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Caracterização do extrato de aroeira (Myracrodruon urundeuva) e seu efeito sobre a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos

Machado, Alessandra Cury 29 August 2013 (has links)
A aroeira (Myracrodruon urundeuva) é uma árvore cujas folhas vem sendo estudadas com fins terapêuticos na medicina e odontologia por apresentar potencial antiinflamatório e antimicrobiano, além de favorecer o processo de reparo e cicatrização. O objetivo do trabalho foi caracterizar quimicamente o extrato de aroeira e avaliar seu efeito sobre fibroblastos gengivais humanos. Foi realizado a caracterização química da aroeira por meio do processo de triagem cromatográfica que consistiu na coleta das folhas sadias, maceração em metanol (MeOH) 80%, partição entre os solventes hexano, acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (n-(BuOH)) Em seguida, realizaram-se análises dos compostos químicos em cromatografia liquida de alta eficiência acoplado a detector de arranjo de fotodiodo HPLC-PAD, análises por espectrometria de massas MS e cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS). Posteriormente foi realizada a análise de citotoxicidade do extrato hidroalcoólico de aroeira em fibroblastos gengivais humanos (linhagem FGH). Para a realização dos experimentos foram plaqueadas 2x103 células/poço em placas de 96 poços. O meio de cultivo foi substituído por meio de cultura de Eagle modificado por Dullbecco complementado por 10% soro fetal bovino (SFB) em diferentes concentrações do extrato hidroalcoólico de aroeira (extrato bruto; 1:10; 1:100; 1:1000; 1:10000 e controle). As análises de viabilidade foram feitas nos tempos experimentais de 24, 48, 72 e 96 horas, por meio dos testes de redução do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio), captação do vermelho neutro e coloração pelo cristal violeta. A estatística foi realizada em análise de variância de 2 critérios seguido de uma análise de teste Tukey (p<0,05). Os compostos encontrados no extrato foram os derivados de ácido gálico, galotaninos, além de flavonoides. Para a redução do MTT os resultados mostraram uma ligeira oscilação da absorbância em todos os grupos nos períodos experimentais. Destaque para as diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 que apresentaram, em geral para todos os períodos, os maiores valores; enquanto os grupos de extrato bruto e diluição 1:10 apresentaram valores inferiores aos outros grupos (p<0,05). Na análise da captação do vermelho neutro também houve uma leve oscilação dos valores de absorbância, no entanto os valores obtidos para o grupo do extrato bruto foram os menores em todos os períodos estudados (p<0,05). Enquanto os grupos controle e de diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 apresentaram valores semelhantes sem diferença significante (p>0,05). Para o teste do cristal violeta, os resultados encontrados seguiram o mesmo padrão do vermelho neutro: valores de absorbância menores nos grupos do extrato bruto e 1:10, ao contrário dos outros grupos que apresentaram valores maiores (p<0,05). Em vista dos resultados, podemos concluir que o extrato metanólico de aroeira apresenta em sua composição taninos, flavonóides e derivados de ácido gálico e de galotaninos. Além disso, o extrato de aroeira é capaz de modular a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos de maneira dose-dependente. / Aroeira (M. urundeuva) is a tree whose leaves have been studied with therapeutic purpose in dentistry and medicine, due it antimicrobial and antinflamatory potencial protect, besides the repair and cicatrization processes. The aim of the study was characterize the aroeiras extract and evaluate effect over human gingival fibroblast. The aroeiras characterization was realized by means of chromatography screenuy, process that consists in healthy leaves maceration in 80% MeOH, partition in the BuOH, AcOEt and hexanes solvents. Next, the chemicals compounds were analysed in High Performance Liquide Chromatography-Photo Diode Array (HPLC-PAD), Liquide Chromatography Mass Spectrometry (LCMS) and Mass Spectrometry (MSs). Subsequently was realized the citotoxicitys analysis from the aroeira hidroalcooholic extract in human gingival fibroblast (FGH lineage). For the experiments realization was platted 2x103 cels/well in 96 wells plate. The cultives mean was substituted for Eagles means culture changed for complemented Dullbeco for 10% bovine fetal serum in aroeiras hidroalcooholic extracts concentrations different (brute extract, 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000). The viability analysis was carried out in experimental times 24, 48, 72 and 96 hours, by means of MTT reductions test (brometo3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio), neutral red captation and violet crystal). The statistics were performed for analysis of variance in 2 criteria continue with a Tukey test analysis (p<0.05). The founded compounds in the extract was the galic acid, gallotanine linked to glucose, besides flavonoids. For the MTTs reduction the results display an absorbance oscillation lightness in all the groups in experimental periods. Distinction for the control group and 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution, that present, by and large, for all the periods, the biggest valuable, while the brute extract group and 1:10 dilution present valuable lower to the others groups (p<0.05). In neutral red is caption analysis there was an absorbants values light oscillation too, despite this, the gotten values for the brute extracts group was smaller in all the studied periods (p<0.05). While the control group and the 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution presented similar values without significant difference (p>0.05). In view of the results, conclude the aroeiras methanolic extract present in your composition flavonoids and gallotanine, and galic acid derivates. Then, the aroeiras extracts is able to human gingival fibroblasts viable modulate dependent dose way.
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Avaliação da atividade antibacteriana de extratos de plantas medicinais: Significância sanitária em região de tríplice fronteira / Evaluation of the antibacterial activity of extracts of medicinal plants: Sanitary significance in the region of triple border

Ferreira, Helder 11 February 2019 (has links)
Nesta tese, objetivou-se avaliar a ação antibacteriana in vitro dos extratos das plantas medicinais mais utilizadas no município de Foz do Iguaçu e região,sobre Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae e Staphylococcus aureus. As plantas mais utilizadas no município de Foz do Iguaçu e região, que são: Mikania glomerata (Guaco), Mentha piperita (Hortelã), Maytenus officinalis (Espinheira-santa) e Aloe vera (Babosa) foram preparadas como fitoterápicos e cedidas pelo Horto de plantas medicinais da hidroelétrica Itaipu Binacional. Para esta avaliação foram preparados extratos hidroalcóolico a 70% por percolação e extratos aquosos por infusão destas plantas. Os extratos hidroalcóolicos foram levados a rota-evaporação e os aquosos ao liofilizador. Também foi extraído o óleo essencial da hortelã pimenta empregando o método de destilação por arraste a vapor d\'água em aparelho de Clevenger seguido da cromatografia por camada delgada. A atividade antibacteriana dos extratos foi testada sobre as linhagens padrão de Pseudomonas aeruginosaATCC (27853), Staphylococcus aureusATCC (25923) e Klebsiella pneumoniaeATCC (13883). A determinação das concentrações inibitórias mínimas (CIM)e das concentrações bactericidas mínimas (CBM)dos extratos vegetais sobre as linhagens bacterianas foram determinadas pelo método de microdiluição em microplaca segundo a metodologia preconizada pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Entre os extratos hidroalcoólicos e aquosos das plantas testados, somente o extrato hidroalcoólico de Guaco (Mikania glomerata) apresentou atividade antibacteriana positiva sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923, na concentração de 200 µg. Também foi observada atividade antibacteriana do óleo essencial da Hortelã pimenta (Mentha piperita) sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923, com CIM de 1000 µg/mL, Klebsiella pneumoniaeATCC 13883 com CIM de 2000 µg/mL e CBM > 2000 µg/mL e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 com CIM e CBM de 2000 µg/mL.Os fitoterápicos mais prescritos nas unidades básicas de saúde do município de Foz do Iguaçu são o Guaco e a Espinheira Santa. Considerando os resultados dos esperimentos que apontam a atividade antibacteriana dos extratos das plantas medicinais mais utilizadas em Foz do Iguaçu e região, pode-se indicar que os estratos de Guaco, Hortelã-pimenta, Espinheira Santa e Babosa, bem como óleo essencial de hortelã-pimeta prometem uma altermativa possível no tratamento de doenças infecciosas / In this thesis, the objective was to evaluate the in vitro antibacterial action of extracts of medicinal plants most used in the municipality of Foz do Iguaçu and region, on Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae and Staphylococcus aureus. The most used plants in the municipality of Foz do Iguaçu and region, which are: Mikania glomerata (Guaco), Mentha piperita (Hortelã pimenta), Maytenus officinalis (Espinheira-santa) and Aloe vera (Babosa) were prepared as phytotherapics and yielded by Horto de plants of the Itaipu Binacional hydroelectric plant. For this evaluation 70% hydroalcoholic extracts were prepared by percolation and aqueous extracts by infusion of these plants. The hydroalcoholic extracts were rotoevaporated and the aqueous extracts were added to the lyophilizer. The peppermint essential oil was also extracted using the water vapor distillation method in a Clevenger apparatus followed by thin layer chromatography. The antibacterial activity of the extracts was tested on the standard strains of Pseudomonas aeruginosa ATCC (27853), Staphylococcus aureus ATCC (25923) and Klebsiella pneumoniae ATCC (13883). The determination of minimum inhibitory concentrations (MIC) and minimum bactericidal concentrations (CBM) of the plant extracts on the bacterial strains were determined by the microplate microdilution method according to the methodology recommended by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Among the hydroalcoholic and aqueous extracts of the plants tested, only the hydroalcoholic extract of Guaco (Mikania glomerata) showed positive antibacterial activity on Staphylococcus aureus ATCC 25923, in the concentrations of 400 ?g and 200 ?g. The other hydroalcoholic and aqueous extracts presented bacteriostaticg and 200 ?g and 200 ?g. The other hydroalcoholic and aqueous extracts presented bacteriostaticg. The other hydroalcoholic and aqueous extracts presented bacteriostatic activity. Antimicrobial activity of peppermint (Mentha piperita) essential oil on Staphylococcus aureus ATCC 25923, with MIC of 1000 ?g and 200 ?g. The other hydroalcoholic and aqueous extracts presented bacteriostaticg / mL, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 with MIC of 2000 ?g and 200 ?g. The other hydroalcoholic and aqueous extracts presented bacteriostaticg / mL and CBM >= 2000 ?g and 200 ?g. The other hydroalcoholic and aqueous extracts presented bacteriostaticg / mL and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 with MIC and CBM of 2000 ?g and 200 ?g. The other hydroalcoholic and aqueous extracts presented bacteriostaticg / ml. The most prescribed herbal medicines in the basic health units of the municipality of Foz do Iguaçu are Guaco and Espinheira Santa. Considering the results of the experiments that point out the antibacterial and bacteriostatic activity of the most used medicinal plants in Foz do Iguaçu, it is possible to indicate that the extracts of Guaco, Peppermint, Espinheira Santa and Babosa as well as peppermint essential oil can serve as an alternative in the treatment of infectious diseases
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SUBSÍDIOS PARA IMPLANTAÇÃO DO PROGRAMA DE FITOTERAPIA NO MUNICÍPIO DE IMPERATRIZ, ESTADO DO MARANHÃO

Nunes, Sheila Elke Araujo 28 June 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-10T10:29:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sheila Elke Araujo Nunes.pdf: 1602464 bytes, checksum: abd927bf50d2a5777d548fc35de84e8c (MD5) Previous issue date: 2010-06-28 / The indication of phytotherapy as an alternative health practice is a recommendation by the World Health Organization (WHO) and a worldwide practice. In many Brazilian states and cities this kind of therapeutic alternative is available in basic health services, which has favorably indicated the amplification of the medicare prescription drug coverage. This work aims to expose information to implement a phytotherapic project in the basic health assistance web in the district of Imperatriz, state of Maranhão. Between June and August, 2009, an ethnopharmacologic research was made in 29 basic health units of the family health program, in which 624 over eighteen years users were interviewed who were at the health unit during the period of the research and all agreed on participating. It was also collected information from 69 health professionals, among medical doctors, nurses and pharmacologists. It was noticed that 602 (96,5%) out of 624 interviewed users agreed on the inclusion of phytotherapic drugs in the roll of basic medications available by the city and 502 (80,45%) of them use medicinal plants as alternative therapy. One perturbing fact is that 433 (86,3%) of the interviewed users informed that they use medicinal plants without any restriction relating to the preparation, therapeutic measures and intermission between the dosages relying on the belief that there is no harm from medicinal plants. There is accordance among the health professionals relating to the implementation of the project and 64 (92,7%) showed interest in participating on specialization or capabilities courses in the field. In the city of Imperatriz the implement of the project is possible, and it disposes of a good acceptance among users and health professionals. / A indicação da fitoterapia como prática alternativa de saúde, trata-se de uma recomendação da Organização Mundial de Saúde (OMS), praticada mundialmente. No Brasil vários estados e municípios dispõem desta alternativa terapêutica nos serviços básicos de saúde, o que vem pontuando de forma favorável na ampliação da cobertura medicamentosa. Este trabalho tem como objetivo viabilizar informações para a implantação de um projeto de fitoterapia na rede de atenção básica do município de Imperatriz, estado do Maranhão. No período de junho a agosto de 2009 realizou-se um levantamento etnofarmacológico, em 29 Unidades Básicas de Saúde do Programa Saúde da Família, no qual foram entrevistados 624 usuários maiores de dezoito anos, que se encontrava na unidade de saúde no momento da pesquisa e que concordaram participar. Coletou-se também informações de 69 profissionais de saúde, entre, médicos, enfermeiros e farmacêuticos. Observou-se que 602 (96,5%) dos 624 usuários entrevistados aprovam a inclusão de medicamentos fitoterápicos na relação de medicamentos básicos disponibilizados pelo município e 502 (80,45%) destes utilizam plantas medicinais como alternativa terapêutica. Um dado preocupante é o fato de 433 (86,3%) dos pesquisados, informarem que utilizam plantas medicinais sem qualquer restrição quanto a forma de preparo, medidas terapêuticas e intervalo entre as administrações, por acreditarem que as plantas medicinais não causam danos à saúde. Quanto aos profissionais de saúde todos, os entrevistados, concordaram com a implantação do projeto e 64 (92,7%) demonstram ter interesse em participar de cursos de especialização ou capacitação na área. Conclui-se que no município de Imperatriz a implantação do projeto é viável, e dispõe de uma boa aceitação entre usuários e profissionais de saúde.
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O USO DE PLANTAS MEDICINAIS PARA EDUCAÇÃO AMBIENTAL NAS ESCOLAS MUNICIPAIS DE JARAGUÁ-GOIÁS.

Oliveira, Daniele Lopes 25 March 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-10T10:45:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DANIELE LOPES OLIVEIRA.pdf: 617119 bytes, checksum: 833965213bb11e32a2e2fc9ce48a877d (MD5) Previous issue date: 2009-03-25 / In Brazil, environmental education has become Law No 9795 on April 27, 1999. As a permanent and essential component of national education that should be present in order articulated at all levels and modalities of the educational process, in character formal and non-formal. Environmental education in all attempts to awaken the conscience of the human being is part of the environment, superadded the anthropocentric view and develop an educational activity which seeks a permanent practice that binds the student to the school community and non-school to develop values and attitudes that promote a behavior directed the transformation overcome this reality, both in natural and social aspects to develop a process of transformation. To achieve this goal has proposed the creation of gardens for medicinal plants typical of the Cerrado in schools in the municipal network of Jaraguá seeking to promote environmental education and the consequent preservation and enhancement of that work. / No Brasil a educação ambiental tornou-se Lei n.° 9.795 em 27 de abril de 1999. Sendo um componente essencial e permanente da educação nacional que deve estar presente de forma articulada em todos os níveis e modalidades do processo educativo, em caráter formal e não-formal. A educação ambiental tenta despertar em todos a consciência de que o ser humano é parte do meio ambiente, superarando a visão antropocêntrica e desenvolver uma ação educativa permanente pela qual busca uma prática que vincula o aluno a comunidade escolar e não-escolar à desenvolver valores e atitudes que promovam um comportamento dirigido a transformação superadora dessa realidade, tanto em seus aspectos naturais como sociais para desenvolver um processo de transformação. Para alcançar esse objetivo foi proposto a implantação de hortas de plantas medicinais típicas do Cerrado nas escolas da rede municipal de Jaraguá buscando promover educação ambiental e a conseqüente preservação e valorização desse bioma.
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Ensaios mutagênicos em decocto de Cochlospermum regium (Mart. et. Schr.) Pilger (Bixaceae) em Poecilia reticulata e Linfócitos humanos. / Mutagenic assays in decoct of Cochlospermum regium (Mart et. Schr.) Pilger (Bixacea) in Poecilia reticulate and human lymphocyte.

Figueiredo, Flávia Rodrigues Gomes 13 March 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-10T10:53:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FLAVIA RODRIGUES GOMES FIGUEIREDO.pdf: 6674066 bytes, checksum: d05bac26a9bf315338d0abbf618eaf34 (MD5) Previous issue date: 2012-03-13 / Cochlospermum regium is a typical Cerrado medicinal plant, known as Cotton-docerrado, much used by local people as an analgesic, antiinflammatory, and antibacterial antiedematogenic. However, many chemical constituents of medicinal plants can be toxic and harmful to human health. Therefore, it is necessary to evaluate the potential cytotoxic, mutagenic and genotoxic potential of aqueous extract of this species. With this goal in vivo tests were performed in Poecilia reticulata and in vitro human peripheral blood lymphocytes. Was estimated for both the lethal concentration (CL50/96h) of decoction of C. regium also performed a Micronucleus Test (MN) and comet assay (EC). Tests with P. reticulata were conducted in aquaria with standard acute exposure for 96 hours. The CL50/96h was estimated at 0.25 gL -1. For testing the MN and EC concentrations used were 0.25 gL-1, 0.19 gL-1, 0.13 gL -1 and 0.06 gL-1 in addition to the negative control. As the experimental conditions of the decoction C. 2.2) of± 1.5) and micronuclei (5.6 ±regium showed difference (p = 0.0046 and p = 0.0007) between the concentration of 0.25 gL-1 with an average of (5.5 1.6) respectively, thus showing cytotoxic and mutagenic by micronucleus test.± 1.3) and (2.7 ±erythrocytic nuclear changes with the negative control (2.8 Correlation was observed and linear regression between the positive damage observed in erythrocytes of P. reticulata and the concentrations of the decoction evaluated. However, no genotoxic activity was identified by the comet assay (p = 0.6289 and p = 0.7677) concentrations in any of the parameters for the length of DNA in the comet's tail and quantity of DNA in the comet's tail, also showing no correlation, or simple linear regression between the results obtained and the concentrations tested. For the tests in vitro CL50/96h in human lymphocytes was estimated at 1.73 gL-1. The micronucleus test was performed in whole cultures for 72 hours and comet assay for 3 hours at concentrations of 1.73 gL-1, 1.29 gL-1, 0.86 and 0.43 gL-1 gL -1 of the decoction, CN and CP to methyl methane sulfonate at a 12 concentration of 80ìM and 70 mM respectively. The decoction these concentrations did not differ (p = 0.6235) with the negative control, showing no mutagenic activity in binucleated human lymphocytes, however, correlated and significant linear regression between the concentrations of the decoction and the number of micronuclei observed. For the comet assay, considering the parameters of the comet tail length (p <0.0001) and amount of DNA in the comet's tail (p = 0.0037) difference was observed between the means obtained in human lymphocytes at concentrations of 1, 0.013 0.003) decoction C.± ±73g.L-one (0.46 and 3.98 0.0008), thus demonstrating the potential genotoxicity.± 0.003 ±regium with the average negative control (0.13 and 0.69 It was found that there was strong correlation and linear regression between the measured concentrations and the observed damage. In short, the decoction of C. regium concentrations evaluated in P. reticulata and human lymphocytes showed cytotoxic, genotoxic and mutagenic including concentrationdependent. In this context, due to damage DNA, the decoct this species and its products in the customary conditions is contraindicated for use by the general population. / Cochlospermum regium é uma planta medicinal típica do Cerrado, conhecida como algodãozinho-do-cerrado, muito utilizada pela população como analgésico, antiinflamatório, antiedematogênico e antibacteriano. Porém, muitos constituintes químicos de plantas medicinais podem ser tóxicos e nocivos para a saúde humana. Portanto, faz-se necessário avaliar o potencial citotóxico, genotóxico e mutagênico do extrato aquoso desta espécie. Com este objetivo foram realizados testes in vivo em Poecilia reticulata e in vitro com linfócitos humanos do sangue periférico. Para ambos foi estimada a concentração letal (CL50/96h) do decocto de C. regium, além disso, foram realizados o Teste do Micronúcleo (MN) e o Ensaio Cometa (EC). Os testes com P. reticulata foram realizados em aquários padronizados com exposição aguda por 96h. A CL50/96h foi estimada em 0,25g.L-1. Para os testes do MN e EC foram utilizadas as concentrações de 0,25g.L-1, 0,19g.L-1, 0,13g.L-1 e 0,06g.L-1 além do controle negativo. Conforme as condições experimentais o decocto de C. regium apresentou diferença (p=0,0046 e p=0,0007) entre a concentração de 0,25g.L-1 com média de (5,5±1,5) micronúcleos e (5,6±2,2) de alterações eritrocíticas nucleares com o controle negativo (2,8±1,3) e (2,7±1,6) respectivamente, portanto exibindo ação citotóxica e mutagênica pelo teste do micronúcleo. Foram observadas correlação e regressão linear simples positiva entre os danos observados em eritrócitos de P. reticulata e as concentrações do decocto avaliadas. Porém, não foi identificada atividade genotóxica pelo ensaio cometa (p=0,6289 e p=0,7677) em nenhuma das concentrações para os parâmetros comprimento de DNA na cauda do cometa e quantidade de DNA na cauda do cometa, não apresentando também correlação, nem regressão linear simples entre os resultados obtidos e as concentrações avaliadas. Para os ensaios in vitro a CL50/96h em linfócitos humanos foi estimada em 1,73g.L-1. O teste do micronúcleo foi realizado em culturas 10 completas por 72 horas e ensaio cometa por 3 horas nas concentrações de 1,73g.L- 1, 1,29g.L-1, 0,86g.L-1 e 0,43g.L-1 do decocto, CN e CP com Metil Metano Sulfonato na concentração de 80µM e 70 µM respectivamente. O decocto nestas concentrações não apresentou diferença (p=0,6235) com o controle negativo, não exibindo atividade mutagênica em linfócitos humanos binucleados, entretanto, apresentou correlação e regressão linear simples significativas entre as concentrações do decocto e a quantidade de micronúcleos observados. Para o ensaio cometa, considerando os parâmetros comprimento da cauda do cometa (p<0,0001) e quantidade de DNA na cauda do cometa (p=0,0037) foi observada diferença entre as médias obtidas em linfócitos humanos na concentração de 1,73g.L-1(3,98±0,46 e 0,013±0,003) do decocto de C. regium com as médias do controle negativo (0,69±0,13 e 0,003±0,0008), desta forma demonstrando potencial ação genotóxica. Também foi constatado que houve forte correlação e regressão linear simples entre as concentrações avaliadas e os danos observados. Em suma, o decocto de C. regium nas concentrações avaliadas em P. reticulata e linfócitos humanos apresentou atividades citotóxica, genótoxica e mutagênicas inclusive com relação concentração-dependente. Neste contexto, devido aos danos causados no DNA, o decoto desta espécie e seus produtos nas condições costumeiras é contraindicado para uso geral pela população.
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Plantas medicinais utilizadas por pessoas com Diabetes mellitus controlam o estresse oxidativo e apresentam baixa toxicidade: avaliação in silico, in vitro e in vivo da “Pata-de-vaca” e “Macela”

Salgueiro, Andréia Caroline Fernandes 27 February 2017 (has links)
Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-13T17:39:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) ANDRÉIA CAROLINE FERNANDES SALGUEIRO.pdf: 5179931 bytes, checksum: b1e888ee98755fdef5badebb2b78a8a0 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-13T17:39:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) ANDRÉIA CAROLINE FERNANDES SALGUEIRO.pdf: 5179931 bytes, checksum: b1e888ee98755fdef5badebb2b78a8a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T17:39:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) ANDRÉIA CAROLINE FERNANDES SALGUEIRO.pdf: 5179931 bytes, checksum: b1e888ee98755fdef5badebb2b78a8a0 (MD5) Previous issue date: 2017-02-27 / Muitas plantas são utilizadas na medicina tradicional para o tratamento do Diabetes mellitus (DM) e suas complicações. A hiperglicemia crônica no DM está intimamente associada ao aumento do estresse oxidativo. Assim, esta pesquisa teve como objetivos: i) investigar quais plantas são utilizadas na medicina tradicional por pessoas com DM na cidade de Uruguaiana/RS; ii) avaliar o potencial antidiabético, antioxidante e toxicológico de duas destas plantas in silico, in vitro e in vivo. Para isso, foi realizada uma entrevista com 105 pessoas com DM em Uruguaiana/RS, no intuito de investigar os hábitos de consumo de plantas medicinais (Manuscrito 1). Dos entrevistados, 67,6% afirmaram usar plantas medicinais. As quatro plantas mais utilizadas foram a pata-de-vaca (Bauhinia), jambolão (Syzygium jambolanum; Syzygium cumini), camomila (Matricaria recutita) e macela (Achyrocline satureioides). A infusão foi a forma de preparo mais utilizada e a frequência de consumo, em mais de 80% dos casos, foi diária. Predições in silico dos constituintes majoritários das plantas mais utilizadas mostraram a existência de provável atividade (Pa) antidiabética para alguns dos compostos analisados (Manuscrito 1). Na sequência, o potencial antidiabético, antioxidante e tóxico da Bauhinia forficata Link subsp. pruinosa (BF) foi testado in silico, in vitro e in vivo, neste último caso utilizando camundongos com hiperglicemia crônica (Manuscrito 2). Os resultados mostram que os fitoconstituintes previamente identificados na infusão de BF (quercetin 3-o-(2-rhamnosyl)rutinoside; kampferol 3-o-(2-rhamnosyl)rutinoside; quercetin-3-O-rutinoside; e kaempferol-3-O-rutinoside) apresentam alta predição in silico como antioxidantes e baixa predição como antidiabéticos e como agentes tóxicos (mutagenicidade, cardiotoxicidade e hepatotoxicidade). A predição antioxidante foi confirmada in vitro e ex vivo, sendo a BF capaz de reduzir a peroxidação lipídica e controlar os níveis de espécies reativas à diclorofluoresceína (DCF-RS) em eritrócitos de camundongos com hiperglicemia crônica. Da mesma forma, a baixa predição antidiabética foi ratificada, visto que tanto a hiperglicemia, quanto os demais sintomas clássicos do DM (poliúria, polidpsia, polifagia e perda de peso) não foram controlados pelo tratamento com a BF (Manuscrito 2). Além disso, a ação da BF sobre os danos hepáticos induzidos pela hiperglicemia foi avaliada em camundongos com DM (Artigo 1). Os resultados mostraram que os animais com DM apresentavam altos níveis de NQO-1 no pâncreas, e de DCF-RS e lipoperoxidação no fígado, assim como diminuição da atividade da catalase hepática. O tratamento com a BF foi capaz de normalizar estes parâmetros, porém não teve efeitos sobre a hiperglicemia, a hepatomegalia, as proteínas carboniladas, os tiois não-proteicos e a atividade da - aminolevulinato desidratase (Artigo 1). Adicionalmente, o potencial antidiabético, antioxidante e tóxico da Achyrocline satureioides (AS) foi testado (Artigo 2). A toxicidade foi predita in silico e avaliada in vitro no ensaio de cometa com linfócitos humanos isolados, e no ensaio de determinação da dose letal mediana (DL50) em naúplios de Artêmia salina. Os resultados mostraram que os componentes majoritários identificados na infusão de AS (quercetina, isoquercitrina e ácido cafeíco) apresentam alta predição como antioxidantes e baixa predição de toxicidade, exceto para a quercetina. A ação antioxidante foi confirmada tanto para o extrato aquoso bruto (infusão), quanto para os constituintes isolados. A DL50 determinada classifica a planta como não tóxica. No ensaio de cometa não foi identificado potencial genotóxico para a infusão de AS (Artigo 2). Os dados apresentados confirmam o elevado uso de plantas por pessoas com DM na medicina tradicional. Da mesma forma, as análises realizadas apontam o estresse oxidativo como sendo um dos mecanismos envolvidos nos danos teciduais decorrentes do DM. As análises mostram ainda que os efeitos protetores resultantes do tratamento com a BF podem ser atribuídos à sua capacidade antioxidante, demonstrada in vitro e ex vivo, visto que não foi identificado potencial antidiabético in silico e in vivo. Nesta mesma linha, o alto potencial antioxidante e baixa predição toxicológica apontam a AS como uma alternativa para o tratamento dos danos causados pelo estresse oxidativo. Em suma, os resultados aqui apresentados permitem concluir que a planta BF, utilizada na medicina tradicional para tratar DM e suas complicações, não apresenta efeito antidiabético direto na forma como foi aqui testada. No entanto, sua importante atividade antioxidante faz, tanto da BF quanto da AS, potenciais agentes para o tratamento complementar do DM, especialmente considerando as complicações diabéticas decorrentes do incremento do estresse oxidativo. Neste contexto, abrem-se perspectivas para investigações futuras do uso dessas plantas como terapia complementar ao tratamento clínico tradicional. / Medicinal plants are extensively used in traditional medicine to treat Diabetes mellitus (DM) and its complications. Chronic hyperglycemia in DM is pointed as responsible for oxidative stress development. The aims of this study were: i) to evaluate which plants are used in traditional medicine by people with DM in Uruguaiana/RS; ii) to evaluate the antidiabetic, antioxidant and toxicological potential for two of these plants in silico, in vitro e in vivo. For this, a research with 105 DM patients from Uruguaiana/RS was conducted to investigate their medicinal plants consumption habits (Manuscript 1). From the interviewed people, 67.6% say they do use medicinal plants. The four more used plants were “cow paw” (Bauhinia), jambolan (Syzygium jambolanum; Syzygium cumini), chamomile (Matricaria recutita), and macela (Achyrocline satureioides). The most used form of consumption was the infusion; in more than 80% of the cases, the consumption frequency was daily. Predictions in silico for the major phytoconstituents of the most used plants showed that some compounds presented probable antidiabetic activity (Manuscript 1). In sequence, the antidiabetic, antioxidant and toxicological potential of Bauhinia forficata Link subsp. pruinosa (BF) was tested in silico, in vitro and in vivo, in the last case using mice with chronic hyperglycemia (Manuscript 2). Results show that the phytoconstituents previously identified in the BF infusion (quercetin3-o-(2-rhammosyl)rutinoside; kampferol 3-o-(2-rhammnosyl)rutinoside; quercentin-3-O-rutinoside; and kaempferol-3-o-rutinoside) show high prediction in silico as antioxidants and low prediction as antidiabetic agents and toxic agents (mutagenicity, cardiotoxicity and hepatotoxicity). The antioxidant prediction was confirmed in vivo and ex vivo. BF was able to reduce lipid peroxidation and to control the reactive dichlorofluroscein species (DCF-RS) levels in erythrocytes from hyperglycemic mice. In the same way, the low antidiabetic prediction was ratified, since both hyperglycemia and other classic DM symptoms (polyuria, polydipsia, polyphagia, and weight loss) were not controlled by BF treatment (Manuscript 2). Besides, the BF action in the hepatic damages induced by hyperglycemia was evaluated in mice with DM (Article 1). Diabetic mice showed high levels of NQO-1 in pancreas, and of DCF-RS and lipid peroxidation in the liver, as well as decrease in the activity of hepatic catalase. BF treatment was able of normalizing these parameters. However, it did not have any effects over hyperglycemia, hepatomegaly, carbonylated proteins, non-protein thiols, and the - aminolevulinate dehydratase activity (Article 1). Additionally, the antidiabetic, antioxidant, and toxicological potential of Achyrocline satureioides (AS) was tested (Article 2). The toxicity was predicted in silico and, after, evaluated in vitro with the comet assay using human lymphocytes. The median lethal dose (LD50) was evaluated in nauplii of Artemia salina. Results showed that the AS major compounds (quercetin, isoquercitrin, and caffeic acid) presents high prediction as antioxidants and low toxicity prediction, except for quercetin. The antioxidant activity was confirmed both in crude aqueous extract (infusion) and in isolated compounds. The determined LD50 classifies the plant as non-toxic. The comet assay showed no genotoxic potential for AS infusion (Article 2). Our data confirm the extensive use of plants by people with DM. In the same way, our analysis point oxidative stress as one of the mechanisms involved in tissue damages resulting of DM. The analysis also showed that the protective effects resulting of the BF treatment could be assigned to its antioxidant capacity, demonstrated in vitro and ex vivo, since no antidiabetic potential was identified in silico and in vivo. In the same line, the high antioxidant potential and the low toxicological prediction, point AS as a possible alternative treatment to the damage caused by oxidative stress. In summary, the results here presented allow us to conclude that BF plant, used in traditional medicine to treat DM and its complications, does not show direct antidiabetic effects. However, the antioxidant potential observed in both, BF and AS, make them possible complementary treatments to DM, especially considering the diabetic complications resulting of the oxidative stress increase. In this context, perspectives to future investigations on the use of these plants as complementary therapy to the traditional clinic treatment are open.
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AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIFÚNGICA DE EXTRATOS NATURAIS E PRÓPOLIS SOBRE CANDIDA spp. – ESTUDO IN VITRO / Atividade antifúngica de extratos naturais e própolis sobre Candida spp. – Estudo in vitro

Silva, Rosana Marques 24 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosana Marques Silva.pdf: 2018273 bytes, checksum: ed33e5b00e8b9365ccba2c7dad7dcfac (MD5) Previous issue date: 2012-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The denture stomatitis is an inflammation of the oral tissues which keeps direct contact with the prostheses. For the treatment of this disease, the use of natural extracts is promising, however, studies of their antimicrobial activity of different extracts should be expanded. Thus, the aim of this study is to evaluate in vitro antifungal activity of natural extracts of medicinal plants and propolis on strains of Candida spp. For this we used hydroalcoholic extracts of Malva sylvestris (malva) and Azadirachta indica (neem) at concentrations of 1:1, 1:2 and 1:4. The hydroalcoholic extract of propolis at concentrations of 20 and 30 was used.The tests were done in duplicate. The extracts were impregnated in sterile paper disks and “inhibition zone” were measured in mm with a caliper. The plates were incubated at a temperature of 37 ± 0.5 C until the development of the colonies. The antifungal activity was evaluated after 48h in the different treatments. Subsequently, the broth microdilution test for determining the minimum inhibitory concentration (MIC) was also performed. Data were evaluated statistically with significance levels of p <0.05 and descriptive analysis. In disk diffusion testing, the extracts were not effective. The extracts which inhibited over 50 of fungal growth were considered effective. The MIC of propolis to C. albicans, C. glabrata, C. krusei was 30 and to C. tropicalis was 20. The malva showed no inhibition percentage above 50 for any strain evaluated. The MIC for neem was 1:1 for C. glabrata and C. krusei, and 1:2 to C. tropicalis. This plant didn’nt showed inhibition to greater than 50 to C. albicans. The results show that plants and propolis under study had limited effectiveness against the strains studied. Future studies of the action of extracts of these plants should be conducted. / A estomatite protética é uma reação inflamatória dos tecidos bucais que matem contato direto com as próteses. Para o tratamento desta doença, a utilização de extratos naturais é promissora, entretanto, os estudos da atividade antimicrobiana de diferentes extratos, devem ser ampliados. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a atividade antifúngica de extratos naturais de plantas medicinais e de própolis sobre cepas de Candida spp., principal agente causador da estomatite protética. Para isso, foram utilizados extratos hidroalcóolicos de Malva sylvestris e Azadirachta indica (neem), nas concentrações de 1:1, 1:2 e 1:4. O extrato hidroalcoólico de própolis nas concentrações de 20 e 30 também foi utilizado. Os testes foram feitos em duplicata. Os extratos foram impregnados em discos de papel estéreis, e os halos de inibição foram medidos em mm com um paquímetro digital. As placas foram mantidas em estufa a temperatura de 37± 0,5C até o desenvolvimento das colônias. A atividade antifúngica foi avaliada após 48 h nos diferentes tratamentos. Posteriormente, o teste de microdiluição em caldo para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) também foi realizado. Os dados foram avaliados estatisticamente com níveis de significância de p<0,05 e análise descritiva. Nos testes de difusão em disco, os extratos não se mostraram efetivos. Os extratos que inibiram acima de 50 do crescimento fúngico foram considerados efetivos. A CIM da própolis para C. albicans, C. glabrata e C. krusei foi de 30 e para C. tropicalis foi de 20. A malva não apresentou porcentagem de inibição acima de 50 para nenhuma cepa avaliada. A CIM para o neem foi de 1:1 para C. glabrata e de 1:2 para C. krusei e C. tropicalis, e não apresentou inibição maior que 50 para C. albicans. Os resultados obtidos mostram que as plantas em estudo e a própolis tiveram baixa efetividade frente às cepas estudadas. Estudos futuros da ação dos extratos destas plantas devem ser realizados.
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Toxicidade de extratos de plantas medicinais obtidos com dióxido de carbono supercrítico à spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (lepidoptera, noctuidae)

Soares, Paula 28 February 2013 (has links)
Submitted by Maicon Juliano Schmidt (maicons) on 2015-07-14T14:47:45Z No. of bitstreams: 1 Paula Soares.pdf: 411834 bytes, checksum: 4ec503f0b12c86465061d9c3d676c251 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-14T14:47:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula Soares.pdf: 411834 bytes, checksum: 4ec503f0b12c86465061d9c3d676c251 (MD5) Previous issue date: 2013-01-31 / Nenhuma / O uso de plantas com potencial inseticida vem sendo cada vez mais freqüente uma vez que, medidas de controle que causem menor impacto são de primordial importância no controle de Spodoptera frugiperda, uma Lepidóptera conhecida como Lagarta-do-cartucho-do-milho e principal praga das agriculturas de milho e arroz, não somente pelos danos causados nas lavouras, mas como também pela dificuldade do seu controle, podendo levar a lavoura a uma grande perda de produtividade. As plantas inseticidas vêm estimulando o ressurgimento de extratos vegetais para o controle destes insetos e sendo empregadas por possuir vantagens quando comparados aos produtos químicos, uma vez que, são facilmente biodegradáveis e podem contribuir na produção de inseticidas botânicos. Ao contrário da utilização em lavoura de pesticidas químicos sintéticos não seletivos, este trabalho tem como principal objetivo testar o potencial das toxinas ativas das folhas de 9 plantas medicinais (Aloe sp., Mikania sp., Casearia sylvestris, Syzygium cumini, Plectranthus neochilus, Jodina rombipholia, Piper umbellatum, Artemisia camphorata e Phyllanthus niruri. Os extratos foram obtidos por meio de extração convencional utilizando como solventes: água fria, água quente por decocção e etanol 70%, todos em temperatura ambiente, e extração com fluido supercrítico com dióxido de carbono a temperatura de 40° C e pressão a 100, 150 e 250 bar. O material vegetal foi coletado em São Leopoldo/RS, de Latitude: 29° 45' 39" Leste; Longitude: 51° 08' 50" Oeste, dentro do ciclo vegetativo e os experimentos foram realizados no Laboratório de Microbiologia e Toxicologia da Unisinos. Os bioensaios foram realizados utilizando lagartas de segundo ínstar colocadas sobre dieta artificial de Poitout, sendo 15 indivíduos por tratamento e um controle com água e outro com o solvente utilizado. Os resultados de mostraram significativos para Jodina rhombifoli que apresentou 31% de mortalidade corrigida com solvente etanol 70%. Nos extratos supercríticos os resultados se mostraram significativos para 250 bar, atingindo 97% de MC (CL50 0.00472). Os resultados dos extratos fracionados sugerem que a eficiência de J. rhombifolia para o controle de S. frugiperda esta relacionado ao efeito de sinergismo, sendo assim eficiente para o controle da praga alvo. / The use of plants with insecticidal potential has been increasingly frequent. Control measures that cause less impact are of prime importance in controlling Spodoptera frugiperda, a lepidopteran known as fall armyworm and main pest of the agriculture of maize and rice, not only for the damage to crops, but also for the difficulty of its control, leading to a major loss in the productivity. Insecticide plants have stimulated a resurgence of the use of plant extracts for the control of these insects and are being utilized for possessing advantages when compared to chemicals, since they are easily biodegradable and can contribute to the production of botanical insecticides. Unlike the use of chemical synthetic and nonselective pesticides in agriculture, this work has as main objective to test the potential of active toxins in leaves of 9 medicinal plants (Aloe sp., Mikania sp., Casearia sylvestris, Syzygium cumini, Plectranthus neochilus, Jodina rombipholia, Piper umbellatum, Artemisia camphoratae Phyllanthus niruri). The extracts were obtained by conventional extraction using the following solvents: cold water, hot water decoction and 70% ethanol, all at room temperature, and supercritical fluid extraction with carbon dioxide at the temperature of 40°C and pressure of 100, 150 and 250 bar. The plant material was collected in São Leopoldo / RS Latitude: 29° 45 '39 "East; Longitude: 51° 08' 50" West within their vegetative cycles and the experiments were performed at the Laboratory of Microbiology and Toxicology at Unisinos. Bioassays were performed using second instar larvae placed on artificial diet of Poitout, with 15 subjects per treatment. One control was performed with water and the other with the solvent used. The results showed significant for Jodina rhombifolia, which showed 31% corrected mortality (CM) with ethanol 70% solvent. The results of supercritical extracts were significant for 250 bar, reaching 97% CM (LC 500.00472). The results of fractionated extracts suggest that J. rhombifolia efficiency for the control of S. frugiperda is related to the effect of synergism, thus being effective to control the target pest.
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Plantas medicinais no noroeste do Rio Grande do Sul : desdobramentos das práticas e da ação social

Silva, Tamara Raísa Bubanz January 2018 (has links)
Este estudo tem como objetivo identificar as dinâmicas dos atores sociais relacionadas à temática das plantas medicinais no contexto da Região Noroeste do Rio Grande do Sul. O trabalho buscou seguir as práticas sociais visando resgatar e analisar a trajetória do Fórum pela Vida, identificar práticas enraizadas localmente de trabalho com plantas medicinais e analisar em profundidade a experiência da farmacinha Saúde Alternativa em Santo Cristo/RS. O Fórum pela Vida foi criado no final da década de 1990, no Rio Grande do Sul, mobilizando grande contingente de pessoas interessadas ou envolvidas com as temáticas das plantas medicinais, saúde, produção de medicamentos, políticas públicas, proteção da biodiversidade. Após um processo desmobilizador em nível estadual, o único Fórum que continuou atuando foi o da Região Noroeste. Para analisar tais processos, a Perspectiva Orientada aos Atores (POA) foi utilizada. Para este fim o trabalho inicialmente apresenta o local do estudo e introduz a discussão sobre o desenvolvimento e a batalha de conhecimentos. Para em seguida, analisar a trajetória do Fórum pela Vida enquanto organização estadual e local, apresentando a transversalidade de temas, interfaces de conhecimentos que perpassam os fóruns. Na última parte do trabalho analisa a farmacinha Saúde Alternativa identificando quais eram as problemáticas cotidianas que fomentaram a organização das mulheres, trazendo a discussão sobre a saúde como tema transversal. Ao abordar a ação social e a luta pelo resgate do conhecimento sobre as plantas medicinais, evidenciou-se como os diferentes projetos de desenvolvimento afetam o cotidiano dos indivíduos e, como os mesmos encontram saídas e mobilizam manobras. / This study aims to identify the dynamics of social actors related to the theme of medicinal plants in the context of the Northwest Region of Rio Grande do Sul. The study sought to follow the social practices in order to retrieve and analyze the trajectory of the Forum for Life, identify locally rooted practices working with medicinal plants and analyze in depth the experience of farmacinha Alternative Health in Santo Cristo / RS. The Forum for Life was created in the late 1990s, in Rio Grande do Sul, mobilizing large numbers of people interested or involved with the theme of medicinal plants, health, medicine production, public policy, protection of biodiversity. After a demobilizing process at the state level, the only forum that continued acting was the Northwest Region. To analyze these processes, Oriented Perspective to Actors (POA) was used. To this end the work initially presents the study site and introduces the discussion on the development and battle skills. To then analyze the trajectory of the Forum for Life as state and local organization, with the crosscutting issues, knowledge interfaces that run through the forums. In the last part of the paper analyzes the farmacinha Health Alternative identifying what were the everyday problems that fomented the organization of women, bringing the discussion on health as a crosscutting theme. In addressing the social action and the fight for the rescue of knowledge about medicinal plants, it became clear how different development projects affecting the daily lives of individuals and how they find ways out and mobilize maneuvers.
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The mitogenic effect of radix ophiopogonis and radix astragali on neonatal primary rat cardiomyocytes and differentiated H9C2 cardiac cells.

January 2003 (has links)
Law Sui-Lin. / Thesis (M.Phil.)--Chinese University of Hong Kong, 2003. / Includes bibliographical references (leaves 99-109). / Abstracts in English and Chinese. / CONTENTS --- p.i / ABSTRACT --- p.v / 撮要 --- p.vii / ACKNOWLEDGEMENTS --- p.ix / LIST OF FIGURES & TABLES --- p.xi / ABBREVIATIONS --- p.xv / Chapter Chapter 1 --- INTRODUCTION --- p.1 / Chapter 1.1 --- The Transition of Hyperplastic to Hypertrophic Growth During Heart Development --- p.1 / Chapter 1.2 --- The Controversial Capability of Heart Regeneration --- p.3 / Chapter 1.3 --- Challenges in Treating Heart Diseases --- p.5 / Chapter 1.4 --- A New Insight Behind Traditional Chinese Medicine (TCM) for Treating Heart Diseases --- p.7 / Chapter 1.5 --- The Potential Mitogenic TCMs on Cardiomyocytes --- p.10 / Chapter 1.5.1 --- Radix Astragali --- p.11 / Chapter 1.5.2 --- Radix Ophiopogonis --- p.12 / Chapter Chapter 2 --- MATERIALS & METHODS --- p.14 / Chapter 2.1 --- Materials --- p.14 / Chapter 2.2 --- Cell Culture --- p.16 / Chapter 2.2.1 --- Primary neonatal rat cardiomyocytes cell culture --- p.16 / Chapter 2.2.1.1 --- Mayer's hemalum-eosin staining --- p.17 / Chapter 2.2.2 --- Primary rat fibroblasts cell culture --- p.18 / Chapter 2.2.3 --- H9C2 cardiac cell culture --- p.18 / Chapter 2.3 --- TCMs Preparation and Treatment --- p.19 / Chapter 2.3.1 --- Preparation of TCMs powder from aqueous extracts --- p.19 / Chapter 2.3.2 --- Preparation of culture medium with TCMs powder --- p.19 / Chapter 2.3.3 --- Pre-treatment of undifferentiated and differentiated H9C2 cardiac cells with TCMs --- p.20 / Chapter 2.3.4 --- Post-treatment of differentiated H9C2 cardiac cells with TCMs --- p.20 / Chapter 2.4 --- Assessment of DNA Synthesis and Proliferation --- p.21 / Chapter 2.4.1 --- Tritiated thymidine incorporation assay --- p.21 / Chapter 2.4.2 --- 5-Bromo-2'-deoxy-uridine (BrdU) assay --- p.22 / Chapter 2.4.3 --- Cell counting --- p.23 / Chapter 2.4.4 --- Statistical analysis --- p.23 / Chapter 2.5 --- Screening of Differentially Expressed Genes in H9C2 Cells after TCM Treatment by cDNA Microarray --- p.25 / Chapter 2.5.1 --- Total RNA extraction --- p.25 / Chapter 2.5.2 --- RNA labeling --- p.26 / Chapter 2.5.2.1 --- Synthesis of fluorescence labeled probe --- p.26 / Chapter 2.5.2.2 --- Purification of fluorescence labeled probe --- p.27 / Chapter 2.5.3 --- Microarray hybridization --- p.28 / Chapter 2.5.3.1 --- Concentration of fluorescence labeled probe --- p.28 / Chapter 2.5.3.2 --- Hybridization --- p.28 / Chapter 2.5.3.3 --- Post-hybridization treatment --- p.29 / Chapter 2.5.4 --- Data collection --- p.29 / Chapter 2.5.4.1 --- Scanning of slide --- p.29 / Chapter 2.5.4.2 --- Image processing: spots finding and quantification --- p.30 / Chapter 2.5.5 --- Data normalization and analysis --- p.30 / Chapter 2.6 --- Confirmation of Differentially Expressed Genes in H9C2 Cells after TCM Treatment by RT-PCR --- p.32 / Chapter 2.6.1 --- DNase I digestion of total RNA sample --- p.32 / Chapter 2.6.2 --- First-strand cDNA synthesis --- p.32 / Chapter 2.6.3 --- RT-PCR of the candidate genes --- p.33 / Chapter Chapter 3 --- RESULTS --- p.36 / Chapter 3.1 --- Neonatal Primary Rat Cardiomyocytes --- p.36 / Chapter 3.1.1 --- Preparation of high-purity neonatal primary rat cardiomyocytes --- p.36 / Chapter 3.1.2 --- Neonatal primary rat cardiomyocytes ceased to undergo DNA replication after 6-day in vitro culturing --- p.38 / Chapter 3.1.3 --- Both MD and HQ promoted the growth of day 1 primary rat cardiomyocytes in dose- and time-dependent manners --- p.40 / Chapter 3.1.4 --- HQ is more potent than MD in promoting the growth of day 7 primary rat cardiomyocytes --- p.43 / Chapter 3.2 --- H9C2 Cardiac cells --- p.45 / Chapter 3.2.1 --- Proliferative effect of MD and HQ on undifferentiated H9C2 cardiac cells --- p.45 / Chapter 3.2.2 --- Pre-treatment of HQ on H9C2 cardiac cells during differentiation --- p.50 / Chapter 3.2.3 --- Pre-treatment of MD and HQ on differentiated H9C2 cardiac cells --- p.52 / Chapter 3.2.4 --- Post-treatment of MD on differentiated H9C2 cardiac cells…… --- p.55 / Chapter 3.3 --- Primary Rat Fibroblasts --- p.57 / Chapter 3.3.1 --- Proliferative effect of MD and HQ on primary rat fibroblasts --- p.58 / Chapter 3.4 --- Screening of Differentially Expressed Genes in H9C2 Cells after HQ Treatment by cDNA Microarray --- p.60 / Chapter 3.4.1 --- Differentially expressed genes in undifferentiated H9C2 cardiac cells after HQ treatment --- p.60 / Chapter 3.4.2 --- Differentially expressed genes in differentiated H9C2 cardiac cells after HQ treatment --- p.66 / Chapter 3.4.3 --- Comparison of differentially expressed genes in both undifferentiated and differentiated H9C2 cardiac cells after HQ treatment --- p.72 / Chapter 3.5 --- Confirmation of Differentially Expressed Genes in H9C2 Cells after HQ Treatment by RT-PCR --- p.73 / Chapter 3.5.1 --- "Preferential up-regulation of N-G, N-G-dimethylarginine dimethylaminohydrolase mRNA expression level in undifferentiated H9C2 cardiac cells after HQ treatment " --- p.74 / Chapter 3.5.2 --- Preferential up-regulation of heme oxygenase-3 mRNA expression level in undifferentiated H9C2 cardiac cells after HQ treatment --- p.75 / Chapter 3.5.3 --- Preferential up-regulation of cyclin B mRNA expression level in differentiated H9C2 cardiac cells after HQ treatment --- p.76 / Chapter Chapter 4 --- DISCUSSION --- p.77 / Chapter 4.1 --- HQ Being a More Effective Mitogenic TCM than MD on Cardiomyocytes Exerted its Effect in Dose- and Time Dependent --- p.79 / Chapter 4.2 --- Mitogenic Effect of Both MD and HQ might Possibly Due to the Regulation of Intrinsic Factors --- p.82 / Chapter 4.3 --- HQ Rather Than MD Showed a Higher Specificity in Promoting DNA Synthesis in Cardiomyocytes --- p.83 / Chapter 4.4 --- The Differentially Expressed Genes were Supported by The Clinical Functions of HQ --- p.85 / Chapter 4.5 --- Relating the Differentially Expressed Genes with Cardiac Growth and Development --- p.87 / Chapter 4.6 --- The Hypothetic Mechanisms of Action that HQ Exerted on Cardiac Growth and Development --- p.92 / Chapter 4.7 --- Future Prospect --- p.94 / Chapter 4.7.1 --- In vivo study of HQ on the proliferation of rat cardiomyocytes from neonatal to postnatal development --- p.94 / Chapter 4.7.2 --- The study of transgenic mice carrying the target gene regulated by HQ on cardiac growth and development --- p.96 / Chapter 4.7.3 --- The determination of active component of HQ on cardiac growth and development --- p.97 / REFERENCES --- p.99 / APPENDIX --- p.110

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