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Criopreservação de acessos de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen e propagação in vitro de Zingiber spectabile Griff. em biorreatores de imersão temporária / Cryopreservation of Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen accessions and in vitro propagation of Zingiber spectabile Griff. in temporary immersion bioreactorsCaproni, Duanny Thais Rodigues 03 October 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-08-15T13:29:22Z
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Previous issue date: 2016-10-03 / O cultivo de plantas in vitro vem sendo amplamente utilizado, proporcionando produção em larga escala de diversas espécies de plantas, como também manutenção de banco de germoplasma, sendo, na maioria das vezes mais vantajoso que a produção e manutenção tradicional. Nesse sentido, a criopreservação é considerada o método mais eficaz e seguro para preservação, em longo prazo, de material biológico, tendo como principal vantagem sua aplicabilidade para diferentes espécies sem a necessidade de subcultivos. Dentre as espécies vegetais com potencial para a criopreservação está a Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen, a qual apresenta grande interesse para a indústria farmacêutica devido às suas propriedades medicinais. Contudo a obtenção de plantas de P. glomerata para uso comercial está sendo realizada de forma indiscriminada e extrativista, podendo causar erosão genética e extinção dentre outros danos. Nesse contexto, esse trabalho vislumbrou o estabelecimento de um protocolo eficiente para criopreservação de genótipos de P. glomerata, testando diferentes soluções criogênicas combinadas à aclimatização sob técnicas de cultivo mínimo, adaptando baixas temperaturas combinadas com reguladores de crescimento (ABA e SA) com a finalidade de obter maiores níveis de regeneração de explantes após os processos de criopreservação. Por outro lado, o cultivo de plantas em biorreatores de imersão temporária, tem por finalidade aumentar a produção dos explantes, uma vez que ocorre o contato de curta duração entre o meio de cultura líquido e o explante, renovando o ambiente interno do equipamento e garantindo o fornecimento adequado de nutrientes. Da mesma forma, nesse sistema de cultivo, a utilização de reguladores de crescimento, em especial as citocininas, otimiza protocolos e maximiza a produção de várias espécies de plantas ornamentais. Nesse sentido, Zingiber spectabile vem sendo amplamente utilizada como planta ornamental, por ser possuidora de grande beleza, utilizada tanto como flores de corte como também em composições de paisagem. Sob cultivo in vitro, essa espécie apresenta elevado potencial de multiplicação, em especial quando utilizados reguladores de crescimento. Desse modo, o presente trabalho buscou compreender e desenvolver a condição ideal de cultivo em biorreatores de imersão temporária para a espécie utilizando concentrações variáveis de sacarose como também diferentes fontes de citocinina. / The in vitro cultivation of plants has been widely used, providing large-scale production of several plant species, as well as germplasm maintenance being often more advantageous than traditional production. In this sense, cryopreservation has been considered the most effective and safe method for long-term preservation of biological material, the main advantage of its applicability to different plant without the need of subcultures. Among the plant species with potential for cryopreservation is the Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen, which shows great interest to the pharmaceutical industry due to medicinal properties. However, obtaining P. glomerata plants for commercial use has been carried out in an indiscriminate and extractivist way, which may lead to genetic erosion and even extinction, among other damages. In this context, this work presents the establishment of an efficient protocol for cryopreservation of P. glomerata accessions, evaluating various cryogenic solutions combined with acclimatization under minimum cultivation techniques growth regulators in order to obtain higher level explant regeneration after cryopreservation procedures. On the other hand, the cultivation of plants in a temporary immersion bioreactor, aiming to increase the yield of propagules by means of a quick contact between the liquid culture medium and the explant, renewing the internal culture environment and ensuring adequate supply of nutrients. Likewise, the use of growth regulators, particularly cytokinins, in this culture system has been optimizing protocols and maximizing the production of various species of ornamental plants. In this sense, Zingiber spectabile has been widely used as an ornamental plant, because it holds great beauty, both used as cut flowers as well as in scenery compositions. In in vitro culture, this species has a high potential for multiplication, especially when growth regulators are used. Thus, this study aim to understand and develop an ideal condition for the cultivation in temporary immersion bioreactors for the species using varying sucrose concentrations as well as different sources of cytokinin.
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Variabilidade morfoagronômica e nutricional de acessos de Cucurbita moschata Duch. do Banco de Germoplasma de Hortaliças - UFV / Morphoagronomic and nutritional variability of accesses of Cucurbita moschata Duch. of the Germplasm Bank of Vegetables - UFVGomes, Ronaldo Silva 26 July 2017 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-01-15T16:50:51Z
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Previous issue date: 2017-07-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os trabalhos envolvendo a caracterização de acessos de Cucurbita moschata D., mantidos pelo Banco de Germoplasma de Hortaliças da Universidade Federal de Viçosa- BGH-UFV, tem revelado a expressiva variabilidade genética desse germoplasma para uma série de características de importância agronômica. Os acesso de C. moschata mantidos pelo BGH-UFV, são particularmente promissores em termos nutricionais, em face de suas elevadas quantidades de componentes bioativos como carotenoides, na polpa do fruto e da elevada qualidade nutricional do azeite de suas sementes. Assim, este trabalho teve como objetivo caracterizar parte dos acessos de C. moschata mantidos pelo BGH- UFV por meio de descritores morfoagronômicos e nutricionais. O experimento foi conduzido em unidade experimental do Departamento de Fitotecnia, “Horta Velha”, da UFV, no período de janeiro a Julho de 2016. Foram avaliados 148 acessos e 4 testemunhas comerciais. O delineamento adotado foi o de blocos aumentados de Federer, com cinco repetições para as testemunhas. Os acessos foram caracterizados por meio de 72 descritores, 11 para a fase de plântula, 19 para a vegetativa, 26 para as fases reprodutiva e características de fruto e 16 para as características da semente. As características qualitativas foram analisadas por meio da distribuição de frequências. Para as características quantitativas, foi realizado a análise de variância. A análise multivariada da variabilidade morfoagronômica foi realizada levando-se em consideração simultaneamente as informações quantitativas e qualitativas, com base na soma de matrizes de distâncias obtidas a partir dos dados quantitativos e qualitativos e no método de agrupamento de Tocher. Para as características quantitativas, foi realizada também a análise de Singh para aferição da contribuição de cada característica na diferenciação dos acessos. Os acessos de C. moschata mantidos pelo BGH-UFV possuem ampla variabilidade morfoagronômica para os descritores qualitativos e quantitativos. Foi constatada diferenças significativas entre os acessos para características de importância agronômica e nutricional como a produtividade de frutos, teor de carotenoides totais da polpa do fruto, massa de semente por fruto e produtividade de sementes e do azeite da semente. As características comprimento da rama principal aos 35 dias após o transplantio, o número de graus dias acumulados para o florescimento feminino e a produtividade de azeite tiveram as maiores contribuições na diferenciação dos acesso. Houve a formação de 36 grupos pelo método de agrupamento de Tocher multivariado, sendo que a maior parte dos acessos foram agrupados no primeiro grupo. A comparação de médias entre grupos permitiu identificar os grupos mais promissores para cada característica. O grupo 36, formado pelo BGH-291 constitui fonte promissoras para hábito de crescimento determinado. O grupo 20 é uma fonte promissora para a obtenção de elevada produtividade de frutos. Os grupos 28 e 34 foram os mais promissores para a estimativa do teor de carotenoides totais na polpa do fruto, os quais permitem a seleção de acessos com maior atividade pró vitamínica. Os grupos 19 e 22 tiveram as maiores médias para a massa de sementes por fruto e os grupos 17 e 27 as maiores médias para a massa de 100 sementes. Os grupos 25 e 5 foram os mais promissores para as produtividades de sementes e de azeite das sementes, os quais representam excelentes alternativas para a obtenção de ácidos graxos alimentares mais saudáveis. Os acessos de C. moschata mantidos pelo BGH-UFV possuem ampla variabilidade morfoagronômica e constituem fonte promissora para o melhoramento de características agronômicas e nutricionais dessa olerícola. / The works involving the characterization of Cucurbita moschata D. accessions maintained by the Vegetable Gen Bank of the Federal University of Viçosa- BGH-UFV, has revealed the expressive genetic variability for this germplasm for a series of characteristics of agronomic importance. The accessions of C. moschata maintained by the BGH-UFV, are particularly promising in terms of nutritional aspects, due their high content of bioactive compounds such as carotenoids, in the pulp of fruits, and the high nutritional quality of oil of their seeds. Thus, the objective of this work was to characterize part of the C. moschata accessions maintained by the BGH-UFV through morphological and nutritional descriptors, to analyze the morphoagronomic and nutritional variability among the accesses and selecting the promising accessions for morphoagronomic and nutritional characteristics. The experimental design adopted was the augmented blocks of Federer, with five repetitions for the checks. The accessions were characterized by 72 descriptors, 11 for the seedling phase, 19 for the vegetative, 26 for the reproductive and fruit characteristics, and 16 for the characteristics of seeds. The qualitative characteristics were analyzed through the frequency distribution. For the quantitative characteristics, was carried out an analysis of variance. The multivariate analysis of morphoagronomic variability was carried out taking into account simultaneously the quantitative and qualitative information, based on the sum of matrices of distances obtained from the quantitative and qualitative data and on the grouping method of Tocher. An analysis of Singh was performed for the quantitative characteristics in order to assess the contribution of each characteristic in the differentiation of the accessions. The accessions of C. moschata maintained by BGH-UFV have a wide morphoagronomic variability for the qualitative and quantitative descriptors. It was observed significant differences between the accessions for characteristics of agronomic and nutritional importance such as fruit yield, total carotenoid content in the pulp of fruit, seed mass per fruit and the yields of seeds and seed oil. The group 36, formed by the BGH-291 constitutes a promising source for determined growth habit. The group 20 is a promising source for the obtaining high yield of fruits. The groups 28 and 34 were the most promising for the estimation of total carotenoid content in the pulp of fruit, which allow selection of accessions with higher pro-vitamin activity. The groups 19 and 22 had the highest means for the mass of seeds per fruit and groups 17 and 27 had the highest mean for the mass of 100 seeds. Groups 25 and 5 were the most promising for the yields of seeds and seed oil, which are excellent alternatives for obtaining healthier food fatty acids. The accessions of C. moschata maintained by the BGH-UFV have a wide morphoagronomic variability and are a promising source for the improvement of agronomic and nutritional aspects of this vegetable.
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Caracterização morfofisiológica de genótipos de Urochloa mosambicensis como subsídio para programas de melhoramento vegetal / Morphophysiological characterization of Urochloa mosambicensis genotypes as resource for plant breeding programsAlves, Maria Monique de Araújo January 2016 (has links)
ALVES, Maria Monique de Araújo. Caracterização morfofisiológica de genótipos de Urochloa mosambicensis como subsídio para programas de melhoramento vegetal. 2016. 57 f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2016-08-08T19:39:36Z
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Previous issue date: 2016 / Thirteen genotypes of Urochloa mosambicensis were characterized for morphogenic indices and evaluated for characteristics and structural components of each genotype. The accessions were exchanged from the active germplasm bank in seedlings and transplanted into pots. The experiment was conducted in a greenhouse from February to December 2014 in a randomized design with two repetitions (pots). Biomass flow was estimated during the regrowth period and thereupon it was measured the structural characteristics and components of biomass. Data were subjected to the Shapiro-Wilk and Bartlett tests, and it was applied base 10 logarithmic transformations for variables leaf elongation rate and previous leaf senescence rate. Mean values of biomass flow were tested by Tukey’s test and structural characteristics were tested by Kruskal-Wallis test, differences were considered significant at P <0.05. From the characterization, we selected the most important variables in the selection of genotypes and stood out Aust81 and Aust99P1 genotypes that were considered as the most productive to use grazing because of the highest average for the leaf elongation rate, leaf appearance rate and new green leaves. The Aust103 and Aust59P1 were considered as the most productive for use to cut, as they kept the lowest stem elongation rate and the higher total forage biomass and green leaf biomass, which is the most important component of biomass and preferably selected by the animals, reflecting positively on forage quality. With the exception of Aust99P1, all the genotypes above had the highest leaf:stem ratio, stressing that it accesses produced forage of better quality and probably the best nutritional value. The accession Aust59P1 was the most persistent genotype as it maintained the highest average for tillering that has great potential for the issuance of new tillers ensuring the pasture persistence. Considering all characteristics, it is recommended to further study the accessions Aust81, Aust103, Aust59P1 and Aust99P1. / Caracterizaram-se treze genótipos de Urochloa mosambicensis, quanto aos índices morfogênicos e avaliaram-se as características e componentes estruturais de cada genótipo. O experimento foi conduzido em casa de vegetação durante os meses de fevereiro a dezembro de 2014 em delineamento inteiramente casualizado com duas repetições. O fluxo de biomassa foi avaliado durante o período de rebrotação e logo após mensurou-se as características estruturais e componentes da biomassa. Os dados foram submetidos aos testes de Shapiro-Wilk e Bartlett, e aplicaram-se transformações logarítmicas de base 10 para as variáveis taxa de alongamento foliar e taxa de senescência foliar anterior. Aplicou-se o teste de Tukey para a comparação dos pares de médias das características do fluxo de biomassa e para as características estruturais o teste Kruskal-Wallis, com as diferenças declaradas significativas quando P<0,05. A partir da caracterização selecionaram-se as variáveis de maior impacto na seleção de genótipos e destacaram-se os genótipos Aust81 e Aust99P1 que foram classificados como mais produtivos para uso sob pastejo por terem apresentado as maiores médias quanto a taxa de alongamento foliar, taxa de aparecimento foliar e novas folhas vivas. Os acessos Aust103 e Aust59P1 foram considerados como os mais produtivos para uso sob corte, pois mantiveram as menores médias em relação à taxa de alongamento de hastes e as maiores produções de biomassa de forragem total principalmente da biomassa de lâmina foliar verde que é a fração mais importante da planta e preferencialmente selecionada pelos animais refletindo positivamente na qualidade da forragem produzida. Com exceção do Aust99P1 todos os genótipos supracitados destacaram-se no quesito qualidade, pois apresentaram as melhores relações lâmina foliar/colmo, frisando que estes acessos produziram forragem de melhor qualidade e provavelmente de melhor valor nutricional. O acesso Aust59P1 mostrou-se o genótipo mais persistente ao manter a maior média para a densidade populacional de perfilhos, mostrando que possui grande potencial para emissão de novos perfilhos, garantindo a persistência da pastagem. Considerando-se todas as características avaliadas, recomenda-se para estudos posteriores os acessos Aust81, Aust103, Aust59P1 e Aust99P1.
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Avaliação de genótipos de meloeiro quanto à resistência à mosca minadora / Evaluation of melon genotypes regarding the leafminer infestationOliveira, Frederico Inácio Costa de January 2014 (has links)
OLIVEIRA, F. I. C. Avaliação de genótipos de meloeiro quanto à resistência à mosca minadora. 2014. 53 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitotecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-26T21:07:32Z
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Previous issue date: 2014 / The melon (Cucumis melo L.) is one of the most important vegetables in the world. Given its peculiarities, as its short cycle and staggered planting, pest control culture is prejudiced, being spent every year large amounts of pesticides to control the miner fly (Liriomyza sativae Blanchard) in melon, which, since 2000, appears as the key pest. The genetic control among the control measures is the ideal medium to circumvent the damage caused by this insect alternative. Thus, the aim of this work to evaluate a collection of Cucumis melo L. germplasm for resistance to miner fly (Liriomyza sativae); resistant accessions to identify and correlate the variables within and between experiments and field cage in field and cage were tested 58 melon genotypes for resistance to leaf miner, 49 accesses the Active Germplasm Bank of melon Embrapa Vegetables, five accessions of the Germplasm Bank of Cucurbits for the Brazilian Northeast and four commercial hybrids. The work was divided into two experiments: field and cage. The field experiment was conducted at the Experimental Station of Pacajus – CE, of the Embrapa Tropical Agroindustry (CNPAT), from December 2012 to February 2013 in a completely randomized design with two replications and six plants per plot. The experiment was conducted in cages in the Laboratories of Entomology and of Plant Breeding and Genetic Resources, in Fortaleza, during the period March 2013 to ammonium in a completely randomized design with six replications, each plant, subjective score based on infestation and number of mines per leaf - in the field: a portion of the following characteristics were evaluated and cage - number of mines per leaf chlorophyll content of leaves and colorimetry. Data were submitted to Kruskal-Wallis test. To determine the degree of relationship between variables, we calculated the Pearson correlation coefficient. The results revealed statistically significant differences among accessions for all variables. Genotypes 16, 48 and 51 showed favorable results for resistance in both experiments, so are best suited for future research focusing on improving introgression of resistance in melon L. sativae. / O meloeiro (Cucumis melo L.) é uma das hortaliças de maior relevância no mundo. Dada suas peculiaridades, como seu ciclo curto e plantio escalonado, o controle fitossanitário da cultura é prejudicado, sendo gasto todos os anos grande volume de defensivos agrícolas para controlar a mosca minadora (Liriomyza sativae Blanchard) no meloeiro, que, desde 2000, aparece como a praga chave da cultura. O controle genético, dentre as medidas de controle, é a alternativa ideal para contornar os danos causados por esse inseto. Com isso, objetivou-se com esse trabalho: Avaliar uma coleção de germoplasma de Cucumis melo L. quanto à resistência à mosca minadora (Liriomyza sativae); identificar acessos resistentes e correlacionar as variáveis analisadas dentro e entre os experimentos de campo e de gaiola.. Foram testados, em campo e em gaiola, 58 genótipos de meloeiro quanto a resistência à mosca minadora, sendo 49 acessos do Banco Ativo de Germoplasma de Melão da Embrapa Hortaliças (Brasília-DF), cinco acessos do Banco de Germoplasma de Cucurbitáceas para o Nordeste Brasileiro e quatro híbridos comerciais. O trabalho foi dividido em dois experimentos: campo e gaiola. O experimento de campo foi realizado no Campo Experimental de Pacajus-CE da Embrapa Agroindústria Tropical (CNPAT), no período de dezembro de 2012 a fevereiro de 2013, em um delineamento inteiramente casualizado, com duas repetições e seis plantas por parcela. O experimento nas gaiolas foi realizado nos laboratórios de Entomologia e de Melhoramento e Recursos Genéticos Vegetais da Embrapa Agroindústria Tropical, em Fortaleza-CE, durante o período de março a maio de 2013, em um delineamento inteiramente casualizado, com seis repetições, sendo cada planta uma parcela Foram avaliadas as seguintes características: no campo - nota subjetiva com base na infestação e número de minas por folha; e, em gaiola - número de minas por folha, teor de clorofila e colorimetria das folhas. Os dados foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis. Para determinar o grau de relação entre as variáveis estudadas, calculou-se o coeficiente de correlação de Pearson. Os resultados revelaram diferença estatística entre os acessos para todas as variáveis estudadas. Os genótipos CNPH 11-282, CNPH 11-1072 e CNPH 11-1077 apresentaram resultados favoráveis para resistência em ambos os experimentos, portanto são os mais indicados para pesquisas futuras em melhoramento com enfoque na introgressão da resistência à L. sativae em meloeiro.
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Caracterização genética dos acessos do banco ativo de germoplasma de alho (Allium sativum L.) de Santa CatarinaVieira, Renato Luís January 2004 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2012-10-21T20:17:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1
203907.pdf: 1713521 bytes, checksum: 5e8a98d2e1b57ffc18a16198c9c0e17a (MD5) / A organização da variabilidade genética de acessos de alhos mantidos em Bancos de Germoplasma tem sido bastante investigada com marcadores morfológicos e isoenzimáticos. Porém, a informação obtida com esses marcadores tem sido considerada inadequada, devido ao pequeno número de marcadores disponíveis e a pequena porção genômica acessada, respectivamente. Os marcadores genéticos baseados na análise direta da molécula de DNA, como RAPDs e AFLPs, permitem acesso a uma ampla região, distribuída ao acaso, devido sua capacidade multiplex e alto nível de polimorfismo detectado. O presente trabalho apresenta os resultados referentes (i) a avanços metodológicos e adequação de protocolos que possibilitaram o uso de descritores morfológicos e marcadores isoenzimáticos, RAPD e AFLP, (ii) e a caracterização da diversidade genética acompanhada da análise de agrupamento dos acessos do Banco Ativo de Germoplasma de Allium sativum L. de Santa Catarina. Constatou-se através de análise multivariada que 10 descritores morfológicos, dos 17 utilizados, foram de grande importância para caracterização dos 96 acessos de alho. A análise isoenzimática revelou que as cultivares comerciais apresentaram cinco padrões diferenciados. Entre as 20 cultivares avaliadas o percentual de locos polimórficos (P) variou de 0 a 57,1, sendo o valor médio 13,6%. No protocolo otimizado para a técnica RAPD, 16% dos iniciadores testados amplificaram um total de 47 bandas sendo que dessas, 25 revelaram polimorfismo. O maior avanço obtido na adaptação de protocolo da técnica AFLP foi a identificação de três novas combinações de iniciadores, e sua utilização pela primeira vez na análise de Alium sativum. Do grupo de 76 acessos de alho crioulo, apenas 25 foram considerados inequivocadamente como genótipos distintos. Em todas as análises, as 20 cultivares comerciais foram separadas em sete grupos de similaridade, sendo detectado apenas duas cultivares potencialmente duplicadas, uma de origem nacional e a outra de origem Chinesa. Assim, as principais conclusões deste trabalho foram: a) apesar da espécie em foco ser de propagação praticamente assexuada, os valores de heterozigosidade encontrados na análise de isoenzimas, sugerem que existe uma quantidade razoável de variabilidade genética entre os acessos; b) a utilização das técnicas moleculares mais modernas, pode possibilitar maior grau de segurança na discriminação, e conseqüentemente na recomendação desses genótipos, para atender as diversas regiões climáticas e c) o uso de marcadores moleculares se mostrou adequado neste estudo e, a possibilidade de obtenção de sementes botânicas de alho, abre espaço para o uso dessa técnica como suporte para a ampliação das atividades dos programas de melhoramento através de cruzamentos, aproveitando a variabilidade das linhagens segregantes.
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Criopreservação de ápices caulinares de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen / Cryopreservation of Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen soot tipsOliveira, Daniela Vasconcelos de 24 February 2017 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Florestal, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-06-19T21:03:15Z
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Previous issue date: 2017-08-18 / O objetivo geral desse trabalho foi desenvolver um protocolo de criopreservação para ápices caulinares de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen, ginseng-brasileiro, visando assegurar a conservação em longo prazo do seu germoplasma. Inicialmente foram estabelecidas as condições para a introdução e multiplicação clonal in vitro de Pfaffia glomerata, a partir de gemas laterais de segmentos nodais de plantas em crescimento em campo, para obter o lote de plantas doadoras de ápices caulinares para os experimentos de criopreservação. Após 30 dias de cultivo in vitro 92% das gemas laterais retomaram o crescimento dando origem a plântulas inteiras, com sistema radicular e parte aérea bem desenvolvidos. Para a definição do protocolo de criopreservação foram testadas duas técnicas, a vitrificação e a gota-vitrificação. A técnica de vitrificação consistiu dos seguintes procedimentos: isolamento dos ápices caulinares (±2,0 mm) de plântulas em crescimento in vitro, pré-cultivo em meio de cultura MS básico, solidificado com ágar e suplementado com 0,3M de sacarose por aproximadamente 18 hrs, tratamento com meio de saturação (MS básico líquido suplementado com 2,0M de glicerol e 0,4M de sacarose, vitrificação com três soluções crioprotetoras (PVS2, PVS3 e PVS4), três tempos de exposição (20 min, 40 min e 60 min), e duas temperaturas para cada solução (25°C e 0°C), congelamento em nitrogênio líquido (-196°C), descongelamento, diluição (MS suplementado com 1,2 M de sacarose) e cultivo in vitro. Para a metodologia de vitrificação o melhor percentual de regeneração foi 64%, obtido para ápices caulinares tratados com a solução PVS4, por 60 minutos, a 25°C . Para o método de gota-vitrificação, as etapas utilizadas foram semelhantes, consistindo de isolamento dos explantes, pré-cultivo (MS sólido suplementado com 0,3M de sacarose), saturação (MS líquido suplementado com 2,0 M de glicerol e 0,4M de sacarose), vitrificação com três soluções (PVS2, PVS3 e PVS4), três tempos de exposição (20 min, 40 min e 60 min), e duas temperaturas (25°C e 0°C), congelamento dos ápices caulinares dispostos em tiras de alumínio e submersos diretamente em nitrogênio líquido, descongelamento, diluição (MS suplementado com 1,2M de sacarose) e cultivo in vitro. As melhores condições para o congelamento pelo método de gota-vitrificação foi o tratamento com a solução PVS3, por 40 minutos, a 0°C, o que resultou em 82% de regeneração. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que a criopreservação em nitrogênio líquido pode ser usada para a conservação do germoplasma de ginseng brasileiro. O método mais eficiente, com maior percentual de regeneração dos ápices caulinares (82%) foi o método de gota-vitrificação, adotando-se o tempo de 40 minutos de exposição dos explantes à solução crioprotetora PVS3, na temperatura de 0°C. / The main objective of this work was to develop a cryopreservation protocol for Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen shoot tips, in order to ensure the long-term conservation of its germplasm. The conditions for introduction in vitro and clonal multiplication of Pfaffia glomerata from lateral buds of nodal segments of plants growing in the field were established to obtain the batch of stock donor plants for the cryopreservation experiments. After 30 days of culture in vitro 92% of the lateral buds resumed growth giving rise to whole plantlets, with well developed root system and shoots. For the definition of the cryopreservation protocol, two techniques were tested, vitrification and dropvitrification,. The vitrification technique consisted of the following procedures: isolation of shoot apices (± 2.0 mm) from in vitro growing plantlets, pre-culture ( MS culture medium, solidified with agar and supplemented with 0.3M sucrose), loading with MS medium supplemented with 2.0M glycerol and 0.4M sucrose), vitrification with three cryoprotectant solutions (PVS2, PVS3 and PVS4), three exposure times (20 min, 40 min and 60 min), two temperatures for each solution (25°C and 0°C), freezing in liquid nitrogen (-196°C), thawing, dilution (MS medium supplemented with 1.2 M sucrose) and culture in vitro. For the drop-vitrification method, the steps used were similar, consisting of excision of the shoot tips, pre-culture of explants (solid MS supplemented with 0.3M sucrose), loading (liquid MS supplemented with 2.0M glycerol and 0.4M sucrose), vitrification (PVS2, PVS3 and PVS4), three exposure times (20 min, 40 min and 60 min), and two temperatures (25°C and 0°C), freezing of the shoot apices arranged in aluminum strips and submerged directly into liquid nitrogen, thawing, dilution (MS supplemented with 1.2M sucrose) and in vitro culture. The best conditions for cryopreservation using the droplet-vitrification method were treatment with PVS3 solution for 40 minutes at 0°C, which resulted in 82% regeneration. The results obtained with this work indicate that cryopreservation in liquid nitrogen can be used for conservation of germplasm of brazilian ginseng. The most efficient method, with the highest percentage of shoot tip regeneration (82%), was the droplet-vitrification method, with 40 minutes of exposure of the explants to the cryoprotectant solution PVS3 at 0°C.
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Recuperação e criopreservação de germoplasma de mamíferos silvestres mortos no bioma Cerrado do Distrito Federal : uma estratégia para conservação animal ex situ / Recovery and mammals of germplasm cryopreservation wild dead in bioma Federal District closed : a strategy for conservation animal ex situMattos, Luciana Miranda 01 June 2016 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-09-20T18:59:56Z
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2016_LucianaMirandaMattos.pdf: 757535 bytes, checksum: dc9aaabc293b5718e20254747d9f337a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-10-20T20:06:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2016_LucianaMirandaMattos.pdf: 757535 bytes, checksum: dc9aaabc293b5718e20254747d9f337a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T20:06:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2016_LucianaMirandaMattos.pdf: 757535 bytes, checksum: dc9aaabc293b5718e20254747d9f337a (MD5) / A perda da diversidade biológica vem aumentando consideravelmente no bioma Cerrado, sendo causada pela destruição de hábitats ocasionados pelo crescimento das cidades, fronteiras agrícolas, aumento da população humana, extração de madeira, abertura de estradas e distúrbios como fogo, caça, pecuária e, sobretudo, atropelamentos de animais silvestres em rodovias. Com essa intensa perda de material genético, fez-se necessário a criação de um banco de germoplasma para se evitar a extinção de espécies ameaçadas. O objetivo deste trabalho foi primeiramente avaliar a possibilidade de recuperar, isolar e caracterizar fibroblastos de três espécies diferentes (lobo-guará, veado-catingueiro e cachorrodo- mato), assim como testar o efeito dos crioprotetores DMSO 10% e DMF 5% associados a uma curva de resfriamento lenta e não controlada, sobre a viabilidade celular destes animais. Em seguida, utilizando o meio de criopreservação mais eficiente identificado previamente, formar um banco de germoplasma contendo fibroblastos de diferentes espécies silvestres do bioma Cerrado, aproveitando o material genético que seria perdido com a morte do animal. Os animais foram provenientes de atropelamento nas rodovias, encontrados mortos no meio ambiente ou do Hospital Veterinário do Jardim Zoológico de Brasília. Foram retirados fragmentos de pele da orelha dos animais mortos. Em seguida foram tricotomizados e fragmentados em pedaços de 2 mm2. As amostras foram colocadas em placas de petri, preenchidas com 3 mL de meio DMEM, suplementado com 10% de SFB e antibiótico e, em seguida levadas à estufa de CO2 a 38,5 ºC e 5% de CO2. Os fragmentos foram retirados após 10 dias após a troca do meio. No sétimo dia após a troca do meio, as células foram suspensas em tripsina-EDTA e transferidas para garrafas de cultivo até atingirem a confluência. Após atingirem a terceira passagem, uma parte das células foi diluída em solução de criopreservação com 10% de DMSO, e a outra parte foi diluída em solução com 5% de DMF. As células foram envasadas em palhetas de 0,25 mL e armazenadas por 24 horas a -80ºC e, logo após esse tempo, armazenadas em nitrogênio líquido. As células pós-congelamento foram coradas com Trypan blue 4% para análise de viabilidade. Os fibroblastos dos exemplares de lobo-guará apresentaram um atraso no crescimento celular em meio DMEM em relação a outras espécies, sendo um fator limitante para seu armazenamento futuro. Diferenças na morfologia celular foram observadas entre os fibroblastos de lobo-guará, veado-catingueiro e cachorro-do-mato, que apresentaram formato ramificado, fusiforme e esférico, respectivamente. A solução de crioproteção contendo 10% de DMSO foi mais eficiente que o meio com DMF 5%, para conservar a viabilidade dos fibroblastos das três espécies (P<0,05). Um banco de germoplasma foi formado com 508 amostras criopreservadas com fibroblastos de 19 animais, provenientes de 11 espécies diferentes. Dentro destas espécies, quatro são classificadas em escala de risco de extinção como menos preocupantes (cachorro-do-mato, veado-catingueiro, furão e macaco-da-noite), seis espécies como vulneráveis (lobo-guará, onça-pintada-preta, onça-pintada, gato-maracajá e gato-palheiro), uma em perigo de extinção (mico-leão-preto) e uma criticamente em perigo (cairara). Este reservatório biológico se configura no primeiro banco de germoplasma contendo células somáticas de mamíferos silvestres mortos do bioma Cerrado do Brasil. Este material está alocado no Jardim Zoológico de Brasília e servirá para estudos futuros de caracterização das espécies e multiplicação de animais por meio da clonagem por transferência nuclear. ________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The loss of biological diversity has increased considerably in the Cerrado biome, being caused by the destruction caused habitat for the growth of cities, agricultural areas, increasing human population, logging, opening roads and disturbances such as fire, hunting, livestock and especially, road kill wildlife on highways. With this intense loss of genetic material, it became necessary to create a germplasm bank to prevent the extinction of endangered species. The objective of this study was first to evaluate the possibility to recover, isolate and characterize three different species fibroblasts (maned wolf, deer brocket and dog-eating fox) and tests the effect of cryoprotectants 10% DMSO and DMF 5% associated with a slow cooling curve and not controlled on the cell viability of these animals. Then, using the most efficient means of cryopreservation identified previously, form a germplasm bank containing fibroblast different wild species of the Cerrado biome, taking advantage of the genetic material that would be lost with the death of the animal. The animals came from being run over on highways, found dead in the environment or the Veterinary Hospital Garden Brasilia Zoo. Ear skin fragments were removed from dead animals. Then they were shaved and fragmented into 2 mm2 pieces. The samples were placed in petri dishes, filled with 3 mL of DMEM supplemented with 10% FBS and antibiotics, and then brought to the CO2 incubator at 38.5 °C and 5% CO2. The fragments were removed after 10 days and the medium replaced. On the seventh day after the exchange of the medium, the cells were suspended in trypsin-EDTA and transferred for cultivation bottles until reaching confluence. After reaching the third passage, a part of the cells was diluted cryopreservation solution with 10% DMSO, and the other part was diluted in solution with 5% DMF. The cells were filled into 0.25 ml straws and stored at -80 °C for 24 hours and, after this time, stored in liquid nitrogen. The post-freezing cells were stained with Trypan blue to 4% viability analysis. Fibroblasts of the maned wolf specimens showed a delay in cell growth in DMEM in relation to other species, a limiting factor for their future storage. Differences in cell morphology were observed between the maned wolf fibroblasts, brocket deer and dog-eating fox, which had branched form, fusiform and spherical, respectively. The cryoprotection solution containing 10% DMSO was more efficient than the medium with 5% DMF, to preserve the viability of the fibroblasts of the three species (P <0.05). A germplasm bank was formed with 508 samples cryopreserved with fibroblasts of 19 animals from 11 different species. Within these species, four are classified endangered risk scale as less worrying (dog-eating fox, brocket deer, ferret and night monkey), six species as vulnerable (maned wolf, black jaguar, jaguar cat maracajá and barn cat) an endangered (black lion tamarin) and a critically endangered (cairara). This biological reservoir is configured in the first germplasm bank containing somatic cells of wild mammals killed the Cerrado biome in Brazil. This material is allocated to the Zoo of Brasilia and serves for future studies to characterize the species and multiplication of animals through cloning by nuclear transfer.
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Formação de um banco ativo de germoplasma, seleção de acessos e propagação vegetativa de Bougainvillea / Formation of active germplasm bank, selection of access and vegetative propagation of BougainvilleaFoschini, Jessica 04 October 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-10-04 / Não recebi financiamento / The world market of flowers and ornamental plants have been demonstrating high growth along the last years. Accompanying this growth, it is also observed the increase of the interest by the study and production of new species with potential of ornamental use, among them the primavera (Bougainvillea sp.), a gender with many native species of Brazil. The cultivation and the production of primavera in vases in Brazil are a recent practice, and he has as need the development of technologies that they make possible the process, as the choice of appropriate genotypes, the propagation, floral induction and durability of the flowers. In that context, the selection of more appropriate genotypes to the cultivation in vase with herbaceous characteristics and semi-shrub, as well as the effectiveness of technology of vegetative propagation for maintenance of the production are primordial in the productive process. Being like this, this work had as objectives: (1) formation of an Active Bank of Germplasm seeking to the selection of accesses and futures programs of genetic improvement and propagation; (2) establishment in vitro of commercial accesses of primavera using different explants and culture means; (3) multiplication of cuttings and rooting vegetation home for the cutting technique. To the total they were collected and identified ten accesses for formation of BAG, of which two were used for studies of vegetative propagation, being just an used in the study in vitro (A1. B. glabra). In function of the obtained results, it can be said that the primavera cultivation in vitro can come to be an alternative for production of the species being used as explant stem apexes, asepsis in sodium hypochlorite 60% for 20 and a half minutes of cultivation WPM, however the established protocols in that study still don't allow the production of seedlings in laboratory. Already the technique of stem cutting was shown viable for obtaining of seedlings, could be applied to a commercial cultivation. The best results presented for stem cutting were with the use of AIB in the concentration of 1000 ppm for the access A5 (B. spectabillis), and without auxin addition for the access A1 (B. glabra). / O mercado mundial de flores e plantas ornamentais tem demonstrado elevado crescimento ao longo dos últimos anos. Acompanhando este crescimento, observa-se também o aumento do interesse pelo estudo e produção de novas espécies com potencial de uso ornamental, dentre elas a primavera (Bougainvillea sp.), um gênero com muitas espécies nativas do Brasil. O cultivo e a produção de primaveras em vasos no Brasil é uma prática recente, e tem como necessidade o desenvolvimento de tecnologias que viabilizem o processo, como a escolha de genótipos adequados, a propagação, indução floral e durabilidade das flores. Nesse contexto, a seleção de genótipos mais adequados ao cultivo em vaso com características herbáceas e semi arbustivas, bem como a efetivação de tecnologia de propagação vegetativa para manutenção da produção são primordiais no processo produtivo. Sendo assim, este trabalho teve como objetivos: (1) formação de um Banco Ativo de Germoplasma visando à seleção de acessos e futuros programas de melhoramento genético e propagação; (2) estabelecimento in vitro de acessos comerciais de primavera utilizando diferentes explantes e meios de cultura; (3) multiplicação de estacas e enraizamento em casa de vegetação pela técnica de estaquia. Ao total foram coletados e identificados dez acessos para formação do BAG, dos quais dois foram utilizados para estudos de propagação vegetativa, sendo apenas um utilizado no estudo in vitro (A1 – B. glabra). Em função dos resultados obtidos, pode-se dizer que o cultivo de primavera in vitro poderá vir a ser uma alternativa para produção da espécie utilizando-se como explante ápices caulinares, assepsia em hipoclorito de sódio 60% por 20 minutos e meio de cultivo WPM, contudo os protocolos estabelecidos nesse estudo ainda não permitem a produção de mudas em laboratório. Já a técnica de estaquia caulinar mostrou-se viável para obtenção de mudas, podendo ser aplicada a um cultivo comercial. Os melhores resultados apresentados para estaquia caulinar foram com a utilização de AIB na concentração de 1000 ppm para o acesso A5 (B. spectabillis), e sem adição de auxina para o acesso A1 (B. glabra).
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Caracterização molecular de acessos de jabuticabeiras do banco ativo de germoplasma da UTFPR com marcadores microssatélitesMartins, Diego Albino 16 December 2013 (has links)
O Brasil é país detentor de grande biodiversidade, no entanto pequena parcela
dessa já foi estudada e catalogada. Os recentes avanços antrópicos sobre os
ecossistemas naturais tem levado a sua rápida fragmentação e eliminação de alguns
biótipos ainda não estudados ou catalogados. Nessa realidade de erosão genética
acelerada encontra-se também espécies de jabuticabeira (Plinia sp.) que são
endêmicas do Centro Sul/Sudoeste do Paraná, no ecossistema Floresta com
Araucária. Medidas de conservação de germoplasma para uso atual e futuro, bem
como táticas de manejo e conservação dos recursos naturais são preponderantes
para reduzir ao mínimo os danos causados a biodiversidade brasileira. Para tanto é
necessário entender a diversidade genética existente nos ecossistemas naturais,
que é o insumo básico para a sobrevivência e evolução entre os indivíduos frente as
modificações ambientais. No presente trabalho foi realizado a caracterização
genética de 110 jabuticabeiras que constituem o banco ativo de germoplasma desta
espécie na UTFPR – Câmpus Dois Vizinhos. Foi possível identificar a
transferibilidade de 9 marcadores moleculares microssatélites (SSR) com caráter
polimórfico para a população estudada, e realizar a padronização de reação de PCR
para cada um deles. Da análise das jabuticabeiras do banco ativo de germoplasma
chegou-se a conclusão de que o mesmo abrigou valor considerável de diversidade
alélica. No entanto tal diversidade está mal distribuída, já que 11 indivíduos sozinhos
já são capazes de representar 59,2% de todos alelos da coleção de 110 plantas. Os
valores encontrados de heterozigosidade observada e conteúdo informativo (PIC)
nessa subpopulação de 11 indivíduos foram superiores aos valores encontrados
para o conjunto integral do banco ativo. O agrupamento dos indivíduos mostrou a
existência de 8 diferentes grupos, sendo que 89 indivíduos ficaram no grupo 1,
demonstrando o seu possível grau de parentesco e baixo nível de diversidade
genética. / Brazil is a country of great biodiversity holder, however small portion of that has been
studied and cataloged. Recent advances human activities on natural ecosystems has
led to its rapid fragmentation and elimination of some biotypes still, not it studied or
cataloged. In this reality of genetic erosion is also accelerated jabuticaba tree species
(Plinia sp.). That are endemic from South Central / Southeastern Paraná State, in
Araucaria forest ecosystem. Germplasm conservation measures for current and
future use, as well as tactics for management and conservation of natural resources
are crucial to minimize the damage caused to Brazilian biodiversity. So it is
necessary to understand the genetic diversity in natural ecosystems, which is the
basic input for the survival and evolution among individuals facing environmental
changes. In the present study was to characterize genetic of 110 jabuticaba tree fruit,
that constitute the germoplasm bank of jabuticaba tree fruit from UTFPR - Câmpus
Dois Vizinhos. It was possible to identify transferability of 9 microsatellite markers
(SSR) with polymorphic character for the population studied, and it carry out
standardization of PCR reaction for each of them. The analysis of plant germoplasm
bank came to the conclusion that houses a considerable amount of allelic diversity,
but this diversity is poorly distributed, since 11 individuals alone are already able to
represent 59.2% of all alleles of the collection of 110 plant. The found values of,
observed heterozygosity and information content (PIC) in this subpopulation of 11
individuals were higher than the values found for the full set of the germoplasm bank.
The grouping of individuals showed the existence of 8 different groups, and 89
subjects were in group 1, demonstrating a possible relationship and low level of
genetic diversity.
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Diversidade genética de acessos de cevada sob sistema de produção irrigado no Cerrado do Planalto Central brasileiroMonteiro, Vitor Antunes 19 March 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2012. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-06-26T18:41:45Z
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2012_VitorAntunesMonteiro.pdf: 1190256 bytes, checksum: f05e14ab2fa765ca1a26a3dbf36cceb7 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-06-27T12:56:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2012_VitorAntunesMonteiro.pdf: 1190256 bytes, checksum: f05e14ab2fa765ca1a26a3dbf36cceb7 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-27T12:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2012_VitorAntunesMonteiro.pdf: 1190256 bytes, checksum: f05e14ab2fa765ca1a26a3dbf36cceb7 (MD5) / O início da produção comercial de cevada (Hordeum vulgare L.) no Brasil data da década de 1930, nos estados do Sul. Sua inserção no Cerrado do planalto central brasileiro ocorreu em 1976 graças à sua adaptabilidade às condições edafoclimáticas deste bioma e aos apoios governamentais, da EMBRAPA e de iniciativas privadas. O sucesso do cultivo, entretanto, depende do conhecimento e utilização da variabilidade genética existente em bancos de germoplasma. No Brasil, ainda que se disponha de ampla coleção de acessos, não se tem uma caracterização sistemática e nem informações sobre o valor dos mesmos em programas de melhoramento. O objetivo deste trabalho foi estimar parâmetros genéticos, fenotípicos e ambientais de componentes de produção e caracteres morfoagronômicos por análise da diversidade entre acessos de cevada pré-selecionados, para formar coleção de trabalho, identificando genótipos a serem utilizados no melhoramento genético da cevada irrigada no Cerrado. Conduziu-se o experimento na Embrapa Cerrados, Planaltina, DF, situada a 15º35’30’’ de latitude Sul e 47º42’30’’ de longitude Oeste, numa altitude de 1.007 m, sob irrigação, entre 18 de junho e 17 de outubro de 2010, composto por 433 acessos, além de BRS 180 e BRS 195 (testemunhas), em delineamento de testemunhas intercalares. Para estimar os parâmetros genéticos foram utilizados 13 descritores morfoagronômicos quantitativos e, para a comparação entre acessos, onze quantitativos e quatro categóricos. Foram encontradas altas magnitudes de herdabilidade e coeficiente de variação genético para as características agronômicas avaliadas, além de forte correlação negativa para interação rendimento x dias para espigamento e teor de proteína. A dissimilaridade genética entre os pares de acessos foi estimada utilizando o coeficiente de Gower e, a partir disso, foram aplicados o método de otimização de Tocher e a dispersão gráfica das distâncias no plano. As distâncias genéticas variaram de 0,025 a 0,572, com média de 0,256. Os acessos foram distribuídos em 18 grupos pelo método de Tocher, de forma coerente ao observado na dispersão gráfica. A divergência genética existente na coleção pesquisada, aliada às altas herdabilidades e coeficientes de variação genética, permitem definir acessos para compor blocos de cruzamentos em programas de melhoramento genético de cevada em ambiente de Cerrado irrigado. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The commercial production of barley (Hordeum vulgare L.) in Brazil began in the 1930s, at first in the southern states. Its insertion into the Brazilian Savannah Highland occurred in 1976 thanks to its adaptability to the edafoclimatic conditions of this biome and to the government subsidies, EMBRAPA and private initiatives. The success of this crop relies, however, on the knowledge and use of genetic variability present in germplasm banks. In Brazil, even though large access collections are available, a systematic characterization of them, with information on genetic parameters estimates and statistics does not exist. The aim of this work was to estimate genetic, phenotypic and environmental parameters of yield components and morfoagronomic characters, by analyzing diversity among pre-selected accessions, to integrate a core collection for barley breeding at irrigated savannah conditon. The experiment was conducted in Embrapa Cerrados, Planaltina, DF, Brazil, located at 15º35'30'' south latitude and 47º42'30'' west longitude at an altitude of 1007 m, under irrigation, between 18 June and 17 October 2010, composed of 433 accesses, plus BRS180 and BRS 195 (checks), in an interpolated control design. To estimate the genetic parameters 13 quantitative morphological descriptors were used while the comparison between accesses were made by eleven quantitative and four discrete. High magnitudes of heritability and genetic variation coefficient were found for the agronomic traits evaluated, besides of strong negative correlation between yield x days to earing and protein content. The genetic dissimilarity between access pairs was estimated using Gower’s coefficient and, from this, the optimizing Tocher method and the graphic dispersion distance were applied. The genetic distances varied between 0.025 and 0.572, with mean of 0.256. The accessions were distributed in 18 groups by the Tocher method, which were directly related to the graphic dispersion. The existing genetic divergence in the collection under study, ally to high heritabilities and genetic variation coefficients, allows the identification of accessions to be used in crossing blocs from a breeding programme directed to savannah environment.
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