Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Staphylococcus aureus has been considered a major public health problem worldwide due mainly to the ability to develop resistance to antibiotics. The prevalence of methicillin resistant strains of S. aureus (MRSA) in both hospital and community settings has been increasing, with cases of infections and deaths reported in healthy children and adults. Bacteriocins have been identified as promising alternatives for the control of this pathogen. However, besides the therapeutic use of these peptides still not approved, some studies indicate the possibility of selection of resistant strains. Therefore, prior to the therapeutic use of bacteriocins, studies must be carried out to understand the effect that bacteriocin may have on the selection of resistant strains to avoid the current problem with lineages resistant to traditional antibiotics. In view of the above, the objective of this study was to verify the antimicrobial activity of nisin against strains of MRSA and MSSA isolated from the oropharynx of health professionals and verify the selection of strains resistant to bacteriocin. For the genotypic characterization of the MRSA and MSSA strains, the nucA, LuckPV, mecA and mecC genes were tested. The MSSA lines were positive for amplification of the nucA gene only, confirming the identification of genus and species of these strains. For MRSA strains, the only gene that was not detected was mecC, confirming the methicillin resistance phenotype and that these strains are of human origin and of community environments. The results obtained by the agar diffusion test demonstrated that 80% of the MSSA strains (n = 30) were inhibited by nisin and only one MRSA line (n = 6) showed no sensitivity to bacteriocin. The MIC of MSSA strains ranged from 97.7 to 1250 IU / mL and from MRSA strains of 937.50 to 5000 IU / mL. The DBM for MSSA strains varied from 97.7 IU / mL to values greater than 50,000 IU / mL, and for MRSA, this variation was between 5000 IU / mL at values greater than 10,000 IU / mL depending on the lineage. For most lineages DBM was higher than MIC, showing that the effect of bacteriocin depends on bacteriocin concentration: low concentrations exert bacteriostatic effect and high concentrations bactericidal effect. The addition of increasing concentrations of the bacteriocin to the BHI medium generally resulted in the increase in the lag phase and decrease in the specific growth rate and maximal DO reached by the MSSA and MRSA cultures. MSSA and MRSA strains were transferred for approximately 30 generations in the presence of bacteriocin and a decrease in sensitivity was observed with a consequent increase in nisin MIC for all strains tested. The bacteriocin resistance phenotype has been shown to be a stable trait for these strains and may be associated with a genetic factor. It has also been observed that the use of nisin may trigger cross-resistance to some antibiotics. The results obtained demonstrated that nisin is efficient in controlling the growth of MSSA and MRSA. However, the fact that these lines demonstrate resistance to bacteriocin after transfer in the presence of the same indicates the need to develop strategies to avoid in the future the current problem of resistance to antibiotics. The best way to use bacteriocins therapeutically is to suggest that it is in combination with traditional antibiotics. / Staphylococcus aureus têm sido considerado um dos maiores problemas de saúde pública a nível mundial devido, principalmente, a habilidade de desenvolver resistência a antibióticos. A prevalência de linhagens de S. aureus resistentes a meticilina (MRSA) tanto em ambiente hospitalar quanto em ambientes comunitários têm aumentado, sendo descritos casos de infecções e relatos de mortes em crianças e adultos saudáveis. Bacteriocinas tem sido apontadas como alternativas promissoras para o controle deste patógeno. Entretanto, além do uso terapêutico destes peptídeos ainda não ser aprovado, alguns estudos indicam a possibilidade de seleção de linhagens resistentes. Portanto, antes do uso terapêutico de bacteriocinas, estudos precisam ser realizados para o entendimento do efeito que a bacteriocina possa ter na seleção de linhagens resistentes para evitar o problema da atualidade com linhagens resistentes aos antibióticos tradicionais. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi verificar a atividade antimicrobiana da nisina contra cepas de MRSA e MSSA isoladas da orofaringe de profissionais da área de saúde e verificar a seleção de linhagens resistentes à bacteriocina. Para a caracterização genotípica das linhagens MRSA e MSSA, foram testados os genes nucA, LuckPV, mecA e mecC. As linhagens MSSA foram positivas para amplificação apenas do gene nucA, confirmando a identificação de gênero e espécie destas linhagens. Para as linhagens MRSA, o único gene que não foi detectado foi o meC, confirmando o fenótipo de resistência a meticilina e que estas linhagens são de origem humana e de ambientes comunitários. Os resultados obtidos pelo teste de difusão em ágar demonstraram que 80% das linhagens MSSA (n=30) foram inibidas pela nisina e apenas uma linhagem MRSA (n=6) não apresentou sensibilidade à bacteriocina. A CIM das linhagens de MSSA variou de 97,7 a 1250UI/mL e das linhagens MRSA de 937,50 a 5000 UI/mL. A DBM para as linhagens de MSSA variou de 97,7 UI/mL a valores superiores a 50000 UI/mL, e para MRSA esta variação ficou entre 5000 UI/mL a valores maiores que 10000 UI/mL dependendo da linhagem. Para a maioria das linhagens a DBM foi maior que a CIM, mostrando que o efeito da bacteriocina depende da concentração da mesma: baixas concentrações exercem efeito bacteriostático e altas concentrações efeito bactericida. A adição de concentrações crescentes da bacteriocina ao meio BHI resultaram, de maneira geral, no aumento da fase lag e diminuição da velocidade específica de crescimento e DO máxima atingida pelas culturas MSSA e MRSA. Linhagens de MSSA e MRSA foram transferidas por aproximadamente 30 gerações na presença da bacteriocina e foi observada diminuição na sensibilidade com consequente aumento da CIM da nisina para todas as linhagens testadas. O fenótipo de resistência à bacteriocina demonstrou ser uma característica estável para estas linhagens, podendo estar associado a um fator genético. Foi observado também que a utilização da nisina pode desencadear resistência cruzada a alguns antibióticos. Os resultados obtidos demonstraram que a nisina é eficiente em controlar o crescimento de MSSA e MRSA. Entretanto, o fato destas linhagens demonstrarem resistência a bacteriocina após transferência na presença da mesma indica a necessidade de desenvolver estratégias para evitar no futuro o problema atual de resistência a antibióticos. A melhor maneira de usar bacteriocinas terapeuticamente sugere-se que seja em combinação com antibióticos tradicionais. / São Cristóvão, SE

A Parede lateral da faringe parece ser a estrutura central envolvida no colapso da faringe nos pacientes com síndrome da apnéia obstrutiva do sono (SAOS). Os pacientes com roncos e apnéia têm uma faringe mais colapsável associada a um espessamento da musculatura da parede lateral da faringe, em grande parte formada pelo músculo constritor superior da faringe. O endomísio da matriz extracelular do músculo esquelético tem uma íntima relação com as células musculares, influenciando suas propriedades mecânicas e biológicas, podendo modificar seu comportamento e função. As fibras colágenas e elásticas formam o arcabouço do tecido conectivo, enquanto os proteoglicanos e as glicoproteínas estruturais (fibronectina) têm importante papel na propriedade de adesão e hidratação dos tecidos e as metaloproteínas são responsáveis pela degradação dos componentes da matriz extracelular. Os fatores determinantes da complacência excessiva da musculatura da parede lateral são desconhecidos. É possível que a MEC tenha um papel relevante neste aspecto. O objetivo deste estudo é descrever e comparar a densidade dos componentes da matriz extracelular do endomísio da musculatura da parede lateral da faringe em controles, roncadores e apnéicos. Neste estudo prospectivo foram avaliados 61 pacientes maiores de 18 anos e não obesos do Departamento de Otorrinolaringologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de medicina da Universidade de São Paulo, com indicação de cirurgias faríngeas no período de 2005 e 2006. Os pacientes foram divididos em três grupos: controles (14 pacientes sem roncos ou SAOS), 18 roncadores primários e 29 pacientes com SAOS. Os espécimes foram obtidos da musculatura da parede lateral da faringe (constritor superior da faringe) durante cirurgias faríngeas. Por meio de análise histoquímica e imunohistoquímica foi determinada a área proprocional do colágeno total, fibras elásticas, colágeno tipos I e III, metaloproteínas 1 e 2, versican e fibronectina, no endomísio destas amostras e comparada entre os grupos. Os resultados foram ainda correlacionados com dados antropométricos. O colágeno tipo I foi o componente mais abundante da matriz extracelular no constritor superior da faringe. Observamos uma correlação positiva entre o colágeno I e a idade (r=0,42, p=0,01) e inversa com o colágeno III (r=-0,28, p=0.027). O índice de massa corpórea também mostrou uma correlação inversa com o colágeno III (r=-0,311, p=0,017). Não houve diferenças estatisticamente significantes para os componentes da MEC entre os grupos. Em resume, a análise histológica da musculatura da parede lateral da faringe de um largo grupo de pacientes com distúrbios do sono, revelaram que a composição da matriz extracelular é relacionada à idade e o peso, e não pode ser envolvida nos mecanismos que levam a colapsibilidade e espessamento da parede lateral da faringe. / The lateral muscular pharyngeal wall appears to be the predominant structure involved in the collapse of the pharynx in obstructive sleep apnea (OSA). OSA patients and snorers have a narrower pharynx which is more susceptible to collapse and is associated with muscle thickening in the lateral pharyngeal wall, largely formed by superior pharyngeal constrictor. The endomysial extracellular matrix of skeletal muscle has an intimate relationship with the muscle cells and has an important influence on its mechanical and biological properties and can modify their behavior and function. Collagen and elastic fibers form the scaffolding of the connective tissue and proteoglycans and structural glycoproteins (fibronectin) have important roles in hydration, resiliency and adhesive properties of the tissues and the matrix metalloproteinases are involved in extracellular matrix components degradation. The determining factors in the compliance of lateral muscular pharyngeal wall are also unknown. It is possible that the ECM has a relevant role in this aspect. Our objective was to determine and compare the density of the components of the extracellular matrix in the deep, structural lateral pharyngeal muscular walls in snorers, OSA and control patients and correlate with age and weight. In this prospective study we evaluated 61 patients older than 18 and nonobese with indications for pharyngeal surgery at the department of Otolaryngology of the Hospital das Clínicas of the São Paulo University, between 2005 and 2006. The patients were divided in three groups: controls (14 patients), 18 primary snorers and 29 OSA patients. We obtained specimens from the lateral pharyngeal muscular wall (superior constrictor muscle) during pharyngeal surgeries. Using histochemical and immunohistochemical analyses, we determined the fractional area of total collagen, elastic fibers, collagen I and III, matrix metalloproteinase 1 and 2, versican and fibronectin in the endomysium of these samples, and compared among groups. Results were further correlated with anthropometric data. Collagen type I was the most abundant component of the ECM within the pharyngeal muscle. There was a positive correlation between collagen I and age (r=0.419, p=0.01) and an inverse one with type III collagen (r=-0.284, p=0.027). Body mass index inversely correlated with collagen type III (r=-0,311, p=0,017). There were no statistically significant differences for any of the components of the ECM among groups. In summary, histological analysis of the lateral muscular pharyngeal wall of a large group of patients with sleep disturbances revealed that its extracellular matrix composition is age and weight related but may not be involved in the mechanisms leading to the collapsibility of the lateral wall of the pharynx.

Um dos tipos de câncer mais frequentes no mundo é o carcinoma epidermoide de cabeça e pescoço. A dificuldade de resposta eficiente aos tratamentos está relacionada à complexidade molecular deste tumor. MicroRNAs regulam uma parte significativa dos genes humanos, dentre os quais genes responsáveis por controlar proliferação e apoptose, caracterizando seu papel na progressão tumoral e resistência a quimioterápicos. O entendimento sobre como moléculas com ação antineoplásica atuam sobre a regulação de microRNAs pode contribuir para a compreensão de resultados terapêuticos. Neste estudo avaliamos o efeito dos triterpenos quinonametídeos maitenina e 22-β-hidroximaitenina sobre a viabilidade celular e sobre a regulação de microRNAs associados com proliferação e apoptose. O efeito destas moléculas foi avaliado frente a linhagens tumorais e em queratinócitos orais livres de tumor. Os resultados indicam que os dois triterpenos avaliados reduzem eficazmente a viabilidade das células cancerígenas e a regulação de microRNAs faz parte dos mecanismos envolvidos neste efeito. / Head and neck squamous cell carcinoma is one of the most frequent cancer types in the world. The difficulty of effective response to treatment is related to the molecular complexity of this tumor. MicroRNAs, small non-coding RNA molecules, regulate a significant proportion of human genes, among which genes involved in cell growth, apoptosis and response to chemotherapy. The comprehension on how anticancer molecules interfere with microRNA expression should contribute to the understanding of treatment outcome. This study evaluated the effect of two quinonamethide triterpenoids, maytenin and 22-β-hidroxymaytenin, on cell viability and on the regulation of microRNAs associated with proliferation and apoptosis. The effect of these molecules was evaluated in tumor cells and oral keratinocytes. The results show that the two triterpenoids effectively reduced cell viability of cancer-derived cell lines and that microRNA regulation is one of the mechanisms involved in this effect.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo desse trabalho foi determinar a prevalência, extensão e severidade da periodontite crônica em pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe e verificar se essa forma de doença periodontal é indicadora de risco para essas neoplasias. Trinta e cinco pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe, atendidos no Instituto Nacional de Câncer (INCA) e 40 pacientes e/ou acompanhantes do ambulatório do Instituto Nacional de Traumatologia e Ortopedia (INTO), não portadores de neoplasias de boca e/ou orofaringe, foram avaliados por meio de anamnese, exame periodontal e índice de dentes cariados perdidos e obturados (CPOD). A população estudada foi formada predominante por indivíduos do sexo masculino, da raça branca, casados, que cursaram até o ensino fundamental e possuíam renda familiar de até 6 salários mínimos. Não houve diferença estatística significante para esses parâmetros entre os grupos. No grupo caso havia significativamente mais pacientes fumantes e que ingeriam mais bebidas alcoólicas. Pacientes do grupo controle praticavam mais exercícios físicos e tinham o índice de massa corporal (IMC) significantemente mais elevado. O consumo de frutas, legumes e vegetais foi maior para o grupo controle (p>0,05), enquanto o consumo de carne vermelha foi maior no grupo caso (p>0,05). O histórico de casos de câncer na família era baixo em ambos os grupos. O grupo caso apresentou mais sítios com placa e sangramento a sondagem e menos sítios com sangramento gengival. Somente o índice de placa teve diferença estatisticamente significante. O número de dentes presentes era significantemente menor no grupo caso embora não houvesse diferença estatística significante entre os grupos para o índice CPOD. As médias de profundidade de bolsa a sondagem (PBS) e nível de inserção clínica (NIC) foram significantemente maiores para o grupo caso. A prevalência da periodontite crônica generalizada foi de 100% nos pacientes com câncer de boca e ou orofaringe. Oitenta e nove por cento dos pacientes do grupo caso apresentaram periodontite crônica severa. A extensão ou a severidade da periodontite crônica permaneceram indicadores de risco para o câncer de boca e/ou orofaringe independentes mesmo após os ajustes para fatores de confusão, álcool e fumo. / The aim of this study was to determine the prevalence, extension and severity of chronic periodontitis in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer, as well as to verify whether this form of periodontal disease is a risk indicator for these neoplasms. Thirty five patients with oral cavity and/or oropharynx cancer from the National Cancer Institute (INCA) Hospital as well as 40 outpatients and/or their companions from the National Institute of Traumatology (INTO) were evaluated by means of anamnesis, periodontal examination and decayed, extracted and filled teeth index (DMFT). The predominant individual of the population in study was male, white, married, had completed grammar school and had a family income of up to 6 times the Brazilian minimum wage. There were no significant statistical differences for these parameters between the case and control groups. The case group had significantly more patients who smoked regularly and their individuals ingested more alcoholic beverages. Patients of the control group practiced more physical activities and had a significantly higher body mass index (BMI). The consumption of fruits and vegetables was higher in the control group (p>0,05) while red meat intake was higher in the case group (p>0,05). The family history for cancer was low in both groups. The case group presented more sites with plaque and bleeding on probing but less sites with gingival bleeding. Only the difference in the plaque index was statistically significant. The number of teeth present in the mouth was significantly lower in the case group although there was no statistically significant difference in the DMTF index between the groups. The mean probing pocket depth and clinical attachment level were significantly higher for the case group. The prevalence of chronic generalized periodontitis was 100% in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer. Eighty nine percent of the patients in the case group presented chronic severe periodontitis. The extension and severity of chronic periodontitis remained as a risk indicator for oral cavity and/or oropharynx cancer even after the adjustments for confusion factors, i.e. smoke and alcohol.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-08-25T20:42:57Z No. of bitstreams: 1 EdilmarDeMouraSantos_TESE.pdf: 2404882 bytes, checksum: 5eff55db010b690ecc915ee6c24050f0 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-08-26T19:45:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 EdilmarDeMouraSantos_TESE.pdf: 2404882 bytes, checksum: 5eff55db010b690ecc915ee6c24050f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T19:45:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdilmarDeMouraSantos_TESE.pdf: 2404882 bytes, checksum: 5eff55db010b690ecc915ee6c24050f0 (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Falhas nos genes respons?veis por reparos no DNA podem influenciar no surgimento de c?ncer ou afetar a resposta aos tratamentos. Estudos t?m demonstrado que a varia??o na capacidade de reparo do DNA pode ser resultado de polimorfismos funcionais nestes genes, e alguns destes experimentos sugerem que a presen?a de polimorfismos de nucleot?deos simples (SNPs), em genes de reparo, est? relacionada ao desenvolvimento e resposta ao tratamento de v?rios c?nceres, incluindo o Carcinoma Epidermoide Oral (CEO) e o Carcinoma Epidermoide de Orofaringe (CEOR). Nesta pesquisa avaliou-se a frequ?ncia de tr?s SNPs em dois genes de reparo do DNA RAD51 172G>T (c.-61 G>T, rs1801321), RAD51 135G>C (c.-98 G>C, rs1801320) e XRCC3 T241M (c. 722 C>T, rs861539) em indiv?duos saud?veis (n=130) e indiv?duos com CEO e CEOR (n=126) e investigou-se poss?veis rela??es de tais achados com os desfechos cl?nicos: resposta tumoral ao tratamento com radioterapia e quimioterapia, recidiva, e sobrevida global. Constatou-se frequ?ncia al?lica e genot?pica em equil?brio. A presen?a dos SNPs analisados n?o revelou ser um fator de risco para o desenvolvimento de CEO ou CEOR; contudo, quando associado ao h?bito de fumar ou beber, aumentou o risco de desenvolver o c?ncer de tr?s a cento e cinquenta vezes (p<000,1). A resposta tumoral ao tratamento de radioterapia e quimioterapia foi semelhante nos pacientes com ou sem SNPs. Nenhum polimorfismo demonstrou signific?ncia estat?stica em rela??o ? sobrevida livre de recidiva ou sobrevida global. Os gen?tipos AA e AC do SNP rs861539 no gene XRCC3, os gen?tipos CC e CG do SNP rs1801320 e GG e GT do SNP 1801321 no gene RAD51, aumentam o risco do desenvolvimento de carcinoma epidermoide oral e de orofaringe, quando associados ao h?bito de beber ou fumar. Os polimorfismos estudados nos genes XRCC3 e RAD51 n?o est?o associados ? resposta ? radioterapia, sobrevida livre de recidiva ou sobrevida global. / Faults in the genes responsible for repairs to the DNA can influence the onset of cancer or affect the response to treatment. This research evaluated the frequency of three single nucleotide polymorphisms (SNPs) in two repair genes DNA RAD51 172g> T (rs1801321), RAD51 135G> C (rs1801320) and XRCC3 T241M (rs861539) in individuals without cancer (n = 130) and patients with oral squamous cell carcinoma (OSC) and carcinoma oropharyngeal squamous (ORSC) (n = 126) and investigated possible relationships of these findings with clinical and pathological data and clinical outcomes: tumor response to radiotherapy and chemotherapy, disease-free survival, and overall survival. It was found that the allele and genotype frequencies were in equilibrium Hard-Weinberg equilibrium. The presence of at least one polymorphic allele in XRCC3 (rs861539) gene is associated with histological grade (WHO) higher (p = 0.007). We observed a higher recurrence rate trend (p = 0.08) and more advanced stage (p = 0.08) in the group that had at least one polymorphic allele of RAD51 gene (rs1801321). The presence of the analyzed SNPs not proved to be a risk factor for the development of CEO or CEOR; however, when combined with smoking or drinking, increased the risk of developing cancer from three to one hundred and fifty times. The tumor response to radiotherapy and chemotherapy was similar in patients with and without SNPs. No polymorphism showed statistical significance in relation to recurrence-free survival or overall survival. We conclude that the presence of at least one polymorphic allele of the SNPs rs861539 in XRCC3 gene, rs1801320 and rs1801321 in the RAD51 gene increase the risk of development of OSC and ORSC, when associated with the habit of drinking or smoking. Polymorphisms studied in XRCC3 and RAD51 genes are not associated with response to radiation therapy, relapse-free survival or overall survival.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo desse trabalho foi determinar a prevalência, extensão e severidade da periodontite crônica em pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe e verificar se essa forma de doença periodontal é indicadora de risco para essas neoplasias. Trinta e cinco pacientes com câncer de boca e/ou orofaringe, atendidos no Instituto Nacional de Câncer (INCA) e 40 pacientes e/ou acompanhantes do ambulatório do Instituto Nacional de Traumatologia e Ortopedia (INTO), não portadores de neoplasias de boca e/ou orofaringe, foram avaliados por meio de anamnese, exame periodontal e índice de dentes cariados perdidos e obturados (CPOD). A população estudada foi formada predominante por indivíduos do sexo masculino, da raça branca, casados, que cursaram até o ensino fundamental e possuíam renda familiar de até 6 salários mínimos. Não houve diferença estatística significante para esses parâmetros entre os grupos. No grupo caso havia significativamente mais pacientes fumantes e que ingeriam mais bebidas alcoólicas. Pacientes do grupo controle praticavam mais exercícios físicos e tinham o índice de massa corporal (IMC) significantemente mais elevado. O consumo de frutas, legumes e vegetais foi maior para o grupo controle (p>0,05), enquanto o consumo de carne vermelha foi maior no grupo caso (p>0,05). O histórico de casos de câncer na família era baixo em ambos os grupos. O grupo caso apresentou mais sítios com placa e sangramento a sondagem e menos sítios com sangramento gengival. Somente o índice de placa teve diferença estatisticamente significante. O número de dentes presentes era significantemente menor no grupo caso embora não houvesse diferença estatística significante entre os grupos para o índice CPOD. As médias de profundidade de bolsa a sondagem (PBS) e nível de inserção clínica (NIC) foram significantemente maiores para o grupo caso. A prevalência da periodontite crônica generalizada foi de 100% nos pacientes com câncer de boca e ou orofaringe. Oitenta e nove por cento dos pacientes do grupo caso apresentaram periodontite crônica severa. A extensão ou a severidade da periodontite crônica permaneceram indicadores de risco para o câncer de boca e/ou orofaringe independentes mesmo após os ajustes para fatores de confusão, álcool e fumo. / The aim of this study was to determine the prevalence, extension and severity of chronic periodontitis in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer, as well as to verify whether this form of periodontal disease is a risk indicator for these neoplasms. Thirty five patients with oral cavity and/or oropharynx cancer from the National Cancer Institute (INCA) Hospital as well as 40 outpatients and/or their companions from the National Institute of Traumatology (INTO) were evaluated by means of anamnesis, periodontal examination and decayed, extracted and filled teeth index (DMFT). The predominant individual of the population in study was male, white, married, had completed grammar school and had a family income of up to 6 times the Brazilian minimum wage. There were no significant statistical differences for these parameters between the case and control groups. The case group had significantly more patients who smoked regularly and their individuals ingested more alcoholic beverages. Patients of the control group practiced more physical activities and had a significantly higher body mass index (BMI). The consumption of fruits and vegetables was higher in the control group (p>0,05) while red meat intake was higher in the case group (p>0,05). The family history for cancer was low in both groups. The case group presented more sites with plaque and bleeding on probing but less sites with gingival bleeding. Only the difference in the plaque index was statistically significant. The number of teeth present in the mouth was significantly lower in the case group although there was no statistically significant difference in the DMTF index between the groups. The mean probing pocket depth and clinical attachment level were significantly higher for the case group. The prevalence of chronic generalized periodontitis was 100% in patients with oral cavity and/or oropharynx cancer. Eighty nine percent of the patients in the case group presented chronic severe periodontitis. The extension and severity of chronic periodontitis remained as a risk indicator for oral cavity and/or oropharynx cancer even after the adjustments for confusion factors, i.e. smoke and alcohol.

A Parede lateral da faringe parece ser a estrutura central envolvida no colapso da faringe nos pacientes com síndrome da apnéia obstrutiva do sono (SAOS). Os pacientes com roncos e apnéia têm uma faringe mais colapsável associada a um espessamento da musculatura da parede lateral da faringe, em grande parte formada pelo músculo constritor superior da faringe. O endomísio da matriz extracelular do músculo esquelético tem uma íntima relação com as células musculares, influenciando suas propriedades mecânicas e biológicas, podendo modificar seu comportamento e função. As fibras colágenas e elásticas formam o arcabouço do tecido conectivo, enquanto os proteoglicanos e as glicoproteínas estruturais (fibronectina) têm importante papel na propriedade de adesão e hidratação dos tecidos e as metaloproteínas são responsáveis pela degradação dos componentes da matriz extracelular. Os fatores determinantes da complacência excessiva da musculatura da parede lateral são desconhecidos. É possível que a MEC tenha um papel relevante neste aspecto. O objetivo deste estudo é descrever e comparar a densidade dos componentes da matriz extracelular do endomísio da musculatura da parede lateral da faringe em controles, roncadores e apnéicos. Neste estudo prospectivo foram avaliados 61 pacientes maiores de 18 anos e não obesos do Departamento de Otorrinolaringologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de medicina da Universidade de São Paulo, com indicação de cirurgias faríngeas no período de 2005 e 2006. Os pacientes foram divididos em três grupos: controles (14 pacientes sem roncos ou SAOS), 18 roncadores primários e 29 pacientes com SAOS. Os espécimes foram obtidos da musculatura da parede lateral da faringe (constritor superior da faringe) durante cirurgias faríngeas. Por meio de análise histoquímica e imunohistoquímica foi determinada a área proprocional do colágeno total, fibras elásticas, colágeno tipos I e III, metaloproteínas 1 e 2, versican e fibronectina, no endomísio destas amostras e comparada entre os grupos. Os resultados foram ainda correlacionados com dados antropométricos. O colágeno tipo I foi o componente mais abundante da matriz extracelular no constritor superior da faringe. Observamos uma correlação positiva entre o colágeno I e a idade (r=0,42, p=0,01) e inversa com o colágeno III (r=-0,28, p=0.027). O índice de massa corpórea também mostrou uma correlação inversa com o colágeno III (r=-0,311, p=0,017). Não houve diferenças estatisticamente significantes para os componentes da MEC entre os grupos. Em resume, a análise histológica da musculatura da parede lateral da faringe de um largo grupo de pacientes com distúrbios do sono, revelaram que a composição da matriz extracelular é relacionada à idade e o peso, e não pode ser envolvida nos mecanismos que levam a colapsibilidade e espessamento da parede lateral da faringe. / The lateral muscular pharyngeal wall appears to be the predominant structure involved in the collapse of the pharynx in obstructive sleep apnea (OSA). OSA patients and snorers have a narrower pharynx which is more susceptible to collapse and is associated with muscle thickening in the lateral pharyngeal wall, largely formed by superior pharyngeal constrictor. The endomysial extracellular matrix of skeletal muscle has an intimate relationship with the muscle cells and has an important influence on its mechanical and biological properties and can modify their behavior and function. Collagen and elastic fibers form the scaffolding of the connective tissue and proteoglycans and structural glycoproteins (fibronectin) have important roles in hydration, resiliency and adhesive properties of the tissues and the matrix metalloproteinases are involved in extracellular matrix components degradation. The determining factors in the compliance of lateral muscular pharyngeal wall are also unknown. It is possible that the ECM has a relevant role in this aspect. Our objective was to determine and compare the density of the components of the extracellular matrix in the deep, structural lateral pharyngeal muscular walls in snorers, OSA and control patients and correlate with age and weight. In this prospective study we evaluated 61 patients older than 18 and nonobese with indications for pharyngeal surgery at the department of Otolaryngology of the Hospital das Clínicas of the São Paulo University, between 2005 and 2006. The patients were divided in three groups: controls (14 patients), 18 primary snorers and 29 OSA patients. We obtained specimens from the lateral pharyngeal muscular wall (superior constrictor muscle) during pharyngeal surgeries. Using histochemical and immunohistochemical analyses, we determined the fractional area of total collagen, elastic fibers, collagen I and III, matrix metalloproteinase 1 and 2, versican and fibronectin in the endomysium of these samples, and compared among groups. Results were further correlated with anthropometric data. Collagen type I was the most abundant component of the ECM within the pharyngeal muscle. There was a positive correlation between collagen I and age (r=0.419, p=0.01) and an inverse one with type III collagen (r=-0.284, p=0.027). Body mass index inversely correlated with collagen type III (r=-0,311, p=0,017). There were no statistically significant differences for any of the components of the ECM among groups. In summary, histological analysis of the lateral muscular pharyngeal wall of a large group of patients with sleep disturbances revealed that its extracellular matrix composition is age and weight related but may not be involved in the mechanisms leading to the collapsibility of the lateral wall of the pharynx.

Orientador: Jorge Esquiche León / Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) de cabeça e pescoço (CECCP) é o quinto tipo de câncer mais comum e a sexta causa de morte por câncer. Recentes estudos enfatizam o CEC oral (CECO) como uma entidade distinta do CEC de orofaringe (CECorof), com este último apresentando melhor prognóstico e estreitamente associado com infecção pelo papilomavírus humano (HPV). A etiologia do CECCP é multifatorial; porém, o CECO está relacionado com abuso do tabaco e álcool, enquanto o CECorof está frequentemente associado com infecção pelo HPV. As células dendríticas (CDs) são importantes células as quais regulam repostas imunes, incluindo aquelas vinculadas à tumorigênese, estabelecendo conexão entre o sistema imune inato e adaptativo. Estão divididas em dois grupos: CDs mieloides (CDmi) e CDs plasmocitóides (CDp), incluindo CDs imaturas (CDim) e CDs maduras (CDm). O objetivo do nosso estudo foi analisar comparativamente, através da técnica de imunoistoquímica (IQ) e hibridização in situ (HIS), a infiltração de CDmi e CDp, incluindo subgrupos de CDim e CDm, no CECO (n=109) e CECorof (n=126), bem como analisar a oncogênese viral (HPV amplo espectro, alto risco (ARHPV) e baixo risco (BRHPV) oncogênico e vírus Epstein-Barr [VEB]) por HIS. O CECOrof (25%) comparado com o CECO (11%) mostrou associação significativa com o HPV. No CECorof e no CECO, 19 e 7 mostram positividade para ARHPV (somente), 6 e 3 BRHPV (somente) e 3 e 2 ARHPV/BRHPV (co-infecção), respectivamente. Os tumores HPV-positivos compara... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

O selênio é um micronutriente essencial que apresenta ação antioxidante por meio de selenoproteínas, como a glutationa peroxidase 1 (GPX1). O polimorfismo PRO198LEU no gene em questão tem sido relacionado ao aumento do risco para alguns tipos de câncer, como o de mama e pulmão. Atualmente, o câncer de cabeça e pescoço é um importante problema de saúde pública no mundo e, inclusive, no Brasil. O objetivo do presente estudo foi avaliar eventual associação entre o polimorfismo GPX1 PRO198LEU e risco de câncer epidermóide da cavidade oral e orofaringe, bem como possível interação com utilização de tabaco e ingestão de álcool. O genótipo para o polimorfismo GPX1 PRO198LEU foi determinado pela técnica de PCR-RFLP (Reação em cadeia da polimerase - Polimorfismo no comprimento do fragmento de restrição) e seqüenciamento do DNA em 175 pacientes com câncer epidermóide da cavidade oral e orofaringe (grupo caso) integrantes de parte da casuística do Projeto Genoma Clínico do Câncer de Cabeça e Pescoço, e em 203 indivíduos sem a doença, internados nas enfermarias do Hospital Heliópolis (grupo controle). A freqüência do alelo de referência e do polimórfico foi de 0,72 e 0,28, respectivamente, em ambos os grupos. A freqüência dos genótipos encontrou-se em equilíbrio de Hardy-Weinberg nos grupos caso e controle. Não houve diferença estatisticamente significante (p>0,05) quanto à distribuição do genótipo para o polimorfismo GPX1PRO198LEU entre casos (50% PRO/PRO; 43% PRO/LEU e 7% LEU/LEU) e controles (51% PRO/PRO; 43% PRO/LEU e 6% LEU/LEU), não se verificando associação entre esse polimorfismo e risco para o câncer epidermóide da cavidade oral e orofaringe (Odds ratio = 1,02; 95% IC = 0,68-1,53; p = 0,51; homozigotos polimórficos e heterozigotos agrupados comparados a homozigotos de referência). Além disso, a utilização de tabaco ou ingestão de álcool não modificou a ausência de associação entre o polimorfismo GPX1 PRO198LEU e o câncer em questão (Utilização de tabaco maior que 20 pack years: Odds ratio = 0,94; 95% IC = 0,53-1,70; p = 0,49; Ingestão de álcool maior que 80g de etanol/dia: Odds ratio = 0,80; IC = 0,46-1,39; p = 0,26). Conclui-se que esse polimorfismo não aumenta o risco para o câncer epidermóide da cavidade oral e orofaringe. / Selenium is an essential micronutrient that presents antioxidant activity through selenoproteins such as glutathione peroxidase 1 (GPX1). PRO198LEU polymorphism in this gene has been associated with increased risk for some cancer types such as breast and lung cancers. Currently head and neck cancer is a major public health problem in the world and in Brazil. The aim of this study was to evaluate a possible association between GPX1 PRO198LEU polymorphism and risk of oral cavity and oropharyngeal squamous cell cancer. GPX1 PRO198LEU polymorphism genotype was determined by PCR-RFLP method (Polymerase chain reaction-Restriction fragment length polymorphism) and DNA sequencing in 175 patients with oral cavity and oropharyngeal squamous cell cancer (case group) from the Head and Neck Cancer Clinical Genome Project, and in 203 cancer-free individuals, hospitalized in the wards of Heliopolis Hospital (control group). The frequency of reference and polymorphic allele was 0.72 and 0.28, respectively, in both groups. The genotype distribution was in Hardy-Weinberg equilibrium in case and control groups. There was no statistically significant difference (p> 0.05) on the distribution of genotype for the GPX1 PRO198LEU polymorphism between cases (50% PRO/PRO, 43% PRO/LEU and 7% LEU/ LEU) and controls (51% PRO/PRO, 43% PRO/LEU and 6% LEU/LEU) and there was no association between this polymorphism and risk for oral cavity and oropharyngeal squamous cell cancer (odds ratio = 1.02, 95% CI = 0.68 to 1,53; p = 0.51; polymorphic homozygotes and heterozygotes combined compared with reference homozygotes). Furthermore, the use of tobacco or alcohol intake did not change the lack of association between the GPX1 PRO198LEU polymorphism and cancer risk (use of tobacco greater than 20 pack years: odds ratio = 0.94, 95% CI = 0.53 to 1,70, p = 0.49; alcohol intake greater than 80g etanol/day: Odds ratio = 0.80, CI = 0.46 to 1.39, p = 0.26). We conclude that this polymorphism does not increase the risk of oral cavity and oropharyngeal squamous cell cancer.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GUILHERME PETITO.pdf: 1076353 bytes, checksum: 35ed726e32ffa4f2f32eee9bafc7c8a7 (MD5) Previous issue date: 2014-06-25 / The human papillomavirus (HPV) has been associated with the risk and prognosis of oral cavity and oropharynx carcinomas. This study aimed to estimate the prevalence and genotype distribution of HPV 16 and 18 in oral cavity and oropharyngeal carcinomas, as well as their associations with clinical and histopathological factors of tumors. It is a retrospective descriptive study, with gathered data analysis of 82 medical records and paraffin blocks containing specimens of oral cavity carcinomas and oropharynx diagnosed at the Hospital Araújo Jorge (HAJ), in Goiânia-GO, between 2005 and 2007. The chain reaction polymerase (PCR) was used for HPV detection and genotyping. Among the 82 evaluated patients, 78% were male. The average age of patients was 58 years. Risk factors, like smoking (78 %) and ethylism (70.8 %), were registered in the studied group. HPV DNA was detected in 21 cases (25.6%; 95% CI: 16.9 to 36.6) of which 33.3% were HPV 16 and 14.3% HPV 18. The presence of metastases lymph node and deaths were less common in tumors with HPV, suggesting a better prognosis for these cases, however, the differences between the groups were not statistically significant. The data described in the present study, regarding the presence of the HPV genome, and the high risk oncogenic genotypes, HPV16 and HPV18, in oral cavity and oropharynx carcinomas highlights the importance of vaccination against HPV in such tumours. / O Papilomavírus humano (HPV), tem sido associado com o risco e o prognóstico dos carcinomas da cavidade oral e orofaringe. Este estudo teve como objetivo estimar a prevalência e a distribuição genotípica do HPV 16 e 18 em carcinomas de cavidade oral e orofaringe, bem como suas associações aos fatores clínicos e histopatológicos dos tumores. É um estudo retrospectivo descritivo, com dados coletados análise de 82 prontuários e de blocos de parafina contendo espécimes de carcinomas de cavidade oral e orofaringe diagnosticados no Hospital Araújo Jorge (HAJ), em Goiânia-GO, entre 2005 e 2007. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi usada para detecção e genotipagem do HPV. Dentre os 82 pacientes avaliados, 78% eram do sexo masculino. A média de idade dos pacientes foi de 58 anos. Fatores de risco, como tabagismo (78%) e etilismo (70,8%) foram registrados no grupo estudado. O DNA do HPV foi detectado em 21 casos (25,6%; IC 95%: 16,9 36,6) dos quais 33,3% eram o HPV 16 e 14,3% o HPV 18. A presença de metástases linfonodais e os óbitos foram menos frequentes nos tumores que apresentaram HPV, sugerindo um melhor prognóstico para esses casos, porém, as diferenças entre os grupos não foram estatisticamente significativas. Os dados descritos no presente estudo, com relação à presença do genoma do HPV, incluindo os genótipos de alto risco, HPV16 e HPV18, destacam a importância de vacinação contra o HPV no controle dos carcinomas de cavidade oral e orofaringe.