Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-29Bitstream added on 2014-06-13T18:31:11Z : No. of bitstreams: 1 braz_ma_me_araca.pdf: 405940 bytes, checksum: bb0a5b6b5df0a0da63d3d467bb5e891c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Chlamydophila psittaci é uma bactéria que causa doença respiratória ou sistêmica em aves e em seres humanos. Há ainda, alguns relatos de infecção em aves por Chlamydophila abortus, que é um agente etiológico de problemas reprodutivos em mamíferos. Em vista do risco de transmissão para humanos a partir de aves assintomáticas o objetivo deste estudo foi detectar a presença de C. psittaci e C. abortus em amostras de fezes ou suabes cloacais de aves assintomáticas. Foram colhidas 403 amostras fecais ou suabes cloacais, provenientes de aves domésticas, selvagens ou exóticas, mantidas em cativeiro ou oriundas de apreensão. As amostras foram submetidas à PCR em tempo real para C. psittaci e C. abortus, para amplificação de fragmento parcial do gene da subunidade 16S do rRNA, utilizando o SsoFast™ EvaGreen® Supermix (Bio-Rad) e análise da curva de dissociação. Para determinação do genótipo de C. psittaci, foi utilizada a hemi- nested PCR específica para o gene OMP-A, realizada nas amostras positivas pela PCR em tempo real, seguida de sequenciamento dos fragmentos amplificados. A PCR em tempo real revelou positividade em 17 (4,21%) amostras. A hemi-nested foi positiva em 2 amostras positivas pela PCR em tempo real. O genótipo A de C. psittaci foi identificado pelo sequenciamento de uma amostra amplificada pela hemi-nested PCR / Chlamydophila psittaci is a bacterium that causes respiratory or systemic disease in birds and humans. In birds there is also some reports of infection by Chlamydophila abortus that is responsible for abortions in mammals. Owing to the risk of transmission of Chlamydophila from asymptomatic birds to humans, the objective of this study was to detect the presence of C. psittaci and C. abortus in asymptomatic birds. Four hundred and three fecal samples or cloacal swabes were collected from domestic, wild or exotic birds kept in captivity or from apprehension. The 403 samples were examined by real time PCR specific for the 16S subunit of rRNA gene using SsoFastEvaGreen®Supermix™(Bio-Rad) and melting curve analysis. Hemi- nested PCR specific for the OMP-A gene, accomplished in real-time PCR positive samples, followed by sequencing of the amplified fragments were used to determine the genotype of C. psittaci. Real-time PCR was positive in 17 (4.21%) samples. Hemi-nested PCR revealed positivity in two samples previously positive by real-time PCR. Sequencing of the fragment amplified by hemi-nested PCR allowed for the identification of genotype A of C. psittaci in one sample

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-12-06Bitstream added on 2014-06-13T20:29:52Z : No. of bitstreams: 1 silva_klo_me_araca.pdf: 342089 bytes, checksum: 33106984cbf6552cd3c58d58104a5a0b (MD5) / A Leishmaniose Visceral (LV) é uma antropozoonose considerada uma das mais importantes zoonoses parasitárias emergentes em expansão por todo o mundo. A transmissão de Leishmania (L.) chagasi, se dá pela picada de fêmeas de insetos dípteros, denominados flebotomíneos, conhecidos popularmente como mosquitos “palha” ou “birigui”. A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença crônica, fatal, sistêmica e infecciosa. No Brasil é causada pelo protozoário L. chagasi. Cães são os maiores hospedeiros e reservatórios do parasita L. infantum e L. chagasi com um papel central no ciclo da transmissão do parasita para os humanos, com um grande contingente de animais assintomáticos. A infecção em cães é clinicamente semelhante à infecção humana e a apoptose tem sido associada à redução de linfócitos T e células mononucleares de sangue periférico e à falha na imunidade, pois ocorre diminuição na secreção do IFN- . A desregulação da apoptose tem sido associada a várias doenças e as principais moléculas implicadas são o sistema FAS/FASL e o TRAIL, que envolvem reações imunológicas e citotoxicidade mediada pelas células T. O entendimento de tal mecanismo em cães infectados pode permitir futuras intervenções terapêuticas para reduzir a depleção dos linfócitos. Para investigar a apoptose nas células CD4+ e CD8+ e a expressão e função dos principais receptores envolvidos no processo apoptótico, FAS/FASL e TRAIL foram avaliados nas células do sangue periférico e baço de 38 cães sintomáticos com leishmaniose visceral moderada e de 25 cães saudáveis. A apoptose das células CD4+ e CD8 + do sangue e baço foi maior nos cães infectados que nos saudáveis. Nas células CD4+ do sangue e baço dos cães infectados a expressão de FAS e FASL foi menor do que a dos saudáveis, nas células CD8+ do sangue e do baço dos cães... / Visceral leishmaniasis (VL) is a anthropozoonosis considered one of the most important emerging parasitic zoonoses expanding worldwide. The transmission of Leishmania (L.) chagasi, occurs through the bite of female insects flies, called sandflies, mosquitoes popularly known as straw or birigui. Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a chronic, fatal, systemic and infectious. In Brazil it is caused by the protozoan L. chagasi. Dogs are the greatest hosts and reservoirs of the parasite L. infantum and L. chagasi with a central role in the transmission cycle of the parasite to humans, with a large contingent of asymptomatic animals. The infection in dogs is clinically similar to human infection and apoptosis has been associated with reduction of T lymphocytes and peripheral blood mononuclear cells and failure to immunity, because there is a decrease in the secretion of IFN- . Dysregulation of apoptosis has been associated with various diseases and key molecules involved are the FAS/FASL and TRAIL, which involve immune reactions and cell-mediated cytotoxicity T. The understanding of this mechanism in infected dogs may allow future therapeutic interventions to reduce the depletion of lymphocytes. To investigate apoptosis in CD4+ and CD8+ lymphocytes and the expression and function of major receptors involved in apoptotic FAS/FASL and TRAIL were assessed in peripheral blood cells and spleen of 38 dogs symptomatic patients with visceral leishmaniasis moderate and 25 healthy dogs. Apoptosis of CD4+ and CD8+ spleen and blood was... (Complete abstract click electronic access below)

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Made available in DSpace on 2014-07-19T02:02:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000459527-Texto+Completo-0.pdf: 855354 bytes, checksum: 2ebbe767e99c1ddc288d33fdf6ff1ebe (MD5) Previous issue date: 2013 / Salmonella enterica is an important pathogen that causes gastroenteritis, and is transmitted to human through the consumption of contaminated food, especially from animal origin. The use of antimicrobials for therapeutic purposes in veterinary medicine and as growth promoters in animals used for food production has been considered one of the causes of emergence and spread of multi-drug resistant (MDR) S. enterica, representing a major risk to public health. Thus, the aim of this study was to determine antimicrobial resistance profiles as well as to characterize the main determinants involved on phenotypes of resistance in S. enterica isolates from poultry by-product meal and from other samples derived of poultry production chain, especially from environment of broiler houses. A total of 203 S. enterica isolates was analyzed, being 106 from poultry by-product meal and 97 isolated mainly from drag swabs. Higher percentages of resistance were detected in S. enterica isolated from drag swab when compared with isolates from poultry by-product meal. The highest percentages of resistance were found to sulfonamides followed by tetracycline, trimethoprim-sulfamethoxazole, nalidixic acid, streptomycin and spectinomycin. The majority of isolates was sensitive to ciprofloxacin and enrofloxacin. MDR phenotypes were detected in 37 (18. 2%) isolates and the profile penta-resistant (ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, tetracycline and sulphamethoxazole) was detected in S. Heidelberg, S. Cerro and two S. Senftenberg. Class 1 integrons was found in 26 isolates (12. 7 %), and did not detect the presence of class 2 integron. A S. Senftenberg isolated from environment was found to harbor two class 1 integrons: one integron with a typical 3’CS, and the other with an atypical 3′CS linked to the qacH–sul3. The sul1, sul2 and sul3 genes were detected in 18. 7%, 32. 5% and 31. 2% S. enterica phenotypically resistant to sulfonamide, respectively. blaCMY, blaCTX-M and blaTEM genes were detected in 23. 8%, 9. 5% and 85. 7% of isolates resistant to β -lactams, respectively. Resistance determinants tetA, tetB and tetC were observed in 70%, 10% and 10% of isolates resistant to tetracycline, respectively. aadA and aadB genes were detected in 26. 1% and 32. 1% of isolates resistant to aminoglycosides, as well as the presence of strA and strB genes in 44. 4% and 34. 9% of S. enterica isolates phenotypically resistant to streptomycin. The presence of a heterogeneous profile of antimicrobial determinants and mobile genetic elements in the isolates analyzed indicates the potential risk that these bacteria represent to human health. / A Salmonella enterica é um importante patógeno causador de gastrenterite transmitido para humanos através do consumo de alimentos contaminados, principalmente os de origem animal. O uso de antimicrobianos para fins terapêuticos na medicina veterinária e como promotores de crescimento em animais destinados à produção de alimentos tem sido apontado como uma das causas do surgimento e disseminação de S. enterica multi-resistentes (MDR), constituindo um grande risco para a saúde publica. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi determinar o perfil de resistência a antimicrobianos, bem como caracterizar os principais determinantes envolvidos nos fenótipos de resistência em isolados de S. enterica provenientes de farinhas de aves e de outras amostras oriundas da cadeia produtiva do frango, especialmente do ambiente de criação. Um total de 203 isolados de S. enterica foi analisado, sendo 106 oriundos de farinhas de aves e 97 provenientes, principalmente, de suabes de arrasto. Percentuais mais elevados de resistência foram detectados em S. enterica isoladas de suabe de arrasto, quando comparadas com isolados de farinhas de aves. Os maiores percentuais de resistência foram encontrados para sulfonamida, seguida por tetraciclina, trimetoprim-sulfametoxazol, ácido nalidíxico, estreptomicina e espectinomicina.A maioria dos isolados foi sensível à ciprofloxacina e à enrofloxacina. Fenótipos de MDR foram observados em 37 (18,2%) isolados, sendo que o perfil penta-resistente (ampicilina, cloranfenicol, estreptomicina, sulfametoxazol e tetraciclina) foi detectado em S. Heidelberg, S. Cerro e em duas S. Senftenberg. Integrons de classe 1 foram detectados em 26 isolados (12,7%), e não foi observada a presença de integron de classe 2. Uma S. Senftenberg isolada a partir do ambiente apresentou dois integrons de classe 1: um com um 3’CS típico e outro com 3′CS atípico ligado a qacH–sul3. Os genes sul1, sul2 e sul3 foram detectados, respectivamente, em 18,7%, 32,5% e 31,2% dos isolados de S. enterica fenotipicamente resistentes à sulfonamida. Os genes blaCMY, blaCTX-M e blaTEM foram detectados 23,8%, 9,5% e 85,7% dos isolados resistentes aos β-lactâmicos, respectivamente. Os determinantes de resistência tetA, tetB e tetC foram observados em 70%, 10% e 10% dos isolados resistentes à tetraciclina, respectivamente. Os genes aadA e aadB foram encontrados em 26,1% e 32,1 % dos isolados resistentes aos aminoglicosídeos, assim como a presença dos genes strA e strB foi detectada em 44,4% e 34,9% dos isolados de S. enterica fenotipicamente resistentes à estreptomicina. A presença de um perfil heterogêneo de determinantes de resistência e de elementos genéticos móveis nos isolados analisados indica o potencial risco que estas bactérias representam para a saúde humana.

Made available in DSpace on 2014-10-18T02:01:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000462080-Texto+Completo-0.pdf: 649282 bytes, checksum: e7c3e58982f8ce80fba84600f84c532c (MD5) Previous issue date: 2013 / Salmonella enterica is considered an important zoonotic pathogen that can be responsible by losses in animal production, especially in poultry husbandry. Different classes of antimicrobials have been used as a prophylactic and/or therapeutic in poultry production, highlighting the quinolones, which also are indicated for human use. The wide use of these antimicrobials may contribute to the selection of microorganisms resistant to these drugs. Resistance to quinolones has been assigned to mutations in genes encoding DNA gyrase and topoisomerase IV, in addition to being associated with the presence of plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR), especially encoded by qnr and aac(6')-Ib-cr genes. Thus, the aim of this study was to evaluate the presence of efflux pump systems involved in the resistance to quinolones using the efflux pump inhibitor carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP), and identify the presence of resistance determinants to quinolones in isolates of S. enterica from poultry-related material. For this, 36 S. enterica strains resistant to quinolones were used. The reduction of the activity of efflux pump systems was detected in 66. 7% of isolates tested for nalidixic acid and ciprofloxacin with addition of CCCP. Mutation in DNA gyrase was determined by sequencing and analysis of the gyrA gene, and qnr (A, B, D and S) and aac(6')-Ib-cr genes were detected by PCR. Analysis of the gyrA gene sequences in isolates phenotypically resistant to quinolones identify the presence of mutation leading to the alteration Ser83→Phe and Asp87→Gly, Asn or Tyr in 38,9% and 22,2%, respectively. Plasmid profile analysis showed nine profiles with plasmids that ranged from ~2 kb to ~50 kb, and PMQR genes were found in 22. 2% of S. enterica isolates. qnrA and qnrB genes were detected in 11. 1% and 5. 5% of isolates, respectively, and qnrS was found in 2. 7%. None qnrD gene was found in the isolates tested. aac(6')-Ib-cr gene was detected in 8. 3% of the isolates. To our knowledge, this study reports for the first time mutations in gyrA in S. Worthington from poultry, as well as this is the first report of the presence of qnrA, qnrS and aac(6')-Ib-cr in S. enterica isolated from samples related to poultry production chain in Brazil. The presence of resistance determinants to quinolones in S. enterica isolates from poultry leads to concern regarding to potential resistance selection due to the use of these antimicrobials in animal production. / A Salmonella enterica é considerada um importante patógeno zoonótico que pode ser responsável por perdas na produção animal, especialmente na criação de aves. Diferentes classes de antimicrobianos têm sido utilizadas de forma profilática e/ou terapêutica na produção avícola, entre elas destacam-se as quinolonas, que também têm indicação para uso humano. A ampla utilização destes antimicrobianos pode contribuir para a seleção de microrganismos resistentes a estes fármacos. A resistência a quinolonas tem sido atribuída a mutações nos genes da DNA girase e da topoisomerase IV, além de estar associada à presença de determinantes de resistência carreados por plasmídeos (PMQR), especialmente aqueles codificados pelos genes qnr e aac(6’)-Ib-cr. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a presença de sistemas de bombas de efluxo envolvidos na resistência a quinolonas utilizando o inibidor Cianeto de Carbonila Clorofenilhidrazona (CCCP), bem como identificar determinantes de resistência a quinolonas em isolados de S. enterica de origem avícola. Para tanto, foram utilizados 36 isolados de S. enterica resistentes quinolonas. A redução na atividade dos sistemas de bombas de efluxo foi observada em 66,7% dos isolados testados para o ácido nalidíxico e para a ciprofloxacina com adição do CCCP. Mutações na DNA girase foram determinadas por sequenciamento e análise do gene gyrA, e os genes qnr (A, B, D e S) e aac(6’)-Ib-cr foram detectados através de PCR. A análise das sequências do gene gyrA nos isolados fenotipicamente resistentes a quinolonas identificou a presença de mutação levando à alteração Ser83→Phe e Asp87→Gly, Asn ou Tyr em 38,9% e 22,2%, respectivamente.A análise do perfil plasmidial revelou nove perfis com plasmídeos que variaram de ~2 kb até ~50 kb e os genes PMQR foram encontrados em 22,2% dos isolados de S. enterica. O gene qnrA e o qnrB foram detectados em 11,1% e 5,5% dos isolados, respectivamente, e o gene qnrS em 2,7%. O gene qnrD não foi encontrado em nenhum dos isolados testados. O gene aac(6’)-Ib-cr foi detectado em 8,3% dos isolados. Até onde se sabe, este trabalho relata pela primeira vez mutações no gene gyrA em S. Worthington de origem aviária, bem como, este é o primeiro relato da presença dos genes qnrA, qnrS e aac(6’)-Ib-cr em cepas de S. enterica isoladas de amostras relacionadas com a cadeia produtiva de frangos no Brasil. A presença de determinantes de resistência a quinolonas em isolados de S. enterica de origem aviária alerta para a possível seleção de resistência pelo uso destes antimicrobianos na produção animal.

Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Juliana Regina Peiró / Resumo: A Leishmaniose Visceral (LV) é uma antropozoonose considerada uma das mais importantes zoonoses parasitárias emergentes em expansão por todo o mundo. A transmissão de Leishmania (L.) chagasi, se dá pela picada de fêmeas de insetos dípteros, denominados flebotomíneos, conhecidos popularmente como mosquitos "palha" ou "birigui". A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença crônica, fatal, sistêmica e infecciosa. No Brasil é causada pelo protozoário L. chagasi. Cães são os maiores hospedeiros e reservatórios do parasita L. infantum e L. chagasi com um papel central no ciclo da transmissão do parasita para os humanos, com um grande contingente de animais assintomáticos. A infecção em cães é clinicamente semelhante à infecção humana e a apoptose tem sido associada à redução de linfócitos T e células mononucleares de sangue periférico e à falha na imunidade, pois ocorre diminuição na secreção do IFN- . A desregulação da apoptose tem sido associada a várias doenças e as principais moléculas implicadas são o sistema FAS/FASL e o TRAIL, que envolvem reações imunológicas e citotoxicidade mediada pelas células T. O entendimento de tal mecanismo em cães infectados pode permitir futuras intervenções terapêuticas para reduzir a depleção dos linfócitos. Para investigar a apoptose nas células CD4+ e CD8+ e a expressão e função dos principais receptores envolvidos no processo apoptótico, FAS/FASL e TRAIL foram avaliados nas células do sangue periférico e baço de 38 cães sintomáticos com leishmaniose visceral moderada e de 25 cães saudáveis. A apoptose das células CD4+ e CD8 + do sangue e baço foi maior nos cães infectados que nos saudáveis. Nas células CD4+ do sangue e baço dos cães infectados a expressão de FAS e FASL foi menor do que a dos saudáveis, nas células CD8+ do sangue e do baço dos cães...(Resumo completo, clicar acesso aletrônico abaixo) / Abstract: Visceral leishmaniasis (VL) is a anthropozoonosis considered one of the most important emerging parasitic zoonoses expanding worldwide. The transmission of Leishmania (L.) chagasi, occurs through the bite of female insects flies, called sandflies, mosquitoes popularly known as "straw" or "birigui." Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a chronic, fatal, systemic and infectious. In Brazil it is caused by the protozoan L. chagasi. Dogs are the greatest hosts and reservoirs of the parasite L. infantum and L. chagasi with a central role in the transmission cycle of the parasite to humans, with a large contingent of asymptomatic animals. The infection in dogs is clinically similar to human infection and apoptosis has been associated with reduction of T lymphocytes and peripheral blood mononuclear cells and failure to immunity, because there is a decrease in the secretion of IFN- . Dysregulation of apoptosis has been associated with various diseases and key molecules involved are the FAS/FASL and TRAIL, which involve immune reactions and cell-mediated cytotoxicity T. The understanding of this mechanism in infected dogs may allow future therapeutic interventions to reduce the depletion of lymphocytes. To investigate apoptosis in CD4+ and CD8+ lymphocytes and the expression and function of major receptors involved in apoptotic FAS/FASL and TRAIL were assessed in peripheral blood cells and spleen of 38 dogs symptomatic patients with visceral leishmaniasis moderate and 25 healthy dogs. Apoptosis of CD4+ and CD8+ spleen and blood was... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2010. / Submitted by Luanna Maia (luanna@bce.unb.br) on 2011-06-06T15:36:47Z No. of bitstreams: 1 2010_AnaPaulaPaivadeFaria.pdf: 488721 bytes, checksum: 3bda6a7be195d840ac115ddaae3b5983 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2011-06-06T15:37:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_AnaPaulaPaivadeFaria.pdf: 488721 bytes, checksum: 3bda6a7be195d840ac115ddaae3b5983 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-06T15:37:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_AnaPaulaPaivadeFaria.pdf: 488721 bytes, checksum: 3bda6a7be195d840ac115ddaae3b5983 (MD5) / O atual estudo objetivou analisar a variabilidade genetica de linhagens vacinais de Brucella, avaliando ainda os efeitos de repiques sucessivos sobre as mesmas. Trata-se de doenca zoonotica de alcance mundial e que causa prejuizos economicos na producao animal e danos a saude publica. Visando controlar a doenca, foi instituido o Programa Nacional de Controle e Erradicacao da Brucelose e Tuberculose Animal em 2001, que inclui a vacinacao de femeas. Quanto a avaliacao genetica de linhagens vacinais, a tecnica de analise em multilocus das repeticoes em tandem de numero variavel - MLVA permite identificar a variabilidade genetica microbiana de forma acurada, identificando-se genogrupos de isolados. O atual estudo analisou 63 amostras de linhagens vacinais B19 (n=53) e RB51 (n=10), provenientes de sete laboratorios brasileiros. Tambem foi avaliado o efeito de sucessivos repiques sobre a o genoma microbiano. Desta forma, foram identificados quatro genogrupos distintos. No genogrupo I foram agrupadas as 10 amostras de B19 do laboratorio G e seus 10 repiques. Quarenta e tres amostras de B19 dos laboratorios A, B, D, E, F, H, bem como os 10 repiques das amostras E e da cepa de referencia S (USDA) foram agrupadas no genogrupo II. O genogrupo III foi composto pelas amostras vacinais de RB51 do laboratorio Y e pelos 10 repiques da linhagem Y1. Finalmente, o genogrupo IV incluiu oito amostras vacinais de RB51 e os 10 repiques das amostras X1 e da cepa de referencia Schurig. As linhagens vacinais B19 e RB51 derivaram de ramificacoes geneticas distintas que formaram, cada qual, dois genogrupos, com divergencia apenas nos loci Bruce07 e Bruce43. Concluindo, a tecnica de MLVA mostrou adequada capacidade discriminatoria, podendo ser utilizada para analises de qualidade na producao de vacinas comerciais em nosso Pais. Foi observado, ainda, que 10 passagens sucessivas nao afetam os loci avaliados. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The present study was aimed to analyze the genetic variability among Brucella abortus lineages present in commercial vaccines from Brazilian laboratories. The brucellosis is a worldwide distributed zoonotic disease. The disease may affect the livestock production as well as the human health. To control the spread of Brucellosis in Brazil, our country established the National Program for Controlling and Eradication of Animal Brucellosis and Tuberculosis – PNCEBT which included the vaccination of female bovines. The multiple locus variable number of tandem repeat analysis (MLVA) is a rapid and accurate method used to access the genetic variability among microbial isolates and to discriminate groups of genetically-related isolates. We used a previously described 16 loci MLVA method to analyze a sample composed by B19 vaccines (n=53) and RB51 vaccines (n=10) from seven Brazilian laboratories. The genetic variability after 10 successive cultures was also accessed. We identified four distinct genogroups of isolates. The genogroup I contained ten B19 samples from the laboratory G and their respective successive cultures. Forty-three B19 samples of the laboratories A, B, D, E, F, and H as well as the successive cultures of the reference S (USDA) strain and the commercial strain E, were all clustered into the genogroup II. The genogroup III included the RB51 laboratory Y’s samples and the Y1’s successive cultures. Finally, eight RB51 samples, the successive X1’s cultures, and the reference Schurig strain, were clustered into the genogroup IV. Our results revealed that the B19 and RB51 lineages derived from two distinct genetic branches that diverged in the locus Bruce07 and Bruce43. In conclusion, the MLVA showed accurate discriminatory results and would be used in future evaluations of the commercial vaccines of Brucellosis. The results of our study also showed that ten successive cultures were not able to generate genetic variability into the loci studied.

A Fazenda Três Lagoas, localizada no município de Angatuba, região do Alto Paranapanema (centro-sul do Estado de São Paulo), é uma área na qual houve introdução de espécies exóticas, como Eucalyptus sp e Brachiaria sp, que fragmentaram o habitat de cerrado original. Uma vez em que foi estabelecida atividade humana em um ambiente antes natural, houve expansão do contato entre humanos e animais domésticos com as populações de animais silvestres; sendo a influência destes fatores sobre o ecossistema local ainda pouco conhecido. O presente estudo teve como objetivo pesquisar a exposição de pequenos mamíferos silvestres e animais domésticos da região a agentes infecciosos e transmissores de zoonoses (Leptospira spp., Lyssavirus, Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Rickettsia spp.). O levantamento dos patógenos nos animais silvestres revelou resultados sorológicos positivos para Leptospira spp. (5,5%, n= 73), Rickettsia spp. (7,9%, n=38) e Toxoplasma gondii (16,1%, n= 56). Em relação aos animais domésticos, foram encontrados 40% de cães (n=10) soropositivos para N. caninum, 20% de soropositivos para Leptospira spp. e T. gondii (n=10), e 23,27% dos cães (n=11) apresentaram títulos de anticorpos menores ou iguais a 0,5 UI/ml para Raiva. Os bovinos (n=42) apresentaram resultados sorológicos positivos para N. caninum (23,8%) e Leptospira spp. (40,5%). 47,6% do gado não havia sido vacinado ou a vacinação para o vírus rábico era desconhecida. Dos 22 bovinos conhecidamente vacinados para a Raiva, 36% foram pouco reagentes ao exame sorológico. Os resultados apresentados, além de contribuírem para a avaliação do status sanitário local, contribuem para o maior conhecimento da interface entre fauna doméstica e silvestre em agroecossistemas. / Três lagoas farm, which is located in Angatuba municipality, in High Paranapanema (southeast of São Paulo state) is an area where exotic species were introduced, such as Eucalyptus sp and Brachiaria sp, which fragmented the habitat in the original Cerradão (a tropical savanna ecoregion). Once the human activity has been established in a natural environment, the contact among human beings and domestic animals with wild animal populations has increased. Nevertheless, the influence of such factors on the ecosystem has not been clarified yet. The aim of the present study was to research the exposition between wild small mammals and domestic animals of this area against infecctious and transmitters of zoonoses agents (Leptospira spp., Toxoplasma gondii, Lyssavirus, Neospora caninum and Rickettsia spp.). The raising of pathogens in the wild animals revealed positive serological results for Leptospira spp. (5,5%, n= 73), Rickettsia spp. (7,9%, n=38) e Toxoplasma gondii (16,1%, n= 56). In relation to the domestic animals, were showed 40% of dogs (n=10) seropositives for N. caninum, 20% were seropositives for Leptospira spp. and T. gondii, and 23.7% of dogs presented antibody titers less than or equal to 0,5 UI/ml for Rabies. The cattle (n=42) had serologic results positives for N. caninum (23,8%) and for Leptospira spp. (40,5%). 47.6% of the cattle had not been vaccinated or vaccination for the rabies virus was unknown. Of the 22 cattle known to be vaccinated for rabies, 36% were less reactive to serologic test. These results presented, besides evaluating the local sanitary status, they can contribute to the greater understanding of the interface between domestic and wild fauna in agricultural ecosystems.

Pombos (Columba livia) são aves exóticas, sinantrópicas, reservatórios de algumas doenças de caráter zoonótico. O presente trabalho teve por objetivo caracterizar genotipicamente isolados de Salmonella spp. e Escherichia coli diarreiogênicas de pombos domésticos. Foram coletados suabes de 118 pombos provenientes de dois zoológicos de São Paulo. Para a identificação de Salmonella spp, as amostras foram submetidas ao pré-enriquecimento em água peptonada 0,1% e incubadas a 37º C por 24-48 horas, seguida do enriquecimento seletivo em caldo de tetrationato de sódio, com incubação a 37º C por 24-48h e plaqueamento em meio seletivo XLT4, a 37º C por 24-48h. Para o isolamento de E. coli, as amostras foram semeadas em ágar MacConkey, com incubação a 37º C por 24 h. As colônias suspeitas foram identificadas por série bioquímica. A técnica de PCR foi utilizada para a confirmação do gênero Salmonella spp, identificação dos sorovares de S. Enteritidis e S. Typhimurium e para a determinação dos fatores de virulência de Escherichia coli. Dentre os 118 animais analisados, 4,23% (5/118) foram positivos para Salmonella spp, sendo todos do sorovar S. Typhimurium. Foram identificadas estirpes diarreiogênicas de E. coli, positivas para os fatores de virulência eae (8/118), bfp (4/118) e stx2f (3/118). Na análise filogenética pela técnica de AFLP, as estirpes de E. coli diarreiogênicas apresentaram uma diversidade genética, mas as estirpes de S. Typhimurium foram consideradas clonais. Os dados deste trabalho destacam o risco sanitário relacionado ao forrageamento da espécie Columba livia em zoológicos, por meio da confirmação da presença de Salmonella Typhimurium, EPEC típica, EPEC atípica e STEC nas excretas destas aves / Pigeons (Columba livia) are exotic birds, synanthropic and reservoirs of some zoonotic diseases. The aim of this study was to characterize genotypically isolates of Salmonella spp. and diarrheagenic strains of Escherichia coli isolated from domestic pigeons. Fecal swabs of 118 pigeons were collected from two zoos in São Paulo. The samples were subjected to a pre-enrichment step being placed in peptone water solution of 0.1% and incubated for 24-48 h at 37º C. Thereafter it was performed selective enrichment step where the samples were transferred in sodium tetrathionate broth with incubation for 24-48 h at 37º C, followed by plating on selective medium XLT4 incubation for 24-48h at 37º C for isolation and identification of Salmonella spp. The samples were also placed in BHI broth for a period of 24 h and then plated on MacConkey medium with incubation for 24h at 37º C for isolation of E. coli. Subsequent microbiological step, the isolates were subjected to DNA extraction using the methodology described by Boom for PCR. Polymerase chain reaction (PCR) was employed for identification of the Salmonella serovar Enteritidis and Typhimurium and virulence factors of E. coli. Of the 118 animals tested, 4.23% (5/118) were positive for Salmonella spp., all characterized as being serovar S. Typhimurium. Some E. coli strains (8/118) were positive for virulence factors: eae, 3,38% (4/118), bfp and 2.54% (3/118) to stx2f. In phylogenetic analysis by AFLP, strains of diarrheagenic E. coli showed a genetic diversity, but S. Typhimurium presented a clonal relationship. Data from this study highlight the health risk related to the foraging of Columba livia in zoos, because they can be reservoirs of Salmonella Typhimurium, typical and atypical EPEC and STEC

Introdução Nas últimas décadas, têm sido recorrente na literatura científica nacional e internacional, a constatação da contaminação de ambientes públicos abertos à comunidade por parasitas com potencial zoonótico e propagadores de infecções humanas. Os geohelmintos são parasitas que podem infectar o homem, entretanto, para que ocorra o embrionamento e, assim tornem-se infectantes requerem obrigatoriamente um período no solo com condições adequadas, principalmente, de temperatura e umidade. Objetivos Avaliar a contaminação do solo por geohelmintos em localidades públicas da zona leste da cidade de São Paulo e a influência da variação sazonal sobre a contaminação. Métodos Dez praças públicas com parque infantil e freqüentadas por pessoas e animais foram sorteadas. Por um período de 12 meses, foram coletadas aproximadamente 250 gramas de amostras de solo de cinco pontos diferentes de cada praça, através da técnica de quarteamento da ABNT foram obtidas 10 gramas de cada amostra, que foram processadas de acordo com a técnica de flotação em solução saturada de cloreto de sódio, para qualificação e quantificação dos parasitos. Utilizou-se o teste de Mann Whitney para comparação de quantidade de ovos e o de regressão linear simples para avaliar a correlação entre as variáveis climáticas. Resultados De um total de 1800 amostras analisadas, foi observado que 49,7 por cento estavam positivas. Dentre os parasitas encontrados notou-se a presença de ovos de Toxocara spp. (44,2 por cento), Ascaris spp. (33,9 por cento), Ancilostomídeos (3,8 por cento), Enterobius spp. (0,6 por cento), Hymenolepis spp (0,4 por cento), Capillaria spp. (0,2 por cento) e Trichuris spp. (0,1 por cento); larvas de nematódeos (16,1 por cento); cistos de Balantidium coli (0,5 por cento) e de Entamoeba coli (0,2 por cento). O conjunto de variáveis climáticas de precipitação, vento e temperatura apresentaram forte influência na recuperação de ovos de parasitas (p=0,02). Conclusões A presença de estruturas parasitárias no solo das praças públicas estudadas indica o risco potencial de transmissão de infecção humana e zoonoses à população; notou-se ainda que a variação climática foi preponderante na frequência de recuperação dos ovos no solo. Os dados apontam para a necessidade de programas de conscientização da população e a implementação de diretrizes regulamentadoras quanto à contaminação de localidades públicas por parasitas / Introduction - In recent decades, have been recurrent in the national and international scientific literature, the finding of contamination of public places open to the community by parasites with zoonotic potential and spreaders of human infections. The geohelminths are parasites that can infect humans, however, to allow for the embryo and thus become infective require a mandatory period in the soil with appropriate conditions, mainly, temperature and humidity. Objectives - To evaluate the soil contamination by geohelminths in public places in the eastern city of Sao Paulo and the influence of seasonal variation on the contamination. Materials and Methods - Ten public parks with playground and frequented by people and animals were randomly selected. For a period of 12 months, were collected approximately 250 grams of soil samples from five different points of each square, using the technique of quartering ABNT were obtained 10 grams of each sample, were processed according to the technique of flotation saturated solution of sodium chloride, for qualification and quantification of parasites. We used the Mann Whitney test to compare the amount of eggs and simple linear regression to assess the correlation between climatic variables. Results - A total of 1800 samples, we observed that 49.7 per cent were positive. Among the parasites found it was noticed the presence of Toxocara spp. (44.2 per cent), Ascaris spp. (33.9 per cent), Hookworms (3.8 per cent), Enterobius spp. (0.6 per cent), Hymenolepis spp (0.4 per cent), Capillaria spp. (0.2 per cent) and Trichuris spp. (0.1 per cent), larvae of nematodes (16.1 per cent), cysts of Balantidium coli (0.5 per cent) and Entamoeba coli (0.2 per cent). The set of climatic variables of precipitation, wind and temperature had strong influence on the recovery of parasite eggs (p = 0.02). Conclusions - The presence of parasitic structures on the ground of public plazas study indicates the potential risk of human infection and transmission of zoonoses to the population, yet it was noted that climate change was prevalent in the frequency of recovery of eggs in soil. The data indicate the need for programs of public awareness and implementation of regulatory guidelines regarding the contamination of public places by parasites