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Efeitos citotóxicos da interação entre nanopartículas de prata e metais não essenciais em células de hepatocarcinoma humano (HEPG2)

Miranda, Renata Rank January 2017 (has links)
Orientador :Prof. Dr. Francisco Filipak Neto / Coorientador : Prof. Dr. Frank Kjeldsen / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 28/03/2017 / Inclui referências / Resumo: Devido a intensa produção e incorporação de AgNP em produtos para consumo, espera-se que estas sejam, direta ou indiretamente, liberadas em ambiente naturais, o que representa uma via de exposição em potencial não apenas para a biota, mas também para humanos. Apesar de muitos estudos terem demonstrado o potencial tóxico de AgNP em células e organismos, a co-exposição com contaminantes onipresentes na natureza, como metais, pode induzir efeitos que não podem ser previstos a partir daqueles gerados por exposições isoladas. Nesta tese, as interações toxicológicas entre AgNP e Cd/Hg foram investigadas em células HepG2. No primeiro capítulo, ensaios bioquímicos, microscopia confocal e quantificação intracelular de metais indicaram que as co-exposições resultam em interações toxicológicas, sendo a associação de AgNP+Cd mais tóxica do que AgNP+Hg. Aumentos nos níveis de EROs citosólicas e mitocondrial foram observados após 2-4 h de exposição a AgNP+ Cd/Hg, porém esse efeito foi parcialmente revertido após 24 h de exposição a AgNP+Hg. Ainda, decréscimos da viabilidade celular, metabolismo, proliferação e atividade dos transportadores MDR foram mais pronunciados em células co-expostas aos contaminantes do que aos contaminantes individuais. As co-exposições levaram ao aumento da morte celular, principalmente por necrose, e aumento na concentração intracelular de Hg. Desta forma, interações toxicológicas resultam na potencialização da toxicidade de AgNP, Cd e Hg. Enquanto o aumento intracelular de Hg pode estar relacionado com a maior toxicidade de AgNP+Hg, essa lógica não é válida para os efeitos deletérios observados após a co-exposição a AgNP+Cd. Desta forma, o segundo capítulo foi conduzido de modo a explorar mais aprofundadamente os efeitos celulares e moleculares induzidos pela associação entre as AgNP e Cd. A viabilidade celular e relação ADP/ATP foram pouco alteradas após 4 h de exposição; no entanto, esses parâmetros foram substancialmente alterados após 24 h. Os resultados da análise proteômica seguiram o mesmo padrão: enquanto após 4 h as exposições aos contaminantes o proteoma total das células foi pouco alterado, após 24 h de exposição às AgNP e Cd, cerca de 7% e 2% do proteoma total foi desregulado, respectivamente, enquanto 43% deste foi alterado após co-exposição a AgNP+Cd. Resumidamente, a toxicidade desta associação parece estar envolvida com a inativação de Nrf-2, o que pode resultar na redução dos níveis da defesa antioxidante, e proteínas relacionadas aos proteossomos; redução dos níveis de proteínas envolvidas na via glicolítica e aumento nos níveis de proteínas envolvidas com a fosforilação oxidativa e metabolismo de lipídios, o que pode indicar uma tentativa de retorno às condições de homeostase energética. No entanto, essa estratégia de adaptação celular não foi suficiente para reestabelecer a homeostase de ADP/ATP e impedir a morte celular. De maneira geral, este estudo fornece as primeiras informações a respeito da interação toxicológica entre AgNP e metais não essenciais em modelo in vitro. Palavras-chave: AgNP, cádmio, mercúrio, co-exposição, interação, ensaios bioquímicos, proteômica. / Abstract: Due to the increasing production and applications of AgNP in consumer products, AgNP are expected to be, directly or indirectly, released into natural environments, representing a potential threat to the biota and humans. An increasing number of studies have described the toxic potential of AgNP in cells and organisms. However, co-exposure of AgNP with ubiquitous contaminants, such as metals, may result in non-predictable outcomes. In this thesis, toxicological interactions of AgNP, Cd and Hg were investigated in HepG2 cells. In the first chapter, biochemical endpoints, confocal microscopy and intracellular metal concentration indicated that the co-exposures led to toxicological interactions, with AgNP + Cd being more toxic to HepG2 cells than AgNP + Hg. Early (2-4 h) increases of cytosolic and mitochondrial ROS were observed in the cells co-exposed to AgNP + Cd/Hg, in comparison to the control and individual contaminants, but the effect was partially reverted in AgNP + Hg at the end of 24 h-exposure. In addition, decreases of mitochondrial metabolism, cell viability, cell proliferation and ABC-transporters activity were also more pronounced in the co-exposure groups. Foremost, co-exposure to AgNP and metals potentiated cell death (mainly by necrosis) and Hg (but not Cd) intracellular levels. Therefore, toxicological interactions seem to increase the toxicity of AgNP, Cd and Hg. While an increase of Hg uptake might be related to the increase of toxicity after exposure to AgNP+Hg, this logic is not valid for the high toxicity observed after co-exposure to AgNP+Cd. Therefore, the second chapter was conducted to further explore cellular and molecular effects induced by this co-exposure. Cell viability and ADP/ATP ratio were slightly affected after the 4 h exposure to individual and combined exposures. However, these endpoints were strongly altered after 24 h co-exposure to AgNP+Cd compared to the control and individual exposures. The proteomics data followed the same trend: minor deregulation at 4 h-exposure in all groups and 7% (AgNP), 2% (Cd) and 43% (AgNP+Cd) at 24 h-exposure. Briefly, the toxicity induced by AgNP+Cd seems to be involved the inactivation of Nrf-2, which can result in down-regulation of antioxidant defense and proteasome related proteins, down-regulation of glycolysis related proteins and upregulation of oxidative phosphorylation and lipid metabolism proteins. This may indicate an attempt to reestablish homeostasis. Thus, the adaptation strategy was not able to restore ADP/ATP homeostasis and avoid cell death. Overall, this study provides the first insights into cellular outcomes after the co-exposure to AgNP and non-essential metals. Key words: AgNP, cadmium, mercury, co-exposure, interaction, biochemical endpoints, proteomics.
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Hidroxiapatitas modificadas com prata aplicadas como agentes antimicrobianos

Lima, Cleibson Oliveira de 03 March 2015 (has links)
Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2016-05-23T12:29:21Z No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 1933896 bytes, checksum: b0b1871a7575744c7578f10900648224 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T12:29:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 1933896 bytes, checksum: b0b1871a7575744c7578f10900648224 (MD5) Previous issue date: 2015-03-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Hydroxyapatite has been the subject of research because of being similar to the crystal phase of the crystalline phase and the bone mineral part of the teeth, moreover possesses good biocompatibility, therefore it has become quite a biomaterial used today. In this study, hydroxyapatites have been modified with silver obtained by the method of coprecipitation and impregnation with a view to implementing the various solids such as antimicrobial agents. The synthesis started by coprecipitation of calcium chloride and dibasic ammonium phosphate using buffer such as sodium hydroxide and silver nitrate at different concentrations in amounts of 0.25, 0.5 and 1 mol% with respect to the calcium to obtain the solid doped in different percentages. In the method for impregnating the pure hydroxyapatite reacted with aqueous solutions of silver nitrate in concentrations of 0.125, 0.25 and 0.5 mmol dm -3 at room temperature. The obtained solids were characterized by X-ray diffraction, infrared spectroscopy, Raman spectroscopy and scanning electron microscopy. The results of X-ray diffraction showed the presence of metallic silver in 2Θ≈38º compounds besides the peaks corresponding to the stoichiometric hydroxyapatite. The modified hydroxyapatites with silver obtained by impregnation and co-precipitation of proved to be effective in inhibiting bacterial growth when tested in vitro bacterial adhesion through direct contact and method for Gram positive and Gram negative bacteria showing its potential for use as an antimicrobial agent. / A hidroxiapatita tem sido objeto de pesquisa em virtude de fase cristalina ser similar a fase cristalina do tecido ósseo e a parte mineral dos dentes, além disso possui boa biocompatibilidade, por esse motivo tornou-se um biomaterial bastante utilizado atualmente. Neste estudo, hidroxiapatitas modificadas com prata foram obtidas pelo método da co-precipitação e por impregnação, visando a aplicação dos diversos sólidos como agentes antimicrobianos. A síntese por co-precipitação partiu do cloreto de cálcio e fosfato de amônio dibásico, utilizando como tampão hidróxido de sódio e do nitrato de prata em diferentes concentrações em quantidades de 0,25, 0,5 e 1% em mol com relação ao cálcio para obtenção dos sólidos dopados em diferentes percentuais. No método por impregnação a hidroxiapatita pura reagiu com soluções aquosas de nitrato de prata com as concentrações de 0,125, 0,25 e 0,5 mmol dm-3, a temperatura ambiente. Os sólidos obtidos foram caracterizados por difratometria de raios X, espectroscopia de infravermelho, espectroscopia Raman e microscopia eletrônica de varredura. Os resultados de difratometria de raios X mostraram a presença da prata metálica nos compostos em 2ϴ≈38º, além dos picos correspondente a hidroxiapatita estequiométrica. As hidroxiapatitas modificadas com prata obtidas por co-precipatação e impregnação mostraram-se ser eficazes na inibição do crescimento bacteriano quando testado in vitro através do método adesão bacteriana e contato direto para bactérias Gram positivas e Gram negativas mostrando seu potencial para o uso como agente antimicrobiano.
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Do mercado velho à nova feira: a reestruturação da feira do bairro da prata, Campina Grande – PB

Lima , Jéssica Camêlo de Lima 31 August 2015 (has links)
Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2016-08-31T11:11:08Z No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 8038155 bytes, checksum: 33799aa7d69e30b886aad3e7322d341b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T11:11:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 8038155 bytes, checksum: 33799aa7d69e30b886aad3e7322d341b (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / This current dissertation aimed to analyze the spatial restructuring process carried out in the Feira da Prata, located in the Prata’s neighborhood in the city of Campina Grande, including the time frame between 2005 and 2015. In that sense, we seek to understand how being processed the public policies directed to this fair in order to suit their physical structure, as well as its form of organization to current consumer demands and marketing standards imposed by modern society. In addition, we try to understand how fair dealers take ownership and are organized within the trade fair space, before and after the restructuring process, to make their sociability practices, market their products and establish their working relationships, realizing the contrasts and conflicts arising from the production of a "mental space", the space of the philosophers and urban planners, as opposed to "real space", the physical and social spheres built by fair dealers based on their "knowing/doing” everyday and, at this juncture, infer the “tactics” adopted by fair dealers to establish in this “mental space”. Still we try to investigate what the intentions underlying the government's actions with respect to continuity of policies aimed at fairs, most often, it is linked to the need for self-promotion policy certain hegemonic groups and not necessarily in understanding the historical character, traditional and unique present in these institutions. Regarding the methodological procedures, the research was characterized, above all, in the fieldwork, with interviews application, combined with the theoretical discussion, with the authors assumptions, mainly from the fields of Geography and History, since fairs study requires an interdisciplinary look. Thereby from our investigation and reflections inferred therefore, the restructuring, the manner in which it was achieved, configured as the imposition of an external rationality to the rationality of the fair, having a primary purpose the promotion of political groups in municipal and state levels and no improvement in their working conditions of the fair dealers. / A presente dissertação teve como objetivo principal analisar o processo de reestruturação espacial realizado na Feira da Prata, localizada no bairro homônimo, na cidade de Campina Grande - PB, tendo como recorte temporal o período que compreende os anos 2005 a 2015. Nesse sentido, buscamos perceber como se processaram as políticas públicas direcionadas para esta feira com o intuito de adequar a sua estrutura física, bem como a sua forma de organização às demandas atuais de consumo e aos padrões de comercialização impostos pela sociedade contemporânea. Tentamos compreender também como os feirantes se apropriam e se organizam no espaço da feira, antes e depois da reestruturação, para realizar as suas práticas de sociabilidade, comercializar os seus produtos e estabelecer as suas relações de trabalho, percebendo os contrastes e conflitos decorrentes da produção de um “espaço concebido”, planejado tecnicamente por arquitetos e urbanistas, em oposição ao “espaço vivido”, construído pelos feirantes com base no seu “saber/fazer” cotidiano e, nessa conjuntura, inferir as principais “táticas” adotadas pelos feirantes para se estabelecer nesse “espaço concebido”. Buscamos investigar ainda quais as intencionalidades que estão subjacentes às ações do poder público no que concerne às políticas de continuidade dirigidas às feiras que, na maioria das vezes, estão vinculadas à necessidade de autopromoção política de determinados grupos hegemônicos e não necessariamente no entendimento do caráter histórico, tradicional e singular presente nessas instituições. No tocante aos procedimentos metodológicos, a pesquisa pautou-se, sobretudo, no trabalho de campo, com a aplicação de entrevistas, aliado à discussão teórica, tendo como pressupostos, principalmente, autores dos campos da Geografia e da História, uma vez que estudar feiras requer um olhar interdisciplinar. Desse modo, a partir de nossas investigações e reflexões depreendemos que a reestruturação, aos moldes em que foi concretizada, configurou-se como a imposição de uma racionalidade externa à própria racionalidade da feira, tendo por finalidade primeira à promoção de grupos políticos em âmbito municipal e estadual e não necessariamente a melhoria nas condições de trabalho dos feirantes.
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Bentonita sódica com propriedade antibacteriana para inibição de biocorrosão em poços tubulares profundos / Sodic bentonite with antibacterial property for corrosion inhibition in tubular deep wells

Magalhães, Vladmir Alvim Vieira [UNESP] 15 July 2016 (has links)
Submitted by VLADMIR ALVIM VIEIRA MAGALHAES null (profvlad@live.com) on 2016-07-23T12:58:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_MAGALHAES_VAV_IQ_Unesp.pdf: 3275925 bytes, checksum: 576eddfe1a8c0c083948bfbeb4c332ac (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-07-28T19:31:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 magalhaes_vav_me_araiq.pdf: 3275925 bytes, checksum: 576eddfe1a8c0c083948bfbeb4c332ac (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T19:31:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 magalhaes_vav_me_araiq.pdf: 3275925 bytes, checksum: 576eddfe1a8c0c083948bfbeb4c332ac (MD5) Previous issue date: 2016-07-15 / O presente trabalho consiste na funcionalização do fluido de perfuração conhecido como bentonita (BN) com grupos funcionais sulfidril (SH) provenientes do reagente 3- mercaptopropil-trimetoxissilano (MPTS) e nanopartículas de prata (NPs/Ag), visando a inibição da biocorrosão por oxidação de bactérias. Para tanto, a argila do tipo bentonita, constituída principalmente do argilomineral montmorilonita, foi modificada através de rota de inserção de organossilano e nanopartículas de prata (NPs/Ag) em sua estrutura, sendo um processo favorecido pelo efeito redutor do grupo tiol, proveniente do silano. As amostras funcionalizadas em concentrações distintas de Ag foram testadas contra a ação da ferrobactéria do tipo Thiobacillus ferrooxidans. Para testar o efeito antibacteriano do material híbrido, utilizou-se metodologia em meio de cultura T&K, onde foi possível medir a capacidade de inibição da oxidação de Fe2+ a Fe3+ por unidade de tempo. O processo de modificação proposto permitiu a manutenção da estrutura original da bentonita, bem como a criação de nanopartículas de prata, cujo efeito antibacteriano inibiu a biocorrosão de Fe2+ obtendo, desta forma, fluido de perfuração funcionalizado com grande potencial de aplicação em obras de perfuração de poços tubulares profundos. / This work proposes the functionalization of the drilling fluid known as bentonite (BN) with sulfhydryl functional groups (SH) from the reagent 3-mercaptopropyltrimethoxysilane (MPTS) and silver nanoparticles (Ag/NPs), to inhibit corrosion by bacteria that oxidize metal. Therefore, the type clay bentonite, consisting mainly of montmorillonite clay mineral, was modified through organosilane insertion route and silver nanoparticles in its structure, because this is a process favored by the reducing effect of the thiol group from the silane. Samples functionalized in different concentrations of Ag were tested against the action of ferrobactéria type Thiobacillus ferrooxidans. To test the antibacterial effect of the hybrid material, was used T&K methodology, where it was possible to measure the capacity to inhibit the oxidation of Fe2+ to Fe3+ per unit time. The planned modification process, permitted the maintenance the original structure of the bentonite, as well as the creation of silver nanoparticles, that due to the antibacterial effect, has inhibited biocorrosion of Fe2+, obtained in this way, a drilling fluid functionalized with great potential for application in drilling works of deep wells.
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Preparação e caracterização de filmes híbridos de (AgNO3) / Preparation and films characterization hybrids (AgNO3)

Mello, Lucas Braga de [UNESP] 06 October 2016 (has links)
Submitted by LUCAS BRAGA DE MELLO null (lucaomello12@gmail.com) on 2016-10-10T23:06:13Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO MESTRADO Lucas Prata PDF.pdf: 1870553 bytes, checksum: 6998aa62034574fa649ce2ba13deebdf (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. O arquivo submetido não contém a folha de aprovação. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2016-10-11T16:02:02Z (GMT) / Submitted by LUCAS BRAGA DE MELLO null (lucaomello12@gmail.com) on 2016-10-11T23:16:56Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO MESTRADO Lucas Mello Versão Final PDF.pdf: 3076697 bytes, checksum: adb1c134f37b4f27c08705c14999bfeb (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-10-17T17:32:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mello_lc_me_rcla.pdf: 3076697 bytes, checksum: adb1c134f37b4f27c08705c14999bfeb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-17T17:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mello_lc_me_rcla.pdf: 3076697 bytes, checksum: adb1c134f37b4f27c08705c14999bfeb (MD5) Previous issue date: 2016-10-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O processo Sol-Gel tem permido preparar materiais vítreos ou vítro-cerâmicos com novas composições com alto grau de pureza, homogêneos, materiais híbridos orgânicos e inorgânicos (OIHM) e até materiais impossíveis de serem preparados por processos convencionais. Um dos melhores sistemas para obtenção dos OIHM de sílica (ORMOSIL – Silicato Organicamente Modificado) é a reação combinada com alcoóxidos de Silício como o TEOS (Tetraetilortosilicato) e alcoóxidos funcionalizados como o GPTS (3-Glicidoxipropil-trimetoxisilano). A Prata, é aplicada em diversas áreas como por exemplo, em pinturas a base de Prata (utilizados para circuitos impressos), em filmes fotográficos, películas de vidros dentre várias outras aplicações. Dois efeitos encontrados quando uma amostra GTD-Ag (Amostra com a dopagem de AgNO3), irradiada por uma lâmpada UV e tratada a temperatura (acima de 80 °C), são os efeitos fotocrômicos e termocrômicos. Para o efeito fotocrômico, a irradiação por lâmpada UV, produz partículas de prata oxidadas (Ag+) que transformam-se em partículas de prata reduzidas (Ago), ocorrendo-se assim, o escurecimento dos filmes (redução). O clareamento das amostras GTD-Ag (oxidação), foi obtido através de um agente oxidante, o H2O2. Para observar o efeito termocrômico, as amostras GTD-Ag, são tratadas em forno convencional em temperaturas de 80 °C à 550 °C em atmosferas de N2 e ambiente. No tratamento térmico em atmosfera de N2, foi possível observar o escurecimento (redução) da amostra, a partir da temperatura de 80 °C, e em tratamento térmico à atmosfera ambiente, observamos um clareamento da amostra (oxidação), a partir da temperatura de 200 °C. Utilizando a técnica de análise térmica diferencial (DTA), foi possível verificar a óxido-redução da amostra GTD-Ag, quando tratada em atmosfera ambiente, em temperaturas superiores a 150 °C. Comportamento semelhante é observado para as amostras GTD (Amostra sem dopagem de AgNO3), em temperaturas acima de 200 °C, ocorrendo um efeito conhecido por pirólise, que no nosso caso é a degradação do grupo epóxi. / The sol-gel process has allowed prepare vitreous or vitro-ceramic materials with novel compositions with high purity, homogeneous, organic and inorganic hybrid materials (OIHM) and impossible materials to be prepared by conventional methods. One of the better systems for obtaining OIHM silica (ORMOSIL - Silicate Organically Modified), is the combined reaction of silicon alkoxides such as TEOS (Tetraethylorthosilicate), and functionalised alkoxides such as GPTS (3- Glycidoxypropyl-trimethoxysilane). The Silver is applied in various areas such as Silver paintings (used for printed circuits) on photographic films, glass films among many other applications. Two effects found when a GTD-Ag sample (Sample with AgNO3 doping) irradiated by a UV lamp and treated at temperatures (above 80 °C), are photochromic and thermochromic effects. For the photochromic effect, the UV irradiation lamp produces oxidized silver particles (Ag+) which becomes reduced particles silver (Agº), occurring to thereby darkening of the films (reduction). The samples of the bleaching GTD-Ag (oxidation) were obtained by an oxidizing agent H2O2. To observe the thermochromic effect, the GTD-Ag samples are treated in a conventional oven at temperatures of 80 °C to 550 °C in N2 atmosphere and ambient. In the heat treatment in N 2 atmosphere, was observed to darkening (reduction) of the sample from the 80 °C temperature and treatments to the ambient atmosphere, we observed a whitening of the sample (oxidation) at low temperature 200 °C. Using the differential thermal analysis (DTA), we found the redox sample GTD-Ag, when treated in atmosphere ambient at temperatures above 150 °C. Similar behavior is observed for the GTD samples (Sample undoped AgNO3) at temperatures above 200 °C, occurring an effect known by pyrolysis which in our case is the degradation of the epoxy group.
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Síntese, caracterização e avaliação antimicrobiana de nanopartículas de ZrO2 e ZrO2:Ag por Método Hidrotermal / Synthesis, characterization and evaluation antimicrobial of ZrO2 and ZrO2 nanoparticles Ag by Hydrothermal Method

Nova, Cássia Vanessa [UNESP] 23 September 2016 (has links)
Submitted by CÁSSIA VANESSA NOVA null (cassia_nova@hotmail.com) on 2016-10-18T22:22:55Z No. of bitstreams: 1 Tese_Cássia_Vanessa_Nova.pdf: 5447985 bytes, checksum: bf5c43eb1b133c3dbf7512457d94c8c6 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-10-25T13:08:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nova_cv_dr_bauru.pdf: 5447985 bytes, checksum: bf5c43eb1b133c3dbf7512457d94c8c6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-25T13:08:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nova_cv_dr_bauru.pdf: 5447985 bytes, checksum: bf5c43eb1b133c3dbf7512457d94c8c6 (MD5) Previous issue date: 2016-09-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O aumento de doenças infecciosas vem perturbando as economias mundiais e a saúde pública. As bactérias que contribuem para essa preocupação são as Escherichia coli, Gram-negativa e a Staphyloccocus aureus, Gram-positiva. Essas bactérias podem provocar infecções graves, principalmente quando presentes em água, alimentos e ambientes hospitalares. Nanopartículas estão sendo desenvolvidas para o tratamento e prevenção dessas estirpes biológicas. Nanoestruturas de ZrO2 apresentam propriedades, ópticas, fungicidas e bactericidas. Quando os metais são suportados nas estruturas, como, Ag, suas propriedades bactericidas são potencializadas. Os materiais foram produzidos por síntese hidrotermal e caracterizados por DRX, UV-Vis, FTIR, MEV, TEM e TG. Para avaliar as nanopartículas sintetizadas, foram realizados testes de atividade antimicrobiana com as bactérias Escherichia coli e Staphylococcus aureus (cepas sensíveis e resistentes à meticilina). A eficiência da avaliação antimicrobiana foi mensurada por cinética de crescimento e estatística, por ensaio colorimétrico de viabilidade e MEV. Os resultados das caracterizações mostraram a metodologia de produção de nanopartículas por rota hidrotermal que foram eficientes na produção de nanomateriais cristalinos com morfologia esférica para a zircônia tetragonal, com tamanhos entre 7 e 10 nm e prata cúbica, com tamanho médio entre 40 e 50 nm. As técnicas de TG e FTIR indicaram e permitiram quantificar e identificar a presença de matéria orgânica residual do processo de síntese. Os biotestes revelaram que as nanopartículas de dióxido de zircônio com e sem prata foram eficientes na inibição das bactérias.
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Síntese, caracterização e efeito microbiológico de nanopartículas de sílica revestidas por prata quando associadas a resina acrílica quimicamente ativada, reembasador macio e ao glaze / Synthesis, characterization and microbiological effect of silver-coated silica nanoparticles when associated with chemically activated acrylic resin, soft reliner and glaze

Lucatto, Bruna Corrêa 06 December 2017 (has links)
Submitted by Bruna Corrêa Lucatto null (brulucatto@hotmail.com) on 2018-01-25T00:26:13Z No. of bitstreams: 1 merged (2).pdf: 2609941 bytes, checksum: 81898d81b1fe7413008b3e7b4b083151 (MD5) / Approved for entry into archive by Silvana Alvarez null (silvana@ict.unesp.br) on 2018-02-01T19:05:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 merged (2).pdf: 2609941 bytes, checksum: 81898d81b1fe7413008b3e7b4b083151 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-01T19:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 merged (2).pdf: 2609941 bytes, checksum: 81898d81b1fe7413008b3e7b4b083151 (MD5) Previous issue date: 2017-12-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho foi sintetizar e caracterizar nanopartículas de sílica recobertas por prata, e avaliar a influência quando incorporadas à resina acrílica quimicamente ativada, ao reembasador macio, e a um glaze, em suas características microbiológicas, microestruturais e mecânicas. Foi confeccionada, pelo método de hidrólise e condensação controlada (método de Stober), uma solução contendo nanopartículas de sílica revestidas por nanopartículas de prata em duas proporções, 10 milimols e 30 milimols, onde as mesmas foram caracterizadas. As nanopartículas de sílica incorporadas com a prata foram analisadas por energia dispersiva de raios-X integrado (EDS), microscopia eletrônica de varredura (MEV), e espalhamento de luz dinâmico (DLS). Para análise microbiológica foram confeccionadas 10 amostras cilíndricas (2mmx10mm), em resina acrílica quimicamente ativada onde as partículas foram incorporadas em duas concentrações: 2.5% e 5% com as duas molaridades diferentes 10 mM e 30 mM. Em outra situação foram confeccionadas 10 amostras cilíndricas (2mmx10mm) de reembasador macio, com concentrações de 2,5% e 5% com as duas molaridades diferentes 10 mM e 30 mM, no terceiro caso as partículas foram acrescentadas a um glaze nas duas concentrações e molaridades e aplicada sob uma amostra de reembasador macio. Uma suspensão de Candida albicans e Estreptococos mutans foi utilizada para análise de concentração inibitória mínima. Amostras retangulares em resina acrílica (n=6) de 30x10x3mm, foram confeccionadas para realização do teste de resistência a flexão de três pontos de ensaios mecânicos EMIC (Modelo DL-1000, EMIC Equipamentos e Sistemas LTDA., São José dos Pinhais - PR – Brasil), com velocidade de 1mm/min. Amostras sem a presença de nanopartículas foram confeccionadas como grupo controle. A sílica inicialmente apresentava-se como um pó de coloração branca e fina, após a sua caracterização com as partículas de Nitrato de Prata, houve alteração da coloração para um tom amarelado, aumento da sua densidade e do tamanho de suas nanopartículas. Os resultados de ação antimicrobiana foram positivos para as amostras de reembasador macio e glaze com 5% e 30 mMol de nanopartículas, já no ensaio mecânico não houve diferença significante estatisticamente entre os grupos. / The aim of this work was to synthesize and characterize silver - coated silica nanoparticles, and to evaluate the influence when incorporated into chemically activated acrylic resin, soft reliner, and glaze, in their microbiological, microstructural and mechanical characteristics. A solution containing silica nanoparticles coated by silver nanoparticles in two proportions, 10 millimols and 30 millimols, where they were characterized, was prepared by the hydrolysis and controlled condensation method (Stober method). Silica nanoparticles incorporated with silver were analyzed by integrated X-ray dispersive energy (EDS), scanning electron microscopy (SEM), and dynamic light scattering (DLS).For the microbiological analysis, 10 cylindrical samples (2mmx10mm) were made in chemically activated acrylic resin where the particles were incorporated in two concentrations: 2.5% and 5% with two different molarities of 10 mM and 30 mM. In another situation, 10 cylindrical samples (2mmx10mm) of soft reliner were made, with concentrations of 2.5% and 5% with the two different molarities 10 mM and 30 mM, in the third case the particles were added to a glaze in the two concentrations and molarities and applied under a sample of soft reliner. A suspension of Candida albicans and Streptococcus mutans was used for analysis of minimal inhibitory concentration. The samples were made in acrylic resin (n = 6) of 30x10x3mm and were made to perform the three-point flexural strength test of EMIC (Model DL-1000, EMIC Equipamentos e Sistemas Ltda., São José dos Pinhais - PR - Brazil), with a speed of 1mm / min. Samples without the presence of nanoparticles were made as a control group. The silica initially presented as a fine white powder after its characterization with the Silver Nitrate particles, there was a change of coloration to a yellowish tone, increase of its density and the size of its nanoparticles. The results of antimicrobial action were positive for the soft reliner and glaze samples with 5% and 30 mMol of nanoparticles, whereas in the mechanical assay there was no statistically significant difference between the groups.
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Filmes de PAH/PAA com nanopartículas metálicas para a desinfecção de efluentes industriais

Eltz, Fabiana Zarpelon 22 November 2017 (has links)
O fornecimento e o acesso à água potável é um dos grandes desafios deste século. Nesta perspectiva, o rápido avanço da Nanotecnologia tem contribuído significativamente para o desenvolvimento e a produção de nanomateriais, objetivando melhorar o desempenho e a eficiência dos processos de descontaminação da água. Desse modo, o presente trabalho teve por objetivo preparar e caracterizar filmes automontados de poli(hidrocloreto de alilamina) (PAH) e poli(ácido acrílico) (PAA) contendo nanopartículas de prata (AgNPs) e de cobre (CuNPs), visando sua posterior aplicação no tratamento terciário de efluentes industriais para reuso. As AgNPs e CuNPs foram sintetizadas por meio da (i) redução de sais de prata e de cobre (II) em meio aquoso, com posterior incorporação das mesmas nos filmes finos de PAH/PAA, e (ii) pela irradiação direta dos filmes finos de PAH/PAA com luz ultravioleta (UV), após a imersão dos mesmos em soluções salinas de prata e cobre (II). Após a automontagem, os filmes foram caracterizados por meio de diferentes técnicas instrumentais, incluindo a espectroscopia de absorção molecular na região do ultravioleta e visível (UV-Vis), a espectroscopia de emissão óptica por descarga luminescente (GD-OES), a microscopia de força atômica (AFM), a microscopia eletrônica de varredura com emissão de campo (MEV-FEG), a espectroscopia de fotoelétrons excitados por raios X (XPS), a espectrometria de emissão óptica com plasma de argônio indutivamente acoplado (ICP-OES) e a microscopia eletrônica de transmissão (MET). De maneira geral, os espectros de UV-Vis e GD-OES comprovaram a incorporação/formação de AgNPs e de CuNPs/óxido de cobre (II) nos filmes finos desse trabalho. Os testes realizados com o efluente industrial evidenciaram que todos os filmes desenvolvidos apresentaram atividade bactericida frente a coliformes totais, com variação de 14 a 100% em termos de inibição. Os filmes contendo AgNPs, por sua vez, apresentaram atividade bactericida 5% superior, quando comparados aos filmes contendo CuNPs. Além disso, os filmes preparados a partir da irradiação direta com luz UV apresentaram a maior eficiência inibitória (superior a 90%) e, dessa forma, foram avaliados em função da variação da concentração do sal precursor. De maneira geral, observou-se através da caracterização por MEV-FEG e MET que a alteração na concentração do sal promoveu uma variação em termos de tamanho das nanopartículas incorporadas aos filmes (10-250 nm para as AgNPs e 10-170 nm para as CuNPs). O tratamento do efluente industrial para reuso com os filmes obtidos pelo método (ii), por sua vez, reduziu de 91 a 100% a contagem total de coliformes presentes no efluente industrial bruto (sem tratamento), sendo que o filme obtido na concentração 0,1098 mmol/L de Ag+ foi o material com maior eficácia. Finalmente, considerando-se a facilidade de aplicação, o baixo impacto ambiental, e a ação inibidora satisfatória, os filmes desenvolvidos neste trabalho apresentam um grande potencial para serem utilizados como auxiliares no tratamento terciário de efluentes industriais. / Submitted by cmquadros@ucs.br (cmquadros@ucs.br) on 2018-03-29T11:26:11Z No. of bitstreams: 1 Tese Fabiana Zarpelon Eltz.pdf: 3978549 bytes, checksum: 096915688f5f686bd248d824172b8fe1 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-29T11:26:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Fabiana Zarpelon Eltz.pdf: 3978549 bytes, checksum: 096915688f5f686bd248d824172b8fe1 (MD5) Previous issue date: 2018-03-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES / The supply and access to drinking water is one of the great challenges of this century. In this perspective, the rapid advancement of Nanotechnology has contributed significantly to the development and production of nanomaterials, aiming to improve the performance and efficiency of water decontamination processes. Thus, the main goal of this work was to prepare and characterize self-assembled thin films of poly(allylamine hydrochloride) (PAH) and poly(acrylic acid) (PAA) containing silver nanoparticles (AgNPs) and copper (CuNPs) for their subsequent application in the tertiary treatment of industrial effluents for reuse. The AgNPs and CuNPs were synthesized by (i) reducing silver and copper (II) salts in aqueous medium, with subsequent incorporation in PAH/PAA thin films, and (ii) by direct irradiation of the PAH/PAA thin films with ultraviolet (UV) light after immersion in silver and copper (II) salt solutions. After self-assembling, the thin films were characterized by different instrumental techniques, including ultraviolet and visible (UV-Vis) molecular absorption spectroscopy, glow discharge optical emission spectroscopy (GD-OES), atomic force microscopy (AFM), field emission scanning electron microscopy (FESEM), X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), inductively coupled argon plasma optical emission spectroscopy (ICP-OES) and transmission electron microscopy (TEM). In general, the UV-Vis and GD-OES spectra confirmed the incorporation/formation of AgNPs and CuNPs/copper (II) oxide in the thin films. The tests carried out with the industrial effluent showed that all the films developed presented bactericidal activity against total coliforms, ranging from 14 to 100% in terms of inhibition. The films containing AgNPs, by other hand, presented bactericidal activity 5% higher when compared to the films containing CuNPs. In addition, the films prepared from direct irradiation with UV light showed the highest inhibitory efficiency (greater than 90%) and, therefore, were evaluated as a function of the variation of the precursor salt concentration. In general, it was observed through the characterization by FESEM and TEM that the change in salt concentration promoted a variation in terms of size incorporated into the films (10-250 nm for AgNPs and 10-170 nm for CuNPs). The treatment of the industrial effluent for reuse with the films obtained by method (ii), in turn, reduced the total count of coliforms present in the raw industrial effluent (untreated) from 91 to 100%, being that the film obtained at the concentration 0.1098 mmol/L Ag+ was the most efficient material. Finally, considering the ease of application, the low environmental impact, and the satisfactory inhibitory action, the films developed in this work present a great potential to be used as auxiliaries in the tertiary treatment of industrial effluents.
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Síntese, caracterização e investigação da atividade tuberculostática de complexos de prata contendo ligantes 2,2’-diimínicos e imidazolidina-2-tiona / Synthesis, characterization and investigation of the tuberculostatic activity of silver complexes containing ligands 2,2'-diimino and imidazolidine-2-thione

Bortoletto, Jessica [UNESP] 07 April 2017 (has links)
Submitted by Jessica Bortoletto null (jessica.bortoletto@hotmail.com) on 2017-05-03T21:27:53Z No. of bitstreams: 1 Dissertação- Jessica Bortoletto.pdf: 1558671 bytes, checksum: 1d2e7fe2c5dce7eda993fe7ef74c63f4 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-05-05T13:18:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bortoletto_j_me_araiq.pdf: 1558671 bytes, checksum: 1d2e7fe2c5dce7eda993fe7ef74c63f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T13:18:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bortoletto_j_me_araiq.pdf: 1558671 bytes, checksum: 1d2e7fe2c5dce7eda993fe7ef74c63f4 (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Os efeitos antimicrobianos e a baixa toxicidade da prata em seres humanos continuam a despertar o interesse científico. A associação entre íons prata e ligantes biologicamente ativos é uma estratégia bem sucedida para obter complexos com efeitos mais potentes contra microorganismos patogênicos. Dessa forma, o planejamento de compostos de coordenação que possuam ligantes sulfurados e nitrogenados, em específico, visa obter drogas mais eficazes frente à Mycobacterium tuberculosis visto que o surgimento de casos de Tuberculose multi-droga-resistente faz com que o tratamento atual seja ineficaz. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi sintetizar e caracterizar novos complexos de prata (I) do tipo [Ag(phen)n(imt)]X e [Ag(dppz)(imt)]X, onde phen= 1,10-fenantrolina, n = 1, 2; dppz = dipirido[3,2-a:2’,3’-c]fenazina, imt= imidazolidina-2-tiona e X= BF4-, CF3SO3-, NO3-. Os complexos foram caracterizados pelas técnicas de condutância molar, espectroscopia vibracional na região do IV, ressonância magnética nuclear (1H), análise elementar e espectrometria de massas. A atividade biológica in vitro dos compostos [Ag(phen)(imt)]NO3 (1), [Ag(phen)2(imt)]BF4 (2), [Ag(phen)(imt)]CF3SO3 (3), [Ag(dppz)(imt)]NO3 (4), [Ag(dppz)(imt)]BF4 (5), [Ag(dppz)(imt)]CF3SO3 (6) foi avaliada frente ao patógeno Mycobacterium tuberculosis e os resultados obtidos indicaram que a variação do ligante quelante nitrogenado afeta a atividade biológica. Os compostos contendo a dipirido[3,2-a:2’,3’-c]fenazina mostraram-se inativos enquanto que os compostos contendo 1,10-fenantrolina apresentaram resultados de MIC menores que 10 µg.mL-1. Além disso, verificou-se que a substituição da tiouréia por imidazolidina-2-tiona e a alteração dos contra-íons não resultou em uma potencialização do efeito tuberculostático. Os complexos sintetizados nesse trabalho foram tóxicos frente às células de fibroblasto pulmonar MCR5, refletindo em índices de seletividades (SI) desfavoráveis. / The antimicrobial effects of silver ion together with its low toxicity in the human body have attracted considerable attention. Combining silver ions with biologically active ligands represents a well-succeeded strategy to afford complexes with enhanced effects towards pathogenic microorganisms. Therefore, the design of new coordination compounds bearing nitrogen/súlfur-based ligands aims at obtain more active agents against Mycobacterium tuberculosis since the outbreak of multidrug resistant tuberculosis is currently hampered by the lack of available treatments. In this work novel silver complexes of the type [Ag(phen)n(imt)]X and [Ag(dppz)(imt)]X (phen= 1,10-phenantroline, n = 1, 2; dppz = dipirido[3,2-a:2’,3’-c]phenazine, imt= imidazolidine-2-thione; X= BF4 - , CF3SO3 - , NO3 - ) have been synthesized and characterized. The complexes have been characterized by infrared spectroscopy, 1H nuclear magnetic resonance, elemental analysis, conductance measurements and mass spectrometry techniques. The in vitro biological activity of the compounds [Ag(phen)(imt)]NO3 (1), [Ag(phen)2(imt)]BF4 (2), [Ag(phen)(imt)]CF3SO3 (3), [Ag(dppz)(imt)]NO3 (4), [Ag(dppz)(imt)]BF4 (5) and [Ag(dppz)(imt)]CF3SO3 (6) has been evaluated against foram estudadas frente Mycobacterium tuberculosis and the obtained results suggest that the nature of chelating ligand affects the biological activity. Compounds bearing the dipyrido[3,2-a:2’,3’-c]phenazine demonstrated to be inactive whereas those containing 1,10-phenantroline exhibited MIC values less than 10 µg mL-1 . Besides that, it was verified that the replacement of thiourea by imidazolidine-2-thione did not result in any increase of the tuberculostatic activity. The complexes were cytotoxic towards pulmonar fibroblast cells MCR5, resulting in unfavorable Selectivity Indexes (SI).
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Fitossíntese de nanopartículas de prata a partir de extrato de cascas de romã e desenvolvimento de formulação para tratamento de feridas: avaliação antimicrobiana, citotóxica e potencial cicatrizante em um modelo in vivo / Phytosynthesis of silver nanoparticles using pomegranate peel extract and development of formulation for wound healing: antimicrobial and cytotoxicity evaluation and repair potential in a in vivo model

Fernandes, Renan Aparecido [UNESP] 16 October 2017 (has links)
Submitted by Renan Aparecido Fernandes null (renanfernandes_91@hotmail.com) on 2017-10-23T13:00:35Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado.pdf: 2041233 bytes, checksum: c669ff654e2b5421422fc61488fe79eb (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-10-26T16:05:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fernandes_ra_dr_araca.pdf: 2041233 bytes, checksum: c669ff654e2b5421422fc61488fe79eb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-26T16:05:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fernandes_ra_dr_araca.pdf: 2041233 bytes, checksum: c669ff654e2b5421422fc61488fe79eb (MD5) Previous issue date: 2017-10-16 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade de produção de nanopartículas de prata através do extrato da casca de romã, e produzir formulações contendo estas nanopartículas para uso em feridas. Elas foram testadas quanto à ação antimicrobiana, citotóxica e potencial cicatrizante. Para a produção das nanopartículas de prata propôs-se uma síntese utilizando-se como base duas metodologias já estabelecidas na literatura, utilizando-se para reação carboximetilcelulose, propilenoglicol, nitrato de prata, água e extrato da casca de romã como agente redutor. O extrato da casca de romã foi caracterizado em parâmetros como pH, massa seca e quantidade de taninos bioativos (ácido elágico e totais fenólicos expressos em ácido gálico). Os totais fenólicos do extrato foram também dosados após seu aquecimento nas diferentes condições de tempo e temperatura propostos para as sínteses das nanopartículas de prata (12 minutos, 1 hora e 2 horas, à 50ºC e 100ºC). As nanopartículas de prata produzidas foram, então, adicionadas a uma solução contendo compostos para produção de formulações para serem utilizadas no tratamento de feridas. Elas foram caracterizadas através de espectroscopia UV-Visível, microscopia eletrônica de varredura (MEV), potencial zeta e dosagem de íons remanescentes após as reações. A atividade antimicrobiana tanto das nanopartículas como de suas formulações contra Candida albicans SC 5314 e Staphylococcus aureus ATCC 25923 foi avaliada por meio do método da microdiluição. Na avaliação dos extratos, apesar de ocorrer um aumento na concentração de totais fenólicos com o aumento da temperatura, a concentração inibitória mínima (CIM) manteve-se estável com valores de 391 µg/ml e 781 µg/ml para S. aureus e C. albicans. A formação das nanopartículas de prata foi confirmada com a formação de picos característicos na espectroscopia UV-Visível e pelas imagens de MEV, onde verificou-se que a síntese com tempo de reação de 12 minutos e aquecimento a 50ºC gerou nanopartículas mais uniformes e melhor distribuídas na formulação. As sínteses propostas promoveram a redução iônica da prata de aproximadamente 100%, independente do tempo temperatura utilizados na reação. Valores de CIM para as nanopartículas de prata foram de 67,50 µg/ml e 68,75 µg/ml respectivamente para S. aureus e C. albicans independente das variações das condições de síntese. Após a seleção da síntese das nanopartículas de prata por 12 min à 50ºC, estas partículas foram também caracterizadas por difração de raios-X e microscopia eletrônica de transmissão (TEM), e as respectivas formulações por meio de espalhamento de luz dinâmica, dosagem de íons livres, potencial zeta, MEV e TEM. Para essas formulações foi também realizado um teste de estabilidade variando-se umidade e temperatura. Além da atividade antimicrobiana contra Candida albicans SC 5314 e Staphylococcus aureus ATCC 25923, a citotoxicidade em fibroblastos (L929) das nanopartículas de prata e das formulações destas partículas e do extrato da casca de romã foram também avaliadas. Para os extratos foram observados valores de 3,13, 86,39±0,96% m/m, 3,64±0,03 mg/g, 392,0±9 mg/g respectivamente para pH, massa seca, ácido elágico e totais fenólicos. Como controle, foram produzidas nanopartículas de prata sintetizadas convencionalmente (AgNP química), e observou-se potencial redutor de 99,89% e 99,51% para as sínteses utilizando-se extrato de romã (AgNP green) e um agente redutor químico convencional (AgNP química). Verificou-se a formação de partículas com tamanhos médios de 89 e 19 nm para nanopartículas green e química. A formulação contendo as nanopartículas de prata apresentaram um potencial antimicrobiano expressivamente maior do que o princípio ativo isolado, sendo 255 e 4 vezes mais efetiva contra S. aureus e C. albicans, respectivamente. Os valores de citotoxicidade foram consideravelmente menores para as nanopartículas de prata sintetizadas pelo extrato de romã quando comparadas as produzidas convencionalmente. De acordo com os valores de CIM e da citotoxicidade, a concentração das formulações foi ajustada, gerando assim três formulações: i) AgNP green, ii) AgNP química e iii) extrato de romã, nas concentrações de 337,5 µg/ml, 5,55 µg/ml e 94 µg/ml respectivamente. Para o estudo in vivo, utilizou-se como controle um medicamento comercial contendo prata indicado para tratamento de feridas (Sulfadiazina de prata). Foram selecionados noventa ratos Wistar machos com peso médio de 180 gramas. Foi induzida diabetes nos ratos, e, em seguida, realizou-se duas incisões no dorso dos animais e as lesões foram imediatamente infectadas com S. aureus (ATCC 25923) e C. albicans (SC 5314). Após 24 h, os animais foram divididos em grupos de acordo com as formulações propostas em cada tratamento, seguindo-se um protocolo de duas vezes ao dia por 2, 7 e 14 dias. Após o período de tratamento os animais foram eutanasiados e verificado o potencial reparador através do índice de fechamento de ferida, avaliação do infiltrado inflamatório, angiogenese, mieloperoxidase e hidroxiprolina. Ainda foi verificado o potencial antimicrobiano das formulações através da contagem de células viáveis de cada microrganismo infectado nas feridas. De forma geral, as formulações contendo nanopartículas de prata mostraram os melhores resultados para o fechamento das feridas, apresentando ainda uma atividade anti-inflamatória maior que a do extrato de casca de romã, o qual apresentou atividade pró inflamatória. Todos os tratamentos não foram capazes de reduzir de forma significativa o número de células de C. albicans, enquanto para S. aureus todos os tratamentos apresentaram redução significativa após quatorze dias de tratamento. Independente das nanopartículas de prata serem produzidas quimicamente ou por meio do extrato da casca de romã, ambas apresentaram considerável potencial de reparo de feridas infectadas em modelos in vivo com ratos. Os achados das presentes pesquisas reforçam e estimulam o uso potencial das nanopartículas de prata no tratamento de feridas, com destaque para a síntese green por gerar menos danos ao meio ambiente e às pessoas envolvidas tanto em sua produção como aos pacientes, e por apresentar, ainda, custo inferior quando comparada às sínteses utilizando reagentes químicos e processos convencionais. / The aim of this study was to investigate the production of silver nanoparticles through peel extract of pomegranate, and produce formulations containing these particles to be used in wound healings. Its antimicrobial action, cytotoxicity and healing potential were tested. The synthesis of silver nanoparticles were based on two methods proposed in the literature with some modifications, which were used carboxymethylcellulose, propylene glycol, silver nitrate, water and peel extract of pomegranate as reducing agent. The peel extract was characterized by pH, dry mass and bioactive tannins (elagic acid and total phenols expressed as galic acid). The total phenols were also quantified after being heated at 50ºC and 100ºC for 12 minutes, 1 hour and 2 hours. Then, silver nanoparticles were added in a solution containing products to develop a formulation to be tested in wound healing. They were characterized by UV-Vis spectroscopy, scanning electron microscopy (SEM), zeta potential and the quantification of remaining silver ions after the synthesis reaction. The antimicrobial activity of the nanoparticles and formulations were tested against Candida albicans (SC 5314) e Staphylococcus aureus (ATCC 25923) by microdilution method. After submitting the peel extract to different conditions of temperature and times (50ºC and 100ºC for 12 minutes, 1 hour and 2 hours), it was noted that the values of the minimum inhibitory concentration was not affected and were 391 µg/ml and 781 µg/ml for S. aureus and C. albicans. The formation of silver nanoparticles was confirmed through the formation of characteristic peaks in the UV-Vis spectroscopy and SEM images, and it was observed that the reaction at 50ºC for 12 min produced silver nanoparticles with regular forms and better dispersed in the formulation. The synthesis proposed promoted the reduction of silver ions at about 100%, regardless of the time and temperature used in the reaction, which also did not interfere in antimicrobial activity against C. albicans (68,75 µg/ml) and S. aureus (67,50 µg/ml). After selecting the reaction at 50ºC for 12 min, the silver nanoparticles produced ere also characterized by X-ray diffraction and transmission electron microscopy (TEM), and the respective formulations through dynamic light scattering, free ion dosage, zeta potential, SEM and TEM. The stability test varying humidity and temperature was also performed for those formulations. Besides antimicrobial assays, the cytotoxicity (L929 fibroblasts) of the silver nanoparticles and the formulations of these particles and of the pomegranate peel extract were evaluated. It was observed in the peel extract the values of 3,13, 86,39±0,96% m/m, 3,64±0,03 mg/g and 392,0±9 mg/g respectively for pH, dry mass, elagic acid and total phenols concentrations. Silver nanoparticles produced by conventional chemical method was prepared and used as controls, and it was noted the reduction potential of 99,89% and 99,51% for the synthesis using pomegranate peel extract (AgNP green) and chemical reducing agent (AgNP chemical). The averages sizes of green and chemical AgNP were 89 and 19 nm. The formulation containing silver nanoparticles presented an antimicrobial potential expressively higher than the active input, being 254 and 5-fold more effective against S. aureus and C. albicans. Also, the cytotoxicity was notable reduced when silver nanoparticles were produced using pomegranate peel extract. Based on the MIC values and the cytotoxicity findings, the concentration of the formulations were determined: i) AgNP green at 337.5 µg/ml, ii) AgNP chemical at 5.55 µg/ml, and iii) pomegranate peel extract at 94 µg/ml. In the in vivo study, a commercial form of silver (Sulfadizsine) to the wound healing was used as control. Ninety Wistar male rats were selected, and, after inducing diabetes, two incisions on the dorsum of the animals were made and followed infected with S. aureus (ATCC 25923) and C. albicans (SC 5314). After the infection, the animals were treated with the formulations twice a day for 2, 7 and 14 days. Then, the animals were euthanized and the repair potential was verified through wound closure index, inflammatory infiltrate evaluation, angiogenesis, myeloperoxidase and hydroxyproline. It was also determined the antimicrobial potential by counting the viable cells of each microorganism used to infect the wounds. In general, the formulations containing silver nanoparticles promoted a better closure of the wounds, and a higher anti-inflamatory activity than the peel extract formulation which otherwise presented a pro-inflamatory effect. All formulations could not significantly reduce the viable cells of C. albicans, while for S. aureus they reduced significantly the cells after 14 days of treatment. Silver nanoparticles produced by both green and conventional chemical process present notable potential in repairing infected wounds in in vivo rat model. The findings of the present research strengthen and stimulate the potential application of silver nanoparticles in wound healings, highlighting the green production of these particles which apart from being lower costly, it is ecofriendly and less detrimental to people involved in its production and use. / FAPESP: 2016/04230-9

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