Thesis (Academic dissertation)--University of Helsinki, 1998. / Includes bibliographical references. Also available on the World Wide Web.

The focus of this thesis is a comparative study of approaches in discovery of carbohydrate-active enzymes (CAZymes). CAZymes synthesise, bind to, and degrade all the multitude of carbohydrates found in nature. As such, when aiming for sustainable methods to degrade plant biomass for the generation of biofuels, for which there is a strong drive in society, CAZymes are a natural source of environmentally friendly molecular tools. In nature, microorganisms are the principal degraders of carbohydrates. Not only do they degrade plant matter in forests and aquatic habitats, but also break down the majority of carbohydrates ingested by animals. These symbiotic microorganisms, known as the microbiota, reside in animal digestive tracts in immense quantities, where one of the key nutrient sources is complex carbohydrates. Thus, microorganisms are a plentiful source of CAZymes, and strategies in the discovery of new enzymes from bacterial sources have been the basis for the work presented here, combined with biochemical characterisation of several enzymes. Novel enzymatic activities for the glycoside hydrolase family 31 have been described as a result of the initial projects of the thesis. These later evolved into projects studying bacterial multi-gene systems for the partial or complete degradation of the heterogeneous plant polysaccharide xyloglucan. These systems contain, in addition to various hydrolytic CAZymes, necessary binding-, transport-, and regulatory proteins. The results presented here show, in detail, how very complex carbohydrates can efficiently be degraded by bacterial enzymes of industrial relevance. / <p>QC 20130826</p>

Esta dissertação teve como objetivo, a preparação de hidrogéis à base de alginato contendo argila e material magnético em sua estrutura. Foram analisadas as modificações nas características físico-químicas dos hidrogéis preparados com diferentes reticulantes (CaCl2 e FeCl3) e diferentes concentrações de material magnético (1 e 3 % m/m) e argila (1, 5 e 10 %). Após isso, os hidrogéis foram avaliados quanto à capacidade de remoção de íons Cu2+ e Zn2+ de soluções aquosas. As amostras foram caracterizadas quanto à composição química por espectroscopia na região do infravermelho (FTIR), quanto à morfologia por microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura (SEM) e quanto às propriedades magnéticas por magnetometria de amostra vibrante (VSM). Através da técnica de difratometria de raios-X (XRD), foi possível verificar a natureza do material magnético e a dispersão da argila nos hidrogéis. A estabilidade térmica das amostras foi analisada por análise termogravimétrica (TGA). Os resultados mostraram que tanto a argila como o material magnético ficaram bem dispersos nas amostras. De forma geral, foram preparados hidrogéis com morfologia esférica, sendo que os hidrogéis de alginato de cálcio tenderam a apresentar maior resistência térmica do que os hidrogéis de alginato de ferro. Todas as amostras magnéticas apresentaram comportamento superparamagnético, porém as amostras de alginato de ferro mostraram-se quebradiças após o intumescimento em água. O tempo médio de equilíbrio de intumescimento foi de 240 minutos. Os resultados de cinética de adsorção mostraram que os hidrogéis de alginato de cálcio preparados nas condições avaliadas nesta Dissertação foram eficientes na remoção dos íons Cu2+ e Zn2+, sendo que o cobre apresentou maior afinidade pelo hidrogel do que o zinco / The aim of this Dissertation was study the preparation of hydrogels based on alginate containing clay and magnetic material in its structure. The modifications on the physicochemical characteristics of hydrogels prepared with different crosslinking (CaCl2 and FeCl3), different concentrations of magnetic material (1 and 3 % w/w), and clay (1, 5 and 10 % w/w) were analyzed. After that, the removal capacity of Cu2+ and Zn2+ from aqueous solutions was evaluated. The samples were characterized according their chemical composition by infrared spectroscopy (FTIR), morphology by scanning electron microscopy (SEM) and optical microscopy, magnetic properties by vibrating sample magnetization (VSM). Through the X-rays diffraction (XRD) it was possible to ascertain the nature of the magnetic material and the clays dispersion into hydrogels. The thermal stability of the samples was analyzed by thermogravimetry analysis (TGA). The results showed that both clay and magnetic material were well dispersed in the samples. Spherical hydrogels were prepared and the calcium alginate hydrogels had tended to present higher thermal resistance than the iron alginate hydrogels. All the magnetic samples showed superparamagnetic behavior; however iron alginate samples had proved be brittle after swelling in water. The equilibrium time of swelling was 240 minutes. The adsorption kinetics results showed that calcium alginate hydrogels prepared under the conditions evaluated in this work were efficient in the removal of Cu2+ and Zn2+, and copper showed higher affinity than zinc for the hydrogel

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-23Bitstream added on 2014-06-13T20:55:08Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_ls_me_arafcf.pdf: 537259 bytes, checksum: 4756eac4f37ae0739a8b59e969ac32a1 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A esporotricose é uma micose de distribuição universal cujo agente é o fungo termodimórfico Sporothrix schenckii. A forma mais comum da doença é a linfocutânea, que compromete pele, tecido subcutâneo e gânglios linfáticos regionais. Os principais constituintes da parede celular de S. schenckii são compostos peptídeo-polissacarídicos contendo ramnose, manose e galactose. Estes compostos se arranjam na parede celular de modo a formar duas subcamadas distintas na forma leveduriforme do fungo, uma das quais, a mais interna e fixa delas, é denominada como peptídeo-polissacarídeo da parede celular (PPC) e foi utilizada como antígeno neste estudo, juntamente com a levedura termo-inativada (SSTI). Os antígenos liberados pelo fungo participam diretamente do processo de escape do sistema imune e também servem como alvos para a eliminação do mesmo por anticorpos ou ligação a receptores presentes em células da imunidade inata, como os macrófagos. Nossos resultados mostraram que o PPC induz citocinas de padrão inflamatório de forma mais pronunciada que o SSTI, que por sua vez induziu maior liberação de IL-10. Sugerimos também que no modelo experimental utilizado a IL-10 não atua provocando supressão da resposta proliferativa dos esplenócitos, e que a IL-4 atua apenas na fase de resolução da infecção, não sendo induzida como forma de escape imunológico pelo fungo. Também mostramos que os antígenos testados são capazes de induzir a liberação de IL-17 em culturas de esplenócitos, num perfil semelhante àquela das citocinas Th1 / Sporotrichosis is a micotic infection of universal distribution, which is caused by dimorphic fungus Sporothrix schenckii. It usually happens as a lymphocutaneous disease, compromising skin, subcutaneous tissues and regional lymphatic nodules. Major constituents of S. schenckii cell wall are peptido-polysaccharide complexes containing rhamnose, mannose and galactose. These complexes are organized in two distinct layers in the fungus yeast cell wall, of which the inner one is called cell wall peptido-polysaccharide (PPC), being used as antigen in this study, along with the heat-killed yeast (SSTI). Antigens released by the fungus directly participate in evasion of the immune system, also serving as targets for fungus elimination by binding of antibodies or innate immune cells like macrophages. Our results showed that PPC induces inflammatory cytokines in a more pronounced way when compared to SSTI, which induced higher levels of IL-10. We also suggest that, in the animal model used, IL-10 doesn’t act as a suppressor of splenocyte proliferative response, and that IL-4 play a role at the resolution phase of the infection, being not induced as a means of immunologic escape by the fungus. Also, we showed that the assayed antigens are capable of inducing IL-17 secretion in splenocyte cultures, in a fashion close to that of Th1 cytokines

Esta dissertação teve como objetivo, a preparação de hidrogéis à base de alginato contendo argila e material magnético em sua estrutura. Foram analisadas as modificações nas características físico-químicas dos hidrogéis preparados com diferentes reticulantes (CaCl2 e FeCl3) e diferentes concentrações de material magnético (1 e 3 % m/m) e argila (1, 5 e 10 %). Após isso, os hidrogéis foram avaliados quanto à capacidade de remoção de íons Cu2+ e Zn2+ de soluções aquosas. As amostras foram caracterizadas quanto à composição química por espectroscopia na região do infravermelho (FTIR), quanto à morfologia por microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura (SEM) e quanto às propriedades magnéticas por magnetometria de amostra vibrante (VSM). Através da técnica de difratometria de raios-X (XRD), foi possível verificar a natureza do material magnético e a dispersão da argila nos hidrogéis. A estabilidade térmica das amostras foi analisada por análise termogravimétrica (TGA). Os resultados mostraram que tanto a argila como o material magnético ficaram bem dispersos nas amostras. De forma geral, foram preparados hidrogéis com morfologia esférica, sendo que os hidrogéis de alginato de cálcio tenderam a apresentar maior resistência térmica do que os hidrogéis de alginato de ferro. Todas as amostras magnéticas apresentaram comportamento superparamagnético, porém as amostras de alginato de ferro mostraram-se quebradiças após o intumescimento em água. O tempo médio de equilíbrio de intumescimento foi de 240 minutos. Os resultados de cinética de adsorção mostraram que os hidrogéis de alginato de cálcio preparados nas condições avaliadas nesta Dissertação foram eficientes na remoção dos íons Cu2+ e Zn2+, sendo que o cobre apresentou maior afinidade pelo hidrogel do que o zinco / The aim of this Dissertation was study the preparation of hydrogels based on alginate containing clay and magnetic material in its structure. The modifications on the physicochemical characteristics of hydrogels prepared with different crosslinking (CaCl2 and FeCl3), different concentrations of magnetic material (1 and 3 % w/w), and clay (1, 5 and 10 % w/w) were analyzed. After that, the removal capacity of Cu2+ and Zn2+ from aqueous solutions was evaluated. The samples were characterized according their chemical composition by infrared spectroscopy (FTIR), morphology by scanning electron microscopy (SEM) and optical microscopy, magnetic properties by vibrating sample magnetization (VSM). Through the X-rays diffraction (XRD) it was possible to ascertain the nature of the magnetic material and the clays dispersion into hydrogels. The thermal stability of the samples was analyzed by thermogravimetry analysis (TGA). The results showed that both clay and magnetic material were well dispersed in the samples. Spherical hydrogels were prepared and the calcium alginate hydrogels had tended to present higher thermal resistance than the iron alginate hydrogels. All the magnetic samples showed superparamagnetic behavior; however iron alginate samples had proved be brittle after swelling in water. The equilibrium time of swelling was 240 minutes. The adsorption kinetics results showed that calcium alginate hydrogels prepared under the conditions evaluated in this work were efficient in the removal of Cu2+ and Zn2+, and copper showed higher affinity than zinc for the hydrogel

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / CopolÃmeros termoresponsivos reticulados e nÃo reticulados foram sintetizados por polimerizaÃÃo radicalar de N-isopropilacrilamida com goma do cajueiro. As duas metodologias apresentaram formaÃÃo de copolÃmero purificado com rendimento e eficiÃncia de enxertia elevadas. A eficiÃncia de enxertia foi maior para os copolÃmeros sintetizados com menor proporÃÃo de iniciador. Os copolÃmeros foram caracterizados por espectroscopia na regiÃo do infravermelho. A presenÃa de bandas caracterÃsticas da estrutura da goma (2935, 1155, 1080 e 1037 cm-1) e da isopropilacrilamida (1647 e 1550 cm-1), confirmaram a reaÃÃo de enxertia. A concentraÃÃo de associaÃÃo crÃtica (CAC) variou de 4,9 x 10-3 a 3,4 x 10-2 mg/mL. O copolÃmero purificado nÃo reticulado com menor teor de iniciador (GCNIPA-2P) apresentou menor valor de CAC do que o com maior teor de iniciador (GCNIPA-1P). Este valor à consistente com o maior grau de enxertia observada para o copolÃmero GCNIPA-2P, o que proporciona um maior carÃter hidrofÃbico ao derivado. Um decrÃscimo de valor de CAC foi encontrado para o copolÃmero reticulado (GCNIPA-1RP) em relaÃÃo ao nÃo reticulado (GCNIPA-1P). GCNIPA-1RP possui menor eficiÃncia de enxertia, entÃo seria esperado teoricamente um maior valor de CAC, entretanto a reticulaÃÃo pode ter promovido uma maior estabilizaÃÃo das regiÃes hidrofÃbicas e como consequÃncia uma menor CAC em relaÃÃo ao nÃo reticulado. Os copolÃmeros sofrem transiÃÃo de fase com o aumento da temperatura. As temperaturas de transiÃÃo (LCST) (34 a 37 &#61616;C) foram superiores à do homopolÃmero (32 &#61616;C). O copolÃmero GCNIPA-2P (menor valor de iniciador) apresenta menor valor de LCST do que o copolÃmero GCNIPA-1P. Este valor, assim como a CAC, à consistente com o maior grau de enxertia observado para o copolÃmero GCNIPA-2P. O valor do tamanho dos agregados observado para a amostra GCNIPA-2P a 50 ÂC (79,8  26 nm) à bem menor do que o obtido para a amostra GCNIPA-1P (192,1  15,3 nm). / Temperature responsive copolymers, crosslinked and not crosslinked, were prepared by radical polymerization of N-isopropylacrylamide on cashew gum. The purified copolymers obtained by graft reaction shows high yield and graft efficiency values. The graft efficiency was higher for copolymers with lower proportion of initiator. Copolymers were characterized by infrared spectroscopy. The presence of bands characteristic of gum structure (2935, 1155, 1080 and 1037 cm-1) and isopropylacrylamide (1647 and 1550 cm-1) on copolymers, confirm the graft reaction. The critical association temperature (CAC) values range from 4.9 x 10-3 to 3.4 x 10-2 mg/mL. The purified copolymer not crosslinked obtained using lower amount of initiator (GCNIPA-2P) shows lower CAC value than the one produced with higher amount of initiator (GCNIPA-1P). The lower value is consistent with the high graft efficiency value obtained for this copolymer. The decrease in CAC value was observed for the crosslinked copolymer (GCNIPA-1RP) in relation to the not crosslinked (GCNIPA-1P). GCNIPA-1RP shows high (%EE) then GCNIPA-1P, so it was hoped a high CAC value, however the crosslinked reaction may produce hydrophobic regions and so on a lower CAC. All copolymers produced in this work show fase transition temperature. The lower critical solution temperature (LCST) obtained (34 to 37 &#61616;C) for the copolymers were higher than the value reported for the homopolymer (32 &#61616;C). GCNIPA-2P copolymer (lower initiator amount) shows the lower LCST then GCNIPA-1P copolymer. This result as well as the CAC is consistent with the high %EE observed for GCNIPA-2P. The size of aggregates formed for GCNIPA-2P copolymer at 50 ÂC (79.8  26 nm) is much smaller than the one obtained for GCNIPA-1P copolymer (192,1  15,3 nm).

A utilização descontrolada de pesticidas tem provocado no decorrer dos anos a intoxicação de milhares de pessoas no mundo, uma vez que, seus resíduos têm sido depositados em alimentos, em solos e em ambientes aquáticos. Assim, a construção de duas novas plataformas sensoras para a detecção de pesticidas é o objetivo desse trabalho. Na primeira plataforma foi utilizado o polieletrólito catiônico polietilenoimina (PEI) em conjunto com o polissacarídeo extracelular algal (PSE) produzido pela microalga criptofícea Cryptomonas tetrapirenoidosa preparados através da técnica de deposição \"spin-coating\". E a segunda plataforma foi produzida por eletrodeposição pulsada, entre um potencial de redução e um de oxidação, utilizando nanoestruturas de óxido de zinco (ZnO). Para caracterizar as plataformas, foram utilizadas as técnicas de microscopia eletrônica de varredura com fonte de emissão de campo (FEG-SEM), difração de raios X (XRD), espectroscopia de absorção ultravioleta-visível (UV-Vis), microscopia de força atômica (AFM) e espectroscopia de reflexão-absorção no Infravermelho com modulação da polarização (PM-IRRAS). Através da imobilização da enzima polifenol oxidase na forma de extrato bruto em sua fonte natural (fruto abacate), as plataformas de PEI/PSE e ZnO, foram avaliadas como biossensores de catecol e do inseticida carbaril. De modo comparativo, as plataformas de PEI/PSE sem a presença imobilizada da enzima também foram estudadas para a detecção do catecol e do carbaril. A simplicidade na formação e na construção dessas plataformas vem qualificá-las como viáveis a serem produzidas em escala industrial e com baixo custo de processamento. E diante dos resultados obtidos no desenvolvimento desses biossensores destaca-se a eficiência e a rapidez de detecção, o que os tornam economicamente promissores e competitivos em termos de aplicações ambientais. / The uncontrolled use of pesticides has resulted over the years the intoxication of thousands of people in the world, since their waste has been deposited in food, in soil and aquatic environments. Thus, the construction of two new sensors platforms for pesticide detection is the objective of this work. At first platform was used cationic polyelectrolyte polyethyleneimine (PEI) along with the extracellular algal polysaccharide (EPS) produced by microalgae criptofícea Cryptomonas tetrapirenoidosa prepared by deposition technique \"spin-coating\". The second platform was produced by pulsed electrodeposition between a reduction and an oxidation potential using nanostructures zinc oxide (ZnO). To characterize the platforms, we used the techniques of field emission gun scanning electron microscopy (FEG-SEM), X-ray diffraction (XRD), ultraviolet visible absorption spectroscopy (UV-Vis), atomic force microscopy (AFM), and polarization modulation infrared reflection-absorption spectroscopy (PM-IRRAS). By immobilization of the polyphenol oxidase enzyme as a crude extract in their natural source (avocado fruit), platforms PEI/PSE and ZnO, they were evaluated as catechol and carbaryl insecticide biosensors. In a comparative way, the platforms PEI/PSE without the presence of immobilized enzyme were also studied for detection of catechol and carbaryl. The simplicity in the formation and construction of these platforms comes qualify them as viable to be produced on an industrial scale and low cost processing. And on the results obtained in the development of such biosensors stand out the efficiency and speed of detection, which make them economically promising and competitive in terms of environmental applications.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As algas marinhas sÃo consideradas uma rica fonte de molÃculas bioativas. Neste trabalho a alga marinha vermelha Gracilaria caudata foi submetida a extraÃÃo aquosa a quente de seus polissacarÃdeos e apresentou rendimento de 32,8%. Os polissacarÃdeos extraÃdos de G. caudata (PGC) apresentaram 1% de Ãtomos de enxofre e um grau de sulfataÃÃo de 0,13. A massa molar de PGC foi determinada por cromatografia de permeaÃÃo em gel e mostrou ser da ordem de 2,5 x 105 g.mol-1. A anÃlise quÃmica feita por Infravermelho e RessonÃncia MagnÃtica Nuclear de PGC revelou que esse composto pertence à uma galactana tipo Ãgar, constituÃdo basicamente por resÃduos alternantes de &#946;-D-galactose e 3,6 &#945;-L-anidrogalactose com grupamentos hidroxila substituÃdos por Ãsteres de sulfato, metil e piruvato. As propriedades antitumorais de PGC foram investigadas in vitro e in vivo. A citotoxicidade de PGC foi avaliada in vitro pelo ensaio do metil tiazolil tetrazolium (MTT). Esse ensaio demonstrou que PGC apresentou valores de CI50 (concentraÃÃo inibitÃria mÃdia) maiores que 25 &#956;g.mL-1 para todas as cÃlulas testadas, sendo considerado nÃo tÃxico. A atividade antitumoral in vivo de PGC contra cÃlulas de Sarcoma 180 transplantadas em camundongos foi avaliada e demonstrou efeito anticÃncer em ambas as vias de administraÃÃo intraperitoneal e oral. PGC reduziu significativamente o crescimento do tumor em 47,59 e 53,53% nas doses de 25 e 50 mg.kg-1 quando administrado intraperitonealmente. A administraÃÃo oral de 50 e 100 mg.kg-1 de PGC causou taxas de inibiÃÃo de 37,27 e 35,98%, respectivamente. O polissacarÃdeo extraÃdo de G. caudata (25 mg.kg-1) potencializou o efeito antitumoral apresentado pelo 5-FU (10 mg.kg-1) de 37,22 para 70,74% quando administrados conjuntamente. As anÃlises histopatolÃgicas do fÃgado e rim mostraram que esses ÃrgÃos foram moderadamente afetados pelo tratamento com PGC. Contudo, nenhuma alteraÃÃo significativa nos parÃmetros marcadores de toxicidade renal (urÃia) ou hepÃtica (AST e ALT) foi observada. Os resultados obtidos apÃs tratamento por via ip. demonstraram que PGC aumentou o peso relativo do baÃo, induziu hiperplasia de folÃculos linfoides, aumentou a percentagem de neutrÃfilos e reverteu a leucopenia ocasionada por 5-FU, sugerindo que a atividade antitumoral pode estar relacionada Ãs suas propriedades imunomodulatÃrias. / Seaweeds are considered an important source of bioactive molecules. In this work the red marine alga Gracilaria caudata was submitted to aqueous extraction of their polysaccharides and presented a recovery of 32.8%. The extracted polysaccharides of G. caudata (PGC) had 1% of sulfur atoms and a degree of sulfation of 0.13. The molar mass of PGC was determined by gel permeation chromatography and the molar mass detected was 2.5 x 105 g.mol-1. Chemical analysis made by spectroscopic methods such as Infrared and Nuclear Magnetic Resonance of PGC demonstrated to belong to the agar type galactan family, mainly constituted by alternating residues of &#946;-D-galactose and 3,6-&#945;-L-anhydrogalactose with the hydroxyl groups substituted by ester sulfate, methyl groups and pyruvic acid acetal. Seaweed polysaccharides have recently been shown to act as antitumor agents. The antitumor properties of the polysaccharides extracted from G. caudata (PGC) were investigated in vitro and in vivo. The cytotoxicity of PGC was evaluated in vitro by the methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. This assay demonstrated that PGC had IC50 values greater than 25 &#956;g.mL-1 for all tested cells, being considered non-toxic. The in vivo antitumor activity of PGC against Sarcoma 180 cells transplanted in mice was evaluated and showed anticancer effect in both oral and intraperitoneal routes of administration. PGC significantly reduced tumor growth in 47.59 and 53.53% at the doses of 25 and 50 mg.kg-1 when administered intraperitoneally. The oral administration of 50 and 100 mg.kg-1 of PGC caused inhibition rates of 37.27 and 35.98%, respectively. Interestingly, PGC (25 mg.kg-1) enhanced the antitumor effect presented by 5-fluorouracil (10 mg.kg-1) from 37.22 to 70.74%. The histopathological analysis of liver and kidney showed that both organs were moderately affected by PGC treatment. Though, no significant changes in renal (urea) or liver (enzymatic activity of Alanine and Aspartate aminotransferase) parameters were observed. Results demonstrated that PGC administered by intraperitoneal route increased the relative spleen weight, induced a hyperplasia of lymphoid folicules, enhanced the neutrophil percentage and reverted the leucopeny induced by 5-FU, suggesting that the observed antitumor activity could be related to its immunomodulatory properties.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A aquicultura à uma das atividades produtoras de alimento que mais cresce a nÃvel mundial e o cultivo de camarÃes marinhos apresentou a maior taxa de crescimento mÃdia nos Ãltimos 50 anos. A busca por produÃÃo, muitas vezes, requer um incremento na densidade utilizada, levando os indivÃduos cultivados a condiÃÃes de estresse e ao surgimento de doenÃas oportunistas. O uso de imunoestimulantes na aquicultura, entre eles os polissacarÃdeos sulfatados (PS), tem resultado em um aumento na resistÃncia dos animais a patÃgenos e a situaÃÃes de estresse. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos PS de Spirulina platensis em pÃs-larvas (PLâs) e juvenis do camarÃo branco Litopenaeus vannamei, por meio de banhos de imersÃo. A administraÃÃo do PS para as PLâs de L. vannamei foi realizada nas concentraÃÃes de 0 (controle); 50; 100 e 200 mg L-1, duas horas antes da avaliaÃÃo da resistÃncia das mesmas ao teste do estresse salino. Os juvenis de L. vannamei foram expostos, durante trÃs horas, aos PS de S. platensis nas concentraÃÃes de 0 (controle); 60; 120 e 240 mg L-1 seguida da coleta da hemolinfa para a anÃlise dos seguintes imunoparÃmetros: contagem total (CTH) e diferencial (CDH) de hemÃcitos, concentraÃÃo protÃica no soro, atividade da fenoloxidase (PO), atividade da &#945;2-macroglobulina (&#945;2-M) e atividade hemaglutinante do soro. ApÃs o teste do estresse salino, foi observado que as PLâs expostas aos PS na concentraÃÃo de 100 mg L-1 apresentaram uma tendÃncia de maior sobrevivÃncia, mas nÃo houve diferenÃa significativa entre os tratamentos. Com relaÃÃo aos imunoparÃmetros, a CTH foi reduzida quando os animais foram expostos aos PS e nas concentraÃÃes mais altas a CTH voltou aos valores normais. Porem, nÃo houve diferenÃa significativa entre os tratamentos e o controle. No entanto, a diferenÃa significativa foi observada entre os tratamentos que foram expostos ao PS. O nÃmero de hemÃcitos granulares (HG) apresentou uma tendÃncia de queda na concentraÃÃo de 60 mg L-1 e, com o incremento da concentraÃÃo de PS, os valores de HG tambÃm tenderam a aumentar, porÃm nÃo houve diferenÃas significativas em relaÃÃo ao controle. No entanto, foi observada diferenÃa significativa entre as contagens de HG nas concentraÃÃes de 60 e 240 mg L-1. A atividade da PO foi significativamente reduzida na concentraÃÃo de 60 mg L-1 o que pode estar relacionado ao baixo valor de CTH como tambÃm à elevada atividade do inibidor de protease &#945;2-M. A atividade da PO voltou a ser semelhante à obtida no controle com o aumento da concentraÃÃo de PS para 120 mg L-1 e foi novamente reduzida na maior concentraÃÃo (240 mg L-1). A atividade do inibidor de protease &#945;2-M foi significativamente elevada quando os animais foram expostos aos PS nas concentraÃÃes de 60 e 240 mg L-1, enquanto essa atividade se manteve semelhante ao controle na concentraÃÃo de 120 mg L-1. Dessa forma, nÃo houve necessidade de regulaÃÃo do sistema proPO, quando os camarÃes foram expostos à concentraÃÃo intermediÃria dos PS de S. platensis. A administraÃÃo dos PS de S. platensis aos camarÃes L. vannamei foi capaz de modular a resposta imunolÃgica desses animais de maneira diferente, dependendo da concentraÃÃo utilizada. Com a realizaÃÃo deste experimento pode-se concluir que a concentraÃÃo intermediÃria de 120 mg L-1 foi a mais eficiente, jà que manteve os nÃveis de hemÃcitos circulantes e as atividades basais da PO e &#945;2-M. / Aquaculture is the food-producing activity that presented the fastest grow the worldwide and the cultivation of marine shrimps had the highest average growth rate over the past 50 years. The search for growing up the production, obtained through the increase on the density, carrying the animals on condition stress and the appearance of diseases. The use of immunostimulants on aquaculture, like the sulfated polysaccharides (SP), resulted in an enhancement of the animalâs resistance against pathogenic microorganism and stress situations. The aim of this study was to evaluate the effect of the SP of Spirulina platensis in post-larvae (PL's) and juvenile of the white shrimp Litopenaeus vannameithrou gh immersion baths. The administration of the SP to L. vannameiâs PL's was performedat concentrations of 0 (control), 50, 100 and 200 mg L-1, two hours before the evaluation of their resistance to the salt stress test. The juveniles of L. vannamei were exposed for three hours to the SP of S. platensisat concentrations of 0 (control), 60, 120 and 240 mg L-1 followed by a hemolymph collection for analysis of the following immune parameters: haemocytes total (THC) and differential (DHC) counts, serum protei n concentration, activity of phenoloxidase (PO), activity of &#945;2-macroglobulin (&#945;2-M) and serum hemagglutinating activity. After the salt stress test it was observed that the PLâs that were exposed to the SP at a concentration of 100 mg L -1 showed a tendency of a higher survival rate but there was not any significant difference between the treatments. Regarding the immune parameters, THC was reduced when the animals were exposed to the SP, while the exposure of shrimp to higher concentrations of PS resulted in normal values of the THC. However, no significant differen cebetween treatments and control. But, the significant difference(p&#8804;0.05) was observed between the treatments that were exposed to PS. The number of granular haemocytes (GH) showed adownward trend in the concentration of 60 mg L -1 and, with increasing concentration of SP, the values of HG also tended to increase, but without significant differences compared to that of the control. However, significant differences were observed between the number of HG at concentrations of 60 and 240 mg L - 1. The PO activity was significantly reducedat a concentration of 60 mg L - 1 which may be related to the low value of THC as well as the high activity of the protease inhibitor &#945;2 -M. The PO activity was again similar to that obtained in control with increasing concentration of SP to 120 mg L -1 and was further reduced in the highest concentration (240mg L-1). The activity of the protease inhibitor &#945;2-M was significantly higher when the shrimps were exposed at concentrations of 60 e 240 mg L -1, while this activity was similar to that of control at a concentration of 120 mg L -1. Thus, there was no need for regulation of the proPO system, when the shrimp were exposed to an intermediate concentration of SP of S. platensis. The administration of SP of S. platensis to shrimps L. vannamei was able to modulate the immune response of these animals in different forms depending on the concentration used. So analyzing the results it is possibl e to conclude that the intermediate concentration of 120 mg L -1 was the most efficient, since it maintained the levels of circulating hemocytes and the basal activities of PO and &#945; 2 -M.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / This work reports the preparation and characterization of collagen-sulfated polysaccharide films and applications in coating of cardiovascular prostheses. The films were prepared by adding the sulfated polysaccharide solution on soluble collagen (0, 5, 10, 20 and 25 %). The blends of collagen-sulfated polysaccharide were casted in acrylic molds, and dried at low temperature. The physico-chemical properties of collagen-sulfated polysaccharide films, were studied using infrared spectroscopy that showed absorptions typical of collagen and sulphated polysaccharide; the thermal analysis (DSC) showed that the structural integrity of collagen was unmodified during the extraction process and the polysaccharide present in the samples did not decrease the thermal stability of the collagen, which was higher for the concentrations of 20 %. In the thermal analysis (DTG), the addition of the polysaccharide caused a small decrease of the stability of thermal degradation and when was adding 5 % of the sulfated polysaccharide to the collagen, a reduction in its stability occurs, however, in the concentrations of 10, 20 and 25 %, the stability of thermal degradation of the film increased. In the impedance spectroscopy, the results are associated possibly, to the interactions between the macromolecules. The blood compatibility was analyzed by platelet adhesion and the results showed that the films possess hemocompatibility and antitrombogenic properties. / Este trabalho aborda sobre o preparo e a caracterizaÃÃo de filmes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado e sua aplicaÃÃo para revestimento de prÃteses vasculares. Os filmes foram obtidos a partir da mistura de soluÃÃo de colÃgeno e polissacarÃdeo sulfatado, nas concentraÃÃes 0, 5, 10, 20 e 25 % do polissacarÃdeo. As soluÃÃes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado foram formatadas em moldes de acrÃlico em condiÃÃes de baixa umidade e temperatura. A caracterizaÃÃo fÃsico-quÃmica dos filmes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado foi estudada por espectrometria no infravermelho que mostraram bandas tÃpicas do colÃgeno e bandas tÃpicas do polissacarÃdeo sulfatado; a anÃlise tÃrmica por DSC mostra que a integridade estrutural do colÃgeno foi preservada no processo de extraÃÃo e que a adiÃÃo do polissacarÃdeo nas amostras nÃo diminuiu a estabilidade tÃrmica do colÃgeno tendo sido maior na concentraÃÃo de 20 %. Na anÃlise tÃrmica por DTG, a adiÃÃo do polissacarÃdeo causa um pequeno decrÃscimo da estabilidade de degradaÃÃo tÃrmica e ao adicionarmos 5 % do polissacarÃdeo sulfatado ao colÃgeno, ocorre uma reduÃÃo em sua estabilidade, porÃm, a partir daÃ, nas concentraÃÃes 10, 20 e 25 %, a estabilidade de degradaÃÃo tÃrmica do filme vai aumentando. Na espectroscopia de impedÃncia, os resultados estÃo associados, possivelmente, a interaÃÃes entre as macromolÃculas. A compatibilidade sangÃÃnea foi analisada por adesÃo de plaquetas e os resultados mostraram que os filmes possuem hemocompatibilidade e propriedades antitrombogÃnicas.