Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pauloeduardofbotturafilho_dissert.pdf: 8951270 bytes, checksum: e8c0f107001a21241dfc8719ec74d296 (MD5) Previous issue date: 2012-04-13 / Background: Periodontal disease is often associated with systemic diseases and is characterized by destruction of the tissues supporting the teeth. Patients using immunosuppressive drugs such as tacrolimus are among those who suffer from tissue destruction. Objective: To evaluate the effects of laser and photodynamic therapies (PDT) (nonsurgical) as an adjunct to scaling and root planing in the treatment of corona-induced periodontitis in rats immunosuppressed with tacrolimus (Prograf ®). Materials and methods: The animals were divided into five groups. Each groups had 6 rats. Group 1, the control group, received only saline solution throughout the study period of 42 days and did not receive periodontal treatment; Group 2, received saline solution and scaling and root planning (SRP); Group 3, received tacrolimus (1 mg/kg/day) and was treated with SRP; Group 4, animals were treated identically to group 3 and then administered laser treatment; and in Group 5, the animals were treated identically to group 3 and then administered photodynamic therapy. Results: Statistical analysis indicated decreased bone loss with the progression of time (p<0.005). There was no significant difference between the bone loss associated with the types of treatment administered to groups 1, 2 and 3 (p>0.9) and groups 4 and 5 (p>0.6). The analysis also indicated that immunosuppression was not a bone loss determining factor. Conclusion: Laser and PDT therapies were effective as an adjunctive treatment to SRP in reducing bone loss caused by experimental periodontitis induced in animals being treated systemically with tacrolimus. / Introdução: A doença periodontal está frequentemente associada a doenças sistêmicas e caracteriza-se pela destruição dos tecidos de suporte dos dentes. Pacientes que usam medicamentos imunossupressores como o tacrolimo, estão entre os que sofrem com esse problema. Objetivo: Avaliar os efeitos do laser e da Terapia Fotodinâmica (PDT) (tratamentos não cirúrgicos) como tratamento adjunto a raspagem e alisamento corono-radicular (RAR) sobre a periodontite induzida em ratos imunodeprimidos com tacrolimo. Materiais e métodos: Cada grupo continha 6 ratos. Grupo 1, grupo controle, recebeu apenas solução salina através do período estudado de 42 dias e não recebeu tratamento periodontal; Grupo 2, recebeu solução salina e RAR; Grupo 3, recebeu tacrolimo (1 mg/kg/d) e foi tratado com RAR; Grupo 4, os animais foram tratados identicamente ao grupo 3 e então administrado tratamento com laser; e o Grupo 5, os animais foram tratados identicamente ao grupo 3 e então foi administrado a PDT. Resultados: A análise estatística indicou decréscimo da perda óssea com a progressão do tempo (p<0,005). Não há diferenças significativas na perda óssea associada conforme o tipo de tratamento entre os grupos 1, 2 e 3 (p>0,9) e também entre os grupos 4 e 5 (p>0,6). As análises também demonstraram que a imunossupressão não foi um fator determinante para a perda óssea. Conclusão: O laser e a PDT foram efetivos como tratamento adjunto a RAR na redução da perda óssea causada pela periodontite experimental induzida em animais tratados com tacrolimo.

INTRODUÇÃO: O tratamento cirúrgico da endometriose profunda tem se mostrado benéfico para os resultados de Reprodução Assistida. O motivo que leva aos melhores resultados ainda é desconhecido, mas remete à etiologia multifatorial dessa doença. Observa-se, então, a oportunidade de investigar mecanismos moleculares que possam justificar este fato. Nesse contexto, os microRNAs podem desempenhar papel fundamental na medida em que alteram a expressão de diferentes genes por meio da inibição póstranscricional. OBJETIVO: Analisar o efeito da remoção cirúrgica das lesões de endometriose profunda na expressão dos microRNAs -21, -451 e -29c, além da expressão da proteína FKBP52. MÉTODOS: Trata-se de estudo clínico, prospectivo, longitudinal e comparativo no qual foram incluídas 26 pacientes que foram divididas em dois grupos, segundo o resultado da ultrassonografia transvaginal com preparo intestinal. As pacientes que não apresentaram alterações sugestivas de endometriose compuseram o grupo controle (n = 11) e foram submetidas à coleta de amostra de endométrio. As pacientes do grupo de estudo (n = 15) foram submetidas à amostragem endometrial antes e após o tratamento cirúrgico da endometriose, além de ter sido realizada a coleta de amostra da lesão profunda durante o ato operatório. Foi realizada a extração total de RNA dessas amostras e, posteriormente, PCR em tempo real para análise de expressão dos microRNAs -21, -451 e -29c, além da proteína FKBP52. RESULTADOS: A comparação da expressão relativa dos microRNAs -21 e -451 entre as amostras, de forma geral, não mostrou diferença estatisticamente significante. A expressão relativa do microRNA-29c foi maior no endométrio de pacientes com endometriose em relação ao grupo controle e ainda maior nas lesões de endometriose profunda. Após a cirurgia, a expressão do microRNA-29c no endométrio, foi equivalente à do grupo controle. A expressão da FKBP52 foi menor no endométrio das mulheres com endometriose e nas lesões da doença em comparação ao grupo controle. Após o tratamento cirúrgico houve aumento da expressão de FKBP52 nas amostras de endométrio nas pacientes com endometriose que passou a ser semelhante à do grupo controle. CONCLUSÕES: Os resultados sugerem que a presença das lesões de endometriose pode aumentar a expressão do microRNA-29c no endométrio e, por conseguinte, diminuir a expressão de um dos seus RNA mensageiros alvos que codifica a proteína FKBP52. Após o tratamento cirúrgico, com remoção das lesões de endometriose, a expressão do microRNA-29c e da FKBP52 se assemelhou à do grupo controle / INTRODUCTION: Surgical treatment of deeply infiltrating endometriosis appears to yield benefits to the affected women and also to the assisted reproduction treatments. Although the mechanisms involved on the improvement of the outcomes are still unknown; yet, they are similar to the multifactorial origin of the endometriosis. Considering that the microRNAs can modify different genes expression, it was investigated their role concerning the molecular pathways leading to endometriosis and the clinical betterment of the assisted reproductive procedures after the surgical treatment. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the effect of surgical treatment in women with endometriosis focusing the microRNAs -21, -451 and -29c expression, as well as the protein FKBP52 expression. METHODS: This is a clinical, prospective, longitudinal and comparative study which included 26 patients that were divided into two groups according to the findings of the transvaginal ultrasound with bowel preparation. Eleven women without evidence of DIE composed the control group and were submitted to eutopic endometrium sampling. Fifiteen women presented with evidence for DIE detected by pelvic ultrasound were also submitted to eutopic endometrium sampling before and after surgical treatment. Surgical procedures revealed the presence of relevant DIE. Total RNA extraction of all samples was performed and followed by real time PCR to evaluate microRNAs -21, -451, -29c and protein FKBP52 expression. RESULTS: MicroRNAs -21 and -451 expression analysis did not show statistically significant difference among samples. Nonetheless, expression of microRNA-29c was elevated in eutopic endometrium of women suffering from DIE in comparison to the control group. After surgery, the microRNA- 29c expression in eutopic endometrium became equivalent to the control group. The expression for FKBP52 was lower in women having DIE than those without endometriosis. The surgical treatment increased the expression of the protein FKBP52 in eutopic endometrial samples, turning it similar to the control group. CONCLUSIONS: The results of this study suggest that the presence of DIE might increase the expression of microRNA-29c in eutopic endometrium and consequently decrease the expression of one of its target messenger RNA that codifies the protein FKBP52. After surgical removal of endometriosis lesions, the microRNA-29c and the FKBP52 expression returned to a level similar to the control group

Introdução: Diabete Melito Pós-Transplante (DMPT) é considerado uma séria complicação do transplante de rim, podendo diminuir a sobrevida do enxerto e do paciente. O imunossupressor tacrolimo (TAC) pode aumentar o risco de desenvolvimento de DMPT. Objetivos: Estimar o risco de DMPT em pacientes tratados com TAC no Serviço de Transplante Renal da Irmandade da Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre, identificar os demais fatores de risco para o DMPT e suas conseqüências. Métodos: Foram analisados 413 pacientes sem diabetes prévia ao transplante, com 18 anos ou mais, tratados com TAC, ciclosporina (CsA) ou sirolimo (SIR), em uso de corticoterapia e com período de seguimento póstransplante maior de 6 meses. O estudo seguiu o modelo observacional–coorte retrospectivo. Os critérios da Associação Americana de Diabete foram utilizados para o diagnóstico de DMPT. Os dados foram coletados de prontuários. Resultados: Dos 413 pacientes analisados, 171(41,4%) receberam como imunossupressão inicial TAC, 221(53,5%) CsA e 21(5,1%) SIR. DMPT ocorreu em 20,6% dos pacientes da coorte (85 de 413). A mediana do tempo para o desenvolvimento de DMPT foi de 54 dias. A incidência cumulativa de DMPT foi de 24,6% e 17,2% para os grupos de tratamento TAC e CsA, respectivamente. Na análise por intenção de tratamento, o risco para o desenvolvimento de DMPT, ao comparar os grupos TAC vs. CsA foi de HR=1,563, (IC:95%=1,008–2,425), P=0,006. Pelo método de Kaplan-Meier, 78,9% dos pacientes em uso de TAC estavam livres de DMPT no mês 6 vs. 87,8% dos pacientes em uso de CsA (P= 0,044). Os demais fatores de risco independentes identificados foram: índice de massa corporal (IMC) pré-transplante (P<0,0001), idade do receptor (P<0,0001) e episódio de rejeição aguda (RA) (P=0,013). Não houve diferença estatística significativa para anti-HCV reagente do receptor. Em 3 anos, a sobrevida do enxerto, ao comparar os pacientes com diagnóstico de DMPT vs. ausência de DMPT foi de 85,5% e 93,3%, respectivamente (P=0,021) e a sobrevida do paciente foi de 88,9% e 96,7%, respectivamente (P=0,017). Conclusão: A incidência de DMPT está associada com o tipo de imunossupressão utilizada, idade do receptor, IMC pré-transplante e episódio de RA. DMPT é um importante fator de risco para perda do enxerto e mortalidade. Medidas para minimizar o risco dessa complicação devem ser tomadas, como a individualização da terapia imunossupressora. / Introduction: Post-transplant diabetes mellitus (PTDM) is considered a serious complication of kidney transplantation and may reduce the patient and graft survival. The immunosuppressive Tacrolimus (TAC) may increase the risk of developing PTDM. Purpose: To estimate the risk of PTDM in renal transplant recipients treated with TAC in our center, identify all risk factors for PTDM and its consequences. Methodology: We analyzed 413 patients without diabetes prior to transplantation, with age ≥ 18 years, who were treated with tacrolimus (TAC), cyclosporine (CyA) or sirolimus (SIR), under steroids therapy and with a follow-up post-transplant period more than 6 months. We performed a retrospective review – cohort study. PTDM was diagnosed according to American Diabetes Association guidelines. Data were collected from medical records. Results: We examined 413 renal allograft recipients, these, 171 (41.4%) received initial immunosuppresion with TAC, 221 (53.5%) CyA and 21 (5.1%) SIR. PTDM occurred in 20.6% of patients in the cohort (85 of 413). The median time to the development of PTDM was 54 days post transplant. The cumulative incidence of PTDM was 24.6% and 17.2% for groups TAC and CyA treatment, respectively. In the analysis by intention to treat, the proportion of patients receiving TAC who developed PTDM was significantly higher than patients receiving CyA (HR=1,563, (CI:95%=1,008–2,425), P=0,006. The Kaplan-Meier method showed that 78,9% patients taking TAC were free of PTDM at six months compared to 87,8% of patients taking CsA (P= 0.044). The other independent risk factors identified were: body mass index (BMI) (P<0,0001), recipient age (P<0,0001) and acute rejections episodes (AR) (P=0,013). There was no statistically significant difference for patients with hepatitis C. Three years actuarial graft survival was 85,5% in patients with PTDM compared with 93,3% for those without diabetes (P=0,021) and patient survival was 88,9% e 96,7%, respectively (P=0,017). Conclusions: The incidence of PTDM is associated with TAC use, the recipient age, BMI and acute rejections episodes. PTDM is an important risk factor for graft loss and mortality. Measures to minimize the risk of this complication should be taken, such as the individualization of immunosuppresive therapy.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012 / Fundos para pesquisa em Cirurgia Plástica da Universidade de Pittsburgh / Introdução: Os mecanismos regulatorios desempenham papel importante na manutencao da tolerancia no transplante. pretende-se, neste estudo, desenvolver uma estrategia de tolerancia baseada na associacao de tacrolimo com rapamicina. Objetivo: Estudar efeitos de tacrolimo e rapamicina sobre as celulas T regulatorias em transplante composto de tecido alogeno. Metodos: O modelo foi de transplante composto de Ratos Brown-Norway para Lewis. Foram feitos 2 experimentos. Um para avaliar atividade reguladora dos tranplantes e outro para identificar o mecanismo de acao. No experimento 1 dividimos os ratos em 4 grupos, o experimental (tacrolimus do PO 0 ao 7 e rapamicina do PO 8 ao 21). Os outros tres: Rapamicina 21d, Tacrolimus 21d e Ambas 21d. Amostras de sangue foram colhidas para citometria de fluxo ao PO 21, PO 45. Em segundo experimento, animais divididos em 4 grupos com terapeutica semelhante ao primeiro, foram submetidos ao mesmo procedimento com coleta de sangue para a medicao dos niveis Idoleamina 2,3di-oxigenase no PO 0,5,10,15,21. Resultados: No grupo experimental nao houve rejeicao no PO 150 de 66% dos animais, em dois grupos houve 100% de rejeicao e no ultimo 75% de rejeicao. No grupo experimental houve significativo aumento nos niveis de celulas T reguladoras no PO 45 em comparacao ao PO 21. No segundo experimento, observou-se uma baixa atividade da IDO no PO 5 em animais recebendo exclusivamente tacrolimus. Conclusao: A associacao de tacrolimus e rapamicina de forma sequencial leva a um aumento de celulas T regulatoria e a tolerancia, bem como uma reduzida atividade da IDO no PO 5 em individuos recebendo exclusivamente tacrolimus / Introduction: Regulatory mechanisms play an important role on manteinance of tolerance in transplant. The intend of this study is develop a strategy for tolerance besed in the sequential association of Tacrolimus and Rapamycin. Aim: Study the efects of Tacrolimus and Rapamycin on T regulatory cells in Composite allotransplantation. Methods: The model was hind limb transplant from Brown-Norway to Lewis rats. 2 experiments were made. One to evaluate regulatory activity of transplants and another to identify its mechanism of action. On experiment 1 rats were divided in 4 groups, the experimental (Tacrolimus from POD 0 to 7 and Rapamycin from POD 8 to 21). The other 3: Rapamycin 21d, Tacrolimus 21d and both 21d. Blood samples were collected for flow cytometry on POD 21 and 45. In a second experiment animals divided in 4 groups with similar therapeutics than experiment 1, submited to the same procedure, with collect of blood samples to measure the levels of Idoleamine 2,3dioxigenase on POD 0,5,10,15,21.. Results: On experimental group there was not rejection no POD 150 of 66% of the animals, in two groups 100% rejected and in the last 75% rejected. In the experimental group was a significant increase of T regulatory cells on POD 45 comparing to POD21. ON second experiment was observed a low activity of IDO on POD 5 in animals receiving exclusevily Tacrolimus. Conclusion: The association of Tacrolimus and Rapamycin sequentialy leads to an increase of T regulatory and to tolerance and reduced activity of IDO on POD 5 of animals receiving exclusevily Tacrolimus as well. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Introdução: No contexto do transplante de órgãos, a adesão à imunossupressão é imprescindível para evitar episódios de rejeição celular, perda do enxerto e óbito do paciente. No transplante hepático infantil, as taxas de não adesão aos imunossupressores variam de 10 a 70,4%, são aparentemente mais frequentes em pacientes adolescentes e raramente estudada em crianças abaixo de 12 anos de idade. Objetivos: determinar a prevalência de não adesão ao tacrolimo em crianças (idade no transplante < 12 anos), acompanhadas no Programa de Transplante Hepático Infantil do Hospital de Clínicas de Porto Alegre, transplantados por no mínimo 1 ano, traçar o perfil dos pacientes classificados como sem adesão e identificar as possíveis repercussões desta sobre o enxerto. Material e métodos: Trata-se de uma coorte histórica de um único centro, onde os pacientes foram recrutados do banco de dados da Unidade de Gastroenterologia Pediátrica do Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Foram revisados os registros médicos de todos os pacientes pediátricos que receberam um enxerto hepático. Critérios de inclusão: procedimento realizado entre os períodos de 1999-2011, por qualquer indicação, em uso de tacrolimo como imunossupressão de manutenção e com no mínimo cinco níveis séricos do imunossupressor em intervalos de aproximadamente três meses. Excluídos pacientes em uso de medicamentos que pudessem interferir no nível sérico do imunossupressor. Não adesão ao tacrolimo foi definida como valores de desvio-padrão do medicamento ≥ 2, considerando-se no mínimo cinco medidas consecutivas do nível sérico (índice de variabilidade do nível do tacrolimo). As características clínicas, sociais, e demográficas dos pacientes, idade e nível educacional maternos definiram a variável perfil do paciente. ALT > 60 IU / l (excluídas infecção e hepatotoxicidade), rejeição celular histologicamente comprovada, perda do enxerto e morte do paciente definiram repercussão da não adesão sobre o enxerto. Análise Estatística: foram utilizados os testes T de Student para as variáveis descritivas e o qui-quadrado para as variáveis categóricas. Valores de p < 0,05 foram considerados significativos. Resultados: Oitenta e seis pacientes menores de 12 anos foram submetidos ao transplante hepático nos períodos entre 1999 e 2011. Destes, sessenta e cinco preencheram os critérios de inclusão. Quinze foram excluídos, resultando em uma amostra final de cinquenta pacientes. Vinte e oito eram do sexo masculino (56%) sendo a média de idade de 4,0 ± 3,5 anos. A atresia biliar representou 62% das indicações de transplante, 87,7% eram lactentes e escolares. Não adesão medicamentosa foi observada em 22 (44%) dos pacientes e nas famílias com maior renda (p=0,045). Houve uma tendência da não adesão ser mais frequente nas famílias cujas mães tinham maior escolaridade (p=0,051). A média de idade materna foi de 31 anos e esta variável não esteve associada aos desfechos. ALT > 60 UI/l foi mais frequente nos pacientes sem adesão medicamentosa (p=0,035) e prontamente resolvida após ajuste da imunossupressão. A rejeição celular aguda foi semelhante entre os grupos (p=0,90). Óbito ou perda do enxerto não foram observados. Conclusão: Houve alta variabilidade do nível de tacrolimo na amostra estudada. Esta foi mais prevalente nas famílias com maior renda. Elevação transitória da ALT foi a principal repercussão dessa variabilidade sobre o enxerto. O índice de variabilidade do nível sérico de tacrolimo ≥2DP pode sugerir alguma falha da adesão medicamentosa. / Introduction: In the context of organ transplantation, the adherence to immunosuppression is important to avoid cell rejection episodes, graft loss and patient death. In pediatric liver transplantation, the rates of non-adherence to immunossupressors vary from 10 to 70,4%. This is more frequent in teenage patients and it is rarely studied in children younger than twelve years old. Objectives: Determining the prevalence of non-adherence to tacrolimus in children (age at transplant below 12 years) followed in the Pediatric Liver Transplantation Program of Clinical Hospital of Porto Alegre (HCPA) for at least 1 year in order to establish these patients’ profile and identify possible repercussions of non-adherence of the graft. Materials and methods: This is a matter of a single center historical cohort in which patients were recruited from the Pediatric Gastroenterology Unit at HCPA. We verified medical records of all pediatric patients who received a liver graft. Inclusion criteria are: procedure carried out from 1999 to 2011 under any recommendation, using tacrolimus as a maintenance immunosupressor, and with at least five serum levels of tacrolimus in approximately every three months. Patients in treatment with medication that could interfere in the suppressor's serum level were excluded. Non-adherence to tacrolimus was defined when the medication standard deviation was greater than or equal to 2, considering at least five consecutive measurements of serum level (variability rates of the tacrolimus level). Each patient profile was defined by their clinical, social and demographic characteristics, as well as their mother's age and educational level. Alanine transaminase (ALT) higher than 60 UI/l (infection and hepatotoxity were excluded), histologically proved cell rejection, graft loss and patient death defined the repercussions on non-graft adherence. Statistical Analysis: We used T tests for the descriptive variables and chi-squared for the categorical variables. Values of p lower than 0.05 were considered as significant. Findings: Eighty-six patients younger than 12 years old were subject to liver transplantation between 1999 and 2011. From these, sixty-five patients fulfilled the inclusion criteria. Fifteen patients were excluded, resulting in a sample of fifty patients. Twenty-eight were male (56%) and the average age was 4.0 ± 3.5 years. Biliary atresia represented 62% of the transplant indications. 87.7% were infants and students. Nonadherence to medication was observed in 22 (44%) patients and it more prevalent it families with greater income (p = 0.045). Non-adherence tended to be more frequent in families in which mothers had a better level of education (p = 0.051). The average age of the mothers was 31 years old and this variable was not associated with the outcomes. ALT> 60 IU/l was more frequent in patients without adherence to medication (p = 0.035) and immediately solved after an adjustment of the immunosuppression. Acute cell rejection was similar among groups (p = 0.90). Death and graft loss were not observed. Conclusion: There was a high variability in tacrolimus levels in the sample studied. This was more prevalent in families with higher income. Temporary elevation of ALT was the main effect of this variability on the graft. The variability rates of the serum level of tacrolimus, which was greater or equal to 2 SD (Standard deviation), may suggest failure of the medication adherence.

Orientador: Prof. Dr. Rogerio de Fraga / Co-orientador Prof. Dr. Renato Tambara Filho / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa: Curitiba, 01/09/2014 / Inclui referências / Área de concentração : Clínica cirurgica / Resumo: A terapia imunossupressora tem melhorado a sobrevida e a duração dos enxertos no transplante renal. Um ponto negativo, no entanto, diz respeito à toxicidade causada por estas drogas. Objetivo: Este estudo objetivou avaliar a toxicidade renal causada pelo tacrolimus e micofenolato mofetil (MMF) em um modelo de isquemia e reperfusão de rim único. Material e Método: Estudo experimental utilizando ratos Wistar, os quais foram submetidos à nefrectomia direita e isquemia renal esquerda por 20 minutos, sendo separados em grupos no pósoperatório (PO): 1) Controle (não operados); 2) Sham (operados, sem droga PO); 3) TAC0.1, TAC1 e TAC10, administrado tacrolimus PO nas doses 0,1 mg/kg, 1 mg/kg e 10 mg/kg via gavagem, respectivamente; 4) MMF, administrado micofenolato mofetil 20 mg/kg; 5) MMF/TAC1 e MMF/TAC0.5, com associação de micofenolato mofetil 20 mg/kg e tacrolimus 1 mg/kg e 0,5 mg/kg, respectivamente. Foram mortos no 14º PO e retirado rim para análise do estresse oxidativo tecidual, pela dosagem de glutationa reduzida (GSH), lipoperoxidação (LPO) e carbonilação de proteínas (PCO), e análise histológica por estereologia glomerular (Densidade de volume glomerular, Densidade numérica glomerular e Volume glomerular médio). Também foi avaliada a função renal pela dosagem de creatinina e uréia séricas. Resultados: Ambas as drogas provocaram alteração na função renal, sendo a toxicidade do tacrolimus dose-dependente. Neste curto intervalo de tempo, a toxicidade subaguda não mostrou alterações histológicas glomerulares significativas, sendo que houve hipertrofia renal e glomerular compensatória em todos os grupos exceto em TAC10. A dosagem de GSH teve aumento dose-dependente com uso de tacrolimus e micofenolato mofetil isolados, mas não em associação das drogas. LPO e PCO não se alteraram com o emprego do tacrolimus e houve redução de ambos com MMF. Conclusões: Pode-se concluir que ambas as drogas provocam alteração na função renal. A morfometria e a estereologia glomerular mostraram interferência negativa dos imunossupressores durante a hipertrofia glomerular compensatória. Tanto tacrolimus quanto MMF parecem aumentar o estresse oxidativo e estimulam elevação de GSH tecidual, no entanto, não foi detectado aumento de peroxidação lipídica ou carbonilação de proteínas, e o MMF parece ser fator protetor contra LPO e PCO. Palavras-chave: Nefrotoxicidade. Imunossupressão. Isquemia. Reperfusão. Estresse oxidativo. Estereologia. Tacrolimus. Micofenolato mofetil. / Abstract: Immunosuppression therapy has improved patient and graft survival in renal transplantation. A point of concern, however, is the drug toxicity. Aim: This study aimed to evaluate the renal toxicity caused by tacrolimus and mycophenolate mofetil (MMF) in a single kidney ischemia and reperfusion model. Methods: Experimental study using Wistar rats, which underwent right nephrectomy and left renal ischemia for 20 min. Postoperative (PO) groups were separated in: 1) control (non-operated); 2) Sham (operated without drug PO); 3) TAC0.1, TAC1 and TAC10, tacrolimus administered PO at doses 0.1 mg/kg, 1 mg/kg and 10 mg/kg by gavage, respectively; 4) MMF, mycophenolate mofetil administered 20 mg/kg; 5) MMF/TAC1 and MMF/TAC0.5, mycophenolate mofetil 20 mg/kg in combination with tacrolimus 1 mg/kg and 0.5 mg/kg, respectively. Rats were sacrificed on the 14th postoperative day and the kidney removed for tissue oxidative stress analysis. Levels of reduced glutathione (GSH), lipid peroxidation (LPO) and protein carbonyls (PCO) were mesured, and glomerular histological analysis was done by stereology (Glomerular volume density, Glomerular number density and Mean glomerular volume). Renal function was assessed measuring serum creatinine and urea. Results: Renal function changed with both drugs use, and there was a dose-dependent toxicity of tacrolimus. In this short period of time, the subacute toxicity showed no significant glomerular histological changes, and there was compensatory renal and glomerular hypertrophy in all groups except in TAC10. The level of GSH increased dosedependently with the use of tacrolimus, and with isolated mycophenolate mofetil, but not in combination of drugs. LPO and PCO did not changed with the use of tacrolimus and both decreased with MMF. Conclusions: Both drugs cause changes in renal function. The glomerular morphometry and stereology showed a negative interference of immunosuppressants during compensatory glomerular hypertrophy. Both tacrolimus and MMF appear to increase oxidative stress and stimulate elevation of tissue GSH levels. However, increased lipid peroxidation and protein carbonylation were not detected, and MMF seems to be protective against PCO and LPO. Key words: Nephrotoxicity. Immunosuppression. Ischemia. Reperfusion. Oxidative stress. Stereology. Tacrolimus. Mycophenolate mofetil.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-15Bitstream added on 2014-06-13T20:05:27Z : No. of bitstreams: 1 nassar_ca_dr_arafo.pdf: 644620 bytes, checksum: c8f926b8b07b13ddf9cd03079f1d6f41 (MD5) / Tacrolimus (FK506) é uma droga imunossupressora usada em transplantes de órgãos e também como terapia alternativa em pacientes com rejeição refratária de enxertos ou intolerância à ciclosporina A (CsA), sem os efeitos adversos atribuídos freqüentemente à CsA. Atualmente não há estudos que explorem os efeitos da administração de FK506 por longos períodos sobre o periodonto. Ë sugerido também que terapias imunossupressivas, principalmente com FK506, possam ser um importante fator no desenvolvimento de Diabetes mellitus pós-transplantes (PTDM). Existem alguns estudos explorando os efeitos do FK506 por longos períodos no desenvolvimento da PTDM em protocolos animais. Assim os objetivos do estudo foram avaliar os efeitos da terapia com FK506 por longos períodos sobre os tecidos gengivais, metabolismo do osso alveolar e do cemento de ratos, bem como os efeitos sobre os níveis glicêmicos. Com relação ao metabolismo ósseo, houve uma tendência de diminuição, estatisticamente significante, dos níveis de ALP em todos os períodos tratados com FK506, sendo que com os níveis de cálcio apenas um aumento em 240 dias de tratamento, quando comparados com os grupos controles. Assim, nós podemos concluir que o FK506 em longos períodos pode levar os efeitos deletérios sobre os tecidos gengivais e pode ser dependente da idade, mas não causaria efeitos negativos sobre o osso alveolar e nem ao cemento. E ainda em relação aos níveis séricos de glicemia, os efeitos negativos da terapia com FK506 também são dependentes do tempo. / Tacrolimus (FK506) is an immunosuppressive drug in organ transplantation and it is also an alternative therapy used for transplant patients with either refractory graft rejection or intolerant to cyclosporine A (CsA), without the adverse effects frequently attributed to CsA therapy. Nevertheless there are not studies exploring the effects of long-term FK506 therapy on periodontium. It has been suggested that immunosuppressive therapy, mainly FK506, may be an important factor in the development of post-transplantation diabetes mellitus (PTDM). There is a lack of studies exploring the effects of a long-term FK506 on PTDM in animal's protocols. The objectives of the present study were to evaluate the effects of long-term therapy with FK506 on the gingival tissue, alveolar bone metabolism and cementum in rats and the deleterious glycemic effects of long-term therapy with FK506. There was a tendency of increase of serum glycemia level in the initial periods (60 and 120 days). Within the limits of this experimental study, it can be concluded that the deleterious gingival effects of FK506 administration may be time and age related side effects and that have not the negative effects of FK506 administration long-term on the alveolar bone and cementum. It can be concluded that the deleterious glycemia effects of FK506 therapy may be time related side effects.

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-11Bitstream added on 2015-05-14T16:59:06Z : No. of bitstreams: 1 000823852_20160902.pdf: 45232 bytes, checksum: 77443f8a3bae513cc5aa1bcbb3bd778e (MD5) Bitstreams deleted on 2016-09-09T14:06:01Z: 000823852_20160902.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-09T14:06:34Z : No. of bitstreams: 1 000823852.pdf: 910226 bytes, checksum: 9457c9e8d1ff93778d17e06ee35eb4a8 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-09-12T15:36:40Z: 000823852.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-12T15:37:21Z : No. of bitstreams: 1 000823852.pdf: 910226 bytes, checksum: 9457c9e8d1ff93778d17e06ee35eb4a8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O presente estudo teve por objetivo avaliar o emprego da associação de Tacrolimus tópico com lipossomas contendo Rapamicina, em cães com ceratoconjuntivite seca grave, sem resposta a tratamentos convencionais. Foram estudados 29 olhos com valor de teste lacrimal de Schirmer menor que 5 mm/minuto. Os cães receberam, a cada 15 dias, durante dois meses, injeção subconjuntival de lipossomas com Rapamicina na dose de 0,4mg/ml, sendo mantida a medicação tópica com colírio de Tacrolimus 0,03%. Avaliação ocular completa, utilizando-se do protocolo de McDonald e Shadduck modificado, bem como testes de produção lacrimal Schirmer I e II e tempo de ruptura do filme lacrimal, foram realizados a cada 15 dias. O tratamento empregado não gerou efeitos adversos oculares em nenhum animal estudado. A associação de Tacrolimus tópico com lipossomas contendo Rapamicina foi eficaz na atenuação dos sinais clínicos de ceratoconjuntivite seca em cães, bem como incrementou a produção lacrimal e a qualidade da lágrima dos animais tratados / The present study aimed to evaluate the use of the association of topical Tacrolimus with liposomes containing Rapamycin in dogs with severe keratoconjunctivitis sicca, non-responsive to conventional treatments. Were studied 29 eyes with Schirmer tear test value of less than 5 mm/min. The dogs received every 15 days a subconjunctival injection of liposomes with Rapamycin at a dose of 0.4 mg/ml for two months. Topical eye drop medication was maintained with 0.03% Tacrolimus. Complete ophthalmologic evaluation using a modified McDonald-Shadduck protocol, as well as Schirmer tear tests I and II and tear film break up time were made every 15 days. The treatment used did not cause ocular side effects in any animal studied. The association of topical Tacrolimus with liposomes containing Rapamycin was effective in alleviating the clinical signs of keratoconjunctivitis sicca in dogs, as well as increased tear production and tear film quality of the studied animals

Introdução: Diabete Melito Pós-Transplante (DMPT) é considerado uma séria complicação do transplante de rim, podendo diminuir a sobrevida do enxerto e do paciente. O imunossupressor tacrolimo (TAC) pode aumentar o risco de desenvolvimento de DMPT. Objetivos: Estimar o risco de DMPT em pacientes tratados com TAC no Serviço de Transplante Renal da Irmandade da Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre, identificar os demais fatores de risco para o DMPT e suas conseqüências. Métodos: Foram analisados 413 pacientes sem diabetes prévia ao transplante, com 18 anos ou mais, tratados com TAC, ciclosporina (CsA) ou sirolimo (SIR), em uso de corticoterapia e com período de seguimento póstransplante maior de 6 meses. O estudo seguiu o modelo observacional–coorte retrospectivo. Os critérios da Associação Americana de Diabete foram utilizados para o diagnóstico de DMPT. Os dados foram coletados de prontuários. Resultados: Dos 413 pacientes analisados, 171(41,4%) receberam como imunossupressão inicial TAC, 221(53,5%) CsA e 21(5,1%) SIR. DMPT ocorreu em 20,6% dos pacientes da coorte (85 de 413). A mediana do tempo para o desenvolvimento de DMPT foi de 54 dias. A incidência cumulativa de DMPT foi de 24,6% e 17,2% para os grupos de tratamento TAC e CsA, respectivamente. Na análise por intenção de tratamento, o risco para o desenvolvimento de DMPT, ao comparar os grupos TAC vs. CsA foi de HR=1,563, (IC:95%=1,008–2,425), P=0,006. Pelo método de Kaplan-Meier, 78,9% dos pacientes em uso de TAC estavam livres de DMPT no mês 6 vs. 87,8% dos pacientes em uso de CsA (P= 0,044). Os demais fatores de risco independentes identificados foram: índice de massa corporal (IMC) pré-transplante (P<0,0001), idade do receptor (P<0,0001) e episódio de rejeição aguda (RA) (P=0,013). Não houve diferença estatística significativa para anti-HCV reagente do receptor. Em 3 anos, a sobrevida do enxerto, ao comparar os pacientes com diagnóstico de DMPT vs. ausência de DMPT foi de 85,5% e 93,3%, respectivamente (P=0,021) e a sobrevida do paciente foi de 88,9% e 96,7%, respectivamente (P=0,017). Conclusão: A incidência de DMPT está associada com o tipo de imunossupressão utilizada, idade do receptor, IMC pré-transplante e episódio de RA. DMPT é um importante fator de risco para perda do enxerto e mortalidade. Medidas para minimizar o risco dessa complicação devem ser tomadas, como a individualização da terapia imunossupressora. / Introduction: Post-transplant diabetes mellitus (PTDM) is considered a serious complication of kidney transplantation and may reduce the patient and graft survival. The immunosuppressive Tacrolimus (TAC) may increase the risk of developing PTDM. Purpose: To estimate the risk of PTDM in renal transplant recipients treated with TAC in our center, identify all risk factors for PTDM and its consequences. Methodology: We analyzed 413 patients without diabetes prior to transplantation, with age ≥ 18 years, who were treated with tacrolimus (TAC), cyclosporine (CyA) or sirolimus (SIR), under steroids therapy and with a follow-up post-transplant period more than 6 months. We performed a retrospective review – cohort study. PTDM was diagnosed according to American Diabetes Association guidelines. Data were collected from medical records. Results: We examined 413 renal allograft recipients, these, 171 (41.4%) received initial immunosuppresion with TAC, 221 (53.5%) CyA and 21 (5.1%) SIR. PTDM occurred in 20.6% of patients in the cohort (85 of 413). The median time to the development of PTDM was 54 days post transplant. The cumulative incidence of PTDM was 24.6% and 17.2% for groups TAC and CyA treatment, respectively. In the analysis by intention to treat, the proportion of patients receiving TAC who developed PTDM was significantly higher than patients receiving CyA (HR=1,563, (CI:95%=1,008–2,425), P=0,006. The Kaplan-Meier method showed that 78,9% patients taking TAC were free of PTDM at six months compared to 87,8% of patients taking CsA (P= 0.044). The other independent risk factors identified were: body mass index (BMI) (P<0,0001), recipient age (P<0,0001) and acute rejections episodes (AR) (P=0,013). There was no statistically significant difference for patients with hepatitis C. Three years actuarial graft survival was 85,5% in patients with PTDM compared with 93,3% for those without diabetes (P=0,021) and patient survival was 88,9% e 96,7%, respectively (P=0,017). Conclusions: The incidence of PTDM is associated with TAC use, the recipient age, BMI and acute rejections episodes. PTDM is an important risk factor for graft loss and mortality. Measures to minimize the risk of this complication should be taken, such as the individualization of immunosuppresive therapy.

Orientador: José Joaquim Titton Ranzani / Banca: Cláudia Valéria Seuller Brandão / Banca: Geórgia Nadalini Rodrigues / Banca: Daniela Nogueira Cremonini / Banca: Maria Guadalupe Sereno / Resumo: O presente estudo teve por objetivo avaliar o emprego da associação de Tacrolimus tópico com lipossomas contendo Rapamicina, em cães com ceratoconjuntivite seca grave, sem resposta a tratamentos convencionais. Foram estudados 29 olhos com valor de teste lacrimal de Schirmer menor que 5 mm/minuto. Os cães receberam, a cada 15 dias, durante dois meses, injeção subconjuntival de lipossomas com Rapamicina na dose de 0,4mg/ml, sendo mantida a medicação tópica com colírio de Tacrolimus 0,03%. Avaliação ocular completa, utilizando-se do protocolo de McDonald e Shadduck modificado, bem como testes de produção lacrimal Schirmer I e II e tempo de ruptura do filme lacrimal, foram realizados a cada 15 dias. O tratamento empregado não gerou efeitos adversos oculares em nenhum animal estudado. A associação de Tacrolimus tópico com lipossomas contendo Rapamicina foi eficaz na atenuação dos sinais clínicos de ceratoconjuntivite seca em cães, bem como incrementou a produção lacrimal e a qualidade da lágrima dos animais tratados / Abstract: The present study aimed to evaluate the use of the association of topical Tacrolimus with liposomes containing Rapamycin in dogs with severe keratoconjunctivitis sicca, non-responsive to conventional treatments. Were studied 29 eyes with Schirmer tear test value of less than 5 mm/min. The dogs received every 15 days a subconjunctival injection of liposomes with Rapamycin at a dose of 0.4 mg/ml for two months. Topical eye drop medication was maintained with 0.03% Tacrolimus. Complete ophthalmologic evaluation using a modified McDonald-Shadduck protocol, as well as Schirmer tear tests I and II and tear film break up time were made every 15 days. The treatment used did not cause ocular side effects in any animal studied. The association of topical Tacrolimus with liposomes containing Rapamycin was effective in alleviating the clinical signs of keratoconjunctivitis sicca in dogs, as well as increased tear production and tear film quality of the studied animals / Doutor