A biodisponibilidade de um fármaco é o fator determinante da eficácia clínica e depende principalmente das seguintes etapas: liberação da substância ativa a partir da forma farmacêutica e absorção. Assim, o controle da extensão e da velocidade de absorção de um fármaco administrado por via oral depende basicamente de dois aspectos: solubilidade nos líquidos fisiológicos e permeabilidade através das membranas biológicas. Fundamentado nestas características, o Sistema de Classificação Biofarmacêutica (SCB) foi proposto como ferramenta que permite a classificação dos fármacos e tem como finalidade auxiliar nas bioisenções e na predição da biodisponibilidade in vivo. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a solubilidade da estavudina e a permeabilidade intestinal de fármacos antirretrovirais por meio do modelo de perfusão in situ. Os meios empregados nos estudos de solubilidade e dissolução intrínseca foram: água purificada, tampão pH 1,2, tampão pH 4,5, tampão pH 6,8 e tampão pH 7,5. Para a determinação da solubilidade pelo método do equilíbrio (técnica shake-flask), quantidades conhecidas do fármaco foram adicionadas em cada meio até atingir a saturação e esta mistura foi submetida à agitação de 150 rpm por 72 horas a 37°C. Para os ensaios de dissolução intrínseca, quantidade conhecida de estavudina foi compactada na matriz do aparato de Wood e submetida à dissolução em cada meio, sob agitação de 50 rpm a 37°C. A determinação da permeabilidade dos antirretrovirais foi realizada empregando o modelo de perfusão in situ em ratos machos Wistar. Uma porção do jejuno foi isolada e a solução de perfusão (pH 6,5) contendo o fármaco foi perfundida a um fluxo de 0,2 mL.min-1 a 37°C por 120 minutos. Os resultados obtidos referentes à solubilidade da estavudina pelo método do equilíbrio foram (em mg.mL-1): 146,49 (água), 149,22 (pH 4,5), 139,43 (pH 6,8) e 130,15 (pH 7,5). A determinação da razão dose:solubilidade (D:S) em cada meio permitiu a obtenção dos seguintes resultados (em mL): 0,27 (água), 0,27 (pH 4,5), 0,29 (pH 6,8) e 0,31 (pH 7,5). Tais dados indicaram que este fármaco apresenta alta solubilidade nos meios utilizados no estudo, exceto em meio pH 1,2, onde a estavudina apresentou instabilidade demonstrada pela presença de coloração e odor alterados, inviabilizando a determinação da solubilidade nestas condições. Os ensaios de dissolução intrínseca da estavudina permitiram a determinação das taxas de dissolução intrínseca (TDI), as quais foram (em mg/min/cm²): 2,3570 (água), 2,7389 (pH 1,2), 2,7590 (pH 4,5) e 2,5947 (pH 6,8), demonstrando que este fármaco apresenta alta velocidade de dissolução nos meios utilizados. Com relação ao estudo de permeabilidade por meio do modelo de perfusão in situ, nas condições experimentais empregadas, os resultados obtidos foram (em cm.s-1): 3,96 x 10-5 (estavudina), 3,08 x 10-5 (lamivudina) e 4,17 x 10-5 (zidovudina) sugerindo que os fármacos estavudina e zidovudina apresentam alta permeabilidade. Para a lamivudina não é descartada a possibilidade de ser considerada como fármaco de alta permeabilidade, mesmo apresentando resultado ligeiramente abaixo em relação aos outros dois antirretrovirais utilizados no estudo. / Drug\'s bioavaliability is a determinant factor of clinical efficacy and it depends on the following steps: release of active ingredient from the dosage form and absorption. Thus, control of extend and rate of absorption of a drug orally administered depends on two aspects: the drug solubility in physiological fluids and permeability across biological membranes. Based on these characteristics, the Biopharmaceutical Classification System (BCS) was proposed as a tool that allows the drug\'s classification and it assists in biowaiver and in vivo bioavailability prediction. The aim of this study was to evaluate stavudine solubility and intestinal permeability of antiretroviral drugs through the in situ perfusion model. The means employed in the solubility studies and intrinsic dissolution were: purified water, buffer pH 1.2, buffer pH 4.5, buffer pH 6.8 and buffer pH 7.5. For solubility study by equilibrium method (shake-flask technique), known amounts of the drug were added in each media to reach saturation and the mixture was subjected to agitation of 150 rpm for 72 hours at 37°C. For intrinsic dissolution test, known amount of stavudine has been compressed in the matrix of Wood\'s apparatus and subjected to dissolution in each media with agitation of 50 rpm at 37°C. Permeability evaluation of antiretroviral drugs was performed using the in situ perfusion model in male Wistar rats. A portion of jejunum was isolated and perfusion solution (pH 6.5) with the drug was perfused at 0.2 mL/min at 37°C for 120 minutes. Results of stavudine solubility by equilibrium method were (in mg/mL): 146.49 (water), 149.22 (pH 4.5), 139.43 (pH 6.8) and 130.15 (pH 7.5). Dose:solubility (D:S) ratio determinations allowed to obtain the following results (in mL): 0.27 (water), 0.27 (pH 4.5), 0.29 (pH 6.8) and 0.31 (pH 7.5). These results indicate that stavudine has high solubility in the means employed in this study, except in buffer pH 1.2, where stavudine showed instability demonstrated by presence of stain and odor changed, which prevented the determination of solubility in these conditions. The intrinsic dissolution study allowed the determination of intrinsic dissolution rates (IDR), which were (in mg/min/cm²): 2.3570 (water), 2.7389 (pH 1.2), 2.7590 (pH 4.5) and 2.5947 (pH 6.8), demonstrating that this drug has a high dissolution rate in each media used. In permeability study through the in situ perfusion model, under experimental conditions adopted, the results obtained were (in cm/s): 3.96 x 10-5 (stavudine), 3.08 x 10-5 (lamivudine) and 4.17 x 10-5 (zidovudine), suggesting that stavudine and zidovudine have high permeability. It\'s possible that lamivudine might be considered high permeability drug, although its effective permeability result was slightly lower compared to effective permeability of stavudine and zidovudine.

O estudo das propriedades físico-químicas é essencial na fase de otimização e desenvolvimento de substâncias bioativas. A lipofilia e a estabilidade química de candidatos a fármacos são extremamente importantes e devem ser determinadas nas fases iniciais da descoberta de fármacos. A determinação da lipofilia dos compostos bioativos foi feita utilizando Membrana Artificial Imobilizada (IAM) para obtenção do logKw. Já a bioanálise qualitativa da estabilidade química de algumas substâncias em meio de cultura foi estudada utilizando um sistema RP-HPLC-MS com fonte de ionização eletrospray e analisador ion trap. Estruturas químicas de dipeptidil nitrilas foram sintetizadas pelo grupo tendo como alvo a inibição de cisteíno proteases a fim de combater a Doença de Chagas e alguns tipos de carcinomas. O trabalho foi realizado a fim de expandir as análises para uma série de derivados do NEQ0409 de forma que foi estabelecido um mapa com aumento da lipofilia de acordo com as modificações estruturais nas substâncias. Desta maneira foi possível obter uma relação estrutura-propriedade (SPR), além da análise do perfil de degradação e/ou estabilidade de algumas das substâncias de interesse, demonstrando que as substâncias analisadas apresentam potencial para continuarem na fase de desenvolvimento. / The study of physicochemical properties is essential in the optimization and development phases of bioactive substances. The lipophilicity and chemical stability of drug candidates are extremely important and should be determined in the initial steps of the drug discovery program. Therefore, the determination of the lipophilicity of the bioactive compounds was done using immobilized artificial membrane (IAM) to obtain logKw. Furthermore, the qualitative bioanalysis of the chemical stability of some substances in culture medium was studied using a RP-HPLC-MS system with electrotropray ionization source and ion trap analyzer. A series of dipeptidyl nitriles was synthesized by the group aiming to inhibit cysteine proteases as an alternative therapeutic approach for Chagas disease and some types of carcinomas. The work was carried out to expand the analyses for a series of derivatives of NEQ0409, so that a map of dipeptidyl nitriles with higher lipophilic characteristics was established according to the substituents of the new compounds. In this way, it was possible to obtain a structure-property relationship (SPR), besides the analysis of the degradation and/or stability profile of some of the substances of interest. All-in-all, these results suggest that dipeptidyl nitrile derivatives are potential candidates for further development.

INTRODUÇÃO: O estudo das lesões mamárias teve um grande avanço com o uso da Ressonância Magnética com contraste. Contudo, muitos achados ainda são comuns nas lesões benignas e malignas, muitas vezes sendo difícil sua diferenciação. O objetivo deste estudo foi estudar a permeabilidade vascular e o volume extra-celular (VEC) nas lesões nodulares benignas e malignas da mama, para verificar se isto poderia aumentar a diferenciação destas lesoes. Para isto, utilizamos o aplicativo do Full Time Point (FTP), que utiliza a sequência dinâmica do contraste e converte em mapa de cores e calcula permeabilidade e VEC. MÉTODOS: Foram incluídas no estudo 31 pacientes, com 57 lesões nodulares, 29 malignas e 28 benignas. Todas as pacientes assinaram um termo de consentimento livre e esclarecido. As lesões foram primeiramente classificadas pelo radiologista leitor quanto à análise dinâmica do contraste de acordo com a classificação do BI-RADS®. Posteriormente, as mesmas lesões foram selecionadas com o programa do FTP que calculou permeabilidade vascular e VEC das lesões. RESULTADOS: Os resultados mostraram que a permeabilidade foi diferente para lesões malignas e benignas, com média de 1,209 (±0,424) para maligno e 0,394 (±0,210) para benigno. O VEC não mostrou diferença estatisticamente significativa entre lesões benignas e malignas, com média de 0,666 (±0,123) para maligno e 0,708 (±0,151) para benigno. Quando correlacionado com a classificação das lesões pelo BI-RADS®, evidenciamos também que as lesões tiveram permeabilidade diferente nas diferentes classificações , sendo de 0,39 (±0,22) para BI-RADS®3, 0,56 (±0,39) para BI-RADS® 4 e 1,29 (±0,37) para BI-RADS® 5, mostrando que nas lesões com maior malignidade, a permeabilidade foi maior. O VEC não foi diferente nas diversas classificações do BI-RADS®. CONCLUSÕES: O estudo nos permite concluir que a permeabilidade vascular pode ser um bom discriminante na diferenciação das lesões benignas e malignas da mama. Contudo, o mesmo não ocorreu com o VEC. / INTRODUCTION: There has been a great development in the study of breast lesions with the use of contrast-enhanced magnetic resonance. However, several findings are common in malignant and in benign lesions turning their differentiation difficult. The objective of this research was to study the vascular permeability and the extracellular volume fraction (EVF) to verify if these characteristics increase the differentiation between benign and malignant lesions. The Full Time Point application that converts contrast dynamic sequence in color hue maps to calculate permeability and EVF was used for this purpose. METHODS: 31 patients were included in this study with 57 lesions, 29 malignant and 28 benign. All patients signed an informed consent form. First the lesions were classified by the reader radiologist by dynamic analysis according to BI-RADS® classification. Later, the same lesions were selected with the FTP program that calculated vascular permeability and EVF. RESULTS: Results showed that permeability was different for malignant and benign lesions, mean 1.209(±0.424) for malignant and 0.394 (±0.210) for benign. The EVF did not show statistically significant difference between benign and malignant lesions, mean 0.666 (±0.123) for malignant and 0.708 (±0.151) for benign. When compared to BI-RADS® classification, it was observed that lesions had different permeability in different classifications: 0,39 (±0.22) for BI-RADS® 3, 0.56 (±0.39) for BIRADS ® 4 and 1.29 (±0.37) for BI-RADS® 5. This showed that higher malignity lesions had higher permeability. EVF was not different in the different BI-RADS® classifications. CONCLUSION: It can be concluded that vascular permeabilitiy can be a good discriminant in differentiating breast malignant and benign lesions. However the same was not true for EVF.

Submitted by SBI Biblioteca Digital (sbi.bibliotecadigital@puc-campinas.edu.br) on 2018-04-10T19:01:59Z No. of bitstreams: 1 GIOVANNA FALZETTA RIZZO.pdf: 4328364 bytes, checksum: c9d6f46d59c6df71381b35bbaab4f27e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-10T19:01:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GIOVANNA FALZETTA RIZZO.pdf: 4328364 bytes, checksum: c9d6f46d59c6df71381b35bbaab4f27e (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado de S?o Paulo - FAPESP / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Civil construction is one of the industries that most impact the environment. The extraction of natural resources, the cement production, the concrete production and the use of its components, beyond the reckless generation of construction, materials that are often discarded as ?rubble?, affects directly affect the environment, the society and cities. Construction waste is already used in many European countries as recycled aggregates for concrete mix with for structural purposes. In Brazil, its use is still restricted to concrete without structural function, because the characteristics of the recycled aggregates can increase the permeability of the concrete. Due to the high porosity of the recycled aggregate when compared to the natural ones, it is expected that the concrete produced with the recycled aggregate higher porosity and consequently, fluids and gases will be easier to penetrate inside, directly affecting the durability and the useful life of reinforced concrete structures. In order for recycled aggregates to be a possible substitute for natural aggregates in the concrete mix for structural purposes, this work aims to study the parameters that affect the durability, determining and comparing through laboratory tests the physical and mechanical characteristics of concrete produced with different types of recycled aggregate. Four different types of coarse aggregates were defined for the accomplishment of this work, natural (AN), concrete (ARCO), cement-based materials aggregate (ARCI) and treated cement-based materials aggregate and two levels of natural aggregate replacement by aggregates recycled, 20 and 30% were employed. The concretes were tested in the ages of 7, 28, 90, 180 days and after 180 days of immersion in saline solution. The physical and mechanical characteristics of the concretes were determined, as well as indirect measurements of durability, such determination of air permeability, chloride ion penetration, carbonation and migration of chloride ions. The results indicated that concrete using recycled concrete aggregate (ARCO) produced 100% of crushed concrete presented characteristics similar to conventional concrete, and that the increase in the substitution content of 20 to 30% did not cause significant loss in concrete characteristics. As for the cement-based materials aggregate (ARCI), the results obtained for concrete with 30% substitution content were higher than for the concrete produced with the substitution content of 20%, and when compared to the conventional concrete the results presented by both concretes were inferior. However, for the substitution content of 30% even the results being inferior to the conventional concrete it presented good mechanical behavior. The concretes produced with the treated cement-based materials aggregate (ARCI Treated) did not present better performance than those with cement-based materials aggregate (ARCI) for most of the characteristics evaluated indicating that the proposed treatment was not adequate. / A constru??o civil ? uma das ind?strias que mais causam impacto ao meio ambiente. A extra??o desenfreada dos recursos naturais, a produ??o de cimento, a produ??o de concreto e a utiliza??o dos seus componentes, al?m da gera??o imprudente dos res?duos de constru??o civil, materiais esses que muitas vezes s?o descartados como ?entulho? afeta diretamente o meio ambiente, ? sociedade e ?s cidades. Os res?duos de constru??o civil j? s?o utilizados em muitos pa?ses da Europa como agregados reciclados para a mistura de concreto com fins estruturais. No Brasil, a sua utiliza??o ainda ? restrita a concretos sem fun??o estrutural, devido ? grande variabilidade do agregado reciclado, e o que elas influenciam nas caracter?sticas do concreto e em sua durabilidade. Devido ? alta porosidade do agregado reciclado quando comparado ao agregado natural, espera-se que o concreto produzido com o agregado reciclado apresente maior porosidade. E, consequentemente, flu?dos e gases possuam maior facilidade em penetrar em seu interior, afetando diretamente a durabilidade e a vida ?til das estruturas de concreto armado. Para que seja poss?vel a amplia??o no campo de consumo dos agregados reciclados, este trabalho tem como objetivo estudar os par?metros que afetam a durabilidade, determinando e comparando atrav?s de ensaios laboratoriais as caracter?sticas f?sicas e mec?nicas de concretos produzidos com diferentes tipos de agregado reciclado. Foram definidos quatro diferentes tipos de agregados gra?dos para a realiza??o deste trabalho, o natural (AN), o de concreto (ARCO), o ciment?cio (ARCI) e o ciment?cio tratado (ARCI Tratado) e dois teores de substitui??o do agregado natural pelos agregados reciclado: 20 e 30%. Os tra?os de concreto foram ensaiados para as idades de 7, 28, 90, 180 dias e ap?s 180 dias de imers?o em solu??o salina. Foram determinadas as caracter?sticas f?sicas e mec?nicas dos concretos, al?m de ensaios de medi??o indireta da durabilidade, como a determina??o da permeabilidade ao ar, penetra??o de ?ons cloreto, carbonata??o e migra??o de ?ons cloreto. Os resultados obtidos demonstram que concreto utilizando o agregado reciclado de concreto (ARCO) produzido com 100% de concreto britado apresentou caracter?sticas similares ao concreto convencional, e que o aumento no teor de substitui??o de 20 para 30% n?o ocasionou perda significativa nas caracter?sticas do concreto. Quanto ao agregado ciment?cio (ARCI), os resultados obtidos para o tra?o com teor de substitui??o de 30% foram superiores daqueles com o tra?o produzido com o teor de substitui??o de 20%, e quando comparados ao concreto convencional os resultados apresentados para ambos os tra?os foram inferiores. Por?m, para o teor de substitui??o de 30% mesmo os resultados sendo inferiores ao concreto convencional foi obtido um bom comportamento mec?nico. Os concretos produzidos de agregado ciment?cio tratado (ARCI Tratado) n?o apresentaram melhor desempenho que os com agregado ciment?cio (ARCI) para a maioria das caracter?sticas avaliadas indicando que o tratamento proposto n?o foi adequado.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARCOS ALVES DA SILVA.pdf: 1775464 bytes, checksum: e75c1a592914214c0e8e845737a1ed64 (MD5) Previous issue date: 2009-09-29 / Aquaculture activity, that s a source of protein with low cost, fills your space every day. Thus, there is an increase in water use which has caused major losses of this natural resource, when used irrationally. Soil variables should be studied, as instruments to minimize these losses, encouraging the rational use of these natural resources. This test was conducted in a Yellowish-red clayey Latosol in deep Nursery excavated for aquaculture aimed to evaluate three repetitions of soil permeability (k) and four repetitions of the density (SD) and total soil porosity (TP) under different levels of compression: uncompressed soil (SN), compacted soil with three (CS3), six (CS6) and nine (CS9) footfalls, respectively, of the compactor drum and three footfalls of this compactor on mixture of soil-cement at a rate of 6.6% (SCC). The witness was the native soil removed from the trench 1.5 m deep. Was concluded that the Tukey test (5%), the variables SD and TP showed significant differences between the treatment SN and treatments CS3, CS6, CS9 and SCC was statistically equal the treatment CS3, CS6, CS9 and SCC when compared with each other; for the variable K, showed a significant difference the treatments SN, CS3 and CS6 was statistically equal the treatments CS9 and SCC, considering the cost of treating SCC as a 100%, the treatment CS9 was equivalent to 7% of this cost, demonstrating its economic viability. / A atividade aquícola, por se tratar de uma fonte de proteína de baixo custo, vem ocupando seu espaço a cada dia. Com isso, há um aumento na utilização da água o que tem gerado maiores perdas desse recurso natural, quando usado de forma irracional. Variáveis do solo devem ser estudadas, como instrumentos para minimizar essas perdas, favorecendo o uso racional desses recursos naturais. Esse ensaio foi realizado em um Latossolo Vermelho Amarelo argiloso em fundo de viveiro escavado para a aqüicultura e teve como objetivo avaliar três repetições da permeabilidade do solo (k), e quatro repetições da densidade do solo (DS) e da porosidade total do solo (PT) submetidos a diferentes níveis de compactação: solo sem compactação (SN); solo compactado com três (SC3), seis (SC6) e nove (SC9) passadas, respectivamente, do compactador de percussão e ainda três passadas do compactador de percussão sobre a mistura de solo-cimento na proporção de 6,6% (SCC). A testemunha foi o solo natural retirado em trincheira a 1,5m de profundidade. Conclui-se que pelo teste Tukey (5%), as variáveis DS e PT apresentaram diferença significativa entre o tratamento SN e os tratamentos SC3, SC6, SC9 e SCC sendo estatisticamente iguais os tratamentos SC3, SC6, SC9 e SCC quando comparados entre si; para a variável K, apresentaram diferença significativa os tratamentos SN, SC3 e SC6 sendo estatisticamente iguais os tratamentos SC9 e SCC; considerando o custo do tratamento SCC como 100%, o tratamento SC9 foi equivalente a 7% desse custo, demonstrando sua viabilidade econômica.

A qualidade final do preparo do canal destaca-se, dentre outras condições, pela ausência de magma dentinário e pelo aumento da permeabilidade dentinária, de modo a permitir pela primeira, a falta de substrato para desenvolvimento de microbiota e melhor adaptação do material obturador e, pelo segundo a possibilidade de alcançar na maior profundidade do túbulo dentinário as sujidades ali eventualmente presentes e fazer com que a medicação intracanal atue plenamente no sistema endodôntico. Metodologias experimentais de avaliação dessas qualidades aferem isoladamente cada uma delas dificultando a percepção de que a interação de ambas poderia permitir compreender o seu real papel no êxito da terapia endodôntica. O objetivo deste estudo consistiu-se em criar um procedimento capaz de, no mesmo espécime dental, avaliar a presença de magma e o quanto de permeabilidade dentinária radicular se alcança após o preparo químico-cirúrgico e a irrigação-aspiração final com diferentes irrigantes. Quarenta dentes unirradiculares humanos foram preparados com instrumentos rotatórios e Endo-PTC + NaOCl a 1% e divididos em quatro grupos (n=10) no momento da irrigação-aspiração final de acordo com o irrigante a ser empregado: G I (controle) - NaOCl a 1%; G II - EDTA a 17%; G III - EDTA-T a 17% e G IV - MTAD®. Os canais foram preenchidos com azul de metileno a 0,5% e mantidos em frascos por 48 h. Decorrido este tempo, as coroas foram removidas e as raízes foram clivadas no sentido transversal obtendose fragmentos do terço cervical, médio e apical. Os espécimes foram fotografados e analisados no programa ImageLab quanto à penetração do corante. Após esta análise, os fragmentos foram novamente clivados no sentido longitudinal e preparados para MEV. As eletromicrografias foram analisadas por três diferentes avaliadores e qualificadas por escores. As substâncias irrigadoras utilizadas, quando comparadas entre si, tiveram efeitos semelhantes sobre a permeabilidade dentinária, considerando as raízes por inteiras e pelos seus terços. Na avaliação individual das substâncias irrigadoras, as diferenças de permeabilidade entre os terços radiculares não foram estatisticamente significantes, exceto para o EDTA-T cujo terço apical teve menor penetração do corante. Quando a substância irrigadora com ação quelante/desmineralizante foi empregada para irrigação-aspiração final do canal radicular, o magma dentinário foi eficientemente removido enquanto a irrigação somente com NaOCl não foi suficiente para remover o magma. Os três terços do canal radicular apresentaram o mesmo grau de limpeza das paredes da dentina radicular, exceto para o EDTA-T, cujo terço apical apresentou maior quantidade de magma quando comparado aos terços cervical e médio. A vinculação dos resultados estatísticos da permeabilidade dentinária com a remoção do magma dentinário não mostrou a mesma relação uniforme para as substâncias irrigadoras avaliadas, quer na sua totalidade quer nos seus terços, deduzindo-se que maior ou menor permeabilidade necessariamente não corresponde a menor ou maior presença de magma dentinário. As análises da permeabilidade dentinária e da remoção do magma dentinário, com aplicação inicial do corante seguido de processamento para MEV, mostraram-se viáveis nos mesmos espécimes radiculares. / After root canal preparation and removal of smear layer, penetration of intracanal dressing deep in dentinal tubules to reduce microbial growth is enhanced. Removal of smear layer also permits a more effective cleaning of organic tissue and bacteria from within the dentinal tubules and allows a better adaptation of obturation material along root canal walls. Other studies have evaluated smear layer removal and dentinal permeability in isolation on different specimens, making it difficult to interpret the interaction between smear layer and dentin permeability and their real roles in root canal treatment. The aim of this study was to create a procedure to evaluate the presence of smear layer and what its influence is on root dentin permeability after chemomechanical root canal preparation and final irrigation-aspiration with different chemicals using the same specimen. Forty single root human teeth were instrumented with rotary instruments and Endo-PTC + 1% NaOCl and ramdomly divided into four groups (n=10) at the final rinse step, according to the irrigant used: G I (control) - 1% NaOCl; G II - 17% EDTA; G III - 17% EDTA-T and G IV - MTAD®. The root canals were filled with 0.5% methylene blue and maintained in bottles for 48 h. After this time, the crowns were cut off and the roots were transversally split resulting in three fragments: coronal, middle and apical. The specimens were analyzed using ImageLab software to evaluate dye penetration. After this analysis, the fragments were then axially split and prepared for SEM. The photomicrographs were analyzed by three different evaluators and qualified by scores. When the whole roots were analyzed and the irrigants used were compared among themselves, the same effect on dentin permeability was observed. Individual evaluation of the irrigants showed, the differences in the permeability levels for all 3 root canal thirds were not statistically significant, except for the apical third of the EDTA-T irrigation group which exhibited less dye penetration. When a decalcifying irrigant was used for final rinse, the smear layer was efficiently removed. In contrast a final rinse with NaOCl was not enough to remove this layer. In all irrigation experimental groups the three different thirds of the root canals showed the same amount of smear layer removal, except for the EDTA-T group, which exhibited higher amounts of smear layer removal in the apical third compared to coronal and middle thirds. The results of both studies (dentin permeability and smear layer removal) did not show an even relationship for the irrigants evaluated, neither on their smear layer in the entire canal nor was it observed in each root canal thirds evaluated. This inferres that higher or lower dentinal permeability does not necessarily correspond to a higher or lower amount of smear layer presence. The Pearson correlation test supports these statements. The analysis of dentin permeability with initial introduction of a dye followed by the smear layer removal analysis under SEM, was shown to be a feasible procedure using the same root specimen.

A preocupação com a contaminação das águas subterrâneas está relacionada principalmente aos aquíferos não confinados, especialmente nos casos em que o nível freático é raso. Para evitar o escoamento subterrâneo lateral através de aterros de resíduos sólidos, o objetivo deste trabalho é avaliar – teoricamente e experimentalmente – uma técnica alternativa de encapsulamento, que consiste em uma barreira vertical de alta permeabilidade. Foi desenvolvida uma solução analítica para modelar o escoamento em uma barreira vertical cilíndrica instalada no entorno de um aterro localizado abaixo do nível d\'água, em um campo de fluxo uniforme, onde cada domínio (aquífero, barreira e área encapsulada) possui uma condutividade hidráulica diferente. Os resultados do estudo teórico mostram que nos casos em que o maciço de resíduos possui condutividade hidráulica maior do que o aquífero, a barreira de alta permeabilidade é a solução mais eficaz. Já nos problemas em que o aterro possui condutividade hidráulica menor do que o aquífero, a técnica mais indicada é a barreira de baixa permeabilidade. A partir do experimento em escala reduzida, conclui-se que a barreira de alta permeabilidade é uma técnica de encapsulamento eficiente para impedir o transporte advectivo através de determinada região. Segundo os resultados, a velocidade média do fluido na área encapsulada é consideravelmente menor do que a velocidade média no aquífero. Comparando com a barreira de baixa permeabilidade, a vantagem da barreira de alta permeabilidade é que o seu preenchimento é muito menos sensível às falhas, resultando em um melhor desempenho em longo prazo. / The concern about groundwater contamination is mainly related to unconfined aquifers, especially in the cases where the water table is shallow. Therefore, in order to prevent the groundwater lateral flow through landfills, this research evaluates – theoretically and experimentally – an alternative encapsulation technique, which consists in a vertical barrier of high permeability. An analytical solution was developed to model the flow for a cylindrical barrier installed around a landfill located below the groundwater table, in a field of uniform flow, where each domain (aquifer, barrier and encapsulated area) has a different hydraulic conductivity. The results from the theoretical study show that in situations where the landfill has a hydraulic conductivity higher than the aquifer, the high permeability barrier is more efficient. In contrast, in the cases where the landfill has a hydraulic conductivity lower than the aquifer, the lw permeability barrier is a more suitable technique. From the small-scale experiment, it is possible to conclude that the permeable barrier is an efficient encapsulation technique to prevent the advective transport through a certain region. According to the results, the fluid mean velocity at the encapsulated area is considerably lower than the aquifer mean velocity. Comparing to the low permeability barrier, the advantage of the high permeability barrier is that its backfill material is less sensitive to defects, resulting in a better long-term performance.

Chez les rongeurs rendus obèses par un régime hyper-lipidique, un changement du microbiote est associé à une altération de la perméabilité intestinale, augmentant le passage d’antigènes alimentaires ou bactériens et contribuant à une inflammation chronique de bas grade et une insulinorésistance. Cependant chez l’homme, les modifications de perméabilité intestinale, son impact sur les altérations métaboliques, inflammatoires systémiques et tissulaires sont peu documentées. L’objectif de ce travail est de caractériser la perméabilité intestinale (i.e. jéjunum) et les mécanismes impliqués dans sa régulation dans l’obésité humaine sévère en conditions de jeûne (basal) et après un apport aigu de lipides selon des approches complémentaires in vivo (biomarqueurs), ex vivo (chambre de Ussing, étude des protéines de jonctions serrées en immunofluorescence) et in vitro (lignée cellulaire Caco-2/TC7). A l’état basal nous avons observé une diminution de la localisation de l’occludine et de la tricelluline dans les jonctions serrées au niveau du jéjunum et des taux circulants en zonuline et LPS binding protéine plus élevés chez les obèses. La perméabilité Jéjunale basale mesurée ex vivo en chambre de Ussing était comparable entre obèses et non obèses avec cependant des liens entre ces mesures et les paramètres de l’inflammation systémique chez les patients obèses (CRP et Haptoglobine). Une charge unique en lipides alimentaires, entrainait une augmentation rapide et significative de la perméabilité aux macromolécules (FITC-Dextran 4 kDa) in vitro et ex vivo, démontrant ainsi l’effet direct des lipides postprandiaux sur la barrière épithéliale. La perméabilité aux macromolécules après exposition aux lipides était plus élevée chez les patients obèses à fortiori diabétiques de type 2 et était associée à l’inflammation systémique (CRP) et intestinale (calprotectine fécale). Ainsi, nos résultats mettent en évidence un défaut de la barrière intestinale dans l'obésité caractérisée par une hyperperméabilité jéjunale démasquée par les lipides alimentaires et associée à l’inflammation et aux troubles métaboliques. / Intestinal barrier damage is associated with low-grade inflammation and metabolic impairment in rodent models of obesity. Whether intestinal permeability is altered in human metabolic disorders remains poorly investigated. Using a large cohort of well-characterized obese subjects and a human enterocyte model, we examined intestinal permeability in the basal state and after a challenge by a lipid load. We showed a reduction of occludin and tricellulin at jejunal tight junctions and increased serum levels of zonulin and LPS-Binding Protein in obese subjects. Jejunal permeability, directly measured in Ussing chambers in the fasting condition, was not significantly increased compared to non-obese subjects. Nevertheless, within the obese cohort, high permeability was associated with systemic inflammation (CRP and haptoglobin). A single lipid load increased permeability both in Caco-2/TC7 cells and ex vivo in human jejunum, demonstrating dietary lipids’ direct effects on the epithelial barrier. Permeability after the lipid load was significantly higher in the jejunum of obese subjects and associated with systemic and intestinal inflammation (CRP and fecal calprotectin) and type 2 diabetes. Thus, our results highlight an intestinal barrier defect in obesity, with a jejunal permeability increased by a lipid challenge and linked to inflammatory and metabolic impairments.

Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-05-23T17:29:40Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luisa Alegria Acevdo.pdf: 94001775 bytes, checksum: 540980ac516efddf6a2f2d366044e20b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T17:29:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luisa Alegria Acevdo.pdf: 94001775 bytes, checksum: 540980ac516efddf6a2f2d366044e20b (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O biovidro tem-se mostrado com um material que por sua bioatividade com organismo pode ser utilizado em diferentes condições clinicas, como é a hipersensibilidade dentinária cervical (HDSC). Os objetivos deste trabalho foram caracterizar as propriedades físicas, químicas, biológicas e redução da permeabilidade dentinária in vitro, de biovidros experimentais em micropartículas. Os biovidro com formulação 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6%P2O5 (Bv1) e suas diferentes composições, 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6%P2O5- K2CO3 (Bv2); 2Na2O.1CaO.3SiO2-6%P2O5-SrO (Bv3), sintetizados pelo método de fusão. Os biovidro comerciais 45S5® (Bv4) e o Biosilicato®(Bv5) foram usados como controle. Todos os biovidros foram caraterizados em microscopia eletrônica de varredura por efeito de campo, espectrofotometria no infravermelho com transformação de Fourier, difração de raio X e espectroscopia de micro-Raman para confirmar sua composição química, a cristalinidade e formato das micropartículas. Nos testes biológicos em cultura de células com fibroblastos 3T3; os biovidros foram colocados em contato com o meio de cultura em 3 concentrações (100, 10 e 1 mg/mL) e foi usado o sobrenadante como meio de cultura nas placas de 96 poços, avaliou se a proliferação celular em presença dos matérias. O efeito antimicrobiano foi avaliado com as amostras dos patógenos Staphylococcus aureus ATCC® 25923, Escherichia coli ATCC® 25922, Pseudomona aeruginosa ATCC 27853. Foi realizado o teste de microdiluição e avaliou-se a concentração inibitória mínima (CIB) e concentração bactericida mínima (CBM). Na redução da permeabilidade dentinária foi usado dentina bovina. Foi avaliada a permeabilidade mínima, permeabilidade máxima (após aplicação EDTA 24%) e permeabilidade final (após aplicação do materiais). As amostras foram armazenadas em estufa (37ºC) em placas de 24 poços com saliva artificial, sendo submetidas ou não à escovação simulada. Os testes mostraram que todos os materiais presentavam características compatíveis com o biovidro. Na cultura celular houve uma aumento na proliferação, com uma diferencia significativa (P<0,0001) entre os grupos Bv1–10 e 1 mg/mL, Bv4 – 10 mg/mL e Bv5 – 1 mg/mL. Os biovidro Bv3 apresentou efeito antimicrobiano, no entanto não foi estatisticamente significativo comparado ao controle positivo (clorexidina 0,12%). Todos os materiais conseguiram reduzir a porcentagem de permeabilidade dentinária (diferença significativa) considerando os fatores grupo (biovidros) e tratamento (com e sem escovação simulada). Conclui-se que os biovidros não foram citotóxicos em baixas concentrações, não apresentaram grande potencial antimicrobiano. Os biovidros apresentaram redução da permeabilidade dentinária. / Bioglass has been shown as a bioactive material, in contact with human body. It can be used in several clinical dental conditions, such as cervical dentine hypersensitivity (CDHS). The objectives of this present study were to characterize the physical, chemical, biological behavior and dentin permeability reduction. The bioglass powder formulation: 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6% P2O5 (BV1) and their different compositions, 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6% P2O5- K2CO3 (BV2); 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6% P2O5-SrO (Bv3) were synthesized by the melt method. Commercial bioglass 45S5® (BV4) and Biosilicate® (BV5) were used as controls positive. All bioactive glasses were characterized by scanning electron microscopy by field effect, infrared spectroscopy with Fourier transform, X-ray diffraction and spectroscopy micro-Raman to confirm the crystallinity and microstructure and chemical composition. Biocompatibility test: cell culture (3T3 fibroblasts); the bioactive glasses were placed in culture medium in three concentrations (100, 10 and 1 mg/mL) and the supernatant was used to evaluate cell proliferation. The antimicrobial effect was evaluated with Staphylococcus aureus (ATCC® 25923), Escherichia coli (ATCC® 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) were tested by microdilution, minimum inhibitory concentration (CIB) and minimum bactericidal concentration (MBC). The dentin permeability reduction was evaluated on bovine dentine in 3 stages: minimum permeability, maximum permeability (after EDTA 24%) and permeability final (after biomaterial). The samples were stored in 24-well plates (37.5oC) in artificial saliva with and no simulated brushing. The results showed all biomaterials had similar bioglass characteristics. In cell culture there was an increase in proliferation (significant difference between the Bv1-10 groups and 1 mg / ml, BV4 - 10 mg / ml and BV5 - 1 mg / ml. The bioglass Bv3 presented antimicrobial effect not statistically significant compare to the positive control (0.12% chlorhexidine). All biomaterials were promoted dentin permeability reduction, however there was a significant difference considering the group factors (bioactive glasses) and treatment (with and without brushing simulated). Considering the results it can be conclude that bioactive glasses were not cytotoxic; not show a broad spectrum antimicrobial however should be carried out other methodologies, all experimental bioglasses show dentin permeability reduction. !

Collagen scaffolds are porous structures which are used in bioreactors and in a wide range of tissue engineering applications. In these contexts, the scaffolds may be subjected to conditions in which fluid is forced through the structure and the scaffold is simultaneously compressed. It is clear that fluid transport within collagen scaffolds, and the inter-relationships between permeability, scaffold structure, fluid pressure and scaffold deformation are of key importance. However, these relationships remain poorly understood. In this thesis, a series of isotropic collagen structures were produced using a freeze-drying technique from aqueous slurry concentrations 0.5, 0.75 and 1 wt%, and fully characterised using X-ray micro-tomography and compression testing. It was found that collagen wt% influenced structural parameters such as pore size, porosity, relative density and mechanical properties. Percolation theory was used to investigate the pore interconnectivity of each scaffold. Structures with lower collagen fraction resulted in larger percolation diameters, but lower mechanical stiffness. Aligned collagen scaffolds were also produced by altering the freeze-drying protocol and using different types of mould materials and designs. It was found that a polycarbonate mould with stainless base resulted in vertically aligned structures with low angular variation. When compared with isotropic scaffolds from slurry of the same concentration, aligned scaffolds had a larger percolation diameter. Tortuosity was used as a mathematical tool to characterise the interconnected pathways within each porous structure. The effect of the size of the region of interest (ROI) chosen and the size of the virtual probe particle used in the analysis on the values of tortuosity calculated were determined and an optimised calculation methodology developed. Increasing the collagen fraction within isotropic scaffolds increased the tortuosity, and aligned structures had smaller tortuosity values than their isotropic counterparts. Permeability studies were conducted using two complementary experimental rigs designed to cover a range of pressure regimes and the results were compared with predictions from mathematical models and computational simulations. At low pressures, it was found that the lower collagen fraction structures, which had more open morphologies, had higher permeabilities. Alignment of the structure also enhanced permeability. The scaffolds all experienced deformation at high pressures resulting in a restriction of fluid flow. The lower collagen fraction scaffolds experienced a sharper decrease in permeability with increased pressure and aligned structures were more responsive to deformation than their isotropic counterparts. The inter-relationships between permeability, scaffold structure, fluid pressure and deformation of collagen scaffolds were explored. For isotropic samples, permeability followed a broad $(1- \epsilon)^2$ behaviour with strain as predicted by a tetrakaidecahedral structural model, with the constant of proportionality changing with collagen fraction. In contrast, the aligned structures did not follow this behaviour with the permeability dropping much more sharply in the early stages of compression. Open-cell polyurethane (PU) foams, sometimes used as dressings in wound healing applications, are often compared with collagen scaffolds in permeability models and were used in this thesis as a comparison structure. The foam had a higher permeability than the scaffolds due to its larger pore sizes and higher interconnectivity. In the light of the effects of compression on permeability, the changes in porous structure with compression were explored in isotropic and aligned 0.75 wt% scaffolds. Unlike the fluid flow experiments, these experiments were carried out in the dry state. Deformation in simple linear compression and in step-wise compression was studied, and the stress relaxation behaviour of the scaffolds characterised. A methodology was developed to characterise the structural changes accompanying compression using X-ray micro-tomography with an in situ compression stage. The methodology accounted for the need for samples to remain unchanged during the scan collection period for stable image reconstruction. The scaffolds were studied in uniaxial compression and biaxial compression and it was found that pore size and percolation diameter decreased with increasing compressive strain, while the tortuosity increased. The aligned structure was less affected than the isotropic at low compressions, in contrast to the results from the permeability study in which the aligned structure was more responsive to strain. This suggests that the degree of hydration may affect the structural changes observed. The insights gained in this study of the inter-relationships between microstructure, fluid dynamics and deformation in collagen scaffolds are of relevance to the informed design of porous structures for medical applications.