Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-10-11T21:21:39Z No. of bitstreams: 1 AudivanGarces.pdf: 8845236 bytes, checksum: 10c5ea58d9314ceb4bcb700d00d2c63f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-11T21:21:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AudivanGarces.pdf: 8845236 bytes, checksum: 10c5ea58d9314ceb4bcb700d00d2c63f (MD5) Previous issue date: 2017-01-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão / Many endemic diseases in Brazil still are neglected, among these, is found the dengue fever that require scientific knowledge with looks more holistic for comprehension of your dynamic, in particular because the annual dengue surges, in each epidemiologic cycle, intensify. In the ambit of the health geography, is matter the analysis of the implications of the environment on dengue development. Is known, than the favorable conditions to the reproduction and dispersion of the Aedes aegypti are the elevated temperatures, concentrated and intermittent rains, although the population of this mosquito may keep itself from semi permanent breeding sites and independent of rains (water box, cisterns and others). In this scenario, is found the São Luís city, because are various the alterations that has been occurring from of a propitious space to the dengue development. This way, is questioned the relation among the environmental conditionings and the dengue fever at the urban area of the São Luís municipality, because it starts from the hypothesis than this relation exists. This etude is supported on the systemic analysis and in approaches of the social environmental geography. The study period comprehenses the years of 2012 to 2015. Were used informations of dengue cases by urban neighborhoods, building infestation index, waters supplying indicators, rubbish and open sewage collecting indicators through secondary data of 2010 cense and meteorological data on INMET. On geoprocessing were used softwares Google Earth Pro®, ArcGis 10.1® e QGis 2.0®. Was concluded that the seasonality of the dengue cases the building infestation index are associated to the rainfall variability, however the environmental sanitation also contributes to the maintaining of the dengue on city, proportioning risk and vulnerability situations in every year. / Muitas doenças endêmicas no Brasil ainda são negligenciadas, dentre estas, encontra-se a dengue, que requer conhecimento cientifico com olhares mais holístico para compreensão da sua dinâmica, em especial porque os surtos anuais de dengue, a cada ciclo epidemiológico, se intensificam. No âmbito da geografia da saúde, cabe a análise das implicações do ambiente no desenvolvimento da dengue. Sabe-se que as condições favoráveis para a reprodução e dispersão do Aedes aegypti são temperaturas elevadas, chuvas concentradas e intermitentes, embora a população deste mosquito possa manter-se a partir de criadouros semipermanentes e independentes de chuvas (caixa d’água, cisternas e outros). Neste cenário, encontra-se o município de São Luís, pois são várias as alterações que vem ocorrendo a partir do processo de urbanização da cidade e que alteram as condições ambientais, tornando-o um espaço propício para o desenvolvimento da dengue. Dessa forma, questiona-se a relação entre os condicionantes ambientais e a dengue na área urbana do município de São Luís, pois parte-se da hipótese de que esta relação existe. Este estudo é baseado na análise sistêmica e em abordagens da geografia socioambiental. O período de estudo compreende os anos de 2012 a 2015. Foram utilizadas informações de casos de dengue por bairros urbanos, índice de infestação predial, indicadores de abastecimento de águas, coleta de lixo e esgoto a céu aberto através de dados secundários do censo de 2010 e dados meteorológicos do INMET. No geoprocessamento foram utilizados os softwares Google Earth Pro®, ArcGis 10.1® e QGis 2.0®. Concluiu-se que a sazonalidade dos casos de dengue e o índice de infestação predial estão associados à variabilidade da pluviosidade, porém que as condições de saneamento ambiental também contribuem para a manutenção da dengue no município, proporcionando situações de risco e vulnerabilidade a cada ano.

Estudos populacionais de Aedes aegypti são de grande importância para o desenvolvimento de estratégias de controle, mas infelizmente o Estado de São Paulo carece desse tipo de estudo. Devido a esse contexto, o objetivo do trabalho foi avaliar a variabilidade genética e fenotípica de 4 populações de Ae. aegypti na área metropolitana de São Paulo. As análises interpopulacionais de forma em ambos os sexos mostraram variabilidade morfológica alar que, no entanto não indica estruturação populacional. Não foi observada correlação entre valores de distância fenética alar e distância geográfica para machos (r =-0,03) e fêmeas (r=0,34). Estruturação populacional foi detectada (Fst global=0,062) e baixo fluxo gênico (Nm=0,47) foi presumido nas quatro localidades. Foi observada correlação entre as distâncias genética e geográfica (r=0,76). Os dois marcadores populacionais aqui empregados aparentemente têm graus de resolução distintos para eventos microevolutivos, tendo sido DNA microssatélite ligeiramente mais sensível para acusar estruturação populacional. / Populational studies of Ae. aegypti are important to develop control strategies, but unfortunately the State of São Paulo lacks such studies. Despite this context, the objective of this work was to evaluate genetic and phenotypic variability of population samples of Ae. aegypti from four collecting sites in the metropolitan area of São Paulo city. The interpopulational analysis of shape for females and males showed morphological variability in wings, but did not indicate population structure. Pairwise fenetic distances among populations were not correlated to the geographic distances for males (r=-0.03) and females (r =0.34). Populational structure was detected (global Fst= 0.062) and low gene flow (Nm= 0.41) was presumed among four locations. Pairwise genetic distances among populations were correlated to the geographic distances (r = 0.76). The two populational markers used here apparently have different degrees of resolution for microevolutionary events, being that microsatellite DNA were slightly more sensitive in revealing populational structure.

Novas alternativas são necessárias para controlar o mosquito transmissor da dengue, como a manipulação genética. Baseada na técnica do inseto estéril (SIT) que compreende a esterilização, a criação em massa e a liberação de grandes números de insetos machos estéreis em uma área alvo, a tecnologia RIDL, baseada em SIT, compreende criação em massa e liberação de mosquitos machos que carregam gene letal para sua prole, neste caso a linhagem OX513A de Aedes aegypti é testada nesse projeto, através da avaliação em testes laboratoriais e em testes de campo com marcação liberação e recaptura, comparando esta linhagem com linhagens selvagens. Foi mensurada a competitividade, longevidade e dispersão. Os testes foram realizados no bairro de Itaberaba (Juazeiro/BA) e na Universidade de São Paulo. Além da avaliação foi realizado o monitoramento com armadilhas ovitrampa, captura de mosquitos adultos com aspirações em residências. E o desenvolvimento de um plano de comunicação para a sociedade. Os resultados apontam que a compatibilidade entre as linhagens (transgênica e selvagem) foi positiva e a competitividade não apresentou tendência entre as fêmeas de escolherem uma linhagem ou outra. Estatisticamente não há diferença entre o número de ovos e larvas (logo a fertilidade) entre a linhagem selvagem e transgênica. O monitoramento da área de estudo confirmou a presença de A. aegypti, e não foi capturado nenhum indivíduo de Aedes albopictus. Para avaliar a dispersão, os mosquitos machos transgênicos foram liberados no ambiente e esses apresentaram uma sobrevivência no campo de 2,3 dias e um raio de vôo de 80 metros do ponto de liberação. O índice de esterilidade relativa foi determinado baseado na competitividade e proporção de ovos fluorescentes encontrados. Foi possível estabelecer uma produção em massa para realizar a fase de pré-supressão com a liberação de 540.000 machos ao longo de seis semanas e obtenção de 17% de larvas transgênicas oriundas do cruzamento desses machos com fêmeas do campo. Baseado nesses dados iniciou-se a fase de supressão com a liberação alvo de 400.000 por semana, aproximadamente 05 vezes mais esperando alcançar o estágio de supressão. / New alternatives are needed to control mosquitoes that transmit Dengue. Based on insect technique Sterile (SIT), which comprises sterilizing, mass rearing and release a large number of sterile males in an area target, RIDL technology based on SIT, but using transgenesis instead of radiation. Doing the same process for mass rearing and release of male mosquitoes carrying lethal gene to their offspring, in this case the strain OX513A of Aedes aegypti is under test in this project, through the evaluation of laboratory and field trials with mark-release-recapture (MRR), comparing transgenic with wild-type. We measured competitiveness, longevity and dispersal. The tests were performed in Itaberaba neighborhood (Juazeiro / BA) and at University of São Paulo. The evaluation was carried out with monitoring through ovitraps and adult mosquitoes collection with aspiration in houses. It was also developed a communication plan to society/community in general. The results indicate that the compatibility between the lines (transgenic and wild-type) was positive, and competitiveness showed no trend among females to choose one lineage or another. Statistically there were no difference between the number of eggs and larvae (resulting fertility) between the transgenic line and wild-type. The study area monitoring confirmed the presence of Ae. aegypti, and no Aedes albopictus was captured. To evaluate dispersion, transgenic males were released into the environment and they showed a field survival of 2.3 days and a flight range of 80 meters from the release point. The relative sterility index was determined based on the competitiveness and fluorescent proportion of eggs. Mass production was established to perform the pre-suppression phase releasing 540,000 males over six weeks and obtaining 17% of transgenic larvae in response of transgenic males mating field females. Based on these data suppression process have started with a release target of 400,000 per week, this is about 05 times more to reach the suppression stage briefly.

I tested a theoretical model proposing that anemia favors transmission of blood-borne parasites to vectors by accelerating the blood-feeding rate. Using Aedes aegypti, the yellow fever mosquito, initially, I was not able to confirm this phenomenon either in an artificial or a live system; anemia did not correlate with blood-feeding rate, time or volume. I then analyzed the feeding rate over different time intervals to examine the possibility that inconsistent feeding rates masked the expected results; a comparison of the blood-feeding rate at one particular time period supports the theory. I then continued investigating the influence of anemia on egg production of mosquitoes and found that anemia has negative influence on vector's fecundity. I conclude that although anemia has opposite influences on mosquitoes in blood-feeding rate and egg production, they can get, at least under certain conditions, benefit from blood-feeding on anemic hosts. / Graduation date: 1992

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:49:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeniseMCS_DISSERT.pdf: 1722274 bytes, checksum: 95bd3c1c6be5db7e268ae35a47572f0b (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Dengue is considered as the most important arthropod-borne viral disease throughout the world due to the high number of people at risk to be infected, mainly in tropical and subtropical regions of the planet. The etiologic agent is Dengue Virus (DENV), it is a single positive-stranded RNA virus of the family Flavivirus, genus Flaviviridae. Four serotypes are known, DENV-1, DENV-2, DENV-3 and DENV-4. One of the most important characteristic of these viruses is the genetic variability, which demands phylogenetic and evolutionary studies to understand key aspects like: epidemiology, virulence, migration patterns and antigenic characteristics. The objective of this study is the genetic characterization of dengue viruses circulating in the state of Rio Grande does Norte from January 2010 to December 2012. The complete E gene (1485 pb) of DENV1, 2 e 4 from Brazilian (Rio Grande do Norte) patients was sequenced. Phylogenetic analysis was performed using MEGA 5.2 software, Tamura-Nei model and Neighbor-Joining trees were inferred for the datasets. In Brazil, there is just one DENV-1 genotype (genotype V), one DENV-2 genotype (Asian/American) and two DENV-4 genotypes (genotypes I and II). Brazilian strains of DENV-1 are subdivided in two different lineages (BR-I and BR-II), the Brazilian strains of DENV-2 are subdivided in four lineages (BRI-IV) and genotype II of DENV-4 is subdivided in three Brazilian lineages (BRI-III). The viruses isolated in RN belong to lineage BR-II (DENV-1), BR-IV (DENV-2) and BR-III (DENV-4).The Caribbean and near Latin American countries are the main source of these viruses to Brazil. Amino acids substitutions were detected in three domains of E protein, this makes clear the necessity of studies that associate epidemiological and molecular data to better understand the effects of these mutations. This is the first study about genetic characterization and evolution of Dengue viruses in Rio Grande do Norte, Brazil / A dengue ? considerada a doen?a transmitida por artr?podes mais importante do mundo devido ao elevado n?mero de pessoas que correm o risco de contra?-la, principalmente em regi?es tropicais e sub-tropicais do planeta. O agente etiol?gico da doen?a ? o v?rus dengue (DENV), um v?rus de RNA fita simples e polaridade positiva, pertencente ? fam?lia Flavivridae e ao g?nero Flavivirus. S?o conhecidos quatro sorotipos distintos: DENV-1, DENV-2, DENV-3 E DENV-4. Uma das suas principais caracter?sticas ? a elevada variabilidade gen?tica que torna clara a necessidade da realiza??o de estudos filogen?ticos e evolutivos com o objetivo de compreender aspectos essenciais como: epidemiologia, virul?ncia, padr?es de migra??o e caracter?sticas antig?nicas. O objetivo deste estudo foi realizar a caracteriza??o gen?tica dos v?rus dengue circulantes no estado do Rio Grande do Norte durante o per?odo de Janeiro de 2010 a Dezembro de 2012. Realizou-se o sequenciamento do gene do envelope (1485pb) dos sorotipos DENV-1 (N=6), DENV-2 (N=6) e DENV-4 (N=4) isolados de casos cl?nicos de diferentes munic?pios do estado do Rio Grande do Norte. A an?lise filogen?tica foi realizada utilizando o programa Mega v5.2, m?todo de Neighbor-Joining e modelo Tamura-Nei. No Brasil, foi constada a circula??o de apenas um gen?tipo de DENV-1 (gen?tipo V), um gen?tipo DENV-2 (asi?tico/americano) e dois gen?tipos de DENV-4 (gen?tipos I e II) no Brasil. As cepas brasileiras de DENV-1 est?o dividas em duas linhagens temporalmente distintas (BR-I e BR-II), as cepas brasileiras de DENV-2 est?o subdividas em quatro linhagens (BRI-IV) e o gen?tipo II de DENV-4 apresentou tr?s linhagens de cepas brasileiras (LI-III). Os v?rus isolados no Rio Grande do Norte pertencem a linhagem BR-II (DENV-1), BR-IV (DENV-2) e BR-III (DENV-4). A fonte de importa??o destes v?rus para o Brasil ? principalmente o Caribe e pa?ses pr?ximos da Am?rica Latina. Foram detectadas substitui??es de amino?cidos ao longo dos tr?s dom?nios da prote?na E, tornando clara a necessidade da realiza??o de estudos que associem dados epidemiol?gicos e moleculares para melhor compreens?o dos efeitos dessas muta??es. Este ? o primeiro estudo sobre caracteriza??o gen?tica e evolu??o dos v?rus dengue no Estado do Rio Grande do Norte, Brasil

Orientador: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Gisela Rita Monteiro Marques / Banca: Antonio Luiz Caldas Júnior / Banca: Wanderlei Pedro Tadei / Banca: Maria Anice Sallun Mured / Resumo: A necessidade de se controlar dengue com uso de inseticidas tem acarretado o desenvolvimento de resistência aos produtos mais utilizados em âmbito mundial. No Brasil, o Ministério da Saúde monitora anualmente o nível de susceptibilidade de populações de Aedes aegypti aos inseticidas. Este estudo objetivou analisar os dados disponíveis para o estado de São Paulo visando avaliar não só o impacto das estratégias de manejo adotadas nos níveis de resistência das populações, mas também o papel de resistência metabólica como um mecanismo da resistência detectada em larvas. Foram analisados os dados do período de 1996 a 2009, relativos à caracterização biológica da resistência de larvas e insetos adultos e os resultados de provas de efetividade em campo. Para avaliação do papel atividade de enzimas metabólicas na resistência observada em larvas, foi feito um experimento em laboratório com medida de atividade enzimática durante o processo de incremento da resistência em população originada do campo. Os dados foram confrontados com os resultados da atividade enzimática das populações de campo. Os dados do Programa de Monitoramento demonstraram ao longo do tempo um aumento do número de populações resistentes ao principal larvicida utilizado (temephos); que a resistência a adulticidas da classe dos piretróides é disseminada em todo o estado desde 2000 e que há comprometimento do controle em campo nas populações resistentes. Enzimas do grupo das esterases foram caracterizadas como envolvidas no mecanismo de resistência a temephos, embora tenham sido caracterizadas alterações em outras classes de enzimas em populações resistentes dificultando a interpretação pontual de atividade enzimática. A caracterização do vínculo genético apontou para um baixo fluxo gênico entre as populações justificando a manutenção da avaliação e manejo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The need to control dengue transmission with insecticides has led to the development of resistance to the most used products all over the world. In Brazil the Ministry of Health monitors annually the level of susceptibility of Aedes aegypti populations to insecticides. This study aimed to evaluate data from São Paulo State in order to evaluate the impact of management of resistance on resistance levels in vector populations and also evaluate the role of metabolic enzymes on larval resistance to temephos. Data of larval and adults resistance from 1996 to 2009 were analyzed together with field efficacy tests response. In order to evaluate the role of metabolic enzymes on resistance of larvae to temephos, an experiment for increasing resistance and measurement of enzyme activity were compared with enzyme profile from field populations. Results showed, along the period, a decrease in susceptibility to the temephos-based larvicide in all populations; resistance to pyrethroids, observed in adult stage, was disseminated in the state since 2000 and that in resistance impacts on field activities. Enzymes from the esterase class were involved on temephos resistance of larvae, although other classes of enzymes show alterations in resistant populations making it difficult the interpretation of enzyme activity on single population. The characterization of the genetic link pointed to a low gene flow among populations. This justifies the maintenance of the assessment and management of sentinel regardless of their geographical origin. The study concludes that there is a general trend for loosing susceptibility of Aedes aegypti to the most used insecticides. To date management strategies adopted were not enough to avoid this process. There is impact of field control on "resistant" populations showing that management should be trigged on populations with "Decreased Susceptibility" status. Insecticide use self imitating tool which should de preserved / Doutor

Mosquito-borne viral tropical diseases represent a great threat to the global public health. Diseases transmitted by mosquitoes are usually endemic, and millions of people throughout the world are infected by mosquitoes of the Family Culicidae. The mosquito Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera: Culicidae) is the main vector of the dengue viruses and the urban yellow fever. The great proliferation of the different mosquitoes species is not only due to the high number of the breeding sites in the urban areas, but also due to the development of the resistance of the mosquitoes to the insecticide, such as the chlorinated organic compounds, organophosphates, carbamates, as well as the biological insecticide. With respect to the environment, the Laboratory of Synthesis and Isolation of the Pheromones (LaSIF) has been studying in the last years more ecological alternatives of control and surveillance of mosquito-borne vector of tropical diseases. Therefore, studies related to the breeding sites of the mosquito Ae. aegypti were accomplished as a form of obtaining data on how to control the populations of this vector. A study of the selection of specific oviposition breeding sites of the Ae. aegypti female mosquito was accomplished with different aqueous samples collected from artificial and natural breeding sites. Among all the different aqueous samples studied at the laboratory, the Aloe vera (Liliaceae) infusion was considered greater stimulant of the oviposition behavior of the Ae. Aegypti female. The Aloe vera infusion was also bioassayed the field and compared with the traditional attractive infusion used in programs of control and surveillance of the mosquito Ae. aegypti. Sample preparation methods solid phase extraction (SPE), stir-bar sorptive extration (SBSE), and liquid-liquid extraction (LLE), were accomplished to isolate the organic compounds present in the Aloe vera infusion. The extracts obtained by the extraction techniques were analyzed in relation to the stimulating potential of oviposition behavior of the female of the mosquito Ae. Aegypti. The separation of the organic substances contained in the extracts was accomplished through gas chromatography (GC). The identification of isolated substances was accomplished through to the use of high resolution gas chromatography coupled the mass spectrometry (CG-MS), and the active components in the extracts were located by coupled high resolution gas chromatography-electrophysiology (GC-EAG). / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Mosquitos hematófagos vetores de doenças tropicais representam uma grande ameaça à saúde pública global. Doenças transmitidas por mosquitos são normalmente endêmicas, e milhões de pessoas no mundo todo são infectados por mosquitos da Família Culicidae. O mosquito Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera: Culicidae) é o principal vetor do vírus da dengue e da febre amarela urbana. A grande proliferação de diferentes espécies de mosquitos é não somente devido ao alto número de criadouros aquáticos nas grandes áreas urbanas, mas também devido ao desenvolvimento da resistência dos mosquitos aos inseticidas tais como os organoclorados, organofosfatos, carbamatos e também aos inseticidas biológicos. Assim, em respeito ao meio ambiente, o Laboratório de Síntese e Isolamento de Feromônios (LaSIF) tem estudado nos últimos anos formas alternativas ecologicamente corretas, de controle e de vigilância de mosquitos hematófagos vetores de doenças tropicais. Portanto, estudos relacionados com os criadouros potenciais do mosquito Ae. aegypti foram realizados como uma forma de obter dados de como controlar as populações deste vetor. Primeiramente, foi realizado um estudo comportamental da seleção de sítios específicos de oviposição da fêmea do mosquito Ae. aegypti com diferentes amostras aquosas provenientes de criadouros artificiais e naturais. Dentre todas as diferentes amostras aquosas estudadas em laboratório, a infusão de Aloe vera (Liliaceae) foi considerada a mais estimulante do comportamento de oviposição da fêmea do mosquito Ae. aegypti. A amostra aquosa foi também testada em campo e comparada com a tradicional infusão atraente utilizada em programas de controle e vigilância do mosquito Ae. aegypti. Métodos de preparação de amostras tais como extração em fase sólida (SPE), extração por sorção com magneto de agitação (SBSE), assim como extração líquido-líquido (LLE) foram realizados para isolar os constituintes orgânicos presentes na infusão de Aloe vera. Os extratos obtidos pelas técnicas de extração também foram analisados em relação ao potencial estimulante de oviposição da fêmea do mosquito Ae. aegypti. A separação das substâncias orgânicas contidas nos extratos foi realizada através da cromatografia gasosa (GC). A identificação das substâncias isoladas foi realizada através do uso da cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massa de alta resolução (CG-MS), e a localização das substâncias eletrofisologicamente ativas foi possível através da cromatografia gasosa acoplada à eletroantenografia (GC-EAG).

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-20T21:11:57Z No. of bitstreams: 1 Kathleen Ribeiro SouzaAvaliação de parâmetros moleculares para....pdf: 2252523 bytes, checksum: 982a659125f51498b2c5188068c9718f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-20T21:11:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kathleen Ribeiro SouzaAvaliação de parâmetros moleculares para....pdf: 2252523 bytes, checksum: 982a659125f51498b2c5188068c9718f (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Apesar do combate recorrente ao mosquito vetor da dengue, o Aedes aegypti, mais de 80% dos estratos da cidade de Salvador-BA apresentam condição de alerta ou risco de surto de dengue. Visto que as abordagens tradicionais para controle do mosquito vetor da dengue não têm produzido os efeitos esperados, o presente estudo avaliou parâmetros moleculares para vigilância entomológica do A. aegypti utilizando ferramentas de geotecnologia e de genética de populações como forma de apoiar o trabalho de campo e ações integradas das instâncias responsáveis pelo controle da dengue. O desenho do estudo apresentou um componente transversal, descrevendo dados sobre a genética de população de larvas de A. aegypti coletadas em Salvador e amostras controle coletadas no ano de 2009 em Jacobina e Vitória da Conquista, além da cepa Rockfeller, e um longitudinal, sobre amostras de quatro áreas (Plataforma, Itapagipe, Tancredo Neves e Itapuã) durante quatro ciclos do LIRAa Salvador entre 2007 a 2009. O DNA de cada larva foi isolado pelo método DNAzol® e genotipado por 5 marcadores SSR através da técnica de PCR e eletroforese capilar. A distribuição espacial dos criadouros foi realizada utilizando-se ortofotos pelo programa Arcview v. 9.3. Para a análise da diferenciação populacional e teste de hipótese foram utilizados os programas GenePop, GenAlEx e Spade, e para inferência populacional utilizamos o programa structure. Os marcadores encontraram-se, em geral, em equilíbrio de H-W e comportaram-se como independentes. Quando utilizamos a estatística Φpt e RST foi possível discriminar significantemente (p<0,05) populações geneticamente diferenciadas de A. aegypti a nível de município, áreas do município de Salvador e estratos pertencentes a estas áreas. O programa structure indicou K igual a 2 populações como ideal para representar os dados, considerando a população de Salvador uma miscigenação de populações de A. aegypti de outras regiões do estado. Os resultados do estudo longitudinal mostraram uma diferenciação entre os ciclos de 2008.3 e 2009.4. As medidas de Ne variaram consideravelmente por área e ciclo evidenciando o efeito de gargalo de garrafa em diferentes períodos em cada área, apesar de não haver correlação com o IIP. A partir dos resultados obtidos, concluímos que o controle vetorial produz alterações sobre a estrutura populacional do A. aegypti, mas que não são efetivas. O uso do georreferenciamento e de informações genéticas do vetor poderiam contribuir para a definição das áreas de abrangência das populações do A. aegypti e para a tomada de decisões a respeito do manejo do tratamento. / Despite the recurring attempts to combat the mosquito vector of dengue, Aedes aegypti, more than 80% of the strata of the city of Salvador-BA show alert condition or risk of an outbreak of dengue. Since traditional approaches to control the mosquito vector of dengue have not produced the expected results, this study evaluated molecular parameters for entomological surveillance of A. aegypti using tools of geotechnology and population genetics as a way of supporting the fieldwork and integrating the actions of the authorities responsible for integrated dengue control. The design of the study had a transverse component, describing data on the population genetics of larvae of A. aegypti collected in Salvador and control samples collected in 2009 in Jacobina and Vitoria da Conquista, in addition to the Rockefeller strain, and a longitudinal samples from four areas (Plataforma, Itapagipe, Tancredo Neves and Itapuã) for four cycles LIRAa of Salvador between 2007 to 2009. The DNA of each larva was isolated by the DNAzol ® method and genotyped with five STR (short tandem repeat) markers by PCR and capillary electrophoresis. The spatial distribution of breeding sites was performed using ortophotos by the program ArcView v.9.3. For the analysis of population differentiation and hypothesis testing the programs GenePop, GenAlEx Spade were used, and for population inference the program structure was used. The markers were usually found to be in H-W equilibrium and behaved as independent. When we use the statistics Φpt and RST it was possible to discriminate (p <0.05) genetically differentiated populations of A. aegypti at the municipal level, between areas of Salvador and strata within these areas. The program structure indicated K equal to 2 populations as ideal to represent the data, considering the population of Salvador is a mixture of populations of A. aegypti in other regions of the state. The results of the longitudinal study showed a difference between the cycles of 2008.3 and 2009.4 Ne measures varied considerably by area and cycle showing the effect of bottleneck in different periods in each area, although no correlation with the IIP. Given these results we conclude that the vector control produces changes on the population structure of A. aegypti, but are not effective. Tthe use of georeferencing and vector’s genetic information could help define the catchment areas of populations of A. aegypti and for making decisions about the management of treatment.

Submitted by Simone Souza (simonecgsouza@hotmail.com) on 2018-08-24T13:11:35Z No. of bitstreams: 1 DISS_2013_ Lucinéia Claudia de Toni Aquino da Cruz.pdf: 2031281 bytes, checksum: e93c3933b1093799158dd43a3928412f (MD5) / Approved for entry into archive by Jordan (jordanbiblio@gmail.com) on 2018-10-03T16:26:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS_2013_ Lucinéia Claudia de Toni Aquino da Cruz.pdf: 2031281 bytes, checksum: e93c3933b1093799158dd43a3928412f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-03T16:26:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS_2013_ Lucinéia Claudia de Toni Aquino da Cruz.pdf: 2031281 bytes, checksum: e93c3933b1093799158dd43a3928412f (MD5) Previous issue date: 2013-07-24 / CNPq / As medidas de controle da dengue concentram-se basicamente na eliminação do vetor Aedes aegypti, porém outros aspectos devem ser investigados de maneira permanente. Neste trabalho o objetivo foi analisar a contribuição do monitoramento de Ae. aegypti, de características sócio ambientais para a estratégias de controle da dengue, em uma área de Cuiabá, MT em 2012. A área foi escolhida por sinalizar um alto risco de transmissão da dengue. Utilizou-se armadilhas de oviposição, denominadas ovitrampas em 10 pontos escolhidos aleatoriamente. O período de coleta dos dados ocorreu em três ciclos de 2012. Foram coletados 2.728 ovos, observando os Índices de Densidade de Ovos (IDO) e Índice de Positividade de Ovitrampas (IPO). As variáveis climáticas sinalizaram uma correlação com o número de ovos em precipitação e umidade. Na análise dos fatores físicos do ambiente os criadouros predominantes foram os do tipo removíveis. A razão de prevalência foi calculada para analisar o microambiente das ovitrampas, sendo encontradas variáveis com fatores de risco para o aumento do número de ovos. As visitas da Agente de Controle de Endemias (ACE), nas residências correspondentes ao mesmo período de estudo também foram observadas. Em alguns imóveis o intervalo entre as visitas chegou a 38 dias, o que não teve influência no aumento do número de ovos. A segunda parte da pesquisa visou estimar a Taxa Mínima de Infecção transovariana em uma amostra de insetos eclodidos das ovitrampas. Um total de 758 foram armazenados em -80ºC para a extração de RNA através de RT PCR pelo método trizol. Encontrou-se 8 pools positivos em 50 testados, com uma TMI de 10,55%. Os quatro sorotipos da dengue, YFV (Febre amarela), WNV (Oeste do Nilo) e SLEV (Saint Louis) foram analisados, porém apenas o sorotipo 4 do DENV foi detectado nas amostras. Em conclusão foi possível demonstrar que a ovitrampa é um método sensível e eficaz. Analisadas com as condições climáticas e físicas contribuíram para uma maior compreensão vetorial da área. Através da análise viral constatou-se que a transmissão transovariana está ocorrendo na região, e sua importância epidemiológica ainda precisa ser mais bem avaliada, em amostras maiores e em áreas diversas. / The measures for dengue control basically concentrate on Aedes aegypti's vector elimination, however other aspects must be investigated permanently. In this paper, the goal was to analyse the contribution of Aedes aegypti's monitoring of socio-environmental characteristics for strategies of dengue control, in an area of Cuiabá-MT, in 2012. The area was chosen for signalling a high risk of dengue transmission. Ovipositions traps were used, called ovitraps, in 10 randomly chosen points. Data collection period occurred in three cycles of 2012. 2728 eggs were collected, observing the Eggs Density Index (IDO in Portuguese) and Ovitraps Positivity Index (IPO in Portuguese). Climatic variables signalized a correlation to the number of eggs in precipitation and humidity. In environment's physical analysis, the predominating breedings were the removable kind. The reason of prevalecence was calculated to analyse the ovitraps' microenvironment, being found variables with risk factors for the increase of eggs' number. The visits of the Endemies Control Agent (ACE, in Portuguese), in residences corresponding to the same period of study were also observed. In some estates the interval between visits was up to 38 days, which did not influence on the increase of eggs' number. The second part of the research aimed to estimate the transovarian Minimum Infection Rate (TMI in Portuguese) in a sample of insects hatched from ovitraps. A total of 758 were stores in -80ºC for RNA extraction through RT PCR by trizol method. Eight positive pools were found out of 50 tested, with a 10,55% TMI. The four sorotypes of dengue, YFW (Yellow Fever), WNV (West Nile) and SLEV (SaintLouis) were analysed, however only sorotype 4 from DENV was detected in the samples. In conclusion, it was possible to demonstrate that the ovitrap is a sensible, efficient method. Analysed with physical and climatic conditions, they contributed for a bigger vectorial comprehension of the area. Through viral analysis, it was testified that transovarian transmission is happening in the region, and its epidemiological importance still needs to be better assessed, in bigger samples and more diverse areas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-10Bitstream added on 2014-06-13T19:42:40Z : No. of bitstreams: 1 guirado_mm_dr_sjrp.pdf: 243606 bytes, checksum: d763ca85a0e74640c2c01e853c525fde (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Hoje se sabe que as enzimas esterásicas estão relacionadas com o desenvolvimento de resistência a inseticidas, em muitos organismos. Em Aedes aegypti, a dedução desse envolvimento tem resultado mais de testes que permitem a avaliação da atividade das esterases no extrato total dos mosquitos (mostrando valores maiores nas populações resistentes) do que de estudos mais profundos de padrões e bandas individualizadas e sua relação com a resistência. Com o objetivo básico de contribuir para o conhecimento desse aspecto, no presente trabalho 11 populações geográficas daquele vetor, sendo seis classificadas como resistentes, três como suscetíveis e duas como tendo suscetibilidade diminuída, foram analisadas quanto ao polimorfismo de esterases, por eletroforese em géis de poliacrilamida. O resultado do estudo de cerca de 30 amostras de larvas e adultos de cada população mostrou 24 bandas que foram tentativamente associadas com oito loci genéticos. Considerando também os dados de Lima-Catelani et al. (2004) e de Sousa-Polezzi & Bicudo (2005), temos o total de 25 bandas esterásicas, incluídas em 12 supostos loci, em 15 populações daquele vetor, até a presente data. A população de São José do Rio Preto, analisada em intervalos de cinco anos entre aqueles dois estudos, e sete anos entre Sousa-Polezzi & Bicudo (2005) e o presente trabalho, mostrou modificações no padrão de esterases, que ocorreram ao longo do tempo paralelamente ao surgimento e aumento da resistência aos inseticidas utilizados no controle, nessa população. Essas modificações abrangeram, basicamente, aumento ou diminuição da freqüência de algumas bandas e ausência de bandas previamente detectadas. De modo geral, a busca por padrões esterásicos específicos, relacionados ao desenvolvimento da resistência, indicou algumas bandas ou combinações de bandas para um estudo mais aprofundado. Essas bandas são: EST-1, sozinha, devido à sua alta freqüência em cinco das seis populações classificadas como resistentes, a combinação de EST-1 com EST-4, ambas ocorrendo simultaneamente, de forma predominante nas populações resistentes, e as colinesterases , detectadas nas 11 populações, mas apresentando freqüências mais altas em quatro das seis populações consideradas resistentes. Diante do conhecimento atual sobre as esterases e sua relação com a resistência a inseticidas, em A. aegypti, no presente trabalho é discutida a possibilidade de que a quantidade total de esterases (principalmente das carboxilesterases) produzidas por um grupo de genes possa ser mais importante em gerar resistência do que o grau de expressão de genes individuais que codificam para bandas específicas. Contudo, entendemos que as bandas destacadas neste trabalho devem ser alvo de um estudo mais detalhado, antes que essa hipótese ganhe maior força. / It is presently known that the esterases are involved in the process of resistance to insecticides, in several organisms. In Aedes aegypti, the conclusion about such involvement resulted rather from tests in which the total amount of esterases is computed in extracts of the mosquitoes (showing greater quantities in the resistant ones) than from deeper studies of esterase patterns or particular esterase bands and their relationship with resistance. With the basic aim to contribute to the knowledge of this relationship, in the present study the esterase polymorphism of 11 geographic populations of that vector, being six classified as resistant, three as susceptible and two as presenting decreased susceptibility, was studied by electrophoresis in polyacrylamide gels. The results of the analysis of about 30 individual samples of larvae and adults of each population showed 24 esterase bands which were tentatively associated to eight loci. Considering also the data from Lima-Catelani et al. (2004) and Sousa-Polezzi & Bicudo (2005), a total of 25 bands and 12 loci, in 15 populations, was obtained. The population from São José do Rio Preto, analyzed at intervals of five years between those two studies and seven years between Sousa-Polezzi & Bicudo (2005) and the present study, showed changes in the esterase pattern, which occurred along time concomitant to the increase of insecticide resistance in that population, including frequency increase or decrease of some bands and absence of bands previously detected. The search for specific esterase patterns related to the resistance development indicated some bands and combinations of bands as deserving a deeper study. They are EST-1 alone, due to high frequency in five of the six resistant populations, or the combination of EST-1 with EST-4, both occurring simultaneously, with high frequency, mainly in the resistant populations, and the cholinesterases, which although present in the 11 populations, showed higher frequencies in four of the six resistant ones. In front of the present knowledge on esterases related with resistance, in A. aegypti, we discuss the possibility that the total amount of esterases (mainly carboxilesterases) produced by a group of genes might be more important in the generation of resistance than the degree of expression of genes codifying particular bands. However, we understand that the bands stood out in the present study must be the target of a more detailed analysis, before this hypothesis gains a greater consideration. / FAPESP: 05/59219-5