetidas a técnicas de HPJ, Rugai e colorações específicas para o diagnóstico de Coccídios (Kinyoun à quente) e Microsporídios intestinais (Hot-Chromotrope-Kokoskin), com concentração coprólogica prévia pela técnica de formalina-acetato de etila. Os achados laboratoriais genéricos de infecção por estes agentes, no total 45 amostras, foram confirmados pela técnica de PCR. A confirmação e a identificação da espécie pelo PCR indicaram a presença do Encephalitozoon intestinalis, Enterocytozoon bieneusi, Cryptosporidium parvum/hominis e Cyclospora cayetanensis nas amostras clínicas analisadas. A padronização da técnica de PCR para amostras ambientais (água) foi feita a partir de um levantamento realizado nos rios e lagos do município de Goiânia. Dentro desse quantitativo foi identificado oocistos de Cryptosporidium parvum/hominis, demonstrando a viabilidade do PCR para análises ambientais que busquem a presença de enteroparasitos oportunistas na água. Estes achados revelam, por um lado, que estes agentes estão presentes em nosso meio podendo causar infecções isoladas ou associadas (co-infecções), entre eles ou com outros agentes infecto-parasitarios, constituindo-se num risco para as populações de pacientes imunosuprimidos; e por outro, sugerem na necessidade de implantar, técnicas diagnósticas mais aprimoradas, para definir os aspectos clínicos e epidemiológicos das parasitoses intestinais oportunistas humanas em nosso estado.

As infecções virais são as maiores responsáveis pelas úlceras esofágicas no portador do HIV, sendo o Citomegalovírus (CMV) o agente mais observado, seguido pelo Herpes Vírus Simples (HSV). A abordagem clínica adequada e a utilização de métodos diagnósticos precisos são de grande relevância para o estabelecimento etiológico. Os objetivos deste trabalho foram: avaliar a prevalência de úlceras esofágicas em portadores do HIV; pesquisar os agentes etiológicos associados; verificar a acurácia dos métodos diagnósticos comparando as impressões obtidas pela endoscopia digestiva alta (EDA), histologia utilizando o método de Hematoxilina-Eosina (H&E) e Imuno-histoquímica (IH) para pesquisa de CMV e HSV; avaliar o impacto da coloração para fungos (Gomori metenamina prata- GMS) e bacilos álcool-ácidos resistentes [BAAR- Ziehl-Neelsen (ZN)] e a relevância numérica da amostragem tecidual na avaliação etiológica. Trata-se de um estudo descritivo, retrospectivo, do tipo transversal, baseado em levantamento de dados demográficos, clínico-laboratoriais, endoscópicos obtidos por revisão de prontuários e análise histológica às cegas de biópsias endoscópicas (H&E, IH, GMS e ZN) de úlceras esofágicas em 41 portadores do HIV, no período de agosto de 2002 a setembro de 2006. A IH foi considerada método padrão. No período avaliado, 399 portadores do HIV submeteram-se à EDA, detectando-se úlcera esofágica em 41 pacientes (23 homens, 25 a 56 anos) com uma prevalência de 10,27%. A mediana da contagem de CD4 foi 49 céls/mm3 e da carga viral 58869,5 cópias/ml. A EDA revelou 29/41úlceras esofágicas suspeitas de infecção pelo CMV; 7/41 pelo HSV; 2/41 relacionada ao refluxo gastroesofágico (DRGE); 1/41 por monilíase; 1/41 por paracoccidioidomicose (PCM) e 1/41 inespecífica. O H&E detectou: 25/41 úlceras com aspectos inflamatórios inespecíficos (61%); 6/41 associadas à monilíase (16%); 4/41 por infecção pelo CMV (10%); 2/41 HSV (5%); 1/41CMV e HSV (2%); 1/41 por PCM (2%); 1/41 devido a Histoplasmose (2%) e 1/41 infiltração neoplásica por Linfoma não Hodgkin (2%). A IH para CMV e HSV confirmou os achados do H&E e detectou mais um caso. A EDA revelou sensibilidade alta (100%) para a detecção da úlcera esofágica, especificidade baixa para a caracterização etiológica viral (15%) quando comparada ao H&E e a IH. O H&E mostrou-se um método adequado para avaliação etiológica com sensibilidade de 87% e especificidade de 100% quando comparada a IH. A pesquisa de BAAR pelo ZN foi negativa nas 34 amostras realizadas. O GMS confirmou a presença de fungos detectados ao H&E e foi fundamental na caracterização morfológica do Histoplasma capsulatum e do Paraccocidioides brasiliensis. O número de amostras não influenciou na avaliação etiológica final. Os nossos achados recomendam o H&E como método adequado na avaliação etiológica de úlceras esofágicas no portador do HIV e indicam a IH para pesquisa viral somente nos casos suspeitos, porém, não típicos ao H&E. / Viral infections are the main cause of esophageal ulcers in HIV carriers, cytomegalovirus (CMV) being the most frequently observed, followed by Herpes Simplex Virus (HSV). An appropriate clinical approach and the use of precise diagnostic methods are very important for etiological evaluation. The aim of this work has been: to evaluate the prevalence of esophageal ulcers in HIV carriers; to research the associated etiological agents; to check the accuracy of the diagnostic methods, comparing the impressions obtained by the upper gastrointestinal endoscopy (UGE), histology using the Hematoxiline-Eosin (H&E) method, and immunohistochemistry (IH) to investigate CMV and HSV; to evaluate the impact of the staining for fungus (Gomori methenamine silver GMS) and for resistant alcohol-acid bacillus (BAAR-Ziehl-Neelsen ZN), and the numerical relevance of tissue samples in the etiological characterization. This is a descriptive, retrospective, transversal study, based on demographic, clinic-laboratorial and endoscopic data, obtained by the review of medical charts and blind histological analysis of endoscopic biopsies (H&E, IH, GMS an ZN) of esophageal ulcers of 41 HIV carriers, from August 2002 to September 2006. The IH has been chosen as the standard method. Along the evaluated period, 399 HIV carriers were submitted to UGE, and esophageal ulcer was detected in 41 patients (25 to 56 years old, 23 males), with a prevalence of 10.27%. The median of the CD4 count was 49 cells/mm3, and the viral load 58869.5 copies/ml. UGE has revealed 29/41 esophageal ulcers under suspicion of infection by CMV; 7/41 by HSV; 2/41 related to gastroesophageal reflux (GER)/ 1/41 by moniliasis; 1/41 by paracoccidioidomycosis (PCM) and 1/41 non-specific. H&E has detected 25/41 ulcers with non-specific inflammatory aspects (61%); 6/41 associated with moniliasis (16%); 4/41 caused by CMV infection (10%); 2/41 by HSV (5%); 1/41 by CMV and HSV (2%); 1/41 by PCM (2%); 1/41 due to Hystoplasmosis (2%) and 1/41, to neoplastic infiltration by non-Hodgkin lymphoma (2%). IH for CMV and HSV has confirmed the H&E findings and has detected another case. UGE has revealed high sensitivity (100%) for the detection of esophageal ulcer and low specificity for the viral etiological characterization (15%), as compared to H&E and IH. H&E has shown to be an adequate method for the etiological evaluation, with 87% of sensitivity and 100% of specificity, as compared to IH. BAAR research by ZN was negative in the 34 samples studied. GMS has confirmed the presence of fungus detected by H&E and has been fundamental in the morphological characterization of Histoplasma capsulatum and Paraccocidioides brasiliensis. Our findings support the use of H&E as a suitable method for the etiological evaluation of esophageal ulcers in HIV carriers and indicate IH for viral search only in suspect cases that are non-typical under H&E.

INTRODUÇÃO: Embora a mortalidade geral tenha diminuído na era da terapia antirretroviral de alta potência (TARVAP), o envolvimento do Sistema Nervoso Central (SNC) ainda é elevado nos pacientes com infecção pelo HIV. O estudo sobre possíveis correlações entre neuroinfecções, a presença de déficts neurocognitivos e o uso da TARVAP é importante para se avaliar os efeitos de longo prazo do tratamento com drogas antirretrovirais em uma população. Desta forma, são necessários estudos para se avaliar a neuropatologia da infecção pelo HIV e os efeitos do tratamento bem como a adesão ao mesmo. OBJETIVOS: Analisar a frequência e o tipo de infecções oportunistas e da infecção crônica pelo HIV no SNC na era pós-TARVAP, de pacientes necropsiados em um hospital universitário, no período de 2007 a 2014. Nestes casos, avaliar o substrato neuropatológico de pacientes com Aids e histórico clínico de demência. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram analisados os achados dos exames neuropatológicos de 123 encéfalos de pacientes autopsiados com AIDS no Serviço de Patologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (HCFMRP/USP), seus dados clínicos e respectivos os laudos necroscópicos. RESULTADOS: Dos 123 casos analisados, 73 (59,3%) eram do sexo masculino e a média de idade foi de 40,56 anos. Destes, 69 (56,1%) tiveram neuroinfecções causadas por agentes oportunistas, sendo a neurotoxoplasmose a mais prevalente. Da correlação entre a contagem de células CD4 e o uso da TARVAP houve diferença significativa para uma delas, àquela que foi analisada como sendo a terceira mais próxima da data do óbito (p = 0,03). Apenas 6 pacientes fizeram uso regular da TARVAP no decorrer da doença e nenhum deles apresentaram neuroinfecções durante o tratamento. CONCLUSÕES: Podemos concluir que mesmo na era pós TARVAP as infecções no SNC causadas por agentes infecciosos permanecem presentes e no caso da população estudada podem estar correlacionadas com a baixa adesão ao tratamento. / RATIONALE: Although overall mortality has decreased in the era of highly active antiretroviral therapy (HAART), the involvement of the central nervous system (CNS) is still high in patients with HIV infection. The study of possible correlations between neuroinfections, the presence of neurocognitive payment deficits and the use of HAART is important to evaluate the long-term effects of treatment with antiretroviral drugs in a population. Thus, studies are needed to evaluate the neuropathology of infection by HIV and the treatment effects and it adhesion. OBJECTIVES: To analyze the changes caused by opportunistic infections and chronic HIV infection in the CNS in the post-HAART era of autopsied patients at a university hospital, from 2007 to 2014. In these cases, assess the neuropathologic of AIDS patients and clinical history of dementia. MATERIALS AND METHODS: The findings of neuropathological examinations of 123 brains of patients were analyzed autopsied AIDS in Hospital Pathology Service of the Clinics of Ribeirão Preto Medical School, University of São Paulo (HCFMRP / USP) clinical data and their postmortem reports. RESULTS: The 123 cases analyzed, 73 (59.3%) were male and the average age was 40.56 years. Of these 69 (56,1%) had neuroinfections caused by opportunistic agents, toxoplasmosis being the most prevalent. The correlation between CD4 cell count and use of HAART were no significant differences for one of them to that which was analyzed as being the closest third of the date of death (p = 0.03). Only 6 patients made regular use of HAART during the disease and none of them showed neuroinfections during treatment. CONCLUSIONS: We can conclude that even in the post HAART era CNS infections caused by infectious agents remain present and in the case of the studied population can be correlated with low adherence to the treatment.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-23Bitstream added on 2014-06-13T21:05:15Z : No. of bitstreams: 1 navas_eafa_dr_sjc.pdf: 459908 bytes, checksum: ff1249e87aef3abfe1f5c0c880a88231 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Considerando-se que pacientes com Lúpus Eritematoso Sistêmico são submetidos a tratamento com corticosteróides e imunossupressores, podemos concluir que esta condição pode interferir na presença de microrganismos potencialmente oportunistas na cavidade bucal. Deste modo, o objetivo deste estudo foi avaliar a presença de leveduras do gênero Candida, estafilococos, enterobactérias e Pseudomonas spp. na cavidade bucal de pacientes com LES comparando os resultados com indivíduos controle. Desta forma, foram selecionados 40 pacientes com idades entre 19 e 53 anos com LES e que estavam em tratamento por no mínimo 60 dias. Para o grupo controle foram selecionados 40 indivíduos sistemicamente saudáveis com perfil semelhante (quanto à idade, gênero e condições bucais) aos pacientes do grupo em estudo. Não foram incluídos pacientes diabéticos, portadores de próteses bucais totais e outras doenças sistêmicas e que estavam sob terapia com medicamentos que pudessem interferir com as condições bucais. Foram realizados anamnese, exame clínico e coleta de enxágüe bucal de cada paciente. A amostra de enxágüe bucal foi semeada em meios de cultura específicos para cada microrganismo e após período de incubação foram realizadas contagens de unidades formadoras de colônia (UFC), obtendo-se o número de UFC/mL. A partir dos isolados obtidos, foram realizadas provas de identificação a fim de caracterizar as espécies dos gêneros em estudo. As contagens de microrganismos foram comparadas entre os grupos LES e controle por ANOVA, Mann Whitney (5%). Contagens de microrganismos em indivíduos sob tratamento com fármacos imunossupressores ou não e atividade positiva... / Considering that patients with systemic erithematous lupus are treated with corticoids and immunossuppresive drugs, this condition may interfere in the presence of potentially opportunistic microorganisms in the oral cavity. The aim of this study was to evaluate the presence of Candida spp. staphylococci, enterobacteria and Pseudomonas spp. in the oral cavity of patients with systemic erithematous lupus (LES) comparing the results with control individuals. Forty patients aged 19-53 years with LES and under therapy for at least 60 days were selected. For the control group, 40 healthy individuals paired to the test group in relation to age, gender and oral conditions were selected. Diabetic and other systemic diseases patients, denture users and individuals under therapy with drugs that affect the oral conditions were not included. Clinical examination, anamnesis and oral rinses sampling were performed. Oral rinse samples were plated on specific culture media and after the period of incubation the number of colony forming units were counted, and the value of cfu/ml was obtained. The isolates were identified in order to obtain the species. The counts of microorganisms were compared between LES and control groups by ANOVA, Mann Whitney (5%). Also, counts of microorganisms in patients under treatment with immunossupressive drugs of not and positive or negative activity of the disease (SLEDAI) were compared. No significant differences in the counts of microorganisms between the studied groups were observed (yeasts, p= 0.55; staphylococci, p=0.24; enterobacteria/Pseudomonas spp., p=0.26). No differences in the counts of microorganisms were observed related to the clinical parameters tested. Higher prevalence of Candida albicans and Staphylococcus epidermidis... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo não disponível

Introdução: Complicações infecciosas estão associadas à elevada morbidade e mortalidade em pacientes neutropênicos. A incidência de neutropenia febril (NF) em pacientes com neoplasias hematológicas é de cerca de 80%, com taxas de até 90% naqueles submetidos a transplante de células-tronco hematopoéticas (TCTH). Apesar da melhora da performance da terapia antimicrobiana, a mortalidade associada à NF permanece elevada, ocorrendo em cerca de 90% dos pacientes com infecção fúngica invasiva. As opções de tratamento são restritas e implicam em aumento substancial dos custos da hospitalização. A implementação de medidas preventivas que incluam o controle de qualidade do ar é considerada estratégia fundamental para redução das taxas de infecção, mortalidade e custos de tratamento de pacientes de alto risco. Objetivos: Avaliar o impacto da implantação de uma unidade de ambiente protegido (UAP) no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) em relação a: (1) incidência de neutropenia febril; (2) mortalidade intra-hospitalar por qualquer causa em até 30 dias após o início da neutropenia; (3) incidência de infecções fúngicas invasivas; (4) incidência e padrão de sensibilidade dos microorganismos isolados em episódios de neutropenia febril; (5) tempo de internação hospitalar; (6) consumo de antibacterianos e antifúngicos; (7) custos diretos com antifúngicos e (8) mortalidade intra-hospitalar por qualquer causa. Delineamento: Estudo quasi-experimental. Métodos: Pacientes neutropênicos internados na UAP, unidade especializada dotada de sistemas de alta tecnologia para manutenção da qualidade do ar, foram prospectivamente acompanhados através da análise de prontuário até alta ou óbito. Demais medidas de controle de infecção, como o monitoramento da higienização das mãos e restrição de acesso aos visitantes, foram simultaneamente adotadas na UAP. Pacientes neutropênicos admitidos no HCPA antes da intervenção foram incluídos no grupo de controles históricos. A incidência de NF foi definida pela ocorrência de febre após 72h da admissão. Os patógenos identificados nos episódios de NF e perfil de resistência aos antimicrobianos foram avaliados, bem como os antimicrobianos utilizados durante a internação. As infecções fúngicas invasivas (IFI) foram definidas segundo critérios propostos pelo consenso do European Organization for Research and Treatment of Cancer. Custos diretos com antifúngicos e mortalidade em 30 dias após o início da neutropenia foram registrados. Resultados: Foram incluídas 190 e 181 admissões hospitalares nos grupos intervenção e controle, respectivamente. Observou-se redução da incidência de NF no grupo de pacientes admitidos na UAP (74.7% vs. 86.7%; P=0.003), benefício que se manteve mesmo após o ajuste para potenciais confundidores (HR=0.74; IC 95% 0.58-0.93; P=0.009). Houve uma tendência à redução das taxas de infecções polimicrobianas e ao aumento de infecções por gram negativos em pacientes admitidos na UAP, principalmente em decorrência da elevada taxa de infecções por Escherichia coli. A mortalidade em 30 dias foi significativamente reduzida no grupo intervenção (6.3% vs. 16.6%; P=0.002), inclusive após o ajuste para a categoria de risco dos pacientes (HR=0.45; 95% CI 0.23-0.87; P=0.02). Observou-se redução da incidência de IFI (7.4% vs. 18.2%; P=0.002). Embora o custo final com antifúngicos tenha sido reduzido após a intervenção (US$ 78347.37 vs. US$ 154176.60), o custo mediano por internação não diferiu entre os grupos. Considerando todas as admissões em que houve diagnóstico de IFI, o custo mediano dos antifúngicos foi significativamente superior aos custos registrados em admissões sem IFI. Conclusão: O estudo demonstrou o impacto positivo da adoção concomitante de estratégias preventivas, incluindo a implantação de uma unidade com sistemas de controle de qualidade do ar, na incidência de NF, IFI e mortalidade em pacientes neutropênicos atendidos em um hospital geral do sul do Brasil. Sugere que estratégias que envolvem alta tecnologia podem resultar em economia de recursos a longo prazo quando implementadas em um país em desenvolvimento.