Orientador: Luiz Cláudio Di Stasi / Banca: Sílvio Luis de Oliveira / Banca: Alessandra Gambero / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Banca: Noeli Pereira Rocha / Resumo: As reações alérgicas afetam grande parte da população e tem aumentado nos últimos anos. Nesse sentido, a histamina liberada pelos mastócitos é um mediador importante e a procura por compostos que inibam a liberação do referido mediador se faz necessária tendo em vista que os tratamentos disponíveis apresentam limitações. Estudos prévios demonstraram que o extrato metanólico bruto da casca do caule de Hymenaea stigonocarpa (ME) apresenta atividade inibitória sobre a liberação de histamina. Assim, o presente trabalho realizou o fracionamento biomonitorado do ME a fim de identificar a(s) frações mais ativa(s). As frações foram avaliadas em suspensão de mastócitos peritoneais de ratos Wistar machos desafiados com ionóforo A23187 e composto 48/80 (apenas as frações mais ativas). Posteriormente, a fração mais ativa foi avaliada em mastócitos sensibilizados com ovoalbumina (OVA). A dosagem de histamina foi realizada utilizando-se um sistema fluorimétrico automatizado e a análise fitoquímica por CG/EM. Os resultados mostraram que a fração acetato de etila foi a mais ativa e, na concentração de 100 g/mL inibiu em 78, 98 e 85% a liberação de histamina induzida pelo ionóforo A23187, composto 48/80 e OVA respectivamente. O fracionamento biomonitorado desta fração por cromatografia líquida sob vácuo (CLV) gerou seis sub-frações, das quais as mais ativas demonstraram ser constituídas por terpenos e ácidos graxos de cadeia longa / Abstract: Allergic reactions affect most of the population and has increased in recent years. Accordingly, histamine released by mast cells is an important mediator and search for compounds that inhibit release of that mediator is necessary in order that the treatments available have limitations. Previous studies demonstrated that the crude methanol extract of the stem bark of Hymenaea stigonocarpa (ME) has an inhibitory activity on the histamine release. Thus, the present study performed the bioguided fractionation of the ME in order to identify (s) most active fractions (s). The fractions were evaluated on the histamine release from rat peritoneum mast cells challenged with ionophore A23187 and compound 48/80 (only the most active fractions). Subsequently, the most active fraction was evaluated in mast cells sensitized with ovalbumin (OVA). The dosage of histamine was performed using an automated fluorimetric system and phytochemical analysis by GC/MS. The results showed that the ethyl acetate fraction was the most active and at concentration of 100 g/mL inhibited by 78, 98 and 85% histamine release induced by ionophore A23187, compound 48/80 and OVA, respectively. The bioguided-fractionatation of this fraction by vacuum liquid chromatography (VLC) generated six sub-fractions, of which the most actives showed the presence of terpenes and long chain fatty acids / Doutor

Resumo: Este trabalho trata da caracterização química de espécies de plantas brasileiras usadas no tratamento de disfunções gástricas. Nossa proposta envolve a investigação de extratos orgânicos polares e infusões por técnicas analíticas. Extração em fase sólida (SPE) e/ou extração líquido-líquido (LLE) foram utilizadas na etapa de clean-up para que açúcares livres e oligômeros de proantocianidinas fossem separados da matriz vegetal bruta. As amostras pré-tratadas foram então analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HLPC) acoplada com detector de arranjo de fotodiodos (PAD) ou por espectrometria de massas em tandem acoplado a um ion trap com interface de ionização por electrospray, usando o modo de inserção direta da amostra (FIA-ESI-IT-MS). Esta estratégia permitiu conhecer os metabólitos secundários de plantas pertencentes às famílias Dilleniaceae (Davilla elliptica e D. nitida: flavonóides, catequinas, isoprenóides e ácidos fenólicos), Apocynaceae (Hancornia speciosa: catequinas, ácidos fenólicos, procianidinas e oligômeros de procianidinas C-glucosiladas) e Malpighiaceae (Byrsonima basiloba, B. coccolobifolia, B. crassa, B. fagifolia e B. intermedia: flavonóides, biflavonóides, ácidos fenólicos, oligômeros de proantocianidinas e ácidos galoilquínicos). A determinação quantitativa dos principais metabólitos secundários também foi realizada, permitindo então a completa caracterização da composição química dos extratos de plantas. Assim, nossa proposta levou a uma caracterização química rápida e eficiente de espécies de plantas brasileiras usadas na medicina popular como antiúlcera. Estes resultados são úteis para um melhor entendimento das atividades farmacológicas das espécies de plantas acima mencionadas. / Abstract: This work deals with the chemical characterization of Brazilian plant species used to treat gastric disfunctions. Our approach involved the investigation of organic polar extracts and infusions by using analytical techniques. Solid-phase extraction (SPE) and/or liquid-liquid extraction (LLE) were used in the clean-up step, so that free sugars and proanthocyanidin oligomers were separated from the bulk of the vegetable matrix. The pre-treated samples were then analyzed by using high performance liquid chromatography (HPLC) coupled to photodiode array (PAD) detector or by direct flow analysis - electrospray ionization - ion trap - tandem mass spectrometry (FIA-ESI-IT-MS). This strategy allowed to recognize the secondary metabolites from plants belonging to the families Dilleniaceae (Davilla elliptica and D. nitida: flavonoids, catechins, isoprenoids and phenolic acids), Apocynaceae (Hancornia speciosa: catechins, phenolic acids, procyanidins and C-glycosilated procyanidins oligomers) and Malpighiaceae (Byrsonima basiloba, B. coccolobifolia, B. crassa, B. fagifolia and B. intermedia: flavonoids, biflavonoids, phenolics acids, proanthocyanidins oligomers and galloylquinic acids). Quantitative determination of the main secondary metabolites was also performed, thus allowing to fully characterization of the chemical composition of plant extracts. Thus, our approach led to a fast and efficient chemical characterization of Brazilian plant species used in folk medicine as antiulcer. These results are useful to the better understanding of the pharmacological activities of the above mentioned plant species. / Orientador: Wagner Vilegas / Coorientador: Lourdes Campaner dos Santos / Banca: Ian Castro-Gamboa / Banca: Mário Sérgio Palma / Banca: Adriana Zerlotti Mercadante / Banca: Claudia Andréa Lima Cardoso / Doutor

CNPQ / Physalis pubescens L., ou camapu, é uma planta herbácea, cujos frutos são comestíveis e folhas, caules e raízes utilizados na medicina tradicional, contra diversas enfermidades. Como os estudos referentes a esta espécie são escassos o presente trabalho teve como objetivos: 1) avaliar os aspectos agronômicos de plantas cultivadas por diferentes métodos e substratos, 2) descrever anatomicamente as principais estruturas da plantas e 3) detectar a presença de compostos de interesse do metabolismo secundário. Para tanto, no primeiro ensaio foram avaliadas plantas produzidas a partir de sementes e estacas herbáceas. Como substratos foram utilizados: (SA) Solo + areia; (SV) Solo + vermiculita; (SP) Solo + Plantmax; (SAV); Solo + areia + vermiculita e (S) Solo. Foram avaliados os comprimentos da parte aérea e da maior raiz; área foliar; massas fresca e seca das folhas, caules e raízes; e volume radicular. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, em um esquema fatorial de 2x5, com 10 repetições por tratamento. No segundo ensaio, folhas, caules e flores foram submetidos a cortes paradérmicos e transversais, fixados em FAA 70%, armazenados em etanol a 70% e posteriormente, analisados por microscopia ótica e eletrônica de varredura. No terceiro ensaio, folhas oriundas de plantas cultivadas em vasos mantidos em casa de vegetação foram secas, moídas e extraídas com hexano. O resíduo seco hexânico foi aplicado em coluna cromatográfica, tendo como solventes de partição diclorometano, acetato de etila, metanol e água destilada. As frações foram submetidas à cromatografia em camada delgada (TLC) e ressonância magnética de prótons (RMN 1H). O extrato bruto foi submetido à cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas (CG/EM). Para o primeiro ensaio observou-se interação significativa entre os fatores substrato e método de propagação somente para massa fresca e seca dos caules, com destaque para o método estaquia e os substratos S, SA, SP. Para as demais variáveis não foram constatadas diferenças significativas. Em relação aos aspectos anatômicos constatou-se que P. pubescens apresenta lâmina foliar hipoestomática, mesófilo com a presença de drusas; idioblastos de areia cristalina dispersos aleatoriamente pelo pecíolo, e tricomas glandulares e eglandulares ao longo de toda a lâmina foliar, caule, pecíolo e pétalas. O estudo fitoquímico por CG/EM revelou a possível presença do alcalóide epistefamiersina (86% de probabilidade); também foram observados as presenças de cumarinas, fisalinas, óleo essencial, saponinas, triterpenóides e taninos por TLC, além de triterpenos e compostos aromáticos de baixa intensidade por RMN 1H. Diante destes resultados, conclui-se que P. pubescens possui características anatômicas que auxiliam a diferenciá-la das demais espécies do gênero, e que a mesma sintetiza uma grande variedade de metabólitos secundários, com a estaquia sendo o melhor método de propagação, independente do tipo de substrato. / Physalis pubescens L., or Winter Cherry, is a herbaceous plant, whose fruits are edible and the leaves, stems and roots used in traditional medicine against various diseases. As the studies for this species are scarce this study aimed to 1) assess the agronomic features of crops grown by different methods and substrates, 2) describe the main anatomical structures of plants and 3) the presence of compounds of interest secondary metabolism. For this, the first trials were evaluated plants grown from seed and cuttings. The substrates were used: (SA) Soil + sand; (SV) Soil + vermiculite, (SP) Soil + Plantmax; (SAV) Soil + sand + vermiculite and (S) Soil. We evaluated the length of shoot and main root, leaf area, fresh and dry weight of leaves, stems and roots and root volume. The experimental design was completely randomized in a factorial scheme 2x5, with 10 replicates per treatment. In the second trial leaves, stems and flowers were sectioned transverse paradermic and fixed in FAA 70%, stored in 70% ethanol and subsequently analyzed by optical microscopy and scanning electron microscopy. In the third essay leaves from plants grown in pots in a greenhouse, were dried and extracted with hexane. The hexanic dry residue was applied to the extraction chromatographic column, and as solvents for the partition dichloromethane, ethyl acetate, methanol and distilled water. The fractions were subjected to thin layer chromatography (TLC) and proton magnetic resonance (NMR 1H). The crude extract was subjected to gas chromatography-mass spectrometry (GC / MS). For the first test there was significant interaction between the factors substrate and method of propagation only for fresh and dry weight of stems, especially the cutting method and the substrate S, SA, SP. For the other variables were not significantly different. Regarding the anatomy it was found that P. pubescens leaf presents hypostomatic mesophyll with the presence of drusen, crystalline sand idioblasts scattered randomly around the petiole, and glandular and eglandular throughout the leaf, stem, petiole and flower petals. Phytochemical study by GC / MS revealed the possible presence of alkali epistephamiersine (86% probability) were also observed the presence of coumarins, physalins, essential oil, saponins, triterpenoids and tannins by TLC, and triterpenes and aromatic compounds of low NMR 1H intensity. Given these results it is concluded that P.pubescens has anatomical features that help differentiate it from other species of the genus, and that it synthetizes a wide variety of secondary metabolites also that the cutting is the best method of propagation, independent of substrate type.

CNPQ / Physalis pubescens L., ou camapu, é uma planta herbácea, cujos frutos são comestíveis e folhas, caules e raízes utilizados na medicina tradicional, contra diversas enfermidades. Como os estudos referentes a esta espécie são escassos o presente trabalho teve como objetivos: 1) avaliar os aspectos agronômicos de plantas cultivadas por diferentes métodos e substratos, 2) descrever anatomicamente as principais estruturas da plantas e 3) detectar a presença de compostos de interesse do metabolismo secundário. Para tanto, no primeiro ensaio foram avaliadas plantas produzidas a partir de sementes e estacas herbáceas. Como substratos foram utilizados: (SA) Solo + areia; (SV) Solo + vermiculita; (SP) Solo + Plantmax; (SAV); Solo + areia + vermiculita e (S) Solo. Foram avaliados os comprimentos da parte aérea e da maior raiz; área foliar; massas fresca e seca das folhas, caules e raízes; e volume radicular. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, em um esquema fatorial de 2x5, com 10 repetições por tratamento. No segundo ensaio, folhas, caules e flores foram submetidos a cortes paradérmicos e transversais, fixados em FAA 70%, armazenados em etanol a 70% e posteriormente, analisados por microscopia ótica e eletrônica de varredura. No terceiro ensaio, folhas oriundas de plantas cultivadas em vasos mantidos em casa de vegetação foram secas, moídas e extraídas com hexano. O resíduo seco hexânico foi aplicado em coluna cromatográfica, tendo como solventes de partição diclorometano, acetato de etila, metanol e água destilada. As frações foram submetidas à cromatografia em camada delgada (TLC) e ressonância magnética de prótons (RMN 1H). O extrato bruto foi submetido à cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas (CG/EM). Para o primeiro ensaio observou-se interação significativa entre os fatores substrato e método de propagação somente para massa fresca e seca dos caules, com destaque para o método estaquia e os substratos S, SA, SP. Para as demais variáveis não foram constatadas diferenças significativas. Em relação aos aspectos anatômicos constatou-se que P. pubescens apresenta lâmina foliar hipoestomática, mesófilo com a presença de drusas; idioblastos de areia cristalina dispersos aleatoriamente pelo pecíolo, e tricomas glandulares e eglandulares ao longo de toda a lâmina foliar, caule, pecíolo e pétalas. O estudo fitoquímico por CG/EM revelou a possível presença do alcalóide epistefamiersina (86% de probabilidade); também foram observados as presenças de cumarinas, fisalinas, óleo essencial, saponinas, triterpenóides e taninos por TLC, além de triterpenos e compostos aromáticos de baixa intensidade por RMN 1H. Diante destes resultados, conclui-se que P. pubescens possui características anatômicas que auxiliam a diferenciá-la das demais espécies do gênero, e que a mesma sintetiza uma grande variedade de metabólitos secundários, com a estaquia sendo o melhor método de propagação, independente do tipo de substrato. / Physalis pubescens L., or Winter Cherry, is a herbaceous plant, whose fruits are edible and the leaves, stems and roots used in traditional medicine against various diseases. As the studies for this species are scarce this study aimed to 1) assess the agronomic features of crops grown by different methods and substrates, 2) describe the main anatomical structures of plants and 3) the presence of compounds of interest secondary metabolism. For this, the first trials were evaluated plants grown from seed and cuttings. The substrates were used: (SA) Soil + sand; (SV) Soil + vermiculite, (SP) Soil + Plantmax; (SAV) Soil + sand + vermiculite and (S) Soil. We evaluated the length of shoot and main root, leaf area, fresh and dry weight of leaves, stems and roots and root volume. The experimental design was completely randomized in a factorial scheme 2x5, with 10 replicates per treatment. In the second trial leaves, stems and flowers were sectioned transverse paradermic and fixed in FAA 70%, stored in 70% ethanol and subsequently analyzed by optical microscopy and scanning electron microscopy. In the third essay leaves from plants grown in pots in a greenhouse, were dried and extracted with hexane. The hexanic dry residue was applied to the extraction chromatographic column, and as solvents for the partition dichloromethane, ethyl acetate, methanol and distilled water. The fractions were subjected to thin layer chromatography (TLC) and proton magnetic resonance (NMR 1H). The crude extract was subjected to gas chromatography-mass spectrometry (GC / MS). For the first test there was significant interaction between the factors substrate and method of propagation only for fresh and dry weight of stems, especially the cutting method and the substrate S, SA, SP. For the other variables were not significantly different. Regarding the anatomy it was found that P. pubescens leaf presents hypostomatic mesophyll with the presence of drusen, crystalline sand idioblasts scattered randomly around the petiole, and glandular and eglandular throughout the leaf, stem, petiole and flower petals. Phytochemical study by GC / MS revealed the possible presence of alkali epistephamiersine (86% probability) were also observed the presence of coumarins, physalins, essential oil, saponins, triterpenoids and tannins by TLC, and triterpenes and aromatic compounds of low NMR 1H intensity. Given these results it is concluded that P.pubescens has anatomical features that help differentiate it from other species of the genus, and that it synthetizes a wide variety of secondary metabolites also that the cutting is the best method of propagation, independent of substrate type.

O extrato n-hexano de Calea serrata demonstrou atividade acaricida contra larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus e R. sanguineus. A enzima acetilcolinesterase (AChE), responsável por hidrolisar a acetilcolina nas sinapses colinérgicas, tem sido alvo de pesticidas e sua inibição pelos organofosforados levam à paralisia e morte de artrópodes. O uso intensivo de acaricidas / inseticidas tem provocado resistência em artrópodes, a qual pode estar relacionada com maior atividade de enzimas de detoxicação, como a glutationa-S-transferase (GST). O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade acaricida do componente isolado do extrato n-hexano, o precoceno II, e do óleo essencial de C. serrata, assim como, determinar a composição química do referido óleo. Com intuito de compreender o mecanismo de ação acaricida do extrato n-hexano de C. serrata, foi investigado o efeito deste extrato sobre a atividade in vitro da AChE em larvas de R. microplus e em estruturas cerebrais de ratos Wistar machos, bem como sobre a modulação da atividade da GST em larvas de R. microplus. O óleo essencial e o precoceno II, o composto isolado, mostraram atividade larvicida. O óleo essencial apresentou diferentes sesquiterpenos em sua constituição química, além de precoceno II. O extrato nhexano de C. serrata inibiu significativamente a atividade in vitro da AChE em larvas de R. microplus e em estruturas cerebrais de ratos. O extrato n-hexano de C. serrata inibiu significativamente a atividade in vitro da GST. Compostos do extrato n-hexano de C. serrata podem ser potenciais inibidores de AChE e de GST, os quais podem contribuir para a sua toxicidade para os carrapatos. Considerando que o aumento da atividade da GST poderia reduzir a eficiência de carrapaticidas, é possível supor que C. serrata possa ser usada como um adjuvante no controle de R. microplus. Os resultados obtidos também suportam a possibilidade de que a inibição da acetilcolinesterase seja um possível mecanismo de ação do extrato n-hexano de C. serrata. / It has been demonstrated that the n-hexane extract of Calea serrata had acaricidal activity against larvae of R. microplus and R. sanguineus. Acetylcholinesterase (AChE), an enzyme that hydrolyses acetylcholine at cholinergic synapses, is a target for pesticides and its inhibition by organophosphates leads to paralysis and death of arthropods. Extensive uses of acaricides/inseticides have induced resistance in arthropods, which can be related to higher activity of detoxification enzymes, such as glutathione-S-transferase (GST).The aims of the present study were to evaluate the acaricide activity of isolated constituent of n-hexane extract, the precocene II, and the essential oil of C.serrata, in addition to determine the chemical composition of essential oil. In order to understand the mechanism of the acaricidal action of C. serrata n-hexane extract, we investigated the effect of this extract on in vitro anticholinesterase activity of larvae from R. microplus and in brain structures of male Wistar rats, as well as, we investigated the effect of C. serrata on GST activity of larvae from R. microplus.The essential oil and the isolated compound, precocene II, showed larvicidal action. Several sesquiterpenes were detected in the essential oil of C. serrata. The n-hexane extract significantly inhibited in vitro acetylcholinesterase activity in R. microplus larvae and rat brain structures. The n-hexane extract of C. serrata inhibited significantly GST activity. Compounds of n-hexane extract from C. serrata may be potential inhibitors of AChE and GST, which may contribute to its tick toxicity. Considering that higher GST activities would reduce the efficiency of the pesticides, we can also suppose that C. serrata may be at least used as an adjuvant in tick control. The results support that inhibition of acetylcholinesterase is a possible mechanism of action of hexane extract at C. serrata.

As plantas são importantes fontes de produtos naturais com atividade biológica que diferem quanto a estrutura e propriedades biológicas. Uma das atividades biológicas dos componentes naturais que tem recebido grande atenção é a capacidade de exercer atividade antitumoral em diferentes tipos de câncer. A boldina é um alcaloide encontrado abundantemente nas folhas e cascas do boldo (Peumus boldus Mol), uma árvore de pequeno porte originária do Chile. Entre outras propriedades, já foi demonstrado que a boldina exerce feito antitumoral em linhagens de glioma in vitro. Neste contexto, o presente estudo avaliou os efeitos do tratamento com boldina em modelos experimentais de gliomas e câncer de bexiga. Boldina foi capaz de diminuir o crescimento celular das linhagens C6 e U-138 MG, por induzir parada do ciclo celular na fase G2/M e/ou apoptose. Estes achados parecem estar associados à inativação da proteína AKT e ativação da proteína GSK-3β. Além disso, a eficácia de boldina também está relacionada com uma diminuição na atividade da proteína ERK. Estes resultados nos levaram a investigar o efeito da boldina em um modelo experimental de glioma em ratos in vivo. O tratamento com 50 mg/Kg/dia de boldina i.p. por 10 dias reduziu significativamente o volume dos tumores implantados nos ratos. Adicionalmente, a análise patológica mostrou que as características de malignidade, como necrose, hemorragia e proliferação, diminuíram nos tumores dos ratos tratados. Experimentos toxicológicos com ratos sadios tratados com 50 mg/Kg/dia de boldina i.p. por 14 dias não revelaram sinais de toxicidade tecidual, danos gastrointestinais ou alteração de atividade de enzimas hepáticas. Ademais, a análise do efeito de boldina em um modelo de câncer de bexiga in vitro, mostrou resultados similares como os observados nas linhagens de glioma. Boldina diminui o crescimento celular da linhagem T24 e induziu parada em G2/M e apoptose. Estes achados também estão relacionados com diminuição da atividade das proteínas AKT e ERK, e aumento de atividade de GSK-3β. Juntos, nossos resultados propõem um novo componente natural, o alcaloide boldina, para o desenvolvimento de um novo agente anticâncer, o qual poderá ser usado em conjunto com os regimes de quimioterapia já estabelecidos. / Plants are important sources of biologically active natural products which differ in terms of structure and biological properties. One of the biological activities of plant compounds that has attracted great interest is the ability to exert antitumoral activity in different types of cancer. Boldine is an alkaloid that occurs abundantly in the leaves and barks of boldo (Peumus boldus Mol.) a widely distributed native tree of Chile. Among other properties, boldine has been shown to exert antitumoral activity against glioma cell lines cells in vitro. Within this context, the present study was designed to evaluate the effects of boldine treatment in experimental models of gliomas and bladder cancer. Boldine was able to diminish the cell growth of C6 and U-138 MG cell lines, by inducing cell cycle arrest at G2/M phase and/or apoptosis. These findings appear to be associated to the inactivation of AKT protein and activation of GSK-3β protein. Additionally, the efficacy of boldine is also correlated with decrease in ERK activity. These results lead us to investigate the effect of boldine in an in vivo rat glioma experimental model. Treatment with 50 mg/Kg/day of boldine i.p. for 10 days significantly diminished the volume of implanted gliomas in rats. Additionally, pathological analysis demonstrated that malignant characteristics, such as necrosis, hemorrhage and proliferation, appeared to be lower in boldinetreated rats. Toxicological experiments with healthy rats treated with 50 mg/Kg/day of boldine i.p for 14 days did not reveal signals of tissue toxicity, gastrointestinal damage or alteration in the activity of hepatic enzymes. Moreover, the analysis of boldine effect in a model of bladder cancer in vitro, showed similar results to those observed in glioma cell lines. Boldine diminished the T24 cell growth and induced G2/M arrest and apoptosis. These findings were also related to decrease in AKT and ERK activities and increase in GSK-3β activity. Taken together, our results propose a novel natural compound, the alkaloid boldine, for the development of a new anticancer agent, which could be used in conjunction with the established quemotherapies regimens.

Achyrocline satureioides (Asteraceae) ou "Marcela" é uma planta nativa de países latino-americanos e, apesar do seu uso generalizado na medicina tradicional, as propriedades químicas e biológicas que sustentam seu uso fitoterápico, ainda não foram completamente caracterizadas. Neste trabalho apresentamos benefícios terapêuticos de extratos de Achyrocline satureioides, através de estudos in vitro e in vivo. Avaliou-se o perfil químico, potencial antioxidante in vitro e atividade antimicrobiana de três extratos de Achyrocline satureioides. Dentre os extratos testados, o extrato hidroetanólico exibiu atividade antioxidante em concentrações de 34 μg/mL, e apresentou um amplo espectro de atividade antimicrobiana (100 a 200 mg/mL) contra bactérias patogênicas intestinais. Os efeitos antibacterianos foram superiores aos exercidos pela amoxicilina, quando testados contra Bacillus cereus e Staphylococcus aureus. Como estudos sobre o efeito do uso indiscriminado de infusões de plantas durante a gravidez são limitados, neste trabalho, também investigamos os efeitos da suplementação em ratas wistar com dois extratos de Achyrocline satureioides, um extrato aquoso (47mg/Kg/dia) e um extrato hidroetanólico (35mg/Kg/dia), administrados durante a gestação e lactação. Nossos dados sugerem que tanto o extrato aquoso quanto o hidroetanólico podem induzir sintomas de toxicidade nas concentrações testadas, no que se refere ao índice de nascimentos dos filhotes, diminuição da sobrevivência neonatal, além de causar alterações significativas específicas nos tecidos quanto aos parametros enzimáticos tanto das mães como dos filhotes fornecendo evidências que podem justificar a necessidade de controle na suplementação na gestação. A administração oral de um extrato hidroetanólico de A. satureioides também produziu atividade anti-hiperglicêmica promissora em ratos. Sendo comparável ao fármaco controle positivo: a acarbose. Este efeito foi observado em ratos que ingeriram níveis elevados de maltose e amido, e também em modelo de indução de diabetes mellitus (DM) com estreptozotocina. Para investigar o mecanismo de ação do extrato, determinamos seus efeitos inibitórios sobre maltase e α-amilase pancreática. O nível de extrato associado a 50% de inibição enzimática (IC50) foi de 185,21 μg/mL para maltase e 265,72 μg / mL para α-amilase pancreática. Uma investigação mais profunda dos constituintes de A. satureioides mostrou que o flavonoide, achyrobichalcona, produziu a maior inibição das glicosidases (IC50 de 4,74 μM para α-amilase e 6,71 μM para maltase), o que foi consistente com os nossos resultados de modelagem molecular. Estes achados sugerem uma potencial aplicação de A. satureioides como agente terapêutico em DM. As atividades antioxidantes, antimicrobianas e hiperglicêmica de parecem estar positivamente correlacionadas com a quantidade de flavonoides. Em conclusão, nossos resultados mostraram evidências de atividades antioxidante, antimicrobiana e hipoglicêmica convidando a pesquisas futuras sobre seu potencial uso como agente co-adjuvante terapêutico tanto para o tratamento das doenças gastrointestinais que podem apresentar altas taxas de resistência a antibióticos, bem como no DM. Contudo, são necessárias mais investigações para verificar os seus efeitos sobre a saúde. / Achyrocline satureioides (Asteraceae) or “Marcela” has been widely used in traditional medicine; however, chemical and biological properties supporting its phytotherapeutic usage are still poorly studied. In this work we present therapeutic benefits of extracts of Achyrocline satureioides, through in vitro and in vivo studies. We evaluated the chemical profiles of the dried extracts, along with antioxidant potential and antimicrobial activity against intestinal pathogenic bacteria. Our data suggest that dried A. satureioides extracts exert greater antibacterial effects than the antibiotic amoxicillin when tested against Bacillus cereus and Staphylococcus aureus. The antioxidant and antimicrobial activities of A. satureioides extracts appear to positively correlate with the amount of flavonoids measured in each extract. Our results provide evidence for the antioxidant and antimicrobial activities of A. satureioides extracts against intestinal pathogens. These findings justify further research regarding the potential for A. satureioides extracts as co-adjuvants to treat bacterial-induced intestinal diseases that may present high rates of antibiotic resistance. Studies regarding the indiscriminate use of plant infusions during pregnancy are limited. Recent reports have shown that chronic flavonoid supplementation induces toxicity in vivo and raises the mortality rates of healthy subjects. Therefore, we investigated whether supplementation of pregnant and lactating Wistar rats with two AS inflorescence extracts, consisting of an aqueous extract similar to a tea (47 mg/kg/day) and a hydroethanolic extract (35 mg/kg/day) with a higher flavonoid content, could induce redox-related side effects. Our data suggest that both aqueous extract and hydroethanolic extract of A. satureioides inflorescence extracts may induce symptoms of toxicity in concentrations tested in mothers regarding the delivery index and further decrease of neonatal survival. Our findings provide evidence that may support the need to control supplementation with the aqueous extract of A. satureioides inflorescence extracts during gestation due to potential toxicity in vivo, which might be related, at least in part, to changes in tissue-specific redox homeostasis and enzymatic activity. Oral administration of a hydroalcoholic extract from A. satureioides also produced promising antihyperglycemic activity in rats. This was comparable to the positive control drug: acarbose. This effect was observed in rats that ingested high levels of maltose and starch, and also in a rat streptozotocin model of DM. To investigate the mechanism of action of A. satureioides, we determined its inhibitory effects on maltase and pancreatic α-amylase. The level of A. satureioides associated with 50% enzyme inhibition (IC50) was 185.21 μg / mL for maltase and 265.72 μg / mL for pancreatic α-amylase. Further investigation of AS constituents showed that flavonoid, achyrobichalcona, produced the highest inhibition of the enzyme (IC50 of 4.74 μM for α-amylase and 6.71 μM for maltase), which was consistent with our modeling results molecular. These findings suggest a potential application of A. satureioides as a therapeutic agent in DM. The antioxidant and antimicrobial and hyperglycemic activities appear to be positively correlated with the amount of flavonoids. In conclusion, our results showed evidence of antioxidant, antimicrobial and hypoglycemic activity inviting future research on its potential use as a co-adjuvant therapeutic agent both for the treatment of gastrointestinal diseases that may present high rates of antibiotic resistance as well as in DM. However, more research is needed to verify its effects on health.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Priscilla Brito Oliveira (priscilla.b.oliveira@gmail.com) on 2009-10-05T20:26:09Z No. of bitstreams: 1 Tese_HumbertoSousaFontoura.pdf: 1238376 bytes, checksum: 084f93953f0e3e85d70bc941a4e1e8a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-07-19T17:32:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_HumbertoSousaFontoura.pdf: 1238376 bytes, checksum: 084f93953f0e3e85d70bc941a4e1e8a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-07-19T17:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_HumbertoSousaFontoura.pdf: 1238376 bytes, checksum: 084f93953f0e3e85d70bc941a4e1e8a6 (MD5) Previous issue date: 2007 / A proposta deste estudo é avaliar as propriedades antiinflamatórias da arnica (Lychnophora ericoides), associada ao uso da fonoforese em ratos Wistar no tratamento de lesões musculares. Foram formados 3 grupos de tratamento. Um grupo recebeu sonificação com gel comercial à base de água. Outro grupo recebeu sonificação com gel à base de arnica. E um terceiro grupo apenas tratamento tópico com gel à base de arnica. Cada grupo tratado continha um controle interno, composto pela pata esquerda lesada e não tratada do mesmo animal. Um quarto grupo foi composto por animais que sofreram a lesão muscular, mas não receberam nenhum tratamento, tendo se formado, assim, o controle externo. As sessões de tratamento foram realizadas 24h, 48h, 72h e 96h após a lesão. Os grupos tratados com ultra-som receberam as ondas numa freqüência de 1Mhz, intensidade de 0,5W/cm2, no modo pulsátil, por 9 minutos. Após o final de cada sessão, partes lesadas dos músculos foram obtidas e preparadas histologicamente para análise morfológica através de microscopia de luz e morfometria. Os resultados mostraram que houve redução gradual do processo inflamatório no grupo tratado com ultra-som e gel comercial e no grupo que recebeu aplicação de ultra-som e gel a base de arnica, quando comparados com seus respectivos controles internos e com o controle externo. Não foi observada no grupo tratado apenas com aplicação tópica de arnica, diminuição no processo inflamatório. Os controles internos dos grupos tratados com ultrasom e gel comercial e com ultra-som e gel de arnica tiveram um decréscimo no processo inflamatório quando comparados com o controle externo, o que confirma a atuação, no sistema imunológico, das ondas ultra-sônicas. O grupo tratado com ultra-som e gel de arnica apresentou significativa melhora na redução do edema, o que não foi observado nos outros grupos. Estes resultados permitem concluir que o ultra-som é um método efetivo na diminuição do processo inflamatório do tecido muscular pós-trauma agudo e que as propriedades antiinflamatórias da arnica agem de modo eficiente na diminuição do edema. Outra conclusão possível é que o ultra-som terapêutico possui uma provável ação no sistema imunológico podendo gerar resultados na diminuição do processo inflamatório em regiões distantes de sua aplicação e também que a fonoforese é um meio efetivo de entrega de fármacos nos tecidos subcutâneos, visto que apenas a aplicação tópica de gel de arnica não mostrou resultados semelhantes à aplicação do ultra-som terapêutico com gel de arnica, sobretudo, na diminuição do edema. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The proposal of this study is to evaluate the anti-inflammatory properties of the arnica (Lychnophora ericoides), associated to the use of the phonophoresis in rats Wistar in the treatment of muscular lesions. Tree treatment groups were formed. A group received sonic application with commercial gel to the base of water. Another group received sonic application with gel to the arnica base. And a third group just topical treatment with gel to the arnica base. Each group treaty contained an internal control, composed by the harmed left paw and no treated of the same animal. A fourth group was composed by animals that suffered the muscular lesion, but they didn't receive any treatment, tends if formed, like this, the external control. The treatment sessions were accomplished 24, 48, 72 and 96 hours after the lesion. The groups treated with ultrasound received the waves in a frequency of 1Mhz, 0,5W/cm2 intensity, in the pressed way, for 9 minutes. After the end of each session, harmed parts of the muscles were obtained and prepared histological methods for morphologic analysis through light microscopy and morfometry. The results showed that there was gradual reduction of the inflammatory process in the group treaty with ultrasound and commercial gel and in the group that received ultrasound application and gel the arnica base, when compared with their respective internal controls and with the external control. It was not observed in the group treated just with topical application of arnica, decrease in the inflammatory process. The internal controls of the groups treated with ultrasound and commercial gel and with ultrasound and arnica gel they had a decrease in the inflammatory process when compared with the external control, what confirms the performance, in the immunological system, of the ultrasonic waves. The group treaty with ultrasound and arnica gel presented significant it gets better in the reduction of the edema, what was not observed in the other groups. These results allow to conclude that the ultrasound is an effective method in the decrease of the inflammatory process of the muscle tissue after acute trauma and that the anti-inflammatory properties of the arnica act in an efficient way in the decrease of the edema. Another possible conclusion is that the therapeutic ultrasound possesses a probable action in the immunological system could generate results in the decrease of the inflammatory process in distant areas of his application and also that the phonophoresis is an effective middle of pharmaceuticals delivery in the subcutaneous tissue, because just the topical application of arnica gel didn't show results similar to the application of the therapeutic ultrasound with arnica gel, above all, in the decrease of the edema.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006. / Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-10-28T20:15:14Z No. of bitstreams: 1 2006_Ana Cristina Meneses Mendes Gomes.pdf: 1279166 bytes, checksum: c2f231484d30a61a36863f7226b35f87 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-06-16T19:26:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Ana Cristina Meneses Mendes Gomes.pdf: 1279166 bytes, checksum: c2f231484d30a61a36863f7226b35f87 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-06-16T19:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Ana Cristina Meneses Mendes Gomes.pdf: 1279166 bytes, checksum: c2f231484d30a61a36863f7226b35f87 (MD5) Previous issue date: 2006-04 / Pfaffia glomerata, comumente denominada “ginseng brasileiro”, é uma planta da família Amaranthaceae que ocorre nas Américas e África, sendo que o Brasil é o mais importante centro de coleta dessa espécie para fins medicinais, alimentícios e cosméticos. Existem vários problemas fitossanitários que podem prejudicar essa planta, entre eles, os nematóides de galhas, Meloidogyne spp, que ocorrem causando sérios danos ao sistema radicular, onde estão armazenados os princípios ativos. Acessos de P. glomerata foram selecionados, quanto à resistência a Meloidogyne incognita raça 1, de coleções de plantas mantidas na Universidade de Brasília (UNB) e Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (Cenargen). Plântulas foram obtidas por mini estaquia a partir da planta mãe e inoculadas com 5000 ovos quando tinham aproximadamente 15 cm de comprimento. Noventa dias após a inoculação foram avaliados os sistemas radiculares quanto aos índices de galhas, de massas de ovos e os fatores de reprodução (FR). Os acessos São Luís (MA), UFV (MG), Cenargen 1 (DF), Pedra de Guaratiba (RJ), Itabaiana (SE) e Cenargen 2213-6 foram considerados altamente resistentes (FR<1); IAPAR (PR), Cenargen 2216-10 e Cenargen 2216-16, medianamente resistentes (FR= de 1,9 a 2,3); Cenargen 2217-10 e UFC (CE), suscetíveis (FR=10,0) e os demais acessos (Farmacotécnica, DF e Cenargen 2217-9) altamente suscetíveis (FR >80,0). A partir desses resultados, a utilização de acessos resistentes é uma medida bastante promissora para o controle de M. incognita, em cultivos comerciais de P. glomerata. O presente estudo também comparou as respostas histológicas através de secções de radicelas quanto à infestação por M. incognita de um acesso resistente (UFV) com um acesso suscetível (Farmacotécnica), com o objetivo de estudar o mecanismo da resistência. Primeiramente, a resistência do (UFV) esteve associada a um fator não identificado que limitou a penetração do nematóide e a uma resposta bioquímica que se manifestou após a penetração. Algumas células apresentaram características particulares como citoplasma colorido em azul escuro ou apresentando autofluorescência azul esbranquiçada (luz UV). Organelas alteradas foram observadas, indicando a presença de uma resposta de xii hipersensibilidade (RH) nas células parasitadas do hospedeiro resistente e/ou entre elas. Células gigantes deformadas foram também observadas muitas vezes associadas a nematóides com autofluorescência azul esbranquiçada, indicando uma degeneração citoplasmática, devido à presença de compostos fenólicos no seu interior. __________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Pfaffia glomerata, commonly denominated “Brazilian ginseng”, is a plant of Amaranthaceae family that occurs in Americas and Africa. Brazil is the most important center of assessment of this species for usage as medicinal, nutritious and cosmetics aims. Some disease problems can damage that plant, among them, the root-knot nematodes, Meloidogyne spp., cause serious gall symptoms on the roots, where the phyto-chemical compounds are stored. Accessions of P. glomerata were selected from a collection maintained in the University of Brasília (UNB) and Embrapa Genetic Resources and Biotecnology (Cenargen). Plants were obtained by cuttings from the plant mother and inoculated with 5.000 eggs when they were15 cm of length approximately. Ninety days after the eggs inoculation the roots were evaluated, using galls index and the reproduction factor (RF). The accessions São Luís (MA), UFV (MG), Cenargen 1 (DF), Pedra de Guaratiba (RJ), Itabaiana (SE) and Cenargen 2213-6 were considered highly resistant (RF<1); IAPAR (PR), Cenargen 2216-10 and Cenargen 2216-16, moderately resistant (RF= from 1.9 to 2.3); Cenargen 2217-10 and UFC (CE), susceptible (FR=10) and the other accessions (Farmacotécnica, DF e Cenargen 2217-9) highly susceptible (RF >80). The current study also compared the histological response of section an accession resistant (UFV) and one susceptible (Farmacotécnica) to M. incognita infection with the aim to clarify the resistance mechanism. Resistance of ‘UFV’ was associated with unidentified factor that limited nematode penetration and with a post-penetration biochemical response. Several cells features including dark-stained or blue-white autofluorescence (UV xiv light) cytoplasm and altered organelle structure were observed in the resistant accession, indicating a hypersensitive response (HR) of the infested host cells. Features of giant cells were sometimes associated with nematodes with blue autofluorescence showing the degeneration of its cytoplasm and the presence of phenolic compounds.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-19T17:29:46Z No. of bitstreams: 1 2009_PhellipeNoratoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 4343093 bytes, checksum: c5e7ad511d6eb98d4cba14794babdf54 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-04-30T22:37:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_PhellipeNoratoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 4343093 bytes, checksum: c5e7ad511d6eb98d4cba14794babdf54 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-30T22:37:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_PhellipeNoratoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 4343093 bytes, checksum: c5e7ad511d6eb98d4cba14794babdf54 (MD5) Previous issue date: 2009-07-13 / O panorama mundial das infecções fúngicas é preocupante, uma vez que tem sido observado um aumento do número de infecções, o surgimento de cepas resistentes aos medicamentos disponíveis e a toxicidade intrínseca desses medicamentos. Diante desse quadro faz-se necessário a busca de novos agentes terapêuticos. O estudo de plantas da medicina tradicional do Cerrado representa uma fonte importante de moléculas inovadoras para o tratamento de diversas doenças, incluindo as infecções fúngicas. Desse modo, o presente trabalho, à partir da etnomedicina avaliou o potencial antifúngico de extratos de plantas do Cerrado. Em uma triagem inicial foram testados 81 extratos de 14 espécies de plantas sobre os isolados clínicos de fungos dermatófitos Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes, Microsporum gypseum, Microsporum canis e sobre as leveduras Candida albicans ATCC 10231 e Candida parapsilosis ATCC 22019, sendo encontrados 27 extratos ativos. Foram selecionados 8 extratos com halos de inibição ≥ 28 mm de diämetro para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) sobre 10 fungos filamentosos e 8 leveduras. Sendo encontrada potente atividade antifúngica, com valores de CIM entre 125 e 0,24 μg/mL. Os extratos mais ativos foram etanólico e acetato de etila da casca do caule, e etanólico da madeira do caule e folha de Terminalia fagifolia; etanólico da madeira do caule e da madeira da raiz de Zanthoxylum rhoifolium; acetato de etila da madeira da raiz de Diospyrus hispida e acetato de etila da casca do caule de Vismia decipiens. O fracionamento cromatográfico biomonitorado desses extratos ativos poderá permitir o isolamento de potentes compostos antifúngicos. Esse estudo mostra à importância da pesquisa de extratos de plantas do Cerrado aliado à de sua preservação. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The worldwide distribution of fungal infections is related to an increasing number of cases, development of drug resistance, and intrinsic drug toxicity. In view of these problems, the search for new therapeutic agents is an urgent need. Cerrado plants used in traditional medicine are important sources of novel molecules for several diseases, including fungal infections. This study evaluated the antifungal potential of Cerrado plant extracts obtained from local ethno-medicine. 81 extracts from 14 plant species were screened for antifungal activity against isolated clinical strains of Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes, Microsporum gypseum, Microsporum canis, Candida albicans ATCC 10231 and Candida parapsilosis ATCC 22019. 8 extracts demonstrated inhibition zones ≥ 28 mm and minimal inhibition concentrations between 125 and 0,24 μg/mL. The extracts which demonstrated the most antifungal activity were: ethanolic and ethyl acetate extracts from stem bark, ethanolic extract from the wood and leaves of Terminalia fagifolia; ethanolic extract from the stem bark and root wood of Zanthoxylum rhoifolium; ethyl acetate extract from the root wood of Diospyrus hispida; and acetate extract from the stem bark of Vismia decipiens. Bioguided chromatographic fractionation of these extracts will enable the isolation of antifungal compounds. This work shows the research importance of Cerrado molecules to treat antifungal diseases and the need to preserve this biome.