Orientador: Jean Leandro dos Santos / Banca: Cíntia Duarte de Freitas Milagre / Banca: Fernando Rogério Pavan / Resumo: O Mycobacterium tuberculosis (MTB), principal agente da tuberculose (TB), é responsável pela morte anual de 1,5 milhões de pessoas no mundo. Atualmente, uma das grandes preocupações mundiais é o aumento do número de casos de TB multirresistente a fármacos (MDR-TB) e TB extensivamente resistente a fármacos (XDR-TB) devido à elevada taxa de mortalidade, dificuldade de tratamento e os altos custos envolvidos nessas condições. A bedaquilina foi o último fármaco aprovado pela agência norte americana - Food and Drug Administration (FDA) - para tratamento da MDR-TB e XDR-TB, após um intervalo de mais de 50 anos sem novos fármacos. Todos estes fatos justificam a descoberta de fármacos mais seguros e efetivos contra formas sensíveis e resistentes do MTB. Entre os fármacos utilizados no tratamento da tuberculose, a isoniazida (INH) é um dos principais representantes da primeira linha de tratamento. Além disso, compostos contendo a função N-óxido como os furoxanos e as quinoxalinas têm sido descritos como protótipos para descoberta de novos fármacos anti-TB. O objetivo deste trabalho foi o planejamento, síntese e avaliação antituberculose de novas moléculas híbridas entre furoxanos e INH (série 1) e quinoxalinas e INH (série 2). Nesse contexto, sintetizamos e caracterizamos onze moléculas híbridas finais da série 1 e sete derivados quinoxalínicos da série 2 e avaliamos a atividade anti-TB contra cepas de MTB H37Rv e isolados clínicos multirresistentes. As moléculas apresentaram valores de concentração inibitória mínima (CIM) entre 1,03 - 101 µM. Quatro moléculas da série 1 se mostraram promissoras e foram avaliadas quanto a sua citotoxicidade (IC50) em células MRC- 5 e J774A.1. As moléculas da série 2 não foram consideradas promissoras devido aos baixos valores de índice de seletividade (IS). O índice de... / Abstract: Mycobacterium tuberculosis, the main agent of tuberculosis, is responsible for the annual death of 1.5 million people worldwide. Currently, one of the major global concerns is the increasing number of cases of multi drug-resistant tuberculosis (MDR-TB) and extensively drug resistant tuberculosis (XDR-TB) due to the high mortality rate, difficulty of treatment and the high costs involved. Bedaquiline was the last drug approved by the north american agency - Food and Drug Administration - to treat MDR-TB and XDR-TB after a gap of more 50 years without new drugs. All these facts justify the need for discovery of new drugs for treatment. Isoniazid is one of the main first line drugs used to treat tuberculosis. Compounds containing the N-oxide functions, such as furoxans and quinoxalines, have been described as prototypes for discovery novel anti-TB drugs. The aim of this work was the planning, synthesis and biological evaluation of novel hybrid molecules between furoxan and INH (Series 1) and quinoxaline and INH (Series 2). In this context, we have synthesized and characterized eleven hybrid molecules of series 1 and seven molecules of series 2. Moreover, we have evaluated the anti-TB activity of these molecules against MTB H37Rv strains and multidrug-resistant clinical isolates. The compounds exhibited minimum inhibitory concentration ranging from 1,03 to 101 µM. Four molecules from series 1 have shown promising antitubercular activity and were evaluated regarding their cytotoxicity against J774A.1 and MRC-5 cells. The molecules of series 2 were not considered promising due to their low selectivity index values. The selectivity index of these four molecules ranged from 3.78 to 52.74 in MRC-5 cells and 1,25 - 34,78 in J774A.1 cells. Furthermore, the molecules have shown activity against several multidrug-resistant strains, with MIC values ... / Mestre

Orientador: Sandra Cordellini / Banca: Carlos Alan Cândido Dias Junior / Banca: Andréia Fresneda Gaspar / Resumo: Introdução: embora a literatura relate alterações cardiovasculares induzidas pela exposição ao etanol e ao chumbo (Pb) isoladamente na vida adulta, há escassez de estudos focando os efeitos cardiovasculares pós-natal da exposição ao etanol e/ou Pb in utero. Objetivos: investigar possíveis alterações nas respostas cardiovasculares de ratos recém-desmamados expostos pré-natalmente ao etanol e ao Pb, isoladamente e em associação. Ainda, avançar na compreensão dos mecanismos envolvidos nestas alterações. Materiais e Métodos: foram utilizados ratos machos Wistar recém-desmamados (25-28 dias de idade) provenientes de mães dos grupos: controle - recebeu água de beber ad libitum; Pb - recebeu chumbo 500 ppm ad libitum durante a prenhez; EtOH - recebeu solução de etanol a 10% na água de beber ad libitum durante a prenhez; e Pb/EtOH - ambos protocolos em associação. Esses animais foram mortos e anéis de aorta torácica foram coletados e mantidos em banho isolado contendo solução de Krebs-Henseleit, 37ºC, pH 7.4, saturado com 95% de O2 e 5% CO2. Curvas concentração-efeito ao L-NAME, à acetilcolina (ACh), na ausência e presença de indometacina e/ou L-NAME, e ao nitroprussiato de sódio foram obtidas de anéis de aorta intacta e desnuda. Avaliou-se ainda a pressão arterial no 25º dia de vida pós-natal. Concentração eficaz 50% (CE50) e resposta máxima (RM) foram avaliadas (MANOVA/Tukey). Resultados: a associação da exposição ao Pb e ao etanol in utero, mas não os protocolos isolados, determinou hipertensão arterial no 25º dia de vida pós-natal (sistólica - controle 135,5 ± 3,0, Pb/EtOH 157,8 ± 4,6*; diastólica - controle 97,5 ± 1,4, Pb/EtOH 125,9 ± 3,2*; *P < 0,05, n=11). Nenhum dos protocolos determinou qualquer alteração da reatividade da aorta intacta e desnuda ao L-NAME e ao nitroprussiato de sódio (RM e CE50) e de CE50 à ACh em aorta intacta (dados não mostrados). Entretanto, a ... / Abstract: Introduction: although the literature reports cardiovascular changes induced by exposure to ethanol and lead (Pb) alone in adulthood, few studies focus on postnatal cardiovascular effects of exposure to ethanol and/or Pb in utero. Objectives: it was to investigate possible changes in the cardiovascular responses of weaned rats prenatally exposed to ethanol and Pb, alone and in combination. Still, advancing our understanding of the mechanisms involved in these changes. Materials and Methods: mothers were separated in 4 groups: control - received drinking water ad libitum ; Pb - received lead 500 ppm ad libitum during pregnancy ; EtOH - received a solution of 10% ethanol ad libitum in drinking water during pregnancy , and Pb / EtOH - both protocols in combination. Male Wistar rats (25 to 28-day old) from exposed mothers were used. The animals were sacrificed and thoracic aortic rings were collected and kept in organ bath containing Krebs- Henseleit solution, 37°C, pH 7.4, saturated with 95% O2 and 5% CO2. Concentration-effect curves to L-NAME, acetylcholine (ACh) in absence and presence of indomethacin and/or L-NAME, and sodium nitroprusside were obtained in intact and/or denuded aortas. It was also evaluated the blood pressure of 25-day old rats from all groups. Effective concentration 50% (EC50) and maximum response (MR) were evaluated (MANOVA/Tukey). Results: association of Pb exposure and ethanol in utero, but not the isolated protocols, determined hypertension on the 25th day of postnatal life (systolic - control 135.5 ± 3.0, Pb/EtOH 157.8 ± 4.6*; diastolic - control 97.5 ± 1.4, Pb/EtOH 125.9 ± 3.2*, *P < 0.05, n=11). None of the protocols determined any change in reactivity of intact and denuded aortas to L-NAME and sodium nitroprusside (MR and EC50) and EC50 to ACh in intact aortas (data not shown). Removal of endothelium abolished vasorelaxation to ACh. Unlike in utero exposure to Pb ... / Mestre

Resumo:A leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica que pode ser fatal para os humanos. A doença é causada por um parasita intracelular, Leishmania infantum e é transmitida pela picada do mosquito flebótomo. Em cães com LV observa-se uma intensa reação inflamatória crônica no fígado, baço, pele, medula óssea e gânglios linfáticos. A atividade arginase é importante na LV, pois o aumento dessa enzima pode contribuir para a multiplicação do parasita e para a redução da síntese de óxido nítrico (NO), predispondo o macrófago à infecção. A prostaglandina E2 (PGE2) pode regular a produção do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e da interleucina-10 (IL-10), porém nenhum estudo ainda foi realizado em cães com LV. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade arginase em macrófagos aderentes de cultura de linfonodos de 23 cães naturalmente infectados e 18 saudáveis, e os níveis de NO e PGE2 no sobrenadante dessas culturas. O efeito regulatório de PGE2 na produção de TNF-α e IL-10 também foi avaliado em cultura de leucócitos totais de linfonodo. Esse estudo ajuda a esclarecer o mecanismo da resposta imunológica na LVC. / Abstract:Visceral leishmaniasis (VL) is a chronic disease that can be fatal to humans and dogs. The disease is caused by the intracellular parasite Leishmania infantum and is transmitted by the bite of the sandfly (phlebotomines). In dogs, VL is observed as an intense chronic inflammatory reaction in the liver, spleen, skin, bone marrow and lymph nodes. Arginase activity is important in VL because an increase of this enzyme may contribute to the multiplication of the parasite and a reduction of nitric oxide (NO) synthesis, predisposing a macrophage to infection. Prostaglandin E2 (PGE2) can play a regulatory role in the production of tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10), however, there have been no studies in dogs with LV. This study aimed to evaluate the arginase activity in adherent macrophages cultivated from the lymph nodes of 18 healthy and 23 naturally infected dogs and to examine levels of NO and PGE2 in the supernatant of these cultures. The regulatory effect of PGE2 on the production of TNF-α and IL-10 was also evaluated in supernatants of total lymph node leukocytes cultures. These results help to clarify the mechanisms of the immune response in CVL. / Orientador:Valéria Marçal Felix de Lima / Banca:Alexandra Ivo de Medeiros / Banca:Caris Maroni Nunes / Mestre

Actualmente se vienen usando varios modelos que utilizan al etanol (EtOH) y la indometacina (Indo) para inducir inflamación gástrica e intestinal en forma experimental. Con el objeto de determinar cuál es el rol del óxido nítrico (NO) en la inflamación gástrica e intestinal, hemos utilizado como donadores de NO al nitrito de sodio (NIT), nitroprusiato de sodio (NPS) y metronidazol (MET); y como inhibidor inespecífico de la sintasa del NO a la NG-nitro-L-arginina-metil éster (LNAME) y el azul de metileno (AM) como inhibidor del guanidin monofosfato cíclico (GMPc). Se utilizaron 620 ratas albinas macho (Holtzman) que fueron adaptadas a las condiciones del laboratorio de Farmacología, Toxicología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la UNMSM y privadas de alimento pero no de agua por 24 horas antes de la inflamación gástrica aguda inducida por EtOH (Robert et al., 1979), y con Indo (Davies y Jamali, 1997). La inflamación intestinal aguda (Ramos Anicama, 2003) y crónica (Yamada et al., 1993) fue inducida con Indo. El daño macroscópico fue determinado en un microscopio calibrado en milímetros (mm), y también por planimetría computarizada que mide el porcentaje de la lesión. La determinación del NO fue indirecta cuantificando en el plasma su metabolito estable, el nitrito, mediante la reacción de Griess. Nuestros resultados demuestran que el NO participa como citoprotector en los modelos de inflamación aguda; y como proinflamatorio en el modelo de inflamación intestinal crónica. La determinación que el NO participa en el modelo de Yamada et al. nos ha permitido encontrar una nueva evidencia científica de la actividad antiinflamatoria de las hojas de Uncaria tomentosa Willd D.C. (“uña de gato”). / --- Nowadays it comes using several models who use etanol (EtOH) and indomethacin (Indo) to induce the gastric and intestinal inflammation in experimental form. In order to determine which is the role of nitric oxide (NO) in the gastric and intestinal inflammation, we have used sodium nitrite (NIT), sodium nitroprusiate (NPS) and metronidazole (MET) as NO donors; NG-nitro-L-argininemethyl ester L-NAME) was used as unspecific NO syntasa inhibitor and methylene blue (AM) like guanidine cyclical monophosphate (GMPc) inhibitor. 620 albino male rats (Holtzman) were used who before were conditioned in the laboratory of Pharmacology, Toxicology of the UNMSM Faculty of Veterinary Medicine and private of food but not of water for 24 hours before the induction of the acute inflammation induced for EtOH (Robert et al., 1979), and with Indo (Davies and Jamali, 1997). The intestinal acute inflammation (Ramos Anicama, 2003) and the intestinal chronic inflammation (Yamada et al., 1993) was induced by Indo. The macroscopic damage was determined in a calibrated microscope and also by computerized planimetry. NO determination was quantifying indirectly in the plasma its stable metabolite: the nitrite, by means of Griess reaction. Our results demonstrate that NO take part as cytoprotector in the models of acute inflammation; and is proinflammatory in the intestinal chronic inflammation model. The discovery that NO take part in the model of Yamada et al. has allowed us to find a new scientific evidence of the inflammatory activity of the leaves of the Uncaria tomentosa Willd D.C. (cat´s claw). / Tesis

Orientador: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Hélio José Montassier / Banca: Osvaldo Augusto Brasil Esteves Sant'Anna / Resumo: No hospedeiro bovino o nível de resistência ao carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus varia de acordo com a raça sendo os fenótipos contrastantes herdáveis. O presente trabalho explora esses fenótipos a fim de estabelecer os perfis das respostas imunes, humoral e inflamatória, correlacionados com resistência em raça zebuína (Nelore) e susceptibilidade em raça taurina (HPB). Os animais foram expostos a infestação natural pelo R.(B.) microplus e amostras de soros foram coletadas em pontos estratégicos da cinética das infestações. Os níveis de imunoglobulinas totais (IgG1 e IgG2), bem como os de anticorpos IgG1, IgG2 e IgE anti-extrato de ovo, anti-extrato de larva não alimentada e anti-saliva foram determinados. Elementos da resposta inflamatória, como as principais proteínas de fase aguda e óxido nítrico, também foram dosados. Os resultados obtidos mostram que as infestações muito intensas, em hospedeiros suscetíveis, são capazes de modular os níveis séricos de IgG1 e IgG2 total, diminuindo-os significativamente em relação aos níveis observados durantes infestações menores. Também modulam negativamente a produção de todos os anticorpos específicos IgG1 e IgG2 avaliados a nível sistêmico. Bovinos susceptíveis ao carrapato produzem níveis mais altos de anticorpos IgE para todos os antígenos. O fenótipo susceptivel de infestação se diferencia pela maior freqüência do alótipo de IgG?2a, herdado por herança Mendeliana co-dominante. Animais suscetíveis, quando infestados, produzem níveis mais altos da proteína de fase aguda a1- glicoproteína ácida, de padrão anti-inflamatório, enquanto que animais resistentes produziram relativamente mais proteínas de fase aguda pró-inflamatórias, haptoglobina e amilóide sérica A. Em ambas as raças não houve diferença nos níveis de transferrina e óxido nítrico sistêmico, porém a produção de ambos é influenciada pelos níveis de infestação. / Abstract: In bovine hosts resistance to the cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, varies according to the breed, being the phenotypes of infestations inherited. The present work exploits these contrasting phenotypes in order to determine the profile of the humoral, inflammatory and acute phase responses that are correlated with resistance seen in a zebuine breed (Nelore) and susceptibility seen in a taurine breed (Holstein). Bovines were exposed to natural infestations with R.(B.) microplus and they presented, as expected, different levels of infestation that also varied in intensity according to the season of the year. Samples of sera were collected at strategic points during the kinetics of different cycles of infestations. The levels of total serum IgG1 and IgG2 immunoglobulins, as well as those of IgG1, IgG2 and IgE anti-egg extracts, anti-unfed larvae extracts and anti-saliva antibodies were measured. Components of the inflammatory response, nitric oxide, as well as acute phase proteins, were also measured. The results show that very intense infestations in ticksusceptible bovines modulate the serum levels of IgG1 and IgG2, which are significantly diminished relative to those observed during less intense infestations. Intense infestations also modulate the production of all specific IgG1 and IgG2 antibodies. Susceptible animals produced more specific IgE, suggesting that this isotype does not participate in resistance against ticks. The susceptible cattle also have a higher frequency of IgG?2a , which are encoded by Mendelian co-dominant alleles. When infested susceptible animals produced higher levels of the anti-inflammatory acute phase protein, a1-acid glycoprotein, whereas resistant animals produced relatively higher levels of the pro-inflammatory proteins, haptoglobin and serum amyloide A. / Mestre

Orientador: Eduardo Kokubun / Banca: Cláudio Alexandre Gobatto / Banca: Eliete Luciano / Banca: Sandra Lia do Amaral / Banca: Ricardo Jacó de Almeida / Resumo: Uma alta incidência de hipertensão arterial, que possui uma etiologia multifatorial envolvendo fatores genéticos, ambientais e psicológicos, tem sido observada na população mundial. Desta forma o entendimento dos mecanismos celulares e moleculares envolvidos na gênese da hipertensão arterial é fundamental para se alcançar medidas preventivas e terapêuticas para o controle da pressão arterial. O óxido nítrico (NO) produzido pelas células endoteliais assume um importante papel no controle cardiovascular, pois tem sido considerado ser um potente vasodilatador e regulador da pressão arterial. Entretanto, as disfunções endoteliais, caracterizadas pela baixa produção e/ou biodisponibilidade do NO e alguns fatores genéticos (polimorfismos), podem contribuir para o surgimento da hipertensão arterial. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar a influência de um programa de exercício aeróbio nas concentrações e biodisponibilidade de NO em portadores do polimorfismo T-786C do gene da eNOS e verificar o efeito dessas variáveis na pressão arterial. O DNA dos participantes foi isolado das células mononucleares periféricas e o diagnóstico genético foi realizado pela técnica de PCR. As análises de concentrações de NO, atividade da superóxido dismutase (SOD), pressão arterial, fluxo sanguíneo, composição corporal (índice de massa corporal e porcentagem de gordura corporal), perfil lipídico (colesterol total, LDL-colesterol, HDL-colesterol e triglicerídeos) e glicemia foram analisadas antes de após 6 meses de um programa de exercício físico aeróbio (70% do VO2 max) em adultos de meia idade e idosos subdivididos de acordo com a genotipagem o nível inicial de pressão arterial. Os resultados mostraram que as variáveis do perfil lipídico não exerceram nenhuma influência na relação entre hipertensão, concentrações de NO e polimorfismo do gene da eNOS... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hypertension has a high incidence in the population of the world and its etiology is multifatorial, involving genetic, environmental and psychological factors. Understanding of the cell and molecular mechanisms involved in the genesis of hypertension is fundamental for the attainment of preventive and/or therapeutic measures for blood pressure control. Nitric Oxide (NO) produced by the endothelial cells has a particularly important role in cardiovascular control because it is a potent vasodilator and thus its role in blood pressure control is extremely relevant. However, the endothelial dysfunction which is characterized by a lower production and/or NO bioavailability, and some genetic factors can contribute to the genesis of hypertension. Therefore, the purpose of this study was investigate the influence of aerobic exercise training (AEX) on the NO concentration and bioavailability in 786C allele carriers and verify the effect of theses variable on the blood pressure. Genomic DNA was isolated from peripheral mononuclear cells and genotyping was done by standard PCR methods. The NOx assay, SOD activity, casual blood pressure, blood flow, body composition (body mass index and body fat), and lipid profile (cholesterol, LDL-cholesterol, HDLcholesterol, glucose, and triglycerides) was evaluated before and after 6 months of AEX (70% of VO2 max) in adults and elderly divided in groups according genotype and blood pressure levels. The results showed that there is no interference of lipid profile on the relationship among hypertension, NO concentration and eNOS polymorphism and the body composition variables showed a small interference on this relationship. NOx levels was associated with blood pressure values and NOx levels were significantly lower in the TC+CC group compared to the TT group at baseline... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Carlos Frederico de Oliveira Graeff / Banca: Marcelo Mulato / Banca: José Humberto Dias da Silva / Banca: Carlos José Leopoldo Constantino / Banca: Alvaro Antonio Alencar de Queiroz / O programa de Pós graduação em Ciência e Tecnologia de Materiais, PosMat, tem carater institucional e integra as atividades de pesquisa em materiais de diversos campi da UNESP / Resumo: O óxido nítrico (NO) é um radical livre conhecido por desempenhar importantes funções fisiológicas, sendo associado, entre outros processos, ao fator de relaxamento da musculatura lisa vascular, importante para a regulagem da pressão sanguínea. Para a determinação dos mecanismos através do qual o NO influencia e controla os processos fisiológicos, é de fundamental importância o desenvolvimento de sensores que possibilitem a sua determinação quantitativa. Neste trabalho, foram obtidos e caracterizados sensores sólidos para NO através de duas maneiras: 1 - Enquadramento do complexo ferro(II)-dietilditiocarbamato (FeDETC) na matriz híbrida de siloxano-poli(oxipropileno) (PPO) utilizando um método sol-gel modificado. 2 - Formação de um complexo de inclusão do FeDETC com cucurbit[n]urilas. A detecção de N0, nesses sensores, se dá através de Espectroscopia de Ressonância Paramagnética Eletrônica, baseada na formação de um complexo paramagnético estável ferro(II)-DETC-NO, o qual exibe três linhas características no espectro de RPE(gef=2,04). Os sendores apresentaram bom desempenho. O sensor baseado em PPO, apresentou sensibilidade de 2,5x108 μM-1, com faixa de trabalho entre 100 nM e 1 mM. O sensor CB[6]FeDETC apresentou o limite de detecção de 2,9 nM, limite de quantificação de 16 nM. A faixa de trabalho desse sensor é de 1,37x1015 spings/g a 1x1019 spins/g. Esses resultados são comparáveis aos melhores sensores divulgados na literatura / Abstract: The nitrogen monoxide (NO) is a free radical known to play important physiological roles, being associated with, among other processes, the relaxation factor of vascular smooth muscles, important for the regulation of blood pressure. To determine the mechanisms by which NO influences and controls the physiological processess is of fundamental importance the development of sensors that allow quantitative determination of NO. In this work, solid-state sensors for NO were obtained by two ways: 1 - Encapsulation of the complex iron (II)-diethyldithiocarbamate (FeDETC) in the hybrid matrix of siloxane-poly (oxipropilene) (PPO) using a modified sol-gel method. 2 - Formation of an inclusion complex with the FeDETC cucurbit[n]uril. The detection of NO in these sensors, is performed by Electron Paramagnetic Resonance Spectroscopy, based on the formation of a stable paramagnetic complex iron[II]-DETC-NO, which displays three eharacteristic lines in the EPR spectrum (gef=2,04). The sensors showed good performeance. The PPO based sensor showed a sensitivity of 2.5x108 μM-1, a working range between 100 nM and 1 mM. The sensor CB[6]/FeDETC showed the detection limit of 2.9 nM, quantification limit of 16 nM. The working range of this sensor is between 1.37x1015 spins/g and 1x1019 spins/g. These results are comparable to the best sensors reported in the literature / Doutor

Resumo: Mediadores inflamatórios como mieloperoxidase (MPO) e óxido nítrico (NO) participam do processo inflamatório da doença periodontal e na associação ao diabetes. Inibidores da Óxido Nítrico Sintase (NOS), como o L-NAME têm sido administrados na tentativa de minimizar danos teciduais decorrentes da inflamação. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do L-NAME sobre os níveis da isoforma induzível de óxido nítrico (iNOS), sobre a perda óssea alveolar e sobre os níveis de mieloperoxidase (MPO) em ratos diabéticos com periodontite induzida. Foram utilizados 192 ratos divididos em grupos de 24 animais cada: grupo C: Controle com ingestão de água; grupo C-L: Controle com ingestão de LNAME; grupo D: Ratos diabéticos com ingestão de água; grupo D-L: Ratos diabéticos com ingestão de L-NAME; grupo P: Ratos com periodontite experimental e ingestão de água; grupo P-L: Ratos com periodontite experimental e ingestão de L-NAME; grupo DP: Ratos diabéticos com periodontite experimental e ingestão de água; e grupo DP-L: Ratos diabéticos com periodontite experimental e ingestão de L-NAME. O sacrifício dos animais foram realizados aos 3,7,15,e 30 dias após a indução da periodontite experimental. Foram realizadas análises da taxa glicêmica, da perda óssea alveolar, da atividade de mieloperoxidase e da expressão de iNOS. Os grupos com D, P e DP mostraram níveis de iNOS estatisticamente mais altos quando comparados aos grupos D-L, P-L e DP-L que ingeriram L-NAME em todos os períodos. (p < 0.05). Os grupos que ingeriram L-NAME mostraram perda óssea estatisticamente menor quando comparados aos grupos que ingeriram água (p < 0.05). A alta expressão de MPO foi observada nos grupos com periodontite P e DP que ingeriram água. Foi verificado um pico nos níveis de MPO aos 7 dias em todos os grupos experimentais que ingeriram água... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Inflammatory mediators such as myeloperoxidase (MPO) and nitric oxide (NO) play a role in inflammatory processes related to periodontal disease and diabetes. NO-Synthase (NOS) inhibitors as L-NAME have been administered in attempts to reduce tissue damage resulting from such inflammation. The aim of this study was to evaluate the effects of L-NAME on alveolar bone loss, NO and MPO levels in diabetic rats with experimental periodontitis. A hundred ninety-two rats were divided into one of the following groups with 24 animals each: group C-W: control group with water intake; group C-L: control group with L-NAME intake; group D-W: diabetic rats with water intake; group D-L: diabetic rats with LNAME intake; group P-W: chronic periodontitis rats with water intake; group PL: chronic periodontitis rats with L-NAME intake; group DP-W: diabetic chronic periodontitis rats with water intake, and group DP-L: diabetic chronic periodontitis rats with L-NAME intake. The killing was performed at 3, 7, 15 and 30 days after ligature-periodontitis induction to obtain gingival specimens and to evaluate MPO and NO activity and radiographic bone loss. Groups with D-W or P-W and DP-W showed statistically higher iNOS expression compared to LNAME groups in all periods (p < 0.05). L-NAME treatment (L) statistically decreased iNOS expression in all groups with inflammatory pathological conditions, such as D, P and DP. In general, groups with L-NAME intake showed lower bone loss compared to water intake groups. In addition, P-L or DP-L rats demonstrated statistically lower bone loss compared to diabetics and controls at 30 days (p < 0.05). The highest MPO expression was verified in periodontitis groups with water intake (P-W e DP-W). There was a peak in MPO levels at 7 days in all experimental groups with water intake during experimental evolution. The L-NAME statistically decreased MPO levels from all groups... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Denise Madalena Palomari Spolidorio / Coorientador: Juliana Rico Pires / Banca: Poliana Mendes Duarte / Banca: Sheila Cavalca Cortelli / Banca: Bruno Herrera Shneider / Banca: Benedicto Egbert Corrêa de Toledo / Doutor

Orientador: Valéria Cristina Sandrim / Resumo: A enzima mieloperoxidase (MPO) é caracterizada por produzir substâncias altamente reativas e é reconhecida por desencadear estresse oxidativo e disfunção endotelial mediada, em parte, pela interferência com o vasodilatador óxido nítrico. Neste estudo, nós investigamos a relação entre o óxido nítrico e a MPO in vitro incubando o plasma de gestantes saudáveis, hipertensas e com pré-eclâmpsia com células endoteliais (HUVEC). Foram observados maiores níveis de MPO no sobrenadante de células incubadas com o plasma de pacientes com pré-eclâmpsia comparado ao de células incubadas com plasma de gestantes saudáveis, e que a inibição da atividade enzimática aumentou a disponibilidade de óxido nítrico. Posteriormente, nós avaliamos a concentração e atividade da MPO no plasma de 219 gestantes saudáveis, 130 hipertensas gestacionais (com e sem terapia anti-hipertensiva) e 143 gestantes com pré-eclâmpsia (com e sem terapia anti-hipertensiva). Nós observamos que pacientes com síndromes hipertensivas e sob tratamento anti-hipertensivo apresentaram menores níveis e atividade desta enzima e, curiosamente, pacientes que tiveram o plasma coletado antes do tratamento anti-hipertensivo apresentaram níveis elevados de MPO. Nossos resultados indicam um elevado risco cardiovascular em gestantes com síndromes hipertensivas e que a MPO ativa pode ter um papel na disfunção endotelial nestas síndromes pelo comprometimento da disponibilidade do óxido nítrico. Além disso, o uso de drogas anti-hipertensivas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Angela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Eduardo Bagagli / Resumo: A esporotricose é uma micose de distribuição universal cujo agente é o fungo termodimórfico Sporothrix schenckii. A forma mais comum da doença é a linfocutânea, que compromete pele, tecido subcutâneo e gânglios linfáticos regionais. Os principais constituintes da parede celular de S. schenckii são compostos peptídeo-polissacarídicos contendo ramnose, manose e galactose. Estes compostos se arranjam na parede celular de modo a formar duas subcamadas distintas na forma leveduriforme do fungo, uma das quais, a mais interna e fixa delas, é denominada como peptídeo-polissacarídeo da parede celular (PPC) e foi utilizada como antígeno neste estudo, juntamente com a levedura termo-inativada (SSTI). Os antígenos liberados pelo fungo participam diretamente do processo de escape do sistema imune e também servem como alvos para a eliminação do mesmo por anticorpos ou ligação a receptores presentes em células da imunidade inata, como os macrófagos. Nossos resultados mostraram que o PPC induz citocinas de padrão inflamatório de forma mais pronunciada que o SSTI, que por sua vez induziu maior liberação de IL-10. Sugerimos também que no modelo experimental utilizado a IL-10 não atua provocando supressão da resposta proliferativa dos esplenócitos, e que a IL-4 atua apenas na fase de resolução da infecção, não sendo induzida como forma de escape imunológico pelo fungo. Também mostramos que os antígenos testados são capazes de induzir a liberação de IL-17 em culturas de esplenócitos, num perfil semelhante àquela das citocinas Th1 / Abstract: Sporotrichosis is a micotic infection of universal distribution, which is caused by dimorphic fungus Sporothrix schenckii. It usually happens as a lymphocutaneous disease, compromising skin, subcutaneous tissues and regional lymphatic nodules. Major constituents of S. schenckii cell wall are peptido-polysaccharide complexes containing rhamnose, mannose and galactose. These complexes are organized in two distinct layers in the fungus yeast cell wall, of which the inner one is called cell wall peptido-polysaccharide (PPC), being used as antigen in this study, along with the heat-killed yeast (SSTI). Antigens released by the fungus directly participate in evasion of the immune system, also serving as targets for fungus elimination by binding of antibodies or innate immune cells like macrophages. Our results showed that PPC induces inflammatory cytokines in a more pronounced way when compared to SSTI, which induced higher levels of IL-10. We also suggest that, in the animal model used, IL-10 doesn't act as a suppressor of splenocyte proliferative response, and that IL-4 play a role at the resolution phase of the infection, being not induced as a means of immunologic escape by the fungus. Also, we showed that the assayed antigens are capable of inducing IL-17 secretion in splenocyte cultures, in a fashion close to that of Th1 cytokines / Mestre