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Aplica??o da hidroxipropilmetilcelulose na s?ntese de biomateriais para regenera??o e engenharia de tecidos e an?lise de sua toxicidade em cultura de c?lulas adiposo-derivadas humanas

Favalli, Paulo Pereira de Souza 14 October 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 418546.pdf: 3263858 bytes, checksum: 98405799e09a5518c35fdb38c15ba169 (MD5) Previous issue date: 2009-10-14 / A regenera??o e engenharia de tecidos passam pela aplica??o de c?lulas precursoras multipotentes associadas a biomateriais, os quais devem oferecer a elas um ambiente tridimensional an?logo ? matriz extracelular existente nos organismos vivos. Aprimorar um hidrogel de hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), agregando a ele duas fun??es caracter?sticas de scaffolds, isto ?, ser mold?vel ou favor?vel ? ades?o celular tridimensional, para o uso em regenera??o e engenharia de tecidos foi a inten??o do presente estudo. O desenvolvimento de uma propriedade mold?vel foi obtido baseado em experi?ncias da literatura que citam a s?ntese de HPMC com silano (HPMC-Si). Esta s?ntese permitiu que o hidrogel assumisse o aspecto de gelatina, atrav?s de autorreticula??o em fun??o do pH, mold?vel de acordo com o defeito a ser corrigido. Paralelamente, seguindo outra tend?ncia no desenvolvimento de scaffolds compostos por hidrog?is, sintetizou-se HPMC com pept?deos R-G-D-S (arginina- glicina- ?cido asp?rtico- serina), atrav?s de rea??o por esterifica??o. Isto conferiu ao hidrogel s?tios de ades?o, visando a sua intera??o com c?lulas dentro de um contexto tridimensional. A partir das s?nteses, avaliou-se a viabilidade de c?lulas aderentes adiposoderivadas humanas (CAADh), cultivadas em 2D na presen?a dos hidrog?is HPMC pura, HPMC-Si e HPMC-RGDS, para se determinar a citotoxicidade dos mesmos (ensaio MTT de acordo com a ISO 10993-5), comparando-os entre si e com grupos-controle negativo (CN) e positivo (CP), em 24, 48 e 72h. Os tr?s hidrog?is presentes nas culturas n?o interferiram na viabilidade das c?lulas (% de atividade MTT), durante os 3 momentos observados, quando comparados com o grupo CP (P< 0,001). Ao mesmo tempo, as c?lulas cultivadas em contato com os g?is demonstraram viabilidade semelhante ao grupo CN. Entretanto, ainda que sejam at?xicos em contato com culturas de c?lulas em monocamada, testes de citotoxicidade em 3D devem confirmar a efetividade dos hidrog?is aprimorados HPMC-Si e HPMC-RGDS como scaffolds aplic?veis em regenera??o e engenharia de tecidos.
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Efeito do plasma rico em plaquetas e da eritropoietina na regenera??o do nervo ci?tico de ratos wistar

Colom?, Lucas Marques 29 August 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 443023.pdf: 2231703 bytes, checksum: 8fa714244d8e44469edc5dc83e9b3038 (MD5) Previous issue date: 2012-08-29 / Injuries to the peripheral nervous system present a challenge for regenerative medicine. The study investigated the effects of platelet-rich plasma (PRP) and erythropoietin (EPO), alone or in combination, in the regeneration of peripheral nerve in rats. The work was developed in three phases using 70 rats. The first phase, evaluated the platelet concentration and growth factors production/release (TGF-&#946;, PDGF, VEGF and &#945;&#946;) in three protocols for obtaining PRP (A, B and C) obtained by aortic or cardiac puncture. Cardiac puncture in association with A protocol showed the best results. In the second stage, using best results methods at the first stage, was produced two PRP concentrations (1,000,000 and 2,000,000 platelets.&#956;l-1; PRP1 and PRP2, respectively) for applying in the rats sciatic nerve. Comparison of concentrations with autologous nerve graft (ANG) and saline solution (SS) groups showed benefits in the use of PRP2. In the third phase (same experimental model) were added PRP2 + EPO and EPO groups. The animals of phases 1 and 2 were evaluated by walking track test and histomorphometric analysis (toluidine blue) and showed benefits in autologous nerve graft (ANG) with respect to tubulization (independent of regenerative factor). For tubularized animals, the study showed advantages for PRP and EPO simultaneous use followed by EPO group. Finally, it was observed that PRP 2,000,000 platelets.&#956;l-1 has beneficial effects when compared to PRP 1,000,000 platelets.&#956;l-1 for peripheral neuroregeneration rats. / Les?es ao sistema nervoso perif?rico representam um desafio para a medicina regenerativa. O estudo objetivou conhecer os efeitos do plasma rico em plaquetas (PRP) e da eritropoietina (EPO), isolados ou combinados, na regenera??o do nervo perif?rico de ratos. O trabalho desenvolveu-se em tr?s etapas utilizando 70 ratos. A primeira fase avaliou a concentra??o plaquet?ria e produ??o/libera??o de fatores de crescimento (TGF-&#946;, PDGF-&#945;&#946; e VEGF) em tr?s protocolos de obten??o do PRP (A, B e C) obtidos por pun??o a?rtica ou card?aca. A pun??o card?aca em associa??o com protocolo A gerou os melhores resultados. Na segunda fase, usando os m?todos com melhores resultados na primeira etapa, produziram-se duas concentra??es de PRP (1.000.000 e 2.000.000 plaquetas. &#956;l-1; PRP1 e PRP2, respectivamente) para aplica??o no nervo ci?tico tubulizado de ratos. Compara??o das concentra??es entre si e com grupos auto enxerto (AE) e solu??o fisiol?gica (SF) evidenciaram benef?cios no uso de PRP2. Na terceira fase (mesmo modelo experimental), foram adicionados os grupos EPO e EPO+PRP2. Os animais das fases 1 e 2 foram avaliados por teste de marcha e histomorfometria (azul de toluidina) e demonstraram que o auto enxerto apresentou benef?cios sobre a tubuliza??o (independente do fator regenerativo utilizado). Para os animais tubulizados, o estudo demostrou melhores resultados para o uso simult?neo de PRP e EPO, seguido do grupo EPO. Finalizando, observou-se que a aplica??o de PRP na concentra??o de 2.000.000 plaquetas.&#956;l-1 em compara??o com 1.000.000 platelets.&#956;l- 1 apresentou vantagens para neuroregenera??o perif?rica de ratos.
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Otimiza??o de protocolos para a propaga??o in vitro de g?rbera (Gerbera jamesonii) / Optimization of protocols for in vitro propagation in gerbera (Gerbera jamesonii)

Sousa, Cleiton Mateus 20 January 2005 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T14:58:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005-Cleiton Mateus Sousa.pdf: 885284 bytes, checksum: 42cf8890c05e973310a56f9182c0e1e0 (MD5) Previous issue date: 2005-01-20 / Gerberas are cut flowers with large color diversity and good durability. The use of growth regulators on in vitro propagation is related to the capacity to induce proliferation of sprouts and differentiation of roots. However, citokinins in excess can induce the formation of abnormal plant, with reduced acclimatization potential. The mineral and organic composition of media culture plays an important role during the process. The objective of this dissertation was to adjust protocols for in vitro propagation of Gerbera jamesonii. The following aspects were evaluated: (i) the effect of the inflorescence developmental stage on the performance of in vitro culture initiated from chapters (ii) gerbera varieties (iii) growth regulator balance and (iv) the effect of salt concentration of MS medium on the proliferation of in vitro sprouting and rooting and acclimatization of three varieties of gerbera. For variety Phanter, the regeneration of explants prepared from inflorescences depended on its stage of development. Explants prepared from young chapters showed better results. The concentration and source of citokinin, and the concentration of salts in MS medium influenced the proliferation of sprouts in explants of variety Ornela. BAP was more efficient than kinetin on proliferation of sprouts. Concentrations above 2.0 mg.L-1 of BAP induced the formation of plants with undesirable characteristics during in vitro multiplication, while this was not observed in the presence of the same kinetin in larger concentration (4.0 mg.L-1). The combinations of 0.5 mg.L-1 BAP with the different levels of IBA showed the best results for multiplication and production of sprouts, with potential for acclimatizing variety Ornela. The presence of BAP inhibited the differentiation of roots, while the same was not observed in largest concentration of kinetin. The concentration of salts below 50% limited the proliferation of sprouts in variety Ornela. The varieties Capuccino, Mirage and Ornela, when maintained in the same balance of BAP and IBA, showed divergences in results for number of sprouts; when acclimatized, they presented high survival rates. Difficulties on in vitro gerbera propagation were mostly found on the regeneration phase and on the formation of sprouts in explants prepared from chapters. For the other phases, no major difficulties were detected. / As g?rberas s?o flores de corte que apresentam diversidade na colora??o e boa durabilidade. O uso de fitorreguladores na propaga??o de plantas in vitro esta relacionado com a capacidade de induzir a prolifera??o de brotos e a diferencia??o de ra?zes. No entanto, citocininas em excesso podem induzir a forma??o de pl?ntulas anormais e com baixo potencial para serem aclimatadas. Al?m disso, a composi??o mineral e org?nica do meio de cultura apresenta importante papel durante o processo. O objetivo deste trabalho foi ajustar protocolos para a propaga??o massal in vitro de variedades de Gerbera jamesonii. Avaliou-se: o efeito do est?dio de desenvolvimento de infloresc?ncias na implanta??o de culturas in vitro a partir de cap?tulos; variedades; balan?os de fitorreguladores; concentra??o dos sais do meio MS na prolifera??o de brotos e enraizamento in vitro e a aclimatiza??o de tr?s variedades de g?rbera. A regenera??o de explantes preparados a partir de infloresc?ncias depende do est?dio de desenvolvimento das mesmas. Explantes preparados a partir de cap?tulos jovens apresentaram melhores resultados. A prolifera??o de brotos em explantes de g?rbera, variedade Ornela foi influenciada tanto pela concentra??o quanto pela fonte de citocinina, assim como pela concentra??o dos sais do meio MS. A mol?cula BAP mostrou ser mais eficiente que kinetina para induzir a prolifera??o de brotos. BAP acima de 2,0 mg.L-1 induziu a forma??o de plantas com caracter?sticas indesej?veis durante a multiplica??o in vitro, enquanto isto n?o foi observado mesmo na maior concentra??o de kinetina (4,0 mg.L-1). As combina??es de 0,5 mg.L-1 de BAP com os diferentes n?veis de AIB (0; 0,05 e 0,5 mg.L-1) apresentaram os melhores resultados para a multiplica??o e produ??o de brotos in vitro com potencial para serem aclimatados da variedade Ornela. Somente o BAP inibiu a diferencia??o de ra?zes. A concentra??o dos sais abaixo de 50% limitou a prolifera??o de brotos na variedade Ornela. As variedades Capuccino Mirage e Ornela, quando mantidas no mesmo balan?o de BAP e AIB apresentaram resultados divergentes quanto ? prolifera??o de brotos, e na aclimatiza??o apresentaram alta taxa de sobreviv?ncia. Na propaga??o in vitro de g?rbera, somente na fase de implanta??o das culturas in vitro que verificou-se dificuldade de regenera??o e na forma??o de brotos em explantes preparados a partir de cap?tulos. Nas demais fases, as variedades estudadas apresentaram facilidade e resultados bastante promissores.
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Avalia??o da recupera??o natural de ?reas degradadas pelo garimpo de diamante no Vale do Rio S?o Jos? em Len??is/BA

Silva, Edmilson Alves da 27 March 2013 (has links)
Submitted by Verena Bastos (verena@uefs.br) on 2015-09-16T22:20:18Z No. of bitstreams: 1 Disserta??o finalpdf.pdf: 1860889 bytes, checksum: ee87b81fe0a21430df0bad836a2fe39f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-09-16T22:20:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disserta??o finalpdf.pdf: 1860889 bytes, checksum: ee87b81fe0a21430df0bad836a2fe39f (MD5) Previous issue date: 2013-03-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The present work examined the floristic compositions and structures, and the similarities between seven areas degraded by mechanized diamond mining along the S?o Jos? River Valley (12o34? to 12?36? S - 41o22? to 41?35? W), in the municipality of Len??is, Bahia State, Brazil, after 23 years of abandonment and natural regeneration and compared them to an area of intact gallery forest along the same river. The collections were made between the months of April and December/2011 along 1 x 100 m transects established in each of the seven areas, applying the point method. A previously compiled species list was used to compare the seven recovering areas with an intact riverine forest site. A total of 62 species were encountered, distributed among 53 genera and 26 families. The families demonstrating the greatest species richness were Leguminosae (16), Poaceae (11), Cyperaceae (7), Melastomataceae (6), Malvaceae (4), and Lycopodiaceae (2). The sum of the richnesses of these families represented fully 74% of the total number of species recorded in the present study. In terms of the plant habits, 11 species (15%) were arboreal, 17 (26%) shrubs, 28 (42%) herbaceous, 07(11%) sub-shrubs, and 04 (6%) vines. The species demonstrating the greatest Relative Vigor and Cover were Sebastiania corniculata, Aristida setifolia, and Homolepis aturensis. The slow natural regeneration of these areas was apparently due to the modification of the soil structure by the mechanized mining, as judged by the greater similarity (although low) between the areas regenerating for the longest periods and the intact gallery forest site along the same river as performing solo one little more structured.c / Este trabalho verificou a composi??o flor?stica, estrutura e similaridade entre sete ?reas degradadas pelo garimpo de diamantes no vale do rio S?o Jos? (12o34? e 12?36? S - 41o22? e 41?35? W), munic?pio de Len??is, Bahia, ap?s decorridos 13 anos de registros sobre a regenera??o natural, e comparou com a floresta ciliar do mesmo rio. As coletas foram realizadas entre abril a dezembro de 2011 ao longo de um transecto de 1m x 100m em cada uma das ?reas onde foi aplicado o m?todo de pontos em cada uma das ?reas. Para comparar com o remanescente florestal do entorno, foi usada a lista de esp?cies da floresta ciliar elaborada previamente. Foram amostradas 62 esp?cies distribu?das em 53 g?neros e 26 fam?lias. As fam?lias com maior riqueza de esp?cies s?o Leguminosae (16), Poaceae (11), Cyperaceae (7), Melastomataceae (6), Malvaceae (4), Lycopodiaceae (2). O somat?rio da riqueza destas fam?lias representa 74% do total das esp?cies levantadas neste estudo. Em termos de h?bito foram encontradas 11 (15%) esp?cies arb?reas, 17 (26%) esp?cies arbustivas, 28 (42%) herb?ceas, 07(11%) subarbustivas e 04 (6%) trepadeiras. As esp?cies que mais se destacaram por Vigor Relativo e Cobertura foram Sebastiania corniculata, Aristida setifolia e Homolepis aturensis. A lenta regenera??o natural das ?reas se deve ?s m?s condi??o do solo que apresenta-se modificado pelas a??es do garimpo, tendo sido evidenciada uma maior similaridade, embora baixa, entre as ?reas de maior tempo de abandono que apresentam solo um pouca mais estruturado e o remanescente florestal ciliar do rio S?o Jos?.
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A biotecnologia vegetal como alternativa para a cotonicultura familiar sustent?vel

Silva, Kl?ptura de Oliveira e 23 August 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T15:55:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KlepturaOS.pdf: 1910860 bytes, checksum: 716bf4a5a483f5ccf48509ed1dae3714 (MD5) Previous issue date: 2006-08-23 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / This paper aims to describe the familiar cotton culture in the districts of Tangar? and Triunfo Potiguar, located in the state of Rio Grande do Norte. It relates specific problems that small cotton agriculturists face in the cotton production and sale as well as their perception in relation to public policies that have been put into practice in these districts. The research revealed soils with potentiality for the cotton culture, but that are not being cultivated for anything else but subsistence, not being able to become productive, specifically through the cotton culture. That activity should be practiced so that it preserves the environment and the familiar farmers themselves, since it was verified they are constant1y exposed to health problems due to insecticides use. In what refers to fomentation policies it was observed that bureaucracy delays the liberation of the money destined to production, seeds delivery and other actions related to production and commercialization. Some procedures such as information and training about productivity development and attention with the environrnent and infrastructure are recommended. The results indicate lack of investments, rural credit and technical help, main1y in Triunfo Potiguar. There is unanimity, from the rural farmers of that district in what refers to the desire of improving the production and remaining in that activity. In this sense, the contribution of this research for the most appropriate culture production can be materialized through the technique of tissue's culture, aimed at obtaining plants that are resistant to diseases. The data indicated that the hormonal supplementations used induced regenerative calluses making in vitro morphogenesis possible in alI tested varieties. The use of the activated coal antioxidant was efficient, reducing oxidation, however not suppressing it. The results lead to an opportunity for the familiar t?rmers from Rio Grande do Norte enlarge the cotton culture, because to obtain plants that are resistant to diseases implies in insecticides reduction, propitiating smaller impact to the atmosphere and less cost / Este trabalho tem como objeto de estudo a cotonicultura familiar nos Munic?pios de Tangar? e Triunfo Potiguar, localizados no Estado do Rio Grande do Norte. Discute problemas espec?ficos que os pequenos cotonicultores enfrentam para a produ??o e a venda do algod?o bem como sua percep??o quanto ?s pol?ticas p?blicas que v?m sendo postas em pr?tica nos munic?pios. A pesquisa revelou ?reas cultiv?veis com potencialidade para a cotonicultura, mas que, n?o est?o sendo cultivados para al?m da subsist?ncia, deixando de se tomarem produtivos, especificamente atrav?s da cotonicultura. Essa atividade deve ser praticada de forma que preserve o meio ambiente e os pr?prios agricultores familiares, pois se constatou estarem estes expostos permanentemente a problemas de sa?de decorrentes do uso de agrot?xicos. No que diz respeito ?s pol?ticas de fomento observou-se que, a burocracia dificulta a libera??o, em tempo ?gil, dos cr?ditos destinados ? produ??o, ? libera??o de sementes e a outras a??es voltadas para a produ??o e a comercializa??o. Recomendam-se alguns procedimentos, como informa??o e capacita??o voltadas para o desenvolvimento da produtividade e do cuidado com o meio ambiente, e aten??o para a infra-estrutura. Os resultados indicam car?ncia de investimentos, de cr?dito rural e de assist?ncia t?cnica, principalmente em Triunfo Potiguar. H? unanimidade, por parte dos agricultores rurais desse munic?pio, quanto ao desejo de melhorar a produ??o e permanecer nessa atividade. Nesse sentido, a contribui??o da pesquisa para a produ??o mais adequada de cultivares pode ser materializada atrav?s das t?cnicas de cultura de tecidos, com o objetivo de se obterem plantas resistentes a doen?as. Os dados indicam que as suplementa??es hormonais utilizadas induziram calos regenerativos possibilitando a morfog?nese in vitro em todas as variedades testadas. O uso do antioxidante carv?o ativado mostrou-se eficiente, reduzindo a oxida??o, por?m n?o a suprimiu. Os resultados ensejam uma oportunidade para os agricultores familiares do Rio Grande do Norte ampliarem a cotonicultura, pois a obten??o de plantas resistentes a doen?as implica redu??o no uso de agrot?xico, propiciando menor impacto ao ambiente e menos custo
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Efeito do canabidiol no processo cicatricial de defeitos ?sseos cr?ticos mecanicamente induzidos em calota craniana de ratos : avalia??o cl?nica e histol?gica

Noronha, Rafael de Ara?jo 28 March 2018 (has links)
Submitted by PPG Odontologia (odontologia-pg@pucrs.br) on 2018-06-27T16:07:31Z No. of bitstreams: 1 RAFAEL_DE_ARAUJO_NORONHA_DIS.pdf: 673617 bytes, checksum: 0e6162f0003c8204cabce0b4b4b0a140 (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-07-04T14:34:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RAFAEL_DE_ARAUJO_NORONHA_DIS.pdf: 673617 bytes, checksum: 0e6162f0003c8204cabce0b4b4b0a140 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T14:52:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RAFAEL_DE_ARAUJO_NORONHA_DIS.pdf: 673617 bytes, checksum: 0e6162f0003c8204cabce0b4b4b0a140 (MD5) Previous issue date: 2018-03-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Maxillofacial fractures of traumatic origin have a high incidence in the world population. These can be treated in different ways, ranging from conservative methods to widely invasive procedures. Among the multiple possibilities of treatment of this type of disease is the use of herbal medicines, where cannabidiol (CBD) is inserted. This is the main non-psychomimetic component of Cannabis sativa (Can-ns) and plays potent anti-inflammatory, antioxidant and analgesic effects in a variety of pathological conditions. The present dissertation is structured in the form of 2 scientific papers. The first one consists of a literature review, whose objective was to evaluate the mechanisms of action of CBD that may be involved in bone repair. The results of this study suggest that CBD is unable substance of interfering in the healing process of bone defects from its anti-inflammatory and antioxidant potential. The second is an experiment in an animal model, using 64 Wistar rats, divided into two groups (test with CBD and control). At the periods of two, four, six and eight weeks, they were evaluated clinically and histologically in the cicatricial process of mechanically induced bone defects in the skull cap of rats. It was found that the CBD exerted a beneficial effect in the fourth week after treatment where an increase in the mean of neoformed bone within the defect was observed, however, no statistically significant difference was observed in the healing process of the bone defects at the times analyzed. These results suggest the need to deepen the theme, aiming at a better understanding of the possible effects of CBD on bone metabolism and repair. / As fraturas ?sseas bucofaciais de origem traum?tica possuem uma elevada incid?ncia na popula??o mundial. Estas podem ser tratadas de distintas formas, que variam desde m?todos conservadores at? procedimentos amplamente invasivos. Dentre as m?ltiplas possibilidades de tratamento deste tipo de enfermidade, est? a utiliza??o de fitoter?picos, onde insere-se o canabidiol (CBD). Esse ? o principal componente n?o-psicomim?tico da Cannabis sativa (Can-ns) e desempenha potentes efeitos anti-inflamat?rios, antioxidantes e analg?sicos em diversas condi??es patol?gicas. A presente disserta??o est? estruturada na forma de 2 artigos cient?ficos. No primeiro foi realizada uma revis?o de literatura, cujo objetivo foi avaliar os mecanismos de a??o do CBD que possam estar envolvidos no reparo ?sseo. Os resultados deste estudo sugerem que o CBD ? uma subst?ncia capaz de interferir no processo cicatricial de defeitos ?sseos a partir do seu potencial antiinflamat?rio. O segundo trata de um experimento desenvolvido em modelo animal, utilizando 64 ratos Wistar, divididos randomicamente em 2 grupos (teste com CBD e controle). Avaliou-se cl?nica e histologicamente o efeito da administra??o intraperitoneal do CBD, na dose de 10 mg/kg/dia, por duas, 4, 6 e 8 semanas, no processo cicatricial de defeitos ?sseos mecanicamente induzidos em calota craniana de ratos. Constatou-se que o CDB exerceu um efeito ben?fico na quarta semana p?s tratamento onde observou-se um aumento na m?dia de osso neoformado no interior do defeito. Contudo n?o foi observada diferen?a estatisticamente significativa no processo cicatricial dos defeitos ?sseos nos tempos analisados. Estes resultados sugerem a necessidade de aprofundar o tema, visando uma melhor compreens?o sobre poss?veis efeitos do uso do CBD no metabolismo e reparo ?sseo.
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O uso de c?lulas-tronco adiposas e da t?cnica da tubuliza??o na regenera??o do nervo facial em ratos wistar ap?s transec??o com perda de subst?ncia

Poeta, Josiel Schilling 28 March 2018 (has links)
Submitted by PPG Medicina e Ci?ncias da Sa?de (medicina-pg@pucrs.br) on 2018-07-13T12:12:39Z No. of bitstreams: 1 JOSIEL_SCHILLING_POETA.pdf: 5065733 bytes, checksum: 08aa2054169f20b8e7aff32b78b58210 (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-07-18T14:22:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JOSIEL_SCHILLING_POETA.pdf: 5065733 bytes, checksum: 08aa2054169f20b8e7aff32b78b58210 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-18T14:30:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JOSIEL_SCHILLING_POETA.pdf: 5065733 bytes, checksum: 08aa2054169f20b8e7aff32b78b58210 (MD5) Previous issue date: 2018-03-28 / Introduction: Lesions affecting the peripheral nerves are quite common and can cause devastating damage to their lives of individuals, leading to important functional changes such as pain, morbidity and disability as well as, affecting their psychological condition. When the VII pair of cranial nerve is affected, patients may develop Peripheral Facial Paralysis (PFP), which include aesthetic, functional and emotional damages, as well as pain and discomfort. Treatment for lesions involving the peripheral nerves still presents limitations, since post-surgical results remain uncertain and unsatisfactory, especially in cases where nerve damage causes loss of substance. The use of autologous nerve grafting remains the "gold standard" of treatment; although it does present some important disadvantages. Trying to overcome all the difficulties and limitations, regenerative medicine together with tissue engineering have united their efforts with the purpose of improving the surgical techniques in the repair of this type of injury. Thus, in this context, many researches are being carried out with the aim of developing bioabsorbable materials associated with neurotrophic factors that can be used by the tubulization technique in substitution of the "gold standard". Objective: To evaluate the regeneration of the facial nerve of wistar rats submitted to a total transection of the nerve with loss of substance through the use of the tubulization technique with a PLGA / PCL polymer and autologous adipose stem cells. Material and Methods: 72 wistar rats were randomly divided into 3 groups (A, B, C) and submitted to a surgical procedure of injury (total transection with loss of substance) in the mandibular branch of the facial nerve, forming a gap of 6 mm. Immediately after the injury, the surgical procedure of nerve repair was performed according to the group to which they belonged. The rats of group A (control) were treated through the autologous nerve graft, with suture in the stumps. Group B rats were treated by the tubulization technique using a PLGA / PCL absorbable polymer sutured between the stents. The rats of group C were also treated by the tubulization technique, with the same polymer, but containing a quantity of autologous adipose stem cells in their interior. After 30, 60 and 90 days, the animals were euthanized for histological analysis. Results: The presence of the PLGA / PCL polymer, used by the tubulization technique, appears to have stimulated the formation of fibrosis in all evaluated groups. In 30 days there was no difference in the regeneration of nerve fibers between the three methods used to treat the facial nerve lesion of the rats used in this experiment. The use of stem cells associated with the PLGA/PCL tube presented better results than the "gold standard" in only 60 days. At 90 days, the "gold standard" and the technique of tubulization, without the use of stem cells, had the same results in nerve regeneration, and still, they were superior in relation to tubulization with the use of stem cells. / Introdu??o: As les?es que acometem os nervos perif?ricos s?o bastante comuns e podem causar danos devastadores na vida das pessoas, provocando altera??es funcionais importantes como, por exemplo, dor, morbidade e incapacidade, al?m de afetar a sua condi??o psicol?gica. Quando o s?timo (VII) par de nervos cranianos ? afetado, os pacientes podem desenvolver quadros de Paralisia Facial Perif?rica (PFP), que incluem preju?zos est?ticos, funcionais e emocionais, al?m de dor e desconforto. O tratamento para as les?es que envolvem os nervos perif?ricos ainda apresenta limita??es, visto que os resultados p?s-cir?rgicos continuam incertos e insatisfat?rios, principalmente nos casos em que a les?o ao nervo provoca perda de subst?ncia. O uso do enxerto aut?logo de nervo continua sendo o ?padr?o ouro? de tratamento, embora apresente algumas desvantagens importantes. Tentando suprir todas as dificuldades e limita??es, a medicina regenerativa, juntamente com a engenharia tecidual, t?m unido seus esfor?os com a finalidade de melhorar as t?cnicas cir?rgicas no reparo desse tipo de les?o. Nesse contexto, muitas pesquisas est?o sendo realizadas com o intuito de desenvolver materiais bioabsorv?veis, associados a fatores neurotr?ficos, que possam ser utilizados pela t?cnica da tubuliza??o em substitui??o ao ?padr?o ouro?. Objetivo: Avaliar a regenera??o do nervo facial de ratos wistar submetidos a uma transec??o total com perda de subst?ncia atrav?s do emprego da t?cnica da tubuliza??o com um pol?mero de PLGA/PCL e c?lulas tronco adiposas aut?logas. Material e M?todos: 72 ratos wistar foram randomicamente divididos em tr?s grupos (A, B, C) e submetidos a um procedimento cir?rgico de les?o (transec??o total com perda de subst?ncia) no ramo mandibular do nervo facial, formando um ?gap? de 6mm. Imediatamente ap?s a les?o, foi realizado o procedimento cir?rgico de reparo do nervo de acordo com o grupo ao qual pertenciam. Os ratos do grupo A (controle) foram tratados atrav?s do enxerto aut?logo de nervo, com sutura nos cotos. Os ratos do grupo B foram tratados pela t?cnica da tubuliza??o utilizando um pol?mero absorv?vel de PLGA/PCL suturado entres os cotos. J? os ratos do grupo C tamb?m foram tratados pela t?cnica da tubuliza??o, com o mesmo pol?mero, por?m contendo uma quantidade de c?lulas-tronco adiposas aut?logas em seu interior. Ao fim de trinta, sessenta e noventa dias, os animais foram eutanasiados para an?lise histol?gica. Resultados: A presen?a do pol?mero de PLGA/PCL, usado pela t?cnica da tubuliza??o, parece ter estimulado a forma??o de fibrose em todos os tempos avaliados. Em trinta dias n?o ocorreu nenhuma diferen?a na regenera??o das fibras nervosas entre os tr?s m?todos utilizados para o tratamento da les?o no nervo facial das cobaias neste experimento. O uso de c?lulas tronco, associadas ao tubo de PLGA/PCL, apresentou melhores resultados em rela??o ao ?padr?o ouro? somente em sessenta dias. Aos noventa dias, o ?padr?o ouro? e a t?cnica da tubuliza??o, sem a utiliza??o das c?lulas-tronco, tiveram os mesmos resultados na regenera??o do nervo e, ainda, se mostraram superiores em rela??o ? tubuliza??o com o uso de c?lulas-tronco.
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Avalia??o histol?gica, tomogr?fica e f?sica do efeito da LLLT na distra??o osteog?nica em mand?bulas de coelhos

Kreisner, Paulo Eduardo 30 September 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423502.pdf: 5239440 bytes, checksum: 32e82b4251252353febf2ca10f052662 (MD5) Previous issue date: 2009-09-30 / Esta pesquisa teve como objetivo avaliar, por m?todos histol?gicos, tomogr?ficos e f?sicos, o efeito do laser de baixa pot?ncia (LLLT 830 nm) no osso neoformado em mand?bulas de coelhos submetidas ? fratura, sem ou com distra??o osteog?nica (DO). Foram utilizados 10 coelhos para as an?lises histol?gicas (quatro para o grupo controle e seis para o experimental) al?m de cinco coelhos para as an?lises tomogr?ficas e f?sicas (um n?ofraturado, n?o-distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, n?o-distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, n?o-distra?do e com irradia??o laser; um fraturado, distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, distra?do e com irradia??o laser). Para os coelhos que sofreram alongamento ?sseo por DO foi adotado o seguinte protocolo: lat?ncia tr?s dias, ativa??o sete dias 0,7mm/d, e consolida??o 10 dias. Para os animais irradiados, utilizou-se o laser infravermelho (GaAl)As (J=830 nm, 40 mW) com o seguinte protocolo: dose pontual de 10 J/cm2, diretamente sobre o s?tio ?sseo submetido ? fratura e/ou DO, no per?odo de consolida??o ?ssea, respeitando-se intervalos de 48 horas. O percentual do osso neoformado foi maior no grupo com laser (57,89%) do que no controle (46,75%), p=0,006, conforme observado na an?lise histol?gica. A an?lise tomogr?fica revelou aumento da densidade, medida em Unidades Hounsfield (HU), dos ossos fraturados que foram irradiados com laser. Com rela??o ?s propriedades f?sicas, pareceu n?o haver grandes diferen?as entre os grupos que sofreram fratura. Nos ossos submetidos ? DO, o laser n?o promoveu altera??o da nanodureza, mas modificou os valores do m?dulo de elasticidade, na amostra estudada.
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Horm?nio do crescimento no processo de osseointegra??o de implantes de tit?nio: estudo experimental e revis?o de literatura / Growth hormone on the osseointegration process of titanium implants: an experimental study and review of literature

Abreu, Marcelo Emir Requia 26 October 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 435511.pdf: 4163986 bytes, checksum: 37629882e85d83ed66d26ed9bed14b82 (MD5) Previous issue date: 2011-10-26 / In order to accelerate and improve the quality of the osseointegration process has recently been given emphasis to growth factors. Thus, this thesis was aimed to evaluate the use of growth hormone (GH) on osseointegration of titanium implants. This thesis is composed of two papers, the first chapter is a review of literature on the use of growth factors, and, in particular GH in the process of bone repair. The second chapter is an experimental study to evaluate the topical use of rhGH in the osseointegration of nanotexturized titanium implants inserted in the tibia of rabbits. We used 14 animals randomly divided into rhGH-treated group and control group. In the rhGH-treated group was administered 1 IU of rhGH in surgical defect immediately before the placement of each implant. In the control group was not used rhGH. Each animal received two implants in the left tibia. The animals were sacrificed at 14 and 42 days after surgery. The peri-implant regions were avaluated by transmission and reflection on optical microscopy (OM), to pull out biomechanical testing of implants and scanning electron microscopy (SEM). In all analyzes the rhGH-treated groups showed better performance than the control groups, especially at 14 days. MO at 14 days in the rhGH-treated group have histological characteristics of proliferative repair phase with new bone formation and also marked cortical reaction from the endosteum and periosteum and at 42 days, the bone tissue has a lamellar appearance. The control group at 14 days also has characteristics of the inflammatory and moderate proliferative new bone formation, and with 42 days the new bone does not have lamellar characteristics. In the pull-out testing of the rhGH-treated group showed tension of 59.26N/cm2 and 29.69 N/cm2 at 14 and 42 days respectively. The control group showed tension of 33.88 N/cm2 and 25.99 N/cm2 respectively. The implants analyzed in the SEM showed in the rhGH-treated group at 14 days greater amount of bone attached, but at 42 days there were no differences between groups. The findings in this experiment corroborate the literature, which observed that rhGH increases the speed and amount of newly peri-implanted bone, especially in the early stages of bone repair. Thus, this thesis concludes that topical application of rhGH in the region peri-implant area induces new bone formation. / Com o intuito de acelerar e melhorar a qualidade do processo de osseointegra??o, recentemente tem sido dado ?nfase aos fatores de crescimento. Logo, foi objetivo dessa Tese avaliar o emprego do horm?nio do crescimento (GH) na osseointegra??o de implantes de tit?nio. Esse trabalho ? composto de dois artigos, o primeiro artigo ? uma revis?o de literatura sobre o emprego dos fatores de crescimento, e, em especial o GH, no processo de reparo do tecido ?sseo. O segundo artigo ? um estudo experimental no qual se avaliou o uso t?pico do rhGH no processo de osseointegra??o de implantes de tit?nio nanotexturizados inseridos na t?bia de coelhos. Foram utilizados 14 animais divididos aleatoriamente em grupo teste e controle. No grupo teste foi aplicado 1 IU de rhGH no defeito cir?rgico imediatamente antes da coloca??o de cada implante. No grupo controle n?o foi aplicado o rhGH. Cada animal recebeu 2 implantes na t?bia esquerda. Os animais foram sacrificados em 14 e 42 dias depois da cirurgia. As regi?es periimplantares foram submetidas ? microscopia ?ptica (MO) de transmiss?o e de reflex?o, e os implantes ao ensaio biomec?nico de pull out e a microscopia eletr?nica de varredura (MEV). Em todas as an?lises realizadas o grupo teste apresentou desempenho superior ao controle, principalmente aos 14 dias. Na MO aos 14 dias o grupo teste possu?a caracter?sticas histol?gicas da fase proliferativa do reparo com acentuada neoforma??o ?ssea e tamb?m a forma??o de uma esp?cie de calo ?sseo sobre a cortical ?ssea externa, e aos 42 dias o tecido ?sseo possu?a aspecto lamelar. O grupo controle aos 14 dias possu?a ainda caracter?sticas da fase inflamat?ria e proliferativa com moderada neoforma??o ?ssea, e aos 42 dias o tecido ?sseo neoformado ainda n?o possu?a caracter?sticas lamelares. No ensaio de pull-out o grupo teste apresentou tens?o de 59,26 N/cm2 e 29,69 N/cm2 aos 14 e 42 dias respectivamente, enquanto o grupo controle apresentou tens?o de 33,88 N/cm2 e 25,99 N/cm2 aos 14 e 42 dias, respectivamente. Os implantes analisados no MEV demonstraram no grupo teste aos 14 dias maior quantidade de tecido ?sseo aderido, por?m aos 42 dias n?o se observaram diferen?as entre os grupos. Os achados no experimento corroboram com a literatura, em que se observa que o rhGH aumenta a velocidade e quantidade de osso periimplantar neoformado, principalmente em est?gios iniciais do reparo ?sseo. Com base na revis?o de literatura pesquisada e com os resultados do presente experimento, conclue-se que a aplica??o t?pica de rhGH na regi?o periimplantar acelera o processo de neoforma??o ?ssea. O grupo controle aos 14 dias possu?a ainda caracter?sticas da fase inflamat?ria e proliferativa com moderada neoforma??o ?ssea, e aos 42 dias o tecido ?sseo neoformado ainda n?o possu?a caracter?sticas lamelares. No ensaio de pull-out o grupo teste apresentou tens?o de 59,26 N/cm2 e 29,69 N/cm2 aos 14 e 42 dias respectivamente, enquanto o grupo controle apresentou tens?o de 33,88 N/cm2 e 25,99 N/cm2 aos 14 e 42 dias, respectivamente. Os implantes analisados no MEV demonstraram no grupo teste aos 14 dias maior quantidade de tecido ?sseo aderido, por?m aos 42 dias n?o se observaram diferen?as entre os grupos. Os achados no experimento corroboram com a literatura, em que se observa que o rhGH aumenta a velocidade e quantidade de osso periimplantar neoformado, principalmente em est?gios iniciais do reparo ?sseo. Com base na revis?o de literatura pesquisada e com os resultados do presente experimento, conclue-se que a aplica??o t?pica de rhGH na regi?o periimplantar acelera o processo de neoforma??o ?ssea.
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An?lise da associa??o de c?lulas mononucleares de medula ?ssea a um arcabou?o de osso bovino liofilizado

Kalaoun, Rosana 26 November 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 464699.pdf: 3304843 bytes, checksum: 1c2d736171549331a5af746072affda0 (MD5) Previous issue date: 2014-11-26 / Mesenchymal stem cells hold great promise for tissues repair and regeneration, including bone defects. The association of these cells to a scaffold which resembles bone tissue structure and physiology is a major challenge in bone tissue engineering. The lyophilized bovine bone has a structure, chemical composition and mechanical properties similar to human bone marrow and acts as an excellent osteoconductive material. This in vitro study aimed to evaluate the growth of bone marrow mononuclear cells (BMMC) on a lyophilized bovine bone scaffold (Orthogen? - Baumer S.A., BR) covered with fibronectin; to verify if different cell densities interfere with the adhesion and proliferation of these cells and to evaluate whether the combination of platelet-rich plasma (PRP) interferes with adhesion and proliferation of BMMC grown on the lyophilized bovine bone scaffold. For this purpose, bone marrow cells obtained from a Kyoto rat were grown on blocks of lyophilized bovine bone coated with fibronectin in DMEM culture medium supplemented with 10% inactivated fetal bovine serum. The Orthogen? samples were distributed into four experimental groups, in triplicate, in three 24 wells culture plates and evaluated in three periods: 72 h, 96 h and 192 h. Group 1: lyophilized bovine bone + BMMC (5 x 104 cells / well); Group 2: lyophilized bovine bone + BMMC + PRP; Group 3: lyophilized bovine bone + fibroblasts (3T3); Group 4: lyophilized bovine bone + BMMC (15 x 104 cells / well). Cultures were incubated with the intercalating agent 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) for nuclear staining in order to evaluate the cell population density, by detection with confocal microscopy, of the number of cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffolds, after 72 h, 96 h and 192 h. The analysis of the lyophilized bovine bone surface and the morphological aspects of the cells adhered to it was performed on one sample from each group, by scanning electron microscopy (SEM). Analysis of variance (ANOVA) with two factors showed a significant interaction between the main effects evaluated: group and time, with p < 0.001. Through the results of Bonferroni statistical test, significant difference was found in the average number of nuclei in the period of culture of 96 h in group 3, and the period of culture of 192 h in group 4, which was higher than the other groups. Through SEM analysis, mononuclear cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffold were observed only in the groups 3 and 4, in the last, progressively, being already possible to observe cell morphology differentiation and to identify spherical and fusiform cells with cytoplasmic extensions. We concluded that BMMC cultured on a lyophilized bovine bone scaffold coated with fibronectin adhered and proliferated on the bone surface. BMMC cultured at a density of 15 x 104 cells / well, adhered and proliferated on the bone surface more evidently, when compared to the BMMC cultured at a density 5 x 104 cells / well, in the three culture periods evaluated. The association of PRP to BMMC culture on a lyophilized bovine bone scaffold increased, but not with statistical significance, the adhesion and proliferation on the bone surface. / As c?lulas-tronco mesenquimais det?m grande promessa para a repara??o e regenera??o de tecidos, inclusive de defeitos ?sseos. A associa??o destas c?lulas a um arcabou?o que se assemelhe ? estrutura e ? fisiologia do tecido ?sseo ? um dos grandes desafios da engenharia tecidual ?ssea. O osso bovino liofilizado, com estrutura e composi??o qu?mica similares ao osso humano medular, al?m de possuir propriedades mec?nicas compar?veis ?s do osso humano, atua como excelente material osteocondutor. O presente estudo in vitro teve como objetivos avaliar o cultivo de c?lulas mononucleares de medula ?ssea (CMMO) sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado (OrthoGen? - Baumer S.A., BR) recoberto com fibronectina; verificar se diferentes densidades celulares interferem na prolifera??o e na ades?o destas c?lulas e avaliar se a associa??o de plasma rico em plaquetas (PRP) interfere na ades?o e na prolifera??o das CMMO cultivadas sobre o arcabou?o de osso bovino liofilizado. Para isso, c?lulas da medula ?ssea obtidas de um rato Kyoto foram cultivadas sobre blocos de osso bovino liofilizado, recobertos com fibronectina, em meio de cultura DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino inativado. As amostras do OrthoGen? foram distribu?das em quatro grupos experimentais, em triplicata, em tr?s placas de cultura com 24 po?os e avaliadas em tr?s per?odos: 72 h, 96 h e 192 h. Grupo 1: osso bovino liofilizado + CMMO (5 x 104 c?lulas/po?o); Grupo 2: osso bovino liofilizado + CMMO + PRP; Grupo 3: osso bovino liofilizado + fibroblastos (3T3); Grupo 4: osso bovino liofilizado + CMMO (15 x 104 c?lulas/po?o). As culturas foram incubadas com o agente intercalante 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) para colora??o nuclear visando ? avalia??o de densidade populacional, por meio da detec??o por microscopia confocal, do n?mero de c?lulas aderidas aos arcabou?os de osso bovino liofilizado, ap?s 72 h, 96 h e 192 h. A an?lise da superf?cie do osso bovino liofilizado e das caracter?sticas morfol?gicas das c?lulas aderidas sobre ele o foram realizadas em uma amostra de cada grupo, com o aux?lio do microsc?pio eletr?nico de varredura. A an?lise de vari?ncia (ANOVA) com dois fatores mostrou intera??o significativa entre os efeitos principais avaliados: grupo e tempo, com valor de p < 0,001. Atrav?s dos resultados do teste estat?stico de Bonferroni, verificou-se diferen?a significativa da m?dia de n?cleos no per?odo de cultura de 96 h no grupo 3, e no per?odo de cultura de 192 h no grupo 4, a qual foi maior do que as dos demais grupos. Atrav?s da an?lise por microscopia eletr?nica de varredura foram observadas CMMO aderidas ao arcabou?o de osso bovino liofilizado somente no grupo 3 e no grupo 4, neste aumentando de forma progressiva, j? sendo poss?vel evidenciar diferencia??o na morfologia celular e identificar c?lulas esf?ricas e fusiformes com prolongamentos citoplasm?ticos. Conclui-se que as CMMO cultivadas sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado recoberto com fibronectina aderiram e proliferaram sobre a superf?cie ?ssea. As CMMO cultivadas numa densidade de 15 x 104 c?lulas / po?o, aderiram e proliferaram sobre a superf?cie ?ssea de forma mais evidente, quando comparadas ?s CMMO cultivadas numa densidade 5 x 104 c?lulas / po?o, nos tr?s per?odos de cultura avaliados. A associa??o de PRP ? cultura de CMMO sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado aumentou, mas n?o de forma estatisticamente significativa, a ades?o e a prolifera??o celular sobre a superf?cie ?ssea.

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