Memoria presentada para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo. Mención en Producción Frutícola / Numerosos estudios plantean que el óxido nítrico (NO) cumple una función fundamental en las plantas. Se ha informado que esta molécula actúa en la inhibición de la vía degradativa de la clorofila y que favorece el proceso de síntesis de este pigmento; así también se le atribuye la capacidad de emular algunos efectos dependientes de la luz en las plantas. Debido a esto y los antecedentes sobre el NO donde se demuestra un efectivo aumento en la acumulación de complejos de proteínas en la membrana del tilacoide; se sugiere la posibilidad de que dicha biomolécula se encuentra, directa o indirectamente, formando parte de la vía de inducción de la síntesis de proteínas tempranamente inducidas por luz (ELIPs). El objetivo del presente estudio es evaluar el efecto de aplicaciones exógenas de óxido nítrico sobre hojas jóvenes etioladas de vid. La información existente sobre el efecto del NO comprende sólo plantas anuales, sin embargo, se espera que actúe como molécula señal en un proceso mediado por luz generando un aumento en el contenido de clorofilas y junto a ello, un aumento en la expresión de proteínas ELIPs en plantas perennes como la vid. Para cumplir este objetivo se realizaron una serie de ensayos para estandarizar las respuestas de la vid, además se realizó un primer ensayo en trigo para corroborar resultados previamente obtenidos en este cereal ante la aplicación exógena de NO. Brotes de vid de la variedad Sultanina fueron mantenidos en oscuridad hasta contar con el material vegetal necesario. Las hojas jóvenes etioladas obtenidas fueron sometidas a los distintos tratamientos según la aplicación de NO, asperjando directamente una solución que genera óxido nítrico (S-nitroso-N-acetilpenicilamina, SNAP) en concentración 100 μM o agua destilada sobre las hojas control sin aplicación de NO. Cada ensayo fue sometido adicional y diferencialmente a un tratamiento de luz. La variación del contenido de clorofila total en el tiempo se midió mediante el método de Arnon (1949) y para medir la expresión de las proteínas ELIPs se realizaron Western Blots. Los resultados obtenidos indican que la aplicación exógena de NO afecta positivamente la acumulación de clorofila total y no tan claramente la expresión de proteínas tipo ELIPs en hojas jóvenes etioladas de vid y en plántulas etioladas de trigo, sin embargo, dicho efecto se encuentra condicionado a la presencia de luz. / Numerous studies show that nitric oxide (NO) has a fundamental function in plants. It has been informed that this molecule acts in the inhibition of the degrading of chlorophyll and contributing to its synthesis, as well as emulating some light depending effects in plants. According to this background, were an effect of significant increases in the accumulation of protein complexes in the thylakoid membrane, suggest the possibility that this biomolecule forms part, directly or indirectly, in the induction of early light inducible proteins synthesis (ELIPs). The objective of the present study is to evaluate the effect of exogenous applications of nitric oxide on young leaves of etiolated vines. Existing information on NO effect only considers annual plants; however, it is expected to perform as a signal molecule in a light induced process, generating an increase in the chlorophyll content and together with this, an increase in the ELIPs protein expression in perennial plants like vines. To fulfill this objective, a series of trials were performed to standardize the responses of the vine, also a first trial was done on wheat to corroborate results previously obtained in this cereal to the exogenous application of NO. The results indicate that the exogenous application of NO positively affects the accumulation of total chlorophyll and not so clearly the expression of ELIPs proteins in etiolated young leaves of grapevine and etiolated wheat seedlings, however, this effect is conditional on the presence of light.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El óxido nítrico (NO) es un gas soluble sintetizado en diversas células a partir de Larginina, a través de una reacción de oxidación catalizada por las enzimas óxido nítrico sintasas (NOS). Se sintetiza en el endotelio vascular, y posee una potente acción vasodilatadora, que permite mantener una respuesta vascular adecuada a las crecientes demandas de flujo de sangre durante el ejercicio. En la sangre es oxidado a nitrito, que permanece estable en el plasma sanguíneo. Al mismo tiempo, el nitrito puede ser reducido a óxido nítrico en condiciones de hipoxia. El objetivo de este trabajo es describir la concentración plasmática de nitrito como metabolito estable del óxido nítrico en equinos FSC con diferente rendimiento hípico. Se utilizaron tres grupos de equinos FSC con diferente rendimiento. La muestra de sangre se obtuvo en la mañana, en condición de ayuno y reposo. Luego se centrifugó para obtener el plasma, y la concentración de nitrito se determinó por la prueba de Griess. Los resultados se expresan como μM de nitrito, indicándose valor promedio ± desviación estándar para cada grupo. El mayor valor se obtuvo en el grupo intermedio (226,96 ± 28,17), el cual difiere significativamente (p<0,05) respecto al grupo de bajo rendimiento (190,36 ± 26,81) y de alto rendimiento (157,94 ± 31,59). Este resultado se explica debido a que los grupos de rendimiento bajo e intermedio tienen un régimen de competencia similar (14,1 y 12,0 promedio de carreras corridas en últimos 6 meses respectivamente), en tanto para el grupo de alto rendimiento este promedio es de 6,7. A su vez, en el presente estudio la concentración de nitrito se correlacionó positivamente con el valor del VGA (ρ = 0,44). Estos hallazgos sugieren que la concentración de nitrito plasmática como indicador de actividad de NOS endotelial, no constituiría un biomarcador de rendimiento hípico en ejemplares con diferente régimen de training, pero podría representar una adaptación al ejercicio. / Nitric Oxide (NO) is a soluble gas synthesized in various cells from L-arginine through a oxidation reaction catalyzed by NO synthase (NOS). Nitric Oxide is synthesized in the vascular endothelium, and has potent vasodilating action, which enables to maintain adequate vascular response to growing demands of blood flow during exercise. In blood is oxidized to nitrite, that remains stable in blood plasma. At the same time nitrite can be reduced to NO under hypoxia. The objective of the study is to describe the plasma concentration of nitrite as a stable metabolite of nitric oxide in thoroughbreds with different performance. Three groups of thoroughbreds with different performance were used. The blood sample was obtained in the morning, at fasting condition and rest. Then centrifuged to obtain plasma, and the concentration of nitrite was determined by the Griess assay. Results are expressed as μM of nitrite, indicating average value ± standard deviation for each group. The highest value was obtained in the intermediate group (226,96 ± 28,17), which differed significantly (p <0,05) compared to the low performance group (190,36 ± 26,81) and high performance group (157,94 ± 31,59). This result is explained because the low and intermediate groups have a similar competition regime (14,1 and 12,0 average of races in last 6 months, respectively), while for high performance group this average is 6,7. In turn, the nitrite concentration was positively correlated with PCV (ρ = 0,44). These findings suggest that plasma nitrite concentration as an indicator of endothelial NOS activity, would not constitute a biomarker of performance in thoroughbreds with different training regime, but could represent an adaptation to exercise.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El oxido nítrico (NO) es un radical libre gaseoso de vida media, el cual participa en diversos procesos tanto fisiológicos como patológicos. En el sistema nervioso en particular, actúa normalmente como un mensajero neuronal regulando la transmisión sináptica; sin embargo en condiciones patológicas como en la epilepsia su síntesis puede verse alterada, en términos tales que su aumento puede favorecer la aparición de otros radicales libres, entre ellos el peroxinitrito, el cual es un potente agente neurotóxico. No obstante, además de su acción proepiléptica, el NO de acuerdo con algunas investigaciones presentaría también efectos antiepilépticos. Debido a esta dualidad de efectos, resulta relevante conocer con exactitud en qué condiciones esta molécula puede tomar uno u otro camino. El presente trabajo tiene como objetivo, evaluar en un modelo experimental de epilepsia en gatos, los niveles relativos de las tres isoformas de Oxido Nítrico Sintasa que producen NO, tanto nNOS, iNOS y eNOS en tres regiones cerebrales de bajo umbral a la epilepsia tales como el hipocampo, la amígdala y la corteza cerebral. Para ello se trabajó con tres grupos de gatos adultos, a los cuales se les implantó bilateralmente electrodos en las tres estructuras estudiadas, además de una cánula en hipocampo derecho. En dos de los grupos experimentales, a través de la cánula implantada crónicamente en hipocampo derecho, se inyectó AMPA como agente epileptogénico y solución salina en el grupo control. Uno de los grupos con epilepsia inducida fue sacrificado a las 24 horas y el otro grupo experimental fue sacrificado a los 5 días después de la inyección de AMPA, al igual que el grupo control que también fue sacrificado a los 5 días. Bajo anestesia profunda se extrajeron muestras bilaterales de tejido de las estructuras implantadas. Las muestras fueron procesadas para determinar la presencia de las isoformas nNOS, iNOS y eNOS, las cuales fueron identificadas por Dot Blot y cuantificadas por densitometría. En los dos grupos de gatos con epilepsia se observaron variaciones temporales y regionales respecto de los controles en los niveles de NOS; eNOS se encontró elevada a las 24 horas en corteza cerebral izquierda (p<0,05) y a los 5 días en hipocampo derecho (p<0,05) e izquierdo (p<0,05); por su parte nNOS aumentó a los 5 días tanto en hipocampo derecho (p<0,05) como en corteza cerebral izquierda (p<0,05); la iNOS se encontró elevada a los 5 días sólo en amígdala derecha (p<0,05). Los aumentos en los niveles de las diferentes isoformas de NOS, sugieren un compromiso y respuesta específica de las estructuras estudiadas en el proceso epiléptico, lo que plantea nuevas interrogantes a cerca de los tejidos y los lugares en que el NO actúa modulando los estados de hiperexcitabilidad neuronal

Neste trabalho propusemos a utilização do fotossensibilizador ZnPC associado ao complexo nitrosilo de rutênio Ru-tpy por meio de lipossomas de longo tempo de circulação, com o objetivo de analisar o efeito sinérgico das espécies reativas de oxigênio (EROs) e espécies reativas de nitrogênio (ERONs) geradas respectivamente pelos mesmos, atuando sobre uma linhagem celular neoplásica. Foram estudadas as propriedades fotofísicas e fotoquímicas do sistema misto ZnPC/Ru-tpy empregando-se técnicas de espectroscopia no estado estacionário e resolvido no tempo. Com isto foi possível determinar importantes parâmetros que elucidaram seu perfil fotodinâmico, confirmando sua viabilidade para aplicação em estudos in vitro e in vivo. Estes estudos também indicaram uma possível interação entre a ZnPC e o complexo Ru-tpy através do mecanismo de transferência de elétron do fotossensibilizador para o complexo de rutênio, desta forma liberando o NO. Realizamos os estudos em meio biológico utilizando a linhagem neoplásica B16-F10, avaliando a toxicidade dos sistemas lipossomais na ausência e na presença de luz. Os nossos resultados demonstraram que o sistema misto ZnPC/Ru-tpy em meio lipossomal apresenta propriedades fotofísicas e fotobiológicas úteis, gerando as espécies reativas (EROs e ERONs) atuando sinergicamente pela TFD. / We proposed in this work the use of photosensitizer Zinc phthalocyanine (ZnPC) associated with the nitrosyl ruthenium complex (Ru-tpy) in long circulation liposomes (stealth liposome), with the aim of analyzing the synergistic effects of the reactive of oxygen species (EROs) and reactive of nitrogen species (ERONs) generated, acting on the neoplastic cell line. The photophysical and photochemical properties of the mix system ZnPC/Ru-tpy were studied being used spectroscopic techniques in the stationary state and resolved in the time. With these studies were possible to determine important parameters that elucidated its photodynamic profile, confirming the viability for application in studies in vitro and in vivo. These studies also indicated the possible interaction between ZnPC and the complex Ru-tpy through the electron transfer process from the photosensitizer to the nitrosyl ruthenium complex which leads to release nitric oxide (NO). We accomplished the biological studies using the neoplastic cell line B16-F10, evaluating the toxicity of the liposomes in the absence and presence of light. Our results demonstrated that the system ZnPC/Ru-tpy in the stealth liposome presents useful photophysical and photobiological properties, generating the species reactives (EROs and ERONs) to work synergically for the Photodynamic Therapy (PDT).

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T16:31:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T18:02:22Z : No. of bitstreams: 1 170859.pdf: 2998722 bytes, checksum: 7eed6f18b64435a30624cb553589ea41 (MD5) / A participação das vias nitrérgicas e dos [receptores glutamatérgicos] ionotrópicos nos efeitos da exposição de curta e longa duração ao [etanol] foi avaliada no [hipocampo] de ratos. Inibidor e estimuladores das vias nitrérgicas indicam que estas vias opõem-se ao efeito [ansiolítico] do etanol e podem ter um papel importante no desenvolvimento da dependência ao álcool. A exposição de longa duração ao etanol resulta em dependência ao álcool, mas não fica obrigatoriamente associada com mudanças nos níveis proteicos das subunidades dos receptores glutamatérgicos ionotrópicos e/ou da enzima sintase do [óxido nítrico] hipocampais.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T21:04:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T18:15:06Z : No. of bitstreams: 1 172456.pdf: 6459364 bytes, checksum: 615ceb35d4189eb9ee9b5cecaef0a4aa (MD5) / Este estudo investigou os mecanismos de ação envolvidos no relaxamento produzido pelo sesquiterpeno poligodial (0,00427 - 42,74 mM) , isolado da planta Drymis winteri, nos vasos de coelho e cobaia e no corpo cavernoso de coelho. Para a realização deste trabalho foram utilizados artéria pulmonar de coelho e cobaia e o corpo cavernoso de coelho in vitro. Nossos resultados mostram que o poligodial produz relaxamento concentração-dependente tanto no corpo cavernoso de coelho como nos vasos estudados. Além disso, o relaxamento observado nos vasos ocorre por mecanismos dependentes e independentes do endotélio. O relaxamento induzido pelo poligodial nos vasos estudados é mediado principalmente pela liberação de NO ou de substância relacionada ao endotélio vascular, pela ativação da guanilato ciclase solúvel e elevação dos níveis de GMPc. Possivelmente essa via esteja também envolvida com o relaxamento produzido pelo poligodial no corpo cavernoso de coelho. Nossos resultados também demonstram que parte dos efeitos relaxantes causados pelo poligodial ocorre aparentemente por ativação de canais de potássio modulados por ATP, sensíveis à glibenclamida. No entanto, a liberação de prostaciclina, substância P, ou ativação da adenilato ciclase parecem não estar envolvidas no vasorelaxamento induzido pelo poligodial.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T09:22:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T00:48:37Z : No. of bitstreams: 1 144609.pdf: 3446743 bytes, checksum: 022fd0afb0425428ae5a8add8f48a04d (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-24T14:28:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 262305.pdf: 1360095 bytes, checksum: cebb4ec2f79926d9bedfaac6f68ad9cb (MD5) / Major depression is a chronic, severe, life threatening disease, and one of the most prevalent forms of mental illness in the occidental world. The monoamine theory of depression postulates that this disease results from a deficiency of brain monoaminergic activity, however other neural systems and biochemical process, like oxidative stress, appear to be involved in its pathogenesis. á-Tocopherol, the most active and abundant form of vitamin E, is the major fat-soluble chain-breaking antioxidant of the human organism. Studies have shown that major depression is accompanied by a significant reduction in serum vitamin E concentrations, but no study was conducted in animal models of depression. This study investigated the effect of acute and chronic treatment with á-tocopherol in the forced swim test (FST) and in the tail suspension test (TST), two widely used behavioral tests that predict the efficacy of antidepressant treatments. The oral treatment with á-tocopherol at the doses of 30 and 100 mg/kg reduced the immobility time in the FST and in the TST. The i.c.v. administration of á-tocopheryl phosphate was also able to reduce the immobility time in the FST (0.1 and 1 nmol/site) and in the TST (0.01 nmol/site). The acute treatment with á-tocopherol had no effect in the locomotor activity of animals. In addition, the chronic treatment (4 weeks) with á-tocopherol at the dose of 10 mg/kg reduced the immobility time in the FST, without causing any alteration in the the locomotor activity of animals in the open-field test. Considering the well-known role of vitamin E as an antioxidant, the effect of chronic treatment with á-tocopherol in the glutathione (GSH) antioxidant system was investigated. The chronic treatment with á-tocoferol (10 mg/kg) increased the GSH levels in the hippocampus and in the prefrontal cortex. Moreover, the treatment with á-tocopherol increased the glutathione peroxidase and glutathione reductase activity in the hippocampus (10 mg/kg) and in the prefrontal cortex (10-100 mg/kg). Additionally, this study investigated the involvement of the monoaminergic (serotonergic and noradrenergic) and glutamatergic systems, and of the L-arginine-NO pathway, in the antidepressant-like effect of á-tocopherol in the FST. The anti-immobility effect of á-tocopherol (100 mg/kg, p.o.) was prevented by the pre-treatment of mice with PCPA (100 mg/kg, i.p., four consecutive days), prazosin (1 mg/kg, i.p.), yohimbine (1 mg/kg, i.p.), NMDA (0.1 pmol/site, i.c.v.), D-serine (30 ìg/site, i.c.v.), L-arginine (750 mg/kg, i.p.), SNAP (25 ìg/site, i.c.v) and sildenafil (5 mg/kg, i.p.), but not with propranolol (2 mg/kg, i.p.). In addition, a sub-effective dose of á-tocopherol (10 mg/kg, p.o.) produced a synergistic antidepressant-like effect with WAY100635 (0,1 mg/kg, s.c.), pindolol (32 mg/kg, i.p.), fluoxetine (10 mg/kg, p.o.), phenylephrine (5 mg/kg, i.p.), clonidine (0,06 mg/kg, i.p.), desipramine (8 mg/kg, p.o.), MK-801 (0.001 mg/kg, i.p.), L-NNA (0.3 mg/kg, i.p.), methylene blue (18 mg/kg, i.p.) and ODQ (30 pmol/site, i.c.v.). This study showed that acute and chronic treatment with á-tocopherol produces a specific antidepressant-like effect in animal models of depression. Our results also suggest that the chronic treatment with á-tocopherol improves the antioxidant defences in the hippocampus and in the prefrontal cortex of mice. Moreover, the effect of the acute administration of á-tocopherol in the FST seems to be mediated, at least in part, by an interaction with serotonergic (through 5-HT1A receptors) and noradrenergic (through á1 e á2-adrenoceptors) systems and by the inhibition of NMDA receptors and of NO and cGMP synthesis.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-24T19:22:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 262370.pdf: 1636326 bytes, checksum: 5199bd600ae16874830fe9ee7df25421 (MD5) / O óxido nítrico (NO) é um dos principais mediadores da vasodilatação e hiporeatividade a vasoconstritores que ocorre na sepse. Entretanto, a inibição não-seletiva das enzimas responsáveis por sua produção não se revelou uma alternativa de utilidade clínica. Há dados na literatura mostrando uma importante relação entre NO e canais de potássio durante a sepse. Através de um modelo experimental de sepse em ratos observamos que o bloqueio de canais de potássio com tetraetilamônio (TEA; bloqueador não seletivo de canais de potássio; 8 mg/kg; s.c.), quando administrado nos momentos iniciais da sepse em baixas doses, onde bloqueia preferencialmente canais de potássio sensíveis ao cálcio, reduziu a mortalidade. Este tratamento precoce com TEA reduziu a produção de NO bem como a expressão da NOS-2, melhorando o quadro de hipotensão e hiporeatividade a vasoconstritores, além de melhorar parâmetros de dano tecidual. Adicionalmente, o TEA foi capaz de manter os níveis glicêmicos dentro da normalidade nos animais sépticos, quando normalmente é vista uma grande hiperglicemia, seguida de hipoglicemia. A 4-aminopiridina (10 ou 100 µg/kg; s.c.), um bloqueador seletivo de canais de potássio dependentes de voltagem, quando administrada nos animais sépticos, não alterou a mortalidade dos animais. Já o tratamento com a glibenclamida (GLB; 1 mg/kg; s.c.; inibidor seletivo para canais de potássio dependentes de ATP; 4 horas após a cirurgia) além de não apresentar nenhuma proteção, precipitou a morte dos animais, um efeito que parece estar relacionado com a hipoglicemia causada por este composto. Assim, o bloqueio de canais de potássio dependentes de cálcio deve ser investigado como um possível alvo terapêutico para o tratamento da sepse.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-24T23:14:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 277515.pdf: 1417209 bytes, checksum: 97289a4ad4e58f73192060aeb3fe5d86 (MD5) / A síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SIRS), quando associada a uma infecção pode evoluir para sepse e choque séptico, que são importantes causas de morte nas UTIs. Em geral, a morte é causada por um colapso cardiovascular e hipotensão refratária, que aparecem logo no início da sepse. A disfunção vascular é mais estudada e compreendida que a disfunção cardíaca, contudo a última é reconhecida como um importante mediador da disfunção de múltiplos órgãos na sepse. O objetivo do presente trabalho foi caracterizar a disfunção cardíaca na sepse experimental induzida pela ligadura e perfuração do ceco (CLP) em camundongos, utilizando a metodologia de coração isolado e perfundido (preparação de Langendorff), e também, avaliar a participação do óxido nítrico nesse processo. Os parâmetros cardíacos avaliados foram: Tensão sistólica e diastólica, +dT/dt (velocidade de contração), -dT/dt (velocidade de relaxamento), AUC (área sob a curva), pressão de perfusão das coronárias e frequência cardíaca. Observamos que durante a sepse severa (índice de mortalidade de 100% quarenta e oito horas após a CLP) o perfil de atividade apresentado pelos corações sépticos, apesar de variado, mostra que a sepse causa importantes alterações na funcionalidade cardíaca. O parâmetro tensão sistólica, três horas após os animais serem submetidos à CLP, mostrou que 38% dos corações apresentaram valores superiores aos apresentados pelos corações controle (e por isso denominados de suprafuncionais), 12% apresentaram valores inferiores (subfuncionais) e 50% apresentaram valores semelhantes aos apresentados pelos corações controle (normofuncionais). Seis horas após a CLP o subgrupo suprafuncional correspondeu a apenas 21% do total de corações avaliados, enquanto o subgrupo subfuncional correspondeu a 29%. Doze horas após a CLP o subgrupo normofuncional foi o mais numeroso, correspondendo a 77% do total de corações avaliados. Por fim, vinte e quatro horas após a CLP houve um aumento substancial no número de corações subfuncionais, representando 40% dos corações avaliados. Perfil semelhante foi encontrado em relação aos parâmetros velocidade de contração, velocidade de relaxamento e AUC. Quando estimulados com isoprenalina para avaliação da capacidade contrátil e capacidade cronotrópica positiva, os corações dos animais submetidos à CLP vinte e quatro horas antes apresentaram importante redução no funcionamento das células auto-rítmicas do nodo sino-atrial, alterações no sistema de condução dos estímulos e ainda, o sistema contrátil destes corações encontrou-se parcialmente reduzido. Tanto os corações suprafuncionais avaliados três horas após a CLP quanto os corações suprafuncionais avaliados vinte e quatro horas após, apresentaram tensão sistólica superior à apresentada pelos corações controle em resposta à isoprenalina. A resposta cronotrópica e inotrópica positiva dos demais corações avaliados (subfuncionais três horas após a CLP, normofuncionais três e vinte e quatro horas após a CLP) foi semelhante à resposta apresentada pelos corações controle, sugerindo que a atividade beta-adrenérgica, atividade contrátil e o aspecto elétrico da frequência cardíaca estão preservados nestes corações. Observamos ainda que os níveis plasmáticos de NOx encontram-se elevados a partir de três horas após o procedimento cirúrgico, permanecendo assim até pelo menos quarenta e oito horas após a CLP. A infusão de um inibidor não-seletivo das enzimas NOS (L-NAME) não alterou a atividade basal dos corações controle e dos corações sépticos avaliados vinte e quatro horas após a CLP. Por outro lado, quando estimulados com isoprenalina, os corações controle infundidos com L-NAME apresentaram resposta cronotrópica e inotrópica positiva inferior à apresentada pelos corações controle que receberam apenas Krebs. Os corações sépticos que receberam L-NAME quando estimulados com isoprenalina apresentaram resposta concentração-dependente à isoprenalina, tanto no parâmetro tensão sistólica quanto no parâmetro frequência cardíaca, efeito este que não foi observado nos corações sépticos que receberam apenas Krebs. O substrato L-arginina não é um fator limitante para a produção de óxido nítrico, visto que não foram observadas diferenças em corações controle e corações sépticos avaliados vinte e quatro horas após a CLP e que tiveram arginina adicionada à solução de perfusão. Assim, nosso trabalho mostra que ocorrem importantes alterações cardíacas durante a sepse, as quais acometem tanto a maquinaria contrátil quanto as células auto-rítmicas, tendo início logo nas primeiras horas de instalação do quadro e perdurando até horários mais tardios. Demonstramos ainda, que o óxido nítrico parece estar envolvido nas alterações observadas.