Orientador: Augusto Ducati Luchessi / Resumo: O fator de início de tradução de eucariotos 5A (eIF5A) é uma proteína altamente conservada em archaeas e eucariotos. Caracteriza-se por ser a única proteína conhecida a apresentar o resíduo de aminoácido hipusina, produzido a partir de uma modificação pós-traducional denominada hipusinação, a qual é essencial para sua atividade. Atualmente eIF5A é correlacionada com o início, elongação e término da tradução, além disso, sua função têm sido associada com diferentes processos celulares, fisiológicos e patológicos. Em humanos, é predito que eIF5A seja gerada a partir de cinco variantes transcricionais (A, B, C, D e X5). As variantes B, C, D e X5 codificam a proteína canônica isoforma B de 17 kDa, a qual vêm sendo estudada nas últimas décadas. Entretanto, é previsto que a variante A codifique uma isoforma alternativa (isoforma A) de 20 kDa, que tem uma sequência adicional de 30 aminoácidos na extremidade N-terminal. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo caracterizar eventos moleculares inéditos envolvendo a isoforma A de eIF5A1 humana. Neste estudo, mostramos que a isoforma A é produzida em células HeLa, a qual foi mostrada ser passível de hipusinação. Análises de bioinformática mostraram que a isoforma A possui alta probabilidade de direcionamento para mitocôndria. Assim, técnicas de fracionamento subcelular mostraram que a isoforma A co-purifica com a mitocôndria, diferentemente da isoforma B. Análises de silenciamento gênico em células HeLa, utilizando moléculas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The eukaryotic translation initiation factor 5A (eIF5A) is a highly conserved protein in archaeas and eukaryotes. It is characterized by being the only protein known to present the amino acid residue hypusine, produced from a post-translational modification called hypusination, which is essential for its activity. Currently eIF5A is correlated with the beginning, elongation and termination of translation, and its function has been associated with different cellular, physiological and pathological processes. In humans, eIF5A is predicted to be generated from five transcriptional variants (A, B, C, D and X5). Variants B, C, D and X5 encode the 17 kDa canonical protein B, which has been studied in recent decades. However, variant A is expected to encode an alternative 20 kDa isoform (A isoform), which has an additional 30 amino acid sequence in the N-terminal region. In this context, the present study aimed to characterize unpublished molecular events involving the human eIF5A1 isoform A. In this study, we showed that in HeLa cells, isoform A was detected, which was shown to be subject to hypusination. Bioinformatics analysis showed that isoform A has a high probability of targeting mitochondria. Thus, subcellular fractionation techniques have shown that isoform A co-purifies with mitochondria, unlike isoform B. Analysis of gene silencing in HeLa cells using eIF5A1 isoform A-specific siRNA molecules showed that protein depletion is capable of cause apoptosis in cells, as well as... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Introducción: El perfil del anciano institucionalizado en una residencia geriátrica se caracteriza por ser mayoritariamente mujer, con una edad superior a 80 años, con pluripatología crónica y deterioro cognitivo, asociado muchas veces a demencia, lo que implica dependencia física y mental. El envejecimiento es el principal factor de riesgo para el declive cognitivo y la demencia; el estrés oxidativo desempeña un importante papel en el envejecimiento y, en consecuencia, en la pérdida de la función cerebral debido a la elevada susceptibilidad de este órgano a las especies reactivas de oxígeno. La desnutrición es un problema muy frecuente en este tipo de personas, y también se ha asociado con el deterioro cognitivo, pues los nutrientes participan en la fisiología cerebral así como en la defensa antioxidante. Los cuidados que se proporcionan a los ancianos son de vital importancia para mantener un buen estado nutricional y, en consecuencia, su estado cognitivo, por lo que se consideró de interés valorar el perfil nutricional y funcional de un colectivo de ancianos institucionalizados en una residencia geriátrica y su relación con el estado cognitivo, con el objetivo de conocer los factores más importantes a tener en cuenta en el momento de establecer un programa de cuidados e intervenciones, para intentar atenuar el deterioro cognitivo existente en este tipo de instituciones a través de la mejora del estado nutricional de los residentes. Material y métodos: Se ha llevado a cabo un estudio transversal sobre una muestra de 36 ancianos (14 hombres y 22 mujeres), y un estudio longitudinal sobre los 22 residentes supervivientes al cabo de un año. Se ha valorado el estado nutricional global con el Mini Nutritional Assessment, la función cognitiva con el Mini Examen Cognoscitivo de Lobo, el estado emocional con la escala de Depresión Geriátrica de Yesavage, la capacidad funcional física con el Nursing Home Physical Performance Test. Se ha determinado el IMC, y se han medido diversos pliegues cutáneos y perímetros corporales, y se ha valorado la composición corporal por medio de bioimpedancia. Se han cuantificado diversos parámetros hematológicos y bioquímicos, así como el perfil de ácidos grasos y de estrés oxidativo. Se ha evaluado la oferta y la ingesta energética y nutricional a través del registro alimentario por doble pesada y el recordatorio de 24 horas. Resultados: Los residentes presentaron riesgo de desnutrición, deterioro cognitivo, depresión leve, reducción de la fuerza muscular y, en un 67%, de la capacidad funcional física máxima y, a la vez, bajo peso; mostraron concentraciones de hematíes, hemoglobina, hematocrito, vitaminas B6 y B12, folato, y de diversos compuestos con actividad antioxidante (albúmina, coenzima Q10, β-caroteno, retinol, γ- tocoferol, vitamina C y selenio) próximas al límite inferior y deficitarias en tioles totales. Su ingesta alimentaria fue significativamente inferior a la oferta, hipocalórica, excesiva en ácidos grasos saturados y deficitaria en monoinsaturados y poliinsaturados totales, incluidos los ácidos grasos omega-3, fibra, riboflavina, niacina, piridoxina, ácido fólico, vitaminas D y E, calcio, hierro, magnesio, cobre, cinc, selenio, yodo y potasio. Los ancianos cognitivamente normales mostraron mejor estado nutricional global, mayor fuerza muscular y capacidad funcional física, menor riesgo cardiovascular, mayor concentración sérica de vitamina B12 y mayor defensa antioxidante (ácido úrico, albúmina, γ-tocoferol y luteína-zeaxantina), y realizaron una ingesta superior en ácidos grasos monoinsaturados, fibra, ácido fólico, vitaminas C y E, cobre y yodo. Al cabo de un año, los ancianos mostraron un declive de la función cognitiva, del estado nutricional global, de la capacidad funcional física, de la fuerza muscular, del peso corporal a expensas de grasa corporal y masa muscular, y de la ingesta de selenio. Conclusiones: Los valores del perfil sociosanitario, antropométrico y de composición corporal, hematológico y bioquímico, y dietético que presentaron inicialmente los residentes, y la evolución de los mismos al cabo de un año, han podido contribuir al declive de la función cognitiva así como del estado nutricional y de la capacidad funcional física, y se ha podido establecer una retroalimentación negativa entre los tres ámbitos. El control de los efectos secundarios de los fármacos y del IMC, el adecuado tratamiento y seguimiento de la patología respiratoria, de la hipertensión arterial, la diabetes mellitus y/o la anemia, el establecimiento de un programa de actividad física, la monitorización de indicadores hematológicos (hematíes, hemoglobina, hematocrito) y bioquímicos (glucosa, albúmina, ácido úrico, ferritina, perfil lipídico, PCR), la óptima gestión de los menús, el control de la ingesta alimentaria, y el seguimiento del estado nutricional, podrían ayudar a disminuir el riesgo de deterioro cognitivo, siendo necesario para ello un equipo asistencial interdisciplinar. / Introduction: The profile of institutionalized elderly in a nursing home is characterized by mostly women, older than 80 years, with chronic comorbidity and cognitive impairment, often associated with dementia, which involves physical and mental dependence. Aging is the major risk factor for cognitive decline and dementia; oxidative stress plays an important role in aging and, therefore, the loss of brain function due to the high susceptibility of this organ to the reactive species oxygen. Malnutrition is a common problem in these kinds of people, and has also been associated with cognitive impairment, as the nutrients are involved in brain physiology as well as antioxidant defense. The care provided to seniors are of vital importance to maintaining good nutritional status and, consequently, their cognitive status, so it was considered interesting to assess the nutritional and functional profile of a group of institutionalized elderly in a nursing home and its relationship to cognitive state, in order to know the most important factors to consider when establishing a plan of care and interventions, to try to reduce cognitive impairment exists in these institutions through improved nutritional status of residents. Material and methods: We conducted a cross-sectional study on a sample of 36 elderly (14 men and 22 women), and a longitudinal study of the 22 surviving residents after one year. We valued the overall nutritional status with the Mini Nutritional Assessment, cognitive function with the Mini Mental State Examination of Lobo, emotional state with the Geriatric Depression Scale of Yesavage, physical functional capacity with the Nursing Home Physical Performance Test. BMI was determined, and measured various skin folds and body circumferences, and body composition was assessed by bioimpedance. We quantified various hematological and biochemical parameters and fatty acid profile and oxidative stress profile. Supply and intake of energy and nutrients was measured by using the double weighed food method and the 24 hours dietary record. Results: Residents displayed risk of malnutrition, cognitive impairment, mild depression, reduction of the muscle strength and, in a 67%, of the maximum physical functional capacity, and also under weight; showed concentrations of red blood cells, hemoglobin, hematocrit, vitamins B6 and B12, folate, and several compounds with antioxidant activity (albumin, coenzyme Q10, β-carotene, retinol, γ-tocopherol, vitamin C and selenium) near the lower limit and deficit of total thiols. Their food intake was significantly less than the supply, low-calorie, excessive in saturated fatty acids and deficit in monounsaturated and total polyunsaturated, including omega-3 fatty acids, fiber, riboflavin, niacin, pyridoxine, folic acid, vitamins D and E, calcium, iron, magnesium, copper, zinc, selenium, iodine and potassium. Cognitively normal elderly showed better overall nutritional status, greater muscle strength and physical functional capacity, lower cardiovascular risk, greater serum vitamin B12 and antioxidant defense (uric acid, albumin, γ-tocopherol and lutein-zeaxanthin), and performed a higher intake in monounsaturated fatty acids, fiber, folic acid, vitamins C and E, copper and iodine. After a year, the elderly showed a decline in cognitive function, overall nutritional status, physical functional capacity, muscular strength, body weight, at the expense of body fat and muscle mass, and selenium intake. Conclusions: The values of social-health, anthropometric and body composition, hematological and biochemical, and dietary profile that residents initially presented, and their evolution after one year, may have contributed to the decline of cognitive function as well as nutritional status and physical functional capacity, and has been able to establish a negative feedback between the three areas. Control of drug indirect effects and BMI, proper treatment and monitoring of respiratory disease, high blood pressure, diabetes mellitus and / or anemia, the establishment of a physical activity program, the monitoring indicators hematological (erythrocytes, hemoglobin, hematocrit) and biochemical (glucose, albumin, uric acid, ferritin, lipid profile, CRP), the optimal management of menus, the control of food intake, and monitoring of nutritional status, could help reduce the risk of cognitive impairment, but it’s necessary to establish an interdisciplinary care team.

El estrés oxidativo y la inflamación juegan un papel clave en la arterosclerosis. La formación de placa aterosclerótica y su progresión se caracteriza por una disfunción de las células endoteliales, la acumulación de agregados de las lipoproteínas en la íntima, y a la migración de monocitos a través del endotelio y su diferenciación en macrófagos. La peroxidación de los lípidos está relacionada con la progresión de la enfermedad de la estría grasa a la placa aterosclerótica avanzada. Exploramos por primera vez, si la relación inversa entre los mecanismos de defensa contra el estrés oxidativo del endotelio y la consiguiente respuesta inflamatoria se puede detectar en la sangre. Hemos encontrado que los resultados obtenidos de MCP-1 plasmático y las concentraciones séricas de PON1 y de PON3 prueban nuestra hipótesis y pueden constituir un nuevo indicador del estado de la enfermedad que pueden actuar como biomarcadores. / Inflamation and oxidative stress play a very important role in atherosclerosis. Atherosclerotic plaque formation and progression is characterized by disfunction of endothelial cells, the accumulation of aggregated lipoproteins in the intima, and monocyte migration across the endothelium and their differentiation into macrophages. The peroxidation of lipids is associated with the progression of the disease of the fatty streak to the advanced atherosclerotic plaque. We explore for the first time, if the inverse relationship between the defense mechanisms against oxidative stress and subsequent endothelial inflammatory response can be detected in blood. We found that that results of MCP-1 and serum PON1 and PON3 confirm our hypothesis and may provide a new indicator of the disease that can act as biomakers.

La incidencia del síndrome metabólico es cada vez más alta en los países desarrollados. El estrés oxidativo tiene un papel potencial en la patología del síndrome metabólico. Puede mediar en diversos factores de riesgo como: aterosclerosis, hipertensión, diabetes tipo 2, obesidad y resistencia a la insulina. Los ácidos grasos poliinsaturados n-3 (AGPI n3) reducen el riesgo de enfermedad cardiovascular en parte por la mejora del perfil lipídico, de la hipertensión, del estrés oxidativo y de la inflamación. Se realizó un estudio nutricional en animales Wistar (controles) y SHROB (modelo de síndrome metabólico). Durante tres meses se administraron cinco tratamientos distintos: tres con diferentes proporciones de AGPI n3, EPA:DHA (1:1, 2:1 y 1:2), y dos controles a base de soja y lino. Se controlaron diferentes parámetros como: peso corporal, glucosa, presión arterial, insulina e índice HOMA. Se analizaron el perfil lipídico, biomarcadores de riesgo cardiovascular, estrés oxidativo y se realizó un análisis de daño histológico. Se pretende demostrar cuales son los efectos beneficiosos de los AGPI n3 de origen marino, esclareciendo a su vez cual de las tres proporciones EPA:DHA es la más adecuada en la mejora de los parámetros estudiados. / The incidence of metabolic syndrome increases in developed countries. Oxidative stress has a potential role in the pathology of metabolic syndrome. It mediates various risk factors such as atherosclerosis, hypertension, type 2 diabetes, obesity and insulin resistance. Polyunsaturated fatty acids n-3 (PUFA n3) reduces the risk of cardiovascular disease in part by improving the lipid profile, hypertension, oxidative stress and inflammation. We conducted a nutritional study in Wistar rats (controls) and SHROB rats (model of metabolic syndrome). For three months were administered five different treatments: three with different proportions of PUFA n3, EPA: DHA (1:1, 2:1 and 1:2), and two controls soy and flax. Different parameters were studied as body weight, glucose, blood pressure, insulin and HOMA index. We analyzed the lipid profile, cardiovascular risk biomarkers, oxidative stress and an analysis of histological damage. We want demonstrate beneficial effects of PUFA n3, clarifying turn which of the three ratios EPA: DHA is the most suitable in improving the studied parameters.

Objetivos generales: (I) Estudiar el efecto individual y combinado de un insecticida, un funguicida y un herbicida de uso rutinario en nuestro medio, sobre el metabolismo lipídico y el sistema de defensa antioxidante en SNC y otros tejidos de ratas Wistar machos adultos bajo exposición crónica y de nivel comparable a la sufrida por humanos que habitan áreas pobladas no rurales. (II) Determinar simultáneamente el efecto pro-apoptótico y eventuales alteraciones de la arquitectura tisular, que la exposición individual o conjunta de los contaminantes pudiera ejercer sobre el tejido neuronal dopaminérgico (sustancia nigra) comparándolos con otros tejidos (corteza cerebral, hígado, riñón). (III) Investigar el posible efecto protectivo de sustancias antioxidantes naturales sobre el metabolismo lipídico, el sistema de defensa antioxidante, y los mecanismos de muerte celular desencadenados por los pesticidas ensayados. (IV) Estudiar la presencia de estos pesticidas en el ambiente y analizar la introducción de biomarcadores de estrés oxidativo y del sistema de defensa antioxidante como indicadores de exposición. Objetivos específicos: (1) Establecer el modelo de intoxicación simultánea a partir de datos bibliográficos y experiencia propia en nuestro laboratorio. (2) Medir parámetros de estrés, daño oxidativo, y sistema de defensa antioxidante en áreas específicas del SNC: corteza, sustancia nigra. Comparar los datos obtenidos con similares determinaciones en tejido hepático, renal y sangre periférica de los animales expuestos. (3) Analizar los cambios que se pudieran producir en los componentes lipídicos de SNC, hígado y sangre periférica. (4) Determinar la actividad de marcadores bioquímicos de apoptosis en los tejidos antes mencionados y eventuales cambios en la arquitectura tisular. (5) Administrar a los animales sustancias de origen natural durante el período de exposición, a fin de detectar un posible efecto protectivo que suprima o atenúe el estrés oxidativo-nitrativo que los contaminantes sean capaces de inducir. (6) Detectar la presencia de los pesticidas empleados (zineb, dimetoato, glifosato) en plasma y tejidos de animales tratados y en productos vegetales comercializados localmente. (7) Evaluar la versatilidad y utilidad clínica de algunos de los parámetros de estrés oxidativo-nitrativo y sistema de defensa antioxidante como biomarcadores para la evaluación de la exposición humana a plaguicidas con el fin de ser usados en forma diagnóstica o pronóstica en la práctica médica.

Orientador: Débora Cristina Damasceno / Resumo: Diabetes mellitus gestacional (DMG) aumenta o risco de complicações obstétricas, morbidade e mortalidade infantil. Os recém-nascidos podem apresentar macrossomia e, a longo prazo, alterações metabólicas. Além da insulina e de drogas hipoglicemiantes, os a terapia nutricional controlada também tem sido recomendada como tratamento para os portadores de diabete. Entretanto, o efeito da suplementação com vitaminas e minerais durante a gestação diabética não está bem descrito. Sendo assim, pretendemos analisar os efeitos da administração da vitamina D e de cálcio (Ca2+) de forma associada (mistura) e isolada durante a prenhez de ratas com diabete. Para isso, ratas recém-nascidas receberam a droga beta-citotóxica (streptozotocin) para indução do diabete no dia do nascimento. Na vida adulta, essas ratas foram acasaladas e tratadas com vitamina D e/ou Ca2+ duas vezes por dia desde a confirmação da prenhez (dia 0) até o 20° dia de prenhez. No 17° dia, as ratas prenhes foram submetidas ao teste oral de tolerância à glicose (TOTG) e, ao final da prenhez, foram anestesiadas e mortas para coleta de amostras de sangue e de fígado para avaliação do estado redox. Além disso, foi realizada a exposição dos cornos uterinos visando analisar o desempenho reprodutivo materno e o desenvolvimento embriofetal. As ratas diabéticas tratadas com a mistura apresentaram redução dos níveis glicêmicos nos tempos do TOTG, diminuição da concentração de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e aumen... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background: Although vitamin D effects on glucose metabolism and metabolic control during pregnancy have been shown to be positive, the influence of vitamin D on diabetic pregnancies remains uninvestigated. Since vitamin D stimulates pancreatic β-cell calcium (Ca 2+ ) channels to promote insulin secretion, we tested whether it can improve the maternal diabetic metabolism and thus contribute to adequate fetal growth in rats. Methods and results: Sprague-Dawley rats injected with Streptozotocin for diabetes induction at birth, were later mated and treated with either vitamin D alone, or Ca 2+ alone or their combination during pregnancy. At term pregnancy, maternal blood samples were collected for metabolic profiling, oxidative stress measurement and fetal analysis. In the diabetic animals treated with vitamin D and Ca 2+ combined or with vitamin D alone glycemia was decreased during glucose tolerance test (GTT) and the area under the curve (AUC) was reduced. TBARS concentrations in these animals were also decreased. On the other hand, no changes were observed in those receiving Ca 2+ alone in these parameters. However, the treatment with Ca 2+ alone or combined with vitamin D led to renal calcification. Both vitamin D and Ca 2+ combined and vitamin D alone reduced embryo-fetal loss rates and increased the rate of fetuses classified as adequate for age of pregnancy. Conclusion: Our results suggest that, due to its action on insulin secretion, vitamin D improves glycemic control ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Thais Borges César / Banca: Jair Rodrigues Garcia Júnior / Banca: Nancy Preising Aptekmann / Banca: Ellen Cristini Freitas / Banca: Enrico Fuini Puggina / Resumo: O futebol pode ser caracterizado por um esporte aeróbio com movimentos de alta intensidade durante o jogo o que contribui para o elevado gasto energético dos atletas. Sabe-se que a nutrição adequada é fundamental para o sucesso neste esporte e contribui favoravelmente na capacidade de treinamento, oferecendo melhor desempenho aos atletas. O objetivo desta pesquisa foi avaliar os indicadores do estado nutricional, marcadores do estresse oxidativo e parâmetros fisiológicos em jogadoras de futebol pré e pós o período competitivo. A partir da obtenção dos resultados foram elaborados dois artigos científicos, sendo que no primeiro foi dada ênfase à avaliação da ingestão dietética e da qualidade total da dieta no período pré-competitivo, e o foco do segundo artigo foi estudar a influência da nutrição nos períodos pré e pós competitivo e sua relação com as variáveis bioquímicas e marcadores do estresse oxidativo. Foram também avaliados os parâmetros fisiológicos e variáveis antropométricas nos dois períodos. Os resultados mostraram desequilíbrios importantes na alimentação das atletas, especialmente pelo déficit energético no período pré-competitivo e ingestão elevada de proteínas, gordura saturada e sódio, enquanto, por outro lado, deficiência na ingestão de cálcio. Foi observado redução na produção de hidroperóxidos no período pós-competitivo, provavelmente pela adaptação ao exercício, embora parâmetros fisiológicos analisados não se modificaram ao longo do período. Em conclusão, houve melhoria da condição física das atletas, com redução da massa gorda e aumento da massa muscular, e ficou evidente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Soccer can be characterized as an aerobic sport with high intensity movements during the game that contributes to a higher energy expenditure of athletes. It is well known that proper nutrition is essential to success in this sport and contributes favorably in training capacity, providing better performance to athletes. The objective of this research was to evaluate the nutritional status indicators, oxidative stress markers and physiological parameters in female soccer players, before and after the competitive period. Results were presented in two papers; the focus of the first article was on the assessment of dietary intake and overall diet quality in pre-competitive period, and the second article was focused on the influence of nutrition in the pre and post competitive period and its relationship with biochemical variables and oxidative stress markers. It was also evaluated the physiological parameters and anthropometric variables for both periods. The results showed significant imbalances in the athletes' diet, especially by the energy deficit in pre-competitive period and high intake of protein, saturated fat and sodium, while, on the other hand, low intake of calcium. It was lowered the production of hidroperoxydes on post-competitive period, probably because of the physiologic adaptation to exercise, although those physiologic parameters analyzed remained unchanged throughout the period. In conclusion, there was improvement of the physical condition of athletes after the competition period, with reduced fat mass... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Débora Cristina Damasceno / Resumo: Introdução: Durante o período neonatal de ratos, o pâncreas endócrino sofre remodelamento, sendo considerado uma janela crítica de desenvolvimento, que determina a fisiologia do pâncreas no organismo e possíveis doenças na vida adulta, dentre elas o diabete. Na gravidez, o pâncreas sofre adaptações. Por isso, é relevante entender os mecanismos envolvidos nas adaptações das ilhotas pancreáticas frente à associação gravidez e diabete, a qual pode estar relacionada ao quadro de estresse oxidativo e alterações no desempenho reprodutivo materno. Objetivo: Analisar a morfologia das ilhotas pancreáticas e o quadro de estresse oxidativo durante a janela crítica de desenvolvimento pós-natal e na prenhez de ratas com diabete. Materiais e método: Para a indução do diabete, os recém-nascidos fêmeas receberam droga beta (β)-citotóxica (streptozotocin – STZ, 100 mg/kg de peso corporal via subcutânea) no primeiro dia de vida. As fêmeas controle receberam apenas o tampão de citrato. O critério de inclusão para o grupo diabético foi glicemia ≥ 400 mg/dL no dia 5 de vida (D5) e, para o grupo controle, glicemia < 120mg/dL em D5. Os animais de ambos os grupos foram mortos em momentos diferentes: D5, D10, D15, D30 e no dia 18 de prenhez. Foi realizado a coleta de sangue (dosagem sérica de insulina e glucagon) e do pâncreas (análise morfológica). Os anticorpos utilizados para análise imunoistoquímica foram: anti-Pdx-1, anti-Ki-67, anti-insulina, anti-glucagon, anti-somatostatina, anti-superóxido d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Marina Politi Okoshi / Coorientador: Paula Felippe Martinez / Banca: Silméia Garcia Zanati / Banca: Francis Lopes Pacagnelli / Resumo: Introdução: A insuficiência cardíaca caracteriza-se por redução da capacidade física com ocorrência precoce de fadiga e dispneia. Alterações da musculatura esquelética têm sido responsabilizadas, pelo menos parcialmente, pelos sintomas. Embora aumento do estresse oxidativo participe da fisiopatologia das alterações musculares, as fontes de geração de espécies reativas de oxigênio e suas vias de sinalização intracelular ainda não foram completamente elucidadas. Estudos sugerem que as proteínas quinases ativadas por mitógeno (MAPK) e proteínas da via do fator nuclear-κB (NF-κB) estejam envolvidas na resposta muscular ao estresse oxidativo. Atualmente, as diretrizes recomendam a prática regular de exercícios físicos para pacientes com insuficiência cardíaca estável. Os efeitos do exercício aeróbio sobre a capacidade física e a musculatura esquelética durante sobrecarga pressórica persistente do ventrículo esquerdo não foram esclarecidos. Neste estudo avaliamos a influência do exercício aeróbio sobre o estresse oxidativo, as MAPK e o NF-κB no músculo sóleo de ratos com insuficiência cardíaca induzida por estenose aórtica. Métodos: Vinte semanas após indução de estenose aórtica, ratos Wistar foram alocados nos grupos controle sedentário (C-Sed, n=22), controle exercitado (C-Ex, n=19), estenose aórtica sedentário (EA-Sed, n=18) e estenose aórtica exercitado (EA-Ex, n=18). Exercício físico foi realizado em esteira, 5 vezes por semana, durante 8 semanas. A capacidade física foi avaliada por teste de esforço máximo em esteira antes e após o período de exercício. Ecocardiograma transtorácico foi realizado antes e após o treinamento. A atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase, glutationa peroxidase e catalase e a concentração do hidroperóxido de lipídeo foram avaliados por espectrofotometria. A atividade da NADPH oxidase foi analisada pela redução de lucigenina e a... / Abstract: Introduction: Heart failure is characterized by reduced physical capacity with early occurrence of fatigue and dyspnea. Skeletal muscle abnormalities have been considered responsible, at least partially, for the symptoms. Although increased oxidative stress participates in the pathophysiology of muscle abnormalities, sources of reactive oxygen species generation and their intracellular signaling pathways are not completely elucidated. Studies suggest that mitogen-activated protein kinases (MAPK) and the nuclear factor-kappaB (NF-kB) pathway are involved in muscle response to oxidative stress. Currently, guidelines recommend regular physical exercise for patients with stable heart failure. The effects of aerobic exercise on physical capacity and skeletal muscle changes during left ventricular persistent pressure overload have not been established. In this study, we evaluated the influence of aerobic exercise on oxidative stress, the MAPK and the NF-kB pathway in the soleus muscle of rats with aortic stenosis-induced heart failure. Methods: Twenty weeks after aortic stenosis induction, rats were assigned into four groups: sedentary control (C-Sed, n=22), exercised control (C-Ex, n=19), sedentary aortic stenosis (AS-Sed, n=18) and exercised aortic stenosis (AS-Ex, n=18). Exercise was performed on a treadmill, 5 times a week for 8 weeks. Physical capacity was assessed by maximal exercise test on a treadmill before and after the exercise period. Transthoracic echocardiography was performed before and after training. Activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase, glutathione peroxidase, and catalase, and lipid hydroperoxide concentration were evaluated by spectrophotometry. NADPH oxidase activity was analyzed by reduction of lucigenin and gene expression of its subunits NOX 2, NOX 4, p22phox, and p47phox by qPCR. Total generation of reactive oxygen species was measured by HPLC and protein expression by Western blot. Statistical ... / Mestre

Orientador: Paula Schimidt Gaiolla / Coorientador: Elenize Jmas Pereira / Banca: Lisiane de Almeida Martins / Banca: Silméia Jamas Cazan / Resumo: A doxorrubicina (DOX) é um medicamento amplamente utilizado como agente quimioterápico, tendo eficácia no tratamento de inúmeros tipos de cânceres. Entretanto, o uso desse medicamento pode proporcionar efeitos indesejáveis, como a cardiotoxidade. Diferentes mecanismos têm sido propostos para a cardiotoxicidade induzida pela doxorrubicina, como o estresse oxidativo, inflamação e alterações da matriz extracelular, levando ao processo de remodelação cardíaca. Chá verde (Camellia sinensis), uma das bebidas mais populares em todo o mundo, tem demonstrado uma relação positiva entre o seu consumo habitual e a proteção contra doenças cardiovasculares e contra alguns tipos de neoplasias. Isso se deve as propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, antiapoptóticas encontradas nas catequinas, presentes no chá verde. Portanto, é possível que o mesmo atenue os afeitos cardiotóxicos da doxorrubicina, retardando o processo de remodelação cardíaca. O objetivo do presente estudo foi avaliar se o extrato de chá verde atenua a remodelação cardíaca induzida pela doxorrubicina, por meio da avaliação de variáveis bioquímicas, celulares, intersticiais e variáveis morfofuncionais cardíacas. Para isso, foram utilizados ratos Wistar machos com peso de 300 á 350 gramas. Esses animais foram divididos em 4 grupos: CP (controle) que receberam ração padrão e administração intraperitoneal de solução salina, CCV (controle + chá verde) que receberam ração adicionada de extrato de chá verde e administração intraperitoneal de solução salina, DX (doxorrubicina) que receberam ração padrão e administração intraperitoneal de doxorrubicina e DX-CV (doxorrubicina + chá verde) que receberam ração adicionada de extrato de chá verde e administração intraperitoneal de doxorrubicina. A ração foi ofertada por 35 dias e no 33◦ dia foi feita a infusão de doxorrubicina ou de solução salina foram na mesma proporção... / Abstract: Doxorubicin (DOX) is a widely used drug as a chemotherapeutic agent having efficacy in the treatment of numerous cancers. However, use of this drug may provide undesirable effects such as cardiotoxicity. Various mechanisms have been proposed for doxorubicin cardiotoxicity, such as oxidative stress, inflammation and alterations in the extracellular matrix, leading to cardiac remodeling. Green tea (Camellia sinensis), the most popular drinks in the world, has demonstrated a positive relationship between regular consumption and protection against cardiovascular disease and some types of cancer. This is the antioxidant, anti-inflammatory, antiapoptotic found in catechins present in green tea. It is therefore possible that it mitigates the cardiotoxic fond of doxorubicin, slowing the process of cardiac remodeling. The aim of this study was to evaluate whether the green tea extract attenuates cardiac remodeling induced by doxorubicin, through the evaluation of biochemical variables, cell phones, and interstitial cardiac morphofunctional variables. For this, was used male Wistar rats weighing 250 to 300 grams. These animals were divided into 4 groups: CP (control) received standard chow and intraperitoneal administration of saline, CCV (control + green tea) receiving feed added green tea extract and intraperitoneal administration of saline, DX (Doxorubicin) who received standard chow and intraperitoneal administration of doxorubicin and DX-CV (doxorubicin + green tea) fed diets with added green tea extract and intraperitoneal administration of doxorubicin. The feed was supplied for 35 days and on day 33◦ doxorubicin or infusion of saline solution were carried out in the same ratio (20 mg / kg single dose) and the animals were euthanized 48 hours after drug injection. The rats were subjected to the echocardiography before and 48 hours after injection of doxorubicin. Was conducted evaluation of oxidative stress by spectrophotometry ... / Mestre