Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2016-10-07T21:30:40Z No. of bitstreams: 1 INCID?NCIA, VARIABILIDADE MOLECULAR DE V?RUS E CULTIVO IN VITRO DE MERISTEMAS DE _20160429093320061.pdf: 1513731 bytes, checksum: b1a69730145b3f5bec766a5adb8b491c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-07T21:30:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 INCID?NCIA, VARIABILIDADE MOLECULAR DE V?RUS E CULTIVO IN VITRO DE MERISTEMAS DE _20160429093320061.pdf: 1513731 bytes, checksum: b1a69730145b3f5bec766a5adb8b491c (MD5) Previous issue date: 2016-03-21 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado da Bahia - FAPEB / The vine is grown in many countries, the berries being the main product with many uses, such as fresh grapes, juices and wines. The wine industry is an important economic activity in Brazil, highlighting the pole Petrolina, PE / Juazeiro, BA in sub middle of San Francisco Valley (SSFV), as the main producing region of fine table grapes in the country. The multiplication of vine cuttings is done mainly by vegetative propagation, facilitating the spread of pathogens, one of the main sources of the spread of the virus. This study aimed to evaluate the incidence of Grapevine virus A virus (GVA), Grapevine leafroll-associated virus 1 (GLRaV-1), Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRV-3), Grapevine fanleaf virus (GFLV) and Grapevine fleck virus (GFkV) by detecting by Double Antibody Sandwich ELISA (DAS-ELISA) in grapevines of SSFV in six municipalities located in the states of Bahia and Pernambuco, as well as analyze the regenerative capacity and in vitro development of 13 different tropical clones of vine obtained by cultivation of apical meristems and axillary buds, and finally, to analyze the variability of the fragments of the protein coat (PC) gene of the virus winding the sheet cultivars of tropical vines of the San Francisco Valley. Of the 490 samples evaluated, 320 are cultivars for table with and without seeds, 94 for wine and 76 rootstocks. Infections caused by viruses were detected in 79.4% of samples. The GLRaV-3 was the most widespread viruses, followed by GVA GFkV, GLRaV-1 and GFLV, respectively. Mixed infection was detected in 153 samples. Cultivars wine, fine table grapes and rootstocks showed total percentage of 93.2% infection, 52.6% and 31.9%, respectively. For the regenerative capacity and development in vitro, we analyzed the percentage of regeneration time and the numbers of buds, roots and leaves produced as well as the length of the internodal segments 30, 60 and 90 days of cultivation in culture medium 'MS' and 'Galzy', respectively. Of the 13 cultivars tested, four were regenerated with a percentage ranging between 7% and 47%. The occurrence of significant differences among cultivars showed different responses over time. 'Cabernet Sauvignon' presented the best regeneration response starting from apical meristem and axillary buds. 'IAC-572' stood out with the highest average height and bud and leaf numbers 30, 60 and 90. To determine the variability of the CP gene, samples of 28 BAG vines cultivars of the Embrapa Semiarid with and without of disease symptoms were analyzed by reverse transcriptase and polymerase chain reaction (RT-PCR). Of all the samples GLRaV -1, -2 and -3, zero, 10 and 19 presented infection, respectively, and eight had mixed infection. There was a high and low identity between isolates obtained from Brazilian and foreign isolated for both viruses, finding genetic divergence of the CP gene in some isolates. 13 isolates showed no significant homology with other isolates in the present study and available on GENBANK, to GLRaV-3. / A videira ? cultivada em v?rios pa?ses, sendo as bagas o produto principal com diversos usos, como uvas frescas, sucos e vinhos. A vitivinicultura ? uma atividade econ?mica importante no Brasil, destacando-se o polo Petrolina, PE/Juazeiro, BA no Subm?dio do Vale do S?o Francisco (SVSF), como a principal regi?o produtora de uvas finas de mesa do pa?s. A multiplica??o de mudas de videira ? feita principalmente por propaga??o vegetativa, facilitando a difus?o de pat?genos, sendo uma das principais fontes de dissemina??o dos v?rus. No presente estudo, objetivou-se avaliar a incid?ncia dos v?rus Grapevine virus A (GVA), Grapevine leafroll-associated virus 1 (GLRaV-1), Grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRV-3), Grapevine fanleaf virus (GFLV), e Grapevine fleck virus (GFkV), atrav?s da detec??o por Double Antibody Sandwich ELISA (DAS-ELISA), em parreirais do SVSF, em seis munic?pios, localizados nos estados da Bahia e Pernambuco, como tamb?m analisar a capacidade regenerativa e desenvolvimento in vitro de 13 diferentes clones tropicais de videira obtidos pelo cultivo de meristemas apicais e de gemas axilares, e por fim, analisar a variabilidade dos fragmentos do gene da capa proteica (CP) do v?rus do enrolamento da folha de cultivares de videiras tropicais do Vale do S?o Francisco. Das 490 amostras avaliadas, 320 s?o cultivares para mesa com e sem sementes, 94 para vinho e 76 de porta-enxertos. Infec??es causadas por v?rus foram detectadas em 79,4% das amostras. O GLRaV-3 foi o v?rus mais disseminado, seguido por GVA, GFkV, GLRaV-1 e GFLV, respectivamente . Infec??o mista foi detectada em 153 amostras. Cultivares para vinho, uvas finas de mesa e porta-enxertos apresentaram porcentagem total de infec??o de 93,2%, 52,6% e 31,9%, respectivamente. Para a capacidade regenerativa e desenvolvimento in vitro, foram analisadas a porcentagem de regenera??o, altura, e os n?meros de gemas, ra?zes e folhas produzidas, bem como o comprimento dos segmentos internodais, aos 30, 60 e 90 dias de cultivo em meio de cultura ?MS? e ?Galzy?, respectivamente. Das 13 cultivares testadas, quatro foram regeneradas com porcentagem variando entre 7% e 47%. A ocorr?ncia de diferen?as significativas entre as cultivares revelaram respostas distintas ao longo do tempo. ?Cabernet Sauvignon? apresentou a melhor resposta de regenera??o de plantas partindo de meristema apical e de gemas axilares. ?IAC-572? destacou-se com as maiores m?dias de altura e n?meros de gemas e de folhas aos 30, 60 e 90. Para determinar a variabilidade do gene da CP, amostras de 28 cultivares de videiras do BAG da Embrapa Semi?rido com presen?a e aus?ncia dos sintomas da doen?a foram analisadas por Transcriptase Reversa e Rea??o em Cadeia da Polimerase (RT-PCR). De todas as amostras para GLRaV -1, -2 e -3, zero, 10 e 19 apresentaram infec??o, respectivamente, sendo que oito apresentaram infec??o mista. Observou-se alta e baixa identidade entre os isolados obtidos com isolados brasileiros e estrangeiros para ambos os v?rus, encontrando-se diverg?ncia gen?tica do gene da CP em alguns isolados. 13 isolados n?o apresentaram homologia significativa com outros isolados do presente estudo e dispon?veis no GENBANK, para GLRaV-3.

Neospora caninum é um parasito intracelular obrigatório, formador de cistos, que acomete vários animais domésticos e silvestres, tendo maior importância nas espécies canina e bovina, nas quais causa problemas nervosos e reprodutivos. Os canídeos do gênero Canis são os únicos reconhecidos como hospedeiros definitivos do N. caninum até o momento, nos quais ocorre a fase sexuada de multiplicação, resultando na eliminação de oocistos pelas fezes. Toxoplasma gondii também é um coccídio responsável por uma das zoonoses de maior importância e ocorrência em todo o mundo. A fase assexuada de desenvolvimento do T. gondii ocorre nos mamíferos e aves (hospedeiros intermediários) com formação de cistos teciduais e a fase sexuada de desenvolvimento ocorre no intestino delgado dos hospedeiros definitivos, que são os membros da família Felidae. Este estudo teve por objetivo determinar a soroprevalência de anticorpos contra Neospora spp. e T. gondii em equídeos de diferentes regiões do Brasil e o isolamento e caracterização genética destes coccídios em amostras de tecidos de equídeos. A sorologia para T. gondii e Neospora spp. foi realizada em 453 amostras de soros por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta com ponto de corte de 50 para Neospora spp e 64 para T. gondii. Deste total, oito (1,75%) amostras (sete de jumentos e um de cavalo) foram positivas para Neospora spp. e 129 (28,47%) amostras (82 jumentos, 32 cavalos e 15 mulas) para T. gondii. Para o isolamento do T. gondii foram realizados 29 bioensaios em camundongos, sendo 19 de animais soropositivos e 10 de pools de tecidos de cavalos soronegativos. Por meio dessa prova biológica, foi possível o isolamento em uma amostra de jumento (Equus asinus) de Mossoró, RN, ocorrendo a morte dos dois únicos camundongos infectados, no 16o e 17o dia pós-inoculação. A caracterização genotípica do isolado foi realizada pela PCR-RFLP utilizando 12 marcadores genotípicos. A genotipagem dessa amostra evidenciou o genótipo #60 TgCkBr220, já isolado em galinha do Arquipélago de Fernando de Noronha, PE, Brasil. O isolamento de Neospora spp em gerbilos não pode ser feito uma vez que não foi possível a obtenção de tecidos dos equídeos soropositivos. / Neospora caninum is an obligate intracellular parasite, forming cysts that affect many domestic and wild animals, having greater importance in canine and bovine species due neurological and reproductive problems. Canids of the genus Canis are recognized as the only definitive hosts of N. caninum until the moment in which sexual phase occurs multiplication, resulting in the elimination of oocysts in the feces. Toxoplasma gondii is also a coccidian parasite responsible for a zoonotic disease of great importance and occurrence around the world. The asexual developmental stage of T. gondii occurs in mammals and birds, the intermediate hosts, resulting in the formation of cysts and the sexual stage occurs in the small intestine of definitive hosts, which are the felids, occurring oocysts formation. This study aimed to determine the seroprevalence of antibodies against Neospora spp. and Toxoplasma gondii in equids from different regions of Brazil and the isolation and genetic characterization of these parasites from equids tissue. Serology for T. gondii and Neospora spp. was performed in 453 serum samples by Immunofluorescence Antibody Test (IFAT). Of this total, eight (1.75%) samples (seven of donkeys and one of horse) were positive to Neospora spp. antibodies and 129 (28.47%) samples (82 donkeys, 32 horses, 15 mules) were T. gondii seropositive. For the isolation of T. gondii, bioassay was performed in mice. A sample of one donkey (Equus asinus) from Mossoró, RN, was obtained with two of the 20 inoculated mouse infected. The mouse died at day 16th and 17th post inoculation. The genotypic characterization of the isolate was performed by PCR-RFLP using 12 genotypic markers. Genotyping showed the genotype #60 TgCkBr220, already described in chickens from Fernando de Noronha, PE, Brazil. Due the impossibility of acquisition of tissue from Neospora spp seropositive equids, isolation of this coccidian by gerbil bioassay was not possible to be done.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-18T15:32:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InqueritoSorologicoInfeccao.pdf: 4051634 bytes, checksum: 7404bb86b47f088d2b43652b5bdf96ff (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-11-14T12:54:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InqueritoSorologicoInfeccao.pdf: 4051634 bytes, checksum: 7404bb86b47f088d2b43652b5bdf96ff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-14T12:54:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InqueritoSorologicoInfeccao.pdf: 4051634 bytes, checksum: 7404bb86b47f088d2b43652b5bdf96ff (MD5) Previous issue date: 2010-12-20 / Este trabalho objetivou avaliar a soroprevalência do vírus linfotrópico humano de células T (HTLV) em pessoas residentes nas comunidades de Alcobaça e Ararão, localizadas às margens do lago da Usina Hidrelétrica de Tucuruí/PA. Amostras de soro de 657 indivíduos foram analisadas por meio do teste sorológico imunoenzimático do tipo ELISA (Symbioys®). Observou-se uma importante prevalência do HTLVI/II (4,7%) na população estudada e as características demográficas do grupo de pessoas analisadas reflete que a maioria possui idade superior a 40 anos (p=0,0239), estado civil solteiro (p=0,035), residem há mais de 10 anos na área de abrangência do estudo (p = 0.0027) e escolaridade igual ou inferior a 4 anos (p=0,0308). Não houve diferença estatisticamente significante quando se analisou variáveis como o sexo, naturalidade, prática de hemotransfusão e cirurgia prévia. A prevalência encontrada para o HTLV é considerada alta segundo a literatura vigente, justificando-se o rastreamento para esse vírus nos locais do estudo afim de que se possa entender melhor a epidemiologia de transmissão do HTLV na população. / The aim of this study was to evaluate seroprevalence lymphotropic virus human T cells (HTLV) in individuals living in communities of Alcobaça e Ararão, located on the shores of lake Hydroelectric Plant Tucuruí / PA. Serum samples from 657 individuals were analyzed by immunoenzymatic assays the type of ELISA (Symbioys ®). There was a significant prevalence of HTLVI / II (4.7%) in the study population and the demographic characteristics reflects most of them are older than 40 years (p = 0.0239), unmarried (p = 0.035), resident for over 10 years in the catchment area of the study (p = 0.0027) and educational level was equal to or less than 4 years (p = 0.0308). There was no statistically significant difference when analyzing variables such as sex, birth, blood transfusion and previous surgery. The prevalence for HTLV is considered high according to current literature, justifying the screening for this virus at the study sites in order that we can better understand the epidemiology of HTLV transmission in the population.

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-03-05T12:10:25Z No. of bitstreams: 2 Tese - Joyce Rodrigues Lobo - 2018.pdf: 2149724 bytes, checksum: 9ffc2cc35e80c43e0c544353ae4c1118 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-03-06T10:40:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Joyce Rodrigues Lobo - 2018.pdf: 2149724 bytes, checksum: 9ffc2cc35e80c43e0c544353ae4c1118 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T10:40:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Joyce Rodrigues Lobo - 2018.pdf: 2149724 bytes, checksum: 9ffc2cc35e80c43e0c544353ae4c1118 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-01-26 / Multivariate statistical analysis was used for environmental groupings in Cerrado and Caatinga evaluating the relationship between positive serological prevalences for brucellosis, bovine viral diarrhea (BVD), infectious bovine rhinotracheitis (IBR), leptospirosis, enzootic bovine leukosis (EBL), neosporosis and toxoplasmosis in bovine Curraleiro Pé-Duro, associated with socioeconomic data of the municipalities. Serological results were obtained from the Pro-Centro-Oeste Network database; socioeconomic variables of IBGE and environmental data of the Laboratory of Image Processing and Geoprocessing of UFG and National Institute of Meteorology, in two periods 2006 and 2011. Environmental variables were grouped, later was performed discriminant analysis and canonical correlation. In 2006, cluster 1 was located in the Cerrado-Amazonian transition area and were associated the prevalences of brucellosis, leptospirosis, EBL, IBR and BVD; Cluster 2 was characterized by vegetation typical of Cerrado and was related the prevalence of neosporosis and toxoplasmosis; Cluster 3 was differentiated by water stress and presented the intermediate values of prevalence; Cluster 4 was characterized by areas for environmental protection of the native vegetation; and cluster 5 constituted an anthropogenic environment in the Cerrado. In 2011, cluster 1 was characterized by Cerrado regions rich in natural vegetation and Caatinga, warmer, lower rainfall and low altitudes were associated with the prevalences of LEB, IBR and BVD; Cluster 2 in dry regions associated with the prevalence of neosporosis; Cluster 3 Cerrado antropizado with more hot and humid climate, higher rainfall at high altitudes related to the prevalence of leptospirosis and brucellosis, in dairy cattle. Evaluation of the landscape in the prevalence of bovine diseases reflects historical and socioeconomic aspects of agriculture. / Análise estatística multivariada foi utilizada para agrupamentos ambientais, em Cerrado e Caatinga avaliando a relação entre prevalências sorológicas positivas para brucelose, diarreia viral bovina (BVD), rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), leptospirose, leucose enzoótica bovina (LEB), neosporose e toxoplasmose de bovinos Curraleiro Pé-Duro, juntamente com dados socioeconômicos dos municípios. Resultados sorológicos foram obtidos do banco de dados da Rede Pró Centro-Oeste; socioeconômicos do IBGE e ambientais da plataforma de dados do Laboratório de Processamento de Imagens e Geoprocessamento da UFG e Instituto Nacional de Meteorologia, em dois períodos 2006 e 2011. Variáveis ambientais foram agrupadas, posteriormente foram realizadas análise discriminante e correlação canônica. Em 2006, cluster 1 localizou-se em área de transição Cerrado-Amazônia e associou-se as prevalências de brucelose, leptospirose, LEB, IBR e BVD; Cluster 2 caracterizou por vegetação típicas de Cerrado e relacionou-se as prevalências de neosporose e toxoplasmose; Cluster 3 diferenciou-se pelo estresse hídrico e apresentou os valores intermediários de prevalências; Cluster 4 caracterizou por áreas para proteção ambiental da vegetação remanescente; e cluster 5 constituiu-se ambiente antropizado no Cerrado. Em 2011, cluster 1 caracterizou-se por regiões de Cerrado ricas em vegetação natural e Caatinga, mais quentes, menor pluviometria e baixas altitudes associaram-se as prevalências de LEB, IBR e BVD; Cluster 2 regiões mais secas associadas a prevalência de neosporose; Cluster 3 Cerrado antropizado com clima mais quente e úmido, maior pluviosidade em elevadas altitudes relacionados as prevalências de leptospirose e brucelose, na pecuária leiteira. Avaliação da paisagem na prevalência de doenças bovinas reflete aspectos histórico e socioeconômico da agropecuária.

Introdução e Objetivos: A Hepatite pelo Vírus E (HEV) é uma infecção conhecida mundialmente por ter seu curso assintomático e autolimitado na maioria dos casos. Nos últimos anos, casos de evolução para cronicidade têm sido descritos envolvendo população de pacientes imunocomprometidos, particularmente os transplantados de órgãos sólidos. A prevalência da infecção pelo HEV na população de transplantados de fígado é ainda desconhecida em nosso meio. Pacientes e Métodos: Nós avaliamos parâmetros de infecção pelo HEV (HEV RNA, anti-HEV IgM e anti-HEV IgG) em uma coorte de 294 adultos transplantados de fígado seguidos no HCFMUSP. Para pesquisa dos anticorpos foi utilizada a metodologia ELISA (RecomWell HEV IgM/ IgG da Mikrogen®), sendo os resultados indeterminados e com IgM isoladamente positivo confirmados por Immunoblotting (RecomLine IgM/ IgG da Mikrogen®). Para pesquisa do HEV RNA utilizou-se a metodologia de PCR em tempo real One-Step com primers e sondas que amplificam um fragmento da ORF3 do genoma viral. Foram avaliados dados demográficos e laboratoriais de toda população de transplantados. Posteriormente, foram analisadas apenas as biópsias hepáticas de 122 pacientes transplantados devido à Hepatite pelo Vírus C (VHC) possuidores ou não de marcadores sorológicos ou moleculares do HEV de acordo com a classificação METAVIR. Resultados: Amostras de 8,2% (24/294) dos pacientes foram positivas para anti-HEV IgG, 2% (6/294%) positivas para anti-HEV IgM e 5,8% (17/274) mostraram positividade para o HEV RNA. Apenas um paciente mostrou positividade tanto para anti-HEV IgM quanto para o anti-HEV IgG. Setenta e sete vírgula oito por cento (95/122) dos pacientes transplantados pelo VHC foram tratados com esquema que incluía ribavirina por um período mínimo de 6 meses antes da coleta do sangue. Dentre os transplantados pela cirrose por VHC que apresentaram positividade para o anti-HEV IgG apenas 37,5% (3/122) mostraram níveis de fibrose maior que 2, enquanto que 41,7% (5/122) dos positivos para o HEV RNA demonstraram níveis de fibrose maior que 2. Em geral, a prevalência do HEV no cenário pós transplante hepático parece ser baixa podendo não trazer um dano histológico significativo no cenário pós transplante. Conclusão: Nós concluímos que apesar de alguns estudos demonstrarem riscos de cronificação pelo HEV, esse vírus tem baixa prevalência em nosso meio e os pacientes transplantados de fígado pelo VHC que apresentaram marcadores sorológicos ou moleculares para o HEV não tiveram níveis mais acentuados de fibrose quando comparados com os pacientes que não apresentaram indícios de infecção pelo HEV no momento da análise / Background and Aims: Hepatitis E Virus (HEV) is an infection known worldwide for its asymptomatic and self-limited course in most of the cases. In the last five years, cases evolving to chronicity have been described involving immunosuppressed patients, especially in recipients of solid organs transplants. The HEV infection prevalence in liver transplanted patients has yet to be fully assessed by our community. Patients and Methods: We evaluated laboratory parameters for the HEV infection (HEV RNA, anti-HEV IgM and anti-HEV IgG) in a cohort of 294 adult patients who had liver transplants on the HCFMUSP (Clinical Hospital of University of São Paulo School of Medicine). In order to investigate the antibodies, we used Elisa methodology (RecomWell HEV IgM/ IgG by Mikrogen®) and the indeterminate results and isolates positive anti-HEV IgM were confirmed by immunoblotting (RecomLine IgM/ IgG by Mikrogen®). For screening of HEV RNA, One-Step PCR in real time was used with primers and probes that amplify a fragment of the ORF3 from the viral genome. Laboratory and demographic data were collected in the entirety of the transplanted population. Following that, the hepatic biopsies of 122 patients transplanted due to Hepatitis C (HCV) were analysed with or without serological or molecular markers of HEV according to METAVIR score. Results: Serological samples of 24 (8.2%) of the patients tested positive for anti-HEV IgG, 06 (2%) were positive for anti-HEV IgM and 17 (5.8%) showed positive results for HEV RNA. Only one patient showed positive results for both anti- HEV IgM and anti-HEV IgG. Also, 95 (77.8%) of the patients transplanted because of the HCV infection received treatment including Ribavirin for at least 6 months before the blood sample collection. Among the transplanted patients due to HCV cirrhosis who presented positive results for anti-HEV IgG, only 3 (37.5%) showed fibrosis beyond stage 2, while 5 (41.7%) of the HEV RNA positive patients had liver fibrosis higher than 2. Conclusion: Overall, the prevalence of HEV in the post-hepatic transplant scenario appears to be low, seemingly not harmful histologically in the post-transplant cases. We have concluded that although some studies showed risks of HEV chronification, patients who had their livers transplanted due to HCV who showed serological or molecular markers for HEV did not have higher levels of fibrosis when compared to patients who showed no indications of HEV infection at the time of the analysis

Introdução. O Papilomavírus humano (HPV), particularmente o tipo 16, têm sido associado com risco e prognóstico de tumores de cabeça e pescoço. Contudo, o papel do DNA do HPV e resposta sorológica na sobrevida neste grupo de pacientes ainda não está claro. Objetivos. Avaliar o efeito do HPV (resposta sorológica e detecção do DNA no tecido tumoral) na sobrevida de pacientes com carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço, considerando-se as distintas localizações anatômicas (cavidade oral, orofaringe, hipofaringe e laringe). Material e métodos. Coorte de 1.475 pacientes com carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço, oriundos de dois estudos multicêntricos, diagnosticados entre novembro de 1998 e dezembro de 2008 e acompanhados até 30 de junho de 2009. Detecção de DNA do HPV no tecido tumoral foi feita pela técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction) em tecido fresco e material parafinado. Resposta sorológica às proteínas do HPV foi determinada pela técnica Multiplex Luminex. Sobrevida global e específica pela doença foram calculadas pelo método atuarial (tábuas de vida). Curvas de sobrevida de Kaplan-Meier e teste Log-rank para comparação de curvas de sobrevida foram calculados. Hazard ratio (HR) do efeito da infecção pelo HPV nos tumores de cabeça e pescoço e respectivo intervalo com 95 por cento de confiança (IC95 por cento ) foram calculados via modelo de regressão de Cox ajustado pelas variáveis: estudo de origem dos casos, sexo, idade, educação, consumo de tabaco e de álcool, estadiamento do tumor e tratamento, assim como hábitos sexuais para a subcoorte com esta informação. Resultados. Prevalência de DNA do HPV 16 no tecido tumoral foi de 6,7 por cento nos casos recentes (2003-2008) comparado com 1 por cento nos casos iniciais (1998-2002) para a subcoorte de São Paulo. Aumento da soropositividade para HPV 16 E7 nos casos do estudo mais recente (2003-2008) comparado com os casos do estudo inicial (1998-2002) resultou estatisticamente significante. Foi observada pobre concordância entre os resultados de sorologia e DNA do HPV. Pacientes mais jovens (50 anos), que não fumavam e com tumores de orofaringe apresentaram risco aumentado na resposta sorológica à proteína E6 do HPV 16. Prática de sexo oral associou-se com resposta sorológica conjunta às proteínas E6 e E7 do HPV 16. Pacientes soropositivos para HPV 16 E6 apresentaram maior sobrevida global (HR=0,62; IC95 por cento =0,44-0,87), adicionalmente observou-se que a resposta sorológica conjunta às proteínas E6 e E7 do HPV incrementou a sobrevida dos pacientes com tumores de cabeça e pescoço (HR=0,34; IC95 por cento 0,17-0,70) e de orofaringe (HR=0,17; IC95 por cento 0,05-0,59). Conclusões. A prevalência da infecção pelo HPV entre pacientes com tumores de cabeça e pescoço aumentou no período estudado. O estudo sugere que resposta sorológica conjunta às proteínas E6 e E7 do HPV 16 pode estar associada com maior sobrevida global nos tumores de cabeça e pescoço, especificamente nos pacientes com tumores de orofaringe / Introduction. Human papillomavirus (HPV), especially type 16, had been associated with risk and prognostic of head and neck cancer. However, the role of HPV DNA and serological response in survival of patients with head and neck cancer is not yet clear. Objectives. Evaluate the effect of HPV (serological response and HPV DNA tumor status) in survival of patients with squamous cell carcinoma of head and neck (SCCHN), according to anatomical sites (oral cavity, oropharynx, hypopharynx and larynx). Material and methods. Cohort of 1,475 patients with SCCHN, from two multicentre studies diagnosed between November 1998 and December 2008 and followed-up until 30 of June 2009. HPV DNA detection was evaluated by PCR (Polymerase Chain Reaction) in fresh tissue and paraffin blocks. Antibodies to HPV in the serum were determinated by Multiplex Luminex technique. Overall and disease specific survival were calculated by actuarial method. Kaplan-Meier survival curves and Log-rank test in order to compare survival curves were calculated. Hazard ratio (HR) and 95 per cent of interval confidence (95 per cent IC) for Cox model regression were used to evaluate the effect of HPV infection in SCCHN, adjusted by variables: study group, sociodemographics, tobacco and alcohol consumption, tumor clinical stage and treatment, and also sexual habits in the subcohort with available information. Results. HPV DNA 16 tumoral status prevalence was 6.7 per cent in recent cases (2003-2008) compared to 1 per cent in old cases (1998-2002), only for subcohort of São Paulo. Seropositivity to HPV 16 E7 increased in the late cases (2003-2008) compared to old cases (1998-2002) and was statistically significant. Poor concordance was showed between DNA HPV and serological response to HPV. Younger patients (50 years old), no smokers and with oropharyngeal tumors showed increased risk to HPV 16 E6 serological response. Oral sex was associated with HPV 16 E6 and E7 simultaneously. Seropositivity to HPV 16 E6 had longer overall survival (HR=0.62; 95 per cent CI=0.440.87), additionally HPV 16 E6 and E7 serological response increased the survival of head and neck cancers (HR=0.34; 95 per cent CI 0.17-0.70) and oropharyngeal cancer (HR=0.17; 95 per cent CI 0.05-0.59) Conclusions. Prevalence of HPV infection in patients with SCCHN had increased in the study period. The study suggests that HPV 16 E6 serological response could be associated with increased overall survival in patients with SCCHN tumors and specifically with oropharyngeal cancer

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 738323 bytes, checksum: 02b21d61c33721f0da1f03507348aa68 (MD5) Previous issue date: 2006-12-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The purpose for this study was to evaluate equine hematological (hematocrit, hemoglobin, erythrocytes, leukocytes, neutrophils, bands, lymphocytes, monocytes, basophils, eosinophils and platelets) and biochemical parameters (glucose, fibrinogen, creatine kinase and gamma glutamyltransferase) submitted to ozone therapy, in behalf of the immediate response pattern (the following 24 hours) in between the gas mixture applications (resting period), as well as the positive and/or negative tendencies during the application period and the dose and sex influence or the interaction of these factors on the parameters. Moreover, pattern, tendency and effects of ozone therapy over heart (HR) and respiratory (RR) rates during the recovery period (up to 20 minutes after ozone therapy) were monitored. Twelve cross bred horses, 6 males and 6 females, between 4 and 20 years old were exposed to ozone therapy through the intravenous application of 500 and 1000 mL of the gas mixture, every three days, during 24 days. Four groups were conformed: MT500, MT1000, FT500 and FT1000, which comprised males (M) and females (F) receiving 500 and 1000 mL of ozone, respectively. The different ozone effects over the hematological and blood biochemistry parameters were at first studied during the resting period (1, 6 and 24 hours after each ozone application) and for heart and respiratory rates this immediate evaluation was during the recovery period (until 20 minutes after each ozone application). Furthermore, the parameters were assessed during the experimental time. The results revealed that only the platelets count and glucose and gamma glutamyltransferase concentrations, revealed a linear pattern in response to ozone therapy during the resting period. The former was increased (platelets) and the others diminished (glucose and gamma glutamyltransferase). Positive tendencies were observed after ozone therapy through the hematocrit and erythrocytes values increase, the later count was greater within the mares. Also an augment was registered on neutrophils count even though in a later phase. Furthermore, a transient augment in bands count, platelets and a hypoglycemic effect within each experimental group was seen. Only gamma glutamyltransferase showed an evident initial increase with a later decrease in each group. According to sex, the results revealed that this was a relevant factor on the erythrocytes blood count (p<0.05) in response to ozone therapy, where the females showed higher mean values of this parameter, independently of the administered dose. Finally, related to the heart rate (HR) and respiratory frequency (RF), the results revealed an increase in HR (p>0.05) and RF (p<0.05) in all horses exposed to ozone, independent on sex, dose or the interaction between these factors. After the recovery period (until 20 minutes after ozone therapy), the HR and RR mean values decreased, fact that could imply preconditioning on the horses cardiorespiratory performance. Adverse effects induced by ozone were not observed in the animals through the intravenous application during the experimental period. / O objetivo deste estudo foi avaliar em eqüinos submetidos a ozonioterapia, os parâmetros hematológicos (hematócrito, hemoglobina, eritrócitos, leucócitos totais, segmentados, bastonetes, linfócitos, monócitos, basófilos, eosinófilos e plaquetas) e da bioquímica sangüínea (glicose, fibrinogênio, creatina quinase e gama glutamiltransferase), segundo o comportamento imediato (até 24 horas) entre aplicações da mistura do gás (período de repouso), assim como as tendências, positivas e/ou negativas durante o período de aplicação do ozônio e a influência da dose, sexo ou interação destes fatores nestes parâmetros. Também foram monitorados o comportamento, tendências e efeitos do ozônio sobre parâmetros fisiológicos, como freqüência cardíaca (FC) e respiratória (FR) durante o período de recuperação (até 20 minutos após a ozonioterapia). Para isso, foram utilizados 12 eqüinos mestiços sadios, sendo 6 machos e 6 fêmeas, com idades compreendidas entre 4 e 20 anos. Os animais foram submetidos à ozonioterapia, mediante administração de 500 ou 1000 mL da mistura do gás, por via intravenosa, a cada três dias, por um período total de 24 dias. Os animais foram divididos em quatro grupos: MT500, MT1000, FT500 e FT1000, sendo machos (M) que receberam 500 mL e 1000 mL e, fêmeas (F) que receberam 500 e 1000 mL, respectivamente. Os diferentes efeitos do ozônio sobre os parâmetros hematológicos e da bioquímica sangüínea foram inicialmente estudados durante o período de repouso (1, 6 e 24 horas após cada aplicação de ozônio), e para as freqüências cardíaca e respiratória, esta avaliação imediata foi durante o período de recuperação (até 20 minutos após cada aplicação de ozônio). Além disso, os parâmetros foram avaliados ao longo do tempo do período experimental. Os resultados demonstraram que os únicos parâmetros que sofreram efeito linear durante o período de repouso foram a contagem total de plaquetas e a concentração de glicose e de gama glutamiltransferase, que revelaram concentração aumentada (plaquetas) ou diminuída (glicose e gama glutamiltransferase). Foram observadas tendências positivas após ozonioterapia, mediante aumento nos valores do hematócrito e eritrócitos, sendo que, com relação aos últimos, as fêmeas mostraram médias superiores. Também ocorreu aumento na concentração dos segmentados, ainda que de forma tardia. Adicionalmente, foi possível verificar aumento transitório nos valores dos bastonetes, assim como comprovar o aumento na contagem das plaquetas e o efeito hipoglicemiante em todos os eqüinos. Com relação às enzimas, somente a gama glutamiltransferase apresentou uma elevação inicial bastante evidente, com posterior redução em todos os grupos. Com relação ao sexo, os resultados demonstraram que este foi um fator de relevância na concentração dos eritrócitos (p<0,05) em resposta à ozonioterapia, sendo que as fêmeas revelaram valores médios mais altos deste parâmetro, independentemente da dose do ozônio administrada. Por fim, com relação aos parâmetros freqüência cardíaca (FC) e respiratória (FR), observou-se aumento na FC (p>0,05) e FR (p<0,05) em todos os eqüinos expostos ao ozônio, independente do sexo, dose ou da interação destes fatores. Transcorridos o período de recuperação (até 20 minutos posteriores à ozonioterapia), os valores médios desses parâmetros diminuíram, sendo um indício de que a terapia auxilia no condicionamento cárdiorespiratório dos eqüinos. Efeitos adversos não foram observados nos animais em decorrência da administração do ozônio pela via intravenosa durante o período experimental.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 231764 bytes, checksum: c5edf9a222d138e2316e0498c22f422b (MD5) Previous issue date: 2006-07-21 / The objective of this study was to evaluate passive transfer of immunity in newborn foals, by applying the single radial immunodiffusion (SRID) method and to verify immunoglobulin G correlation in the maternal serum, colostrum, and neonatal serum, as well as compare the results from this methodology with those from zinc sulfate turbidity (ZST) and gluteraldehyde coagulation (GC). Thus, 34 Breton cross bred animals were used, 17 mares and respective neonates, mixed Breton breed. The births were monitored and colostrum samples were collected immediately and 12 and 48 hours after birth. Blood samples were collected from the mares next to the foals birth and from the foals immediately, before colostrums ingestion, and 6, 12, 24, 48 hours and 30 days after birth. The samples were processed and IgG concentration determined in the colostrum by SRID. Blood serum samples was used for SRID, TSZ and GC. A drop in antibody concentration in the colostrum was observed after birth, however still significant values were detected within 48 hours. No significant correlation was verified between mare serum IgG concentration and respective colostral concentration, but rather between mare serum and neonate serum concentrations, at the moment that each animal presented maximum value of this immunoglobulin, which occurred between 6 and 24 hours after birth. Correlation was also found between IgG concentration in the colostral and neonatal serum at birth, and 12 and 48 hours after it. Maximum IgG values were found 48 hours after birth, for SRID, ZST and GC test. The comparison of the mean IgG values obtained each time indicated a period of 12 hours after birth as the ideal time for determining IgG concentration by the SRID and ZST techniques and of 6 hours using the GC test. A significant correlation was observed between IgG concentration obtained in the foal serum by the SRID technique with that found using ZST and GC test. / O objetivo deste estudo foi avaliar a transferência de imunidade passiva em neonatos eqüinos, mediante a utilização do método de imunodifiusão radial simples (IDRS) e verificar a correlação entre a concentração de IgG no soro materno, no colostro e no soro do neonato, bem como comparar os resultados obtidos com esta metodologia com aqueles alcançados pelas técnicas de turbidez pelo sulfato de zinco (TSZ) e coagulação pelo glutaraldeído (CG). Para isso foram utilizados 34 animais, sendo 17 éguas e respectivos neonatos, mestiços da raça Bretão. Os partos foram acompanhados e amostras de colostro foram coletadas imediatamente após o parto, assim como com 12 e 48 horas após o mesmo. Amostras de sangue foram coletadas das éguas próximo ao parto e dos potros imediatamente após o nascimento, antes da ingestão de colostro, e com 6, 12, 24, 48 horas e 30 dias após o mesmo. As amostras foram processadas e a concentração de IgG no colostro determinada por IDRS. As amostras de soro foram submetidas às técnicas de IDRS, TSZ e CG. Observou-se queda na concentração de anticorpos no colostro após o parto, porém valores ainda significativos foram detectados com 48 horas. Não foi observado correlação significativa entre a concentração de IgG no soro das éguas e respectivo colostro, mas sim entre a concentração no soro das éguas e soro dos neonatos, no momento em que cada animal apresentou valor máximo dessa imunoglobulina, o que ocorreu entre 6 e 24 horas após o parto. Correlação também foi encontrada entre as concentrações de IgG no colostro e soro dos neonatos no momento do parto, assim como com 12 e 48 horas após o mesmo. Valores máximos de IgG foram encontrados com 48 horas após o parto, tanto quando se utilizou a técnica de IDRS como TSZ ou CG. A comparação dos valores médios de IgG obtidos em cada tempo, mostrou o momento de 12 horas após o parto como indicado para a determinação da concentração de IgG para os métodos de IDRS e TSZ e 6 horas indicado para CG. Correlação significativa foi observada entre a concentração de IgG no soro determinada por IDRS e a encontrada por TSZ e CG.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA10MA065.pdf: 574095 bytes, checksum: 57eb26bddb6a6d197fe88cd5d25475f2 (MD5) Previous issue date: 2010-10-08 / The present study was intended to characterize Rickettsia spp. circulating in arthropod vectors in Santa Catarina, Brazil, utilizing to technical of Reaction of Chain of the Polimerase (PCR) and sequencing genetic and investigate the presence of antibodies against the spotted fever Rickettsiae group (SFRG) in horses. 288 arthropods were collected and taxonomically identified in the Laboratório de Parasitologia e Doenças Parasitárias do Centro de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina (CAV/UDESC) and, subsequently prosecuted by the PCR and sequencing in the Laboratório de Doenças Parasitárias do Departamento de Medicina Preventiva e Saúde Animal (VPS) of the Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ) of the Universidade de São Paulo (USP). Amblyomma ovale, A. aureolatum, A. longirostre, Rhipicephalus sanguineus and Dermacentor nitens showed sequences homology with R. parkeri cepa Mata Atlântica e R. amblyommi cepa AL. Equine (150) serum samples were tested by indirect fluorescent antibody (IFA) using R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommi, R. rhipicephali, R. belli and R. felis antigen. Only two of the equine sera tested (1.33%) had conclusive results of antibody titers. Molecular detection of rickettsiae species potentially pathogenic to humans in arthropod vectors and the presence of seroreactivity to SFRG in horses show the risk of transmission of rickettsiosis in this area and the need to maintain continuous epidemiological surveillance for rickettsial diseases / O presente trabalho foi realizado com objetivo de investigar as espécies de Rickettsia spp. que ocorrem no estado de Santa Catarina, por meio de pesquisa em ixodídeos coletados de diversas espécies animais, utilizando a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e sequenciamento genético, e detectar anticorpos contra Rickettsia spp. em equinos, pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Os carrapatos coletados foram encaminhados para o Laboratório de Parasitologia e Doenças Parasitárias do Centro de Ciências Agroveterinárias da Universidade do Estado de Santa Catarina (CAV/UDESC) para identificação taxonômica e, posteriormente processados pela PCR e sequenciamento no Laboratório de Doenças Parasitárias do Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal (VPS) da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ) da Universidade de São Paulo (USP). Os carrapatos (n=288) foram analisados para os genes rickettsiais gltA, presente possivelmente em todas as espécies do gênero Rickettsia, e ompA, comum às rickettsias do grupo da febre maculosa. Para o gene gltA, 14 amostras foram positivas, infectando os vetores das espécies Rhipicephalus sanguineus, Amblyomma aureolatum, A. ovale, A. longirostre, A. tigrinum e Anocentor nitens. Nove amostras foram positivas para o gene ompA (A. aureolatum, A. ovale, A. longirostre, R. sanguineus). As amostras positivas para ompA foram sequenciadas. O resultado do sequenciamento indica que em Santa Catarina circulam os agentes Rickettsia parkeri cepa Mata Atlântica e Rickettsia amblyommii cepa AL. Além dos carrapatos, 150 amostras de sangue foram colhidas de equinos de duas mesorregiões de Santa Catarina (Serra Catarinense e Vale do Itajaí) para análise de anticorpos contra Rickettsia spp. Foram considerados positivos animais com RIFI &#8805;1:64. A soroprevalência para Rickettsia spp. observada em equinos do estado de Santa Catarina foi de 18,66%, ocorrendo reações cruzadas em todas as amostras para, no mínimo, duas das espécies testadas. Somente dois animais resultaram em um sorodiagnóstico conclusivo para R. bellii e R. rickettsii nas diluições máximas de 1:4096 e 1:512, respectivamente. Os resultados obtidos comprovam a importância do estudo da febre maculosa no estado de Santa Catarina e indicam a circulação de agentes da febre maculosa brasileira (FMB), tanto nos reservatórios como em seus vetores, e sugere que esta doença possa estar ocorrendo neste estado

Orientadora: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Jose Mauricio Barbante Duarte / Banca: Natalino Hajime Yoshinari / Resumo: Poucos relatos têm sido feitos sobre o diagnóstico da erliquiose e babesiose em felinos domésticos e selvagens brasileiros, os quais são baseados diretamente pela presença de mórulas em leucócitos e piroplasmas em eritrócitos, e indiretamente pela detecção de anticorpos anti-Ehrlichia canis. O presente estudo teve como objetivo realizar a detecção molecular de E. canis e B. canis e a presença de anticorpos da classe IgG contra esses hemoparasitas em amostras de sangue e soro, respectivamente. Neste utilizamos 72 felídeos selvagens brasileiros mantidos em cativeiro em algumas instituições e zoológicos. Pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), dezoito (25%) e cinqüenta e três (73,6%) dos 72 animais amostrados foram sororeagentes frente aos antígenos de E. canis e B. canis, respectivamente. Na PCR para E. canis, onze (15,3%) dos 72 animais amostrados foram positivos. Os amplicons foram confirmados por seqüenciamento e o DNA de E. canis encontrado mostrou grande similaridade genética com amostras de E. canis isoladas no Brasil, México, Portugal, Grécia e Taiwan, com 98% de similaridade. Nenhuma das amostras foi positiva na PCR para B. canis. Destaca-se a importância e a primeira detecção molecular de E. canis e presença de anticorpos anti-E. canis e anti-B. canis em felídeos selvagens brasileiros mantidos em cativeiro. / Abstract: Few are the reports that have been carried out on ehrlichiosis and babesiosis diagnostic in Brazilian domestic and wild felids, which are based directly on the presence of morulae in leucocytes and piroplasms in erythrocytes, and indirectly by detection of antibodies against E. canis. The aim of this study was to detect molecularly E. canis and B. canis and the presence of anti-E. canis and B. canis IgG antibodies in the blood and sera samples, respectively, from 72 Brazilian wild captive felids maintained in some instituitions and zoos. Eighteen (25.0%) and fifty-three (73.6%) out of 72 animals were seroreagent for E. canis and B. canis antigen, respectively, by IFA (Indirect Immunofluorescent Assay). Eleven (15.3%) of the 72 samples were positive for nPCR E. canis. The amplicons were confirmed by sequencing and the E. canis DNA found appeared to be closely related to E. canis samples from Brazil, Mexico, Portugal, Greece and Taiwan with 98% percent identity. None of the 72 samples were positive for B. canis by PCR. This is the first molecular detection of E. canis and presence of seroreactivity for both B. canis and E. canis in Brazilian wild captive felids. / Mestre