A pubarca precoce (PP) é definida como o desenvolvimento de pêlos pubianos antes dos 8 anos de idade em meninas e 9 anos de idade em meninos. Embora a PP não interfira diretamente com os eventos da puberdade, algumas evidências sugerem que estas meninas tenham maior risco para desenvolver, mais tarde, a Síndrome dos Ovários Policísticos (PCOS). A 17ß-hidroxiesteróide desidrogenase tipo 5 (17ßHSD5) é a principal responsável pela conversão de androstenediona em testosterona. Variações no gene que codifica para essa enzima, em especial os polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs), podem estar relacionados com hiperandrogenismo e PCOS. A vitamina D, além dos efeitos sobre metabolismo ósseo, parece modular outras ações extra-esqueléticas, incluindo secreção e sensibilidade tecidual à insulina. A Vitamina D vem sendo associada com resistência insulínica e variantes do gene do receptor da vitamina D (VDR), vem sendo estudadas em populações de risco como no diabetes. No entanto, pouco se sabe sobre o envolvimento destes polimorfismos na PP. Os objetivos do presente trabalho foram: Avaliar os níveis de 25-hidroxivitamina D; determinar a frequência dos polimorfismos FokI, BsmI, ApaI e TaqI do gene do VDR e do SNP-71AG do gene da 17ßHSD5; verificar se existe associação entre esses polimorfismos com variáveis antropométricas, metabólicas e hormonais em uma amostra de pacientes com PP e controles do sul do Brasil. Foram arroladas 36 meninas com PP e 197 controles saudáveis. As genotipagens foram realizadas por PCR em tempo real para os SNPs -71AG, BsmI e FokI e por PCR-RFLP para os SNPs ApaI e TaqI. O SNP -71 AG do gene da 17ßHSD5 apresentou distribuição genotípica de 52,4% AA, 39,1% AG e 8,6% GG, sendo a frequência dos alelos A:G de 0,72:0,28. Analisando os dois grupos, verificamos uma maior freqüência do alelo variante (G) no grupo de meninas com PP quando comparadas aos controles (0,37 e 0,26, respectivamente), no entanto sem diferença estatística (p=0,054); não foram verificadas associações do polimorfismo com os dados clínicos e hormonais. As meninas com PP apresentaram níveis séricos de 25(OH)D inferiores aos das meninas controles (18,08±8,32 versus 21,27±7,03; p=0,032). Na análise dos polimorfismos, observou-se que o genótipo polimórfico GG do SNP ApaI TG, apresentou uma frequência maior em PP (30,6%) do que nas controles (16,2%) (Odds Ratio: 2,269; 95% Intervalo de Confiança: 1,015 – 5,076; p=0,042). Este genótipo foi também associado com níveis mais baixos de estradiol (35,30 (14,80 – 50,48) versus 12,22 (6,49 – 23,69); p=0,030) e testosterona total (0,52 (0,39 – 0,84) versus 0,20 (0,11 – 0,47); p=0,009) nas meninas com PP, mas não foi associado com os níveis de 25(OH)D. Por outro lado, verificou-se associação entre a presença dos polimorfismos TaqI TC (genótipo TC+CC) e BsmI GA (genótipo GA+AA) e níveis séricos de 25(OH)D mais elevados no grupo de meninas saudáveis (19,86±7,16 versus 22,55±6,69, p=0,007; 19,53±6,94 versus 22,88±6,76, p=0,001, respectivamente). Em conclusão, os dados deste estudo indicam que: 1) houve maior freqüência do alelo variante G SNP -71 AG do gene da 17βHSD5, com uma associação limítrofe desse alelo com o diagnóstico clínico de PP; 2) o polimorfismo ApaI TG associou-se com PP e parece estar modulando os processos esteroidogênicos nas meninas com PP; 3) houve uma interação entre os polimorfismos TaqI TC e BsmI GA e concentrações circulantes de vitamina D em meninas do sul do Brasil. / Precocious pubarche (PP) is usually defined as the development of pubic hair before the age of 8 in girls and age of 9 in boys. Although the PP does not interfere directly in puberty events, some evidence suggests that these girls have higher risk for the development of Polycystic Ovary Syndrome (PCOS) at later ages. The Type 5 17β-Hydroxysteroid Dehydrogenase (17ßHSD5) is the principal responsible for the conversion of androstenedione to testosterone. Variations in the gene encoding for this enzyme, especially Single Nucleotide polymorphisms (SNPs), may be related with hyperandrogenism, and PCOS. Besides the effects on bone metabolism, vitamin D appears to modulate other extra-skeletal actions, including secretions and tissue sensitivity to insulin. Vitamin D has been associated with insulin resistance and variants in the vitamin D receptor (VDR) gene, have been studied in populations at risk of Diabetes. However, little is known about these polymorphisms in the PP. The aims of this work were: to evaluate the levels of the 25-hydroxyvitamin D; to determine the polymorphisms FokI, BsmI, ApaI and TaqI in VDR gene and SNP -71AG in 17ßHSD5 gene frequencies; to asses if exist association between this SNPs and anthropometric, metabolic and hormonal characteristics in patients with PP and controls of the southern Brazil. Were enrolled 36 girls with PP and 197 healthy controls. Genotypic analyzes were evaluated by Real Time for the SNPs -71AG, BsmI and FokI and by PCR-RFLP for the ApaI e TaqI polymorphisms. Genotype frequency for SNP -71 AG of the 17ßHSD5 gene was 52.4% AA, 39.1% AG and 8.6% GG, A:G allelic frequency was 0.72:0.28. Analyzing both groups, higher frequency of the variant allele (G) in patient PP than controls (0.37 e 0.26, respectively) was found but without statistical difference (p=0.054); there were no associations between this polymorphism and clinical and hormonal features. PP girls have serum levels of 25(OH)D lower than those from control group (18.08±8.32 versus 21.27±7.03; p=0.032). The polymorphism analyze was observed that genotype GG of the SNP ApaI TG showed a higher frequency in PP (30.6%) than controls (16.2%) (Odds Ratio: 2.269; 95% confidence interval: 1.015 – 5.076; p=0.042). The same genotype was associated with lower estradiol (35.30 (14.80 – 50.48) versus 12.22 (6.49 – 23.69); p=0.030) and total testosterone levels (0.52 (0.39 – 0.84) versus 0.20 (0.11 – 0.47); p=0.009), in girls with PP. There were no association between this polymorphism and serum 25(OH)D. On the other hand, there was association between the presence of the polymorphisms TaqI TC (TC + CC genotype) and BsmI GA (GA + AA genotype) and higher serum 25(OH)D in the group of healthy girls (19.86 ± 7.16 versus 6.69 ± 22:55 , p = 0.007; 19:53 ± 6.94 versus 22.88 ± 6.76, p = 0.001, respectively). In conclusion, data from this study indicate that: 1) there was a higher frequency of the variant allele G of the SNP -71 AG of the 17ßHSD5 gene, with a borderline association of this allele with the clinical diagnosis of PP; 2) ApaI TG polymorphism is associated with PP and seems to modulate the processes steroidogenesis in girls with PP; 3) there was an interaction between the polymorphisms TaqI TC and BsmI GA and vitamin D concentrations in girls from southern Brazil.

Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: Introdução: A pré-eclâmpsia (PE) é uma patologia obstétrica e uma das principais causas de morbimortalidade materna e fetal. Na PE ocorre um estado de má adaptação da tolerância imunológica, caracterizada por ativação anormal do sistema imune inato e adaptativo. As células T reguladoras (Treg) representam uma população de linfócitos T responsáveis pela manutenção da tolerância e controle da inflamação, enquanto células Th17 medeiam diferentes tipos de reações inflamatórias. Portanto, o balanço entre células Treg e Th17 pode ser crítico para a tolerância ao feto e prevenção da PE. Objetivo: Avaliar as subpopulações de células T CD4+ (Th1, Th2, Th17 e Treg) e o perfil de citocinas produzido por essas células, em gestantes portadoras de pré-eclâmpsia, classificadas em PE precoce e PE tardia. Métodos: Foram estudadas 60 gestantes, sendo 20 normotensas e 40 portadoras de PE, pareadas pela idade gestacional. As gestantes com PE foram classificadas de acordo com o aparecimento das manifestações clínicas em PE precoce (< 34 semanas de gestação; n=20) e PE tardia (≥ 34 semanas de gestação; n=20). Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), obtidas das gestantes foram avaliadas quanto à produção de citocinas pró e anti-inflamatórias e à expressão de fatores de transcrição envolvidos na caracterização das subpopulações de células T CD4+. A expressão dos fatores de transcrição intracitoplasmáticos de células Th1 (T-bet), Th2 (GATA-3), Th17 (RORc) e Treg (FoxP3) foi avaliada por c... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Dois experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar o efeito da inclusão de butirato de sódio, monensina sódica ou propionato de cálcio no concentrado inicial, sobre o desempenho, parâmetros sanguíneos e desenvolvimento ruminal de bezerros leiteiros. No primeiro experimento, 24 bezerras recém-nascidas da raça Holandesa foram alojadas em abrigos individuais até a 10a semana de vida, com livre acesso à água, sendo alimentadas com 4 litros de leite/dia e concentrado ad libitum, enquanto feno de capim-coast-cross foi fornecido após o desaleitamento. Os animais foram distribuídos em blocos de acordo com peso ao nascer e data de nascimento e alocados em um dos tratamentos, de acordo com o aditivo no concentrado: 1)Butirato de sódio (0,15%); 2)Monensina sódica (30 ppm); e 3)Propionato de cálcio (0,15%). Os animais foram pesados e avaliados quanto à altura na cernelha, largura do traseiro e perímetro torácico semanalmente. A partir da 4a semana foram realizadas colheitas semanais de amostras de sangue para determinação de glicose, ácidos graxos livres (AGL) e ?-hidroxibutirato (BHBA). Não foram observadas diferenças significativas entre os tratamentos para o consumo de concentrado ou de feno e para o peso e ganho de peso dos animais (P>0,05). As avaliações quanto à altura na cernelha e perímetro torácico também não apresentaram diferenças entre os tratamentos (P>0,05), entretanto as medidas de largura de traseiro foram menores para os animais do tratamento com adição de propionato de cálcio (P<0,05). As concentrações plasmáticas de glicose, AGL e BHBA não foram afetadas pelos tratamentos (P>0,05). Houve efeito significativo da idade (P<0,0001) para a concentração plasmática de glicose, sendo esta reduzida com a idade dos animais. No segundo experimento, 15 bezerros recémnascidos da raça Holandesa, recebendo o mesmo manejo nutricional, foram fistulados no rúmen e alojados em baias individuais até a 10ª semana de vida. A partir da 4ª semana, foram realizadas colheitas semanais de fluído ruminal para determinação de pH, ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e N-amoniacal; e de sangue para determinação de glicose. Ao completar dez semanas os animais foram abatidos para avaliação do desenvolvimento do trato digestório superior e de papilas ruminais. Não foram observadas diferenças significativas entre tratamentos para o consumo de concentrado e para o desempenho dos animais (P>0,05). Houve efeito significativo (P<0,05) de tratamento e horário de colheita para o pH ruminal. As concentrações de AGCC totais, bem como de cada ácido, não foram afetadas pelos tratamentos. As concentrações plasmáticas de glicose foram afetadas pelos tratamentos (P<0,05). O peso total do trato digestório superior, os pesos médios de cada compartimento e a capacidade máxima do retículo-rúmen não foram afetados pelos tratamentos, assim como os parâmetros de desenvolvimento do epitélio ruminal. Os aditivos incluídos no concentrado inicial se mostraram igualmente eficazes no que diz respeito aos seus efeitos no desempenho e desenvolvimento ruminal de bezerros em aleitamento. / Two trials were conducted in order to evaluate the effects of the addition of sodium butyrate, sodium monensin or calcium propionate in the starter feed on the performance, blood parameters and ruminal development of dairy calves. In the first experiment, 24 newborn Holstein calves were housed in individual hutches during ten weeks of life, with free access to water, being fed 4 liters of milk per day and starter ad libitum, with coast-cross hay offered only after weaning. The animals were blocked according to weight and date of birth and allocated in one of the treatments, according to the additive included in the starter feed: 1) sodium butyrate (0.15%); 2) sodium monensin (30 ppm); and 3) calcium propionate (0.15%). Animals were weighed and evaluated for whiter height, hearth girth and hip width weekly. From the fourth week of age blood samples were taken for glucose, free fatty acids and ?-hydroxybutyrate concentration determination. No significant differences were observed among treatments for starter or hay intake, and weight gain or live weight (P>0.05). Measurements of whiter height and hearth girth were also not affected by treatments (P> 0.05); however, measures of hip width of the animals were smaller for treatment with addition of calcium propionate (P<0.05). Plasma concentrations of glucose, free fatty acids and ?-hydroxybutyrate were not affected by treatment (P>0.05). There was significant effect of age (P<0.0001) for the plasma concentration of glucose, with reduction as animals aged. In the second experiment, 15 male newborns Holstein calves, receiving the same nutritional management, were ruminally fistulated and housed in individual pens during ten weeks of life. From the fourth week of age ruminal samples were taken weekly for the determination of pH, short-chain fatty acids (SCFA) and ammonia-N concentration. Blood samples were also taken weekly for glucose determination. By completing ten weeks of age, animals were slaughtered for forestomach growth and papillae development evaluation. No significant differences were observed among treatments for starter intake as well as for animal performance (P>0.05). The ruminal pH was significantly affected (P<0.05) by treatments and by sampling time. Concentrations of total SCFA and individual SCFA were not affected by treatments (P<0.05). Plasma concentrations of glucose were affected by treatments (P<0.05). The total forestomach weight, the average weight of each compartment and the maximum capacity of reticulum-rumen were not affected by treatments, as well as the parameters for ruminal epithelium development. The additives included in the starter feed were equally effective as regard to its effects on animal performance and rumen development of milk-fed dairy calves.

A puberdade é um processo biológico complexo do desenvolvimento sexual que tem início no final da infância e se caracteriza pela maturação do eixo hipotálamo-hipófise-gonadal, pelo desenvolvimento dos caracteres sexuais secundários, aceleração do crescimento e finalmente pela capacidade reprodutiva. Nos últimos anos, o peptídeo kisspeptina e seu receptor KISS1R têm sido fortemente envolvidos na regulação da secreção pulsátil do GnRH hipotalâmico e, portanto, com o início da puberdade humana. Mutações nos genes KISS1R e KISS1 foram identificadas em crianças brasileiras com puberdade precoce central (PPC). Estudos em famílias e em irmãs gêmeas estimaram que 50-70% da variação na idade de menarca pode ser hereditária, porém, até pouco tempo atrás, não se tinha conhecimento de variantes genéticas comuns que influenciassem no tempo de puberdade. Recentemente, quatro estudos independentes de associação ampla do genoma estabeleceram que marcadores genéticos próximos ou dentro do gene LIN28B estavam relacionados com a idade da menarca em mulheres normais. Além disso, mutações recessivas no gene lin28 levaram ao desenvolvimento precoce no C. elegans. Camundongos que superexpressam Lin28a apresentaram um retardo no desenvolvimento sexual. Com base nesses achados, investigamos a presença de variantes conhecidas ou novas nos genes KISS1, KISS1R e LIN28B em um grupo de crianças portadoras de PPC idiopática com o intuito de estabelecermos a prevalência dessas mutações na etiologia do desenvolvimento sexual prematuro em humanos. Cento e sete crianças com PPC (101 meninas e 6 meninos) foram selecionados, incluindo casos esporádicos e familiares. A população controle consistiu de 200 indivíduos adultos com história de desenvolvimento puberal normal em idade apropriada. A região promotora e os três exons do gene KISS1, os cinco exons do gene K1SS1R e os quatro exons do gene LIN28B foram amplificados e submetidos à sequenciamento automático. Uma variante em homozigose no gene KISS1, descrita anteriormente por pesquisadores do nosso laboratório, p.H90D, foi identificada em mais três crianças não relacionadas, portadoras de PPC idiopática. Essa variante está localizada no exon 3 do KISS1, levando a substituição de uma histidina por um ácido aspártico na posição 90 da kisspeptina-1 (p.H90D), correspondendo à região amino-terminal da kisspeptina-54 e estava ausente em 200 controles brasileiros. Estudos prévios in vitro com a variante p.H90D não revelaram alterações na capacidade de ligação ou ativação do KISS1R e na resistência a degradação. As mutações ativadoras p.R386P do KISS1R e p.P74S da kisspeptina, previamente descritas em puberdade precoce central, não foram identificadas no estudo atual. Uma nova e rara variante em heterozigose no gene LIN28B, p.H199R, foi identificada em uma menina brasileira com PPC idiopática. Essa variante está localizada no exon 4 do LIN28B, levando a substituição de uma histidina conservada por uma arginina na posição 199 da proteína (p.H199R) e estava ausente em 200 controles brasileiros. O pai da paciente, que apresentou desenvolvimento puberal normal, era portador da mesma variante em heterozigose. Estudos in vitro revelaram que a variante p.H199R não afeta a função de LIN28B na regulação da expressão do miRNA let-7. Outra variante alélica no gene LIN28B foi identificada numa menina com PPC. Essa variante estava localizada no íntron 2 do gene e uma análise computacional demonstrou que ela não altera o sítio de splicing no RNA maduro. Em conclusão, observamos que mutações nos genes KISS1 e KISS1R têm uma baixa prevalência em crianças com puberdade precoce central idiopática. Descrevemos uma nova e rara variante no gene LIN28B (p.H199R) numa menina com puberdade precoce central e os estudos funcionais do LIN28B selvagem ou contendo a variante p.H199R sugeriram que essa variante não está relacionada ao fenótipo de puberdade precoce / Puberty is a complex biological process of sexual development that begins in the late childhood and it is characterized by the maturation of the hipothalamic-pituitary-gonadal axis, secondary sexual characteristics development, growth acceleration and acquisition of the reproductive capacity. Over the last years, the kisspeptin peptide and its receptor KISS1R have been envolved in the regulation of the pulsatile hipothalamic GnRH secretion and consequently with the beginning of the puberty human. Researchers from our laboratory identified mutations in the KISS1R and KISS1 genes in Brazilian children with central precocious puberty (CPP). Studies performed in families and twins estimated that 50%-70% of the variation in the menarce age can be hereditary, however, until last years, we did not have knowledgment of the influence of commun genetic variants in the puberty time. Recently, four independent Genome-Wide Association Studies established that genetic markers near or inside of LIN28B gene were related with the menarce age in normal women. Furthermore, recessive mutations in the LIN28B gene caused a precocious develpment in C. elegans. Interestingly, mouse that overexpress Lin28a exhibited a sexual development delay. Accordingly with these datas investigated the presence of known or new variants in the KISS1, KISS1R and LIN28B genes in a larger cohort of children with CPP to establish the prevalence of these mutations in the etiology of premature sexual development in humans. 107 children with CPP (101 girls and 6 boys) were selected, including sporadic and familial cases. The control population consisted of 200 adults with normal pubertal development. The promoter region and the three exons of KISS1 gene, five exons of KISS1R and four exons of LIN28B were amplified and automatically sequenced. A homozygous variant previously described by researchers from our laboratory in the KISS1 gene, p.H90D, was identified in more 3 no related children with CPP idiophatic. This variant is located in exon 3 of KISS1, resulting in substitution of a histidine to an aspartic acid at position 90 of kisspeptin-1 (p.H90D), in the amino-terminal region of the protein-54 and was absent in 200 Brazilian controls. Previous studies in vitro with the p.H90D variant did not show alterations in the binding or activation capacity and in the resistance to degradation. The activating mutations p.R386P of the KISS1R and p.P74S of the kisspeptin, previously described in central precocious puberty, were not identified in the present study. A new and rare heterozygous variant in the LIN28B gene, p.H199R, was identified in a Brazilian girl with CPP idiophatic. This variant is located in exon 4 of the LIN28B, resulting in substitution of a histidine to an arginine at position 199 of protein (p.H199R) and was absent in 200 Brazilian controls. Her father, which had normal pubertal development, carried the same heterozygous variant. Studies in vitro revealed p.H199R did not affect the function of Lin28B in the regulation of let-7 miRNA expression. Another allelic variant in the LIN28B gene was identified in a girl with CPP. This variant was located in intron 2 of the gene and an in silico analysis showed that it does not change the splicing site in mature RNA. In conclusion, we observed that mutations in the KISS1 and KISS1R genes have a low prevalence in children with idiopathic central precocious puberty. We described a new and rare variant in LIN28B gene (p.H199R) in a girl with central precocious puberty and functional studies of the wild LIN28B or containing p.H199R variant suggested that p.H199R variant of the LIN28B is not related to the precocious puberty phenotype

Ratos submetidos à desnutrição proteica apresentam elevada impulsividade e alterações em comportamentos de avaliação de risco no labirinto em cruz elevado (LCE). A desnutrição também pode influenciar a atividade do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA). Alterações causadas pela desnutrição podem ser parcialmente revertidas pela estimulação ambiental; animais desnutridos e submetidos ao enriquecimento ambiental apresentaram maior locomoção e exploração no LCE, comparados com animais de mesma condição de dieta e que não foram estimulados. Demonstrou-se também que a estimulação pode influenciar os níveis de corticosterona plasmática evidenciando uma alteração da sensibilidade do eixo HPA. Este trabalho tem o objetivo de comparar, em ratos desnutridos (M) e bem nutridos (C), os efeitos do enriquecimento ambiental (E) em relação às concentrações de corticosterona plasmática, expressão de receptores de glicocorticóides (GR) no hipocampo e o desempenho no LCE aos 36 dias de idade. Ratos Wistar machos foram divididos em dois grupos de acordo com a dieta e subdivididos em subgrupos conforme a manipulação ambiental. A manipulação ambiental foi realizada no período de 8 a 35 dias (1 hora por dia). Após o teste no LCE os animais foram decapitados e tiveram o sangue coletado e o cérebro removido. Para a análise de corticosterona plasmática foi utilizada a técnica de radioimunoensaio. Para a quantificação dos receptores (GR) no hipocampo foi realizada uma análise quantitativa de expressão gênica por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Ratos M apresentaram menor peso corporal quando comparados com os ratos C (p<0,001). Em relação ao LCE, ratos M permaneceram uma maior porcentagem de tempo [F(1,44)=9,08; p<0,01] e entraram mais [F(1,44)=9,01; p<0,01] nos braços abertos em relação a C. Animais ME apresentaram porcentagem de tempo nos braços abertos (6% ± 2%) próxima àquela dos animais CN (8% ± 2%). De acordo com a PCR em tempo real, o teste do LCE alterou a quantidade de receptores GR no hipocampo (t(10)=2,37; p<0,05) e essa adaptação ocorreu diferentemente em ratos M quando comparados com os C. Também foi possível observar que a quantidade de receptores GR após o teste do LCE é diferente entre os grupos M e ME (t(11)=4,48; p<0,05). Os dados do presente estudo sugerem que animais desnutridos se expõem a mais situações de risco que ratos bem nutridos. Quando o enriquecimento ambiental foi realizado no período crítico do desenvolvimento do sistema nervoso central observou-se um efeito de neuroproteção em relação às alterações produzidas pela desnutrição tanto na expressão de RNAm de receptores GR como no comportamento de avaliação de risco de ratos no LCE. Os dados do presente trabalho também mostraram que a desnutrição pode alterar a resposta de estresse mediada pelo eixo HPA após exposição ao teste do LCE, e que o enriquecimento ambiental possui efeito protetor em relação os efeitos da desnutrição precoce sobre a atividade deste eixo / Rats subjected to protein malnutrition have high impulsivity and changes in risk-assessment behaviors in the elevated plus maze (EPM). Malnutrition can also influence the activity of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA). Changes caused by malnutrition can be partly reversed by environmental stimulation; malnourished animals subjected to environmental enrichment had higher locomotion and exploration in the EPM compared with animals of the same condition and diet that were not stimulated. It was also demonstrated that stimulation can influence plasma corticosterone levels indicating a change in sensitivity of the HPA axis. This study aims to compare, in undernourished rats (M) and well nourished (C), the effects of environmental enrichment (E) in relation to plasma concentrations of corticosterone, expression of glucocorticoid receptors (GR) in the hippocampus and performance in EPM at 36 days of age. Male Wistar rats were divided into two groups according to diet and subdivided according handling environment. The environmental manipulation was performed within 8 to 35 days (1 hour per day). After testing in the EPM animals were decapitated and had their blood drawn and the brain removed. For the analysis of plasma corticosterone it was used the radioimmunoassay technique. For quantification of the glucocorticoid receptor (GR) in the hippocampus it was performed a quantitative analysis of gene expression by polymerase chain reaction (PCR) in real time. M rats showed lower body weight compared to C rats (p<0.001). In relation to the EPM, M rats showed higher number of entries [F(1,44)=9.01, p<0.01] and remain a higher percentage of time [F(1,44)=9.08, p<0.01] in the open arms as compared to C. ME rats presented a percentage of time in the open arms (6% ± 2%) similar to that of CN animals (8% ± 2%). According to the real time PCR, the EPM test changed the quantity of GR receptors in the hippocampus (t(10)=2.37, p<0.05), and that adaptation was different in M as compared with C rats. It was also observed that the amount of GR after EPM test was different between M and ME groups (t(11)=4.48, p<0.05). Data from the present study suggest that M animals are more likely to explore risk situations than C rats. It is also suggested that environmental enrichment imposed during the critical period of central nervous system development may have neuroprotective effects in both physiological and behavioral changes produced by early protein malnutrition. The data of this work also showed that malnutrition may alter the stress response mediated by the HPA axis after exposure to the EPM test and that environmental enrichment has a protective effect against the effects of malnutrition on the functioning of that axis.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The study aimed to evaluate the silvicultural performance of Eucalyptus spp. clones and select superior clones with higher quality of the wood. The material used for the study was from a clonal test of interspecific hybrids of Eucalyptus spp., in the municipality of Tapes - state of Rio Grande do Sul, belonging to company CMPC Celulose Riograndense. The forest stand was established in August 2003, with initial spacing of 3.0 x 3.0 m, containing 138 clones. The clones were grouped by the diameter at breast height (DBH) and overall height (h), and 29 of them were selected for the study. For the sampling of trees DBH, h, bark thickness (EC), dynamic modulus of elasticity (Ed) using ultrasound and longitudinal residual strain (DRL) resulting from growth stresses. The DRL was measured in living trees with the extensometer method CIRAD-Fôret. Afterwards, 58 trees were felled and broken into logs to evaluate end splitting planks were taken to prepare speciments for wood physical and mechanical properties according to D 143-94 - ASTM (2000) standards. The end logs splitting (IRT) was evaluated in the field, covering the logs end during five days for subsequent measurement. The phenotypic variance components and indirect gain selection estimate for the clones in this study were determined by DRL, wood volume (Vsc), basic density (ρpond) and IRT. The clones showed enough genetic variability to be separated into groups according to DHB at three and seven years, and for h at seven years of age. The early selection at three years after planting can be used to identify Eucalyptus spp. clones with best growth. The DRL showed variability among clones, but no correlation with the dendrometric variables. The mean value for IRT was 0.46%. The DRL was highly correlated with TCL and IRT, however the ρpond and mechanical properties showed no correlations with the DRL. The clones belonging to group 1, which present the lowest levels for TCL and consequently lower IRT, can be considered potential for forest breeding programs. Clone selection performed by the variable DRL, Vsc, ρpond and IRT, provided satisfactory genetic gains, by improving the growth characteristics or improving quality of the wood. / DESEMPENHO SILVICULTURAL E SELEÇÃO DE CLONES DE Eucalyptus spp. PARA A QUALIDADE DA MADEIRA Autor: Rafael Beltrame Orientador: Dr. Clovis Roberto Haselein Data e Local da Defesa: Santa Maria, 14 de dezembro de 2012. O estudo teve como objetivos avaliar o desempenho silvicultural de clones de Eucalyptus spp. e selecionar clones superiores visando à qualidade da madeira. O material utilizado foi procedente de um teste clonal de híbridos interespecíficos de Eucalyptus spp., conduzido no município de Tapes-RS, pertencente à empresa CMPC Celulose Riograndense. O povoamento foi implantado em agosto de 2003, com espaçamento inicial de 3,0 x 3,0 m, contendo 138 clones. Os clones foram avaliados e agrupados quanto ao diâmetro à altura do peito (DAP) e altura total (h), selecionandose 29 deles para o estudo. Nas árvores, foram medidos o DAP, a h, a espessura de casca (EC), o módulo de elasticidade dinâmico (Ed) com auxílio do ultrassom e a deformação residual longitudinal (DRL) decorrente das tensões de crescimento. A DRL foi medida em árvores vivas, utilizando o extensômetro, pelo método CIRADFôret. Em seguida, 58 árvores foram abatidas e desdobradas em toras para avaliação das rachaduras de topo e confecção de amostras para a realização dos testes físicos e mecânicos, conforme a norma D 143-94 - ASTM (2000). O índice de rachaduras de topo das toras (IRT) foi avaliado a campo, ensacando as extremidades dessas por um período de cinco dias para posterior medição. A estimativa dos componentes da variância fenotípica e o ganho indireto de seleção para os clones do estudo foram determinadas por meio da DRL, volume sem casca (Vsc), massa específica básica ponderada (ρpond) e IRT. Os clones apresentaram variabilidade genética suficiente para serem separados em grupos quanto ao DAP, aos três e aos sete anos, e quanto à h das árvores, aos sete anos de idade. A seleção precoce aos três anos após o plantio pode ser empregada para identificar clones de Eucalyptus spp. com melhor vigor de crescimento. A DRL apresentou variabilidade entre os clones, porém não apresentou correlações com as variáveis dendrométricas. O valor médio do IRT foi de 0,46%. A DRL apresentou alta correlação com a TCL e o IRT, entretanto, a ρpond e as propriedades mecânicas não apresentaram correlações com a DRL. Os clones pertencentes ao grupo 1, por apresentarem os menores níveis para a TCL e, consequentemente, menores IRTs, podem ser considerados potenciais para programas de melhoramento genético florestal. A seleção de clones realizada por meio das variáveis DRL, Vsc, ρpond e IRT proporcionaram ganhos genéticos satisfatórios, tanto para o melhoramento das características de crescimento quanto para a qualidade da madeira.

Submitted by Izabel Franco (izabel-franco@ufscar.br) on 2016-09-19T12:17:15Z No. of bitstreams: 1 DissAB.pdf: 1469709 bytes, checksum: 4e3a475885c84908531d17d4a30fec4e (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-20T13:49:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissAB.pdf: 1469709 bytes, checksum: 4e3a475885c84908531d17d4a30fec4e (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-20T13:49:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissAB.pdf: 1469709 bytes, checksum: 4e3a475885c84908531d17d4a30fec4e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-20T13:49:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissAB.pdf: 1469709 bytes, checksum: 4e3a475885c84908531d17d4a30fec4e (MD5) Previous issue date: 2014-06-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / In Brazilian context, the official guideline recommends that Early Stimulation have the purpose of providing the development of children with special needs. In the use of the institutions, this practice involves different types of professionals and of guided acquirements to children with risk to their development. The diversity of practices makes it relevant to describe the performance of the professionals that work in Early Stimulation programs as a way of enabling the improvement of the work carried out, aiming the harmonization of concepts, guidelines and practices. In this research, the purpose was to describe the performance of 13 professionals experienced in working at early stimulation programs, in three institutions, and to analyze the relationships established by these professionals between their professional practice and the knowledge acquired during graduation course. For this purpose, an exploratory study was carried out, whose data collection consisted of semistructured interviews with the abovementioned professionals and the collection of the institutions’ data through consults to the coordination and to the available documents. Regarding the results, the interviewed professionals conceived early stimulation as the provision of opportunities to the child’s development; and/or support to the Family or the prevention of risk for the development. The professionals considered it important for a good service in the early stimulation program the professional involvement and/or specific working conditions and/or partnership with the family. Regarding the difficulties faced in carrying out the work, the reports were focused on the lack of familiar participation/involvement, the inadequacy of work conditions and the work with the child itself. Regarding the preparation/training that the Higher Education Institution (HEI) offered for the work in early stimulation program, eight interviewed professionals informed that the graduation course offered the training on the Early Stimulation; however, half of them related that this training was inadequate/superficial. From the thirteen professionals, five declared that the HEI did not offer preparation/training to work with early stimulation. From all the professionals, tem considered that the HEI could have offered better training, even those that offered some; from those tem, five declared that there should be better articulation between theory and practice. / No contexto brasileiro, a diretriz oficial preconiza que a Estimulação Precoce tem por finalidade propiciar o desenvolvimento de crianças com necessidades especiais. Na prática das instituições, esse serviço requer diferentes tipos de profissionais e de saberes orientados também para as crianças com risco para o desenvolvimento. A diversidade de serviços torna relevante caracterizar a atuação dos profissionais nos programas de Estimulação Precoce, como forma de possibilitar a compreensão do trabalho realizado, visando a compatibilização dos conceitos, diretrizes e práticas. Nesta pesquisa, visou-se caracterizar a atuação de 13 profissionais, com experiência de trabalho em programas de Estimulação Precoce, em três instituições, e analisar as relações que os profissionais estabeleciam entre a sua atuação profissional e a formação recebida durante a graduação. Para tanto, foi realizado um estudo exploratório cuja coleta de dados consistiu na realização de entrevistas semiestruturadas com os referidos profissionais e coleta de dados das instituições por meio de consulta à coordenação e aos documentos disponíveis. Com relação aos resultados, os entrevistados concebiam a Estimulação Precoce como oferecimento de oportunidades para o desenvolvimento da criança; e/ou suporte à família ou prevenção de risco para o desenvolvimento. Os profissionais consideravam importante para um bom atendimento, no programa de Estimulação Precoce, o envolvimento profissional e/ou condições específicas de trabalho e/ou parceria com a família. Quanto às dificuldades enfrentadas, os relatos referiramse à falta de participação/envolvimento familiar; à insuficiência das condições de trabalho e às atividades específicas com a criança. Sobre o preparo/formação que a Instituição de Ensino Superior (IES) ofereceu para a atuação na Estimulação Precoce, oito entrevistados informaram que o curso de graduação forneceu formação a respeito da Estimulação Precoce, porém a metade desses profissionais relatou que essa formação foi insuficiente/superficial e cinco afirmaram que a IES não preparou/formou para atuar na Estimulação Precoce. Do total de profissionais, dez consideraram que a IES poderia ter proporcionado melhor formação, mesmo aquelas que ofereceram alguma formação; destes dez, cinco afirmaram que deveria ter maior articulação entre teoria e prática.

Submitted by Regina Correa (rehecorrea@gmail.com) on 2016-09-26T14:03:00Z No. of bitstreams: 1 DissMGM.pdf: 2144965 bytes, checksum: 356a93562613810a808bc41438e7a3ef (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-27T19:25:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissMGM.pdf: 2144965 bytes, checksum: 356a93562613810a808bc41438e7a3ef (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-27T19:25:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissMGM.pdf: 2144965 bytes, checksum: 356a93562613810a808bc41438e7a3ef (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T19:25:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissMGM.pdf: 2144965 bytes, checksum: 356a93562613810a808bc41438e7a3ef (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Motor development is a process of changes in motor behavior over time, due to an interaction of systems within the organism, the environment and tasks. The presence of risk factors, such as prematurity, may influence motor development, including the control of head movements. In this context, some strategies may prevent delay in the acquisition of head control, which is required for more complex abilities. Postural manipulation may be a strategy to improve head control in preterm infants, as it is known that postural manipulation may facilitate more mature head movements in full-term infants between birth and four months of age. Objective: To assess the influence of postural manipulation on head movements in full-term and late preterm infants at 5-6 months of corrected age. Method: Thirty eight infants (22 full-term infants and 16 late preterm infants, born at 34-36 weeks gestation) were assessed in a infant chair once in three experimental conditions: a) unsupported supine, b) supported supine (small pillow as an external support), and c) supported reclined at an angle of 20 degrees (small pillow). To elicit head movements, a black and white smiley face card was manually moved from side to side in the infant’s visual field for two minutes in each posture. A two-way repeated measures ANOVA was conducted to compare the groups and conditions (p <0.05). Results: We found that body orientation or external support influenced the control of head movement however in a different way than expected, possibly because at these ages infants have acquired strength and control enough for the task even in the most demanding postures at neuromotor and biomechanical level. No difference was observed between the experimental conditions for most variables, however, the use of support promoted more controlled movements. There was a difference for the desaceleration index (F [1.44]= 4.741; p=0.01), which the preterm infants presented higher values than full-term infants in supported supine position (p=0,012). Moreover, for the preterm infants, they presented higher values in the supported supine compared to the unsupported supine, and supported reclined (p = 0.007 and p = 0.003 , respectively). Conclusion:. We suggest the external support of the head promoted more controlled head movements in preterm infants. These findings suggested posture manipulation may be an early intervention strategy for infants at risk for developmental delay. / O desenvolvimento motor é um processo de mudanças no comportamento motor ao longo do tempo, que resulta da interação do indivíduo com o ambiente e a tarefa. Assim, a presença de fatores de risco, como a prematuridade, influencia o controle do movimento de cabeça. Neste contexto, estratégias podem prevenir o atraso na aquisição do controle deste segmento, a qual é pré-requisito para habilidades mais complexas. A mudança na orientação corporal pode ser uma estratégia, pois foi favorável em lactentes de termo do nascimento ao quarto mês por propiciar movimentos de cabeça com padrão mais maduro. Objetivo: Verificar a influência da orientação corporal nos movimentos de cabeça em lactentes a termo e pré-termo tardios aos 5-6 meses de idade. Método: Foi realizada avaliação cinemática do movimento de cabeça com 38 lactentes (22 a termo e 16 pré-termo tardios, nascidos entre 34 e 36 semanas e 6 dias de idade gestacional) nas orientações: supino, supino com suporte de cabeça e reclinado com suporte. Um cartão de estimulação visual foi movido manualmente no plano frontal por 2 minutos em cada postura, a fim de eliciar o movimento de cabeça. Estatística: Os dados foram analisados por meio da análise de variância (ANOVA) para medidas repetidas, com nível de significância de p≤0.05. Resultados: O presente estudo verificou que, nas condições de nascimento a termo e prétermo tardio, a orientação corporal ou o suporte externo exerceram influências no controle do movimento da cabeça de forma divergente da esperada, possivelmente porque nessas idades os lactentes já adquiriram força e controle o suficiente para a execução da tarefa mesmo em posturas mais exigentes a nível neuromotor e biomecânico. Não foi observada diferença entre as condições experimentais para a maior parte das variáveis, entretanto, o uso do suporte favoreceu a execução de movimentos mais controlados e com padrão mais maduro, sendo que houve diferença para o índice de desaceleração (F [1,44]= 4,741; p=0,01), no qual os pré-termo apresentaram maior valor que os a termo na postura supino com suporte (p=0,012). Além disso, para os pré-termo, foi observado maiores valores na postura supino com suporte que na sem suporte e reclinado com suporte (p = 0,007 e p = 0,003, respectivamente). Conclusão: Sugere-se que o uso do suporte de cabeça promoveu movimentos de cabeça mais controlados, evidenciando seu possível uso enquanto estratégia de intervenção precoce para lactentes com fatores de risco ou com alteração no desenvolvimento neurosensoriomotor.

Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2018-02-26T14:04:16Z No. of bitstreams: 1 PGPV16MA197.pdf: 2230923 bytes, checksum: e668d82b2261743e59f2124d9315814d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-26T14:04:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV16MA197.pdf: 2230923 bytes, checksum: e668d82b2261743e59f2124d9315814d (MD5) Previous issue date: 2016-07-13 / Capes / Highland regions of Santa Catarina State, Brazil, have been acquiring great importance due to the high potential for wine production from Vitis vinifera L. cultivars, but due to highlands of Santa Catarina State are being in an emergent wine grown region fundamental investigations into vineyard practices are necessary. This work aims to contribute to the generation of data that can direct the management of leaf removal in the vineyards in order to develop a differentiated quality wine, determining times of leaf removal in the varieties Cabernet Sauvignon and Sauvignon Blanc, and evaluate the its effect on vegetative, productive aspects, enological potential of grape wine quality, and the occurrence of bunch rot. The results of this study show the importance of management of leaf removal grapes wines, demonstrating its benefits in relation to technological and phenolic maturity indices, providing better quality grape, higher productivity and better vegetative balance. And the leaf removal, held between phenological full flowering stage and grain pea resulted in a significant reduction in the incidence and severity of bunch rot of Cabernet Sauvignon and Sauvignon Blanc grown in high altitudes of Santa Catarina. It is evident that the removal leaf vine is indispensable for obtaining a grape of high quality and sanity / As regiões de altitude de Santa Catarina vem despertando interesse de investidores, pela sua característica de elaborar vinhos de elevada qualidade. Porém, por ser uma atividade ainda recente nessas regiões, há uma grande demanda pela geração de informações técnicas adequadas, visto que possui características distintas das demais regiões vitícolas do Brasil. A presente dissertação visa contribuir na geração de informações que possam direcionar o manejo da desfolha nos vinhedos, a fim de elaborar um vinho de qualidade diferenciada, determinando o efeito de diferentes épocas de desfolha nas variedades Cabernet Sauvignon e Sauvignon Blanc sobre aspectos vegetativos, produtivos, potencial enológico da uva, qualidade do vinho, e na ocorrência de podridão cinzenta (Botrytis cinerea Pers) nos cachos. Os resultados deste estudo evidenciam a importância do manejo da desfolha da videira, demonstrando seus beneficios em relação aos índices de maturação tecnológica e fenólica, propiciando melhor qualidade da uva, maior produtividade e melhor equilíbrio vegeto:produtivo. Além disso, a realização de uma desfolha precoce, realizada entre os estádios fenológicos plena florada e grão ervilha resultaram em redução da incidência e severidade de podridão cinzenta (Botrytis cinerea) nos cachos das variedades Cabernet Sauvignon e Sauvignon Blanc cultivadas em elevadas altitudes de Santa Catarina. Evidencia-se que o manejo da desfolha da videira é indispensável para obtenção de uma uva de elevada qualidade e sanidade

Submitted by DANILO GUALBERTO DE SANDRE null (danilo.sandre@hotmail.com) on 2016-07-14T21:57:39Z No. of bitstreams: 1 TESE e ARTIGO Danilo18.pdf: 1530531 bytes, checksum: 1a9072d60b1aee7abd7f4a51ea079af4 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-07-18T20:35:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sandre_dg_me_araca.pdf: 1530531 bytes, checksum: 1a9072d60b1aee7abd7f4a51ea079af4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-18T20:35:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sandre_dg_me_araca.pdf: 1530531 bytes, checksum: 1a9072d60b1aee7abd7f4a51ea079af4 (MD5) Previous issue date: 2016-06-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Dois experimentos envolvendo 1280 pintos machos Cobb 500, foram conduzidos para avaliar as possíveis interações entre condicionamento termo precoce e balanço eletrolítico da dieta sobre o desempenho de frangos de corte, bem como estudar os efeitos do estresse térmico agudo e crônico. No d 8, as aves foram transferidas para 32 boxes, com raspas de madeira e resíduo desidratado de acerola (proporção ½ a ½ ) como cama, mantendo os mesmos tratamentos com oito repetições cada. Os dados da Exp. 1 (stress agudo) e 2 (stress crónico) foram combinados num arranjo fatorial 2x2x2 (com e sem condicionamento térmico precoce (CTP); dieta com e sem equilíbrio eletrolítico (EE); e estresse térmico agudo ou crônico. A dieta com EE foi calculada como mEq / kg para a Na + K-Cl e o valor da relação (K + Cl) / Na, com 300 mEq / kg e uma proporção de 3: 1, respectivamente. As aves foram alimentadas com: (1) uma dieta tradicional (176 mEq / kg e a relação de 3,36: 1) sem CTP; (2) dieta tradicional com CTP; (3) dieta com EE e sem CTP e (4) dieta com EE e CTP. Ração e água foram fornecidas ad libitum. Metade das aves foram expostas a 36 °C durante 24 horas com a idade de 5, enquanto que a outra metade não foi exposto a CTP. Na idade de 38 d, metade dos pintos foram termicamente desafiados por estresse térmico agudo de 36 °C durante 6h e com a idade de 35 a 39 d, outra metade dos pintos foram termicamente desafiado por um estresse térmico crônico de 32 °C por 6h. O consumo de ração, peso corporal (PC), a umidade das fezes e deposição de gordura abdominal foram determinadas a 46 d de idade e taxa de conversão alimentar ajustado foi calculado através da inclusão de PC da mortalidade. Coordenadas tricromáticas (L*, a*, e b*) foram medidos no músculo do peito, às 24h. Nenhum efeito de interação foi encontrado com nenhum dos parâmetros avaliados. Assim, não existe sinergismo para qualquer um dos traços. Houve aumento expressivo da mortalidade [(3,06-65,62%) / P <0,0001] de estresse agudo. O EE aumentou a umidade nas fezes (P = 0,0202). Os conteúdos de lipídios dos tecidos abdominais foram afetados pela exposição ao calor e diminuiu significativamente (P <0,0001) para crônica (53.9g) versus estresse agudo (127.5g). Além disso, um efeito significativo (P <0,0001) valores mais elevados foi encontrado em carne para aguda (66,4 e 23,2) versus o estresse crônico (57,6 e 17,6), em L* e b*, respectivamente. Os resultados sugerem que as aves submetidas a estresse agudo estão sujeitos a síndrome do músculo pálida aves. / Two experiments involving 1280 male Cobb 500 chicks were conducted to evaluate the possible interactions between early thermal conditioning and electrolyte balance of the diet on the performance of broiler chickens, as well as studying the effects of acute and chronic heat stress. On d 8, the broilers were transferred to 32 floor pens with wood shavings as litter while maintaining the same treatments with eight replicates each. The data from Exp. 1 (acute stress) and 2 (chronic stress) were combined in a 2x2x2 factorial arrangement [with and without early thermal conditioning (ETC)]; diet with and without electrolyte balance (EB); and acute or chronic heat stress. The diet with EB was calculated as mEq/kg for Na+K-Cl and the value the ratio (K+Cl)/Na, with 300 mEq/kg and a ratio the 3:1, respectively. The birds were fed: (1) a traditional diet (176 mEq/kg and a ratio the 3.36:1) without ETC; (2) traditional diet with ETC; (3) diet with EB and without ETC and (4) diet with EB and ETC. Feed and water were supplied ad libitum. Half of birds were exposed to 36°C for 24h at the age of 5, whereas the remaining half was not exposed to ETC. At the age of 38 d, half chicks were thermally challenged by an acute heat stress of 36°C for 6h or at the age of 35 to 39 d, another half chicks were thermally challenged by a chronic heat stress of 32°C for 6h. Feed intake, body weight (BW), moisture of feces and abdominal fat deposition were determined at 46 d of age and adjusted feed conversion ratio was calculated by including BW of mortality. Trichromatic coordinates (L*, a*, and b*) were measured on the breast muscle at 24h. No interaction effects were found for any of the parameters evaluated. Thus, there is no synergism for any of the traits. There was expressive increase of mortality [(3.06 to 65.62%) / P<0.0001] from acute stress. The EB increased moisture of feces (P=0.0202). Lipid contents of abdominal tissues was affected by heat exposure with significantly decreased (P<0.0001) to chronic (53.9g) versus acute stress (127.5g). Also, a significant effect (P<0.0001) values higher was found in meat for acute (66.4 and 23.2) versus chronic stress (57.6 and 17.6) on L* and b*, respectively. The results suggest that birds submitted to acute stress are subject to pale poultry muscle syndrome.