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Avalia??o do efeito radioprotetor da lidoca?na e da histamina em gl?ndulas par?tidas de ratos submetidos ? radioterapiaMedella Junior, Francisco de Assis Carvalho 18 August 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-08-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Head and neck radiotherapy often involves major salivary glands, which may result in hyposalivation and xerostomia. Qualitative and quantitative salivary dysfunctions predispose the individual to changes in the oral mucosa and teeth, cause impairment to oral functions and negative impact on quality of life. In the first article of this study we carried out a literature review addressing the therapeutic management of salivary dysfunction. Established in the literature treatment modalities were reviewed, as well as new options still under investigation. The second paper describes an experimental study, which aimed to evaluate the radioprotective effect of histamine and lidocaine on morphological changes induced by radiation in parotid glands of rats. Fifty-six Wistar rats were divided into four groups: Control, Irradiated, Lidocaine and Histamine. The experimental groups were submitted to ionizing radiation, with the exception of the control group, in a single session of 20 Gy. In the Lidocaine Group this drug was administered at a concentration of 2%, intraperitoneally 10 minutes before radiotherapy, dose of 1mg / kg. In the histamine group, the substance was administered subcutaneously at a concentration of 0.5 mg/0.5 mL and a dose of 0.1 mg/kg daily for seven days, starting 24 hours before radiotherapy. Seven and 30 days after radiotherapy the animals were euthanized and their parotids were dissected for morphological analysis and measurement of the nuclear area of acinar cells. Morphological alterations such as acinar disorganization, cytoplasmic vacuolation, suggestive alterations of apoptosis / necrosis and nuclear pleomorphism were observed in the glands of the irradiated rats, with no differences between the groups receiving lidocaine or histamine. Nuclear area of acinar cells was significantly higher in the Lidocaine and Histamine groups. Despite this result, the parotid glands of irradiated animals showed significant mophological changes, regardless of treatment with lidocaine or histamine. The methodology used and results obtained in this study do not support the radioprotective effect of administered substances on the morphology of the rats parotid glands. / A radioterapia direcionada ? regi?o de cabe?a e pesco?o frequentemente envolve as gl?ndulas salivares maiores, podendo resultar em hipossaliva??o e xerostomia. Disfun??es salivares qualitativas e quantitativas predisp?e o indiv?duo a altera??es na mucosa bucal e nos dentes, causam preju?zo ?s fun??es orais e impacto negativo na qualidade de vida. No primeiro artigo desta disserta??o foi realizada uma revis?o de literatura abordando o manejo terap?utico das disfun??es salivares. Foram revisadas modalidades de tratamento j? consagradas na literatura, bem como novas op??es ainda em investiga??o. O segundo artigo descreve um estudo experimental que teve como objetivo avaliar o efeito da lidoca?na e da histamina sobre altera??es morfol?gicas induzidas pela radioterapia em gl?ndulas par?tidas de ratos. Foram utilizados 56 ratos Wistar, divididos em quatro grupos: Controle, Irradiado, Lidoca?na e Histamina. Os animais foram submetidos ? radia??o ionizante, excetuando-se o grupo-controle, em sess?o ?nica de 20 Gy. No grupo lidoca?na o f?rmaco foi administrado por via intraperitoneal na concentra??o de 2%, 10 minutos antes da radioterapia, na dosagem de 1mg/Kg. No grupo histamina a subst?ncia foi administrada por via subcut?nea na concentra??o de 0,5 mg/0,5 mL e dosagem de 0,1 mg/Kg, diariamente, por sete dias, iniciando-se 24 horas antes da radioterapia. Sete e trinta dias ap?s a radioterapia os animais foram eutanasiados e suas par?tidas foram dissecadas para analise morfol?gica e mensura??o da ?rea nuclear das c?lulas acinares. Altera??es morfol?gicas como desorganiza??o acinar, vacuola??o citoplasm?tica, altera??es sugestivas de apoptose/necrose e pleomorfismo nuclear foram observadas nas gl?ndulas dos animais irradiados, sem diferen?as entre os grupos que receberam lidoca?na ou histamina. A ?rea nuclear das c?lulas acinares foi significativamente superior nos grupos Lidoca?na e Histamina. Apesar deste resultado, as gl?ndulas par?tidas dos animais irradiados apresentaram importantes altera??es morfol?gicas, independente do tratamento com lidoca?na ou histamina. A metodologia utilizada e os resultados obtidos neste estudo n?o suportam o efeito radioprotetor das subst?ncias administradas sobre a morfologia de gl?ndulas par?tidas de ratos.
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Integrina beta1 no desenvolvimento das glândulas salivares humanas / Integrin beta1 in developing human salivary glandsMeisel, Dirce Mary Correia Lima 21 January 2011 (has links)
INTRODUÇÃO: O desenvolvimento das glândulas salivares envolve um processo coordenado de interações moleculares complexas, nas quais as integrinas têm papel fundamental. As integrinas são uma família de receptores transmembrânicos, heterodímeros, compostos por duas subunidades: alfa e beta que estão ligadas de forma não covalente e dependentes de cations bivalentes. Estes heterodímeros medeiam sinais intra e extracelulares envolvidos na organização das células em tecidos e órgãos durante seu desenvolvimento. Em particular a integrina beta1 está envolvida na proliferação e diferenciação de células no desenvolvimento dos tecidos epiteliais. OBJETIVOS: Para compreender o papel da integrina beta1 no desenvolvimento das glândulas salivares humanas, estudamos a sua expressão por meio da hibridização in situ em tecido fetal humano em desenvolvimento. MATERIAL E MÉTODOS: A hibridização in situ com o método chromogenic in situ hibridization (CISH) foi utilizada para investigar a expressão genética da integrina beta1 em espécimes de glândulas salivares em desenvolvimento derivados de 30 fetos humanos em vários estágios gestacionais (de 825 semanas de vida intrauterina). Os resultados obtidos com a hibridização in situ foram relacionados com os aspectos morfológicos das glândulas salivares em desenvolvimento em cada fase da evolução da morfogênese glandular, por meio de análise qualitativa. RESULTADOS: Expressão da integrina beta1 foi detectada em raras células na fase prebotão. A expressão dessa molécula foi detectada em mais estruturas com a evolução do desenvolvimento morfogenético das glândulas salivares. CONCLUSÕES: A expressão a integrina beta1 parece ser regulada de forma temporoespacial e é associada ao estabelecimento do fenótipo maduro das glândulas salivares / INTRODUCTION: Salivary gland development entails coordinated processes involving complex molecular interactions in which integrins have a fundamental role. The integrins are a family of heterodimeric transmembrane receptors comprising alpha and beta subunits that mediate intercellular and extracellular signals involved in the organisation of cells in tissues and organs during development. The beta1 integrin in particular have been implicated in proliferation and differentiation of cells involved in the development of epithelial tissues. OBJECTIVE: To understand the role of beta1 integrin in salivary gland development we have studied its expression in human foetal tissues. MATERIAL AND METHODS: In situ hybridisation CISH technique was used to compare the expression and localisation of integrin beta1 with differentiation markers in developing human salivary glands obtained from foetuses of 825 gestational weeks. RESULTS: Integrin beta1 first appeared during bud stage in a few cells and its distribution increased as salivary gland morphogenesis progressed. CONCLUSIONS: The developmentally regulated expression of integrin beta1 in association with the establishment of a mature phenotype of salivary glands is suggestive of its role in salivary gland morphogenesis
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Aplicação das imagens de ressonância magnética convencionais e ponderadas por difusão no diagnóstico de alterações das glândulas salivares maiores / Application of conventional magnetic resonance imaging and diffusion weighted imaging by the diagnosis of changes in the major salivary glandsTerra, Guilherme Teixeira Coelho 26 January 2017 (has links)
A ressonância magnética (RM) tem sido amplamente utilizada no diagnóstico por imagem de alterações de glândulas salivares. No entanto, a presença de aspectos similares nas imagens com técnicas convencionais de RM dificulta a distinção do diagnóstico entre patologias inflamatórias e neoplásicas. O objetivo deste estudo foi comparar valores dos coeficientes de difusão aparentes (ADC - Apparent Diffusion Coefficient) de imagem ponderada em difusão (DWI - Difusion Weighted Imaging) com ressonância magnética, entre glândulas salivares normais, casos com sialoadenite e com adenoma pleomórfico das glândulas salivares maiores. Vinte e dois pacientes (totalizando 44 glândulas salivares maiores) diagnosticados com sialoadenite unilateral (em glândula parótida ou submandibular) ou adenoma pleomórfico (apenas em parótida) foram selecionados. Todas as glândulas contralaterais não afetadas também foram analisadas. Imagens de RM ponderadas em T1, T2 e DWI foram obtidas utilizando sequências de pulso spin-eco (SE) com um aparelho de ressonância magnética de 1.5 Tesla. Primeiramente, a performance diagnóstica (sensitividade, especificidade e acurácia) foi calculada para três observadores após analisarem imagens de RM e DWI, separadamente. Em seguida, os valores médios de ADC foram comparados entre os três grupos analisados (glândulas normais contralateral, sialoadenite e adenoma pleomórfico). O uso da DWI rendeu uma melhor performance diagnóstica em geral para todos os observadores. Além disso, casos de adenoma pleomórfico apresentaram os maiores valores de ADC do estudo. Dentro das limitações deste estudo, os resultados sugerem que DWI permite a diferenciação entre sialoadenite e adenoma pleomórfico. / Alterations of the salivary glands are usually detected by conventional magnetic resonance imaging (MRI) techniques. However, their imaging presentation may present similar aspects. The aim of this study was to compare apparent diffusion coefficient (ADC) values from diffusion-weighted MRI (DWI) among normal salivary glands, cases with sialadenitis and with pleomorphic adenoma of major salivary glands. Twenty-two patients (totaling 44 major salivary glands) diagnosed with either unilateral sialadenitis (on either parotid or submandibular gland) or parotid gland pleomorphic adenoma were selected. Contralateral non-affected glands (normal) were also analyzed. DWI images were achieved using a spin-echo (SE) pulse sequence with a 1.5T MRI device. Mean ADC values were compared among the three groups analyzed (contralateral normal glands, sialadenitis and pleomorphic adenoma). Furthermore, diagnostic performance of MRI and DWI were calculated for three observers. DWI also presented better diagnostic performance results. In addition, cases of pleomorphic adenoma presented the highest ADC values of the study. Within the limitations of this study, the present results suggest that DWI allows for differentiation between parotid sialadenitis and pleomorphic adenoma.
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Estudo do efeito da irradiação com laser em baixa intensidade no metabolismo celular das glândulas salivares e na glicemia de ratas diabéticas induzidas por estreptozotocina / Effect of laser irradiation on cellular metabolism of salivary glands and glycaemic state of diabetic-induced streptozotocin ratsSimões, Alyne 03 June 2008 (has links)
Considerando que o diabetes experimental altera a morfologia e função das glândulas salivares de ratos, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da irradiação com laser em baixa intensidade no metabolismo das glândulas parótidas (GP) e submandibulares (GSM) de ratas diabéticas, assim como analisar a glicemia destes animais. Ratas Wistar com aproximadamente 195 g foram divididas em diabéticas (D) e controles (C), e subdivididas de acordo com a dose de irradiação recebida: C-D0 (0 J/cm2), C-D5 (5 J/cm2), C-D10 (10 J/cm2), C-D20 (20 J/cm2). O diabetes foi induzido por injeção de estreptozotocina 60 mg/kg p.c., e confirmado após 72 h, através da glicemia. Vinte e nove dias após a indução, as ratas receberam a irradiação de acordo com o grupo a qual pertenciam. O laser de diodo (Ecco Fibras®), 660nm, foi utilizado nas áreas correspondentes às GP e GSM. Após 24 h, as ratas foram eutanasiadas e as glândulas removidas para posterior análise iônica, histológica e bioquímica de concentração total de proteína, atividade das enzimas catalase, peroxidase e amilase. Além disso, análise glicêmica também foi realizada. Análise de variância e teste de Tukey revelaram diminuição da glicemia nos grupos D5 e D20 (p<0,05), assim como diminuição na atividade da enzima catalase, nestas mesmas dosagens, nas GP e GSM para valores similares às ratas não-diabéticas (p>0,05), sendo que para as GSM, a dose de 10 J/cm2 também se mostrou efetiva. Análise histológica demonstrou acúmulo de lipídeos nas GP dos animais diabéticos, sendo que para os grupos que receberam irradiação, este acúmulo foi reduzido. Com base nos resultados, podemos concluir que a irradiação com laser vermelho nas GP e GSM altera a atividade enzimática da catalase, assim como altera a concentração de glicose sangüínea e o acúmulo de lipídeos. Com isto, mais estudos devem ser realizados objetivando continuar as análises de parâmetros antioxidantes, assim como, análise glicêmica, uma vez que a hiperglicemia e alterações no sistema antioxidante são diretamente relacionadas às complicações do diabetes. / Considering that experimental diabetes alters rat salivary gland morphology and function, the aim of this study was to evaluate the effect of laser irradiation (LI) on the glycaemic state and some biochemical parameters of the parotid glands (PG) and submandibulary glands (SMG) in diabetic and non diabetic rats, which were divided into 8 groups: D0/5/10/20 and C0/5/10/20, respectively. Diabetes was induced by administration of streptozotocin (60 mg/kg) and confirmed later by the glycaemia results. Twenty-nine (29) days after the induction, the PG and SMG of groups D-C5, D-C10 and D-C20, were irradiated with 5, 10 and 20 J/cm2 of laser diode (660nm/100mW) respectively. On the following day, the rats were euthanized and the blood glucose determined. The PG and SMG were removed and total protein concentration and amylase, peroxidase and catalase activities were performed, as well as, ionic and histological analysis. The analysis of the results (ANOVA and Tukey tests) revealed a decrease in the glycaemia level for groups D5 and D20 (p<0.05). In addition, diabetic rats showed higher catalase and peroxidase activities than non diabetic groups, without radiation. The doses of 5 and 20 J/cm2 decreased catalase activity, of PG and SMG, of diabetic groups to non diabetic values (p<0.05). Moreover, the dose of 10 J/cm2 also was effective to SMGs. Histological analysis showed accumulation of lipids droplets on parotid glands of diabetic animals. However, the lipid droplets quantity was lower in comparison with that observed to non irradiated diabetic animals. The results of the present study suggest that the classical organs which control glycaemia should also be analyzed after being irradiated with LI, once hyperglycaemia and alterations of the antioxidant system are the main causes of diabetes complications.
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Considerações sobre a presença de formas promastigotas de Leishmania spp. em intestinos, ovários e glândulas salivares de carrapatos Rhipicephalus sanguineus em cães de áreas endêmicas / Milena Araúz Viol. -Viol, Milena Araúz. January 2015 (has links)
Resumo:Nós investigamos a presença de formas promastigotas de Leishmania spp. pelo método de imuno-histoquímica em intestinos, ovários e glândulas salivares de carrapatos Rhipicephalus sanguineus em cães. Neste estudo, foram utilizados, 66 cães positivos e 33 negativos para Leishmania spp. pelo teste Imunoenzimático (ELISA), por exame citológico direto e por meio do método da Reação em cadeia da polimerase (PCR). Um total de 990 carrapatos foram colhidos desses 99 cães, sendo 10 por animal e estes foram dissecados, com posterior separação dos intestinos, ovários e glândulas salivares. Lâminas contendo os órgãos supramencionados foram confeccionadas para a execução da imuno-histoquímica (IHQ). Também foi efetuada a PCR em tempo real desses órgãos, bem como a quantificação da sua carga parasitária. Pela PCR em tempo real dos intestinos, ovários e glândulas salivares dos carrapatos, foram detectadas positividades de 93,94%, 46,97% e 27,27%, respectivamente. As cargas parasitárias médias no intestino foram de 9027,90 Leishmania/μL, nos ovários 411,66 Leishmania/μL e nas glândulas salivares 305,56 Leishmania/μL. Com relação as leituras das lâminas de IHQ, em 98,48% dos intestinos, 13,64% dos ovários e 7,58% das glândulas salivares houve imunomarcação positiva para Leishmania spp. Em virtude destes resultados evidenciados pela técnica de IHQ, com utilização do anticorpo primário lipofosfoglicano (LPG), nós consideramos a possibilidade da presença de formas promastigotas de Leishmania spp. em órgãos de R. sanguineus / Abstract:We investigated the presence of promastigotes of Leishmania spp. by immunohistochemical method in intestines, ovaries and salivary glands of Rhipicephalus sanguineus ticks in dogs. In this study, was used, 66 dogs positive and 33 negative for Leishmania spp. by immunoenzymatic test (ELISA), direct cytological examination and by polymerase chain reaction (PCR). A total of 990 ticks were collected from these 99 dogs, 10 per animal and these were dissected, with further separation of the intestines, ovaries and salivary glands. Slides of these organs were made for the implementation of immunohistochemistry (IHC). Also the real-time PCR was performed in these organs as well as the quantification of that parasite load. For real-time PCR of the guts, ovaries and salivary glands of ticks were detected positivities 93.94%, 46.97% and 27.27%, respectively. The average parasitic loads in the intestine were 9027.90 Leishmania/μL, the ovaries 411.66 Leishmania/μL and salivary glands 305.56 Leishmania/μL. Regarding the readings of IHC slides in 98.48% of the intestines, 13.64% of the ovaries and 7.58% of the salivary glands were positive for Leishmania spp. In view of these results shown by IHC technique, using the lipofosfoglicano primary antibody (LPG), we consider the possibility of the presence of promastigotes of Leishmania spp. in R. sanguineus organs / Orientador:Katia Denise Saraiva Bresciani / Banca:Jancarlo Ferreira Gomes / Banca:Suely Regina Mogami Bomfim / Banca:Gisele Fabrino Machado / Banca:Mônica Regina Vendrame Amarante / Doutor
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Efeito da terapia laser de baixa pot?ncia em gl?ndulas par?tidas de camundongos submetidos ? radioterapiaAcauan, Monique Dossena 25 March 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-21T20:48:49Z
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Previous issue date: 2015-03-25 / Head and neck radiotherapy often involves major salivary glands and causes morphologic and functional alterations, resulting in hyposalivation and xerostomia. Literature was reviewed in the first manuscript, addressing the structural changes observed in the salivary glands resulting from oxidative stress caused by radiotherapy and pathogenic mechanisms involved. Preventive and regenerative therapies for altered acinar morphology and glandular function were also discussed. Among the acute and late microscopic alterations observed in glandular tissue, there are particularly changes indicative of cell death, hypovascularization, formation of fibrous tissue and edema. Considering the evidences before mentioned, the aim of this study was to evaluate the effect of low level laser therapy (LLLT) on radiotherapy-induced morphological changes and immunodetection of caspase-3 protein in parotids of mice. Forty-one Swiss mice were divided into a control group and three experimental groups: radiotherapy, 2 J laser and 4 J laser. The experimental groups were exposed to ionizing radiation in a single session of 10 Gy. In the laser groups, a GaAlAs laser (830 nm, 100 mW, 0.028 cm2, 3.57 W/cm2) was used on the region corresponding to the parotid glands, with 2 J energy (20 sec, 71 J/cm2) or 4 J (40 sec, 135 J/cm2) per point. The animals were euthanized 48 hours or seven days after radiotherapy and parotid glands were dissected for morphological analysis and immunodetection of caspase-3. There was no significant difference between groups in the immunodetection of caspase-3, but the laser groups had a lower percentage compared to the radiotherapy group. Furthermore, the results indicated that LLLT promoted the preservation of acinar structure, reduced the occurrence of cytoplasmic vacuolation and stimulated parotid gland vascularization. Of the two LLLT protocols, the one using 4 J of energy showed better results. Given the methodological limitations of this study, further researches should be conducted in irradiated animals, using different LLLT protocols and observing glandular response, not only in the short term but also long term, when the occurrence of late changes in the salivary glands can be analyzed. / A radioterapia direcionada ? regi?o de cabe?a e pesco?o frequentemente envolve as gl?ndulas salivares maiores, as quais sofrem altera??es morfol?gicas e funcionais, resultando em hipossaliva??o e xerostomia. No primeiro artigo desta disserta??o foi realizada uma revis?o da literatura com o objetivo de abordar as altera??es estruturais observadas nas gl?ndulas salivares e os poss?veis mecanismos patog?nicos pelos quais o estresse oxidativo, decorrente da radioterapia, causa disfun??es salivares. Al?m disso, foram revisados os m?todos de preven??o e regenera??o da morfologia acinar e da fun??o glandular. Entre as altera??es microsc?picas agudas e tardias observadas no tecido glandular irradiado, podem-se citar altera??es indicativas de morte celular como a apoptose, hipovasculariza??o, forma??o de tecido fibroso e edema. Considerando as evid?ncias anteriormente mencionadas, o objetivo deste estudo foi avaliar, em gl?ndulas par?tidas de camundongos, o efeito da terapia laser de baixa pot?ncia (TLBP) sobre altera??es morfol?gicas causadas pela radioterapia e na imunodetec??o da prote?na caspase-3. Quarenta e um camundongos Swiss foram distribu?dos em um grupo controle e tr?s grupos experimentais: radioterapia, laser 2 J e laser 4 J. Os grupos experimentais foram submetidos ? radia??o ionizante em sess?o ?nica de 10 Gy. Nos grupos laser, um laser de diodo, GaAlAs (830 nm, 100 mW, 0,028 cm2, 3,57 W/cm2) foi utilizado de forma pontual sobre a regi?o correspondente ?s gl?ndulas par?tidas, com energia de 2 J (20 seg, 71 J/cm2) ou 4 J (40 seg, 135 J/cm2) por ponto. Os animais foram eutanasiados 48 h ou sete dias ap?s a radioterapia e as gl?ndulas par?tidas dissecadas para an?lise morfol?gica e imunodetec??o da caspase-3. N?o houve diferen?a significativa entre os grupos na imunodetec??o da caspase-3, entretanto, os grupos laser apresentaram percentuais inferiores aos do grupo radioterapia. Al?m disso, os resultados indicaram que a TLBP promoveu preserva??o da estrutura acinar, reduziu a ocorr?ncia de vacuoliza??o citoplasm?tica e estimulou a vasculariza??o glandular. Entre os protocolos de TLBP, o que utilizou a energia de 4 J apresentou os melhores resultados. Tendo em vista as limita??es metodol?gicas desta pesquisa, mais estudos devem ser conduzidos em animais irradiados, utilizando diferentes protocolos de TLPB e observando a resposta glandular, n?o apenas em curto prazo, como tamb?m em longo prazo, quando a ocorr?ncia de altera??es tardias nas gl?ndulas salivares pode ser analisada.
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Caracterização in vitro de células de cultura primária de tumores de glândula salivar : avaliação da auto-renovação e dos efeitos da IL-6 secretada por células endoteliais na fosforilação de STAT3, Akt e ERK / In vitro characterization of primary cell cultures from salivary gland tumors : analysis of self-renew and effect of IL-6 secreted by endothelial cells in the phosphorylation of STAT3, Akt and ERKBernardi, Lisiane January 2013 (has links)
O câncer é um problema de saúde pública mundial, apresentando acréscimo na sua incidência a cada ano. O seu processo de evolução ainda não foi completamente desvendado, dificultando a elaboração de terapias adequadas. Na busca por um melhor prognóstico, pesquisas recentes têm discutido o papel das citocinas inflamatórias, do nicho perivascular e das células-tronco nos mecanismos de desenvolvimento e manutenção dos tumores malignos. Os tumores de glândula salivar representam uma pequena porcentagem das patologias malignas da região de cabeça e pescoço, podendo ocorrer em adultos e em crianças. O diagnóstico dificilmente é precoce e a taxa de sobrevida é extremamente baixa comparada aos demais tumores da região. Assim, este estudo teve como objetivo estudar as células provenientes dos tumores de glândula salivar do tipo adenoide cístico (CAC) e adenocarcinoma NOS (AdNOS) quanto ao seu perfil imunofenotípico, quanto à existência ou não de células-tronco tumorais nessa população, bem como investigar possíveis modificações na ativação de STAT3, Akt e ERK (moléculas envolvidas em vias de sinalização de manutenção do tumor), quando em contato com fatores secretados por células endoteliais. Foram coletados 5 CACs e 4 AdNOS, no Hospital da Universidade de Michigan (Ann Arbor, MI, EUA), durante 2010 e 2012. As células foram isoladas e caracterizadas em citometria de fluxo em P0 e P7, demonstrando um perfil de células CD44+ALDH+Lin- variando de 0,33 a 3,19% e 0,36 a 2,00%, respectivamente, entre 5 linhagens avaliadas. Na avaliação por western blotting, a e-caderina, o Snail e a actina de músculo liso foram ausentes em todos os tipos tumorais, enquanto que a citoqueratina 20 (Ck20) foi presente apenas nos AdNOS. Comparando os tumores com suas metástases, a presença de Ck20, p63 e β-catenina foi semelhante, enquanto que citoqueratina 7, a vimentina e o Bmi-1 foram maiores nas metástases. Tanto os AdNOS quanto CACs apresentaram receptores para IL-6, IL-8 e EGF. Foi observado que mediadores solúveis liberados pelas células endoteliais foram capazes de fosforilar STAT3, Akt e ERK em todas as células salivares estudadas, no entanto, a proteína recombinante humana IL-6, isoladamente, não foi capaz de ativar Akt. Orosferas foram geradas em todos os tipos tumorais, demonstrando o potencial de auto-renovação celular. Um maior número de esferas foi observado nas células metastáticas em relação às primárias. Células CD44+ALDH+, comparadas com CD44-ALDH-, geraram mais esferas, quando plaqueadas em alta densidade (5.000 células). No entanto, o inverso foi encontrado, quando uma única célula foi utilizada para o ensaio (p>0,05). Devido à dificuldade de obtenção e manipulação de células de tumores de glândula salivar, ainda há muito que se investigar mecanisticamente. Considerando a fosforilação de STAT3 na presença de IL-6, semelhante ao verificado em outros tumores, o uso de anticorpos contra IL-6, talvez sejam uma opção no futuro. / Cancer is a public health problem worldwide, with an increase in incidence every year. The process of its evolution is still not completely understood, hindering the development of appropriate therapies. In the search for a better prognosis, recent reports have discussed the role of inflammatory cytokines, perivascular niche and stem cells in the mechanisms of development and maintenance of malignant tumors. The salivary gland tumors represent a small percentage of malignancies of the head and neck and can occur in both adults and children. Early diagnosis is difficult and the survival rate is extremely low compared to other tumors in the same region. Thus, this study aimed to study cells from the adenoid cystic carcinoma (ACC) and adenocarcinoma NOS (AdNOS) tumors of salivary gland regarding its immunophenotypic profile and the existence or absence of tumor stem cells in this population, as well as investigate possible changes in the activation of STAT3, Akt and ERK (molecules involved in signaling pathways of tumor maintenance), when exposed to factors secreted by endothelial cells. ACCs (n=5) and AdNOS (n=4) were collected at the Hospital of the University of Michigan (Ann Arbor, MI, USA), during 2010 to 2012. Cells were isolated and characterized by flow cytometry at P0 and P7, showing a profile of ALDH+CD44+Lin- ranging from 0.33% to 3.19% and 0.36% and 2.00%, respectively, between 5 cell lines evaluated. In the protein profile, e-cadherin, Snail and SMA were absent in all tumor types. Ck20 was present only in AdNOS. Comparing primary tumors and their metastases, the presence of Ck20, and p63 β-catenin was similar, while Ck7, vimentin and Bmi-1 were higher in metastases. Both AdNOS as ACCs had receptors for IL-6, IL-8 and EGF. It was observed that soluble mediators released by endothelial cells were able to activate STAT3, Akt and ERK phosphorylation in all cells studied. However, recombinant human IL-6 alone was not able to activate Akt. Orospheres were generated in all tumor types, indicating the potential for cellular self-renewal. Highest number of spheres was observed in metastatic cells compared to primary. ALDH+CD44+ cells compared to ALDH-CD44- generated more spheres when plated in high density (5,000 cells), however, the opposite was found when one single cell seed was evaluated (p> 0.05). There is doubt if these cell markers would be consider for a stem cell model in salivary tumors. Due to the difficulty of obtaining and manipulating salivary gland tumor cells, there is still much to investigate mechanistically. As the phosphorylation of STAT3, in the presence of IL-6, was similar to that observed in other tumors, the use of antibodies against IL-6, may be an option in the future.
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Comparação microscópica de glândulas sublinguais de cadáveres humanos e de pacientes desdentados portadores de tumefações do soalho da boca relacionadas às glândulas sublinguais: estudo morfológico e morfométrico / Microscopic comparative study of human cadaver sublingual glands and mouth floor enlargements related to the sublingual glands in edentulous patients: morphological and morphometric analysisSá, Josiane Costa Rodrigues de 14 September 2009 (has links)
O soalho da boca de alguns pacientes desdentados parciais ou totais pode apresentar tumefações do soalho da boca relacionadas às glândulas sublinguais que dificultam a adaptação de próteses totais ou parciais, às vezes requerendo tratamento cirúrgico. Erroneamente, estas tumefações têm sido atribuídas à hiperplasia glandular. Alterações decorrentes do envelhecimento têm sido aventadas como possível causa, mas a etiopatogenia continua incerta. Na busca de explicar a causa das tumefações do soalho da boca de desdentados, foi elaborada a presente pesquisa. Foram comparadas microscopicamente as glândulas sublinguais de cadáveres humanos com glândulas removidas em tratamento cirúrgico pré-protético das tumefações do soalho da boca de desdentados. Estudo morfológico e morfométrico foram realizados em indivíduos de idades cronológicas semelhantes. Os resultados foram analisados com nível de significância de 5%. No estudo morfológico foram analisados: atrofia acinar (p=0,758), autólise acinar (p=0,014), infiltrado mononuclear focal (p=1,000) e difuso (p=0,142), substituição do parênquima por tecido fibroso (p=0,547), substituição do parênquima por tecido adiposo (p=0,547), extravasamento de muco focal (p=0,192) e difuso (p=0,758) e oncocitose (p=0,883). As variáveis ductos e/ou estruturas ductiformes (p=1,000) e vasos sangüíneos congestos (p=0,043) foram classificadas em ausentes e presentes. Morfometricamente foi determinada a densidade de volume de ácinos (p=0,752), ductos (p=0,444), estroma (p=0,209) e tecido adiposo (p=0,794). A análise dos resultados mostrou diferença estatisticamente significante para os aspectos microscópicos autólise (p=0,014) e vasos sanguíneos congestos (p=0,043). As características microscópicas das glândulas sublinguais nas tumefações do soalho da boca de desdentados retratam o processo normal de envelhecimento das glândulas salivares. Concluiu-se que nas tumefações do soalho da boca de pacientes desdentados as glândulas sublinguais não são patológicas. / Mouth floor enlargements related to sublingual glands in edentulous or partially edentulous patients may be present, impairing denture fitting. Sometimes surgical treatment is needed. Erroneously, these enlargements have been attributed to glandular hyperplasia. Changes due to aging process have been suggested as a possible cause but the etiopathogenesis continues uncertain. The aim of the study was to explain the cause of mouth floor enlargements in edentulous patients. Human sublingual glands from necropsies and glands removed in pre-prosthetic surgical treatment of mouth floor enlargements in edentulous patients were microscopically compared. Morphological and morphometric studies were performed in individuals of similar chronological ages. Results were analyzed with significance set for p0,05. The morphological study analyzed: acinar atrophy (p=0,758), acinar autolysis (p=0,014), focal (p=1,000) and diffuse mononuclear infiltrate (p=0,142), replacement of parenchyma by fibrous tissue (p=0,547), replacement of parenchyma by adipose tissue (p=0,547), focal (p=0,192) and diffuse mucus overflow (p=0,758) and oncocytosis (p=0,883). The variables ducts and/or duct-like structures (p=1,000) and congested blood vessels (p=0,043) were classified in absent and present. The volumes densities of acini (p=0,752), ducts (p=0,444), stroma (p=0,209) and adipose tissue (p=0,794) were determined by the morphometric study. The results showed statically significant difference to the microscopic aspects: autolysis (p=0,014) and congested blood vessels (p=0,043). The microscopic aspects of the sublingual glands in mouth floor enlargements in edentulous patients revealed the normal aging process of the salivary glands. Concluding, the sublingual glands in mouth floor enlargements in edentulous patients are not pathological glands.
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Potencial antioxidante do chá de camomila nas glândulas salivares e sua influência no estado glicêmico de ratos diabéticos / Antioxidant potential of chamomile tea in the salivary glands and its influence on the glycemic state of diabetic ratsPerestrelo, Bruna de Oliveira 02 July 2018 (has links)
O presente estudo teve como objetivo avaliar a influência da administração do chá de camomila durante 21 dias sobre parâmetros antioxidantes e estresse oxidativo das glândulas parótida e submandibular. Bem como o efeito do consumo do chá no transporte de glicose do fígado e possíveis alterações sistêmicas. Os grupos estudados foram divididos em controle não tratado (C), controle tratado com chá de camomila (CC), diabético não tratado (DM) e diabético tratado com chá de camomila (DMC). A indução do diabetes nos grupos DM e DMC foi realizada com injeção intraperitoneal de estreptozotocina (60 mg/Kg de peso corporal). No 7º dia experimental, os animais do grupo CC e DMC iniciaram o tratamento com o chá de camomila. Foram avaliados os sistemas antioxidantes enzimáticos por meio da atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx) e da via não enzimática pelo total antioxidante (TAS). O estresse oxidativo foi avaliado por meio da quantificação de malondialdeído (MDA). Além disso foram analisados os níveis de insulina séricos, glicemia, peso e consumo hídrico e alimentar. A via de transporte de glicose foi estudada por meio da avaliação da expressão e quantificação das proteínas AKT e AMPK. Os resultados obtidos confirmam o potencial hipoglicemiante do chá de camomila, bem como sua ação no controle da polidipsia. O chá não alterou os níveis de insulina além disso provocou uma redução da expressão da p-AMPK. O tratamento com chá ocasionou um aumento nos valores da atividade da GPx e CAT tanto na glândula parótida como na submandibular. No entanto, para o TAS o chá provocou aumento apenas na glândula submandibular. Na glândula parótida o chá diminuiu a peroxidação lipídica. Os resultados obtidos confirmam o potencial antioxidante do chá de camomila na glândula parótida dos animais diabéticos após tratamento. Conclusão: O tratamento com o chá de camomila aponta como sendo promissor na prevenção dos danos oxidativos presentes no diabetes mellitus, tanto nas glândulas salivares através da redução do MDA, quanto sistemicamente pelo seu potencial hipoglicemiante. / The present study aimed to evaluate the influence of the administration of chamomile tea for 21 days on antioxidant parameters and oxidative stress of the parotid and submandibular glands. As well as the effect of tea consumption on the transport of glucose from the liver and possible systemic alterations. The groups studied were divided into untreated control (C), control treated with chamomile tea (CC), untreated diabetic (DM) and diabetic treated with chamomile tea (DMC). The induction of diabetes in the DM and DMC groups was performed with intraperitoneal injection of streptozotocin (60 mg / kg body weight). On the 7th experimental day, the CC and DMC animals started treatment with chamomile tea. The enzymatic antioxidant systems were evaluated through the activity of the enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx) and non-enzymatic pathway by total antioxidant (SAT). Oxidative stress was evaluated by the quantification of malondialdehyde (MDA). Serum insulin levels, glycemia, weight, and water and food intake were also analyzed. The glucose transport pathway was studied by evaluating the expression and quantification of AKT and AMPK proteins. The results confirm the hypoglycemic potential of chamomile tea, as well as its action in the control of polydipsia. The tea did not alter insulin levels, in addition it caused a reduction of p-AMPK expression. Treatment with tea caused an increase in the values of GPx and CAT activity in both the parotid gland and the submandibular gland. However, for TAS the tea caused only increase in the submandibular gland. In the parotid gland the tea decreased lipid peroxidation. The results confirm the antioxidant potential of chamomile tea in the parotid gland of diabetic animals after treatment. Conclusion: Treatment with chamomile tea is shown to be promising in preventing the oxidative damage present in diabetes mellitus, both in the salivary glands through the reduction of MDA and systemically due to its hypoglycemic potential.
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Estudo clínico, bioquímico e histológico comparativo do efeito das fototerapias LED, laser de baixa e alta potência na mucosite oral e do efeito do laser na hipofunção das glândulas salivares em hamsters tratados com 5-Fluorouracil / Comparative study of terapeutic effects of different phototherapies on 5-Fluorouracil-induced salivary glands hypofunction and oral mucositis in hamsterCampos, Luana de 05 July 2013 (has links)
Considerando a mucosite oral (MO) e a hipofunção das glândulas salivares (HGS) consequências debilitantes da quimioterapia (QT), este trabalho teve como objetivo induzir, em hamsters, MO e HGS, através do quimioterápico 5- Fluorouracil (5-FU), e comparar, através de análises clínicas, bioquímicas e histológicas, diferentes fototerapias no tratamento da MO, assim como o efeito do laser no tratamento da HGS. Cento e oitenta animais foram divididos em dois grupos, controle e experimental, onde, o grupo controle foi subdividido em grupo C, o qual recebeu somente anestesia/veículo de diluição do quimioterápico e o CQ, o qual recebeu anestesia/quimioterapia e indução da MO. O grupo experimental foi também subdividido em grupo L: com indução de MO e tratamento com LED, 630nm, 1,2J/cm2; LA: MO e tratamento com laser de alta potência (LAP), 808nm, 10J/cm2; LB: MO e tratamento com laser de baixa potência (LBP), 660nm, 6J/cm2 e o LG: sem MO e tratamento com LBP, 780nm, 5J/cm², na região das glândulas salivares (GS) submandibulares (GSSM) e sublinguais GSSL). A MO foi induzida através de ranhuras após QT e foi avaliada, clinicamente, através de escalas específicas. Os animais foram sacrificados após 5, 7 e 10 dias de experimento e a mucosa oral e as GS removidas para análises bioquímicas (TNF- e análise de proteína total, LDH e parâmetros do sistema antioxidante, respectivamente) e histológicas (análise por microscopia de luz e imuno-histoquímica para as amostras de mucosa, e por microscopia de luz, eletrônica de transmissão e imunocitoquímica para as amostras de GS). Após análises estatísticas, os resultados clínicos, bioquímicos e histológicos mostraram que os tratamentos com LBP e LED foram eficazes no tratamento da MO, com diminuição da concentração de TNF- no dia 7 (p<0.05) e completa cicatrização das lesões ao termino do experimento, com maior formação de tecido de granulação e angiogênese. Além disso, a expressão de citoqueratina 10, analisada por imunohistoquímica, apresentou-se menos intensa comparada ao grupo CQ. O LAP não prejudicou a cicatrização final da MO quando comparada ao grupo CQ. O LBP também se mostrou eficaz para a HGS causada pelo 5-FU, uma vez que os parâmetros estudados para o grupo LG foram similares para os animais do grupo C na maior parte dos tempos experimentais. A HGS do grupo CQ foi representada por importantes alterações morfológicas, estruturais e bioquímicas, como a atrofia das unidades secretoras terminais, aumento do estroma glandular na GS sublingual e alterações na expressão de EGF, NGF e PIP2 nas GSSM, assim como alteração na expressão de mucina e p16 nas GSSL. De acordo com as análises bioquímicas, foram observadas alterações na atividade das enzimas antioxidantes catalase, peroxidase e superóxido dismutase e da atividade da enzima lactato desidrogenase (p<0.05) tanto para a GSSM quanto para a GSSL. Com base nos resultados, podemos concluir que as fototerapias com LBP e LED diminuem a severidade da MO por acelerar a reparação tecidual e diminuir o processo inflamatório, assim como o LBP é eficaz no tratamento da HGS induzida pelo quimioterápico 5-FU. / Considering oral mucositis (OM) and salivary glands hipofunction (SGH) debilitating consequences of chemotherapy (CT), the aim of this study was to compare, through clinical, biochemical and histological analysis, different photherapies on the treatment of OM and SGH induced by injections of the chemotherapic agent 5-Fluorouracil in hamsters. One-hundred-eighty animals were divided into two groups, control and experimental, which were subdivided in group C: anesthesia/chemotherapy vehicle and CQ: anesthesia, chemotherapy/OM induction, for control group and in group L: anesthesia, chemotherapy/OM and phototherapy with LED (1,2 J/cm², 1.2 J of total energy), LA: anesthesia, chemotherapy/OM and phototherapy with highpower laser (HPL) (10 J/cm², 10 J of total energy), LB: anesthesia, chemotherapy/OM and phototherapy with low-power laser (LPL) (6 J/cm², 1.2 J of total energy) and LG: anesthesia, chemotherapy and phototherapy with LPL (5 J/cm2) on salivary gland (SG) (submandibular and sublingual) areas for experimental group. The OM was induced by slots on oral mucosa, which were performed after chemotherapy treatment. The OM was analyzed through specific clinical scales and after 5, 7 and 10 days, the animals were sacrificed and the oral mucosa and submandibular and sublingual glands removed for biochemical (TNF- and total protein concentration, LDH and antioxidant system parameters, respectively) and histological (light microscopy and immune-histochemical for OM samples, and light microscopy, electronic transmission and immunocitochemical for SG samples) analysis. After statistical analysis, the clinical, biochemical and histological results showed Led and LPL as efficient treatments for OM, with decrease of TNF- concentration on day 7 (p<0.05) and complete lesions healing on last day of experiment, showing increase of granulation tissue and new blood vessels formation. In agreement, the citokeratin 10 expression by immunehistochemistry, showed less intensity when was compared with CQ group. The HPL had no interference on OM final healing in comparison with CQ group. The LPL also showed good results on treatment of SGH induced by 5- FU. The SGH on CQ group included important morphological, structural and biochemical changes, as acinar atrophy, increase of glandular stroma on sublingual glands and important changes for EGF, NGF and PIP2 expression on submandibular glands, and for mucin and p16 gene expression on sublingual glands. Furthermore, the biochemical analysis showed changes on antioxidant enzime system activity, catalase, peroxidase and superoxide dismutase, and also for dehidrogenase lactate activity (p<0.05). The results of the present study suggest the phototherapies with LPL and LED where efficient on decrease of OM severity, accelerating tissue repair and decreasing the inflammatory process, as well as, the LPL efficient as treatment of SGH induced by 5-FU.
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