Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2014-12-23T18:36:23Z No. of bitstreams: 2 luise_andrade_amaral.pdf: 1436467 bytes, checksum: 25e61f8ccb471b178196973f1abe067f (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2014-12-23T18:37:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 luise_andrade_amaral.pdf: 1436467 bytes, checksum: 25e61f8ccb471b178196973f1abe067f (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2014-12-23T18:37:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 luise_andrade_amaral.pdf: 1436467 bytes, checksum: 25e61f8ccb471b178196973f1abe067f (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-23T18:37:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 luise_andrade_amaral.pdf: 1436467 bytes, checksum: 25e61f8ccb471b178196973f1abe067f (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2013 / O objetivo deste trabalho foi avaliar dois tipos de topsoil, assim como maneiras de utiliza??o dos mesmos, ou como fonte de prop?gulos, nutrientes, microorganismos, mat?ria org?nica etc., na recupera??o de diferentes ?reas degradadas. Os experimentos foram desenvolvidos em ?reas pertencentes ? empresa de minera??o de ferro Anglo American, sediada no munic?pio de Concei??o do Mato Dentro, Minas Gerais, no entanto, como a empresa ainda est? em fase de instala??o, as ?reas cedidas n?o s?o degradadas pelo processo de extra??o do min?rio, sendo uma em pilha de est?ril e a outra em pastagem degradada. O trabalho foi organizado em cap?tulos, em que o primeiro apresenta uma revis?o bibliogr?fica sobre todos os temas envolvidos no estudo. O segundo cap?tulo apresenta a avalia??o da regenera??o natural e da cobertura do solo de uma pilha de est?ril no per?odo seco e chuvoso a partir da deposi??o a lan?o de topsoil proveniente de campo rupestre ferruginoso no munic?pio de Concei??o do Mato Dentro, Minas Gerais. E o terceiro cap?tulo apresenta abordagens para o uso de topsoil na recupera??o de uma pastagem degradada. Na ?rea do cap?tulo 2, foram instaladas, sistematicamente, 26 parcelas e uma parcela controle de 1 m?, foram caracterizados os atributos f?sicos e qu?micos dos substratos com e sem topsoil. Para identifica??o flor?stica, foram realizados dois invent?rios, um em julho de 2012 (in?cio da esta??o seca) e o outro em novembro de 2012 (in?cio da esta??o chuvosa). A cobertura do solo foi estimada, visualmente, por meio da porcentagem de cobertura viva, serrapilheira e solo exposto. Foram registrados 675 indiv?duos, sendo 201 contabilizados na primeira amostragem e 474 na segunda, totalizando 24 esp?cies identificadas pertencentes a 11 fam?lias e X indeterminadas. As fam?lias com maior n?mero de esp?cies foram: Asteraceae, com 26,92%, e Melastomataceae, com 15,38%. No entanto, as fam?lias que apresentaram maior o n?mero de indiv?duos foram Poaceae (33,33%) e Verbenaceae (28,85%) na esta??o seca e Poaceae (93,03%), Portulacaceae (68,16%) e Verbenaceae (35,82%) na esta??o chuvosa. Dentre os h?bitos encontrados, as herb?ceas se destacaram com 65,63% do total, seguidas pelas arbustivas 6,22%, subarbustivas 5,48% e arb?reas 1,18%. A cobertura viva aumentou 53%, a serrapilheira e o solo exposto diminu?ram 13 e 11%, respectivamente. J? no cap?tulo 3, foram estabelecidos 14 tratamentos com tr?s repeti??es implantados em 42 parcelas de 5 x 5 m numa ?rea, anteriormente, ocupada por pastagem. O experimento foi realizado em delineamento em blocos casualizados (DBC), em esquema fatorial (3 x 2 x 2) + 2. Os tratamentos foram compostos pela combina??o das origens do topsoil (est?gio inicial e est?gio m?dio), tr?s espessuras (10, 20 e 30 cm) e aus?ncia ou presen?a de sombrite de 70% com duas testemunhas adicionais (T1 e T2). Foi realizada a caracteriza??o f?sica, qu?mica e microbiol?gica do topsoil por meio de amostras coletadas na profundidade de 0-10 cm. Determinaram-se microorganismos por meio de an?lise de DNA, cobertura do solo e a flor?stica. Os resultados mostraram que o uso do topsoil melhorou, consideravelmente, a atividade microbiana atrav?s do carbono da biomassa e da amplifica??o de DNAs para grupos de bact?rias e fungos. A cobertura vegetal desenvolvida sobre os dois tipos de topsoil apresentou um total de 2929 indiv?duos de h?bitos herb?ceo, arbustivos e subarbustivos, identificadas 33 esp?cies em 11 fam?lias e uma morfoesp?cie. A fam?lia Asteraceae foi a que apresentou o maior n?mero de esp?cies (9), seguida de Fabaceae (6), Convolvulaceae e Malvaceae (4) e Solanaceae (3). J? o levantamento flor?stico do estrato arb?reo registrou 235 indiv?duos pertencentes a 21 esp?cies e 14 fam?lias e duas esp?cies sem identifica??o. A fam?lia com maior riqueza de esp?cies foi a Fabaceae (4), seguida da Rutaceae, Solanaceae, Myrtaceae e Asteraceae, no entanto, o maior n?mero de indiv?duos foi a Siparunaceae. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncia Florestal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2013. / ABSTRACT The aim of this study was to evaluate two types of topsoil, as well as ways to use them as a source of propagules, nutrients, microorganisms, organic matter etc., The recovery of degraded areas different. The experiments were conducted in areas belonging to the mining company Anglo American iron headquartered in the municipality of Concei??o do Mato Dentro, Minas Gerais, however, as the company is still in the installation phase, the assigned areas are not degraded by the process of extraction of ore, one in waste dump and the other in degraded pasture. The work was organized in chapters where the first presents a literature review on all subjects involved in the study. The second chapter presents the evaluation of natural regeneration and soil cover of a waste dump in the dry and wet deposition from the haul topsoil from ferruginous rocky fields in the municipality of Concei??o do Mato Dentro, Minas Gerais. The third chapter presents approaches to the use of topsoil in the recovery of a degraded pasture. In the area of Chapter 2 were systematically installed 26 plots and a control plot 1 square meter, we characterized the physical and chemical properties of the substrates with and without topsoil. For floristic identification were two surveys one in July 2012 (early dry season) and the other in November 2012 (rainy season). The ground cover was visually estimated by the percentage of live coverage, litter and exposed soil. We recorded 675 individuals being recorded in sample 201 and 474 in the second sample, a total of 24 identified species belonging to 11 families and a group of indeterminate. The families with the largest number of species were Asteraceae and Melastomataceae with 26.92% to 15.38%. However, households that had higher number of individuals were Poaceae (33.33%) and Verbenaceae (28.85%) in the dry season and Poaceae (93.03%), Portulaca (68.16%) and Verbenaceae ( 35.82%) in the rainy season. Among the habits found the herbaceous stood out with 65.63% of the total followed by shrub 6.22%, 5.48% and woody subshrubs 1.18%. The live coverage increased by 53%, the litter and exposed soil decreased by 13 and 11%, respectively. Already in chapter 3 were established 14 treatments with three replications implanted in 42 plots of 5 x 5 m in an area previously occupied by grasslands. The experiment was conducted in randomized block design (RBD), factorial (3x 2 x 2) + 2. The treatments consisted of combinations of sources of topsoil (early stage and middle stage), three thicknesses (10, 20 and 30 cm) and presence or absence of shading 70% with two additional witnesses (T1 and T2). We performed the physical, chemical and microbiological through the topsoil samples collected at a depth of 0-10 cm. Microorganisms was determined through DNA analysis, ground cover, and flora The results showed that the use of topsoil considerably improved microbial activity through carbon and biomass DNA amplification for groups of bacteria and fungi. The vegetation developed on the two types of topsoil had a total of 2929 individuals habits herbaceous, shrubby and subarbustivos, 33 species in 11 families and one morphospecies. The family Asteraceae was the one with the highest number of species (9), followed by Fabaceae (6), Convolvulaceae and Malvaceae (4) and Solanaceae (3). Already a floristic inventory of the tree stratum recorded 235 individuals belonging to 21 species and 14 families and two unidentified species. The family with the highest species richness was the Fabaceae (4), followed by Rutaceae, Solanaceae, Myrtaceae and Asteraceae, however, the largest number of individuals was Siparunaceae.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-02-12T17:10:17Z No. of bitstreams: 1 TES_JULIANO_BUSETTI_COMPLETO.pdf: 4728791 bytes, checksum: 9cc2c815f6f8eda49ba630d9796f6ea8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-12T17:10:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_JULIANO_BUSETTI_COMPLETO.pdf: 4728791 bytes, checksum: 9cc2c815f6f8eda49ba630d9796f6ea8 (MD5) Previous issue date: 2015-10-27 / Regeneration of lost tissues can be obtained in a predictable way by using the Guided Bone Regeneration (GBR) concept. The development of such concept is based on the observation that to regenerate a certain type of tissue, specific cells with the ability to reconstruct such kind of tissue must repopulate the wound. GBR was applied to heal different type of bone defects and the isolation of it by using resorbable and nonresorbable membranes resulted in a predictable healing through the formation of new bone. Nowadays the GBR concept is used for the treatment of multiple clinical situations in dentistry, even with dental implants. Osteoporosis is the most common chronic bone disease and may interfere in the healing of regenerative procedures. The increase in life expectancy results in a larger number of elderly patients referred for bone regeneration and dental implants. Osteoporosis is associated with aging, menopause and chronic use of some types of drugs. Regenerative protocols must be postulated taking into account this category of patients. Limited scientific evidence suggests that osteoporosis can negatively influence bone healing as well as the osseointegration of dental implants. In addition to disease, the use of drugs for its prevention and treatment may affect healing of GBR procedures. Bisphosphonates (BP) are the most frequently used drugs for treatment and prevention of osteoporosis. The drug acts mainly in the inhibition of bone resorption by its action on osteoclasts. Among the commercially prescribed BP, zoledronic acid (ZA) is known to be the most potent of all. In the first paper of this thesis osteoporosis was induced in rats and these animals were submitted to regenerative procedures comparing samples with and without osteoporosis as well as with and without the use of ZA. To assess GBR, critical size defects (CSD) were made in the animals? calvarial bone. Microporous non-resorbable PTFE (polytetrafluorethylene) membranes were used to promote GBR in healthy, osteoporotic and osteoporotic animals treated with ZA. Forty-eight Wistar rats with 6 months of age were included in the study. Experimental osteoporosis was induced by ovariectomy (OVX) associated with hipocalcic diet in 32 animals. Sixteen OVX rats received a single dose of ZA (OZ) while the other 16 osteoporotic rats received no treatment (O). The remaining 16 animals were SHAM operated; the ovaries were exposed but not removed, being considered the control group (C). Six weeks after osteoporosis induction, each animal from the OZ group received a single dose of ZA. One week latter (7 weeks after baseline) two 5-mm CSD were performed bilaterally in the parietal bones and one of these defects was treated with two membranes, one located internally, in contact to the Dura, and the other was placed on top of the defect. GBR healing periods were 30 and 60 days for each group. Evaluation of new bone formation (NBF) was done by qualitative and quantitative histological analysis. Differences in means between groups (O, OZ and C), the use of membranes as well as the observation period (days 30 and 60) were analyzed by ANOVA for each variable. When a statistically significant difference was identified between the averages, the Bonferroni post hoc test was used. The results showed that treatment with ZA (p = 0.001) and the use of membranes (p = 0.000) significantly increased the amount of regenerated bone tissue and the presence of osteoporosis may have reduced NBF (p = 0.028). / Regenera??o de tecido ?sseo perdido pode ser alcan?ada de forma previs?vel utilizando-se o conceito de Regenera??o ?ssea Guiada (ROG). O desenvolvimento deste conceito ? baseado na observa??o de que para realizar a regenera??o de um tipo de tecido, c?lulas espec?ficas, com habilidade de regenerar este tecido especificamente, devem repopular a ferida. Quando ROG foi utilizada para regenera??o de v?rios tipos de defeitos ?sseos, o isolamento destes, com o uso de barreiras f?sicas reabsorv?veis e n?o reabsorv?veis, as membranas, resultou em uma cicatriza??o previs?vel atrav?s da forma??o de novo tecido ?sseo. Atualmente, o pr?nc?pio de ROG ? usado para o tratamento de v?rias situa??es cl?nicas na odontologia, com ou sem o uso associado de implantes dent?rios. Osteoporose ? a doen?a ?ssea cr?nica mais prevalente e pode interferir na cicatriza??o de procedimentos regenerativos. O aumento na expectativa de vida da popula??o resulta em um maior n?mero de pacientes idosos indicados para regenera??o ?ssea e implantes dent?rios. Considerando que a osteoporose est? relacionada com fatores como idade, menopausa e uso cr?nico de alguns tipos de f?rmacos, a preval?ncia desta doen?a ? alta. Protocolos regenerativos devem ser postulados levando-se em conta esta categoria de pacientes. Por?m, limitada evid?ncia cient?fica sugere que osteoporose pode influenciar negativamente a cicatriza??o ?ssea assim como a osseointegra??o de implantes dent?rios. Somado ? doen?a, o uso de drogas para preven??o e tratamento da osteoporose pode influenciar na cicatriza??o de procedimentos regenerativos. Bisfosfonatos (BF) s?o os f?rmacos mais utilizados para tratamento da osteoporose. A droga age na inibi??o da reabsor??o ?ssea atrav?s da sua a??o principalmente sobre os osteoclastos. Dentre os BF existentes comercialmente, o ?cido zoledr?nico (AZ) ? reconhecidamente o mais potente de todos. Sendo assim, o primeiro artigo desta tese buscou criar condi??es de osteoporose em ratas e, nestes animais, procedimentos regenerativos foram feitos comparando amostras com e sem osteoporose assim como com e sem o uso de AZ. Para avaliar ROG, defeitos cr?ticos (CSD) foram feitos na calv?ria dos animais. Membranas n?o reabsorv?veis microporosas de teflon foram utilizadas para ROG em animais saud?veis, osteopor?ticos e osteopor?ticos tratados com AZ. Quarenta e oito ratas Wistar, com 6 meses de idade, foram inclu?das no estudo. Osteoporose experimental foi induzida atrav?s de ovariectomia (OVX) associada ? dieta hipoc?lcica em 32 animais. Dezesseis ratos OVX receberam uma dose ?nica de AZ (OZ) enquanto as outras 16 ratas osteopor?ticas n?o receberam tratamento (O). Os demais 16 animais foram submetidos ? cirurgia controle, onde os ov?rios n?o foram removidos, sendo considerado o grupo controle (C). Seis semanas ap?s a indu??o da osteoporose, o grupo OZ recebeu uma dose ?nica de AZ. Ap?s mais uma semana (7 semanas ap?s OVX), dois CSD de 5 mm foram feitos, bilateralmente, nos ossos parietais, sendo que um destes defeitos foi tratado com duas membranas, uma instalada internamente ao defeito, sobre a dura mater, e outra na por??o externa. Os per?odos de cicatriza??o de ROG foram de 30 e 60 dias para cada grupo. Avalia??o da forma??o de tecido ?sseo (NBF) foi feita atrav?s de an?lise histol?gica qualitativa e quantitativa. Diferen?as entre as m?dias entre os grupos (O, OZ e C), o uso de membranas assim como o per?odo de observa??o (30 e 60 dias) foram analisados atrav?s de ANOVA para cada vari?vel. Quando uma diferen?a estat?stica era identificada entre as m?dias, o teste p?s hoc Bonferroni foi utilizado. Os resultados mostraram que o tratamento com AZ (p=0,001) e o uso de membranas (p=0,000) aumentaram significativamente a quantidade de tecido ?sseo regenerado e que a presen?a de osteoporose pode ter reduzido a forma??o de novo osso (p=0,028).

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 422340.pdf: 14563536 bytes, checksum: b6883cbe3401270733359041afa6d671 (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / INTRODU??O: As c?lulas mononucleares (CMs) da medula ?ssea t?m sido utilizadas em diversas patologias na tentativa de regenera??o tecidual. O objetivo deste estudo foi avaliar a ades?o de c?lulas mononucleares sobre um defeito cr?tico, com a adi??o do plasma rico em plaquetas (PRP) e/ou TGF-β1 (Fator de crescimento transformador Beta 1) e, por fim, verificar o reparo ?sseo dos s?tios defeituosos dos f?mures dos ratos. M?TODOS: Foi criado um defeito cr?tico bilateral nos f?mures de 33 ratos Wistar-Kyoto. C?lulas mononucleares da medula ?ssea, TGF-β e PRP foram adicionadas no lado tratado da les?o e soro fisiol?gico no lado contralateral. Avaliou-se a ades?o de c?lulas mononucleares sobre o defeito cr?tico e o reparo ?sseo. RESULTADOS: A presen?a e conseq?ente ades?o das c?lulas mononucleares administradas nos animais tratados n?o foram evidenciadas atrav?s de t?cnica de PCR. As an?lises radiogr?ficas evidenciam fechamento da les?o nos grupos CMs +TGF-β e CMs + PRP, por?m, n?o podemos afirmar se foi pelos tratamentos administrados ou pela pr?pria regenera??o ?ssea, quando analisadas em 6 e 10 semanas, haja visto n?o apresentarem diferen?as significativas entre os grupos. CONCLUS?ES: a) as c?lulas mononucleares da medula ?ssea n?o aderiram ao defeito cr?tico criado no f?mur do rato; b) N?o foi poss?vel avaliar a efici?ncia relativa dos tratamentos propostos no reparo ?sseo, uma vez que n?o houve diferen?as significativas na avalia??o dos grupos.

Submitted by PPG Odontologia (odontologia-pg@pucrs.br) on 2018-03-13T18:14:07Z No. of bitstreams: 1 GUILHERME_PIVATTO_LOUZADA_DIS.pdf: 4084164 bytes, checksum: 92327e9e0d6d6a7868235af68dc557f1 (MD5) / Approved for entry into archive by Tatiana Lopes (tatiana.lopes@pucrs.br) on 2018-03-21T11:56:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 GUILHERME_PIVATTO_LOUZADA_DIS.pdf: 4084164 bytes, checksum: 92327e9e0d6d6a7868235af68dc557f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-21T12:03:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GUILHERME_PIVATTO_LOUZADA_DIS.pdf: 4084164 bytes, checksum: 92327e9e0d6d6a7868235af68dc557f1 (MD5) Previous issue date: 2018-01-12 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Objective: The present study aimed to evaluate the effects of systemic ozonotherapy on bone remodeling of critical defects in the calotte of rats, with and without a xenograft presence, using an animal model of immunosuppression induced by corticosteroids. Methods: Sixty male Wistar rats (180-220 g), distributed in 8 experimental groups (N = 8 / group) were used. For corticosteroid therapy (groups II, IV, VI and VIII), the animals received dexamethasone (1 mg / kg; i.p.), one injection every 48 h, starting two weeks before the surgical procedures, extending to euthanasia. Control animals (groups I, III, V and VII) received saline solution (10 ml / kg, i.p.) at the same time intervals. After two weeks of corticosteroid therapy, the animals were anesthetized with ketamine and xylazine (100 and 10 mg / kg, i.p.) to produce two critical defects in the parietal bones of the skull cap (5 mm diameter). The defects were filled with clot (groups I, II, V and VI) or Bio-Oss x xenograft (Geistlish Biomaterials, Germany) (groups III, IV, VII and VIII). In all groups, the right defect was covered by a Bio-Gide? collagen membrane (Geistlish Biomaterials, Germany). For systemic ozono-therapy, animals of groups V, VI, VII and VIII received an application of ozone (0.7 mg / kg, i.p.) every day for 7 days, starting immediately after surgery. Four weeks after the defects were created, the animals were euthanized, and the skull caps were collected for histological evaluation of the bone neoformation with hematoxylin and eosin (HE) staining. The protocols were approved by the Ethics Committee on the Use of Animals (7691). Qualitative histological analyzes were performed based on the pattern of connective tissue formation around the defect, existence of inflammatory cells in the region, aspect of bone trabeculated, osteoblastic activity around the bone matrix and existence of graft particles in the region. Results: Groups V and VII presented greater bone areas along the surface of the defect compared to VI and VIII, because of the potential effects of ozone on bone remodeling, minimizing negative interference in the glucocorticoid bone microarray. The presence of the xenografts groups III, IV, VII, VIII, provided the covering of an extensive area of the defect, forming a more prominent immature bone matrix near the edges of the defects, with the presence of graft particles dispersed in the central area. The presence of the type I collagen membrane was shown to be an important tool in the acceleration of bone remodeling used in all experimental groups, in which, in comparison to contralateral defects in which the membrane was not used, a significant increase of bone just graduated. At the systemic level, the results of ozone treatment allowed the reduction of adverse effects of glucocorticoids, such as the reduction of the body weight of the animals and atrophy of lymphatic organs such as spleen, observed in the groups treated alone with dexamethasone. Conclusion: Given the limitations of the animal study, the use of systemic ozone associated with the xenograft stimulates bone remodeling in critical defects of immunosuppressed rats. / Objetivo: O presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da ozonioterapia sist?mica sobre o remodelamento ?sseo de defeitos cr?ticos na calota de ratos, com e sem a presen?a de xenoenxerto, utilizando um modelo animal de imunossupress?o induzido por corticoterapia. M?todos: Foram utilizados 64 ratos machos Wistar (180-220 g), distribu?dos em 8 grupos experimentais (N = 8/grupo). Para a corticoterapia (grupos II, IV, VI e VIII), os animais receberam dexametasona (1 mg/kg; i.p.), uma inje??o a cada 48 h, com in?cio duas semanas antes dos procedimentos cir?rgicos, se estendendo at? a eutan?sia. Os animais controles (grupos I, III, V e VII) receberam solu??o salina (10 ml/kg; i.p.), nos mesmos intervalos de tempo. Ap?s duas semanas do in?cio da corticoterapia, os animais foram anestesiados com quetamina e xilazina (100 e 10 mg/kg; i.p.), para a confec??o de dois defeitos cr?ticos nos ossos parietais da calota craniana (5 mm de di?metro). Os defeitos foram preenchidos com co?gulo (grupos I, II, V e VI) ou com xenoenxerto Bio-Oss? (Geistlish Biomaterials, Germany) (grupos III, IV, VII e VIII). Em todos os grupos, o defeito da direita foi coberto por uma membrana de col?geno Bio-Gide? (Geistlish Biomaterials, Germany). Para a ozonioterapia sist?mica, os animais dos grupos V, VI, VII e VIII receberam uma aplica??o de oz?nio (0,7 mg/kg; i.p.), todos os dias, durante 7 dias, iniciando imediatamente ap?s a cirurgia. Decorridos quatro semanas da cria??o dos defeitos, os animais foram eutanasiados e as calotas cranianas foram coletadas para avalia??o histol?gica da neoforma??o ?ssea, com colora??o de hematoxilina e eosina (HE). Os protocolos foram aprovados pela Comiss?o de ?tica no Uso de Animais (7691). Foram realizadas an?lises histol?gicas qualitativas baseado no aspecto do trabeculado ?sseo, atividade osteobl?stica em torno da matriz ?ssea, padr?o de forma??o de tecido conjuntivo na ?rea do defeito, e exist?ncia de part?culas de enxerto na regi?o. Resultados: Os grupos V, VII apresentaram maiores ?reas ?sseas ao longo da superf?cie do defeito, em compara??o com os VI e VIII, como consequ?ncia dos efeitos potenciais do oz?nio no remodelamento ?sseo, minimizando as interfer?ncias negativas na microarquitetura ?ssea causada pelos glicocortic?ides. A presen?a do xenoenxerto nos grupos III, IV, VII, VIII, proporcionou o recobrimento de extensa ?rea do defeito, formando matriz ?ssea imatura mais proeminente nas proximidades dos bordos dos defeitos, com presen?a de part?culas de enxerto dispersas na ?rea central. A presen?a da membrana de col?geno tipo I, se mostrou um importante recurso na acelera??o do remodelamento ?sseo utilizado em todos os grupos experimentais, na qual em compara??o com os defeitos contralaterais em que n?o foi utilizado a membrana, pode ser visto um significativo aumento de osso rec?m-formado. A n?vel sist?mico, os resultados do tratamento com oz?nio possibilitaram a diminui??o de efeitos adversos dos glicocorticoides, tais como a diminui??o do peso corporal dos animais e atrofia de ?rg?os linf?ticos como o ba?o, observados nos grupos tratados isoladamente com a dexametasona. Conclus?o: Diante das limita??es do estudo animal, a utiliza??o de oz?nio sist?mico associado ao xenoenxerto, estimula o remodelamento ?sseo em defeitos cr?ticos de ratos imunossuprimidos.

Submitted by PPG Medicina e Ci?ncias da Sa?de (medicina-pg@pucrs.br) on 2018-07-12T13:10:54Z No. of bitstreams: 1 TATIANA_ZOTTI_PIT?GORAS.pdf: 16837328 bytes, checksum: 65a299720852db7830bef151dfdba46a (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-07-17T14:10:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TATIANA_ZOTTI_PIT?GORAS.pdf: 16837328 bytes, checksum: 65a299720852db7830bef151dfdba46a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-17T14:31:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TATIANA_ZOTTI_PIT?GORAS.pdf: 16837328 bytes, checksum: 65a299720852db7830bef151dfdba46a (MD5) Previous issue date: 2018-03-28 / Introduction: Peripheral nerve transection injuries are common and occur frequently in clinical practice and are responsible for serious problems such as pain, loss of sensibility and motor, and permanent sequelae. Great advances were obtained in the treatment of peripheral nerve lesions due to greater knowledge about their physiology and the development of techniques such as microsurgery. The results of electrical stimulation are encouraging and suggest its use as an alternative treatment. Objective: To evaluate, in vivo, the use of electrostimulation (EE) associated with the tubulization technique on the repair of sciatic nerve injury in Wistar rats. Materials and Methods: Ninety male Wistar isogenic rats weighing between 200 and 300 grams were divided into three groups of 30 rats (electrostimulation associated with the tubing technique (EE), tubing suture (ST) and suture(SUT), which were subdivided into three other groups with ten animals according to the evaluation time, with three, six and nine weeks postoperative. Regeneration was assessed by ?walking track? analysis and histological analysis in which determination of the area and number of Schwann cells in the nerve samples. Results: In the functional evaluation, the group that received only one EE with 20 Hz, 3 V for one hour presented a superior result, statistically significant when compared to those stimulated more than once, however when comparing the three different types of treatment at the end of the nine weeks there was statistically significant superiority in the treated with standard suture. Regarding the number of cells, no statistically significant result was found in either group. The findings related to the nerve area, in those submitted to EE at three weeks, when compared to the other groups in the same period, were significant, and in the comparison within the same group, those with suture and tube at six weeks obtained a regenerated nerve with area in a statistically significant way. / Introdu??o: Traumatismos por transec??o de nervo perif?rico s?o comuns e ocorrem, frequentemente, na pr?tica cl?nica, sendo respons?veis por problemas graves como dor, perda de sensibilidade e motricidade, al?m de sequelas permanentes. Grandes avan?os foram obtidos no tratamento das les?es dos nervos perif?ricos, devido ao maior conhecimento sobre sua fisiologia e ao desenvolvimento de t?cnicas como a microcirurgia. Os resultados da estimula??o el?trica s?o encorajadores e sugerem seu uso como alternativa de tratamento. Objetivo: Avaliar, in vivo, o uso da eletroestimula??o (EE) associada ? t?cnica de tubuliza??o sobre o reparo de les?o de nervo ci?tico, em ratos Wistar. Materiais e m?todos: Noventa ratos isog?nicos da ra?a Wistar, machos, adultos, pesando entre 200 e 300 gramas de massa corporal, foram divididos em tr?s grupos de 30 ratos (eletroestimula??o associada ? t?cnica de tubuliza??o (EE), sutura com tubuliza??o (ST) e sutura padr?o (SUT). Os tr?s grupos foram ainda subdivididos em tr?s grupos com 10 animais, de acordo com o tempo de avalia??o (tr?s, seis e nove semanas de p?s-operat?rio). A regenera??o foi avaliada atrav?s da an?lise da marcha e an?lise histol?gica, em que houve a determina??o da ?rea e do n?mero de c?lulas de Schwann nas amostras de nervo. Resultados: Na avalia??o funcional, o grupo que recebeu somente uma EE com 20 Hz e 3V por uma hora apresentou um resultado superior se comparado com os estimulados mais de uma vez. Entretanto, ao se comparar os tr?s diferentes tipos de tratamento ao final das nove semanas, os ratos com sutura padr?o apresentaram resultados melhores. Com rela??o ao n?mero de c?lulas, n?o foi encontrado resultado estatisticamente significativo em nenhum dos grupos. Em rela??o aos achados relacionados ? ?rea do nervo, naqueles submetidos ? EE com tr?s semanas, quando comparados aos outros grupos no mesmo per?odo, houve signific?ncia, sendo que na compara??o dentro do mesmo grupo, aqueles com sutura e tubo com seis semanas, obtiveram um nervo regenerado com ?rea maior.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-07-07T13:31:06Z No. of bitstreams: 1 471664 - Texto Completo.pdf: 1025603 bytes, checksum: cc2bf12cfe7084c63f710f9fd2c36364 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-07T13:31:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 471664 - Texto Completo.pdf: 1025603 bytes, checksum: cc2bf12cfe7084c63f710f9fd2c36364 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / The repair of injured peripheral nerves is one of the most difficult tasks in neurosurgery. Among the techniques used is distinguished using the artificial tube for nerve guidance during the regeneration process. The preparation of composites based on biodegradable polymers and conducting polymers related to growth factors, have been proposed as a promising approach for improving regeneration of injured peripheral nerves. However, it should be considered that during the regeneration process is necessary to have a control over the dosage and the time of release of the drug in question not to jeopardize the recovery process.In this work were based membranes prepared PLGA (lactic-co-glycolic poly-acid), polypyrrole (PPy) and Tacrolimus as a growth factor. Was reported as a factor of the process of degradation and the relationship between the composition of membrane PLGA / PPy / Tacrolimus with the release of the drug in the first days of incubation. It was found that membranes with higher PLGA thicker, resulting in a lower weight loss and delayed release of Tacrolimus. In this work PLGA membranes containing search polypyrrole nanofibers (PPy) and Tacrolimus, as a growth factor, were prepared by the solvent evaporation method. The process of degradation and drug release were assessed 28 days of incubation. It was observed that membranes with a higher concentration of PLGA. / A repara??o de nervos perif?ricos lesionados ? uma das tarefas mais dif?ceis na neurocirurgia. Entre as t?cnicas utilizadas destaca-se a utiliza??o de tubos artificiais para orientar o nervo durante o processo de regenera??o. A prepara??o de comp?sitos baseados em pol?meros biodegrad?veis e pol?meros condutores, associados a fatores de crescimento, t?m sido proposta como uma abordagem promissora para melhorar a regenera??o de nervos perif?ricos lesionados. Por?m, deve ser considerado que durante o processo de regenera??o ? necess?rio ter um controle sobre a dosagem e o tempo de libera??o do f?rmaco em quest?o para n?o prejudicar o processo de recupera??o.Assim, neste trabalho foram preparadas membranas baseadas em PLGA (poli-?cido l?ctico-co-glic?lico), polipirrol (PPy) e Tacrolimus como fator de crescimento. Foi avaliado o processo de degrada??o e a rela??o entre a composi??o de membranas de PLGA/PPy/Tacrolimus com a libera??o do f?rmaco nos primeiros dias de incuba??o. Foi verificado que membrana com maior quantidade de PLGA, mais espessa, resultou numa menor perda massa e retardou a libera??o do tacrolimus. Neste trabalho de pesquisa membranas de PLGA contendo nanofibras de polipirrol (PPy) e Tacrolimus, como fator de crescimento, foram preparadas por meio da metodologia da evapora??o do solvente. O processo de degrada??o e a libera??o do f?rmaco foram avaliados durante 28 dias de incuba??o. Foi observado que membranas com uma maior concentra??o do PLGA.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-12-28T12:22:52Z No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-28T12:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458573 - Texto Completo.pdf: 3676265 bytes, checksum: 796a38fadce4a0d871cc457059630e2b (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: Peripheral nerve injury results in functional loss in the innervated organ, and recovery without surgical intervention is rare. Many surgical techniques can be used for nerve repair. Among these, the tubulization technique can be highlighted: this allows regenerative factors to be introduced into the chamber. Biomaterials and neurotrophic factors are indicated as a therapeutic alternative for reconstruction of peripheral nerves. Objective: To develop a nanotextured absorbable tube of poly(lactic-co-glycolic acid), and to evaluate its effect with and without tacrolimus on peripheral nerve regeneration in rats. Materials and Methods: Nanotextured absorbable PLGA tubes and films with and without incorporation of tacrolimus are developed, which were characterized in vitro and in vivo biocompatibility, biodegradability and effectiveness as technical tubing were fabricated. The in vivo experiment in which 88 rats were used, occurred in two stages: the copolymers with and without tacrolimus were implanted in 63 animals to evaluate the biocompatibility; a defect of 10mm sciatic nerve was created in the remaining 25 animals were divided into three groups according to treatment: autograft (5), tubulization with PLGA (10), tubulization with PLGA and tacrolimus (10). Walking Track and histomorphometric analyses were performed. Results: Nanotextured PLGA films, containing tacrolimus or not, differ from the negative control cell viability in vitro assays (p=0.000). The film containing tacrolimus was significantly improved, regardless of the time, when compared to the film without the drug (p=0.026). In vivo biocompatibility evaluation demonstrated a surrounding tissue to PLGA implants with acute inflammation, which was decreasing the long 90 days evaluation. It was evident less collagen deposition in both biomaterials, p ? 0.020 seven days after the implants were inserted. The PLGA tube without tacrolimus had smaller average response to the thickness of the myelin sheath compared to autograft and the tube containing tacrolimus in proximal, medial and distal segments (p<0.05). In functional assessment of the recovery of the sciatic nerve in rats, the group of PLGA without tacrolimus significantly differed from the 90 days autograft group (p= 0.0020). Conclusion: The present study suggests that the combination of tacrolimus and PLGA promoted the regeneration of rat sciatic nerves, and this can be a powerful alternative to clinical use in peripheral nerve injuries. / Introdu??o: Les?es em nervos perif?ricos resultam na perda de fun??o do ?rg?o inervado e raramente apresentam recupera??o sem a interven??o cir?rgica. Uma das formas de reparo ? a t?cnica de tubuliza??o, atrav?s da qual ? poss?vel acrescentar fatores com capacidade regenerativa. Nesse contexto, biomateriais e fatores neurotr?ficos s?o indicados como uma alternativa terap?utica para reconstru??o de nervos perif?ricos. Objetivo: Desenvolver tubo nanotexturizado absorv?vel composto por poli (?cido l?ctico-co-?cido glic?lico), e avaliar seu efeito sem e com incorpora??o de tacrolimus sobre a regenera??o de nervo perif?rico em ratos. Materiais e M?todos: Foram confeccionados tubos nanotexturizados absorv?veis de PLGA com e sem incorpora??o de tacrolimus, que foram caracterizados in vitro e in vivo quanto ? biocompatibilidade, biodegrada??o e efic?cia como t?cnica de tubuliza??o. O experimento in vivo, no qual foram utilizados 88 ratos, ocorreu em 2 etapas: os copol?meros sem e com incorpora??o de tacrolimus foram implantados em 63 animais para avaliar a biocompatibilidade; um defeito de 10mm no nervo ci?tico foi criado nos 25 animais restantes, os quais foram divididos em tr?s grupos conforme o tratamento: enxerto aut?logo (5), tubuliza??o com tubo PLGA (10) e tubuliza??o com tubo PLGA e tacrolimus (10). Foram realizados Teste de Marcha e an?lise histomorfom?trica. Resultados: As membranas de PLGA, contendo ou n?o tacrolimus, diferiram do controle negativo nos ensaios de viabilidade celular in vitro (p=0,000); a membrana contendo tacrolimus foi significativamente melhor, independentemente do tempo, quando comparada ? membrana sem o f?rmaco (p=0,026). Na avalia??o da biocompatibilidade in vivo, o tecido circunjacente aos implantes de PLGA apresentaram inflama??o aguda, que foi decrescendo ao longo dos 90 dias de avalia??o. Em 7 dias ap?s os implantes serem inseridos, evidenciou-se menor deposi??o de col?geno nos dois biomateriais quando comparado aos demais per?odos (p ? 0,020). O tubo de PLGA sem tacrolimus teve m?dia menor em rela??o ? espessura da bainha de mielina comparado ao enxerto aut?logo e ao tubo contendo tacrolimus nos segmentos proximal, medial e distal (p < 0,05). Na avalia??o funcional da recupera??o do nervo ci?tico de ratos, o grupo de PLGA sem tacrolimus diferiu significativamente do grupo enxerto aut?logo (em 90 dias | p= 0,0021), com menores ?ndices de fun??o ci?tica. Conclus?o: o presente estudo sugere que a combina??o de PLGA e tacrolimus favoreceu a regenera??o de nervo ci?tico de rato, e esta poder? ser uma potente alternativa para aplica??o cl?nica em les?es de nervos perif?ricos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 431500.pdf: 1563957 bytes, checksum: 69f1b1753af9d037782b9078a3ce2f8f (MD5) Previous issue date: 2011-03-24 / A engenharia tecidual, dispondo de c?lulas, matrizes biocompat?veis e fatores de crescimento, pode exercer um grande papel na regenera??o ?ssea. Atrav?s de biopsias de tecido vivo, pode-se obter c?lulas-tronco mesenquimais que, quando expandidas e cultivadas in vitro, s?o capazes de originar tecidos de diversos fen?tipos. Desta maneira, ? poss?vel estabelecer uma alternativa aos enxertos ?sseos, uma vez que a quantidade de material coletado ? menor quando comparada aos enxertos ?sseos convencionais. Essa pesquisa visou contribuir para a melhor escolha de uma matriz biocompat?vel, avaliando in vitro, de forma direta, a citotoxicidade do ?cido hialur?nico TEOSYAL? sobre as c?lulas da linhagem pr?-osteobl?stica de camundongos denominadas OFCOL II de forma quantitativa e qualitativa. Foram criados os seguintes grupos experimentais: A) c?lulas + ?cido hialur?nico (AH) + Plasma rico em Plaquetas com Trombina (PRP) + Hidroxiapatita (HP); B) c?lulas + AH + PRP + HP; C) c?lulas + AH + HP; D) c?lulas + HP; E) c?lulas + AH; F) c?lulas + PRP com trombina; G) c?lulas + PRP e H) c?lulas + DMEM puro com 15% de soro bovino fetal, utilizado como controle. As c?lulas OFCOL II foram semeadas 24 horas antes dos experimentos e incubadas em estufa a 370C com 5% de CO2. Ap?s atingirem a semi-conflu?ncia, as c?lulas foram expostas aos diferentes est?mulos conforme o grupo experimental por um per?odo adicional de 48 horas nas mesmas condi??es de temperatura e umidade. A viabilidade celular foi avaliada atrav?s do teste MTT e comparada ao grupo controle H. Os valores num?ricos, obtidos atrav?s de absorb?ncia, foram submetidos ? an?lise estat?stica ANOVA, complementados por TUKEY, com n?vel de signific?ncia p < 0,05 para compara??o entre todos os grupos. J? para as compara??es entre cada grupo experimental e o controle foi utilizado o Teste T. Na avalia??o da morfologia celular, foi utilizada a microscopia ?ptica em aumento de 100x e 200x. Os resultados encontrados comprovaram uma diminui??o na viabilidade celular nos grupos B (67% de viabilidade) e C (68% de viabilidade), diferindo do grupo D (99% de viabilidade). Ao comparar cada grupo experimental ao grupo controle, foi obtida uma diferen?a estat?stica (p < 0,05) para os grupos B, C e E. Portanto, foi observado, atrav?s destes resultados, uma diminui??o da viabilidade celular nos grupos com a presen?a do ?cido hialur?nico TEOSYAL?. A adi??o do PRP ao ?cido hialur?nico aumentou a 8 viabilidade celular, j? que foi obtida uma viabilidade de 79% (grupo A), por?m, insuficiente para potencializ?-la. Nas imagens, foram encontradas diferen?as morfol?gicas entre os grupos experimentais e o grupo controle. Pode-se concluir que a presen?a do ?cido hialur?nico TEOSYAL? causou diminui??o na viabilidade da linhagem celular OFCOL II.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 388585.pdf: 2402252 bytes, checksum: 61c5f710d7d456a08638eac157bdc111 (MD5) Previous issue date: 2007-01-16 / O estroma da medula ?ssea, al?m de conter uma popula??o heterog?nea de c?lulas conjuntivas, nervosas e hematopoi?ticas, mant?m uma quantidade de c?lulas com caracter?sticas de c?lulas tronco (c?lulas mesenquimais indiferenciadas). Estas possuem capacidade de se diferenciarem em qualquer c?lula de natureza conjuntiva quando estimuladas pelo organismo. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a ades?o, a prolifera??o e a diferencia??o de c?lulas mesenquimais da medula ?ssea cultivadas sobre membrana de col?geno bovino e sobre arcabou?o de ?cido poliglic?lico polil?tico (PLGA) com a adi??o do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) e/ ou da prote?na morfogen?tica ?ssea recombinante humana (rhBMP-4). As c?lulas foram coletadas da medula ?ssea da crista do osso il?aco humana e separadas por t?cnica espec?fica. As c?lulas foram cultivadas em dois suportes: membrana de col?geno e arcabou?o de PLGA, e receberam 4 tratamentos distintos: (1) com rhBMP-4, (2) com rhBMP-4 e PRP, (3) com PRP e (4) controle (somente meio de cultura). Os subgrupos foram avaliados em 6, 9, 14 e 21 dias. Foram realizadas an?lises microsc?picas das membranas e arcabou?os com as colora??es de Iodeto de Prop?dio e de Hematoxilina e Eosina. Foi feito PCR em tempo real a fim de se avaliar a express?o de osteopontina e osteocalcina e PCR convencional para osteopontina. Os resultados mostraram ades?o celular tanto na membrana de col?geno como no arcabou?o de PLGA. Sugere-se haver uma maior prolifera??o e diferencia??o celular nos grupos que foram adicionados PRP, e rhBMP-4 e PRP juntos. Nos grupos com rhBMP-4 parece haver uma maior diferencia??o celular que o grupo controle. Os dados obtidos indicam que o PRP e/ ou a presen?a de rhBMP-4 induzem ades?o, prolifera??o e diferencia??o de c?lulas da medula ?ssea em c?lulas de linhagem osteog?nica

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 419178.pdf: 2007989 bytes, checksum: be7bf028f4f59c8aac1c686ee0ecf9f8 (MD5) Previous issue date: 2009-03-04 / Introdu??o: O tratamento de les?es com perda dos nervos perif?ricos ? ainda um problema n?o resolvido. Na ?rea de pesquisa experimental, modelos animais com perdas nervosas de grande porte t?m sido usados com o objetivo de estudar o efeito de sust?ncias promotoras da regenera??o axonal adicionadas dentro de sistemas de tubuliza??o. Como medida de regenera??o nervosa, o efeito funcional ? considerado como o mais importante o ?ndice funcional da marcha, ou Sciatic Function Index (SFI), ? o m?todo mais utilizado nas les?es de nervo ci?tico em ratos; seu uso, por?m, tem sido questionado em modelos de transec??o nervosa (neurotmese). O objetivo do presente trabalho experimental ? estudar o desempenho do SFI, em um modelo de transec??o e perda de grande porte (12 mm) em nervo ci?tico de ratos, com o fim de verificar se a utiliza??o do SFI ? uma ferramenta confi?vel para diferenciar padr?es de recupera??o funcional e regenera??o nervosa ap?s perdas segmentares de grande porte em ratos. M?todos: Foram utilizadas 30 f?meas de ratos Wistar, adultos, isog?nicos, divididos em 5 grupos, nos quais se realizou uma perda de 12 mm do nervo ci?tico direito. Posteriormente, tal perda foi reparada com auto-enxerto ou com tubo de silicone preenchido com uma matriz de fibrina, onde se adicionaram c?lulas mononucleares de medula ?ssea (CMMO), fator de crescimento neural (NGF) ou uma combina??o destes. O ?ndice funcional da marcha (SFI) foi medido entre as 5? e 16? semanas ap?s a cirurgia. Resultados: Do total de ratos tratados com tubo, 21 dos 24 animais falharam em reconstituir nervo no tubo (87,5%). Os tr?s animais em que se evidenciou crescimento de nervo dentro do tubo n?o mostraram diferen?as no SFI em rela??o aos outros em que n?o cresceu nervo. Todos os animais com tubuliza??o mostraram aus?ncia de recupera??o funcional no SFI durante o seguimento. Depois de 16 semanas, a m?dia do SFI? DP dos 4 grupos com tubo foi -77,88 ? 8,3, obtendo valores significativamente piores aos obtidos com auto-enxertos, com m?dia SFI ?DP, -56,97?12,71, com valor p=0,003. Ainda que a diferen?a tenha sido significativa, o grupo com auto-enxerto apresentou uma melhoria limitada: 43% do valor considerado normal, ap?s 16 semanas de observa??o. Discuss?o: As diferen?as do SFI encontradas entre os grupos com aus?ncia de efeito (tubo) e o melhor efeito poss?vel (auto-enxerto) foi significativa (p=0,003); por?m, a baixa precis?o da estimativa e a baixa amplitude de valores encontrada entre eles determinam um m?todo com baixo poder. Conclus?es: O ?ndice funcional da marcha (SFI) n?o ? um m?todo adequado para avaliar regenera??o nervosa ap?s les?es com perda segmentar de 12 mm em nervo ci?tico de rato, por ter um baixo poder para detectar verdadeiras diferen?as.