Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2013-12-05T21:51:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 265977.pdf: 823598 bytes, checksum: f2e984af26365f52486ab46f32807bf8 (MD5) Previous issue date: 2009 / O presente estudo investigou a participação dos receptores NK1 do septo lateral de ratos avaliados no modelo experimental de odor de gato. Para realizar este objetivo primeiramente o teste foi padronizado nas condições experimentais do nosso laboratório. Nesta etapa foi feita a padronização farmacológica do teste do odor de gato com o benzodiazepínico midazolam, sendo escolhida a dose de 0,25 mg/Kg i.p. a mais eficaz em inibir os comportamentos de defesa dos animais após a exposição ao odor. Na etapa seguinte, foi realizada uma curva dose-resposta ao antagonista de receptores taquicinérgicos do tipo NK1, o WIN51,708. A dose de 10 pmol, administrada centralmente (icv) antes da exposição ao odor, mostrou-se eficaz na diminuição do comportamento defensivo de ratos frente ao odor de gato. A última etapa de nosso trabalho consistiu na administração de 10 pmol do WIN51,708 no septo lateral de ratos antes da exposição ao odor. Este tratamento foi capaz de modificar todos os parâmetros comportamentais dos ratos expostos ao odor de gato, indicando uma atividade do tipo ansiolítica. Este resultado evidencia a participação dos receptores NK1 presentes no septo lateral na modulação do comportamento de defesa de ratos e um papel tônico da substância P endógena na modulação destes comportamentos.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T09:22:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T00:48:37Z : No. of bitstreams: 1 144609.pdf: 3446743 bytes, checksum: 022fd0afb0425428ae5a8add8f48a04d (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Curso de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-17T15:50:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T16:17:19Z : No. of bitstreams: 1 181088.pdf: 2123229 bytes, checksum: 78d387e89fa7d5dfc4be12dae9ed8ba8 (MD5) / O presente trabalho investigou o substrato neuroanatômico e o envolvimento dos receptores taquicinérgicos NK1 e NK2 na área de maior relevância para o efeito ansiogênico induzido pela SP em ratos avaliados no teste do labirinto em cruz elevado (LCE). Nossos dados mostram que os ratos tratados com SP 10 pmol no septo lateral (SL) expressaram reações de defesa extremas no teste do LCE e na arena, denominadas como respostas de "freezing" e "darting", respectivamente, sendo essa ação muito mais evidente nessa área do que quando a SP foi injetada na região amigdalar ou no ventrículo lateral. Por outro lado, a injeção intra-septal de FK 888 (100 pmol), antagonista NK1, ou de SR 48968 (100 pmol), antagonista NK2, no SL, seguido da injeção de SP (10 pmol) no ventrículo lateral foi capaz de inibir as respostas aversivas induzidas pela injeção intracerebroventricular de SP. Estes resultados sugerem que o septo lateral parece ser um substrato neuroanatômico muito importante na mediação dos efeitos do tipo ansiogênico da SP e que os receptores NK1 e NK2 possuem um papel importante na mediação deste efeito.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-11-10T03:10:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 335903.pdf: 3436374 bytes, checksum: d64f01ea784144e72802fb02cfca8bb1 (MD5) Previous issue date: 2015 / O modelo de derrota social (DS) tem sido considerado um modelo naturalístico de estresse, caracterizado por interações agressivas e imprevisíveis que ajudam a compreender melhor as respostas neurobiológicas ao estresse, consistindo em um importante modelo translacional para o transtorno de estresse pós-traumático (TEPT). O presente trabalho teve como objetivo a caracterização temporal das respostas comportamentais defensivas do modelo de derrota social e a investigação do papel do sistema taquicinérgico neste contexto. Camundongos C57BL/6 utilizados como animais intrusos ou derrotados, foram inseridos na caixa moradia de um animal residente (camundongos Swiss) ? dentro de uma caixa metálica a fim de conferir proteção física. Durante as sessões de treino (1, 3 ou 6 h) a caixa metálica foi retirada em períodos aleatórios, permitindo o contato direto entre os animais por 2 min ou 10 ataques. Após as sessões de treino, grupos independentes de animais foram submetidos ao teste de partição (TP) em diferentes tempos após a DS (24 h, 7 ou 30 dias). Os animais controle (CTL) foram submetidos ao mesmo protocolo, porém na ausência do animal residente. Nossos resultados mostraram que sessões de treino com duração de 3h por 3 dias consecutivos e avaliação comportamental 24 h após ao TP promoveram respostas comportamentais defensivas mais evidentes (redução do tempo de aproximação na barreira e aumento do comportamento de avaliação de risco), quando comparadas ao demais tempos. Esse foi, portanto, eleito o tempo de protocolo para avaliação das alterações moleculares e bioquímicas do presente estudo. O estresse social induzido pelo DS promoveu o aumento da imunomarcação de substância P, particularmente ao redor do corpo das células neuronais, em regiões encefálicas como hipocampo (HC) e córtex (CT) que são algumas das mais importantes estruturas envolvidas no TEPT. Em paralelo a este aumento, foi observada ainda uma ativação astrocitária e, em menor intensidade, a ativação/migração de micróglias, culminando com a instalação de um importante processo neuroinflamatório que parece ser fundamental para a manutenção da patologia. Os dados obtidos mostraram ainda que a situação de estresse social promoveu um aumento da expressão de receptores NK1 em células GFAP positivas no HC de animais derrotados (58%) em relação ao grupo CTL (32%). Associado a este evento, a expressão do receptor12NK1 na camada de células neuronais foi reduzida pelo estresse. Foram observadas ainda alterações como a degeneração neuronal e prejuízos na neurogênese nas sub-regiões CA3 e giro denteado do hipocampo. O tratamento com uma única administração do antagonista seletivo não peptídico do receptor NK1 - L-703, 606; 10 mg/kg; i.p. - reduziu as respostas comportamentais defensivas. Além disso, parece reestabelecer a expressão de receptores NK1 nas células astrocitárias (35%), assim como a expressão deste receptor na camada de células neuronais. A intervenção farmacológica realizada neste trabalho promoveu também um aumento na expressão dos marcadores de neurogênese como BDNF e espinofilina, sugerindo um possível efeito benéfico deste antagonista. Além disso, o bloqueio dos receptores NK1 promoveu uma redução nos níveis de corticosterona plasmática e reestabeleceu a expressão de receptores de glicocorticoide no HC e CT dos animais, semelhante ao grupo CTL, que havia sido reduzida após o estresse social. Os dados obtidos indicam a relevância do sistema taquicinérgico na neurobiologia do modelo de derrota social. Em conjunto, os resultados sugerem que a SP parece ser liberada em decorrência do estresse social e induz a degeneração neuronal, possivelmente por ativação de vias neuroinflamatórias específicas. Desta forma, sugerimos que o bloqueio o receptor NK1 possa ser uma abordagem terapêutica atrativa para o TEPT.<br> / Abstract : The social defeat model (SD) has been considered a naturalistic model of stress featured by aggressive and unpredictable interactions, and it seem to be an important translational model for the post-traumatic stress disorder (PTSD). The present study aimed to evaluate the temporal defensive behavioral responses a social defeat model, besides elucidating the role of tachykinin system on this model. C57BL/6 mice were used as intruders (defeated animals) and were inserted into the housing box of a resident animal (Swiss) inside a metal box in order to provide physical protection. During the training sessions (1, 3 or 6 h), the metal box was randomly removed allowing direct contact between the animals, during 2 min or 10 attacks. After the training sessions, independent groups of animals were submitted to the partition test (PT) at different times (24 h, 7 or 30 days). Control group (CTL) underwent the same protocol in the absence of the resident animal. Our results showed that animals submitted to training sessions lasting 3 h for 3 consecutive days with behavioral assessment 24 h after in the PT presented more evident defensive behavioral responses ? reduction of time spent in the barrier and increased risk assessment behavior ? when compared to other protocol times. Therefore, this was the chosen standard protocol to further evaluate the molecular and biochemical changes in this model. The stress augmented substance P animals submitted to the SDM, particularly, surrounding the neuronal cells bodies in the hippocampus (HC) and cortex (CT), well-known cerebral areas involved in PTSD. Moreover, as increased astroglial activation and less intense microglial activation were observed and they could contribute to a neuroinflammatory process. Overall, these alterations seem to be essential for the maintenance of the neurobiology. Our data also have shown a stress-induced NK1 receptor expression in GFAP positive cells in the HC of defeated animals (58%), associated a with reduced NK1 expression in the neuronal cell layer, compared to CTL group (32% of co-localization). In addition, defeated animals presented impaired neurogenesis and neurodegeneration. A single administration of the selective non-peptide NK1 receptor antagonist ? L-703, 606; 10 mg/kg; i.p. ? reduced the defensive behavioral responses. NK1 receptors antagonism restored the NK1 receptors expression in astrocytic cells (35%), as well as in the neuronal cell layer. NK1 receptor antagonism also increased markers of14neurogenesis, namely, BDNF and spinophilin, suggesting a beneficial effect of this pharmacological intervention. Blockage of NK1 receptors induced in the defeated animals a decreased plasma corticosterone, compared to CTL levels. Moreover it reduced the expression of glucocorticoid receptors in the HC and CT. Data obtained in the present study indicates the relevance of tachykinergic system in the neurobiology of social defeat model. Taken together, our results suggest that social stress induces SP release contributing to neuronal degeneration, possibly by activating specific neuro-inflammatory pathways. Thus, we here propose that NK1 receptor may be an attractive therapeutic target to PTSD treatment.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-20T21:39:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 190352.pdf: 281352 bytes, checksum: b4a4269a93a10bd03c26a7e3343b8c16 (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T03:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 192964.pdf: 327476 bytes, checksum: 89b78e1efa68ee40e2f23dc441aa3039 (MD5) / A ansiedade, ao mesmo tempo em que é influenciada por fatores genéticos, pode modular a reatividade à dor. As linhagens isogênicas de ratos Lewis (LEW) e espontaneamente hipertensos (SHR), exibem altos e baixos níveis de ansiedade. O presente estudo investigou a reatividade nociceptiva de ratos LEW e SHR de ambos os sexos no teste da formalina e os efeitos da injeção central de SP sobre estas respostas. Além disso, investigou-se os efeitos de um antagonista de receptores NK1, o NKP608, nestas duas linhagens no labirinto em cruz elevado (LCE) e no teste do campo aberto (TCA). Os resultados indicaram que ratos LEW de ambos os sexos exibiram uma maior reatividade nociceptiva comparados a ratos SHR. A administração central de SP causou um aumento significativo dos comportamentos nociceptivos somente em ratos LEW machos. Todas as doses de NKP608 produziram efeitos do tipo ansiolítico, similar aqueles do CDZ, em ratos SHR machos testados no TCA, mas não no LCE. Por outro lado, este composto teve um efeito ansiolítico parcial para LEW machos (e, em um menor grau, para fêmeas SHR) no LCE, mas não no TCA. Fêmeas LEW não foram afetadas após os tratamentos. Estes resultados sugerem que os níveis basais de ansiedade dos ratos LEW e SHR podem estar associados às diferenças na nocicepção. Estes resultados também sugerem que os efeitos da SP sobre a nocicepção e do NKP608 sobre a ansiedade são linhagem-, sexo- e teste-dependentes e demonstram que as linhagens LEW e SHR constituem um modelo genético útil, não só para estudos comportamentais ligados à ansiedade, mas também para o estudo da dor e, talvez, da relação desta com fatores psicológicos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências / Made available in DSpace on 2012-10-20T03:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T02:34:17Z : No. of bitstreams: 1 182962.pdf: 1617046 bytes, checksum: fb76be08451b69a6987bcb63771db9d1 (MD5) / Neste estudo procurou-se avaliar o efeito da quercetina sobre o extravasamento plasmático induzido pela substância P (SP) e bradicinina (BK) em diversos tecidos de ratos: rim, duodeno, coração, pâncreas, traquéia e bexiga. A avaliação do extravasamento plasmático (EP) mediado pela SP e pela BK foi feita pela técnica do corante azul de Evans, determinado por espectrofotometria (620nm) e expresso em mg de azul de Evans/g de tecido seco. A SP aumentou o EP de modo dose-relacionado no coração, pâncreas, traquéia e bexiga; a BK aumentou o EP de modo dose-relacionado no duodeno, pâncreas, traquéia e bexiga. A quercetina na dose de 7mg/kg, v.o. não alterou o EP em nenhum dos tecidos selecionados; entretanto, a quercetina na dose de 20mg/kg, v.o. provocou um aumento significante do EP no duodeno. A quercetina potencializou o aumento do EP induzido pela SP no duodeno, coração, pâncreas e bexiga, e também potencializou o aumento do EP induzido pela BK no duodeno, coração e traquéia. A inibição farmacológica seletiva da EPN com fosforamidon potencializou o aumento do EP induzido pela SP na traquéia e na bexiga; a inibição da ECA com captopril potencializou o EP induzido pela BK no duodeno e pâncreas. O pré-tratamento com antagonistas de receptores NK-1 e B2 mostrou que os mediadores envolvidos no aumento do EP provocado pela quercetina são a SP e a BK. No rim, o EP não foi modificado por nenhum dos tratamentos utilizados. Portanto, conclui-se que a quercetina tem ação potencializadora do EP induzido tanto pela SP como pela BK, e que este efeito é resultado da inibição das enzimas degradadoras destes mediadores inflamatórios, EPN e ECA, respectivamente. A inibição ECA pela quercetina foi comprovada quando se comparou a atividade da ECA plasmática de animais controle com a de animais tratados com quercetina.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2013-07-15T22:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 213767.pdf: 503822 bytes, checksum: 2a262da6b5db2cb3eedc15d7a6e29b43 (MD5) / O presente estudo teve por objetivo investigar a relação entre a substância P (SP) e o diazepam (DZP) nos comportamentos de ansiedade e memória em ratos avaliados no labirinto em T (LT). Na primeira etapa, os animais foram tratados intraperitonealmente (i.p.) com diazepam (DZP, 0,5, 1 e 2 mg/Kg; ansiolítico padrão), pentilenotetrazol (PTZ, 5, 15 e 30 mg/Kg; ansiogênico padrão), SP (5, 50 e 250 mg/Kg, droga teste) ou solução Salina (NaCl 0,9%, solução controle), antes de serem testados no LT. O procedimento experimental no teste consistiu em medir a latência para deixar o braço fechado (Linha de Base, Esquiva 1 e Esquiva 2) e aberto (Fuga 1) do aparelho; e no re-teste (72 h após) foram registrados a Esquiva 3 e a Fuga 2. Nossos resultados mostraram que a droga padrão DZP apresentou um efeito ansiolítico e/ou amnésico da memória de curta duração (STM) e a droga padrão PTZ um efeito ansiogênico e/ou facilitador na aprendizagem da esquiva inibitória. Por outro lado, a SP não apresentou per se efeito algum neste paradigma experimental. Na segunda etapa, os animais foram pré-tratados i.p. com DZP (1 mg/Kg) e tratados, pela mesma via, com Salina, SP (5 mg/Kg) ou PTZ (30 mg/Kg). Os resultados mostraram que o DZP continuou apresentando um efeito ansiolítico e/ou amnésico da STM da esquiva inibitória e que este efeito foi bloqueado e revertido tanto pelo PTZ como pela SP. Na terceira etapa, os animais foram pré-tratados i.p. com DZP (1 mg/Kg) e tratados via intracerebroventricular (i.c.v.) com SP (10 pmoL) ou PBS (controle). O DZP continuou apresentando seu(s) efeito(s) e este(s) efeito(s) sendo revertido(s) pela administração central de SP. Na quarta e última etapa, foi avaliado o envolvimento dos receptores NK1 na reversão do efeito ansiolítico e/ou amnésico produzido pelo DZP com a administração central de SP. Os animais foram pré-tratados com DZP (1 mg/Kg) i.p. e com FK 888 (100 pmoL) i.c.v. e na seqüência tratados i.c.v. com SP (10 pmoL) ou PBS. O FK 888, antagonista do receptor NK1, não interferiu per se no(s) efeito(s) do DZP, mas foi capaz de abolir a reversão do(s) efeito(s) do DZP induzido pela injeção i.c.v. de SP. A latência de fuga no teste e re-teste, bem como a memória de longa duração da esquiva inibitória não foi afetada pelos diferentes tratamentos em nenhuma das etapas experimentais avaliadas no LT. Em resumo, nossos resultados mostraram que o LT não é um modelo sensível aos efeitos tipo ansiogênico e facilitador dos processos mnemônicos da SP, além de ratificarem a interação existente entre os sistemas GABAérgico e taquicinérgico, já mostrada em outros modelos experimentais, na modulação da ansiedade e memória no LT.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-22T00:07:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Foi avaliado o efeito da dotarizina (10 mmo/Kg, i.v.), um bloqueador de canais de cálcio, sobre o extravasamento plasmático induzido pela substância P (10 nmol/Kg, i.v.), bradicinina (1 nmol/Kg, i.v.) e serotonina (300 nmol/Kg, i.v.) na dura-máter e sistema nervoso central de ratos (cerebelo e córtex). A substância P, a bradicinina e a serotonina, aumentaram o extravasamento plasmático na dura-máter de modo dose relacionado, sem alterar o extravasamento plasmático basal no cerebelo e córtex. O pré-tratamento com dotarizina bloqueou o extravasamento plasmático induzido por estes mediadores inflamatórios na dura-máter de ratos.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-20T13:37:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 196919.pdf: 1245563 bytes, checksum: e5b57000d33d53abd6813beb3add944c (MD5) / O presente estudo investigou a relação entre as [taquicininas], em especial a [substância P] e situações de [estresse], avaliando respostas comportamentais no [labirinto em cruz elevado] (LCE) e na distribuição de [leucócitos] em camundongos. Nossos resultados mostraram que as fêmeas são mais sensíveis à administração central de SP, apresentando efeitos do tipo ansiogênicos mais evidentes que os dos machos, além de linfopenia, leucopenia. Os pré-tratamentos farmacológicos com aminoglutetimina, propranolol e naloxona sugerem uma participação dos glicocorticóides e dos b-adrenoceptores, mas não dos receptores opióides do tipo m, na modulação dos efeitos estudados, em animais submetidos ao estresse de natação e também naqueles tratados com SP centralmente. Ambos os grupos submetidos ao estresse de natação ou tratados centralmente com SP têm seus efeitos comportamentais e sangüíneos inibidos pelo pré-tratamento com um [antagonista do receptor taquicinérgico NK1] (FK-888) e do [antagonista de receptor de interleucina IL-1b] (??IL-1ra)?, indicando que uma via comum provável entre as alterações comportamentais e fisiológicas produzidas pela SP e pelo estresse seria via liberação de [citocinas].