Glicocorticóides modulam a resposta imune de forma complexa em vertebrados expostos a diferentes estressores. Dado que as populações naturais têm estado expostas a uma multiplicidade de estressores, uma melhor compreensão da associação funcional entre a duração e a intensidade da resposta ao estresse, as mudanças resultantes nos níveis dos hormônios esteróides e seu impacto sobre os diferentes aspectos da imunocompetência emergem como um ponto chave para as estratégias de conservação dos vertebrados. Nós investigamos as relações entre os níveis plasmáticos de hormônios esteróides e a imunocompetência inata em anfíbios anuros, incorporando as metodologias de desafio de contenção, elevação experimental dos níveis de corticosterona por aplicação transdérmica, capacidade bactericida por espectrofotometria e o desafio imunológico com fitohemaglutinina. Nossos resultados demonstram que a capacidade bactericida plasmática (CBP) medida por espectrofotometria é um método confiável e preciso para estimar a imunocompetência de anfíbios anuros, além disso, mostramos a existência de uma grande diversidade interespecífica na CBP de anuros machos. Quando quatro diferentes espécies de Bufonídeos foram submetidas a um desafio de contenção, as respostas gerais incluíram aumento dos níveis plasmáticos de corticosterona (CORT) e da relação neutrófilo/linfócito (N:L) e diminuição dos níveis plasmáticos de testosterona (T). As respostas da CBP à contenção foram muito mais variáveis, com R. ictérica mostrando diminuição e R. marina mostrando aumento dos valores de CBP. Adicionalmente, CORT e N:L tenderam a aumentar mais em resposta à contenção com restrição de movimento do que à contenção sem restrição de movimento, indicando que os sapos demostraram um aumento da resposta ao estresse quando submetidos ao estressor mais intenso. Todas as variáveis estudadas mostraram variação interespecífica. Rhinella ornata apresentou os maiores níveis basais de CORT quando comparado com as outras espécies, enquanto R. ornata e R. ictérica mostraram os maiores valores basais de CBP. Entretanto, as mudanças na relação N:L, nos níveis de T e na CBP, não foram correlacionadas com o aumento em CORT, dentro ou entre espécies. A aplicação transdérmica de corticosterona eficientemente simulou eventos repetidos de resposta ao estresse agudo em Rhinella ictérica, sem alterar os parâmetros imunitários, mesmo após treze dias de tratamento. Curiosamente, o cativeiro a longo prazo não atenuou a resposta ao estresse, uma vez que estes sapos mantiveram um aumento de três vezes em CORT mesmo depois de três meses sob estas mesmas condições. Além disso, a manutenção em cativeiro a longo prazo, nas mesmas condições, aumentou a contagem total de leucócitos (TLC) e gerou uma diminuição ainda maior na CBP, sugerindo que as consequências da resposta ao estresse podem ser agravadas pelo tempo em cativeiro. Com base em nossos resultados, consideramos que uma avaliação cuidadosa é necessária para compreender a modulação da resposta imunitária pelo estresse a nível intra e interespecífico. A inclusão de diferentes segmentos da resposta imune é desejável, e a padronização da coleta de dados para todas as espécies sob o mesmo período (em geral, dentro ou fora da época reprodutiva) e mesma atividade (em geral, vocalizando ou forrageando) se faz obrigatória / Glucocorticoids modulate the immune response in complex ways in vertebrates exposed to different stressors. Given that natural populations have been exposed to a multitude of stressors, a better understanding of the functional association between duration and intensity of the stress response, the resulting changes in steroid hormone levels and their impact on different aspects of immunocompetence emerges as a cornerstone for vertebrate conservation strategies. We investigated the relationships between steroids levels and innate immunocompetence in anuran amphibians, incorporating the methodology of restraint challenge, experimental elevation of corticosterone levels by transdermal application, bacterial killing ability by spectrophotometry and the immune challenge with phytohemagglutinin. Our results demonstrate that the bacterial killing ability (BKA) measured by spectrophotometry is a reliable and accurate method to estimate the immunocompetence of anuran amphibians, additionally showed the existence of a large interspecific diversity in BKA from male anurans. When four different species of Bufonids were submitted to a restraint challenge, the general responses included increased in corticosterone plasma levels (CORT) and neutrophil/lymphocyte ratio (N:L) and decreased in testosterone plasma levels (T). The responses of BKA to restraint were much more variable, with R. icterica showing decreased and R. marina showing increased values. Additionally, CORT and N:L tended to increase more in response to restraint with movement restriction than to restraint without movement restriction, indicating that toads showed an increased stress response to the more intense stressor. All variables studied show interspecific variation. Rhinella ornate showed higher baseline CORT when compared to other species, while R. ornate and R. icterica showed the highest baseline BKA values. However, changes in N:L ratio, T levels and BKA, were not correlated to increased CORT within or between species. Transdermal application of corticosterone efficiently mimics repeated acute stress response events in Rhinella icterica, without changing the immune parameters even after thirteen days of treatment. Interestingly, long-term captivity did not mitigate the stress response, since the toads maintained three fold increased CORT even after three months under these conditions. Moreover, long-term captivity in the same condition increased total leukocyte count (TLC) and generated an even greater decrease in BKA, suggesting that consequences of the stress response can be aggravated by time in captivity. Based on our results, we consider that a careful evaluation is necessary in order to understand the modulation of the immune response by stress at intra and interspecific levels. The inclusion of different segments of the immune response is desirable, and a standardized data collection for all the species under the same period (e.g. inside or outside of breeding season) and same activity (e.g. calling or foraging) is mandatory

A partir de estudos sobre o controle endócrino do comportamento reprodutivo em anuros sabemos que diversos aspectos do comportamento vocal e das interações agonísticas nestes animais encontram-se associados a alterações dos níveis hormonais de testosterona e corticosterona. Dentre as espécies de anuros neotropicais de grande interesse para estudos a respeito do controle endócrino do comportamento reprodutivo destaca-se Hypsiboas faber, uma espécie de hilídeo caracterizada pela presença de machos territorialistas, cujas interações agonísticas abrangem uma diversidade de padrões vocais com agressividade escalar, podendo culminar em embate físico, além da construção de ninhos para oviposição e comportamento facultativo de guarda deste ninho. O objetivo deste trabalho foi entender as inter-relações entre os níveis plasmáticos de corticosterona e testosterona, e os comportamentos de vocalização e defesa territorial em machos de H. faber durante a atividade reprodutiva. Tais interrelações foram investigadas através da observação do comportamento durante as atividades vocais, seguidas de coleta de sangue para dosagem hormonal. Contamos adicionalmente com uma abordagem experimental, que consistiu no uso de gravações do coaxo de anúncio (playback), simulando a invasão de outro macho no território dos indivíduos focais, seguida de observação comportamental e coleta de sangue para dosagem hormonal. O estímulo experimental não surtiu qualquer efeito sobre os níveis plasmáticos de corticosterona e testosterona, nem sobre a maior parte das variáveis comportamentais. Conseguimos identificar um padrão de variação sazonal nos níveis de corticosterona e testosterona, bem como uma correlação positiva entre estes hormônios. Adicionalmente, indivíduos que vocalizam a taxas mais altas apresentam níveis mais elevados de corticosterona durante o início da temporada reprodutiva, enquanto níveis mais elevados de testosterona aparecem nos indivíduos mais responsivos a estímulos provindos do entorno social. / From studies on the endocrine control of reproductive behavior in anurans, we know that many aspects of vocal behavior and agonistic interactions of these animals are related to changes in plasma levels of testosterone and corticosterone. Among the species of neotropical frogs of great interest for studies on the endocrine control of reproductive behavior stands out Hypsiboas faber, a hylid characterized by the presence of territorial males, whose agonistic interactions cover a variety of vocal patterns with aggressiveness scale, which may culminate in physical conflict. Males of H. faber also build nests for oviposition and presents optional guard of the nests with eggs. The aim of this study was to understand the interrelationships between plasma levels of corticosterone and testosterone with calling behavior and territorial defense in males of H. faber during reproductive season. These relationships were investigated by focal observations during the vocal activities, followed by blood sampling for hormonal assay. We additionally used an experimental approach, which consisted of using recorded advertisement calls (playback), simulating an invasion of another male in the territory of the focal subjects, followed by behavioral observation and blood sampling for hormonal assay. The experimental stimulus had no effect on plasma levels of corticosterone and testosterone, neither on the majority of behavioral variables. We can identify a pattern of seasonal variation in levels of corticosterone and testosterone, as well as a positive correlation between these hormones. Additionally, individuals who vocalize at higher rates have higher levels of corticosterone during the beginning of reproductive season, while higher levels of testosterone appear in individuals more responsive to stimuli from the social environment.

Em resposta a diversos estressores, o hipotálamo de anfíbios secreta o hormônio liberador de corticotropina (CRH), o qual estimula a hipófise a liberar o hormônio adrenocorticoctrópico (ACTH) na corrente sanguínea. O ACTH, por sua vez, atua na glândula inter-renal estimulando a liberação de glicocorticoides, sendo a corticosterona o principal glicocorticoide em anfíbios. Embora a modulação exercida pelos glicocorticoides de diversas respostas fisiológicas de estresse seja fundamental para a manutenção da homeostase em curto prazo, a ativação muito frequente e/ou prolongada do eixo hipotálamo-hipófise-interrenais (HHI) pode inibir processos importantes em longo prazo, tais como a reprodução e a imunocompetência e afetar a síntese de melatonina atuando diretamente sobre a pineal. O objetivo do presente estudo foi avaliar possíveis alterações nos níveis plasmáticos de corticosterona, testosterona, níveis oculares de melatonina, hematócrito e aspectos imunitários (contagem total de leucócitos e capacidade antimicrobiana plasmática - contra Escherichia coli) de machos da perereca Hypsiboas faber em resposta à injeção de ACTH, bem como o curso temporal destas respostas. Amostras de sangue e plasma foram obtidas a partir de 30 machos capturados em campo, dentro de 3 minutos da captura. Os animais foram trazidos para o laboratório e, após dois meses, divididos em seis grupos para serem amostrados em três horários distintos 1 h, 3h e 6h após o tratamento. Para cada horário um grupo controle e um grupo experimental foram adicionados, recebendo uma injeção de 105 μL de solução salina ou de solução de ACTH (0,446 μg de ACTH/g de massa corpórea (grupo experimental)). O tratamento com ACTH aumentou significativamente os níveis plasmáticos de corticosterona e diminuiu os níveis plasmáticos de testosterona bem como os níveis oculares de melatonina após 1 hora. Após 6 h da injeção de ACTH, houve um aumento da porcentagem do hematócrito e dos níveis de melatonina ocular. O tratamento com ACTH não afetou os aspectos imunitários estudados dentro do intervalo amostrado. Os resultados confirmam o papel da ativação do eixo HHI na inibição da secreção de testosterona e na modulação da secreção de melatonina, embora os possíveis efeitos imunomodulatórios possam se dar em intervalos temporais mais tardios / In response for several stressors, the amphibian hypothalamus release the corticotrophin release hormone (CRH), which stimulates pituitary to release the adenocorticotropic hormone (ACTH) in the bloodstream. The ACTH, in your turn, acts in inter renal glands stimulating the glicocorticoids releasing, being the corticosterone the main glicocorticoid in anphibians. While the modulation exercised by the glicocorticoids of diverses physiological responses of the stress is fundamental for de maintainance of homeostasis in short period, the frequent and/or prolongued activation of the hypothamlamus pituitary interenal axis (HHI) could inhibit important process in long periods, as the reproduction and immunocompetence and affect melatonin synthesis acting directly in pineal gland. The objective of the present study was evaluate possible alterations in plasmatic corticosterone levels, testosterone, eyes melatonin levels, hematocrit and immunity aspects (Total count leucocytes and antimicrobian plasmatic capacity - against Escherichia coli) from males of the treefrog Hypsiboas faber in response to ACTH injection, as well, the temporal course of these responses. Blood and plasma samples were obtained from the 30 males captured in the field, whitin 3 minutes from the capture. The animals were transferred to the laboratory and, after two months, divided in six groups to be sampled in three different times 1 h, 3 h and 6 h after treatment. For each time one control group and one experimental group were added, receiving one injection of 105 μL of saline or ACTH solution (0,446 μg de ACTH/g of body mass (experimental group)). The ACTH treatment increase significantly the plasmatic corticosterone levels and decrease the plasmatic testosterone levels, as well, the eye melatonin levels after one hour. After six hours of the ACTH injection, occurred the increase of the hematocrit percentage and the eye melatonin levels. The ACTH treatment did not affect the immunity aspects studied in the sampling interval. The results confirm the role of the activation on the axis HHI in the inhibition of the testosterone secretion and in the modulation of melatonin secretion, althougth the possible immunomodutatory effects could happen in temporal intervals later

Durante 60 dias foram utilizados seis garanhões de raças variadas, com peso médio inicial de 472,67±90,48 kg, alimentados duas vezes ao dia com dietas compostas por feno de Tifton (Cynodon dactylon) e concentrado comercial, suplementadas com 300 mL de óleo vegetal (óleo de arroz ou óleo de soja), além de sal mineralizado e água ad libitum. Foi avaliado o efeito da suplementação com óleo de arroz semi-refinado com alto teor de gama-orizanol sobre a aceitabilidade da dieta, ganho de peso, escore corporal, lipídeos plasmáticos, digestibilidade aparente dos nutrientes da dieta (Matéria Seca MS, Matéria Orgânica MO, Proteína Bruta PB, Fibra em Detergente Neutro FDN e Fibra em Detergente Ácido FDA), além da qualidade espermática e testosterona plasmática. Para tal observação, foram colhidas amostras sangüíneas com 0, 15, 30, 45 e 60 dias após o início do tratamento para mensuração das concentrações plasmáticas de testosterona, triglicérides, colesterol total e suas frações, tais como lipoproteína de densidade muito baixa (VLDL-C), lipoproteína de densidade baixa (LDL-C) e lipoproteína de densidade alta (HDL-C). Para avaliação da digestibilidade aparente dos nutrientes da dieta, os animais passaram por três dias de colheita total de fezes. Para avaliação da qualidade espermática, os garanhões passaram por colheita seminal com 0, 15, 30, 45 e 60 dias do tratamento. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado com medidas repetidas no tempo e as médias foram comparadas considerando-se o nível de 5% de significância. Os valores médios obtidos para a digestibilidade aparente da MS, MO, EE, FDN e FDA foram respectivamente 64,34; 68,03; 71,95; 83,37; 62,15 e 55,05% para o tratamento com óleo de soja, e 58,97; 62,61; 66,96; 81,94; 54,85 e 45,87% para o tratamento com óleo de arroz. Não houve diferença (p < 0,05) em relação à digestibilidade aparente dos nutrientes da dieta para os tratamentos propostos. Os valores médios para testosterona, colesterol total, HDL-C, LDL-C, VLDL-C e triglicérides foram respectivamente 75,93 ng/dL; 92,73; 61,47; 26,99 e 4,28 mg/dL para o tratamento com óleo de soja; e de 62,13 ng/dL; 110,20; 66,73; 38,44 e 5,02 mg/dL para o tratamento com óleo de arroz. Em relação à qualidade espermática, também não se observou (p < 0,05), e os valores médios para volume, motilidade, vigor, concentração, defeitos maiores, defeitos menores e defeitos totais, foram respectivamente, de 71,87 mL; 69 %; 2,63; 123 x 106 espermatozóides/mL; 17,73%; 4,60% e 22,33 % para o tratamento com óleo de soja, e de 78,67 mL; 70,67%; 2,93; 115,67 x 106 espermatozóides/mL; 17,96%; 6,03% e 22,63% para o tratamento com óleo de arroz. Podemos concluir que a suplementação da dieta com óleo de arroz semi-refinado, com alto teor de gama-orizanol, proporciona melhora do ganho de peso e do escore corporal, não afeta a qualidade espermática ou a concentração plasmática de testosterona, VLDL-C, HDL-C e triglicérides, porém, eleva as concentrações plasmáticas de colesterol total e de LDL-C. / Using up six stallions of various breeds during 60 days, with initial average weight of 472,67 ¬± 90,48 kg, fed twice a day with a diet consisting of Tifton hay (Cynodon dactylon) and commercial concentrate, supplemented with 300 mL. of a vegetable oil (rice bran or soybean), moreover mineralized salt and ad libitum water. The experiment evaluated the effect of the supplementation of diet with rice bran oil, with high level of gamma-oryzanol, about acceptability of the diets, weight gain, body score, levels of plasmatic lipids, apparent digestibility of nutrients of the diets (dry matter - DM, organic matter - OM, crude protein - CP, ether extract - EE, neutral detergent fiber - NDF and acid detergent fiber ADF), and spermatic quality and plasmatic testosterone. Blood samples were also held with 0, 15, 30, 45 and 60 days after starting treatment, for analysis of the values of testosterone, triglycerides, total cholesterol and its fractions (HDL-C, LDL-C and VLDL-C). To evaluation of the apparent digestibility of the nutrients of the diet, the animals had passed for three days of total fecal collection. To evaluation of the sperm quality, the sires had passed for seminal collection with 0, 15, 30, 45 and 60 days of the treatment. It was used completely randomized design for repeated measures design with repeated measures over time and the means were compared under 5 % significance level. The gotten average values for the apparent digestibility of the DM, OM, CP, EE, NDF and ADF were respectively 64,34; 68,03; 71,95; 83,37; 62,15 and 55.05 % for the treatment with soybean oil, and 58,97; 62,61; 66,96; 81,94; 54,85 and 45.87 % for the treatment with rice bran oil. There was no statistical difference (p < 0,05) from the apparent digestibility of nutrients of the diet. The average values for testosterone, total cholesterol, HDL-C, LDL-C, VLDL-C and triglycerides had been respectively 75,93 ng/dL; 92,73; 61,47; 26,99 and 4,28 mg/dL for the treatment with soy oil; and of 62,13 ng/dL; 110,20; 66,73; 38,44 and 5,02 mg/dL for the treatment with rice bran oil. In relation to the spermatic quality, also did not have difference (p < 0,05), and the average values for volume, motility, vigor, concentration, defects, lesser defects and total defects, had been respectively, of 71,87 mL; 69%; 2,63; 123 x 106 sptz/mL; 17.73%; 4.60% and 22.33% for the treatment with soybean oil, and 78,67 mL; 70.67%; 2,93; 115,67 x 106sptz/mL; 17.96%; 6.03% and 22,63% for the treatment with rice bran oil. The supplementation of diet with semi-refined rice bran oil, with high level of gamma-oryzanol, provided better weight gain and improves the body score, do not affect the sperm quality or plasmatic levels of testosterone, VLDL-C, HDL-C and triglycerides, however, it increase plasmatic levels of total cholesterol and LDL-C.

Pouco se conhece acerca dos aspectos fisiológicos da reprodução de ranfastídeos, sendo estas informações importantes para sua conservação e criação em cativeiro. Métodos não-invasivos permitem análises a longo prazo e em espécies pequenas, além de facilitar estudos em vida livre e minimizar o estresse causado aos animais. Este trabalho teve por intuito a dosagem de metabólitos de testosterona (machos e fêmeas), progesterona e estradiol (somente fêmeas) nas excretas de 3 casais de tucano-toco (Ramphastos toco) e 3 casais de tucano-de-bico-verde (Ramphastos dicolorus), dentro e fora da estação reprodutiva. Dados de observações comportamentais mostraram que os animais foram mais ativos durante a estação reprodutiva, porém comportamentos sociais e proximidade entre o casal se mostraram raros nas duas fases durante as seções de observação. Concentrações de metabólitos de progesterona foram obtidos para as duas espécies na Fase Reprodutiva, mas não foram detectados nos ensaios para a Fase Não-reprodutiva. Metabólitos de testosterona puderam ser dosados em ambas as espécies, nas duas fases, tanto em machos quanto em fêmeas; sendo que os resultados mostraram para a maioria dos indivíduos concentrações maiores na Fase Reprodutiva. Aumentos acima de variações basais de metabólitos de testosterona foram associados à ocorrência de posturas, que ocorreram durante a Fase Reprodutiva numa das fêmeas de R. toco. Não foram obtidos resultados de metabólitos de estradiol em nenhuma das duas espécies, possivelmente pela falha do anticorpo utilizado em reconhecer os metabólitos. No entanto, este trabalho mostrou que a técnica utilizada foi eficaz para dosagem de metabólitos de testosterona e progesterona nas excretas destas espécies, evidenciando variações sazonais nas concentrações hormonais e indicando uma relação entre a concentração de metabólitos de testosterona e as posturas. / Little is known about reproductive physiology in Ranfastidae and this knowledge is needed for the development of conservation programs and for successful captive breeding. Non-invasive methods allow long-term analysis in small animals, facilitate studies with free-living animals and minimize the handling stress. The purpose of this work was to measure the testosterone (males and females), progesterone and oestrogen (females) metabolites concentrations in the droppings of Toco-toucan (Ramphastos toco) and Red-billed-toucan (Ramphastos dicolorus), inside and outside the reproductive season. Three captive couples of each species were studied. Collected behavioural data showed that the animals were more active during reproductive season, but social behaviours and the couple proximity were rare in the two phases during the observation sessions. Progesterone metabolites concentrations could be obtained in the Reproductive Phase for both species, but weren`t detected in the Nonreproductive Phase. Testosterone metabolites could be measured for both species in the two phases, in males and females; and the results showed higher concentrations in most of individuals in the Reproductive Phase. Concentrations of testosterone metabolites above basal levels were associated to egg laying, which occurred during Reproductive Phase in one of the R. toco females. Results of oestrogen metabolites concentrations could not be obtained in both species, probably because the fail of the antibody in detecting these metabolites. However, this work showed that the utilized technique was efficient to measure testosterone and progesterone metabolites in those species droppings, evidencing seasonal variations in hormonal concentrations and indicating a relationship between testosterone concentrations and oviposition.

No study has examined the effect of exercise modality (free weight vs. machine weight) on the acute hormonal response using similar multi-joint exercises. The purpose of this investigation was to examine the effect of resistance exercise modality on acute hormonal responses by comparing the squat and leg press which are multi-joint, and similar in action and lower-body muscle involvement. Ten resistance trained men (21-31 y, 24.7 ± 2.9 y, 179 ± 7 cm, 84.2 ± 10.5 kg) participated in the study. Sessions 1 and 2 determined the participants’ 1-RM in the squat and leg press. During acute heavy resistance exercise testing visits (AHRET), sessions 3 and 4, participants completed 6 sets of 10 repetitions with an initial intensity of 80% of their 1-RM for the squat and leg press exercises. There was a 2 minute rest period between each set. Blood samples were collected before, immediately after, and 15 and 30 minutes after exercise via intravenous catheter during the AHRET visits and were analyzed for testosterone, cortisol, and growth hormone. Lactate, plasma volume change, heart rates and ratings of perceived exertion were also measured. Total work was calculated for external load only and for external load and the body mass used in the exercises. The 4 sessions were counterbalanced and randomized for exercise mode. Testosterone for the squat (Pre: 23.9 ± 8.7 nmol•L-1; IP: 31.4 ± 10.3 nmol•L) and leg press (Pre: 22.1 ± 9.4 nmol•L-1; IP: 26.9 ± 7.8 nmol•L) increased but more significantly after the squat. Growth hormone increased in both the squat (Pre: 0.2 ± 0.2 µg/L; IP: 9.5 ± 7.3 µg/L) and the leg press (Pre: 0.3 ± 0.5 µg/L; IP: 2.8 ± 3.2 µg/L). The increase was significantly higher after the squat compared to the leg press. Cortisol also increased after performing the squat (Pre: 471.9 ± 167.2 nmol•L-1; IP: 603.2 ± 277.6 nmol•L) and leg press (Pre: 463.5 ± 212.4 nmol•L-1; IP: 520.3 ± 270.3 nmol•L), but there was no significant difference between the two modes. The total work was significantly higher in the squat (60509 ± 10759 j) compared to the leg press (42875 ± 7010). The squat exercise is more effective at inducing an acute hormonal response. If the leg press exercise is used, the hormonal response may be reduced, which might lead to reduced training adaptations, especially when only a 90º knee angle ROM is used. To induce the maximal hormonal response to resistance exercise, free weight exercises should be used.

"Prostate cancer (Pca) is the number one cancer in U.S. men and a leading cause of cancer-related deaths. The disease is initially dependent upon active male androgens for survival, such as testosterone or dihydrotestosterone. However, relatively inactive androgens like 5-androstenediol (5Adiol) have been considered to play larger roles in disease progression than previously considered. 5Adiol is synthesized in the prostate, is not affected by current anti-androgen therapies, and activates the androgen receptor in human prostate cancer cell lines more effectively than active male androgens. The causal relationship between androgens and prostate cancer progression has significantly risen due to anabolic steroid abuse in competitive sports and recreational athletes. The evidence surrounding an association between androgen abuse and prostate cancer, as well as various other carcinomas, is of great concern within this demographic because of its preventability. Despite their prohibited use, anabolic products continue to be marketed and available for purchase as nutritional supplements. Surveys on current steroid user trends have documented high dosing regimens, extended periods of use, multiple self-diagnosed side effects, and unsafe injection practices. Because few studies have investigated the effects of advertised 5Adiol products on prostate cancer progression, the goal of this study was to investigate whether Value Nutrition’s 5Adiol product possesses comparable mitogenic stimulant activity to testosterone in the androgen-dependent cell line, LNCaP. It should be noted that while this compound is banned by the U.S. Drug Enforcement Administration and is no longer sold through this company, alternative steroids continue to be marketed to consumers. Additional goals included determining whether this product would affect the proliferation of liver cells using the HepG2 cell line, if HepG2 metabolism of the product would play a role in the proliferation of LNCaP cells, and whether the LNCaP cells are capable of converting the 5Adiol product into testosterone. Multiple assays determined that the LNCaP cells were androgen responsive to the 5Adiol product, HepG2 proliferation was stimulated, and HepG2 metabolism of the 5Adiol product increased LNCaP mitogenicity, although significant differences were unattainable primarily due to the LNCaP cells reduced adhesion properties. Because reverse-phase HPLC was unable to detect compounds within 5Adiol even at high concentrations, the mitogenicity observed in both cell lines is unable to be correlated with a particular component in this product. While it is possible that 5Adiol is present at extremely low levels, contamination with other factors, hazardous or not, cannot be ruled out. In conclusion, these results suggest that the use of nutraceuticals have inherent risks for men at risk of developing prostate cancer. The mitogenic effects observed from small levels of unknown compounds in the tested 5Adiol product raise serious questions as to the legitimacy of allowing companies to market and self-regulate their own products."

Orientador: Claudia Herrera Tambeli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-09-19T14:06:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fischer_Luana_D.pdf: 1122094 bytes, checksum: 8b6c9b3ab833b6c7931a0c3408f48170 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos hormônios sexuais na nocicepção da articulação temporomandibular (ATM) de ratos e os possíveis mecanismos envolvidos. A injeção de formalina na ATM em uma concentração (0,5%) que não induziu nocicepção em machos intactos, induziu em machos gonadectomizados e em fêmeas intactas, o que sugere que os níveis fisiológicos de testosterona diminuem o risco de machos desenvolverem nocicepção da ATM. A resposta nociceptiva induzida pela injeção de uma alta concentração de formalina (1,5%) na ATM de machos é significativamente menor que àquela induzida na ATM de fêmeas em diestro, fase do ciclo estral com baixos níveis de estrógeno, mas semelhante àquela induzida na ATM de fêmeas em proestro, faze do ciclo estral com altos níveis de estrógeno. Esse resultado sugere que a nocicepção da ATM, em fêmeas, é exacerbada durante a fase do ciclo estral em que os níveis de estrógeno estão baixos. A administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em fêmeas gonadectomizadas e de testosterona em machos gonadectomizados reduz a resposta nociceptiva induzida pela injeção de formalina na ATM. A influência do sexo e dos hormônios ovarianos na nocicepção induzida pela injeção de formalina ou de glutamato na ATM foi exatamente a mesma, o que demonstra que o efeito antinociceptivo dos hormônios ovarianos na ATM não é estritamente relacionado a nocicepção induzida pela formalina. A semelhança entre estudos clínicos e os resultados obtidos utilizando estes dois agentes nociceptivos sugere que o modelo comportamental de nocicepção da ATM pode ser útil e confiável para estudar os mecanismos envolvidos no efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais na ATM de ratos. A administração de drogas no líquido cefalorraquidiano da região de complexo sensorial trigeminal também é útil para o estudo desses mecanismos, mas o procedimento cirúrgico realizado para a implantação do cateter usado para a injeção pode afetar a expressão dos comportamentos relacionados a nocicepção orofacial. Portanto, a técnica que permite a injeção direta de drogas nessa região, sem a necessidade de procedimentos cirúrgicos contribui para o estudo dos mecanismos envolvidos no efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais na ATM de ratos. A administração, por meio dessa técnica, do antagonista de receptores opióides naloxona no espaço subaracnóide da região do complexo sensorial trigeminal bloqueou o efeito antinociceptivo induzido pelos níveis fisiológicos de estrógeno em fêmeas em proestro e pela administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em fêmeas gonadectomizadas e de testosterona em machos o gonadectomizados. No entanto, a co-administração de naloxona e formalina na ATM bloqueou o efeito antinociceptivo da progesterona e da testosterona, mas não do estrógeno. Esses dados sugerem que mecanismos opióides centrais medeiam o efeito antinociceptivo do estrógeno, da progesterona e da testosterona, enquanto mecanismos opióides periféricos também medeiam o efeito antinociceptivo da progesterona e da testosterona. A administração local de estrógeno, conjugado ou não com a albumina plasmática, na ATM de fêmeas reduziu significativamente a nocicepção induzida pela formalina. Como o estrógeno conjugado com a albumina tem ação restrita a receptores de membrana, esse dado sugere que o estrógeno reduz a nocicepção através de uma ação periférica não genômica. O efeito antinociceptivo do estrógeno foi bloqueado pelo antagonista de receptores estrogênicos ICI 182 780 e pelos inibidores da óxido nítrico sintase, L-NNA, e da guanilato ciclase, ODQ, mas não pelo antagonista de receptores opióides, naloxona. Esse dado sugere que o efeito antinociceptivo periférico do estrógeno é mediado pela ativação da via do óxido nítrico/GMP cíclico. Juntos, os resultados desse estudo demonstram que os níveis fisiológicos de testosterona diminuem o risco de ratos desenvolverem nocicepção da ATM e os de estrógeno diminuem a nocicepção da ATM em ratas. Além disso, a nocicepção da ATM também é diminuída pela administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em ratas e de testosterona em ratos. O efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais é mediado por mecanismos opióides centrais, enquanto mecanismos opióides periféricos medeiam o efeito da progesterona e da testosterona, mas não do estrógeno. De fato, a administração de estrógeno na ATM reduz a nocicepção através de um mecanismo periférico não genômico, mediado pela ativação da via do óxido nítrico-GMPc, mas não pela ativação do sistema opióide periférico / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of sex hormones on temporomandibular joint (TMJ) nociception in rats and the possible mechanisms underlying their effect. The TMJ injection of 0.5% formalin induced nociception in intact females and gonadectomized males, but not in intact males, suggesting that the physiological level of testosterone protect males by decreasing their probability to develop TMJ pain. A higher dose of formalin (1.5%) induced a nociceptive behavior response significantly higher in female rats during diestrus phase of the estrous cycle than in those during proestrus phase and male rats. Since estradiol serum level was higher in proestrus than in diestrus females, this finding suggests that during low estradiol level of the estrous cycle the TMJ nociception is increased in female rats. Systemic administration of estradiol or progesterone in gonadectomized females and of testosterone in gonadectomized males significantly decreased 1.5% formalin-induced TMJ nociception. The role of sex and ovarian hormones in formalin and glutamate-induced TMJ nociception was virtually the same, showing that the antinociceptive effect of ovarian hormones was not exclusively related to the nociception induced by formalin. The similarity between clinical studies and the present results, obtained by using two different nociceptive agents, suggests that the TMJ behavior model may be useful and reliable to study the mechanisms underling the antinociceptive effect of sex hormones in the TMJ. Drug delivery to the medullary cerebrospinal fluid is also useful to study these mechanisms, however, the surgical procedure for implantation of the catheter used for drug delivery may affect the expression of the nociceptive behaviors related to orofacial nociception. Therefore, the technique for direct drug delivery to the medullary cerebrospinal fluid, without catheter implantation, will contribute for the study of the mechanisms underling the antinociceptive effect of sex hormones in the TMJ. The administration, though this technique, of the opioid receptor antagonist naloxone in the medullary region blocked the antinociceptive effect of estradiol, progesterone and testosterone. However, the co-administration of naloxone with formalin into the TMJ blocked the antinociceptive effect of progesterone and testosterone, but not of estradiol. These findings suggest that central opioid mechanisms mediate the antinociceptive effect of estradiol, progesterone and testosterone, while peripheral opioid mechanisms also mediated the antinociceptive effect of progesterone and testosterone. The local administration of estradiol, conjugated or not with the bovine serum albumin, significantly decreased formalin-induced TMJ nociception in female rats. Given that estradiol conjugated with bovine serum albumin is a membrane impermeable compound, these findings suggest that estradiol decreases TMJ nociception by a peripheral nongenomic mechanism. The antinociceptive effect of estradiol was blocked by an estrogen receptor antagonist and by a nitric oxide synthase and a guanilato cyclase inhibitors, but not by a opioid receptor antagonist. These findings suggest that estradiol decreases TMJ nociception in female rats through a peripheral activation of NO-cGMP signaling pathway. Taken together, the findings of this study suggest that the high physiological level of testosterone decreases the risk of male rats develop TMJ pain and that of estradiol decreases TMJ nociception in female rats. Furthermore, TMJ nociception was also decreased by systemic administration of estradiol or progesterone in female and of testosterone in male rats. The antinociceptive effect of sex hormones is mediated by central opioid mechanisms, while peripheral opioid mechanisms mediate the antinociceptive effect of progesterone and testosterone, but not of estradiol. In fact, the administration of estradiol in the TMJ decreases nociception by a peripheral non-genomic mechanism mediated by activation of the nitric oxide-cGMP signaling pathway, but not by opioid receptors / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutor em Odontologia

Orientador: Eliete Luciano / Banca: José Rodrigo Pauli / Banca: Maria Alice Rostom de Mello / Resumo: Os objetivos do presente estudo foram investigar as adaptações endócrinometabólicas em ratos submetidos ao exercício físico de natação associado com a administração de testosterona durante 8 semanas. Ratos jovens Wistar foram divididos em 4 grupos: controle sedentário (CS), controle treinado (CT), testosterona sedentário (TS), testosterona treinado (TT). O protocolo de natação consistiu de 1 hora/dia, 5 dias/semanas, durante 8 semanas, suportando durante a natação uma sobrecarga de 5% do seu peso corporal. A testosterona foi administrada 3 dias/semana, na concentração de 5 mg/kg de peso corporal do animal, por via subcutânea, também por 8 semanas. Ao final da sétima semana de experimento, os ratos foram submetidos aos testes de tolerância à glicose (GTT) e teste de tolerância à insulina (ITT). Após 10 semanas os animais foram sacrificados na condição de repouso. Amostras de sangue foram coletadas para a determinação do hematócrito, glicose, insulina, proteínas totais, colesterol total e triglicérides. Os testículos, a próstata e vesícula seminal, os tecidos adiposos foram analisados em balança analítica. O tecido muscular e hepático foram usados para determinação do glicogênio e da razão proteína/DNA. As adrenais foram pesadas e usadas para determinar o conteúdo de colesterol e ácido ascórbico. A análise estatística foi feita por ANOVA e aplicação do teste de post-hoc de Newman-Keuls, onde adequado, com nível de significância pré-fixado em 5%. Os resultados indicam que os ratos treinados tiveram maior tolerância à glicose comparados com os animais sedentários durante o GTT. Nossos dados mostram que a administração crônica da testosterona mais o treinamento físico foi associada ao aumento da sensibilidade à insulina.O grupo treinado administrado com testosterona mostrou uma maior taxa de desaparecimento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aims of this study were to investigate the endocrine-metabolic adaptations in rats submitted to chronic swimming exercise associate to administration of testosterone during 8 weeks. Young Wistar rats were divided into four groups: sedentary control (CS), trained control (CT), sedentary testosterone (TS), trained testosterone (TT). Training protocol consisted of swimming 1h/day, 5 days/week, during 8 weeks, supporting a load of 5% body weight. Testosterone was administered 3 times a week, in concentration of 5 mg/kg body weight, during 8 weeks. After 7 weeks rats were submitted to glucose (GTT) and insulin (ITT) tolerance tests. After 8 weeks rats were sacrificed in rest. Blood samples were collected to determine hematocrit, glucose, insulin, total protein, total cholesterol and triglyceride. Hepatic and muscular tissues were used to determine glycogen and protein/DNA ratio. Adrenals were weighed and used to determine cholesterol and ascorbic acid contents. The results were analyzed by ANOVA and Newman- Keuls post-hoc test where appropriate and the significance level was 5%. The results indicate that trained rats showed higher glucose tolerance compared to sedentary animals during GTT. Our data showed that chronic exposure to testosterone plus physical training was associated with increase insulin sensitivity. The animals trained and administered with testosterone, showed higher glucose disappearance rates when compared to other groups. Testosterone administration promoted decrease in testicular mass and increase in prostate and seminal vesicle. Training promoted increase in muscle when compared to the sedentary groups, taking us to presuppose that training stimulated glycogen syntheses. The training protocol, testosterone administration or combination of two treatments, resulted in decrease of epididimal and perirrenal adipose tissues weight... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Em resposta a diversos estressores, o hipotálamo de anfíbios secreta o hormônio liberador de corticotropina (CRH), o qual estimula a hipófise a liberar o hormônio adrenocorticoctrópico (ACTH) na corrente sanguínea. O ACTH, por sua vez, atua na glândula inter-renal estimulando a liberação de glicocorticoides, sendo a corticosterona o principal glicocorticoide em anfíbios. Embora a modulação exercida pelos glicocorticoides de diversas respostas fisiológicas de estresse seja fundamental para a manutenção da homeostase em curto prazo, a ativação muito frequente e/ou prolongada do eixo hipotálamo-hipófise-interrenais (HHI) pode inibir processos importantes em longo prazo, tais como a reprodução e a imunocompetência e afetar a síntese de melatonina atuando diretamente sobre a pineal. O objetivo do presente estudo foi avaliar possíveis alterações nos níveis plasmáticos de corticosterona, testosterona, níveis oculares de melatonina, hematócrito e aspectos imunitários (contagem total de leucócitos e capacidade antimicrobiana plasmática - contra Escherichia coli) de machos da perereca Hypsiboas faber em resposta à injeção de ACTH, bem como o curso temporal destas respostas. Amostras de sangue e plasma foram obtidas a partir de 30 machos capturados em campo, dentro de 3 minutos da captura. Os animais foram trazidos para o laboratório e, após dois meses, divididos em seis grupos para serem amostrados em três horários distintos 1 h, 3h e 6h após o tratamento. Para cada horário um grupo controle e um grupo experimental foram adicionados, recebendo uma injeção de 105 &mu;L de solução salina ou de solução de ACTH (0,446 &mu;g de ACTH/g de massa corpórea (grupo experimental)). O tratamento com ACTH aumentou significativamente os níveis plasmáticos de corticosterona e diminuiu os níveis plasmáticos de testosterona bem como os níveis oculares de melatonina após 1 hora. Após 6 h da injeção de ACTH, houve um aumento da porcentagem do hematócrito e dos níveis de melatonina ocular. O tratamento com ACTH não afetou os aspectos imunitários estudados dentro do intervalo amostrado. Os resultados confirmam o papel da ativação do eixo HHI na inibição da secreção de testosterona e na modulação da secreção de melatonina, embora os possíveis efeitos imunomodulatórios possam se dar em intervalos temporais mais tardios / In response for several stressors, the amphibian hypothalamus release the corticotrophin release hormone (CRH), which stimulates pituitary to release the adenocorticotropic hormone (ACTH) in the bloodstream. The ACTH, in your turn, acts in inter renal glands stimulating the glicocorticoids releasing, being the corticosterone the main glicocorticoid in anphibians. While the modulation exercised by the glicocorticoids of diverses physiological responses of the stress is fundamental for de maintainance of homeostasis in short period, the frequent and/or prolongued activation of the hypothamlamus pituitary interenal axis (HHI) could inhibit important process in long periods, as the reproduction and immunocompetence and affect melatonin synthesis acting directly in pineal gland. The objective of the present study was evaluate possible alterations in plasmatic corticosterone levels, testosterone, eyes melatonin levels, hematocrit and immunity aspects (Total count leucocytes and antimicrobian plasmatic capacity - against Escherichia coli) from males of the treefrog Hypsiboas faber in response to ACTH injection, as well, the temporal course of these responses. Blood and plasma samples were obtained from the 30 males captured in the field, whitin 3 minutes from the capture. The animals were transferred to the laboratory and, after two months, divided in six groups to be sampled in three different times 1 h, 3 h and 6 h after treatment. For each time one control group and one experimental group were added, receiving one injection of 105 &mu;L of saline or ACTH solution (0,446 &mu;g de ACTH/g of body mass (experimental group)). The ACTH treatment increase significantly the plasmatic corticosterone levels and decrease the plasmatic testosterone levels, as well, the eye melatonin levels after one hour. After six hours of the ACTH injection, occurred the increase of the hematocrit percentage and the eye melatonin levels. The ACTH treatment did not affect the immunity aspects studied in the sampling interval. The results confirm the role of the activation on the axis HHI in the inhibition of the testosterone secretion and in the modulation of melatonin secretion, althougth the possible immunomodutatory effects could happen in temporal intervals later