Orientadora: Mara Cristina Pessôa da Cruz / Banca: Ronaldo Severiano Berton / Banca: Manoel Evaristo Ferreira / Resumo: O soro de leite é o principal resíduo da fabricação de queijos, e a sua composição química permite o uso como fertilizante. Para melhorar a eficiência da aplicação, é necessário conhecer a fração de mineralização do nitrogênio orgânico do soro. Com este trabalho, pretende-se avaliar a fração de mineralização do N do soro ácido de leite e comparar métodos de incubação de solo usados para determinar a taxa de mineralização do nitrogênio. Para determinar a fração de mineralização do N orgânico do soro, foram conduzidos dois experimentos em laboratório, ambos de incubação do solo com doses de soro por 126 dias, um com e outro sem lixiviação, utilizando Argissolo Vermelho-Amarelo e Latossolo Vermelho. Em casa de vegetação, foi conduzido experimento com os mesmos solos e milho como planta-teste. As doses de soro avaliadas nos experimentos de laboratório e casa de vegetação foram 0; 101; 203; 304 e 405 m3 ha-1, que corresponderam a 0; 80; 160; 240 e 320 kg ha-1 de N. Os resultados de mineralização do N nos experimentos em laboratório foram ajustados ao modelo cinético de primeira ordem, e cálculos de correlação foram feitos entre variáveis obtidas nos experimentos em laboratório e em casa de vegetação para estimar a capacidade dos métodos de laboratório de prever a disponibilidade de N. A fração de mineralização do nitrogênio do soro ácido de leite, média dos dois solos, é de 50% com o método de incubação com lixiviação, e de 35% com o método sem lixiviação. Apesar de o coeficiente de correlação entre o N absorvido pelo milho e o N mineralizado ter sido semelhante com os dois métodos, a diferença na fração de mineralização entre os métodos com e sem lixiviação não recomenda o seu uso alternativo para cálculo das taxas de aplicação do soro ácido de leite / Abstract: Whey is the main residue from the manufacture of cheese and its chemical composition allows the use as fertilizer. To improve the efficiency of use it is necessary to know the fraction of organic nitrogen mineralization in the whey. This study aims to assess the N mineralization from acid whey and to compare methods of soil incubation used to determine the mineralization rate. Two incubation experiments were conducted in laboratory for 126 days, with and without leaching, to determine the mineralization of organic N in whey, using an Ultisol and an Oxisol. A greenhouse experiment was carried out with the same soils and maize as test plant. In all experiments, the whey rates were 0, 101, 203, 304 and 405 m3 ha-1, corresponding to 0, 80, 160, 240 and 320 kg ha-1 N. The results of N mineralization in laboratory experiments were fitted to the model first-order kinetic and correlation were made between variables obtained in laboratory experiments and greenhouse conditions to estimate the capacity of laboratory methods to predict N availability. The mean fraction of nitrogen mineralization of acid whey obtained with the methods with and without leaching is 50% and 35%, respectively. Although the correlation coefficients between N uptake by mayze and N mineralized were similar, the difference in the fraction of mineralization between the methods with and without leaching does not recommend its alternative use to calculate the application rates of acid whey / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-03-10T20:24:54Z No. of bitstreams: 1 MayaraSantaRosaLima_DISSERT.pdf: 1762065 bytes, checksum: 81b2ba7e141b5e4144aae1950f65a16e (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-03-17T00:16:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MayaraSantaRosaLima_DISSERT.pdf: 1762065 bytes, checksum: 81b2ba7e141b5e4144aae1950f65a16e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-17T00:16:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MayaraSantaRosaLima_DISSERT.pdf: 1762065 bytes, checksum: 81b2ba7e141b5e4144aae1950f65a16e (MD5) Previous issue date: 2015-05-26 / A vitamina A ? um nutriente essencial em diversos processos fisiol?gicos, como crescimento e desenvolvimento, de modo que um adequado estado nutricional nesse nutriente ? fundamental na gesta??o e lacta??o. Mulheres lactantes e crian?as em aleitamento materno s?o consideradas grupos de risco para a defici?ncia de vitamina A e alguns fatores podem aumentar o risco de hipovitaminose, como a prematuridade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a concentra??o de vitamina A em lactantes e rec?m-nascidos pr?-termo e a termo, por meio da determina??o do retinol no soro materno, no soro do cord?o umbilical e no leite materno coletado at? 72 horas p?s-parto. Foram recrutadas 182 parturientes, divididas em grupo pr?-termo (GPT; n=118) e grupo termo (GT; n=64). No grupo pr?- termo tamb?m foram analisadas amostras de leite de transi??o (7?-15? dia; n=68) e leite maduro (30?-55? dia; n=46). O retinol foi analisado por cromatografia l?quida de alta efici?ncia (CLAE). A concentra??o materna de retinol s?rico foi 48,6 ? 12,3 ?g/dL no GPT e 42,8 ? 16,3 ?g/dL no GT (p<0,01). O retinol no soro do cord?o umbilical foi 20,4 ? 7,4 ?g/dL no GPT e 23,2 ? 7,6 ?g/dL no GT (p>0,05). Entre os rec?m-nascidos, 43% dos prematuros e 36% dos a termo apresentaram baixos n?veis de retinol s?rico no cord?o umbilical (<20 ?g/dL). No colostro, lactantes pr?- termo e termo apresentaram m?dia de retinol de 100,8 ? 49,0 ?g/dL e 127,5 ? 65,1 ?g/dL, respectivamente (p<0,05). A m?dia de retinol no leite pr?-termo aumentou para 112,5 ? 49,7 ?g/dL na fase de transi??o e reduziu para 57,2 ? 23,4 ?g/dL no leite maduro, diferindo significativamente entre todas as fases (p<0,05). Ao comparar com a recomenda??o de ingest?o de vitamina A (400 ?g/dia) o leite colostro do GT atingiu a recomenda??o para lactentes, por?m no GPT a recomenda??o n?o foi atingida em nenhuma das fases. As m?es de rec?m-nascidos prematuros possu?am concentra??o s?rica de retinol superior ? de m?es a termo, entretanto, isso n?o foi refletido no retinol do soro do cord?o umbilical, uma vez que os prematuros apresentaram menor concentra??o da vitamina. Tal condi??o pode ser explicada devido ? menor hemodilui??o fisiol?gica materna e transfer?ncia placent?ria de retinol para o feto durante a gesta??o pr?-termo. A compara??o do retinol no colostro evidenciou menor concentra??o no GPT, no entanto na fase de transi??o houve um aumento importante do conte?do de retinol liberado pela gl?ndula mam?ria de lactantes pr?-termo. Essa situa??o evidencia uma adapta??o fisiol?gica pr?pria da prematuridade, provavelmente no sentido de contribuir mais para a forma??o das reservas hep?ticas de retinol dos lactentes prematuros. / Vitamin A is an essential nutrient for many physiological processes such as growth and development, so that their adequate nutritional state is essential during pregnancy and lactation. Lactating women and children in breastfeeding are considered risk groups for vitamin A deficiency and some factors may increase the risk of vitamin A deficiency, such as prematurity. The aim of this work was to evaluate the vitamin A concentration in preterm and term lactating women and newborns by determination of retinol in maternal serum, umbilical cord serum and breast milk collected until 72 hours postpartum. 182 mothers were recruited and divided into preterm group (GPT; n = 118) and term group (GT, n = 64). In preterm group were also analyzed transition milk (7th-15th day; n = 68) and mature milk (30th-55th day; n = 46) samples. Retinol was analyzed by high-performance liquid chromatography (HPLC). Maternal retinol concentration in serum was 48.6 ? 12.3 ?g/dL in GPT and 42.8 ? 16.3 ?g/dL in the GT (p <0.01). Cord serum retinol was 20.4 ? 7.4 ?g/dL in GPT and 23.2 ? 7.6 ?g/dL in GT (p> 0.05). Among newborns, 43% of premature and 36% of term had low levels of serum retinol in umbilical cord (<20 ?g/dL). In colostrum, the retinol in preterm and term groups had an average of 100.8 ? 49.0 ?g/dL and 127.5 ? 65.1 ?g/dL, respectively (p <0.05). The retinol average in preterm milk increased to 112.5 ? 49.7 ?g/dL in transition phase and decreased to 57.2 ? 23.4 ?g/dL in mature milk, differing significantly in all stages (p <0.05). When comparing with the recommendation of vitamin A intake (400 ?g/day) GT colostrum reached the recommendation for infants, but in GPT the recommendation was not achieved at any stage. Mothers of premature infants had higher serum retinol than mothers at term; however, this was not reflected in serum retinol of umbilical cord, since premature had lower concentration of retinol. Such condition can be explained due to lower maternal physiological hemodilution and placental transfer of retinol to the fetus during preterm gestation. Comparison of retinol in colostrum showed lower concentrations in GPT; however the transition phase there was a significant increase of retinol content released by the mammary gland of preterm mothers. This situation highlights a specific physiological adaptation of prematurity, likely to more contribute to formation of hepatic reserves of retinol in premature infants.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-10T16:42:15Z No. of bitstreams: 1 CristianeSantosSanzioGurgel_TESE.pdf: 4190612 bytes, checksum: 773e7fec68bad460acc07eb6d8f76c81 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-02-10T21:19:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CristianeSantosSanzioGurgel_TESE.pdf: 4190612 bytes, checksum: 773e7fec68bad460acc07eb6d8f76c81 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-10T21:19:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CristianeSantosSanzioGurgel_TESE.pdf: 4190612 bytes, checksum: 773e7fec68bad460acc07eb6d8f76c81 (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / Este estudo objetivou avaliar o estado de vitamina A de pu?rperas atendidas durante o parto na cidade de Natal/RN. Foram recrutadas no estudo 793 mulheres, 60.1% (n=485) da rede p?blica e 39.0% (n=310) a rede privada. Amostras de soro (n=619) e leite colostro (n=656) foram coletadas em ambiente hospitalar, ap?s jejum noturno. O leite maduro (n=154) foi coletado trinta dias ap?s o parto, em visita domiciliar. Os indicadores bioqu?micos (retinol no soro e leite materno) foram avaliados por local de moradia (capital vs interior) e por rede de atendimento em sa?de (p?blico vs privado). O consumo de vitamina A foi avaliado referente ao ?ltimo trimestre gestacional. Para avaliar as diferentes formas de suplementa??o materna com vitamina A e suas associa??es com os indicadores bioqu?micos (soro e leite materno) formaram-se subgrupos baseados nas suplementa??es que ocorreram durante a gesta??o: GC, F1, F2, F3 e no p?s-parto: GM. O retinol das amostras foi quantificado por cromatografia l?quida de alta efici?ncia (CLAE). Para o total de mulheres, a concentra??o m?dia de retinol s?rico foi de 41.8 ? 12.9?g/dL e a preval?ncia da DVA foi de 5.3% (n= 33) com retinol (<20 ?g/dL), com diferen?a significativa entre o retinol s?rico das mulheres provenientes da capital e do interior (p<0,01). Em Natal, as preval?ncias de defici?ncia encontradas nas regi?es norte, sul, leste e oeste foram respectivamente: 4.3% (n=6), 5.6% (n=7), 2.9% (n=3) e 11.9% (n=8). A m?dia de retinol no colostro no grupo total foi de 95,3+ 53.7?g/dL, entretanto 27.3% (n=179) apresentaram valores inadequados (<60 ?g/dL). Os valores m?dios estimados de retinol fornecido aos rec?m-nascidos atrav?s do colostro, n?o atingiram a recomenda??o m?nima de 400?g/RAE/dia da AI (Adequate Intake) para rec?m-nascidos, considerando a ingest?o de 396mL/dia. Houve diferen?a significativa entre o retinol no colostro das mulheres da capital e aquelas provenientes do interior (p<0.01). Ambos os grupos n?o forneceram a AI de vitamina A para o rec?m-nascido e tamb?m o mesmo foi observado com as lactantes das regi?es norte e oeste da cidade de Natal. No leite maduro, nenhum dos grupos de mulheres das diferentes regi?es atingiu a recomenda??o, considerando a ingest?o de 780mL/dia pelos rec?m-nascidos. Ao avaliar as pu?rperas separadamente por rede de atendimento em sa?de (p?blico vs privado) foi encontrada diferen?a significativa entre o retinol s?rico e retinol no colostro (p<0.0001), mas n?o houve diferen?a para o leite maduro (p>0.05). Na estimativa do fornecimento de retinol atrav?s do colostro e leite maduro, as mulheres da rede p?blica n?o forneceram vitamina A dentro da recomenda??o m?nima para o rec?m-nascido (AI=400?g/RAE/dia), ao contr?rio das mulheres da rede privada, que forneceram. O consumo diet?tico m?dio total de vitamina A das parturientes foi de 987.1 + 674.4 ?gRAE/dia, sendo 872.2 + 639.2 ?gRAE/dia na da rede p?blica e 1169.2 + 695.2 ?gRAE/dia na rede privada, com diferen?a altamente significativa (p<0,00001). Na avalia??o individual, 38.4% (n=100) e 17.3% (n=28) das mulheres das redes p?blica e privada tinham ingest?o abaixo da ideal. Ao se estudar as diferentes formas de suplementa??o com vitamina A, n?o foram encontrados casos de DVA nos grupos suplementados com F1, F2 e F3. Ao se analisar o efeito da suplementa??o sobre o retinol do colostro, o grupo F2 (betacaroteno) apresentou mais casos de inadequa??o (40%). Os grupos F2 e GM n?o forneceram a quantidade de retinol m?nima recomendada pela AI aos rec?m-nascidos. No retinol do leite maduro n?o houve diferen?a entre os grupos GC, F1, F2, F3 e GM e com percentuais de inadequa??o mais baixos no GM (14.3%) e os grupos GC e F2 n?o forneceram a quantidade de retinol m?nima recomendada pela AI para os rec?m-nascidos. Concluiu-se que a preval?ncia de DVA entre as pu?rperas atendidas em Natal foi considerada um problema "leve" de sa?de p?blica na popula??o em geral. Os grupos de alto risco neste estudo viviam em cidades do interior, eram atendidos na rede p?blica de sa?de e n?o tomavam vitamina A, como o suplemento regular durante a gesta??o. / This study aimed to evaluate the vitamin A status of women who delivered in Natal/RN. A total of 795 women were enrolled in the study. Serum (n=619) and colostrum (n=656) samples were collected in the hospital after an overnight fast. Mature milk samples (n=15) were collected at the women?s house thirty days after delivery. Biochemical indicators were evaluated according to home location (capital city vs. country towns) and type of health care system (public vs. private). Vitamin A intake was assessed using a food-frequency questionnaire (FFQ) corresponding to the last trimester of pregnancy. In order to evaluate the different forms of maternal supplementation with vitamin A and their associations with biochemical markers (maternal serum and breast milk), subgroups were formed based on the type of supplementation that occurred during pregnancy: GC, F1, F2, F3 and postpartum: GM. Retinol concentrations in the biological samples were quantified by high performance liquid chromatography (HPLC). For the total sample, the mean serum retinol concentration was 41.8 ?12.9?g/dL and the prevalence of VAD was 5.3% (n=33) of women presenting retinol concentrations (<20 ?g/dL), evidencing a significant difference in serum retinol concentrations between women from the capital city and from the countryside (p <0.01). In Natal, the prevalence of disability found in the north, south, east and west were, respectively, 4.3% (n= 6), 5.6% (n= 7), 2.9% (n= 3) and 11.9% (n= 8). The overall mean retinol concentration in colostrum was 95.3 ? 53.7?g/dL; however, 27.3% (n=179) of women presented inadequate values (<60 ?g/dL). The average estimated amounts of retinol provided to newborns through colostrum did not meet the minimum recommendation of 400 ?g/RAE/day of AI (Adequate Intake) for newborns in both groups, considering the intake of 396mL/day. It was found a significant difference in colostrum retinol concentrations between women from the capital city and from the countryside (p<0.01). In Natal, colostrum milk of women from the northern and western regions did not meet the AI. For mature milk, none of the groups from the different regions met the recommendation, considering the intake of 780mL/day. Evaluating the sample separately by childbirth care system (public vs. private), it was found a significant difference in serum and colostrum retinol concentrations between the groups (p <0.0001); there was no difference for the mature milk (p>0.05). Estimating the retinol supply through colostrum and mature milk, women attending the public health system did not provide the minimum vitamin A amount recommended for newborns (AI= 400?g/RAE/day), unlike women's private network, which provided. The average total dietary vitamin A intake of pregnant women was 987.1 ? 674.4 ?gRAE/day, was 872.2 + 639.2 ?gRAE/day for women attending the public health system and 1169.2 + 695.2 ?gRAE/day for those attending the private system, evidencing a highly significant difference (p<0.001). Individually assessing the participants, 38.4% (n=100) e 17.3% (n=28) of women in the public and private systems had vitamin A intakes below the ideal. There was no difference in serum retinol concentrations between the CG, F1, F2, F3 and MG groups (p<0.05), although only the supplemented groups F1, F2 and F3 had no cases of VAD. Regarding colostrum retinol levels, the F2 group (beta-carotene) presented the highest number of inadequate cases (40%). The F2 and MG groups did not provide the minimum amount of retinol recommended by AI for newborns. Regarding retinol concentrations in mature milk, there was no difference between the CG, F1, F2, F3 and MG groups, and the MG group presented the lowest percentage of inadequacy (14.3%), while the CG and F2 groups did not provide the minimum amount of retinol recommended by the AI for infants. It was concluded that the prevalence of VAD among mothers who delivered in Natal was considered a ?mild? public health problem in the overall population. High-risk groups in this study lived in towns, were attended in the public health system and did not take vitamin A as regular supplement during pregnancy.

O soro de leite é o coproduto da produção de queijos e contém proteínas com excelentes propriedades nutricionais e tecnológicas. Dentre essas proteínas, as majoritárias são a β-lactoglobulina (BLG) e a α-lactalbumina (ALA). Embora o soro do leite já seja aproveitado pelas indústrias para a produção de isolados e concentrados proteicos, esses produtos consistem em uma mistura de diversas proteínas e atualmente há um grande interesse em realizar o seu fracionamento a fim de aproveitar melhor as suas propriedades individuais. Entretanto, fracionar essas proteínas é um grande desafio devido às suas massas molares próximas, e uma combinação de diferentes abordagens baseadas nas suas características se torna necessária para possibilitar uma boa separação. A ALA apresenta uma capacidade de formar agregados proteicos em meio ácido e ausência de cálcio, sendo uma estratégia interessante para combinar com processos de separação por membranas. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi realizar o fracionamento da BLG e da ALA a partir da agregação proteica combinada com processos de separação por membranas. O ajuste do pH para 4 e adição de citrato de sódio como agente complexante do íon cálcio possibilitou a formação de agregados proteicos da solução de isolado proteico do soro de leite 6 %, porém ao determinar a pressão de operação dessa solução utilizando membranas cerâmicas de microfiltração (MF) de 0,8 e 0,05 μm para reter os agregados proteicos, o fluxo de permeado foi baixo. O mesmo procedimento foi utilizado para a solução de soro do leite em pó 6 % e membrana de 0,8 μm, resultando, também, em um fluxo de permeado baixo durante a determinação da pressão de operação. Ao combinar a centrifugação com a ultrafiltração (UF), o sobrenadante, contendo a fração que não formou agregados proteicos, apresentou maiores fluxos de permeado em pH 7 e 10, e baixos fluxos em pH 3 e 4. A purificação do sobrenadante em pH 10 com membrana cerâmica de 5 kDa apresentou fluxo de permeado elevado e, quando a diafiltração foi realizada, o fluxo de permeado apresentou um comportamento ascendente e menor tendência ao fouling, variando entre 56,5 e 64,6 %. O sedimentado ressolubilizado em pH 10 também apresentou um fluxo de permeado elevado, porém com comportamento mais estável durante a diafiltração, e tendência ao fouling entre 81,4 e 84,6 %. Contudo, a agregação proteica precisa ser mais bem avaliada para separar as proteínas, bem como a retenção da membrana de 5 kDa, x a qual permitiu a passagem de parte das proteínas tanto do sobrenadante como do sedimentado ressolubilizado, sendo, ainda, verificado um pH mais elevado nos concentrados do que nos permeados e livre passagem dos demais íons mediante análise de condutividade elétrica. Os resultados demonstraram que o ajuste do pH para 10 possibilitou melhorar a performance do fluxo de permeado, provavelmente devido à menor interação proteína-proteína e proteína-membrana, além de ser uma estratégia interessante para minimizar os fatores limitantes em processos de separação por membranas. / Whey is the co-product of cheese production and contains proteins with excellent nutritional and technological properties. Among these proteins, β-lactoglobulin (BLG) and α-lactalbumin (ALA) are the main ones. Although whey is already used by industries to produce protein isolates and concentrates, these products consist of a mixture of several proteins and currently there is a great interest in their fractionation in order to take better advantage of their individual properties. However, fractionating whey proteins is a great challenge because of their similar molecular weight. Due to this, a combination of different approaches based on characteristics of each of these proteins becomes necessary to enable a good separation. ALA has the ability to form protein aggregates in an acidic media and absence of calcium, providing an interesting condition to combine with membrane separation processes. In view of this, the aim of this work was to fractionate BLG and ALA using a combination of protein aggregation procedure and membrane separation processes. Adjustment of pH to 4 and addition of sodium citrate as complexing agent of calcium ion allowed the formation of protein aggregates in whey protein isolate solution, but when microfiltration was carried out with ceramic membranes of 0.8 and 0.05 μm to retain the protein aggregates formed, permeate flux was low during the determination of the operating pressure of the process. The same procedure was used with whey powder solution and 0.8 μm membrane, also resulting in a low permeate flux when determining the operating pressure. By combining centrifugation with ultrafiltration, the supernatant containing the fraction that did not form protein aggregates showed higher permeate flux at pH 7 and 10, and lower permeate flux at pH 3 and 4. Purification of the supernatant at pH 10 with 5 kDa ceramic membrane showed high permeate flux and, when the diafiltration was performed, the permeate flux presented an upward behavior and lower fouling tendency, varying between 56.5 and 64.6 %. The resolubilized sediment at pH 10 also showed a higher permeate flux, but with a more stable behavior during diafiltration and fouling tendency between 81.4 and 84.6 %. Nevertheless, protein aggregation procedure needs to be better evaluated to separate the proteins as well as the retention of the 5 kDa membrane, which allowed passage of part of the proteins of the supernatant and the resolubilized sediment solutions and showed a higher pH in the xii concentrates than in the final permeate and free passage of the other ions evaluated by electrical conductivity analysis. The results showed that adjusting the pH to 10 allowed to improve the perfomance of permeate flux, probably due to the lower protein-protein and protein-membrane interactions, besides being an interesting strategy to minimize the limiting factors in PSM.

Leveduras oleaginosas possuem a capacidade de sintetizar grande quantidade de lipídeos em suas células, gerando produtos de alto valor agregado através de um processo sustentável. Um perfil de ácidos graxos poli-insaturados é de grande interesse por parte das industrias alimentícia e farmacêutica e têm sido alvo de diversos estudos em relação à sua produção e efeitos benéficos à saúde. O presente trabalho teve como objetivo produzir ácidos graxos poli-insaturados pela levedura Meyerozyma guilliermondii BI281 utilizando glicose, glicerol residual e permeado de soro de queijo como fontes de carbono. Avaliou-se o metabolismo da levedura em meios de cultivo com diferentes composições (“meio A” e “base YM”) e comparou-se o seu desempenho em razões C/N 100: 1 e 50:1. A levedura foi capaz de metabolizar todos os substratos testados e o meio de cultivo “A” com glicerol residual e razão C/N 50:1 mostrou-se o mais adequado, obtendo valores de 5,67 g.L-1 de biomassa e 1,04 g.L-1 de lipídeos, representando aproximadamente 18 % do peso da massa seca de biomassa. Esta condição foi escalonada para biorreator de 2 L, onde condições de aeração e controle de pH puderam ser avaliadas, apresentando quantidade semelhante de lipídeos (1,08 g.L-1) e uma maior produção de biomassa (7,05 g.L-1). Os ácidos graxos sintetizados apresentaram em sua composição ácido láurico (C12:0), ácido mistírico (C14:0), ácido palmítico (C16:0), ácido pamitoleico (C16:1), ácido esteárico (C18:0), ácido oleico (C18:1 n-9), ácido linoleico (C18:2 n-6) e ácido linolênico (C18:3 n-3). / Oleaginous yeasts are able to synthesize high amounts of lipids in their cells, producing high added-value products through a sustainable process. Food and pharmaceutical companies have great interest in polyunsaturated fatty acids depending on their profiles and many studies related to their production and health benefits have been carried out. The aim of this study was to produce polyunsaturated fatty acids by the yeast Meyerozyma guilliermondii BI281A using glucose, crude glycerol, and cheese whey permeate as carbon sources. Yeast metabolism was evaluated in different compositions of culture media (“A” and “YM”) and at different C/N ratios (100:1 and 50:1). The yeast was able to assimilate all substrates tested, and medium “A” with crude glycerol as carbon source at a C/N ratio of 50:1 had the most efficient result with biomass production of 5.67 g.L-1 and lipid production of 1.08 g.L-1, which represented 18 % of dry cell weight. This composition was scaled-up to a 2 L bioreactor, where it was possible to measure pH and aeration conditions, and showed similar lipid production (1.08 g.L-1) and higher biomass production (7.05 g.L-1). Fatty acids profile obtained was composed by lauric acid (C12:0), myristic acid (C14:0), palmitic acid (C16:0), palmitoleic acid (C16:1), stearic acid (C18:0), oleic acid(C18:1), linoleic acid (C18:2 n-6), and linolenic acid (C18:3 n-3).

A síndrome hemorrágica causada por contato com lagartas da Lonomia obliqua tem alcançado proporções epidêmicas no sul do Brasil. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia de diferentes doses do soro antilonômico (SALon) no tratamento de pacientes que tiveram contato com lagartas da Lonomia obliqua. Um ensaio clínico prospectivo, randomizado, duplo-cego foi realizado no hospital universitário São Vicente de Paulo de Passo Fundo, RS, Brasil. Entre janeiro de 2000 a março de 2002, 44 pacientes portadores de síndrome hemorrágica grau I e grau II foram randomizados em dois grupos: Grupo A: 22 pacientes que receberam uma dose de 10,5mg (três ampolas) de SALon; Grupo B: 22 pacientes que receberam uma dose de 17,5mg (cinco ampolas) de SALon. A eficácia do tratamento foi avaliada pelo tempo necessário para normalização dos fatores de coagulação sangüínea, freqüência de reações adversas e dias de hospitalização. Não houve diferença no quadro clínico e nas alterações laboratoriais entre os dois grupos. O tempo médio para normalizar o tempo de coagulação foi de 15,3 ± 6,6 h e de 19,1 ± 8 h nos grupos A e B, respectivamente (P = 0,09). A freqüência de reações adversas e o tempo de internação hospitalar foram semelhantes entre os dois grupos. O uso do soro antilonômico foi efetivo e bem tolerado. Doses substancialmente menores das preconizadas podem ser suficientes para reverter à síndrome hemorrágica causada pelo envenenamento por contato com lagartas da Lonomia obliqua. / The hemorrhagic syndrome caused by contact with Lonomia obliqua caterpillars has reached epidemic proportions in southern Brazil. This study aimed at assessing the efficacy of different dosages of an antilonomic serum (SALon) in the treatment of patients who had accidental contact with Lonomia obliqua caterpillars. A randomized, double-blinded, prospective clinical trial was conducted at São Vicente de Paulo Hospital, a tertiary hospital in Passo Fundo, Brazil. From January 2000 to April 2002, 44 patients with grade I or II hemorrhagic syndrome were randomly assigned to either group A (22 patients treated with 10,5mg total dose, 3 vials of SALon) or group B (22 patients treated with 17,5mg total dose, 5 vials of SALon). Treatment efficacy was assessed according to time necessary for blood coagulation to go back to normal, incidence of adverse reactions, and hospitalization time. There were no differences in clinical picture and laboratory findings between the two groups. Mean time for coagulation to go back to normal was 15.3±6.6 h and 19.1±8 h in groups A and B, respectively. Adverse reactions and hospitalization time were similar in both groups. SALon was effective and well tolerated. Results suggest that substantially smaller doses than those routinely prescribed may be sufficient for the treatment of envenoming by Lonomia caterpillars.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2017-11-22T13:03:36Z No. of bitstreams: 1 PDF - Áurea Marcela de Souza Pereira.pdf: 23095025 bytes, checksum: ca7df5818d6387801b52ad5382678d07 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2017-12-06T18:34:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Áurea Marcela de Souza Pereira.pdf: 23095025 bytes, checksum: ca7df5818d6387801b52ad5382678d07 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-06T18:34:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Áurea Marcela de Souza Pereira.pdf: 23095025 bytes, checksum: ca7df5818d6387801b52ad5382678d07 (MD5) Previous issue date: 2016-08-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The goat whey is considered a byproduct of the cheese production and is often discarded as effluent without any treatment, becoming a source of pollution. Alternatively, the use of whey for the production of dairy beverages has been a very attractive option, especially due to its nutritional value. Probiotic cultures are composed of microorganisms that confer health benefits for the host, can be used in fermented beverages. Several food proteins contain physiologically active peptides, known as bioactive peptides. Milk proteins are considered a major source of potentially inhibitory peptides on the activity of the angiotensin-converting enzyme (ACE). This study aimed to prepare fermented dairy beverages produced with goat cheese whey powder considering the addition of a probiotic microorganism and its viability in the product, as well as, to evaluate bromatological, microbiological and physicochemical properties during the storage, and also to investigate the inhibitory activity on the ACE. The fermentation process was performed for the beverages of the control trial (BLC), added with Streptococcus thermophilus TA 40, and the probiotic trial (BLP), added with Streptococcus thermophilus TA 40 and Lactobacillus casei BGP 93. The chemical composition of the whey powder and the final milk beverages was evaluated, as well as the pH, titratable acidity and viability of the microorganisms in the reconstituted whey after the addition of the cultures, before fermentation (T0), after fermentation (TF), and after 1, 7, 14 and 21 days of storage at 4 °C. The instrumental texture for both beverages was analyzed during the storage period. The sensory analysis was performed on D7, D14 and D21 sampling periods. The protein content was analyzed for the reconstituted whey (SR) and for beverages on D1, D7, D14 and D21 sampling periods. The degree of proteolysis by the o-ftaldialdeíde (OPA) method and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis were carried out to evaluate the protein degradation in samples during the processing and storage. The inhibitory activity on the angiotensin converting enzyme (ACE) was measured in order to obtain the bioactive potential of the product. The pH during fermentation (T0 and TF) and storage decreased from 5.71 to 4.92 and from 5.72 to 4.97 for BLC and BLP, respectively. The acidity for both trials increased significantly (p<0.05) between T0 and TF and showed significant differences neither between storage periods nor between trials (p>0,05). The viability of S. thermophilus was in accordance with the levels required by the Brazilian legislation for fermented dairy beverages, showing populations higher than 10 CFU/ml in the final product, during the whole storage period. Viable L. casei cells in the probiotic trial were consistent with the recommended levels by the literature (above 10 – 10 CFU/ml) for products with probiotic benefits. The final products were in accordance with the Brazilian legislation for microbial contaminants, which present less than 3 most probable number (MPN)/ml to 100 MPN/ml for coliforms at 30/35 °C and at 45 °C. The texture parameters did not differ significantly (p>0.05) between the trials and the storage period. The presence of the probiotic microorganism did not result in significant differences between trials in the sensory evaluation. The protein content of the SR was significantly higher (p<0.05) than that verified in the dairy beverages during the storage periods for the two trials, which showed values of 2.2 g/100 g for BLC and of 2.1-2,17 g/100 g for BLP. Both beverages showed, during the whole storage, protein levels higher than the minimum of 1.0 g/100 g required by the Brazilian legislation for dairy beverages with added ingredients. Although the degree of proteolysis did not differ significantly between trials and storage time (p>0.05), there was a tendency for the increasing of this parameter during the storage period, as well as a trend of higher proteolysis in the probiotic trial, suggesting that the addition of L. casei promoted the release of peptides, since it was also found electrophoretic bands with larger size ranges for BLP in relation to those verified for BLC. For the ACE assay, both BLP and BLC were able to inhibit the enzyme under study, with increased values for BLP on D1, close to that found with captopril (reference medicine to treat hypertension). / O soro caprino é considerado um subproduto da produção queijeira e muitas vezes descartado sem nenhum tratamento como efluente, tornando-se uma fonte de poluição. Como alternativa, a utilização de soro de queijo para a produção de bebidas lácteas tem sido uma opção muito atraente, notadamente devido ao seu valor nutricional. Culturas probióticas são constituídas de microrganismos que conferem benefícios à saúde do hospedeiro, podendo ser utilizadas em bebidas fermentadas. Muitas proteínas dos alimentos contêm peptídeos fisiologicamente ativos, chamados de peptídeos bioativos As proteínas do leite são consideradas uma das principais fontes de peptídeos com potencial de inibição da atividade da enzima conversora de angiotensina (ACE). Este trabalho teve por objetivo elaborar bebidas lácteas fermentadas produzidas a partir do soro de queijo de cabra em pó considerando a adição de um microrganismo probiótico e sua viabilidade no produto e avaliar as propriedades bromatológicas, microbiológicas e físico-químicas ao longo do armazenamento, e a capacidade inibitória sobre a ACE. O processo de fermentação foi realizado para as bebidas lácteas controle (BLC), adicionada de Streptococcus thermophilus TA 40 e probiótica (BLP), adicionada de Streptococcus thermophilus TA 40 e Lactobacillus casei BGP 93. Foram avaliados os valores de composição do soro em pó e das bebidas lácteas finais, pH, acidez titulável, viabilidade dos microrganismos no soro reconstituído após a adição das culturas, antes da fermentação (T0), depois da fermentação (TF), após 1, 7, 14 e 21 dias de armazenamento a 4 °C (D1, D7, D14 e D21, respectivamente). A textura instrumental para ambas as bebidas foi analisada durante o período de armazenamento. A análise sensorial realizada nos tempos D7, D14 e D21. A quantificação de proteínas foi efetuada no soro reconstituído (SR) e nas bebidas nos tempos D1, D7, D14 e D21. As análises de grau de proteólise pelo método o-ftaldialdeído (OPA) e eletroforese em gel de poliacrilamida-dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) foram realizadas para avaliar a degradação proteica nas amostras ao longo do processamento e armazenamento. A atividade inibidora sobre a ACE foi avaliada a fim de se obter a potencial atividade bioativa do produto. Os valores de pH durante a fermentação (T0 e TF) e o armazenamento diminuíram de 5,71 para 4,92 e de 5,72 para 4,97, para BLC e BLP, respectivamente. A acidez para os dois tratamentos aumentou significativamente (p<0,05) entre T0 e TF, mas não diferiu significativamente nem entre os períodos de armazenamento (D1 a D21), nem e os tratamentos (p>0,05). A viabilidade de S. thermophillus esteve em conformidade com o exigido pela legislação para bactérias láticas viáveis em bebidas lácteas fermentadas, apresentando populações superiores a 10 UFC/ml, no produto final, durante todo o período de armazenamento. A viabilidade de L. casei, no tratamento probiótico, foi condizente com o valor recomendado pela literatura (acima de 10 – 10 UFC/ml) para produtos com benefícios probióticos. Os produtos finais estiveram em conformidade com a legislação para contaminantes, apresentando resultados menores que 3 número mais provável (NMP) /ml até 100 NMP/ml, para coliformes a 30/35 °C e a 45 °C. Os parâmetros de textura não diferiram significativamente (p>0,05) quanto aos tratamentos e ao período de armazenamento. A presença do microrganismo probiótico não resultou em diferença significativa entre os tratamentos na avaliação sensorial. O teor proteico do SR foi significativamente maior (p<0,05) que o verificado nas bebidas lácteas dos dois tratamentos, em todos os períodos de amostragem, as quais apresentam valores de 2,2 g/100 g na BLP e de 2,1-2,17 g/100 g na BLP. Ambas as bebidas apresentaram durante todo o armazenamento teores proteicos maiores que o mínimo de 1,0 g/100 g exigido pela legislação para bebidas lácteas com adições. O grau de proteólise, embora não tenha diferido entre os tratamentos e o tempo de amostragem (p>0,05), apresentou uma tendência de aumento ao longo do período de armazenamento, assim como tendência de maior proteólise no tratamento probiótico, sugerindo que a adição de L. casei promoveu maior liberação de peptídeos, pois também foram encontradas bandas eletroforéticas inferiores a 6 kDa com faixas de tamanhos maiores para BLP em relação à BLC. Para o ensaio com a ACE, tanto BLP quanto BLC foram capazes de inibir a enzima em estudo, com valores superiores para BLP, sendo que para esta bebida no D1 os valores foram próximos ao encontrado para o captopril (medicamento de referência para o tratamento da hipertensão).

Foi investigada a existência de proteção cruzada entre bacterinas bivalentes formuladas com um de três representantes do Sorogrupo Sejroe: hardjo (bacterina A), wolffi (bacterina B) e guaricura (bacterina C), e uma estirpe do sorovar pomona, empregada por ser patogênica para hamsters (Mesocricetus auratus) e possibilitar a realização do teste de potência com desafio. Os ensaios foram efetuados em hamsters machos, comparando-se os níveis de anticorpos aglutinantes e neutralizantes, respectivamente obtidos nos testes de soroaglutinação microscópica (SAM) e inibição de leptospiras in vitro (ICL). Os animais receberam duas doses de vacinas via subcutânea; aos dez dias da segunda dose, foram inoculados com culturas não inativadas dos respectivos sorovares do Sorogrupo Sejroe. Aos 21 dias pós-infecção (d.p.i.), os animais foram sangrados, os soros (n=8) foram agrupados em pools e submetidos aos testes de SAM e ICL. O teste de potência com desafio para o sorovar pomona foi adaptado do protocolo preconizado pelo United States Department of Agriculture, mas as vacinas não foram diluídas e o esquema de imunização empregou duas aplicações de 1,0mL pela via subcutânea em intervalo de dez dias; o desafio foi efetuado aos dez dias da segunda aplicação; os óbitos por leptospirose foram registrados e, aos 21 d.p.i., os sobreviventes foram sacrificados e a condição de portadores renais foi investigada através de cultivos de tecido renal para isolamento de leptospiras. No teste de potência com o sorovar pomona, o número de doses infectantes empregado para desafio (100) situou-se dentro da faixa preconizada (10 a 100); respectivamente para as bacterinas A, B e C, as proporções de mortes por leptospirose entre os animais vacinados foram de 1/10, 0/10 e 3/10, e as de portadores renais de leptospiras entre os sobreviventes foram 2/9, 1/10 e 2/7. Os resultados do teste SAM revelaram que a bacterina A induziu reações para os sorovares hardjo e wolffi; a bacterina B, para hardjo, wolffi e guaricura, e a bacterina C, apenas para a guaricura, e do teste de ICL, que animais vacinados com as bacterinas B ou C apresentaram proteção para hardjo, wolffi e guaricura; entretanto, a bacterina A conferiu proteção apenas para wolffi. Apesar das variações no poder imunogênico segundo a estirpe de leptospira empregada para a produção das bacterinas, houve proteção cruzada entre os sorovares hardjo, wolffi e guaricura. / The existence of cross-protection among bivalent bacterins, produced with one of three leptospires belonging to Serogroup Sejroe: hardjo (bacterin A), wolffi (bacterin B) and guaricura (bacterin C), and a strain of serovar pomona (included because of its pathogenicity to hamsters and the possibility of performing potency assay with challenge), was investigated in male hamsters (Mesocricetus auratus) by comparison of agglutinating and neutralizing antibodies titers, respectively measured by microscopic agglutination (MAT) and in vitro growth inhibition (GIT) tests. All animals received two doses of bacterins by subcutaneous route; after ten days from the second dose, they were inoculated with non-inactivated cultures of respective serovars of Serogroup Sejroe. At 21 post-challenge day (p.c.d.), all animals were bled and their sera (n=8) were joined in pools and tested by MAT and GIT. The potency assay with challenge performed only with serovar pomona was modified from protocol of USDA, but vaccines were not diluted and the immunization schedule employed two 1.0 mL vaccine doses by subcutaneous route with 10?day interval; the challenge was performed after ten days from the second dose; the number of deaths due to leptospirosis was registered; at 21 p.c.d., the survivors were sacrificed and their renal carrier state was investigated by culture of renal tissue for leptospires isolation. In the potency assay with serovar pomona, the number of infectious doses employed for challenge (100 infective units) was in accordance with the recommended range (10-1,000 infective units); respectively to bacterins A, B and C, proportions of deaths due to leptospirosis among vaccinated animals were 1/10, 0/10 and 3/10, and proportions of leptospires renal carrier among survivors were 2/9, 1/10 and 2/7. Results of MAT showed that bacterin A induced reactions against serovars hardjo and wolffi; bacterin B, against hardjo, wolffi and guaricura, and bacterin C, against guaricura; results of GIT revealed that vaccinated animals with bacterins B or C presented protection against serovar hardjo, wolffi and guaricura; however, bacterin A induced protection only against wolffi. A cross?protection was observed among serovars hardjo, wolffi and guaricura, although variations exist in the immunogenic capacity according to the strain of leptospires used for the bacterins production.

Orientador: Flavia Maria Netto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-10T02:53:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VillasBoas_MarianaBattaglin_M.pdf: 1570328 bytes, checksum: 8264ab45a2d69c56c77f60117495628a (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O leite bovino contém várias proteínas que são consideradas antigênicas e capazes de induzir resposta imune, dentre elas, a ß-lactoglubulina (ß-Lg) é uma das mais antigênicas. A enzima transglutaminase (TG) é a única enzima utilizada comercialmente que catalisa reação de ligação cruzada inter ou intramolecular em diversas proteínas, formando polímeros de alta massa molar. Até o momento, pouco se conhece sobre a modificação dos epítopos antigênicos na estrutura das proteínas do soro de leite modificada ou polimerizada pela enzima TG. O presente trabalho teve como objetivo estudar o efeito da reação de polimerização induzida pela TG na atividade antigênica da ß-Lg. A modificação da ß-Lg com a TG foi realizada em dois experimentos: (1) a ß-Lg foi tratada termicamente (80 °C/60 min) em diferentes concentrações (3, 5 e 7%) e polimerizada com TG (5, 10, 25 e 50 U/g de proteína) e (2) a ß-Lg (3, 5 e 7%) foi polimerizada com TG 25 U/g de proteína na presença de agente redutor Cys nas concentrações 0,05, 0,1, 0,25 e 0,4 mol/L. A caracterização da ß-Lg polimerizada foi realizada por eletroforese (SDS-PAGE) e cromatografia líquida de alta eficiência de exclusão molecular (CLAE-EM). A antigenicidade da proteína foi avaliada por métodos imunoquímicos, utilizando soro de camundongos BALB/c e técnicas de Immunoblotting e ELISA. Quando a ß-Lg 3% foi tratada termicamente e polimerizada com TG, 40% da ß-Lg permaneceu nas formas monomérica e dimérica. Já as amostras tratadas com maior concentração de proteína (5% e 7%) apresentaram de 70% a 87% de material com massa molar (MM) > 100 kDa, sendo que ß-Lg 7% polimerizada com 25U TG/g foi a que apresentou maior grau de polimerização. Na presença de Cys, observou-se maior percentual de produtos com MM > 100 kDa que o obtido com o tratamento térmico. Nas amostras ß-Lg 5% e ß-Lg 7%, a presença da Cys possivelmente aumentou a susceptibilidade da ß-Lg à polimerização. As amostras selecionadas para avaliação da antigenicidade foram ß-Lg nativa, ß-Lg 7% tratada termicamente e polimerizada com 25U TG/g de proteína (ß-Lg 7% TT 25TG) e ß-Lg 7% polimerizada com 25 U/g de proteína na presença de Cys 0,25 mol/L (ß-Lg 7% 0,25Cys TG). Os resultados mostraram que os animais sensibilizados com ß-Lg polimerizada na presença de agente redutor Cys apresentaram níveis séricos de IgE e IgG menores, comparados aos grupos imunizados com ß-Lg nativa e ß-Lg tratada termicamente e polimerizada com TG, sugerindo que a polimerização na presença de agente redutor Cys pode reduzir o potencial antigênico da proteína ao modificar .e/ou ocultar regiões de epítopos na proteína / Abstract: The bovine milk contains several proteins that are considered antigenic and capable of inducing immune responses, among them ß-lactoglubulin (ß-Lg) is one of the most antigenic protein. The enzyme transglutaminase (TG) is the only enzyme commercially used that catalyzes reaction of crosslinking inter or intramolecular in several proteins, forming polymer of high molecular mass. Up to now, little is known about modification of epitopes of whey proteins by the TG. The present study examines the effect of the polymerization reaction induced by TG on the antigenic activity of ß-Lg. The ß-Lg was modified by TG in two experiments: (1) ß-Lg was heat treated (80 °C/60 min) at different concentrations (3, 5 and 7%) and modified with TG (5, 10 , 25 and 50U / g protein), and (2) ß-Lg (3, 5 and 7%) was modified with TG 25U / g of protein in the presence of reducing agent Cys ( 0.05, 0.1, 0.25, 0.4 mol/L). The characterization of the modified ß-Lg was performed by electrophoresis (SDSPAGE) and high performance liquid chromatography molecular exclusion (HPLCMS). The antigenicity of the protein was measured by Immunoblotting and ELISA, using serum from BALB/c mices. When ß-Lg 3% was heat treated and modified by TG, 40% of the ß-Lg remained as monomeric and dimeric forms. However, the samples treated at higher protein concentration (5% and 7%) showed 70% to 87% of material with molecular weigh > 100 kDa. ß-Lg 7% modified with 25U TG / g presented the greatest degree of polymerization. In the presence of Cys, higher percentage of products with MW > 100 kDa was obtained than with the previous heat treatment. The presence of Cys increased the susceptibility of ß-Lg for polymerization, especially those treated at protein 5 and 7% concentrations. The samples selected for evaluation of the antigenicity were native ß-Lg, 7% ß-Lg treated with 25U TG / g of protein (ß-Lg 7% TT 25TG) and 7% ß-Lg treated with 25U TG / g protein in the presence of Cys 0.25 mol / L (ß-Lg 7% 0.25 Cys TG). The results showed that animals sensitized with ß-Lg in the presence of reducing the agent Cys had lower levels of IgG and IgE, compared to the groups immunized with native ß-Lg and ß-Lg treated with high temperature and modified with TG, suggesting that the polymerization in the presence of reducing agent Cys can modify or hide epitopes and reduce the potential antigenic of the protein / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestre em Alimentos e Nutrição

A partir de uma biblioteca de cDNA de glândulas de veneno de Micrurus corallinus (cobra-coral), uma serpente da Família Elapidae bastante representada no Brasil e muito comum em áreas florestais tropicais, foram gerados 1.438 Expressed Sequences Tags (ESTs), agrupados em 611 clusters. O banco representa os genes mais expressos na glândula de veneno de M. corallinus. Os transcritos relacionados às toxinas apresentaram ao redor de 46% de representação nesse banco de seqüências. A composição geral das toxinas inclui: toxinas de três dígitos (3FTx) (24%), fosfolipases A2 (PLA2) (16%), lectinas do tipo C (5%), entre outros. O banco permitiu não somente a identificação de possíveis toxinas, mas também de transcritos celulares, sendo a maioria envolvida nas funções fisiológicas de células da glândula de veneno. A maior parte dessas moléculas apresenta um envolvimento na expressão gênica e protéica, o que reflete uma alta especialização do tecido para a síntese de toxinas. A análise do transcriptoma de glândulas de veneno de M. corallinus possibilitou a identificação de alguns candidatos antigênicos para um anti-soro antielapídico alternativo. Cinco candidatos antigênicos foram selecionados por meio da análise do transcriptoma obtido: Atg1 (Grupo das neurotoxinas Homolog 8), Atg2 (Grupo das neurotoxinas Homolog 7/3/1), Atg3 (Outras neurotoxinas 1), Atg4 (Outras neurotoxinas 2) e Atg5 (fosfolipase do tipo A2). Avaliamos a viabilidade de imunização com o DNA desses candidatos. Para isso, os cinco grupos de antígenos foram clonados, primeiramente em pGEM-T e, posteriormente, em pSecTag2A, que é um vetor de expressão em células de mamíferos. As clonagens foram inicialmente testadas em células do tipo COS (transfecção transiente), entretanto não ficou clara a capacidade dessas células em expressar os antígenos. Para a análise da resposta imunológica da vacina de DNA, proteínas recombinantes produzidas em E. coli foram utilizadas para o coating de ELISA para detectar anticorpos presentes no soro primário proveniente da imunização com DNA. Os resultados mostraram que o soro dos animais imunizados foi capaz de reconhecer os antígenos recombinantes. Isso indica que a imunização por DNA em camundongos poderia ser uma boa alternativa em relação à imunização do veneno puro de serpente, que é custosa e muito depende da disponibilidade do veneno. Apesar da necessidade de testes complementares, esse é um resultado promissor, já que a produção de anticorpos pode ser alcançada por via de imunização intramuscular, mais prática para objetivos de produção. / Micrurus corallinus(coral snake) is a tropical forest snake belonging to the Elapidae Family, and is very common in Brazil. From the cDNA library of its venom glands, 1.438 Expressed Sequences Tags (ESTs) were generated and grouped into 611 clusters. This database contains the most expressed genes in the M. corallinus venom glands. The transcripts related to toxins represent approximately 46% of the total genes in this database. The toxin compound consists of: three finger toxins (24%), phospholipases A2 (PLA2s) (16%), type-C lectins (5%), among others. This database allowed not only the identification of possible toxins, but also the identification of cellular transcripts, most of which seems to be involved in physiological functions of venom gland cells. The majority of these molecules are involved in gene and protein expression, revealing the high level of specialization of the tissue for toxin synthesis. The analysis of the M. corallinus venom gland transcriptome allowed the identification of some antigenic candidates for an alternative antielapidic antiserum. Five antigenic candidates were selected after analysing the transcriptome: Atg1 (Homolog group 8), Atg2 (Homolog group 7/3/1), Atg3 (Other neurotoxins 1), Atg5 (A2-type phospholipase). These five antigenic groups were used for DNA immunization. Then they were first cloned in pGEM-T and, after, in pSecTag2A, which is an expression vector in mammal cells. The cloning was tested in COS-type cells (transient transfection), without signs of expression. To analyze the immunological response, recombinant proteins were produced in E. coli and used for ELISA coating to react with the primary serum deriving from the DNA immunization. The results showed that the serum from the immunized animals was able to recognize the recombinant antigens, indicating that the DNA immunization in mice could be a feasible alternative regarding the traditional immunization with crude snake venom, which is costly and heavily dependent on the availability of the venom. Regardless the need for additional tests, this is a promising result, because the antibody production can be achieved by intramuscular immunization, a more effective method when aiming for downstream production.