Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-08-09Bitstream added on 2014-06-13T20:28:40Z : No. of bitstreams: 1 teixeira_pc_me_jabo.pdf: 886510 bytes, checksum: 7e701e9c09d806beb2b0ac2590cbdfaa (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudar o sangue significa monitorar a saúde dos animais reduzindo, desta forma, as perdas por doenças ou injúrias, seja frente a um determinado tipo de estressor, por sistemas de criação não apropriados, por manejos inadequados ou ainda por alterações ambientais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta fisiológica de girinos de rã-touro (Rana catesbeiana) em diferentes densidades e após exposição aérea. O experimento foi realizado em duas etapas utilizando-se de animais entre os estágios 31 a 39, na fase de pró-metamorfose; na primeira etapa, realizada no CAUNESP - UNESP/SP, avaliou-se somente a exposição aérea nos tempos de 0, 15, 30,45,60 e 90 minutos. Na segunda etapa, realizada no Instituto de Pesca – APTA/ SP foi avaliada a densidade de estocagem sendo testados 1 girino/L (Tratamento I), 5 girinos/L (Tratamento 2) e 10 girinos/L (Tratamento 3), conduzidos em 3 réplicas simultâneas, e a exposição aérea nos dias 0,14(6 horas), 4, 8 e 12 dias. O sangue foi retirado por rompimento do vaso caudal na condição de Normóxia - N (tempo zero) e Hipóxia - H (tempo de 15 minutos de exposição ao ar). Avaliou¬se, na primeira etapa, somente o cortisol plasmático e na segunda etapa, cortisol plasmático, glicemia, hematócrito, hemoglobina, número de eritrócitos, os índices hematimétricos absolutos ¬VCM, HCM e CHCM, contagem diferencial de leucócitos e contagem total de leucócitos e trombócitos. Foi observado um aumento nos valores de cortisol, aos 4 e 8 dias de exposição aérea retomando aos valores basais ao final do experimento, apesar de não haver diferenças significativas. A glicemia foi influenciada no tratamento com 10 girinos/L mostrando forte correlação com a hipóxia. Os parâmetros hematológicos, principalmente, o número de linfócitos, neutrófilos e eosinófilos mostraram diferença significativa aos 12 dias de experimentação... / Studying blood means monitoring animals health reducing, losses by disease or injury caused by certain kinds of stress related to improper rearing systems, handling or alterations in the environment. The aim of this study was to evaluate bullfrog's tadpole physiological answer (Rana catesbeiana) to different densities and air exposition. The experiment was carried out in two parts using animals, at the pro-metamorphosis phase, on the first part carried out at CAUNESP - Aquaculture Center, São Paulo State University was evaluated only air exposition, which animals were sampled on zero, fifteen, thirty, forty five, sixty and ninety minutes and on second part, carried out at Fisheries Institute – APTA/SP was evaluated different densities and air exposition, which stocking densities was 1 tadpole/L (treatment one), 5 tadpoles/L (treatment two) and 10 tadpoleslL (treatment three) with three simultaneous replicates and animals were sampled on zero, 114 (six hours), four, eight and twelve experimental days. Blood was collected by breaking tail blood vessel at norrnoxic (zero time) and hipoxic (fifteen minutes by air exposition) conditions. Only cortisol was evaluate on the first part and on second, cortisol, glicemy, hematocryts, haemoglobin tax, couting of erytrocyte's number, absolute hematimetrycs indices -MCV, MCH and MCHC, differenctial couting of leucocytes, total counting of leucocytes and trombocytes were evaluated. An increase in plasmatic cortisol was observed at four and eight days of the experiment, retuming to initial values after 12 days. Glicemy values increased at treatrnent. three, showing strong correlation with hypoxia. Hematological parameters as linphocytes, neutrophils and eosinophils numbers at the 12th day of the experiment showed differences comparing to zero day; concluding that stocking densities until 10 tadpoles/L and air exposition ...(Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-27Bitstream added on 2014-06-13T18:19:52Z : No. of bitstreams: 1 medeiros_fp_me_jabo.pdf: 1347966 bytes, checksum: 53673618c4a072d813fe2018e7c5a578 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / No presente estudo foi analisado o parênquima hepático com características homogêneas e ecogenicidade difusa reduzida (G1), aumentada (G2) e normal (G3), em relação ao perfil dos animais, dimensão do fígado e achado bioquímico e hematológico. Amostras de sangue obtidas por punção venosa da jugular ou da cefálica do antebraço foram encaminhadas para realização de hemograma e dosagem sérica de ALT, FA, proteínas totais, albumina, globulina, uréia e creatinina. Dos 30 cães que compuseram o G1, 30 (100%) apresentaram evidência das paredes portais e da vesícula biliar, 23 (76,67%) fígado com dimensão preservada e bordos em ângulos agudos, 15 (50%) faixa etária entre 1 e 6 anos de idade e 8 (26,67%) eram da raça lhasa apso. Não houve predisposição quanto ao sexo, assim como não foram identificadas alterações significativas nos exames bioquímicos e hematológicos dos cães do G1. Quanto aos diagnósticos clínicos atribuídos para estes cães, houve maior prevalência de gastrinterite (43,33%). Dos 30 cães do G2, 27 animais (90%) apresentaram hepatomegalia e arredondamento dos bordos hepáticos, 18 (60%) tinham idade superior a 9 anos, 16 (53,33%) eram fêmeas e 9 (30%) eram da raça poodle. Houve elevação da atividade sérica de FA e elevação de ALT, redução nos níveis de proteínas séricas totais, albumina, globulinas, eritrócitos e volume globular, além de leucocitose por neutrofilia, com desvio à esquerda, eosinopenia, linfopenia e monocitose nos cães do G2. Neste grupo houve prevalência de doenças metabólicas (54%), como diabetes mellitus e hiperadrenocorticismo, além das hepatopatias crônicas (17%), atribuídas ao uso contínuo e prolongado de corticóide e drogas anticonvulsivantes. Dos 30 cães do grupo controle (G3), 22 (73,33%) apresentaram... / The present study evaluated the liver with homogeneous parenchyma in dogs, with diffuse reduced echogenicity (G1), increased echogenicity (G2) and normal echogenicity (G3) by ultrasound examination associating the findings on animal profile, liver size and hematology and biochemistry results. Blood samples obtained by cephalic or jugular venipunture were submitted for hemogram and ALT, ALP, total proteins, albumin, globulin, urea and creatinine analysis. Among the 30 dogs in G1, 30 (100%) presented portal venous and gall bladder wall clarity, 23 (76.67%) presented normal liver size and edges, 15 (50%) were from 1 to 6 years old and 8 (26.67%) belonged to the lhasa apso breed. No predispositions were found according to gender, as well as no significant alterations in biochemical and hematological exams were observed in G1. The most prevalent disease found in this group was gastroenteritis (43.33%). Among the 30 dogs in G2, 27 (90%) presented hepatomegaly and rounded hepatic edges, 18 (60%) were over 9 years old, 16 (53.33%) were female and 9 (30%) belonged to the poodle breed. The laboratorial findings related to this group were increased ALT and ALP serum activity, decreased levels of total protein, albumin, globulin, erythrocytes and hematocrit, as well as leukocytosis with neutrophilia and a left shift, eosinopenia, lymphopenia and monocytosis. The most prevalent diseases found in this group were metabolic disorders (54%), such as diabetes mellitus and hyperadrenocorticism, and chronic hepatopathies (17%) due to prolonged and continuous use of corticoid and anticonvulsive drugs. Among the 30 dogs in the control group (G3), normal liver size and edges were presented in 22 (73.33%). In this group, no alterations were seen in laboratorial exams.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:51:08Z : No. of bitstreams: 1 kitamura_ea_me_botfmvz.pdf: 643374 bytes, checksum: acf4c3d1531bf42eaabaf871100eca42 (MD5) / Na clínica de pequenos animais, rotineiramente, observam-se casos de intoxicações de cães por rodenticidas anticoagulantes. Isto é conseqüência da grande utilização deste pesticida, que é de fácil aquisição para o uso doméstico no controle de roedores. Estes animais comumente apresentam distúrbios de hemostasia secundária com quadro hemorrágico. O presente trabalho teve por objetivo avaliar as alterações hematológicas, hemostáticas e a resposta terapêutica de cães intoxicados experimentalmente por varfarina. Foram utilizados 28 cães, adultos, machos e fêmeas, que foram divididos em 2 grupos de 14 animais, sendo: Grupo I (varfarina + vitamina K1) e Grupo II (varfarina + vitamina K1 e plasma fresco congelado). Os cães foram intoxicados com a varfarina sódica (30mg/kg) por via oral e foram tratados com vitamina K1 (1mg/kg) por via subcutânea e a transfusão do plasma fresco congelado (PFC) na dose de 10mL/kg por via intravenosa. Os exames laboratoriais como hemograma, plaquetas, fibrinogênio, tempo de sangramento em mucosa oral (TSMO), tempo de coagulação (TC), tempo de protrombina (TP), tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e tempo de trombina (TT) foram realizados em sete momentos: M0 (controle), M1 (48 horas), M2 (72 horas), M3 (78 horas), M4 (96 horas), M5 (120 horas) e M6 (168 horas) após a intoxicação. O tratamento com a vitamina K1 foi iniciado após o M2, continuando a cada 24 horas até o último momento, e a transfusão de PFC foi realizada somente uma vez imediatamente após o M2. Os resultados laboratoriais demonstraram que o TP é o mais sensível para o monitoramento da intoxicação por varfarina. TTPA e o TC também se apresentam prolongados pelo efeito anticoagulante do veneno, sendo que estes três testes devem ser utilizados conjuntamente no diagnóstico diferencial da intoxicação por varfarina. O tratamento com o PFC associado... / Anticoagulant rodenticide intoxication is very common in the small animal practice. This is due to the high prevalence of its use as a domestic pesticide and its purchase availability. These animals usually present secondary hemostatic defects, with a hemorrhage. The aim of this work was to evaluate the hematological and hemostatic changes and the therapeutic response of dogs experimentally intoxicated by warfarin. Twenty eight adult dogs, males and females, were divided in two groups of 14 dogs: Group I (warfarin + vitamin K1) and Group II (warfarin + vitamin K1 and fresh frozen plasma). Dogs were intoxicated with sodium warfarin (30mg/kg) by the oral route and treated with vitamin K1 (1mg/kg) by the subcutaneous route. Fresh frozen plasma (FFP) was administrated intravenously (10mL/kg). The CBC, platelet count, fibrinogen, bucal mucosa bleeding time (BMBT), clotting time (CT), prothrombin time (PT), activated partial prothrombin time (APPT) and thrombin time (TT) were evaluated at seven moments: M0 (control), M1 (48h), M2 (72h), M3 (78h), M4 (96h), M5 (120h) and M6 (168h) pos-intoxication. Vitamina K1 administration was initiated immediately after M2 and repeated each 24 hours until the end of the experiment and the fresh frozen plasma was given only after M2. The results demonstrated that PT is the most sensible test for the follow up of warfarin toxicosis. APPT and CT also had been presented prolonged by the anticoagulation effect of the venom; therefore these three tests should be used together in the differential diagnosis of warfarin intoxication. Treatment with FFP associated to vitamin K1 promoted a considerable shortening on the time of coagulation tests, earlier than the treatment with the vitamin K1 alone.

Orientador: Jean Leandro dos Santos / Banca: Carlota de Oliveira Rangel Yagui / Banca: Flávio da Silva Emery / Resumo: A Anemia Falciforme (A.F.) é uma doença hematológica genética na qual ocorre mutação no gene da β-hemoglobina. Essa mutação promove polimerização das moléculas de hemoglobina, promovendo alterações (afoiçamento) da estrutura física dos eritrócitos e aumento da adesão das células sanguíneas no vaso contribuindo para o aumento do processo vaso-oclusivo, principal característica da doença. A doença promove um processo inflamatório crônico e há aumento de diversas citocinas pró-inflamatórias, a exemplo do TNF-α, sendo este, portanto um importante alvo para intervenção terapêutica. A hidroxiuréia (HU) é o único fármaco disponível para o tratamento e seus efeitos benéficos estão associados à capacidade de biotransformação da mesma em óxido nítrico. Entretando, a mielotoxicidade e demais efeitos deletérios da HU, torna importante a introdução de novos fármacos que agregue os efeitos benéficos da mesma sem sua potencial toxicidade. O NO desempenha efeitos benéficos tais como: vasodilatação, inibição da agregação plaquetária e produção de hemoglobina fetal (HbF), esta última tem função de diminuir a polimerização da hemoglobina. Nesse contexto, em continuidade com uma linha de pesquisa que visa o planejamento, síntese e avaliação farmacológica de novos protótipos candidatos a fármacos para tratamento das complicações da anemia falciforme, foi sintetizada uma nova série de quatro compostos híbridos inéditos (I-IV) contendo a subunidade ftalimídica (inibidora de TNF-α) e o núcleo furoxânico (doador de NO) espaçados pela subunidade N-acilidrazona. Todos os compostos apresentaram-se como doadores de NO. Os compostos I a IV mostraram-se inibidores de TNF-, sendo o composto IV o mais promissor, inibindo em torno de 65% em concentrações menores que os demais. No ensaio de agregação plaquetária induzida por ADP, os compostos III e IV foram capazes de inibir sigficativamente a ... / Abstract: Sickle Cell Anemia is a genetic blood disease in which there is a mutation in the β-hemoglobin gene. This mutation promotes polymerization of hemoglobin molecules that change the structure of the erythrocyte cytoskeleton promoting sickling of the cell. Moreover, there is increased adhesion of blood cells in the vessel contributing to the increasement of the vaso-occlusive process, the main characteristic of the disease. It is further known that the chronic inflammation associated with the disease contributes to a number of complications and among the process responsible for this proinflammatory cytokine is TNF-α, which is an important target for therapeutic intervention. Hydroxyurea (HU) is the only available drug for treatment and its beneficial effects are associated with the same capacity biotransformation of nitric oxide. The NO plays beneficial effects such as vasodilation, inhibition of platelet aggregation and production of fetal hemoglobin (Hb F), latter has the function of decreasing polymerization of hemoglobin. In this context, continuing the research line that aims at planning , synthesis and pharmacological evaluation of new prototypes drug candidates for the treatment of sickle cell anemia complications, in this work have synthesized a series of four new hybrid compounds ( I- IV) containing the phtalimide (TNF-alfa inhibitory subunit) and furoxan subunits ( nitric oxide donors) according to structural design. The compounds were presented as NO donors. Compounds I-IV were shown to be inhibitors of TNF-α in the immunoassay of this cytokine assay and the compound IV is the most promising inhibiting between 65% in smaller concentrations than the other. In the assay of ADP-induced platelet aggregation, compounds III and IV were able to inhibit platelet aggregation sigficantily. In addition, the compound I after 72 hours was able to increase the gene expression of gamma globin approximately two times the control, at a ... / Mestre

Orientador: Elizabeth Romagosa / Coorientador: Giovani Sampaio Gonçalves / Banca: Leonardo Tachibana / Banca: Neuza Sumico Takahashi / Banca: Renata Guimarães Moreira / Banca: Vander Bruno dos Santos / Resumo: Um dos desafios da cadeia produtiva da tilápia é determinar qual a dieta mais adequada de modo a garantir a melhor eficiência reprodutiva. Os experimentos avaliaram o desempenho reprodutivo de tilápias-do-nilo, alimentadas com diferentes níveis de proteína bruta (PB) em duas etapas (I e II): I-Unidade experimental, utilizando quatro dietas (32, 38, 44 e 50% de PB). Observou-se resultados de motilidade (MOT), velocidade curvilinear (VCL), velocidade média do deslocamento (VAP) e velocidade em linha reta (VSL) significativos no sêmen dos machos até uma inclusão de 44% de PB, porém, não foram verificados benefícios relevantes nas fêmeas, sendo que, para todos os tratamentos apresentaram os parâmetros reprodutivos: volume de ovos, número de ovos e fecundidade absoluta sem diferença significativa (p>0,05). II-Piscicultura comercial, utilizando quatro dietas experimentais (32B, 38, 44 e 50% PB) e duas comerciais (32A e 36% PB). Não foram encontrados resultados significativos no desempenho reprodutivo das fêmeas (volume de ovos, fecundidade absoluta e número de ovos produzidos), no entanto, observando os parâmetros avaliados nos machos (MOT, VCL, VAP e VSL) o crescimento e a sobrevivência significativa (p<0,05) das larvas, propõe-se a utilização de dietas contendo 44% de PB em rações para matrizes de tilápia-do-nilo, a fim de se obter resultados satisfatórios na produção em escala comercial (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: One of the challenges of the tilapia reproductive chain is to determine the most appropriate diet in order to ensure better reproductive efficiency. The experiments evaluated the reproductive performance of Nile tilapia fed with different levels of crude protein (CP) in two stages (I and II): I-experimental unit, using four diets (32, 38, 44 and 50% CP). There was a positive response for males up to 44% CP, however, there have not been verified significant benefits in females. II-commercial fish farming, using four experimental diets (32B, 38, 44 and 50% CP) and two commercial diets (32A and 36% CP). There were no significant results on females reproductive performance, however, observing the parameters evaluated in males and the significant growth of the larvae, it is proposes the use of diets containing 44% crude protein in diets for broodstock Nile tilapia, in order to obtain satisfactory results in the production on a commercial scale (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / With the increase in demand for fish and the decrease in supply coming from the extractive fisheries, aquaculture now has a key role in food production, and its growth has been sought to optimize production processes with the rational and sustainable use of resources natural. One of the main costs involved in the production system is used in feed, which is justified by the high value of protein sources needed for the formulation. The food provided and to promote animal growth through weight gain, should also nourish the defense system, and so the fish can withstand the stress caused in cropping systems. Considered a natural additive, seaweed Arthrospira platensis can be used to supplement the rations due to their properties and high protein content, reaching up to 70% of its dry weight and possessing considerable amino acid content. This study aimed to evaluate the efficiency of dietary supplementation with dry flour A. platensis with different levels in diets used in the nursery hybrid tambatinga (Colossoma macropomum x Piaractus rachypomus), through the growth performance, haematological parameters, chemical composition of fillets and feed, coloring fin fish and measurement of water quality parameters. The experimental cultivation lasted 64 days corresponding to the nursery phase. The fry, with initial weight of 3.56  0.02 g, were fed a diet supplemented with two levels (20 and 40%) and a control (commercial feed). During the experiment were performed to monitor the growth performance, water quality parameters, and the end, blood was collected for determination of hematological, coloring analysis of the anal fin and chemical composition of the fillets. Water quality parameters those that are above safe limits are the total ammonia (NH3), Nitrite (NO2-), Nitrate (NO3-), increasing as the higher level of supplementation and phosphate (PO43-) in the treatment with 20%, but They did not cause mortality, where survival was 100%. The zootechnical results final weight, weight gain and feed conversion and feed efficiency were obtained in the treatments of 20 and 40%. In color, the best results were in treatment with 20%, which showed very marked in red color. Hematological parameters were higher in treatments 20 and 40% compared to the control diet, with emphasis on the total number of red blood cells, hematocrit, hemoglobin, white blood cell count and total plasma protein and is higher as the highest level of supplementation. The highest crude protein (CP) in fillets were found in the treatments that received supplementation (20 and 40%). The preferred level for supplementation of diets tambatinga fry was 20% A. platensis flour therefore maximizes the benefits outlined above in relation to production performance, the protein composition of the fillet, the coloring and the immune system, concurrently minimizing costs and maintaining good water quality. / Com o aumento na demanda por pescados e a diminuiÃÃo na oferta oriunda da pesca extrativa, a aquicultura passa a ter um papel fundamental na produÃÃo de alimentos, e para seu crescimento tem se buscado a otimizaÃÃo dos processos produtivos com o uso racional e sustentÃvel dos recursos naturais. Um dos principais custos envolvidos no sistema de produÃÃo à o da raÃÃo utilizada, que à justificado pelo elevado valor das fontes proteicas necessÃrias para a formulaÃÃo. O alimento fornecido alÃm de promover o crescimento dos animais atravÃs do ganho de peso, tambÃm deve nutrir o sistema de defesa, e assim os peixes possam resistir ao estresse ocasionado nos sistemas de cultivo. Considerado um aditivo natural, a microalga Arthrospira platensis pode ser utilizada na suplementaÃÃo das raÃÃes, devido as suas propriedades e elevado teor proteico, alcanÃando atà 70% de seu peso seco e possuindo considerÃvel teor de aminoÃcidos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a eficiÃncia da suplementaÃÃo alimentar com farinha seca da Arthrospira platensis com diferentes nÃveis em raÃÃes utilizadas na alevinagem do hÃbrido tambatinga (Colossoma macropomum x Piaractus brachypomus), por meio do desempenho zootÃcnico, parÃmetros hematolÃgicos, composiÃÃo centesimal dos filÃs e raÃÃes, coloraÃÃo da nadadeira dos peixes e aferiÃÃo dos parÃmetros de qualidade da Ãgua. O cultivo experimental teve duraÃÃo de 64 dias correspondente à fase de alevinagem. Os alevinos, com peso inicial de 3,56  0,02 g, receberam raÃÃes com dois nÃveis de suplementaÃÃo (20 e 40%) e um controle (raÃÃo comercial). Durante o experimento foram realizados o acompanhamento do desempenho zootÃcnico, parÃmetros de qualidade de Ãgua, e ao final, foi coletado o sangue para determinaÃÃo dos parÃmetros hematolÃgicos, anÃlise da coloraÃÃo da nadadeira anal e composiÃÃo centesimal dos filÃs. Dos parÃmetros de qualidade da Ãgua, os que se encontraram acima dos limites seguros foram a amÃnia total (NH3), nitrito (NO2-), e nitrato (NO3-), aumentando conforme o maior nÃvel de suplementaÃÃo, e fosfato (PO43-) no tratamento com 20%, porÃm nÃo ocasionaram mortalidades, onde a sobrevivÃncia foi de 100%. Os melhores resultados zootÃcnicos de peso final, ganho peso, bem como conversÃo alimentar e eficiÃncia alimentar foram obtidos nos tratamentos de 20 e 40%. Na coloraÃÃo, os melhores resultados foram no tratamento com 20% que apresentou coloraÃÃo bem acentuada no vermelho. Os parÃmetros hematolÃgicos foram superiores nos tratamentos 20 e 40% em relaÃÃo à dieta controle, com destaque para o nÃmero total de eritrÃcitos, hematÃcrito, concentraÃÃo de hemoglobina, leucÃcitos totais e proteÃna plasmÃtica total, sendo mais elevado conforme o maior nÃvel de suplementaÃÃo. Os maiores teores de proteÃna bruta (PB) nos filÃs foram encontrados nos tratamentos que receberam a suplementaÃÃo (20 e 40%). O nÃvel mais indicado para a suplementaÃÃo em dietas de alevinos de tambatinga foi de 20% de farinha de A. platensis, pois maximiza os benefÃcios em relaÃÃo ao desempenho zootÃcnico, à composiÃÃo proteica do filÃ, à coloraÃÃo e ao sistema imunolÃgico, concomitantemente à minimizaÃÃo dos custos e manutenÃÃo da boa qualidade de Ãgua.

Células T de memória são a marca registrada da imunidade adaptativa, e podem ser caracterizadas em central memory (TCM) e effector memory (TEM) T cells. A participação destas células no curso de doenças hematológicas é descrita como mecanismo relacionado à evolução das mesmas. Neste trabalho, analisamos o sangue periférico de doadores de sangue e pacientes com Mielodisplasia (SMD), Mieloma Múltiplo (MM) e Leucemia linfocítica crônica B (LLC), e avaliamos a distribuição das células T CD4+ e CD8+ naive e de memória. SMD e MM não apresentaram resultados significativos, mas na LLC, as células T CD4+ estavam alteradas e dependentes do prognóstico, com aumento das células TCM somente nos pacientes com prognóstico ruim. Essas evidências sugerem que interações imunológicas entre células B da LLC e células T CD4+ possa ser um mecanismo próprio da doença que venha interferir na fisiopatologia e favorecer a geração de células TCM, que podem fornecer sinais de sobrevivência, como citocinas e CD40L, contribuindo assim para o estabelecimento e agressividade da LLC. / Memory T cells are the hallmark of adaptive immunity and are characterized as central (TCM) and effector memory (TEM) T cells. The influence of T cells in the course of hematological malignancies has been described as a mechanism related to the evolution. In this study, we analyzed the peripheral blood of healthy donors and patients with myelodysplastic syndrome (MDS), multiple myeloma (MM) and chronic lymphocytic leukemia B (CLL), and analyzed the distribution of CD4+ and CD8+ naive and memory T cells. MDS and MM revealed no significant difference, but CLL patients showed changes in CD4+ T cell and it were dependent on the prognosis. Patients with poor prognosis presented increased in frequency and absolute number of TCM cells. These evidences show that immunological interactions between CLL and CD4+ T cells could be a disease mechanism that could interfere in pathophysiology and result in the generation of TCM cells, that provide survival signals to the tumor clone, such as cytokines and CD40L, thus contributing to establishment and more aggressive CLL progression.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-13T13:00:47Z No. of bitstreams: 1 Joao Menezes Guimaraes.pdf: 673478 bytes, checksum: ef54de7c4a3b2b028a8d0c3258c0eb0f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T13:00:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Joao Menezes Guimaraes.pdf: 673478 bytes, checksum: ef54de7c4a3b2b028a8d0c3258c0eb0f (MD5) Previous issue date: 2011-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The environmental changes during fish culture reflect directly in the animal health, so the physiologic state should be evaluated systematically. It’s important to assess the animal health during whole culture, making possible an intervention as fast as necessary when any anomaly be detected. The hematological exams are an important tools to diagnose early symptoms. The aim of this study was to investigate the hematological reference values for Nile tilapia, Oreochromis niloticus (Cichlidae), cultured in Pernambuco. Were analyzed 109 fishes with weight and length mean of 525g and 27.7cm. Were determined the hematocrit, red blood cells (RBC); white blood cells (WBC); total thrombocyte; differential count of leukocytes expressed in relative and absolute values; hemoglobin concentration; mean corpuscular volume (MCV); mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and mean corpuscular hemoglobin (MCH). When evaluated separately the fishes from two different groups according to the culture technique (pond or cage), great heterogeneity was observed between the two groups. The mean value of RBC from tilapia cultured in ponds was 2.14x106/μL and in cages was 1.86x106/μL, being around 15% greater. The mean value of hemoglobin and hematocrit were, respectively, 16.87% and 26.14% greater in the pond cultured fish. Was verified difference (P<0.05) in the mean values of total thrombocyte, WBC and lymphocyte/μL, that were respectively 34.83%, 38.55%, 33.28% greater in tilapia cultured in ponds. These differences demonstrate that generic parameters to tilapia hematology must be used with caution, try when possible to establish specific values to the target population, using as reference in sanity accompaniment. / As alterações ambientais no cultivo refletem diretamente na saúde animal, necessitando, por isso, avaliar sistematicamente o estado fisiológico. É importante ter um acompanhamento do estado animal durante todo o cultivo, possibilitando uma rápida intervenção quando for detectada qualquer anomalia. Os exames hematológicos é uma importante ferramenta para um diagnostico ou sinalização precoce e por isso objetivou-se com este estudo investigar os valores hematológicos para a tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus (Cichlidae), cultivadas em Pernambuco. Foram analisados 109 peixes, com peso e comprimento médios de 525g e 27,7cm. Foram determinados o hematócrito, contagem de eritrócitos, leucócitos totais, trombócitos totais, contagem diferencial de leucócitos expressa em valores relativos e absolutos, taxa de hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e hemoglobina corpuscular média (HCM). Ao avaliar separadamente os peixes classificados em dois grupos, de acordo com a técnica de cultivo (viveiro e tanques-rede) observou-se grande heterogeneidade entre os dois grupos. O valor médio de eritrócitos de tilápias cultivadas em viveiro foi 2,14x106/μL e em tanque-rede de 1,86x106/μL, sendo em torno de 15% maior, assim como as médias de hemoglobina e de hematócrito, que foram respectivamente, 16,87% e 26,14% maiores para os peixes de viveiro. Também foi verificado diferença nas médias de trombócitos totais, leucócitos totais e linfócitos/μL, que foram 34,83%, 38,55%, 33,28% maiores no sangue das tilápias cultivadas em viveiro. Tais diferenças demonstram que perfis genéricos para hematologia de tilápias devem ser usados com cautela, devendo-se sempre que possível estabelecer valores específicos para a população que se quer aferir os parâmetros, para servirem como referência no acompanhamento da sanidade.

O gene humano lysine methyltransferase 2E (KMT2E) pertence ao grupo Trithorax (TrxG) e age como proteína modificadora de histonas envolvida no controle transcricional de genes relacionados a hematopoiese. Foi previamente identificado como supressor tumoral, atuando sobre a diferenciação, proliferação e ciclo celular. DAMM et al. (2011) e LUCENA-ARAÚJO et al. (2014) descreveram a associação entre baixos níveis de expressão do gene KMT2E e desfechos desfavoráveis do tratamento de pacientes com leucemia mielóide aguda (LMA) e leucemia promielocítica aguda (LPA), respectivamente. O objetivo desse trabalho foi estudar os efeitos do aumento da expressão do gene KMT2E na leucemia mielóide aguda (LMA). Foi utilizada a linhagem celular U937, reconhecida como modelo de LMA, e o aumento da expressão do gene de interesse foi obtido por meio da transfecção das células com um vetor lentiviral contendo o cDNA codificante para a isoforma longa do gene (pCDH-MSCV-MCS-EF1-GFP+Puro, aqui chamado pMEG). As partículas lentivirais foram geradas por co-transfecção em células da linhagem HEK 293T, e posteriormente, titulados com a linhagem celular HT 1080. A expressão do gene e a presença da proteína foram confirmadas por qPCR e western blotting, respectivamente. Foram realizados ensaios funcionais de ciclo celular, proliferação, viabilidade, apoptose espontânea e induzida por trióxido de arsênico e luz ultravioleta e diferenciação celular induzida por 12-miristato 13-acetato de forbol (TPA), com as amostras U937 wild type (WT), U937 pMEG (U937 transduzidas com o vetor vazio) e U937 pMEG-KMT2E. Também foram realizadas mensurações da massa tumoral das células inoculadas em camundongos NSG. A expressão relativa do gene KMT2E na célula U937 pMEG-KMT2E foi 1000 vezes mais alta que na célula U937 sem a modificação genética. Os ensaios de diferenciação celular demonstraram que as células U937 pMEG-KMT2E apresentaram maior diferenciação em monócitos/macrófagos que as células controles, quando levada em consideração a marcação para o antígeno CD11c. A expressão induzida de KMT2E em células U937 não alterou a proliferação, viabilidade, ciclo celular, apoptose, ix espontânea ou induzida e o aspecto clonogênico in vitro, porém, foi associado a um maior crescimento tumoral em modelo animal. Nossa hipótese para justificar as diferenças entre os achados in vitro e in vivo é que o aumento da expressão de KMT2E, talvez por meio do aumento de CD11c, facilitou a interação entre as células e o microambiente, estimulando assim o crescimento tumoral in vivo. / The human lysine methyltransferase 2E (KMT2E) gene belongs to the Trithorax (TrxG) group and acts as a histone modifying protein participating in the transcriptional regulation of hematopoiesis-related genes. KMT2E has been previously described as a tumor suppressor, involved in cellular differentiation, proliferation and cell cycle progression. DAMM et al. (2011) and LUCENA-ARAÚJO et al. (2014) described the association between low levels of KMT2E gene expression and poor treatment outcomes in patients with acute myeloid leukemia (AML) and acute promyelocytic leukemia (APL), respectively. The aim of this project was to study the effects of high levels of KMT2E expression in acute myeloid leukemia (AML). For this purpose, the U937 AML cell line was used and an high expression of the gene was obtained by transfecting the cells with a lentiviral vector containing the cDNA encoding the long isoform of the gene (pCDH-MSCV-MCS-EF1- GFP + Pure, here called pMEG). The lentiviral particles were transfected into HEK 293T cells and the viral concentration was determined by titration using HT 1080 cells. The gene expression and the protein presence were confirmed by qPCR and western blotting, respectively. All experiments to determine the biological function of overexpressed KMT2E were conducted with U937 wild type, U937 pMEG (U937 transduced with the empty vector) and U937 pMEG-KMT2E cells. In-vitro the impact of overexpressed KMT2E was studied on cell cycle progression, proliferation and cell viability, spontaneous and induced apoptosis by arsenic trioxide and ultraviolet light and cell differentiation induced by 12-myristate 13-phorbol acetate (TPA). In vivo, the effect of overexpressed KMT2E was detected by comparing the tumor mass growth in NSG mice when inoculating U937 pMEG and pMEG-KMT2E cells in each flank of the same mouse. The relative expression level of the KMT2E gene in pMEG-KMT2E U937 cells was 1000 higher than in the wild type U937 strain. The cell differentiation assay revealed that U937 pMEG-KMT2E cells presented an increased monocyte/macrophage differentiation, when analyzing the CD11c antigen. Induced xi overexpression of KMT2E in U937 cells did not alter cell proliferation, cell viability, cell cycle progression, spontaneous or induced apoptosis or clonogenic appearance in vitro. However, the overexpression of KMT2E resulted in an increased tumor mass formation in vivo. Taking our discrepant in vitro and in vivo results into account, we could hypothesize that the increased expression of KMT2E, possibly caused by the enhanced expression of CD11c, favored the interaction between U937 pMEGKMT2E cells and their microenvironment, thereby stimulating tumor growth in vivo.

Os girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, podem ser bons bioindicadores de condições ambientais. O objetivo desse trabalho foi determinar o potencial de toxicidade para L. catesbeianus de alguns dos principais agrotóxicos utilizados no cultivo de arroz irrigado. Foram realizados testes de toxicidade aguda para a determinação da CL50-96h do bentazon, penoxsulam, óleo vegetal, permetrina e carbofuran, separadamente, e da mistura desses agrotóxicos. Com esses resultados foram estimados os índices de segurança dos produtos. Girinos em fase pré-metamorfose foram expostos aos agrotóxicos na própria lavoura de arroz e em laboratório por 21 dias, para avaliar os possíveis efeitos crônicos destas substâncias, separadamente e da mistura, sobre o quadro hematológico, metamorfose (regulada pelo eixo tiroideano), e também o possível potencial mutagênico através do teste do micronúcleo. A CL50-96h para girinos foi de 4530 mg/L para o bentazon; 7,52 mg/L para o penoxsulam + 145,66 mg/L do óleo vegetal; 81,57 mg/L para o óleo vegetal, 0,10 mg/L para a permetrina, 29,90 mg/L para o carbofuran (ingredientes ativos) e, 38,79 vezes a dose utilizada no campo para a mistura desses produtos. Foi determinado risco ambiental apenas para o inseticida permetrina. Nos testes in situ, as águas de irrigação não apresentaram toxicidade aguda para os girinos. A taxa de metamorfose não diferiu entre os tratamentos, demonstrando que os agrotóxicos utilizados nas doses indicadas não tem ação desreguladora do eixo tiroideano. As análises do micronúcleo mostraram aumento significativo de eritrócitos micronúcleoados para os testes in situ e, no laboratório, para o herbicida bentazon e para a mistura dos agrotóxicos. As análises hematológias mostraram diminuição da hemoglobina e número de eritrócitos no teste de campo, retornado aos padrões normais na semana seguinte. No laboratório houve queda na contagem de eritrócitos para o bentazon, aumento do VCM e HCM para o bentazon e penoxsulam; aumento do CHCM para o penoxsulam e para a mistura dos agrotóxicos. Para a série branca não houve diferenças no teste in situ, mas obtivemos aumento dos números de neutrófilos dos girinos tratados com o bentazon. / American bullfrogs, Lithobates catesbeianus could be good environmental indicators. The aim of this study was evaluate the potential toxicity of some principal pesticides used in irrigated rice crops to L. catesbeianus tadpoles. The pesticides Bentazon, Penoxsulam, Vegetable oil, Permetrina, Carbofuran and the mixture of them were assessed. Pre-metamorphose tadpoles were exposed to all of these agrochemicals in the laboratory to determinate de LC50-96h and so estimate the index of security by each product. Animals in the same phase were exposed to these pesticides on the rice crops, in situ and in laboratory per 21 days to evaluate the possible chronic effects of the substances, separated and in the mixture of them. The hematological results, red and white series, the mutagenic potential (micronucleous test), and the metamorphose rate (regulated by thyroid axis) were evaluated. The LC50-96h to tadpoles was 4530 mg/L to Bentazon; 7.52 + 145.66 mg/L to Penoxsulam + vegetable oil; 81.57 mg/L to vegetable oil; 0.10 mg/L to Permetrina; 29.90 mg/L to Carbofuran (active ingredients) and 38.79 times to the dose used in the field to the mixture of the products. Only to Permetrina insecticide was observed environmental risk. The metamorphose rate showed no difference between the treatments suggesting that these pesticides, used on indicated doses did not promote deregulated action on the thyroid axis. In situ tests the irrigated waters showed low mortality to the animals. The red series showed in situ, a decrease in the haemoglobin tax and in the counting of erytrocyte\'s number however return to the normal values in the follow week. In laboratory tests showed a decrease in the counting of erytrocyte\'s number to the animals exposed to Bentazon, an increase in the MCV and MCH to the animals exposed to Bentazon and Penoxsulam, an increase in the MCHC to those exposed to Penoxsulam and to the \"mixture\". The white series showed no difference in situ test however an increase in the neutrophils number was observed to the animals exposed to Bentazon in laboratory. The micronucleous analyze showed significant increase in the erytrocyte\'s micronucleated number in situ and in laboratorial tests to animals exposed to Bentazon and to the \"mixture\".