Tesis para optar al grado de Doctor en Química / Las enzimas son capaces de acelerar reacciones químicas con una gran selectividad, permitiendo que la vida sea posible como la conocemos. Glutamato mutasa (GM) es una enzima dependiente de adenosilcobalamina (AdoCbl), la cual cataliza la isomerización reversible de glutamato (glm) a metilaspartato (masp). AdoCbl es un cofactor que consiste en un macrociclo ubicado en el plano ecuatorial denominado corrina, el cual tiene como átomo central un Co+3. Este metal está axialmente coordinado por un ligando desoxiadenosina e intramolecularmente por un grupo 5,6-dimetilbenzimidazol. El mecanismo propuesto para la reacción de isomerización comienza con la unión del sustrato al sitio catalítico, la cual induce la ruptura homolítica del enlace cobalto-carbono (Co-C) del cofactor. Como producto de esta disociación homolítica se forma el radical desoxiadenosilo (Ado•) que luego abstrae un hidrógeno desde el sustrato, formando un radical derivado del sustrato y AdoH. Este radical sufre un reordenamiento que da origen al radical relacionado con el producto, el cual reabstrae el hidrógeno desde AdoH, regenerando Ado•. El ciclo catalítico termina con la formación del enlace Co-C. La generación de intermediarios radicalarios altamente reactivos hace que esta reacción sea muy difícil de llevar a cabo sin reacciones secundarias. Es así que la necesidad de una maquinaria catalítica capaz de controlar los caminos de reacción sea indispensable. Una interesante pregunta en química bioinorgánica es cómo luego de la unión del sustrato, el complejo cofactor-enzima es capaz de modificar su estructura electrónica debilitando el enlace Co-C hasta su disociación homolítica. Además, el camino de reacción exacto que conecta el rompimiento del enlace Co-C con el proceso de abstracción del hidrógeno desde el sustrato permanece incierto. Finalmente, el papel exacto que cumple el entorno enzimático en el mecanismo de isomerización está lejos de ser completamente comprendido. La necesidad de una mayor comprensión del mecanismo catalítico de GM, especialmente el proceso de control de la ruptura del enlace Co-C y el mecanismo para controlar la transformación química catalizada por GM son interesantes problemas para ser resueltos por métodos químico computacionales. En este trabajo presentamos un conjunto de modelos químico-cuánticos obtenidos con el propósito de responder a las preguntar presentadas anteriormente. Primero, exploramos la naturaleza del enlace Co-C mediante en estudio comparativo de AdoCbl y un cofactor análogo conocido como MeCbl, ambos en sus formas libres. Segundo, obtuvimos un conjunto de modelos del cofactor unido a GM para explorar las fuerzas involucradas en el proceso de ruptura catalítica del enlace Co-C, junto con la influencia del sustrato en esta. Tercero, con el fin de comprender las fuerzas que manejan el ciclo catalítico, llevamos a cabo el estudio del estado fundamental, intermediarios clave y estados de transición del ciclo catalítico usando modelos del complejo GM-Ado-glm obtenidos a partir de cálculos de estructura electrónica. Los estudios de la disociación del enlace Co-C en complejo con la enzima y del ciclo catalítico fueron enfocados en el efecto del entorno enzimático cercano. La aproximación de cluster fue usando en todos los cálculos que involucraron a GM como parte del modelo. Nuestros principales resultados revelaron que el enlace Co-C es debilitado por el reemplazo de base axial que sufre luego de unirse a la enzima por el par histidina-aspartato. Además existe un efecto electrostático ejercido por el par lisina-glutamato de la enzima que estabiliza al radical Ado•. La presencia de glm tiene un papel importante luego de la formación del radical Ado• ya que permite la formación del radical un radical glm• que es más estable, propagando el ciclo catalítico hacia la formación del producto. Finalmente, nuestros hallazgos revelaron que el entorno enzimático conduce la reacción de isomerización mediante una estabilización diferencial de los intermediarios y estados de transición asociados a la reacción. Además provee de un importante soporte estructural. Los antecedentes entregados en este trabajo permitirán en el futuro el diseño de bio-miméticos capaces de catalizar reacciones químicas extremadamente complejas / Enzymes accelerate chemical reactions with exceptional selectivity making life itself possible. Glutamate Mutase (GM) is an adenosylcobalamin (AdoCbl)-dependent enzyme that catalyzes the reversible isomerization of glutamate (glm) to methylaspartate (masp). The AdoCbl cofactor consists of an equatorial corrin ring, which has a Co+3 as the metal center axially coordinated by a deoxyadenosyl moiety and intramolecularly by a 5,6-dimethylbenzimidazole group. The accepted mechanism for the isomerization reaction begins with substrate binding to the catalytic site, which induces the homolytic cleavage of the cobalt carbon bond (Co-C) of AdoCbl, being this the first catalytic event. This generates an adenosyl radical (Ado•) that subsequently abstracts a hydrogen atom from the substrate, forming a substrate-derived radical and AdoH. The newly formed radical rearranges to a product-related radical, which eventually re-abstracts the hydrogen from AdoH, leading into Ado• regeneration. Finally, the catalytic cycle ends by Co-C bond formation. The generation of highly reactive radical intermediaries makes this reaction very difficult to occur without side reactions. Thus, the need of proper catalytic machinery able to control the reaction pathway is mandatory. An intriguing question in bioinorganic chemistry is how upon substrate binding, the cofactorenzyme complex modifies its electronic structure weakening the Co-C bond strength until its homolytic dissociation. In addition, the exact reaction pathway that connects the Co-C bond breaking with the hydrogen abstraction from the substrate remains uncertain. Finally, the exact role of the enzymatic environment on the isomerization reaction mechanism is far from been completely understood. The need of deeper insights about the GM catalytic reaction, especially the control of the Co- C bond dissociation process and the mechanism to manage the chemical transformation are interesting challenges to be solved by computational chemistry approaches. Here we present a large set of quantum chemical models obtained to answer the questions above presented. First, we explored the nature of the Co-C bond by the comparative study of AdoCbl and an analogous cofactor known as methylcobalamin (MeCbl), both in their free forms. Second, a set of models of AdoCbl in complex with GM were obtained to explore the forces involved in the catalytic Co-C bond dissociation process and the influence of the substrate on it. Third, in order to shed light into the driving forces of the catalytic cycle, we performed the study of models of ground state, key intermediates and transition states of the catalytic cycle using GM-Ado-glm complexes by means of modern electronic structure calculations. In all the calculation involving the GM as part of the model, the cluster approach was used. The studies of the Co-C bond dissociation in complex with the enzyme and the study of the catalytic cycle were focused on the effect of the nearby enzymatic environment. Our main results revealed that the Co-C bond is weakened in part by the axial ligand replacement involving a histidine-aspartate pair, and the electrostatic effect exerted by the lysine-glutamate pair from the enzyme which stabilizes the Ado• radical. After the formation of the Ado•, the presence of glm leads to the formation of glm• radical, which is largely more stable than Ado•. Thus, glm has an important role on the propagation of the catalytic cycle toward the product formation. Finally, our findings revealed that the near enzymatic environment provides differential stabilization of the reaction intermediaries and transition state mediated by the properties of the interactions with the catalytic site. Additionally, it provides of an important structural support. This understanding would allow in the future the design of bio-mimetic able to catalyze highly complex reactions

A vitamina A e seus derivados, os retinóides, participam de processos celulares tais como desenvolvimento, proliferação, diferenciação e apoptose. Os efeitos da vitamina A, em sua maior parte, são atribuídos à ativação de receptores nucleares da família dos receptores esteróides, conhecidos como RAR e RXR. No entanto, o excesso de vitamina A ou de retinóides na dieta ou em uso terapêutico, pode ser teratogênico. Diversos trabalhos tem demonstrado in vitro e in vivo que a vitamina A e seus metabólitos são moléculas redox ativas, isto é, podem agir como pró-oxidantes ou antioxidantes , dependendo da concentração e do ambiente em que se encontram. Os objetivos deste trabalho foram investigar possíveis alterações no ambiente redox do pulmão de ratos Wistar tratados com vitamina A. Neste trabalho, foram utilizados ratos Wistar machos adultos – 90 dias (no início do tratamento), que foram tratados por 3, 7 ou 28 dias com vitamina A na forma de palmitato de retinol (Arovit®) nas doses de 1000, 2500, 4500 ou 9000 UI/kg/dia via intra-gástrica (gavagem). Verificamos um aumento significativo nos níveis de marcadores de estresse oxidativo (carbonilação de proteínas, peroxidação lipídica e diminuição no conteúdo de tióis reduzidos) além de modulação da atividade de enzimas antioxidantes em todos os períodos analisados, tanto nas doses consideradas terapêuticas que são as doses de 1000 e 2500 UI/kg/dia quanto nas doses excessivas 4500 e 9000 UI/kg/dia. Então, a partir destes resultados e de outros dados já reportados na literatura, acreditamos que seja necessária uma maior cautela no uso de vitamina A tanto a nível de suplementação quanto a nível terapêutico, visto que ela na forma que foi utilizada nesse trabalho pode ser adquirida livremente em farmácias sem a necessidade de receita médica. / Vitamin A and its derivatives, the retinoids, participate in cellular processes such as growth, cell division and apoptosis. The effects of vitamin A , in part, is ascribed to gene transcription mediated by nuclear receptors from the family of the steroid receptors, known as RAR and RXR. However, excessive vitamin A, or its retinoids, in the diet, or by therapeutic use, may be theratogenic. Diverse works have demonstrated in vitro and in vivo that vitamin A and its metabolites may be pro-oxidant or antioxidant. In this work, we aimed to investigate alterations in the redox environment of the lung of the rats Wistar treated with vitamin A. Here, we have utilized adult male Wistar rats (90/days old) that were treated for 3, 7 or 28 days with vitamin A as retinol palmitate at 1000, 2500, 4500 or 9000 IU/kg/day intra-gastrically (gavage). We have verified an increased level of oxidative stress markers (protein carbonylation, lipid peroxidation, and decreased protein and non-protein thiol content) and antioxidant enzymes activities modulation after any period of treatment, in all periods analyzed, both doses that are considered therapeutic doses of 1000 and 2500 IU / kg / day and in excessive doses 4500 and 9000 IU / kg / day. Then, regarding the results obtained in this work and from other reported data, we recommend caution in the use of vitamim A for supplementation or for therapeutic use.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2015. / Este trabalho apresenta a síntese, caracterização e aplicação de complexos ionicamente marcados de európio (III) e térbio (III) como sondas fluorescentes em ensaios de bioimageamento. Estes novos complexos foram obtidos a partir de um líquido iônico de função específica (inédito) e sua posterior polimerização. De acordo com os dados de calorimetria diferencial de varredura e análises termogravimétricasos complexos apresentaram-se termicamente mais estáveis quando comparados com seus monómeros precursores e respectivos polímeros ausente de metais. Outras técnicas de caracterização, como RMN, ATR-FTIR, fluorescência e cromatografia de permeação em gel confirmou a síntese bem sucedida de complexos marcados ionicamente e seus polímeros. As análises de FTIR-ATR e fluorescência sugerem que clusters de água auto-organizadas suprimem a emissão de luz dos complexos. Na verdade, o baixo rendimento quântico de fluorescência é uma consequência do acoplamento vibrônico das moléculas de água. Todos os complexos foram submetidos a experimentos de imagem celular. Os resultados forneceram evidências de que estes complexos foram eficazes e seletivos na distinção das diferentes organelas dentro da célula. Alguns dos complexos (VAIEu) foram seletivos para os endossomos precoces e tardios, enquanto outros (VAITb) associaram ao retículo endoplasmático. Além disso, VAIEu-βdicetona acumulou em vesículas citoplasmáticas, PVAIEu associado com lisossomos, complexos PVAITb foram seletivos para retículo endoplasmático e PVAIEu-βdicetona apresentou associação para vesículas e endossomos, tanto precoces e tardios. / This work presents the synthesis, characterization, and the application of ionically tagged complexes of europium(III) and terbium(III) as fluorescent probes in cellular bio imaging. These new complexes were obtained from an ionic liquid of specific function and their post polymerization. According to thermogravimetric and differential scanning calorimetrydata the polymerized complexes were thermally more stable than the precursor monomers and respective polymers absent of metals. In particular, the glass transition temperature was higher in metaled polymerized complexes. Other characterization techniques, namely NMR H1 and C13, FTIR-ATR, fluorescence and gel permeation chromatography confirmed the successful synthesis ofionically tagged complexes and their polymers. FTIR-ATR and fluorescence analysis suggest that self-organized water clusters suppress the light emission of ionically tagged complexes and their polymers. In fact, the low quantum yield of fluorescence is a consequence of the vibronic coupling with water molecules. All complexes were submitted to experiments of cellular imaging. Results provided evidence that these complexes were effective and selective in the distinction of different organelles within the cell. Some of the complexes (VAIEu) were selective for early and late endosomes, while others (VAITb) were associated with the endoplasmic reticulum. Moreover, VAIEu-βdiketoneaccumulated in cytoplasmic vesicles, PVAIEu associated with lysosomes, PVAITb complexes were selective for endoplasmic reticulum and PVAIEu-βdiketonepresented association to vesicles and endosomes, both early and late.

Orientador: Renata Guimarães Moreira / Resumo: Este estudo investigou a influência da suplementação de vitamina A sobre a maturação ovariana de fêmeas do lambari-do-rabo-amarelo, Astyanax altiparanae. 580 fêmeas adultas foram distribuídas em 10 tanques de 750 litros, compondo 5 tratamentos (duplicata). Foi formulada uma ração com baixo nível de vitamina A, as rações foram suplementadas com 0; 1.800; 3.600; 7.200 e 14.400 UI/kg de ração. Após 8 dias de ajuste às condições experimentais com dietas comerciais, os peixes receberam uma dieta sem suplementação de vitamina A durante 16 dias, para a depleção dessas reservas e em seguida os animais foram alimentados por 60 dias com os diferentes tratamentos. Indicadores de maturação gonadal como concentração plasmática de 17β-Estradiol (E2), índice gonadossomático (IGS), fecundidade e histologia ovariana foram analisados aos 30 e 60 dias. Além destes, indicadores metabólicos, como o índice hepatossomático (IHS), viscerossomático (IVS) e concentração plasmática de lipídios totais, triglicérides, colesterol total e frações também foram analisados nestes momentos. Os diferentes níveis de vitamina A alterou o padrão de deposição ovariana desta vitamina. A manutenção nas condições experimentais promoveu a maturação ovariana, avaliada pela histologia do ovário e IGS. As variáveis fisiológicas mostraram que a manutenção das fêmeas com uma dieta composta integralmente por ingredientes vegetais, reduziu a concentração plasmática de lipídio e colesterol total e o nível mais elevado de suple... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study investigated the influence of vitamin A supplementation during the ovarian maturation of female lambari-do-rabo-amarelo, Astyanax altiparanae. 580 adult females were distributed in 10 tanks of 750 liters, composed by 5 treatments (duplicate). A basal diet with low level of vitamin A. The diet was supplemented with 0; 1.800; 3,600; 7,200 and 14,400 IU / kg of diet. After 8 days of adjustment to the experimental conditions with commercial diets, the fish received a diet without vitamin A supplementation for 16 days, for the depletion of these reserves and the animals were fed for 60 days with different treatments. Indicators of gonadal maturation, such as 17β-Estradiol (E2) plasma level, gonadosomatic index (GSI), fecundity and ovarian histology were analyzed at 30 and 60 days. Additionally, metabolic indicators such as hepatosomatic index (HSI), viscerosomal index (VSI) and plasma concentration of total lipids, triglycerides, total cholesterol and fractions were also analyzed at these periods. Vitamin A supplementation levels altered the deposition levels of this vitamin in the ovaries. The maintenance in the experimental conditions promoted ovarian maturation, evaluated by ovary histology and GSI. The physiological variables evidenced that the maintenance of these females in the experiment, with a diet composed entirely of vegetable ingredients, reduced the plasma levels of total lipids and cholesterol, and the higher level of supplementation (14,400 IU / kg) reduc... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadora: Profª. Drª. Vania Oliveira de Carvalho / Coorientador: Prof. Dr. Nelson Augusto Rosário Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do Adolescente. Defesa: Curitiba, 11/10/2016 / Inclui referências : f. 98-115 / Resumo: Introdução: A dermatite atópica (DA) é uma doença inflamatória da pele, de caráter recidivante e crônico. O diagnóstico é clínico e a gravidade da doença pode ser avaliada por um índice de pontuação, o SCORAD. Existem evidências de que baixos níveis sanguíneos de vitamina D (VD) em pacientes com DA estão relacionados com maior gravidade da doença. Assim a sua suplementação seria uma possibilidade terapêutica. Objetivo: Avaliar a influência da suplementação de VD na gravidade da DA. Métodos: Estudo do tipo antes e depois, com coleta de dados prospectiva, com menores de 14 anos, atendidos entre janeiro de 2014 e janeiro de 2016. A gravidade da doença foi determinada pelo índice SCORAD e classificada como leve (pontuação < 25), moderada (? 25 à ? 50) ou grave (> 50). Os valores séricos de VD foram classificados como: suficientes (? 30 ng/mL), insuficientes (29 a 21 ng/mL) e deficientes (? 20 ng/mL). Participantes com deficiência receberam 50.000 UI de VD por semana, durante 4 semanas; enquanto os com insuficiência receberam 15.000 UI por semana, durante 4 semanas. A dose de manutenção da medicação, para todos os indivíduos com níveis inadequados foi de 15.000 UI por semana, durante 2 meses, totalizando 3 meses de tratamento. Todos foram submetidos ao teste cutâneo alérgico de leitura imediata. Após a suplementação vitamínica, os participantes foram reavaliados clínica e laboratorialmente. As variáveis categóricas foram tratadas com distribuição de frequências. Utilizado teste exato de Fisher, Qui-quadrado de Pearson e Qui-quadrado de Pearson para tendências lineares e o teste de regressão logística multivariada. O nível de significância mínimo adotado foi de 5%. Resultados: Cento e cinquenta e dois participantes preencheram os critérios de inclusão, dos quais 89 (58,5%) eram meninas. As avaliações ocorreram em todas as estações do ano. Quarenta e duas (27,6%) crianças usavam filtro solar diariamente. Foi diagnosticada DA leve, moderada e grave em 90 (59,2%), 36 (23,6%) e 26 (17,2%) participantes, respectivamente. A deficiência de VD ocorreu em 50 participantes (32,9%), níveis insuficientes de VD foram encontrados em 66 (43,4%), e em 36 (23,7%) crianças os níveis de VD foram suficientes. Os níveis médios de VD foram respectivamente de 24,9 ± 6,3 ng/mL na DA leve, 23,8 ± 7,5 ng/mL na moderada e 22,4 ± 8,4 ng/mL na grave. Os participantes com níveis vitamínicos suficientes apresentavam valores de SCORAD mais baixos, ou seja, tinham menor gravidade da DA (p<0,01). Cento e dezesseis participantes (76,3%) com níveis insuficientes e deficientes de VD, receberam suplementação da vitamina e após 3 meses de suplementação os valores de VD desse grupo foram significativamente mais elevados (35,9 ng/mL) em comparação com os níveis iniciais (23,7 ng/mL; p<0,001). Ao mesmo tempo, foi observada uma redução no índice SCORAD (19,4 antes da suplementação versus 12,3 após a suplementação; p<0,001). Crianças do sexo feminino tiveram menor resposta (p=0,02) com a suplementação de VD na diminuição da gravidade da DA. O teste cutâneo alérgico de leitura imediata foi positivo em 55 casos (36,1%). A sensibilização alérgica presente não teve relação estatística com a gravidade da DA (p=0,56). Conclusões: Níveis de VD foram deficientes ou insuficientes em 76,3% das crianças. Os participantes com níveis vitamínicos suficientes tinham DA mais leve, pelo SCORAD. Houve melhora dos níveis séricos de VD dos participantes com DA após a suplementação vitamínica e a suplementação de VD promoveu melhora da gravidade da DA. A sensibilização alérgica não teve relação com os níveis séricos de VD ou com a gravidade da doença. Palavras-chave: Dermatite atópica, vitamina D, hipersensibilidade. / Abstract: Introduction: Atopic dermatitis (AD) is an inflammatory skin disease, with a recurrent and chronic nature. Diagnosis is clinical and the disease severity can be assessed by a scoring index, SCORAD. There is evidence that low blood levels of vitamin D (VD) in patients with AD are related to greater severity of the disease. Thus, the supplementation would be a therapy option. Objective: To assess the influence of VD supplementation on the severity of AD. Methods: study type before and after, with prospective data collection, with children under 14 evaluated between January 2014 and January 2016. The severity of the disease was determined by the SCORAD index and was classified as mild (score <25), moderate (? 25 à ? 50) and severe (> 50). Serum VD values were classified as sufficient (? 30 ng/mL), insufficient (29-21ng/ml) and deficient (? 20 ng/mL). Participants with deficient levels received 50,000 IU of VD per week for 4 weeks; while those with insufficient levels received 15,000 IU per week, for 4 weeks. The maintenance dose for all subjects with inadequate levels was 15,000 IU per week for 2 months, a total treatment of 3 months. All participants underwent skin prick allergy test. After vitamin supplementation, participants were reevaluated both clinically and with new laboratory levels. Categorical variables were treated with frequency distribution. Fisher's exact test, chi-square test, chi-square test for linear trends and multivariate logistic regression test were used. The minimum level of significance was 5%. Results: One hundred and fifty-two participants met the inclusion criteria, of which 89 (58.5%) were girls. Assessments occurred in all seasons. Forty-two (27.6%) children used sunscreen daily. AD was diagnosed as mild, moderate and severe in 90 (59.2%), 36 (23.6%) and 26 (17.2%) participants, respectively. VD deficiency occurred in 50 subjects (32.9%), insufficient levels were found in 66 (43.4%), and 36 (23.7%) children had sufficient levels. Mean levels of VD were respectively 24.9 ± 6.3 ng/ml in mild AD, 23.8 ± 7.5 ng/ml in moderate and 22.4 ± 8.4 ng/ml in severe. Participants with sufficient vitamin levels had lower SCORAD values, therefore less severe AD (p<0.01). One hundred and sixteen participants (76.3%) with insufficient and deficient levels of VD received the vitamin, and, after 3 months of supplementation, the VD values of this group were significantly higher (35.9 ng/mL) compared to baseline levels (23.7 ng/ml; p <0.001). At the same time, a decrease in the SCORAD index (19.4 before supplementation versus 12.3 after; p <0.001) was observed. Female children had lower response to supplementation of VD in reducing the severity of AD (p = 0.02). The skin prick allergy test was positive in 55 cases (36.1%). Allergic sensitization was not statistically related to the severity of AD (p = 0.56). Conclusions: VD levels were deficient or insufficient in 76.3% of children. Participants with sufficient vitamin levels had milder AD by SCORAD. Vitamin D supplementation led to an increase in serum VD levels in the participants, as well as to an improvement in AD severity. Allergic sensitization was not related to serum levels of VD or the severity of the disease. Keywords: atopic dermatitis, vitamin D, hypersensitivity.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-05Bitstream added on 2014-06-13T18:35:09Z : No. of bitstreams: 1 vargas_fs_me_arafo.pdf: 600635 bytes, checksum: c88f9eb602669098e457e9ab4722d46a (MD5) / O clareamento dental de consultório, realizado com géis que apresentam elevada concentração de peróxido de hidrogênio (PH), pode causar danos intensos para as células da polpa dentária. Dentro deste contexto, a administração de agentes antioxidantes previamente ao clareamento dental, tem sido considerada uma terapia promissora, pois pode eliminar ou pelo menos minimizar os efeitos adversos deste procedimento clínico estético. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o possível efeito protetor da Vitamina E (alfa-Tocoferol / α-T) contra à ação citotóxica do PH sobre células odontoblastóides (MDPC-23). Para isto, células foram semeadas em placas de 96 wells durante 72 horas e então submetidas a diferentes tempos de pré-tratamento (1, 4, 8 e 24 horas) com variadas concentrações de α-T (1, 3, 5 e 10 mM). Após os períodos de pré-tratamento, as células foram expostas ou não ao PH (0,018%) durante 30 minutos. Nos grupos controle positivo e negativo, as células foram somente expostas a uma solução de PH (0,018%) ou meio de cultura, respectivamente. O metabolismo celular foi avaliado pelo teste de MTT. A absorbância foi transformada em porcentagem e analisada pelo Teste de Kruskal-Wallis, complementado por Mann-Whitney (α=0,05%). Todas as concentrações de α-T e tempos de pré-tratamento propostos neste estudo apresentaram proteção das células contra os efeitos citotóxicos do PH. Porém, os melhores resultados foram obtidos com as concentrações de 1 e 3 mM (126% e 97%, respectivamente) por 24 horas em relação a 41% de metabolismo celular do grupo controle positivo (p<0,05). Portanto, as células pré-tratadas com α-T por 24 horas, em concentrações baixas (1 e 3 mM), apresentaram os melhores resultados de viabilidade celular, ou seja, maior efeito protetor frente à agressão direta do PH / The in-office tooth bleaching using gels with high concentrations of hydrogen peroxide (HP) may cause irreversible damage to pulp tissue. Therefore, the administration of antioxidazing agents previously to the tooth bleaching procedures has been considered as a promising therapy, mainly due the capacity of these agents to prevent, or at last reduce, the negative side-effects caused by toxic products used in this esthetic treatment. Therefore, the aim of the present in vitro study was to evaluate the protective activity of vitamin E (alfa-Tocoferol / α-T) against the toxic effects of HP applied to cultured odontoblast-like cells (MDPC-23). Cells were seeded in wells of 96-well plates for 72 hs and then pre-treated with different concentrations of α-T (1, 3, 5, and 10 mM) for variable periods (1, 4, 8, and 24 hs). Following, the cells were exposed to a HP solution (0,018%) for 30 min. In positive and negative control groups, the cells were exposed only to HP solution (0,018%) or culture medium, respectively. The cell metabolism was assessed by MTT assay and the absorbance numeric data, expressed as percentage values, were subjected to the statistical analysis of Kruskal-Wallis complemented by Mann-Whitney test (α=0.05%). All α-T concentrations and pre-treatments evaluated in this study showed cell protection against the cytotoxic effects of HP. However, considering the MDPC-23 cells in the negative control group as presenting 100% metabolism, it was observed that the most relevant data occurred when the cells were pre-treated with α-T at 1 and 3 mM (126% and 97% of cell metabolism, respectively) for 24hs compared to the positive control group (41%) (p<0.05). Based upon the methodology used in the present investigation, it can be concluded that low concentrations of α-T (1 and 3 mM) applied for 24 hs to the cultured odontoblast-like MDPC-23 cells provide the best protective effects against the cytotoxicity caused by hydrogen peroxide

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Introdução: A vitamina D desempenha um importante papel na homeostase do cálcio e fósforo e, intervenções específicas são recomendadas nos vários estágios da doença renal crônica, a fim de se evitar ou postergar o aparecimento do hiperparatireoidismo secundário. Além da 1,25¬ dihidroxivitamina D a forma mais ativa da vitamina D; a 25-hidroxivitamina D seu precursor hepático, também tem tido destaque como participante dos mecanismos fisiopatológicos no desenvolvimento do hiperparatireoidismo secundário. O objetivo desse estudo foi avaliar a distribuição dos níveis de 25¬ hidroxivitamina D nos diferentes estágios da doença renal crônica e o possível papel dessa vitamina no metabolismo mineral de pacientes na fase pré¬ dialítica. Material e Métodos: Através de corte transversal foram estudados 51 pacientes adultos, portadores de doença renal crônica na fase pré-dialítica. Para a análise, os pacientes foram distribuídos nos vários estágios da doença renal crônica, de acordo com a classificação do KDOQ/I, o que compreendeu os segundo, terceiro e quarto estágios. Foram estudados os seguintes parâmetros laboratoriais: albumina, bicarbonato, cálcio iônico, fósforo, fosfatase alcalina total, PTH-intacto, 25-hidroxivitamina D, 1,25-dihidroxivitamina D, clearance de creatinina e proteinúria de 24hs. Resultados: Dos 51 pacientes, 10 encontravam-se no estágio 2, 25 no estágio 3 e 16 no estágio 4 da doença renal crônica. De acordo com o KIDOQI, nenhum paciente tinha deficiência severa de 25-hidroxivitamina D « 5 ng/mL) e 28 pacientes (55 por cento) apresentavam níveis dentro dos valores-alvo (> 30 ng/mL)Cerca de 62 por cento dos pacientes tinham PTH intacto acima do recomendado para seu estágio de doença renal. Não foram observadas quaisquer correlações entre a 1,25-dihidroxivitamina D e outros parâmetros bioquímicos ou hormonais. Uma análise de regressão linear múltipla revelou o clearance de creatinina, o fósforo e a 25-hidroxivitamina D como os determinantes independentes do PTH. Conclusão: Este estudo encontrou uma alta prevalência de hiperparatireoidismo secundário em pacientes com doença renal crônica não¬ dialítica, com níveis relativamente adequados de 25-hidroxivitamina D. Novos estudos serão necessários para determinar os reais valores-alvo desta vitamina na doença renal crônica em sua fase pré-dialitíca / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2015-12-21T14:51:06Z No. of bitstreams: 1 2015_TamyresPereiraAraujoMartins.pdf: 661857 bytes, checksum: a40f3bb3f03dc13da14cb69c6aa5cba7 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2016-01-05T12:54:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_TamyresPereiraAraujoMartins.pdf: 661857 bytes, checksum: a40f3bb3f03dc13da14cb69c6aa5cba7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-05T12:54:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_TamyresPereiraAraujoMartins.pdf: 661857 bytes, checksum: a40f3bb3f03dc13da14cb69c6aa5cba7 (MD5) / O aumento no consumo de produtos oriundos da aquicultura tem levado o mercado a desenvolver tecnologias para suprir a cadeia agroindustrial. Nas últimas décadas a ranicultura tem desenvolvido diversas tecnologias para a expansão da atividade no país, com maior enfoque para a criação de girinos. A alimentação adequada na fase inicial confere à cadeia produtiva ranícola produtos finais de qualidade e em quantidade ideal. Assim, a dieta fornecida deve atender as exigências nutricionais dos animais para o bom crescimento e desenvolvimento dos mesmos. Dentre os nutrientes exigidos pelos animais está o ácido ascórbico que atua como cofator em algumas reações metabólicas proporcionando melhor desempenho produtivo aos animais. Com o objetivo de verificar o efeito da suplementação de vitamina C na dieta de girinos de rã-touro, foi realizado um estudo com 480 girinos com peso médio de 0,078g, distribuídos em 12 aquários com 40L de água em sistema fechado de recirculação de água. O delineamento foi inteiramente casualisado com 4 tratamentos (0, 150, 300, e 600 mg kg-1 de monofosfato de ácido L-ascórbico ) e 3 repetições. Para avaliação de desempenho produtivo foram utilizados parâmetros nutricionais de ganho de peso (GP), conversão alimentar aparente (CAA), consumo aparente de ração (CRA), taxa de eficiência proteica (TEP), rendimento de carcaça (RC), índice hepatossomático (IHS), índice viscerossomático (IVS), índice de gordura visceral (IGV), matéria seca (MS) e extrato etéreo (EE). A temperatura observada ao longo do período experimental foi de 21,74± 0,43°C. A suplementação com vitamina C não influenciou significativamente o rendimento de carcaça e o índice viscerossomático. Verificou-se diferença significativa (p<0,05) com efeito quadrático para ganho de peso, conversão alimentar aparente, taxa de eficiência proteica, índice de gordura visceral, índice hepatossomático e extrato etéreo da carcaça. Com base nos dados obtidos no presente estudo sugere-se que girinos de rã-touro sejam suplementados com 600mg vit. C kg-1 da dieta quando submetidos a temperaturas baixas. / The increase in consumption from aquaculture products has led the market to develop technologies to meet the agro-industrial chain. In recent decades the frog culture has developed various technologies for expansion of activity in the country, with greater focus on the creation of tadpoles. Proper nutrition in early stage gives the production chain ranícola end quality products and perfect amount. Thus, the given diet should meet the nutritional requirements of animals for proper growth and development of the same. Among the nutrients required by animals is ascorbic acid that acts as a cofactor in some metabolic reactions providing better productive performance of animals. In order to check the effect of vitamin C supplementation in the diet of bullfrog tadpoles, a study of 480 tadpoles with an average weight of 0,078g, distributed in 12 aquariums with 40L of water in closed water recirculation system was carried out. The experimental design was a complete randomized with 4 treatments (0, 150, 300, and 600 mg kg-1 monophosphate L-ascorbic acid) and 3 replicates. To evaluate productive performance were used nutritional parameters of weight gain (WG), feed conversion (CAA), apparent feed intake (CRA), protein efficiency ratio (PER), carcass yield (RC), hepatosomatic index( IHS), viscerossomatic index (SVI), visceral fat index (IGV), dry matter (DM) and ether extract (EE). The temperature observed during the experimental period was 21.74 ± 0.43°C. Supplementation with vitamin C did not significantly influence the carcass yield and the viscerossomatic index. There was a significant difference (p<0,05) with quadratic effect for weight gain, apparent feed conversion, protein efficiency rate, visceral fat index, hepatosomatic index and ethereal extract. Based on the data obtained in this study it is suggested that bullfrog tadpoles are supplemented with 600mg vit. C kg-1 when undergoing low temperatures.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T03:40:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 280145.pdf: 1169418 bytes, checksum: 017f34565736c2dcb78673c0a53f6bee (MD5) / O cloridrato de buclizina (BCZ) está entre os fármacos mais utilizados como estimulantes do apetite e apresenta-se geralmente em associação com vitaminas e aminoácidos, para atender às necessidades nutricionais do paciente. Apesar do seu amplo consumo, não existe método oficial para determinar a BCZ em associação com vitaminas e aminoácidos, e há poucos métodos descritos na literatura para quantificação deste fármaco. Também não há relatos de métodos para avaliar a dissolução in vitro da BCZ nas formas farmacêuticas disponíveis. No presente trabalho foram desenvolvidos e validados métodos por cromatografia líquida para quantificação e avaliação da dissolução do fármaco em comprimidos e suspensão oral. A determinação simultânea de BCZ, piridoxina, triptofano e cianocobalamina foi realizada em coluna C18, utilizando sistema de eluição gradiente, com fase móvel composta de metanol, tampão fosfato 15 mM e solução de ácido fosfórico 30 mM, e detecção no ultravioleta. O método mostrou boa linearidade (r>0,99), precisão (DPR<2%) e exatidão (>99%). Foram estabelecidas, também, as condições para o teste de dissolução in vitro da BCZ em comprimidos e suspensão oral. As condições que forneceram resultados satisfatórios para as formulações testadas foram 900 mL de solução aquosa contendo 1,5% de lauril sulfato de sódio, mantida a 37,0 ± 0,5 ºC, utilizando, para comprimidos, o aparato cesta com rotação de 100 rpm e, para a suspensão oral, aparato pá com rotação de 25 rpm. Nestas condições, a liberação da BCZ foi superior a 80%, e as diferentes formulações analisadas demonstraram boa eficiência de dissolução (>85%). O método desenvolvido para avaliar a % dissolvida utilizou coluna C18, com fase móvel composta por metanol:solução de ácido fosfórico 30mM (80:20, v/v; pH 2,6) e detecção em 230 nm. Este método também permitiu a quantificação apenas da buclizina nas formas avaliadas. O método foi validado e mostrou ser específico, não havendo interferência de excipientes na quantificação de BCZ; linear (0,5 - 24 ?g/mL; r>0,99); preciso (DPR<5%) e exato (% de recuperação>99%). O fármaco mostrou estabilidade satisfatória no meio de dissolução selecionado.

Resumo não disponível