Submitted by Fabricia Fialho Reginato (fabriciar) on 2015-06-19T00:42:30Z No. of bitstreams: 1 Adriano_cunha.pdf: 1713625 bytes, checksum: 4051e5f692695e5d9a97621c1f013019 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-19T00:42:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adriano_cunha.pdf: 1713625 bytes, checksum: 4051e5f692695e5d9a97621c1f013019 (MD5) Previous issue date: 2014-07-30 / Nenhuma / Inúmeros benefícios para a saúde humana podem ser adquiridos na dieta através de alimentos com teores substantivos de compostos bioativos. Dentre os alimentos que mais se destacam, estão aqueles que possuem níveis significativos de vitamina C (ácido ascórbico), vitamina E (α-tocoferol), carotenóides e compostos fenólicos, em especial os flavonóides. Provenientes dos metabólitos secundários das plantas, estes compostos são capazes de combater reações em cadeia danosas ao organismo humano. De acordo com a literatura, é possível encontrar inúmeras propriedades benéficas extraídas em sementes de plantas germinadas, capazes de retardar ou impedir os danos oxidativos nas células causados pela ação dos radicais livres. Processos complexos ocorrem durante o evento da germinação, entre eles a reorganização de membranas e organelas, o aumento na atividade respiratória, a síntese e o consumo de ATP, a síntese de proteínas e de mRNAs e a ativação de enzimas. O objetivo deste estudo foi analisar o perfil de compostos fenólicos e a atividade antioxidante em grãos comestíveis de cereais de trigo (Triticum eastivum L.) e cevada (Hordeum vulgare), em diferentes dias de germinação, utilizando as técnicas de determinação do conteúdo de compostos fenólicos, e da atividade antioxidante pelos radicais ABTS (ácido 2,2-azino-bis(3-etilbenzotiazolin)-6-sulfônico) e DPPH (2,2-difenil-1-picrilidrazil). Os resultados mostraram que a germinação aumentou os níveis de compostos fenólicos totais, bem como a atividade antioxidante das sementes, nos diferentes dias do processo de germinação. Registros de períodos de picos foram significativos para ambas amostras a partir do quarto dia de germinação. É possível perceber que o processo de germinação de sementes é uma eficaz técnica de manipulação para as sementes com a intenção de obter compostos bioativos importantes para manutenção da saúde humana. / Numerous benefits to human health can be acquired in the diet through foods with significant amounts of bioactive compounds. Among the foods with the best performance are those with significant levels of vitamin C (ascorbic acid), vitamin E (α-tocopherol) and carotenoids phenolic compounds, particularly the flavonoids. From the secondary plant metabolites, these compounds are able to combat harmful reactions in the human body chain. According to the literature, one can find numerous beneficial properties extracted seeds germinated plants, able to delay or prevent oxidative damage to cells caused by the action of free radicals. Complex processes occurring during germination event, including reorganization of the membrane and organelles, increasing the respiratory activity, synthesis and consumption of ATP, protein synthesis, and mRNAs and activation of enzymes. The aim of this study was to analyze the profile of phenolic compounds and antioxidant activity in edible seeds of cereals wheat (Triticum eastivum L.) and barley (Hordeum vulgare), on different days of germination, using the techniques of determination of total phenolic compounds, and the antioxidant activity from the ABTS (ácido 2,2-azino-bis(3-etilbenzotiazolin)-6-sulfônico) e DPPH (2,2-difenil-1- picrilidrazil) radicals. Our results showed that germination increased the levels of phenolic compounds, as well as the antioxidant activity of the seeds in the different days of the processo of germination. Records peak periods were significant for both samples from the fourth day of germination. The process of seed germination is an effective technique for handling the seeds with the intention of getting important bioactive compounds for maintaining human health.

Neste estudo foi proposto o desenvolvimento de um software para automatizar o processo de estimativa da incerteza de medição pelo método descrito no Guia EURACHEM. Com a finalidade de testar a eficácia do software, foi desenvolvido um procedimento analítico para a determinação de compostos fenólicos na água subterrânea do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares a fim de se obter dados reais de um processo. Para tanto, a determinação dos compostos foi realizada por cromatografia gasosa acoplada ao detector de espectrometria de massas, GC/MS. Para garantir a qualidade dos dados gerados, o procedimento analítico foi submetido ao processo de validação, onde foram avaliados os parâmetros: seletividade/especificidade, faixa de trabalho e faixa linear de trabalho, linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, precisão, exatidão, recuperação e robustez. A estimativa da incerteza da medição foi realizada pelo software desenvolvido e manualmente, confirmando que o mesmo é adequado para o processo. Além disso, o software foi testado utilizando dados da literatura, o que confirmou sua eficácia. Os resultados da análise da água subterrânea demonstraram que não há a presença de compostos fenólicos nos níveis estudados. A utilização de sistemas automatizados para a estimativa da incerteza diminui ou minimiza erros sistemáticos e permite trabalhar com mais organização e controle do processo. / A software development to automate the process of uncertainty measurement by the method described by the Guide EURACHEM is proposed. In order to test the effectiveness of the software, an analytical procedure for phenolic compounds determination in the ground water was developed. Water samples were collected at Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN, São Paulo, Brazil) campus area. The determination of compounds was performed by gas chromatography coupled to mass spectrometry detector (GC / MS). To ensure the quality of the generated data, the analytical procedure was submitted to a validation process. The evaluated parameters were: selectivity / specificity, working range and linear range, linearity, detection limit, quantification limit, precision, recovery and robustness. The uncertainty measurements were performed by the software and manually, confirming that it is suitable for the process. Moreover, the software was tested using literature data, which confirmed its effectiveness. The results of the ground water analysis showed that there are no phenolic compounds within the studied levels. The use of automated systems for the uncertainty estimation is very promising because it reduces or minimizes systematic errors and allows working in a more organized way and with the process under control.

Os compostos fenólicos pertencem a um grupo tóxico de poluentes ambientais descartados do processo de muitas indústrias tais como refinarias de óleo e indústrias químicas. Embora o fenol possua ação bactericida, alguns micro-organismos adquiriram a habilidade de se adaptar e utilizar este composto como fonte de carbono e energia, através do controle coordenado de vias metabólicas (catabólicas). A expressão destas vias pode ser regulada por: mecanismos de controle globais ou por uma via específica de resposta controlada, porém estes mecanismos ainda não são bem compreendidos. O presente trabalho pretendeu isolar e identificar micro-organismos de um ambiente contaminado para tratamento biológico de efluentes fenólicos, bem como analisar o padrão de proteínas citosólicas expressas em função da exposição à duas diferentes fontes de carbono (glicose ou fenol). As linhagens isoladas de Cubatão-SP foram identificadas pela amplificação e sequenciamento do gene 16S DNAr, resultando em 100 % de similaridade com os gêneros Achromobacter e Pandoraea. Os ensaios de biodegradação em diferentes concentrações de fenol (200 a 600 mg.L-1) mostraram que as duas linhagens foram capazes de degradar 100 % do fenol. As proteínas expressas por Achromobacter sp. em resposta ao fenol foram submetidas a eletroforese 2D e os resultados sugerem que a biodegradação do fenol foi realizada através da meta clivagem do anel aromático, pois três enzimas desta via foram identificadas (proteína degradação do fenol via meta- clivagem, 2- hidroximucônico semialdeído desidrogenase 1 e 4-hidroxi-2-oxovalerate aldolase). Outras enzimas envolvidas no metabolismo celular também foram identificadas, reforçando a hipótese que o fenol altera todo o metabolismo celular, envolvendo as mais diferentes vias metabólicas para que a célula possa superar o estresse celular ocasionado por esta exposição. / Phenolic compounds belong to a group of toxic environmental pollutants discharged from the process in many industries such as oil refineries and chemical plants. Although phenol has bactericidal action, some microorganisms acquired the ability to adapt and use this compound as a source of carbon and energy, through the coordinated control of metabolic pathways (catabolic). The expression of these pathways may be regulated by: control mechanisms via a global or specific response, but these mechanisms are not well understood. This work aims to isolate and identify micro-organisms from a contaminated environment for biological treatment of phenolic wastewaters, as well as analyzing the pattern of cytosolic proteins expressed in terms of exposure to two different carbon sources (glucose or phenol). The strains isolated from Cubatao-SP were identified by amplification and sequencing of 16S rDNA, resulting in 100% similarity with the genera Achromobacter and Pandoraea. The biodegradation assays at different concentrations of phenol (200 to 600 mg.L-1) showed that both strains were able of degrading 100% of the phenol. The proteins expressed by Achromobacter sp. in response to phenol were subjected to 2D electrophoresis and the results suggest that the biodegradation of phenol was performed using the meta cleavage of the aromatic ring, once three enzymes of this pathway have been identified (protein degradation meta-cleavage pathway phenol, 2-hydroxymuconic semialdehyde dehydrogenase 1 and 4-hydroxy-2-oxovalerate aldolase). Other enzymes involved in cellular metabolism were also identified; reinforcing the hypothesis that phenol modifies the entire cellular metabolism, involving very different metabolic pathways for the cell can overcome stress caused by this exposure.

Algumas frutas nativas brasileiras podem ser consideradas excelentes fontes de compostos bioativos de natureza fenólica. Destacamos, dentre elas, o cambuci, o araçá, o camu-camu, a cagaita, algumas espécies de maracujá silvestres e a jabuticaba. Alguns destes compostos são capazes de inibir as enzimas do metabolismo de carboidratos in vitro. A inibição das enzimas α-amilase e α-glicosidase retardam e prolonga o tempo de digestão de carboidratos reduzindo, assim, a proporção e a velocidade de glicose absorvida e, consequentemente, o aumento brusco de glicose pós-prandial no plasma. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o efeito de sucos clarificados de frutas nativas brasileiras sobre a glicemia pós-prandial em seres humanos, após consumo de uma unidade de pão branco (Tipo pão francês com aproximadamente 55 g), e estudar o efeito dos compostos fenólicos purificados a partir dos sucos sobre as enzimas α-amilase e α-glicosidase in vitro. Os resultados obtidos mostraram que todos os sucos clarificados, excetuando-se o de maracujá-alho (Passiflora tenuifila Killip), tiveram efeito positivo sobre a glicemia pós-prandial, causando redução da quantidade total de glicose absorvida (cambuci (campomanesia phae O.Berg.), cagaita (Eugenia dysenterica DC), camu-camu (Myciaria dúbia Mc Vaugh) e araçá (Psidium guineensis Sw)), aumento no tempo para atingir a concentração sanguínea máxima de glicose (camu-camu e cambuci), diminuição na velocidade de incremento da glicose (cambuci, cagaita, camu-camu, araçá e jabuticaba (Myrciaria cauliflora Berg)) e diminuição do incremento percentual da glicose (todos os sucos exceto o de maracujá-alho). O consumo dos sucos causou ainda aumento da capacidade antioxidante do plasma. Os compostos fenólicos purificados a partir dos sucos testados foram capazes de inibir a atividade das enzimas α-amilase e α-glicosidase in vitro, sendo que, excetuando-se o suco de jabuticaba, todos foram mais eficientes que a acarbose na inibição da α-glicosidase / Some native Brazilian fruit can be considered excellent sources of bioactive compounds of phenolic nature. Featuring, among them, the cambuci, the araça, camu-camu, the cagaita, some species of wild passion and jabuticaba. Some of these compounds are able of inhibiting the enzymes of carbohydrate metabolism in vitro. Inhibition of the enzymes α-amylase and α-glycosidase slow and prolongs the digestion of carbohydrates, thus reducing the rate and velocity of glucose absorbed and therefore the sudden increase of postprandial glucose in plasma. The objectives of this study were to evaluate the effect of fruit juices clarified Brazilian native on postprandial glycemia in humans following consumption of a unit of white bread (French bread type with approximately 55 g), and study the effect of phenolic compounds purified from the juices of the enzymes α-amylase and α-glucosidase in vitro. The results showed that all juices clarified, except the passion fruit garlic (Passiflora tenuifila Killip), had a positive effect on postprandial glycemia, causing reduction in the total amount of glucose absorbed (cambuci (Campomanesia phae O.Berg .), cagaita (Eugenia dysenterica DC), camu-camu (Myciaria dubious Mc Vaughn) and araça (Psidium guineensis Sw)), increase in the time to reach maximum blood concentration of glucose (camu-camu and cambuci), decrease in speed of glucose increment (cambuci, cagaita, camu-camu, araça and jabuticaba (Myrciaria cauliflora Berg)) and decreased percentage increase in glucose (all except the passion garlic fruit juices). The consumption of juice also caused an increase in plasma antioxidant capacity. Phenolic compounds purified from the juices tested were able to inhibit the activity of enzymes α-amylase and α-glycosidase in vitro, and, except for the juice jabuticaba, all were more efficient than acarbose in inhibiting α- glycosidase

O cupuaçu (Theobroma grandiflorum Willd. Ex Spreng. K. Shum) é um fruto nativo brasileiro com boa palatabilidade e grande potencial agroeconômico. Suas sementes são usadas no preparo de um produto similar ao chocolate de cacau (Theobroma cacao L.), conhecido como cupulate®. Os benefícios do cacau à saúde cardiovascular são amplamente descritos. A proximidade filogenética entre cacau e cupuaçu sugere que este último poderia ter efeitos biológicos semelhantes. Entretanto não há estudos que avaliaram a influência do líquor de cupuaçu em doenças metabólicas. Aqui, nós comparamos a composição centesimal e mineral, os conteúdos de compostos fenólicos totais, proantocianidinas, flavonóides e a capacidade antioxidante in vitro dos líquores de cupuaçu e cacau. As composições, centesimal e mineral, de ambos foram semelhantes. Todos os outros parâmetros foram significativamente maiores no líquor de cacau, contudo, o perfil de flavonóides foi muito distinto. No cupuaçu predominaram os flavonóides derivados de quercetina enquanto que no cacau, as proantocianidinas corresponderam à maior classe de compostos fenólicos. Foram estudados os efeitos dos extratos fenólicos dos líquores de cupuaçu e cacau na atividade das enzimas α-amilase e glicosidase. As inibições das atividades enzimáticas foram semelhantes às relatadas na literatura para outras frutas. A fim de investigar a influência dos líquores de cupuaçu e cacau em algumas disfunções metabólicas, nós estudamos o efeito desses líquores em um modelo de ratos com diabetes induzida por estreptozotocina e em ratos alimentados com ração hiperlipídica (HL). A administração oral dos líquores nas doses de 3,6 e 7,2 g/kg de peso corpóreo a ratos diabéticos melhorou significativamente as atividades das enzimas antioxidantes, perfil lipídico e peroxidação lipídica de maneira dose-dependente. Semelhantemente, os extratos fenólicos dos líquores nas doses 2,1 e 7,2 g/kg de peso corpóreo administrados a animais alimentados com ração hiperlipídica reparou o dano hepático devido à melhora da peroxidação lipídica, capacidade antioxidante plasmática e tecidual com relação dose-dependente. Além disso, a sensibilidade a glicose e insulina nos animais alimentados com ração (HL) foram aumentadas pelo tratamento com a maior dose do extrato fenólico do líquor de cupuaçu. Embora o líquor de cacau possua maior conteúdo de compostos fenólicos e atividade antioxidante in vitro comparado ao cupuaçu, este último mostrou-se mais efetivo na redução do dano causado pela diabetes e dieta hiperlipídica. Essas contradições podem ser explicadas pela diferente composição fenólica entre os dois líquores. A análise conjunta desses resultados sugere que o líquor de cupuaçu, assim como o cacau, poderia auxiliar no tratamento de distúrbios metabólicos associados com o estresse oxidativo. / Cupuassu (Theobroma grandiflorum Willd. Ex Spreng. K. Shum) is a native brazilian fruit with good flavor and great agroeconomic potential. Its seeds are used to prepare a cocoa (Theobroma cacao L.) chocolate-like, known as cupulate®. The cocoa beneficial properties to cardiovascular health have been extensively described. Despite the phylogenetic similarity between cocoa and cupuassu suggests that the later could promote the same biological effects, no study has attempted to examine the role of cupuassu liquor on metabolic disorders. Here, we compared the centesimal and mineral composition, contents of total phenolic compounds, proanthocyanidins, flavonoids and in vitro antioxidant capacity of cupuassu and cocoa liquors. Centesimal and mineral compositions of both were similar. All the other parameters were significantly higher in cocoa liquor. However, flavonoids profile was quite different, where quercetin derivatives predominated in cupuassu whereas in cocoa, the proanthocyanidins corresponded to the major class of phenolic compounds. Studies were undertaken to determine the effect of phenolic extracts on α-amylase and glucosidase activities. The enzymatic activities inhibitions were close to that previously related to other fruits. To further investigate the role of cupuassu and cocoa liquors on metabolic disturbs, we assessed the effect of these liquors in streptozotocin-induced diabetic and high-fat diet (HFD) rats. Oral administrations of liquors at doses 3.6 and 7.2 g/kg body weight to diabetic rats improved significantly antioxidant enzymes activities, lipid profile and peroxidation in dose-dependent manner. Similarly, liquors phenolic extracts at doses 2.1 and 7.2 g/kg body weight administrated to HFD animals repaired the liver damage by ameliorating lipid peroxidation, plasma and tissue antioxidant capacities in dose dependence. Indeed, HFD animal sensitivity for glucose and insulin was markedly augmented in animals treated with the highest dose of phenolic extract of cupuassu. Although cocoa has higher content of phenolic compounds and in vitro antioxidant potential activity than cupuassu, the later showed more effectively in reducing the damage in animal models of diabetes and high-fat diet. These contradictions could be explained due to differences in phenolic composition in cupuassu and cocoa liquors. Taken together, these results suggest the cupuassu liquor, as well as cocoa liquor, could help in treatment of metabolic diseases associated with oxidative stress.

Duas espécies de Barbatimão, da família Leguminosae, foram utilizadas como modelo neste trabalho para elucidar as vias ontogenéticas de produção de taninos: Dimorphandra mollis Benth. (Caesalpinioideae) e Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Mimosoideae). Apesar de inseridas em grupos distantes de Leguminosae, as duas espécies são grandes produtoras de taninos, geralmente concentrados na casca, o que confere a elas uma grande procura para uso na medicina popular. Partes vegetativas de Indivíduos jovens e adultos foram processadas para observações em microscopia de luz e eletrônica (varredura e transmissão). Dois tipos de estruturas secretoras são responsáveis pela produção e acúmulo de taninos: idioblastos, encontrados já em indivíduos jovens de ambas espécies; e tricomas secretores, encontrados em gemas vegetativas de indivíduos adultos de S. adstringens. O processo de produção de taninos nas duas espécies é semelhante, com alguma diferença nas etapas de acúmulo. Plastídios e RER parecem ser as organelas associadas à produção de taninos nessas espécies. Destaca-se ainda o relato inédito da ocorrência de coléteres de origem protodérmica em D. mollis. Considerando a problemática referente à classificação de estruturas secretoras, pretende-se utilizar os resultados obtidos para reflexão sobre o tema / In this study, two species of Leguminosae, popularly known as Barbatimão, were used as a model to elucidate the ontogenetic process of tannin production: Dimorphandra mollis Benth. (Caesalpinioideae) and Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Mimosoideae). Although inserted in non-related groups of Leguminosae, the two species are largely known as tannin producers, a metabolite often concentrated in the bark, which makes them highly sought after for use in folk medicine. Vegetative parts of young and adult plants were processed for observation using light and electron microscopy (scanning and transmission). Two types of secretory structures are responsible for tannin production and accumulation: idioblasts, found even in young plants of both species, and secretory trichomes, observed in vegetative buds of mature plants of S.adstringens. Tannin production is similar in both species, although some differences in the stages of accumulation occur. Plastids and RER organelles appear to be associated with the production of tannins in these species. This study also provides the first report of colleters in D. mollis, which originate from protodermal cells. Considering the controversies regarding the classification and nomenclature of secretory structures, our results can be used to help clarify some issues regarding secretory structures, especially colleters

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2017-04-24T11:58:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertaçaofinalll.pdf: 1151891 bytes, checksum: 0b347b32b7f2948018d266fd346e3ed7 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-04T19:03:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertaçaofinalll.pdf: 1151891 bytes, checksum: 0b347b32b7f2948018d266fd346e3ed7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-04T19:03:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertaçaofinalll.pdf: 1151891 bytes, checksum: 0b347b32b7f2948018d266fd346e3ed7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O mel é um alimento natural e nutritivo, com elevado teor de carboidratos e água, contendo também quantidades menores de diversos ácidos orgânicos, enzimas, vitaminas, hormônios, flavonoides, proteínas, compostos aminados e outros elementos orgânicos e inorgânicos. Compostos fenólicos e carotenoides, mesmo estando em baixa concentração, conferem efeito anti-inflamatório, antioxidante e antimicrobiano ao produto, aumentando a imunidade e outras atividades fisiológicas do organismo. O teor e diversidade dos constituintes do mel são dependentes das condições regionais da área forrageada pelas abelhas. Assim, este trabalho teve por objetivo a determinação do perfil físico químico, de compostos bioativos e da atividade antioxidante de méis oriundos de mesorregiões do estado do Rio Grande do Sul. Para tanto, foram analisadas vinte e uma amostras de diferentes produtores do Sudoeste e Sudeste Rio-Grandense, quanto ao teor de cinzas, pH, acidez total, umidade, sólidos solúveis totais, cor, condutividade elétrica e açúcares, através de metodologias oficiais; além das avaliações de compostos fenólicos, flavonoides, carotenoides e atividade antioxidante, por espectrofotometria. Para a maioria das amostras, os parâmetros físico-químicos determinados se apresentaram dentro dos padrões brasileiros e internacionais. Os conteúdos de compostos fenólicos e de flavonoides das amostras avaliadas neste estudo reafirmam a qualidade dos méis. A análise de componentes principais permitiu agrupar amostras de acordo com sua origem geográfica, em dois grandes grupos, utilizando apenas seis parâmetros. Mesmo que a flora e as condições climáticas da zona geográfica estudada sejam semelhantes, este trabalho demonstra que pode ser possível classificar o mel por origem geográfica, o que contribuiria para conhecimento da rastreabilidade físico química deste produto. / Honey is a natural and nutritious food with a high content of carbohydrates and water, also containing smaller amounts of various organic acids, enzymes, vitamins, hormones, flavonoids, proteins, amino compounds and other organic and inorganic elements. Phenolic compounds and carotenoids, even in low concentration, confer anti-inflammatory, anti-oxidant and antimicrobial effect to the product, increasing the immunity and other physiological activities of the organism. The content and diversity of the constituents of honey are dependent on the regional conditions of the area foraged by the bees. The objective of this work was to determine the chemical physical profile, bioactive compounds and antioxidant activity of honey from mesoregions in the state of Rio Grande do Sul. Twenty one samples from different producers were analyzed of the Southwest and Southeast Rio-Grandense, as regards ash content, pH, total acidity, moisture, total soluble solids, color, electrical conductivity and sugars, through official methodologies; besides the evaluations of phenolic compounds, flavonoids, carotenoids and antioxidant activity, by spectrophotometry. For most of the samples, the physical and chemical parameters determined were within the Brazilian and International standards. The contents of phenolic compounds and flavonoids of the samples evaluated in this study reaffirm the quality of the honey. The analysis of main components allowed to group samples according to their geographical origin, in two large groups, using only six parameters. Even though the flora and climatic conditions of the geographical area studied are similar, this work demonstrates that should be possible to classify honey by geographical origin, which would contributes to the knowledge of the physical chemical traceability of this product.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-15T11:55:14Z No. of bitstreams: 1 Isabel Cristina Solano Guerra.pdf: 942122 bytes, checksum: 5683fa570313b58392de0fb4c7778348 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-15T11:55:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Isabel Cristina Solano Guerra.pdf: 942122 bytes, checksum: 5683fa570313b58392de0fb4c7778348 (MD5) Previous issue date: 2009-09-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study aimed to partially characterize the oxidative enzymes and quantify the phenolic compounds in fruits of three cultivars of yellow mombin (Spondias mombin L.) on maturation and mature green, installed in the Active Germplasm Bank of the Agricultural Research Company of Pernambuco - IPA. We used green and ripe fruits of genotypes IPA 2.1, IPA4.1 and IPA 6.1 with hard shell and, respectively, totally green and yellow coloring. After collection the fruits were transported, washed, sanitized and separated into: peel and pulp. Were determined soluble solids (SST), titratable acidity (ATT), pH and total phenolics. Then the crude extract was obtained using EDTA, CaCl2 and PEG 10,000 and the activity of peroxidase (POD) and polyphenoloxidase (PPO) were determined, as well as the quantification of soluble proteins. With the maturation of fruits were found to be a decrease in phenolic content and levels of ATT, an increased content of soluble solids and pH remained stable at various stages of pulp for genotype IPA 2.1 and IPA 4.1, while in There was a IPA 6.1 increase in pH during ripening. In caja fruit in both peel into the pulp in mature stage showed higher POD enzyme activity in the green maturity stage. Between average PPO activity in fruit peel and pulp of genotypes cajazeira in both maturity stages showed a significant difference, with higher activity in the bark, except for genotype IPA 4.1 green. Among the genotypes at maturity, which showed higher enzymatic activity for POD and PPO in the whole peel and pulp was IPA 6.1, except for genotype IPA 4.1 green. Through partial characterization of the pulp of genotype IPA 6.1 has been obtained the optimal pH and temperature of the enzymes POD and PPO, respectively, pH 7.0 and 50 ° C, pH 9.0 and 60 ° C. Both enzymes were stable at various pHs, from acidic and basic, keeping 100% of residual activity after 180 minutes. While the temperatures studied for the POD retained 100% of residual activity after 10 minutes and PPO showed relatively stable temperatures studied, maintaining 50% residual activity after 10 minutes at 90 ° C. The profile for POD and PPO enzyme obtained with the crude extract of the ripe pulp of genotype IPA 6.1 suggests the presence of isoforms. / Este estudo objetivou caracterizar parcialmente as enzimas oxidativas e quantificar os compostos fenólicos em frutos de três genótipos de cajazeira (Spondias mombin L.) nos estádios de maturação verde e maduro, instalados no Banco Ativo de Germoplasma da Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuária – IPA. Foram utilizados frutos verdes e maduros dos genótipos IPA 2.1, IPA 4.1 e IPA 6.1 com casca rígida e, respectivamente, de coloração totalmente verde e amarela. Após a coleta os frutos foram transportados, lavados, sanitizados e separados em: casca e polpa. Foram determinados os sólidos solúveis totais (SST), a acidez total titulável (ATT), o pH e os compostos fenólicos totais. Em seguida, o extrato bruto foi obtido utilizando-se EDTA, CaCl2 e PEG 10.000 e as atividades das enzimas peroxidase (POD) e polifenoloxidase (PPO) foram determinadas, como também a quantificação de proteínas solúveis. Com a maturação dos frutos detectou-se uma diminuição no teor de compostos fenólicos e nos teores de ATT, um aumento no conteúdo dos sólidos solúveis totais e o pH manteve-se estável nos diferentes estádios para polpa do IPA 2.1 e 4.1 , enquanto no genótipo IPA 6.1 houve um aumento no pH durante o amadurecimento. Em frutos de cajá tanto na casca quanto na polpa no estádio de maturação maduro a enzima POD apresentou maior atividade que no estádio de maturação verde. Entre as médias da atividade da PPO em casca e polpa dos frutos dos genótipos de cajazeira em ambos os estádios de maturação apresentou diferença significativa, com maior atividade nas cascas, exceto para o genótipo IPA 4.1 verde. Dentre os genótipos no estádio maduro, o que apresentou maior atividade enzimática para POD e PPO no conjunto casca e polpa foi o IPA 6.1, exceto para o genótipo IPA 4.1 verde. Através da caracterização parcial da polpa do genótipo IPA 6.1 foi obtido o pH e temperatura ótima das enzimas POD e PPO, respectivamente, pH 7,0 e 50ºC; pH 9,0 e 60ºC. Ambas as enzimas mostraram-se estáveis a vários pHs , entre ácidos e básicos, mantendo-se 100% de atividade residual após 180 minutos. Enquanto nas temperaturas estudadas, para a POD manteve 100% de atividade residual após 10 minutos e para PPO apresentou-se relativamente estável nas temperaturas estudadas, mantendo atividade residual de 50% após 10 minutos a 90ºC. O perfil enzimático para POD e PPO obtido com o extrato bruto da polpa madura do genótipo IPA 6.1 sugere a presença de isoformas.

Neste estudo foi proposto o desenvolvimento de um software para automatizar o processo de estimativa da incerteza de medição pelo método descrito no Guia EURACHEM. Com a finalidade de testar a eficácia do software, foi desenvolvido um procedimento analítico para a determinação de compostos fenólicos na água subterrânea do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares a fim de se obter dados reais de um processo. Para tanto, a determinação dos compostos foi realizada por cromatografia gasosa acoplada ao detector de espectrometria de massas, GC/MS. Para garantir a qualidade dos dados gerados, o procedimento analítico foi submetido ao processo de validação, onde foram avaliados os parâmetros: seletividade/especificidade, faixa de trabalho e faixa linear de trabalho, linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, precisão, exatidão, recuperação e robustez. A estimativa da incerteza da medição foi realizada pelo software desenvolvido e manualmente, confirmando que o mesmo é adequado para o processo. Além disso, o software foi testado utilizando dados da literatura, o que confirmou sua eficácia. Os resultados da análise da água subterrânea demonstraram que não há a presença de compostos fenólicos nos níveis estudados. A utilização de sistemas automatizados para a estimativa da incerteza diminui ou minimiza erros sistemáticos e permite trabalhar com mais organização e controle do processo. / A software development to automate the process of uncertainty measurement by the method described by the Guide EURACHEM is proposed. In order to test the effectiveness of the software, an analytical procedure for phenolic compounds determination in the ground water was developed. Water samples were collected at Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN, São Paulo, Brazil) campus area. The determination of compounds was performed by gas chromatography coupled to mass spectrometry detector (GC / MS). To ensure the quality of the generated data, the analytical procedure was submitted to a validation process. The evaluated parameters were: selectivity / specificity, working range and linear range, linearity, detection limit, quantification limit, precision, recovery and robustness. The uncertainty measurements were performed by the software and manually, confirming that it is suitable for the process. Moreover, the software was tested using literature data, which confirmed its effectiveness. The results of the ground water analysis showed that there are no phenolic compounds within the studied levels. The use of automated systems for the uncertainty estimation is very promising because it reduces or minimizes systematic errors and allows working in a more organized way and with the process under control.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Dentre as espÃcies do gÃnero Erythrina (Fabaceae), duas conhecidas popularmente como mulungu, E. velutina e E. mulungu, tem comprovado interesse social e econÃmico para o Brasil. E. mulungu ocorre no Sudeste, pertence à RelaÃÃo Nacional de Plantas de Interesse para o SUS (RENISUS). Jà E. velutina à uma Ãrvore amplamente utilizada no Nordeste, cuja casca do caule à utilizada tradicionalmente no tratamento da ansiedade, agitaÃÃo e insÃnia. Contudo, nÃo existe um produto farmacÃutico com qualidade agregada e estudos farmacolÃgicos dessa espÃcie para justificar seu uso medicinal. Diante do exposto, o objetivo do presente trabalho foi realizar o desenvolvimento e o controle de qualidade do extrato de Erytrhina velutina e investigar as atividades antioxidante e neuroprotetora, visando seu emprego no tratamento de doenÃa neurodegenerativa, como a DoenÃa de Parkinson (DP). Inicialmente, foi validado mÃtodo espectrofotomÃtrico para dosagem de fenÃis totais (FT) em produtos derivados de E. velutina, sendo este especÃfico, linear, preciso, exato e robusto. Foi estabelecido o mÃtodo de preparaÃÃo (estufa com circulaÃÃo e renovaÃÃo de ar â 80ÂC; 24h) e especificaÃÃes para o controle da droga vegetal. O extrato etanÃlico de E. velutina (EEEV) produzido por percolaÃÃo foi caracterizado quando ao teor de FT (155,14  3,31  EAG/mg de extrato) e perfil cromatogrÃfico por CLAE-DAD (FenÃis: hesperidina - Tr: 18,8 min; abssinina - Tr: 22,9 min; homoesperidina Tr: 31,2 min; Ãcido rizÃnico (AR) - Tr: 32,1 min e sigmoidina C - Tr: 38,6 min). O EEEV nÃo mostrou citotoxicidade no teste do MTT, mas aumentou (EEEV: 100 e 200 Âg/mL) a atividade da LDH em neutrÃfilo humano. Em cÃlulas 9L/lacZ, o EEEV (100, 400, 1000 mg/mL) reduziu significativamente a viabilidade celular, teste MTT. EEEV (0,0025 â 1 Âg/mL) e AR (0,0025 â 1 Âg/mL) nÃo foram citotÃxicos e inibiram parcialmente a neurotoxicidade induzida por 6-OHDA em cÃlulas SH-SY5Y, modelo experimental de DP, observada pela reduÃÃo significativa dos nÃveis de nitrito/nitrato. Na avaliaÃÃo do potencial antioxidante, testes DPPH e NBT, o EEEV (10 â 200 Âg/mL) apresentou atividade sequestradora de radicais livres no teste DPPH. Os resultados obtidos no presente estudo permitiram definir as condiÃÃes ideais de preparaÃÃo da droga vegetal e do extrato, os quais foram caracterizados, incluindo validaÃÃo de mÃtodo analÃtico e avaliaÃÃo farmacolÃgica, comprovando o potencial antioxidante e neuroprotetor do EEEV e AR.