A manipulação comportamental é uma das principais correntes teóricas utilizadas para explicar as alterações comportamentais presentes em roedores parasitados pelo Toxoplasma gondii. Vários estudos propõem que o parasitismo pelo protozoário provoca mudanças metabólicas, imunológicas e neuropatológicas que possibilitam o desenvolvimento de mudanças no comportamento dos indivíduos infectados. Contudo, alguns fatores relacionados ao desenvolvimento da manipulação comportamental, ainda, não estão bem elucidados, entre eles, destaca-se o possível efeito do genótipo da cepa infectante nas modificações comportamentais. Neste trabalho, avaliamos o efeito da infecção crônica por cepas cistogênicas geneticamente distintas de T. gondii no comportamento de camundongos. Foram desenvolvidos modelos de infecção experimental com as cepas ME-49 (tipo II) e VEG (tipo III) em camundongos isogênicos BALB/c para avaliação da resposta imune humoral por ELISA, quantificação de parasitas em cistos cerebrais por PCR em tempo real e testes comportamentais como Esquiva Inibitória, Labirinto de Barnes, Labirinto em Cruz Elevado, Campo Aberto e Labirinto em Y visando, respectivamente, a avaliação da aprendizagem - memória, ansiedade, atividade locomotora e aversão ao odor do felino. Nossos dados mostram que camundongos infectados pela cepa VEG apresentaram redução mais acentuada da capacidade de recuperação de memória de longo prazo e alterações motoras mais proeminentes do que os animais infectados pela cepa ME-49. Na avaliação da aversão ao odor do felino, verificamos que a infecção pela cepa VEG induziu uma alteração comportamental mais acentuada no hospedeiro, nas fases iniciais da infecção, do que a infecção pela cepa ME-49, sendo este efeito observado tanto na presença de urina pura de gato como do aminoácido L-felinina. Nossos resultados sugerem que o genótipo da cepa infectante pode influenciar o desenvolvimento de alterações comportamentais em animais infectados pelo T. gondii, tornando o hospedeiro mais suscetível e exposto ao predador, sobretudo em infecções causadas por cepas do tipo III. / The behavioral manipulation is the main theoretical current used to explain the behavioral changes present in rodents parasitized by Toxoplasma gondii. Several studies suggest that protozoan parasitism causes metabolic, immunological and neuropathological changes that allow the development of changes in the behavior of infected individuals. However, some factors related to the development of behavioral manipulation are still not well understood, among them, the possible effect of the genotype of the infecting strain on behavioral modifications is highlighted. In this study, we evaluated the effect of chronic infection by genetically distinct cystogenic strains of T. gondii on the behavior of mice. Experimental models were developed with the ME-49 (type II) and VEG (type III) strains in isogenic BALB / c mice to evaluate the humoral immune response by ELISA, quantification of parasites in brain cysts by real-time PCR and behavioral tests as Passive Avoidance, Barnes Maze, Elevated Plus Maze, Open Field and Y - Maze aiming, respectively, evaluation of learning - memory, anxiety, locomotor activity and aversion to feline odor. Our data showed that mice infected with the VEG strain showed a more pronounced reduction in long-term memory retrieval capacity and more prominent motor alterations than the animals infected with the ME-49 strain. In the evaluation of feline odor aversion, we observed that infection by the VEG strain induced a more marked behavioral change in the host in the early stages of infection than the infection by the ME-49 strain, and this effect was observed both in the presence of urine pure cat as the amino acid L-felinine. Our results suggest that the genotype of the infecting strain may influence the development of behavioral changes in T. gondii infected animals, making the host more susceptible and exposed to the predator, especially in infections caused by type III strains.

A toxoplasmose afeta cerca de um bilhão de pessoa em todo mundo, é geralmente assintomática, apesar de doença ocular ou doenças grave e letal em fetos, pacientes com HIV e transplantados. A sorologia é a principal ferramenta para o diagnóstico e determinação de incidência, que é uma tarefa difícil, devido à alta prevalência na maioria dos países. Estudos de incidência são ideais em crianças, mas este grupo é protegido pela sociedade e de difícil abordagem por métodos invasivos como a punção venosa. A saliva pode ser uma ótima alternativa por sua coleta não ser invasiva, aceitável para crianças, e conter pequenas quantidades de IgG, eliminada através da mucosa gengival e fluido crevicular. Métodos de detcção de anticorpos disponíveis no mercado estão focados em amostras de soro, com baixa sensibilidade e são raros os relatos de pesquisas com material biológico alternativo, como a saliva. Sendo assim, padronizamos imunoensaios com alta sensibilidade para detecção de anticorpos anti- T. gondii na saliva frente a amostras de soro de 20 voluntários adultos. A sensibilidade e especificidade dos nossos dot-ELISA e ELISA de captura com proteína A foram semelhantes entre soro e saliva. Também testamos 100 amostras de saliva de universitários em nossos ensaios, onde mostramos uma frequência da toxoplasmose de 19% (IC 95% 12-28%). Imunoensaios para detecção de IgG anti-T. gondii em saliva são uma ferramenta muito promissora para estudos epidemiológicos da toxoplasmose em crianças ou outros grupos protegidos. / Toxoplasmosis that affects about one billion people worldwide is usually asymptomatic, despite ocular disease and severe and lethal disease in fetuses, AIDS patients and transplant recipients. Serology is the main approach for diagnosis and incidence determination is a difficult task due to high prevalence in most countries. Incidence studies are feasible in children but this age group is protected and difficult to approach by invasive methods as venipuncture. Saliva could be obtained by non-invasive procedure, acceptable for children, and it contains small amounts of IgG from mucosal and gingival crevicular fluid. Available antibody detection methods are focused in serum samples, with low sensitivity and few reports of alternative biological material, like saliva. Here, we standardized immunoassays with high sensitivity for detection of anti-T. gondii IgG in paired saliva and serum sample from 20 adult volunteers, which allows DOT-ELISA and a Protein A IgG capture assay. The sensitivity and specificity of the saliva DOT-ELISA were similar to sera ELISA. We also tested 100 saliva samples from university graduates in all assays, showing 19% (95%CI 12-28%) frequency of toxoplasmosis in this group, lower than reported for our area. Protein A IgG capture saliva assay was also efficient with similar results. Immunoassay with saliva IgG for toxoplasmosis is a very promising tool for use for the epidemiology of toxoplasmosis in children or other protected groups.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-02T13:19:25Z No. of bitstreams: 1 Flaviana Santos Wanderley.pdf: 2218547 bytes, checksum: 33783f2ee07821db7f23103bcb5d7838 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T13:21:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flaviana Santos Wanderley.pdf: 2218547 bytes, checksum: 33783f2ee07821db7f23103bcb5d7838 (MD5) Previous issue date: 2013-02-26 / The objective was to evaluate the clinical, pathological, and reproductive aspects of the Toxoplasma gondii experimental infection in goats. Firstly was studied the transmission T. gondii in goats inseminated vaginally with semen contaminated with strain tachyzoites CPG (genotype III). Were divided into two experimental groups (G1 and G2) each with five goats. The females of the G1 were inseminated with semen containing 1x105 tachyzoites and females G2 (control) with semen free tachyzoites (insemination = day 0). To confirm infection were performed serologic tests (indirect immunofluorescence) and detection of parasitic DNA (polymerase chain reaction) in blood and organs. For monitoring pregnancy ultrasound exams were used. In G1, seroconversion occurred between days 7 and 14 at 4/5 goats. In the same group, the DNA of T. gondii was present between days 7 and 49 in blood and various tissues of 3/5 goats and two kids born at full term. In G2, all samples were negative for both techniques. In the second experiment, the goats of the G1 in the first experiment were monitored in the acute and chronic phases of infection; embryonic reabsorption occurred in 4/5 goats in the acute phase, while in the chronic phase were observed in anestrus 2/5 goats, 1/5 goats had both hydrosalpinx and ovarian cysts. The third experiment investigated to venereal transmission of T. gondii in goats mated with breeder experimentally infected orally with oocysts of the ME-49 strain. Ten goats were allocated into two groups (G1 and G2) each with five animals. The female goats in G1 were mated with a breeder that had been experimentally infected with T. gondii oocysts whereas those in G2 (control) were mated with a serologically negative goat. The infection of the breeder and the females was confirmed through clinical, serological, molecular and histopathological findings. Seroconversion ocurred in the breeder infected on the 7th day post-infection (d.p.i.) and T. gondii DNA was present in the blood and semen in the 3th d.p.i. In G1, 2/5 goats seroconverted and DNA was present in the blood in 2/5 goats. In G2, all goats were negative in all tests. With regards to gestational development, the goats in G1 ocurred embryonic reabsorption in 1/5 in day 34 after mating, 1/5 aborted in day 42 after mating and 3/5 goats gave birth to full-term healthy kids. One of the kids exhibited PCR-positive blood at birth. In total, 2/5 of the females in G1 and 4/5 of the kids born alive in G1 exhibited PCR-positive in at least one organ. In G2, the goats gave birth goats healthy. In conclusion, artificial insemination with semen containing tachyzoites of T. gondii infected goats, causing reproductive pathologies during acute and chronic phases of infection. Furthermore, it was found that venereal transmission of T. gondii occurs in goats mated with an infected breeder. / Objetivou-se estudar os aspectos clínicos, patológicos e reprodutivos da infecção experimental por Toxoplasma gondii em caprinos. No primeiro experimento foi avaliada a transmissão de T. gondii em cabras inseminadas via vaginal com sêmen contaminado com taquizoítos da cepa CPG (Genótipo III). Foram formados dois grupos experimentais (G1 e G2) constituídos por cinco cabras cada um. As fêmeas do G1 foram inseminadas com sêmen contendo 1x105 taquizoítos e as fêmeas do G2 (controle) com sêmen livre de taquízoitos (inseminação=dia 0). Para confirmar a infecção foram realizados testes sorológicos (reação de imunofluorescência indireta) e detecção do DNA parasitário (reação em cadeia da polimerase) no sangue e órgãos. Para o acompanhamento gestacional foram utilizados exames ultrassonográficos. No G1, a soroconversão ocorreu entre os dias 7 e 14 em 4/5 cabras. Neste mesmo grupo, o DNA de T. gondii foi detectado entre os dias 7 e 49 no sangue e vários tecidos de 3/5 cabras e em dois cabritos nascidos a termo. No G2, todas as amostras foram negativas para ambas as técnicas. No segundo experimento, as cabras do G1 do primeiro experimento foram monitoradas nas fases aguda e crônica da infecção; reabsorção embrionária ocorreu em 4/5 cabras na fase aguda, enquanto que na fase crônica foram observados anestro em 2/5 cabras, hidrossalpinge em 1/5 cabras e cisto ovariano em 1/5 cabras. No terceiro experimento pesquisou-se a transmissão venérea de T. gondii em cabras acasaladas com o reprodutor infectado experimentalmente por via oral com oocistos da cepa ME-49. Dez cabras foram alocadas em dois grupos (G1 e G2) cada um com cinco animais, sendo as cabras do G1 acasaladas com o bode infectado e G2 (controle) acasaladas com bode sorologicamente negativo. A infecção do reprodutor e das cabras foi confirmada por meio dos achados clínicos, sorológicos, moleculares e histopatológicos. No reprodutor, a soroconversão ocorreu no 70 dia pós-infecção (d.p.i.) e o DNA para T. gondii esteve presente no sangue e sêmen no 30 d.p.i. No G1, 2/5 cabras soroconverteram e em 2/5 cabras o DNA foi detectado no sangue. As cabras do G2 e o reprodutor não infectado foram negativos em todos os testes. Em relação ao desenvolvimento gestacional, nas cabras do G1 ocorreu reabsorção embrionária em 1/5 no 340 dia após o acasalamento, 1/5 abortou no 420 dia após acasalamento e 3/5 pariram cabritos saudáveis a termo. No G1, o DNA de T. gondii estava presente no sangue em 1/5 cabritos ao nascimento e em pelo menos um órgão em 2/5 cabras e 4/5 cabritos nascidos vivos. As cabras do G2 pariram cabritos saudáveis. A partir dos resultados obtidos, conclui-se que a inseminação artificial com sêmen contaminado com taquizoítos de T. gondii infecta cabras, causando patologias reprodutivas durante as fases aguda e crônica da infecção. Além disso, constatou-se que a transmissão venérea por T. gondii ocorre em cabras acasaladas com reprodutor caprino infectado experimentalmente.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-05T15:07:53Z No. of bitstreams: 1 Silvio Gomes de Sa.pdf: 1708875 bytes, checksum: a786d439ef8b4d1c09becfbe1f091fb2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T15:07:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silvio Gomes de Sa.pdf: 1708875 bytes, checksum: a786d439ef8b4d1c09becfbe1f091fb2 (MD5) Previous issue date: 2014-06-30 / The aim of the present study was to assess the occurrence of antibodies anti-Mycoplasma gallisepticum and anti-Toxoplasma gondii among chickens and turkeys on rural family properties in the state of Pernambuco, Brazil, as well as to identify risk factors associated with these infections. In chickens, antibodies anti-Mycoplasma gallisepticum were sought using the Immunoenzymatic assay (ELISA) and antibodies anti-Toxoplasma gondii were sought using the Immunofluorescence assay (IFA). In turkeys, antibodies anti-Toxoplasma gondii were investigated using the Modified Agglutination Test (MAT). In turkeys, antibodies anti-Toxoplasma gondii were investigated based on 204 serum samples on 28 properties. In chickens, antibodies anti-Toxoplasma gondii were investigated based on 629 serum samples from 39 properties, of which 421 samples came from 29 properties that participated in the study of risk factors. Antibodies anti-Mycoplasma gallisepticum were analyzed based on 300 serum samples from 23 properties, all of which participated in the study of risk factors. In the present study, an investigative questionnaire was applied on the properties and risk factors were checked based on univariate analysis (chi-squared test or Fischer’s exact test), followed by multivariate analysis (Logistic regression). The relative frequency of turkeys that were positive for antibodies anti-T. gondii was 11% (21/204). Thirteen (13) properties contained at least one reactive turkey (46.5%). The general prevalence of chickens that were positive for antibodies anti-Toxoplasma gondii in the region was 28% (176/629). The following variables exhibited significant associations with chicken infections in the multivariate analysis (logistic regression): the slaughter of animals on the properties (OR=1,66; p=0,027); the presence of sheep (OR=1,96; p= 0,004); the occurrence of sheep births (OR=1,72; p= 0,014) and reproductive disorders among sheep (OR=2,29; p=0,003). The prevalence of chickens infected by Mycoplasma gallisepticum was 53.33% (157/300), while 100% of the properties exhibited foci. The following risk factors were confirmed in the multivariate analysis: the presence of poultry such as Numida meleagris (OR=2,22; p=0,005); different species of parrots (OR=1,72; p=0,027) and the presence of passerines (OR=1,88; p=0,007). The results of the present study indicate that Mycoplasma gallisepticum and Toxoplasma gondii infection are quite widespread in the region studied. Chickens and turkeys infected with Toxoplasma gondii could serve as a source of human infection if their meat and viscera are poorly cooked and then consumed. The large number of Mycoplasma gallisepticum foci is significant, considering the dangers associated with backyard animal reproduction and the risks for the surrounding industrial poultry plants. The chickens and turkeys assessed in the present study were good indicators of the presence of these pathogens in the environment, highlighting the need for greater care on behalf of sanitary authorities in relation to control and educating the population. / Objetivou-se estudar a ocorrência de anticorpos anti Mycoplasma gallisepticum e Toxoplasma gondii em galinhas e perus de propriedades familiares rurais no estado de Pernambuco, Brasil e identificar os fatores de risco associados a estas infecções. Em galinhas, pesquisaram-se anticorpos contra Mycoplasma gallisepticum por meio de ensaio de imunoadsorção enzimática indireto (ELISA) e contra Toxoplasma gondii por meio da Imunofluorescência Indireta (RIFI); para pesquisa de anticorpos contra Toxoplasma gondii em perus utilizou-se o teste de Aglutinação Modificado (MAT). Para pesquisa de anticorpos contra Toxoplasma gondii em perus foram analisadas 204 amostras de soro sanguíneo em 28 propriedades. Para pesquisa de anticorpos contra Toxoplasma gondii em galinhas foram analisadas 629 amostras de soro sanguíneo originadas de 39 propriedades, das quais 421 amostras de 29 propriedades participaram do estudo dos fatores de risco. Para pesquisa de anticorpos contra Mycoplasma gallisepticum foram analisadas 300 amostras de soro sanguíneo de 23 propriedades e todas as propriedades participaram do estudo dos fatores de risco. Para este estudo, um questionário investigativo foi aplicado nas propriedades e os fatores de risco foram verificados numa análise univariada (Qui-quadrado ou Exato de Fischer) seguida de análise multivariada (Regressão Logística). A frequência relativa de perus positivos para anticorpos anti-T. gondii foi de 11% (21/204) e treze (13) foram as propriedades com pelo menos um peru reagente (46,5%). A prevalência de galinhas positivas para anticorpos contra Toxoplasma gondii na região foi de 28% (176/629). A ocorrência de abate de animais nas propriedades (OR=1,66; p=0,027), a presença de ovinos (OR=1,96; p= 0,004), a ocorrência de partos de ovinos (OR=1,72; p= 0,014) e distúrbios reprodutivos em ovinos (OR=2,29; p=0,003) foram as variáveis que apresentaram associação significativa com a infecção das galinhas na análise multivariada (regressão logística). A prevalência de galinhas infectadas por Mycoplasma gallisepticum foi de 53,33% (157/300) com 100% de propriedades foco e os fatores de risco confirmados na análise multivariada foram a criação de outras espécies de aves nas propriedades como Numida meleagris (OR=2,22; p=0,005), espécies de psitacídeos (OR=1,72; p=0,027) e a criação de passeriformes (OR=1,88; p=0,007). Os resultados indicaram que a infecção por Mycoplasma gallisepticum e Toxoplasma gondii ocorre na região estudada de forma bastante disseminada. Tanto perus quanto as galinhas infectadas por Toxoplasma gondii podem servir de fonte de infecção para humanos se estes consumirem carnes e vísceras mal cozidas. O grande número de focos para Mycoplasma gallisepticum é de grande importância, tendo em vista os prejuízos causados à criação de fundo de quintal e os riscos para as criações industriais circunvizinhas. As galinhas e perus neste estudo foram bons indicadores da presença destes patógenos no ambiente suscitando maior atenção das autoridades sanitárias em relação à educação da população e ao seu controle.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-05-21T19:50:01Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Hanstter Hallison Alves Rezende - 2015.pdf: 1875029 bytes, checksum: a2cbf1f53df5830e4fdd38a866fc6ff4 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-05-21T19:53:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Hanstter Hallison Alves Rezende - 2015.pdf: 1875029 bytes, checksum: a2cbf1f53df5830e4fdd38a866fc6ff4 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-21T19:53:32Z (GMT). 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The aim of this study was to verify the prevalence of intestinal parasites from stray cats in Goiania-GO, to verify the seroprevalence of anti-T. gondii antibodies through the modified aglutination test (MAT) and to perform the evaluation of the accuracy of the parasitological tests applied. Therefore 155 samples of feces and 50 blood samples from stray cats from the Zoonosis Center of Goiania were collected during the year of 2012. The feces samples were processed by the Willis (gold standard), Sheather, Faust and Hoffman-Janer-Pons-Lutz (HJPL) techniques. The MAT was performed in the blood samples. The accuracy was performed through the determination of sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV), negative predictive value (NPV), and kappa index (k). The intestinal parasites prevalence in the feces from stray cats was 71.68% (115/154). The most prevalent helminth was Ancylostomatids (83.48%, 96/115) and the most prevalent protozoan in monoparasitism was Cystoisospora sp (7.83%, 9/115). T. gondii presented high prevalence (18.27%, 21/115) in fecal samples, 64% in blood samples (32/50) while 36% seronegative (18/50). The accuracy showed that the HJPL and Sheather techniques presented association to the golden standard for the intestinal parasites diagnosis. For the specific diagnosis of T. gondii oocysts the Faust techniques was the one with high accuracy in comparasion to the golden standard, with we emphasize the importance of using two parasitological techniques for the diagnosis of intestinal parasites / O gato doméstico é um importante transmissor de agentes zoonóticos para o homem, em especial Toxoplasma gondii. O gato infectado é capaz de eliminar milhões de oocistos no meio ambiente, provocando uma contaminação maciça nestes locais, sendo considerado um problema de saúde pública. A toxoplasmose é uma doença com alta prevalência em todo o mundo, sendo o gato responsável pela perpetuação do parasito. Avaliar a acurácia de métodos parasitológicos é de extrema importância para melhorar o diagnóstico laboratorial veterinário, utilizando testes de alta sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade. O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalência de parasitos intestinais em gatos errantes em GoiâniaGO, verificar a soroprevalência de anticorpos anti-T. gondii pelo teste de aglutinação modificado (MAT) e realizar a avaliação da acurácia de técnicas parasitológicas aplicadas no diagnóstico de parasitos intestinais. Foram coletadas 155 amostras de fezes no ano de 2012 no Centro de Controle de Zoonoses de Goiânia-GO e 50 amostras de sangue de gatos no mesmo período. As amostras de fezes foram processadas pelos métodos de Willis (padrão-ouro), Sheather, Faust e Hoffman-Janer-Pons-Lutz (HJPL). Nas amostras de sangue foi realizado o MAT. A análise de acurácia foi realizada determinando a sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (VPN) e índice kappa (k). A prevalência de parasitos intestinais no ano de 2012 foi de 71,68% (115/154), sendo os Ancilostomídeos o helminto mais prevalente 83,48% (96/115), o protozoário mais prevalente foi Cystoisospora sp. em monoparasitismo 7,83% (9/115). T. gondii apresentou alta prevalência: 18,27% (21/115). Ao analisar a soroprevalência de um grupo de 50 animais, 64% (32/50) eram soropositivos e 36% (18/50) soronegativos. A análise de acurácia demonstrou que as técnicas de HJPL e Sheather apresentaram associação ao padrão-ouro para o diagnóstico de parasitos intestinais. No diagnóstico específico de oocistos de T. gondii a técnica de Faust apresentou melhor acurácia comparada ao padrão-ouro, com isso ressaltamos a importância do uso de duas técnicas parasitológicas para o diagnóstico de parasitos intestinais.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Aline A Barbaresco.pdf: 3370221 bytes, checksum: 707471f496b902352a55ab3c490d78b1 (MD5) Previous issue date: 2009-11-05 / The infection caused by Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi, Rubella virus, Cytomegalovirus (CMV) and Treponema pallidum, can reach the fetus via the placenta or transamniótica may cause different damage. The severity of the infection or even abortion, depend on the virulence of the strain of microorganism, the immune response of the mother and the period. The aim of this study was to analyze the results of serological, pathological and parasitological material for abortive infections with risk of vertical transmission, with emphasis on toxoplasmosis. They were invited to participate in the study, women who miscarried and complete or incomplete, attended at two public hospitals in Goiânia, Goiás, between the period June 2008 to June 2009. Were interviewed through a questionnaire and collected blood samples and abortive material. There were immunologic tests for toxoplasmosis, Chagas disease, rubella, cytomegalovirus and syphilis and pathology in cytogenetic. 55% of women were aged 20 to 30 years of age. The majority (68%) had gestational ages ranging from 7-14th weeks. 54.3% of women had completed high school or incomplete. Regarding the number of abortions, most women (69%) had only one abortion and minority (2.9%) were already in the fourth or fifth abortion. For the analysis of serology, infection with the risk of vertical transmission was more frequent with the CMV 97.1% positivity and then the rubella 95.2%. Toxoplasmosis has a percentage of 54.3%, Chagas disease by 1.9% and syphilis by 0.95%. The analysis of the biopsy showed that 63.1% showed inflammation and 34% absence of inflammation. Analysis of serological, pathological and parasitological of 105 women, 57 were seropositive for T. gondii. It was observed that 77.1% showed inflammation, detected in pathological examination. None has tested positive for Polymerase Chain Reaction (PCR) and inoculation in mice. This study demonstrated the high frequency of seropositive for CMV and rubella then toxoplasmosis, Chagas disease and syphilis in our country. The elucidation of the cause of miscarriage is still not routine in our country. These data showed that the prevalence of disease with risk of congenital transmission in patients with spontaneous abortion is important, more research is needed to elucidate the etiology of abortion. Women's health should receive more attention from our managers because primary care is the best and most efficient path to be followed in order to quality of life for mothers and their future children. / A infecção primária causada por Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi, Rubella virus, Citomegalovirus (CMV) e Treponema pallidum, podem atingir o concepto por via transplacentária ou transamniótica podendo causar diferentes danos. A gravidade da infecção ou até mesmo o aborto, dependem da virulência da cepa do microrganismo, da resposta imune da mãe e do período. O objetivo deste estudo foi analisar os resultados sorológicos, anatomopatológicos e parasitológicos de material abortivo para infecções com risco de transmissão vertical, com ênfase na toxoplasmose. Foram convidadas para participar da pesquisa, mulheres que sofreram aborto espontâneo completo e/ou incompleto, atendidas em duas maternidades públicas em Goiânia-Goiás, entre o período de junho 2008 a junho de 2009. Foram entrevistadas, por meio de um questionário, e coletadas amostras de sangue e material abortivo. Realizaram-se testes imunológicos para toxoplasmose, doença de Chagas, rubéola, citomegalovírus e sífilis e o exame anatomopatológico nos restos ovulares. 55% das mulheres tinham entre 20 a 30 anos de idade. A maioria (68%) apresentou idade gestacional entre 7ª a 14ª semanas. 54,3% das mulheres tinham o ensino médio completo ou incompleto. Em relação ao número de aborto, a maioria das mulheres (69%) tiveram apenas um aborto e a minoria (2,9%) já estavam no quarto ou quinto aborto. Pela análise da sorologia, a infecção com risco de transmissão vertical mais frequente foi o CMV com 97,1% de positividade e em seguida a rubéola com 95,2%. A toxoplasmose teve um percentual de 54,3%, a doença de Chagas de 1,9% e a sífilis de 0,95%. A análise dos laudos de biópsia demonstrou que 63,1% apresentaram inflamação e 34% ausência de inflamação. Das análises sorológica, anatomopatológica e parasitológica das 105 mulheres, 57 foram soropositivas para T. gondii. Observou-se que 77,1% apresentaram inflamação, detectados no exame anatomopatológico. Nenhuma teve resultado positivo para a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e para inoculação em camundongos. Este estudo demonstrou a alta frequência de soropositivas para CMV e rubéola em seguida de toxoplasmose, doença de Chagas e sífilis em nosso meio. A elucidação da causa dos abortos espontâneos ainda não é rotina em nosso país. Estes dados demonstraram que a prevalência de doenças com risco de transmissão congênita nas pacientes com abortamento espontâneo é importante, sendo necessário mais pesquisas visando esclarecer a etiologia do aborto. A saúde da mulher deve receber mais atenção de nossos gestores, pois a atenção primária é o melhor e o mais eficiente caminho a ser seguido visando uma qualidade de vida para mães e seus futuros filhos.

A toxoplasmose é uma protozoose de alta prevalência no Brasil, causada pelo Toxoplasma gondii, sendo transmitida pela ingestão de alimentos contaminados com oocistos, excretados em fezes de felinos, ou cistos, em carnes cruas ou mal cozidas. A doença é usualmente assintomática, mas em fetos ou pacientes com imunodepressão, pode ser devastadora. Neste trabalho, estudamos a prevalência sorológica da infecção em animais de diferentes regiões do estado de São Paulo, tanto de vida livre, cães (200/ABC) como indicadores ambientais, e gatos (100/São Paulo) como hospedeiros definitivos, e em animais de produção, bovinos (200/Taquarituba), suínos (200/Osasco), caprinos( 200/Botucatu), ovinos (200/São Manuel) e frangos de corte(185/Botucatu), além de estudos parasitológicos em gatos e águas sob suspeita. Foram padronizados ELISA para cada espécie animal, utilizando índices adequados e reprodutíveis, com confirmação por Western Blotting e determinação da avidez em amostras positivas. A prevalência da toxoplasmose animal foi determinada sendo crescente em suínos (8.5%), bovinos (11%), caprinos (17%), ovinos (31%), felinos (40%) e cães (50,5%), não sendo encontrada em frangos de corte. Em suínos, caprinos, cães e gatos, a freqüência de anticorpos de baixa avidez sugere que a transmissão da infecção é constante durante a vida do animal, mas em bovinos e ovinos não foram encontrados anticorpos de baixa avidez, sugerindo infecção precoce ou sazonal na vida do animal. Pela alta taxa de infecção recente em felinos, é possível prever uma fração significativa de animais excretando oocistos, embora sem comprovação parasitológica. A avaliação da presença de anticorpos anti-T.gondii deve ser criteriosa, sendo que os reagentes de hemaglutinação para uso humano fornecem resultados erráticos nesta medida. A pesquisa de oocistos na água é de baixa sensibilidade, devendo ser feita em materiais colhidos no período de suspeita da transmissão. Em São Paulo, o risco de transmissão da toxoplasmose está relacionado a quase todas as fontes de infecção pesquisadas, tornando necessários estudos para o melhor manejo dos animais de consumo humano e tratamento de água, com eliminação de gatos errantes. / Toxoplasmosis, caused by Toxoplasma gondii and highly prevalent protozoan disease in Brazil, is mainly transmitted by ingestion of contaminated food and water, both by oocysts, excreted in cat feces, or cysts from undercooked meat from warm-blooded animals. Usually asymptomatic, it is extremely severe in the fetus or immunosuppressed patients. In this work, we studied the serological prevalence of toxoplasmosis in animals from several regions of the São Paulo State, both free living, as dogs (ABC) as environmental contamination index, and cats (São Paulo, as definitive hosts, or livestock as cattle (Taquarituba), swine (Osasco), goats (Botucatu), sheep (São Manuel) and fowls (São Paulo), with parasitological studies in cats and suspicious drinking water. We standardized ELISA for each species, using reproducible and adequate indexes, with Western blot confirmation and avidity assays in positive samples. Toxoplasmosis prevalence was increasing in swine (8.5%), cattle (11%), goats (17%), sheep (31%), cats (40%) and dogs (50.5%), without positive sample in fowls. Goats, pigs, dogs and cats presented 5-20% low avidity antibody samples, suggesting sustained transmission during animal life, but cattle and sheep presented only high avidity samples, suggesting an seasonal or early in life infection. Due to the high recent infection rate in cats, it is possible to preview a significant oocyst excreting cat frequency, despite parasitological evidence. Antibody determination must be carefully evaluated, as human hemagglutination reagents give erratic information. Oocyst detection in drinking water presented very low sensitivity and must be performed only in water collected at the period of the infection. In São Paulo, almost all of tested sources are able of toxoplasmosis transmission, reinforcing the need of better management of livestock, adequate water treatment and elimination of free living cats.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-09T11:44:34Z No. of bitstreams: 1 hugovieirafajardo.pdf: 1531404 bytes, checksum: f5fe49445c6f2c8dfc323eea58325b41 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-13T15:40:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 hugovieirafajardo.pdf: 1531404 bytes, checksum: f5fe49445c6f2c8dfc323eea58325b41 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T15:40:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 hugovieirafajardo.pdf: 1531404 bytes, checksum: f5fe49445c6f2c8dfc323eea58325b41 (MD5) Previous issue date: 2011-03-01 / A toxoplasmose é uma zoonose mundialmente disseminada causada pelo protozoário intracelular obrigatório Toxoplasma gondii. Os felídeos são os únicos hospedeiros definitivos, pois neles ocorre a reprodução sexuada e eliminação de oocistos pelas fezes, enquanto que o homem, outros mamíferos e as aves são hospedeiros intermediários e não possuem esta característica, transmitindo a doença por via congênita ou principalmente quando sua carne é ingerida na alimentação por outros animais. O hábito alimentar do brasileiro e a grande importância econômica do país no cenário internacional da pecuária bovina de corte, objetivaram este trabalho a realizar um estudo soroepidemiológico da toxoplasmose bovina na Zona da Mata Mineira e detecção dos fatores de risco de infecção e disseminação do parasito entre os bovinos criados para o abate. Para isso, foram coletadas 1200 amostras de sangue de bovinos para análise sorológica, utilizando-se a técnica de reação de imunofluorescência indireta (RIFI); também foi feita uma visita às propriedades rurais de onde provinham estes animais abatidos, e realizado um questionário epidemiológico com os produtores rurais destes estabelecimentos, com perguntas que esclareciam algumas dúvidas sobre o manejo e condições sanitárias das propriedades em questão que poderiam influenciar e servir como fatores de risco no ciclo deste parasito. Encontramos uma prevalência de 2,68% de animais positivos analisados para anticorpos anti-T.gondii da classe IgG, e com relação aos fatores de risco, os que envolvem a atuação de um médico veterinário na criação, sinais clínicos da doença e presença de felinos nas propriedades obtiveram um destaque nos resultados encontrados como fatores com consideráveis níveis de significância estatística e correlação positiva com a soropositividade dos animais. / The toxoplasmosis is a zoonose worldwide disseminated, caused by the obligatory intracellular protozoan Toxoplasma gondii. The felines are the only definitive hosts, because in this host the parasites can reproduce sexually and eliminate oocistos through the host feaces. The man kind, like other mammals, and also the birds are intermediary hosts, transmitting the toxoplasmosis congenitally or mainly when its meat is ingested by other animals. Brazilian’s food habit and the great economical importance of the country in the international cattle field are important factors that justify the investigation about the prevalence of toxoplasmosis in cattle. Therefore, the purpose of this work was to realize a seroepidemiologic study of the bovine toxoplasmosis at the Zona da Mata, in Minas Gerais. Looking forward to elucidate the risk factors of infection and insemination from the parasite in between the cattle designated to slaughter. For that, 1200 samples of cattle blood were collected for the serological analysis, using the indirect reaction of imunofluorescence technique (IRIF); visits to the rural properties where those animals came were also realized and on those occasions the rural producers from these properties responded to a epidemiological questionnaire with questions about the properties managing and sanitary conditions, that could act as risk factors of infection by T. gondii. Among the 1195 animals tested for IgG anti-T. gondii, using the IRIF technique 32 presented themselves seropositives, which means 2,68% of prevalecence. Bovines from 53 properties located in the Zona da Mata Mineira were analized. From these 53 properties, 17 (30,07%) showed one or more serologically positives animals for T. gondii. With respect to risk factors, the ones that involve the actuation of a Veterinary Doctor in the raising, clinical signs of the disease and the presence of felines in the properties got a highlight on the results found as factors with considerable levels of statistic significance and positive relations to the seropositivity of the animals.

Orientador: Cláudio Lúcio Rossi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T13:51:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nascimento_FernandaSantos_D.pdf: 5313856 bytes, checksum: fd526ebe03ae5465c13afe95ffe8df9a (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A neurotoxoplasmose é considerada uma grave complicação em pacientes com comprometimento do sistema imune e em crianças congenitamente infectadas pelo Toxoplasma gondii. O presente estudo abordou três aspectos da neurotoxoplasmose, o diagnóstico molecular, a resposta imune e a relação desta infecção com transtornos mentais. Com relação ao diagnóstico molecular, a eficiência das técnicas de nested-PCR (nPCR) e PCR convencional (PCRc) em detectar DNA do T. gondii foi avaliada em nove amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com neurotoxoplasmose, cinco amostras de LCR de pacientes com outras desordens neurológicas (dois com neurocriptococose, dois com neurosífilis e um com neurocisticercose) e amostras artificiais contendo diferentes concentrações do parasito. A nPCR foi positiva em todos os nove pacientes com neurotoxoplasmose, enquanto a PCRc foi positiva em somente cinco casos. As duas técnicas de PCR foram negativas em LCR de pacientes com outras desordens neurológicas. Nas amostras artificiais, a concentração de taquizoítos detectada por nPCR foi dez vezes menor do que aquela detectada por PCRc. Para avaliar a resposta imune, anticorpos das subclasses da IgG anti-T. gondii foram pesquisados em 19 amostras de LCR de pacientes com neurotoxoplasmose, utilizando ELISA padronizada com uma preparação antigênica de cistos do parasito. Os anticorpos IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 foram detectados em 84,2%, 73,7%, 36,8% e 36,8% dos pacientes, respectivamente. Não foram encontradas diferenças significativas entre as sensibilidades e as médias das absorbâncias das reações ELISA para IgG1 e IgG2, porém, as sensibilidades e as médias das absorbâncias das reações para essas duas subclasses foram significativamente maiores do que as encontradas nas reações ELISA para IgG3 e IgG4. A associação entre toxoplasmose e transtornos mentais foi investigada comparando as prevalências e/ou as concentrações dos anticorpos IgG, IgM e IgA anti-T. gondii, detectados por reações imunoenzimáticas, em amostras de soro de 41 pacientes com esquizofrenia, 38 pacientes com transtornos do humor e 95 voluntários sadios. Os anticorpos IgG foram detectados em 43,9% dos pacientes com esquizofrenia, 52,6% dos pacientes com transtornos do humor e 28,4% dos voluntários sadios. A prevalência da IgG e as concentrações desse anticorpo nos pacientes com transtornos do humor foram significativamente maiores do que as encontradas em voluntários sadios (p=0,0204 e p=0,0059, respectivamente). Por outro lado, não foram encontradas diferenças significativas nesses dois parâmetros entre pacientes com esquizofrenia e voluntários sadios ou entre os pacientes com esquizofrenia e transtornos do humor. Os anticorpos IgA foram detectados em um paciente (2,6%) com transtorno do humor e em um (1,1%) voluntário sadio, enquanto os anticorpos IgM foram detectados em dois pacientes (5,2%) com transtornos do humor. O presente estudo indica que a nPCR pode ser uma ferramenta potencialmente útil para a confirmação diagnóstica da infecção do sistema nervoso central pelo T. gondii e sugere que esse parasito poderia ser um dos possíveis fatores causais dos transtornos do humor. Estudos adicionais são necessários para compreender melhor a fisiopatologia da neurotoxoplasmose e sua associação com outras doenças / Abstract: Neurotoxoplasmosis is considered a serious complication in patients with an impaired immune system and in children congenitally infected by Toxoplasma gondii. The present study addressed three aspects of neurotoxoplasmosis, namely, the molecular diagnosis, the immune response and the relationship of this infection to mental disorders. With regard to molecular diagnosis, the ability of nested-PCR (nPCR) and conventional PCR (cPCR) to detect T. gondii DNA was assessed in nine cerebrospinal fluid (CSF) samples from patients with neurotoxoplasmosis, five CSF samples from patients with other neurological disorders (two with neurocryptococcosis, two with neurosyphilis and one with neurocysticercosis) and artificial samples containing different concentrations of the parasite. The nPCR was positive in all nine patients with neurotoxoplasmosis whereas the cPCR was positive in only five cases. Both PCR procedures were negative in CSF from patients with other neurologic disorders. In the artificial samples, the tachyzoite concentrations detected by nPCR were ten times lower than those detected by cPCR. To assess the immune response, 19 CSF samples from patients with neurotoxoplasmosis were screened for IgG subclass antibodies to T. gondii using an ELISA standardized with an antigenic preparation from parasite cysts. IgG1, IgG2, IgG3 and IgG4 antibody subclasses were detected in 84.2%, 73.7%, 36.8% and 36.8% of the patients, respectively. There were no significant differences in the ELISA sensitivities and mean absorbances for IgG1 and IgG2, whereas the sensitivities and mean absorbances for these two IgG subclasses were significantly higher than for IgG3 and IgG4. The association between toxoplasmosis and mental disorders was investigated by comparing the prevalences and/or the concentrations of anti-T. gondii IgG, IgM and IgA antibodies screened by immunoenzymatic reactions in serum samples from 41 patients with schizophrenia, 38 patients with mood disorders and 95 healthy volunteers. IgG antibodies were detected in 43.9% of patients with schizophrenia, 52.6% of patients with mood disorders and 28.4% of healthy individuals. The prevalence of IgG and the concentration of this antibody in patients with mood disorders were significantly greater than in healthy volunteers (p=0.0204 and p=0.0059, respectively). In contrast, there were no significant differences in these two parameters between patients with schizophrenia and healthy volunteers, or between patients with schizophrenia and patients with mood disorders. IgA antibodies were detected in one patient (2.6%) with mood disorders and in one (1.1%) healthy volunteer, whereas IgM antibodies were detected in two patients (5.2%) with mood disorders. The present study indicates that nPCR may be a potentially useful tool for the diagnosis of T. gondii infection of the central nervous system and suggests that this parasite could be a possible cause of mood disorders. Further studies are necessary to improve our understanding of the physiopathology of neurotoxoplasmosis and its association with other diseases / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_beatris_cademartori.pdf: 636391 bytes, checksum: 43565196211ab5284ee321f2b82e0430 (MD5) Previous issue date: 2007-06-28 / The toxoplasmosis acquired during pregnancy of benign course in imunocompetentes patients and asymptomatic in 85% of the cases may infect the fetus and result in congenital infection. Although most of the newborns do not present symptoms or clinical signs, there may be sequelae during the childhood and adult life, being the corioretinitis the most frequent one. Among the strategies to prevent congenital toxoplasmosis we can find the education for health and the preconception trial, which aim is to reduce the exposition to the risk factors that may lead to an infection by T. gondii, to detect and to treat acute infection in pregnant woman. The aims of this study were to evaluate the prevalence and risk of congenital transmission by Toxoplasma gondii, through serological analysis of the pregnant women and also through their knowledge about the zoonose transmission routes, to check the possible association between the soropositivity of the pregnant women and their exposition to the infection risk factors, and also to compare the Chemiluminescence and Indirect Immunofluorescence techniques in the diagnosis of the toxoplasmosis in the studied sample. A transversal study was conducted, with 425 pregnant women who were attending prenatal care in public health centres of Pelotas (RS-Brazil), during the period of May to November 2006. It was verified a T. gondii soroprevalence of (IgG) 54,8% and it was not detected the presence of IgM antibodies. The analysis of the risk factors showed a significant association (p<0.05) between the soropositivity of the pregnant women and their age, the handle of raw meat, the intake of raw vegetables, raw or undercooked meat and raw or nonpasteurized milk and direct contact with the soil. The Logistic Regression Model confirmed the above associations to the intake of raw or undercooked meat (OR=1.85) and to the direct contact with the soil (OR=2.67). The interaction with cats did not present a significant association with the T. gondii soropositivity patients. It was observed that the pregnant women who were interviewed did not know much about the disease and its main sources of infection. The Chemiluminescence technique proved to be an adequate one in the routine diagnosis of the T. gondii infection as, besides being a practical technique, it showed results comparable to the ones of the Indirect Immunofluoresence, sensibility, specificity and accuracy. The results indicate the necessity of implementing T. gondii primary prevention programmes for the pregnant women who as a way of reducing the risks of congenital toxoplasmosis. / A toxoplasmose adquirida durante a gestação, de curso benigno em pacientes imunocompetentes e assintomática em 85% dos casos, pode ser transmitida para o feto e resultar em infecção congênita. Embora maioria dos recém- nascidos não apresente sintomas ou sinais clínicos, pode evoluir para seqüelas na infância e vida adulta, sendo que a coriorretinite é a lesão mais freqüente. Entre as estratégias de prevenção da toxoplasmose congênita incluem-se a educação em saúde e a triagem pré-natal, com o objetivo de reduzir a exposição aos fatores de risco para a infecção por Toxoplasma gondii, detectar e tratar a infecção aguda na gestante. Os objetivos foram avaliar a prevalência e o risco de transmissão congênita por T. gondii, através da análise do perfil sorológico das mesmas e do conhecimento sobre as formas de transmissão da zoonose, verificar possíveis associações entre soropositividade das gestantes e a exposição aos fatores de risco da infecção, além de comparar as técnicas de Quimioluminescência e Imunofluorescência Indireta para o diagnóstico sorológico da toxoplasmose na amostra estudada. Foi realizado um estudo transversal, com 425 gestantes que realizaram o pré-natal nos Postos de Saúde de Pelotas-RS, no período de maio a novembro de 2006. Constatou-se uma soroprevalência (IgG) de 54,8% para T. gondii e não foi detectado a presença de anticorpos IgM. Na análise dos fatores de risco foi verificada associação significativa (p<0,05) entre a soropositividade das gestantes e a idade, manuseio de carne crua, consumo de vegetais crus, de carnes cruas ou mal cozidas, de leite cru não pasteurizado e contato direto com o solo. Através do modelo de regressão logística, essa associação foi confirmada para o consumo de carnes cruas ou mal cozidas (OR=1,85) e o contato direto com o solo (OR=2,67). O convívio com gatos, não apresentou associação significativa com a soropositividade para T. gondii nas pacientes estudadas. Constatou-se elevado desconhecimento da doença e das principais fontes da infecção pelas gestantes entrevistadas. A técnica de Quimioluminescência mostrou-se adequada ao diagnóstico de rotina da infecção por T. gondii, pois, além da praticidade, apresentou de sensibilidade, especificidade e acurácia comparáveis aos da Imunofluorescência Indireta. Os resultados obtidos indicam a necessidade da implantação de programas de prevenção primária da infecção por T. gondii para gestantes, a fim de reduzir o risco da toxoplasmose congênita.