Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:26:21Z : No. of bitstreams: 1 Publico-204.pdf: 1677799 bytes, checksum: 7f10174cddd62a0a9683b2af760805d8 (MD5) / O mosquito Ae. aegypti é o vetor clássico da febre amarela e do dengue. Em insetos hematófagos, a digestão do sangue é realizada por enzimas proteolíticas, que também podem estar envolvidas na relação parasita-vetor. O processo de alimentação com sangue requer que os artrópodes hematófagos sejam capazes de inibir as defesas hemostáticas do hospedeiro, como por exemplo, com a presença de inibidores das enzimas da cascata da coagulação. Com a finalidade de conhecer melhor sobre a biologia do vetor do dengue, o objetivo deste trabalho foi a expressão e a caracterização de um inibidor de serinoproteases do tipo Kazal presente em mosquito Ae. aegypti. Para isso, o inibidor recombinante (rAaTI) e sua forma truncada rAaTIΔ (sem a região C-terminal) foram expressos em sistema Pichia pastoris e purificados por cromatografia de afinidade. O rAaTI purificado foi capaz de inibir a atividade amidolítica da tripsina, plasmina e fracamente a trombina. O rAaTI foi também capaz de prolongar o tempo de coagulação, e há indícios que o inibidor se ligue em alguma região ocupada pela heparina ou pela anitrombina III. O análise do transcrito mostrou que o AaTI está presente na glândula salivar e em intestino de fêmeas 3 e 24 h após a alimentação com sague, e também em todos os estádios larvais, em pupa e em machos, o que sugere que este inibidor possa ter outras funções no desenvolvimento do mosquito. O rAaTI ainda foi capaz de inibir fortemente as tripsinas de larva de 4° instar, e tripsina de fêmeas 24 h após a alimentação, sugerindo que também possa estar envolvido com a modulação destas enzimas na fase larval e no final da digestão com sangue. / The Aedes aegypti mosquito is the classic vector of yellow fever and dengue fever. In haematophagous insects, blood digestion is carried out by proteolitic enzymes, which can also be envolved in parasite-vector relationship. Blood feeding requires that haematophagous insects are able to inhibit host hemostatic defenses, containing inhibitors of coagulation cascade enzymes, for example. In order to understand the vector bilogy, the aim of this work was expression and characterization of a Kazal-type serine protease inhibitor present in Aedes aegypti mosquito. Recombinant inhibitor (rAaTI) and its truncated form rAaTIΔ (without Cterminal region) were expressed in Pichia pastoris system and purified by affinity chromatography. Purified rAaTI was able to inhibit amidolytic activity of trypsin, plasmin and weakly inhibited thrombin. rAaTI was also able to prolong coagulation time, and there are evidences that inhibitor bind in some region occupied by heparin or antithrombin III. Transcription analyzes showed that AaTI is present in salivary gland and midgut of females 3 and 24 h after blood feeding, and in all larval instars, pupae and males, which suggest that inhibitor may have other functions in mosquito development. rAaTI was also able to strongly inhibit trypsin from 4th instar lavae , and female trypsin 3 and 34 h after blood feeding, suggesting that rAaTI may be involved in trypsin modulation in larval phase and in the end of blood difgestion. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-20T21:11:57Z No. of bitstreams: 1 Kathleen Ribeiro SouzaAvaliação de parâmetros moleculares para....pdf: 2252523 bytes, checksum: 982a659125f51498b2c5188068c9718f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-20T21:11:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kathleen Ribeiro SouzaAvaliação de parâmetros moleculares para....pdf: 2252523 bytes, checksum: 982a659125f51498b2c5188068c9718f (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Apesar do combate recorrente ao mosquito vetor da dengue, o Aedes aegypti, mais de 80% dos estratos da cidade de Salvador-BA apresentam condição de alerta ou risco de surto de dengue. Visto que as abordagens tradicionais para controle do mosquito vetor da dengue não têm produzido os efeitos esperados, o presente estudo avaliou parâmetros moleculares para vigilância entomológica do A. aegypti utilizando ferramentas de geotecnologia e de genética de populações como forma de apoiar o trabalho de campo e ações integradas das instâncias responsáveis pelo controle da dengue. O desenho do estudo apresentou um componente transversal, descrevendo dados sobre a genética de população de larvas de A. aegypti coletadas em Salvador e amostras controle coletadas no ano de 2009 em Jacobina e Vitória da Conquista, além da cepa Rockfeller, e um longitudinal, sobre amostras de quatro áreas (Plataforma, Itapagipe, Tancredo Neves e Itapuã) durante quatro ciclos do LIRAa Salvador entre 2007 a 2009. O DNA de cada larva foi isolado pelo método DNAzol® e genotipado por 5 marcadores SSR através da técnica de PCR e eletroforese capilar. A distribuição espacial dos criadouros foi realizada utilizando-se ortofotos pelo programa Arcview v. 9.3. Para a análise da diferenciação populacional e teste de hipótese foram utilizados os programas GenePop, GenAlEx e Spade, e para inferência populacional utilizamos o programa structure. Os marcadores encontraram-se, em geral, em equilíbrio de H-W e comportaram-se como independentes. Quando utilizamos a estatística Φpt e RST foi possível discriminar significantemente (p<0,05) populações geneticamente diferenciadas de A. aegypti a nível de município, áreas do município de Salvador e estratos pertencentes a estas áreas. O programa structure indicou K igual a 2 populações como ideal para representar os dados, considerando a população de Salvador uma miscigenação de populações de A. aegypti de outras regiões do estado. Os resultados do estudo longitudinal mostraram uma diferenciação entre os ciclos de 2008.3 e 2009.4. As medidas de Ne variaram consideravelmente por área e ciclo evidenciando o efeito de gargalo de garrafa em diferentes períodos em cada área, apesar de não haver correlação com o IIP. A partir dos resultados obtidos, concluímos que o controle vetorial produz alterações sobre a estrutura populacional do A. aegypti, mas que não são efetivas. O uso do georreferenciamento e de informações genéticas do vetor poderiam contribuir para a definição das áreas de abrangência das populações do A. aegypti e para a tomada de decisões a respeito do manejo do tratamento. / Despite the recurring attempts to combat the mosquito vector of dengue, Aedes aegypti, more than 80% of the strata of the city of Salvador-BA show alert condition or risk of an outbreak of dengue. Since traditional approaches to control the mosquito vector of dengue have not produced the expected results, this study evaluated molecular parameters for entomological surveillance of A. aegypti using tools of geotechnology and population genetics as a way of supporting the fieldwork and integrating the actions of the authorities responsible for integrated dengue control. The design of the study had a transverse component, describing data on the population genetics of larvae of A. aegypti collected in Salvador and control samples collected in 2009 in Jacobina and Vitoria da Conquista, in addition to the Rockefeller strain, and a longitudinal samples from four areas (Plataforma, Itapagipe, Tancredo Neves and Itapuã) for four cycles LIRAa of Salvador between 2007 to 2009. The DNA of each larva was isolated by the DNAzol ® method and genotyped with five STR (short tandem repeat) markers by PCR and capillary electrophoresis. The spatial distribution of breeding sites was performed using ortophotos by the program ArcView v.9.3. For the analysis of population differentiation and hypothesis testing the programs GenePop, GenAlEx Spade were used, and for population inference the program structure was used. The markers were usually found to be in H-W equilibrium and behaved as independent. When we use the statistics Φpt and RST it was possible to discriminate (p <0.05) genetically differentiated populations of A. aegypti at the municipal level, between areas of Salvador and strata within these areas. The program structure indicated K equal to 2 populations as ideal to represent the data, considering the population of Salvador is a mixture of populations of A. aegypti in other regions of the state. The results of the longitudinal study showed a difference between the cycles of 2008.3 and 2009.4 Ne measures varied considerably by area and cycle showing the effect of bottleneck in different periods in each area, although no correlation with the IIP. Given these results we conclude that the vector control produces changes on the population structure of A. aegypti, but are not effective. Tthe use of georeferencing and vector’s genetic information could help define the catchment areas of populations of A. aegypti and for making decisions about the management of treatment.

Made available in DSpace on 2016-05-19T13:08:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 174.pdf: 454680 bytes, checksum: 9c562dcb6ffa461994ffc34ce6b10bbd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação OSwaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Os insetos podem atuar como pragas agrícolas e vetores de patógenos causadores de doenças ao homem e outros animais. Investigações a respeito do sistema imunológico de Ae. aegypti e Cx. quinquefasciatus poderão contribuir para o desenvolvimento de métodos de controle das doenças veiculadas por estes insetos, principalmente a dengue, enfermidade causadora de sério problema de saúde pública no mundo. Apesar de Ae. aegypti ser a única espécie vetora confirmada na transmissão do vírus Dengue no Brasil, considera-se também importante um melhor entendimento dos mecanismos imunológicos de Cx. quinquefasciatus tido como refratário ao vírus. Neste estudo foram utilizadas linhagens de Ae. aegypti e Cx. quinquefasciatus mantidas no Insetário do Departamento de Entomologia do CPqAM/FIOCRUZ. Três grupos experimentais de fêmeas com 10 dias de idade foram formados para cada espécie. Grupo I, composto por fêmeas alimentadas com solução sacarose (10 por cento); grupo II, fêmeas alimentadas com sangue limpo e grupo III, fêmeas alimentadas com sangue infectado com o sorotipo DENV-1. De cada grupo foram obtidos hemolinfa, glândula salivar, intestino médio e corpo gorduroso para avaliação da expressão dos antimicrobianos defensina e transferrina. Essa avaliação foi realizada através de PCR em Tempo Real utilizando o kit QuantiFast SYBR Green - One-Step qRT-PCR. A avaliação da hemodinâmica foi realizada utilizando 10 microlitros de hemolinfa de cada grupo, através da contagem das células em câmara de Neubauer. Nossos resultados demonstraram que o Cx. quinquefasciatus tem um maior aumento da expressão de defensina e um maior número total de hemócitos quando infectados com DENV-1 em relação ao Ae. aegypti e a transferrina teve sua expressão alterada somente no Ae. aegypti. Em ambas as espécies estudadas, apenas a alimentação sanguínea não interfere na produção de hemócitos ou quanto na indução de defensina e transferrina. Esses dados sugerem que fêmeas de Cx. quinquefasciatus parecem apresentar uma resposta imune celular e humoral mais intensa do que Ae. aegypti quando infectados com DENV-1

Made available in DSpace on 2016-06-21T13:43:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 16.pdf: 1288159 bytes, checksum: 2cc2211b7c112d6211913cb143210291 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Made available in DSpace on 2016-07-05T22:16:57Z (GMT). No. of bitstreams: 3 16.pdf.txt: 147563 bytes, checksum: bd0b620aa6e12c62ec7b8d6d41de5c7b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 16.pdf: 1288159 bytes, checksum: 2cc2211b7c112d6211913cb143210291 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Em Cabo Verde, arquipélago situado na Costa Ocidental Africana, os primeiros casos de dengue ocorreram em 2009, com a notificação de mais de 21.000 casos, a maioria desses registrados na Ilha de Santiago. O mosquito Aedes aegypti foi identificado como vetor, e ações para seu controle, usando os inseticidas temephos (larvicida) e a deltametrina (adulticida), têm sido implementadas. Objetiva-se com esse trabalho avaliar o atual status de suscetibilidade a inseticidas e caracterizar os mecanismos de resistência nessa população. Amostras de A. aegypti da ilha de Santiago foram coletadas através de armadilhas de oviposição, para o estabelecimento de uma população a ser analisada. Foram realizados bioensaios do tipo dose diagnóstica, usando garrafas impregnadas com doses únicas dos adulticidas malathion (organofosforado), deltametrina (piretróide) e cipermetrina (piretróide), e bioensaios do tipo dose resposta, usando múltiplas concentrações dos inseticidas temephos (organofosforado), Bacillus thuringiensis sorovariedade israelensis (bactéria entomopatogênica) e diflubenzuron (inibidor de síntese de quitina). Para a investigação dos mecanismos de resistências, foram realizados testes bioquímicos com substratos específicos para quantificar a atividade das enzimas glutationa S-transferases, esterases (alfa, beta e PNPA) e oxidases de função mista, ligadas a detoxificação de xenobióticos, e a taxa de inibição da acetilcolinesterase ligada a insensibilidade do sítio alvo. Pesquisou-se também a presença de mutaçõeso do tipo kdr (knock-down resistance) associadas à resistência a piretróides, pela análise da sequência dos exons 20 e 21 no gene do canal de sódio. Nos resultados dos bioensaios constatou-se que a população de A. aegypti investigada apresenta resistência aos piretróides deltametrina e cipermetrina (mortalidade 80 por cento) e ao organofosforado temephos (RR90=4), mas é suscetível ao malathion (mortalidade maior ou igual a 98 por cento), Bacillus thuringiensis sorovariedade israelensis (RR90=0.8) e ao diflubenzuron (RR90=2,2). Em relação a atividade das enzimas ligadas ao processo de detoxificação, foram detectadas alterações nas glutationa S-transferases (25 por cento), oxidases de função mista (18 por cento), esterase-alfa (19 por cento) e esterase-beta (17 por cento). A taxa de inibição da acetilcolinesterase (6 por cento) e a atividade da esterase-PNPA (7 por cento) mostraram que estas estão inalteradas. Nenhuma das mutações do tipo kdr pesquisadas foi detectada. Estes resultados permitem concluir que a população de A. aegypti da ilha de Santiago, Cabo Verde, é suscetível aos inseticidas, excetuando os piretróides testados e o temephos, usados no seu controle; e que ela apresenta alterações em enzimas detoxificadoras que poderão estar implicadas na resistência a esses compostos.

Submitted by Simone Souza (simonecgsouza@hotmail.com) on 2018-08-24T13:11:35Z No. of bitstreams: 1 DISS_2013_ Lucinéia Claudia de Toni Aquino da Cruz.pdf: 2031281 bytes, checksum: e93c3933b1093799158dd43a3928412f (MD5) / Approved for entry into archive by Jordan (jordanbiblio@gmail.com) on 2018-10-03T16:26:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS_2013_ Lucinéia Claudia de Toni Aquino da Cruz.pdf: 2031281 bytes, checksum: e93c3933b1093799158dd43a3928412f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-03T16:26:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS_2013_ Lucinéia Claudia de Toni Aquino da Cruz.pdf: 2031281 bytes, checksum: e93c3933b1093799158dd43a3928412f (MD5) Previous issue date: 2013-07-24 / CNPq / As medidas de controle da dengue concentram-se basicamente na eliminação do vetor Aedes aegypti, porém outros aspectos devem ser investigados de maneira permanente. Neste trabalho o objetivo foi analisar a contribuição do monitoramento de Ae. aegypti, de características sócio ambientais para a estratégias de controle da dengue, em uma área de Cuiabá, MT em 2012. A área foi escolhida por sinalizar um alto risco de transmissão da dengue. Utilizou-se armadilhas de oviposição, denominadas ovitrampas em 10 pontos escolhidos aleatoriamente. O período de coleta dos dados ocorreu em três ciclos de 2012. Foram coletados 2.728 ovos, observando os Índices de Densidade de Ovos (IDO) e Índice de Positividade de Ovitrampas (IPO). As variáveis climáticas sinalizaram uma correlação com o número de ovos em precipitação e umidade. Na análise dos fatores físicos do ambiente os criadouros predominantes foram os do tipo removíveis. A razão de prevalência foi calculada para analisar o microambiente das ovitrampas, sendo encontradas variáveis com fatores de risco para o aumento do número de ovos. As visitas da Agente de Controle de Endemias (ACE), nas residências correspondentes ao mesmo período de estudo também foram observadas. Em alguns imóveis o intervalo entre as visitas chegou a 38 dias, o que não teve influência no aumento do número de ovos. A segunda parte da pesquisa visou estimar a Taxa Mínima de Infecção transovariana em uma amostra de insetos eclodidos das ovitrampas. Um total de 758 foram armazenados em -80ºC para a extração de RNA através de RT PCR pelo método trizol. Encontrou-se 8 pools positivos em 50 testados, com uma TMI de 10,55%. Os quatro sorotipos da dengue, YFV (Febre amarela), WNV (Oeste do Nilo) e SLEV (Saint Louis) foram analisados, porém apenas o sorotipo 4 do DENV foi detectado nas amostras. Em conclusão foi possível demonstrar que a ovitrampa é um método sensível e eficaz. Analisadas com as condições climáticas e físicas contribuíram para uma maior compreensão vetorial da área. Através da análise viral constatou-se que a transmissão transovariana está ocorrendo na região, e sua importância epidemiológica ainda precisa ser mais bem avaliada, em amostras maiores e em áreas diversas. / The measures for dengue control basically concentrate on Aedes aegypti's vector elimination, however other aspects must be investigated permanently. In this paper, the goal was to analyse the contribution of Aedes aegypti's monitoring of socio-environmental characteristics for strategies of dengue control, in an area of Cuiabá-MT, in 2012. The area was chosen for signalling a high risk of dengue transmission. Ovipositions traps were used, called ovitraps, in 10 randomly chosen points. Data collection period occurred in three cycles of 2012. 2728 eggs were collected, observing the Eggs Density Index (IDO in Portuguese) and Ovitraps Positivity Index (IPO in Portuguese). Climatic variables signalized a correlation to the number of eggs in precipitation and humidity. In environment's physical analysis, the predominating breedings were the removable kind. The reason of prevalecence was calculated to analyse the ovitraps' microenvironment, being found variables with risk factors for the increase of eggs' number. The visits of the Endemies Control Agent (ACE, in Portuguese), in residences corresponding to the same period of study were also observed. In some estates the interval between visits was up to 38 days, which did not influence on the increase of eggs' number. The second part of the research aimed to estimate the transovarian Minimum Infection Rate (TMI in Portuguese) in a sample of insects hatched from ovitraps. A total of 758 were stores in -80ºC for RNA extraction through RT PCR by trizol method. Eight positive pools were found out of 50 tested, with a 10,55% TMI. The four sorotypes of dengue, YFW (Yellow Fever), WNV (West Nile) and SLEV (SaintLouis) were analysed, however only sorotype 4 from DENV was detected in the samples. In conclusion, it was possible to demonstrate that the ovitrap is a sensible, efficient method. Analysed with physical and climatic conditions, they contributed for a bigger vectorial comprehension of the area. Through viral analysis, it was testified that transovarian transmission is happening in the region, and its epidemiological importance still needs to be better assessed, in bigger samples and more diverse areas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-10Bitstream added on 2014-06-13T19:42:40Z : No. of bitstreams: 1 guirado_mm_dr_sjrp.pdf: 243606 bytes, checksum: d763ca85a0e74640c2c01e853c525fde (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Hoje se sabe que as enzimas esterásicas estão relacionadas com o desenvolvimento de resistência a inseticidas, em muitos organismos. Em Aedes aegypti, a dedução desse envolvimento tem resultado mais de testes que permitem a avaliação da atividade das esterases no extrato total dos mosquitos (mostrando valores maiores nas populações resistentes) do que de estudos mais profundos de padrões e bandas individualizadas e sua relação com a resistência. Com o objetivo básico de contribuir para o conhecimento desse aspecto, no presente trabalho 11 populações geográficas daquele vetor, sendo seis classificadas como resistentes, três como suscetíveis e duas como tendo suscetibilidade diminuída, foram analisadas quanto ao polimorfismo de esterases, por eletroforese em géis de poliacrilamida. O resultado do estudo de cerca de 30 amostras de larvas e adultos de cada população mostrou 24 bandas que foram tentativamente associadas com oito loci genéticos. Considerando também os dados de Lima-Catelani et al. (2004) e de Sousa-Polezzi & Bicudo (2005), temos o total de 25 bandas esterásicas, incluídas em 12 supostos loci, em 15 populações daquele vetor, até a presente data. A população de São José do Rio Preto, analisada em intervalos de cinco anos entre aqueles dois estudos, e sete anos entre Sousa-Polezzi & Bicudo (2005) e o presente trabalho, mostrou modificações no padrão de esterases, que ocorreram ao longo do tempo paralelamente ao surgimento e aumento da resistência aos inseticidas utilizados no controle, nessa população. Essas modificações abrangeram, basicamente, aumento ou diminuição da freqüência de algumas bandas e ausência de bandas previamente detectadas. De modo geral, a busca por padrões esterásicos específicos, relacionados ao desenvolvimento da resistência, indicou algumas bandas ou combinações de bandas para um estudo mais aprofundado. Essas bandas são: EST-1, sozinha, devido à sua alta freqüência em cinco das seis populações classificadas como resistentes, a combinação de EST-1 com EST-4, ambas ocorrendo simultaneamente, de forma predominante nas populações resistentes, e as colinesterases , detectadas nas 11 populações, mas apresentando freqüências mais altas em quatro das seis populações consideradas resistentes. Diante do conhecimento atual sobre as esterases e sua relação com a resistência a inseticidas, em A. aegypti, no presente trabalho é discutida a possibilidade de que a quantidade total de esterases (principalmente das carboxilesterases) produzidas por um grupo de genes possa ser mais importante em gerar resistência do que o grau de expressão de genes individuais que codificam para bandas específicas. Contudo, entendemos que as bandas destacadas neste trabalho devem ser alvo de um estudo mais detalhado, antes que essa hipótese ganhe maior força. / It is presently known that the esterases are involved in the process of resistance to insecticides, in several organisms. In Aedes aegypti, the conclusion about such involvement resulted rather from tests in which the total amount of esterases is computed in extracts of the mosquitoes (showing greater quantities in the resistant ones) than from deeper studies of esterase patterns or particular esterase bands and their relationship with resistance. With the basic aim to contribute to the knowledge of this relationship, in the present study the esterase polymorphism of 11 geographic populations of that vector, being six classified as resistant, three as susceptible and two as presenting decreased susceptibility, was studied by electrophoresis in polyacrylamide gels. The results of the analysis of about 30 individual samples of larvae and adults of each population showed 24 esterase bands which were tentatively associated to eight loci. Considering also the data from Lima-Catelani et al. (2004) and Sousa-Polezzi & Bicudo (2005), a total of 25 bands and 12 loci, in 15 populations, was obtained. The population from São José do Rio Preto, analyzed at intervals of five years between those two studies and seven years between Sousa-Polezzi & Bicudo (2005) and the present study, showed changes in the esterase pattern, which occurred along time concomitant to the increase of insecticide resistance in that population, including frequency increase or decrease of some bands and absence of bands previously detected. The search for specific esterase patterns related to the resistance development indicated some bands and combinations of bands as deserving a deeper study. They are EST-1 alone, due to high frequency in five of the six resistant populations, or the combination of EST-1 with EST-4, both occurring simultaneously, with high frequency, mainly in the resistant populations, and the cholinesterases, which although present in the 11 populations, showed higher frequencies in four of the six resistant ones. In front of the present knowledge on esterases related with resistance, in A. aegypti, we discuss the possibility that the total amount of esterases (mainly carboxilesterases) produced by a group of genes might be more important in the generation of resistance than the degree of expression of genes codifying particular bands. However, we understand that the bands stood out in the present study must be the target of a more detailed analysis, before this hypothesis gains a greater consideration. / FAPESP: 05/59219-5

Introdução: Febre amarela urbana, dengue, chikungunya e Zika vírus são arboviroses transmitidas pela picada das fêmeas de mosquitos do gênero Aedes, principalmente Ae. aegypti e Ae. albopictus. São espécies simpátricas, que desenvolvem-se nos mesmos criadouros, porém, alguns aspectos biológicos desses vetores, como a distribuição e frequência, são influenciados pelo nível de urbanização do ambiente e pelas variáveis climáticas. Objetivo: Avaliar a distribuição e frequência do Ae. aegypti e Ae. albopictus em três diferentes áreas do Parque Municipal do Piqueri, na zona leste de São Paulo, durante a primavera e o outono. Metodologia: Durante seis semanas consecutivas das primaveras de 2014 e de 2015 e dos outonos de 2015 e de 2016, ovitrampas foram instaladas em três diferentes áreas do parque, delimitadas de acordo com a distância da região habitada e grau de cobertura vegetal: A (interna), B (intermediária) e C (periférica). No laboratório, os ovos eclodiram sob temperatura ambiente e larvas L4 foram identificadas por espécie. Dados de temperatura e pluviosidade foram obtidos junto ao Centro de Gerenciamento de Emergências da Prefeitura de São Paulo. Resultados: Foram coletados 38.561 ovos de Aedes, 23.509 larvas foram identificadas: 5.270 de Ae. aegypti e 18.239 de Ae. albopictus. O maior número de ovos foi coletado nas primaveras (25.457; 66 por cento ) e a maior taxa de eclosão de ovos foi obtida nos outonos (68,3 por cento em 2015; 80,4 por cento em 2016). Utilizando a Razão de Taxas de Incidência (Incidence Rate Ratio, IRR), os modelos da regressão binominal negativa indicaram associação entre a oviposição dos vetores e estação, sendo essa associação explicada pelas temperaturas máximas e mínimas. Os mapas da krigagem evidenciaram a distribuição espacial das espécies com Ae. aegypti concentrado na área C, a qual está fortemente associado e Ae. albopictus distribuindo-se pelas três áreas de estudo, principalmente A e B, sem associação significativa. Conclusão: A presença de Ae. aeypti e Ae. albopictus já foi apontado nos parques da cidade de São Paulo, mostrando o quanto esses culicídeos estão adaptados a essas áreas verde urbanas. Os resultados do estudo corroboram com dados da literatura e demonstram que, o aumento em uma unidade das variáveis temperatura máxima e mínima, incide também no aumento da oviposição de ambas espécies. A distribuição espacial mostrou o padrão de segregação dos vetores com Ae. aegypti, estritamente antropofílico, concentrado na área C, próxima a região habitada, enquanto Ae. albopictus, de comportamento eclético e associado a áreas com determinado grau de cobertura vegetal, concentrado entre as áreas A e B, mas também encontrado na área C. Os parques urbanos podem servir de refúgio para essas espécies vetoras, que encontram abrigo e fonte de alimento nesses locais, podendo estabelecer ciclos de transmissão de arbovírus, portanto, é de grande interesse que a vigilância epidemiológica também atue nessas áreas / Introduction: Urban yellow fever, dengue, chikungunya and Zika virus are arboviruses transmitted by the bite of females of mosquitoes of the genus Aedes, mainly Ae. aegypti and Ae. albopictus. They are sympatric species that develop in the same breeding sites, but some biological aspects of these vectors, such as distribution and frequency, are influenced by the level of urbanization of the environment and by climatic variables. Objective: To evaluate the distribution and frequency of Ae. aegypti and Ae. albopictus in three different areas of Piqueri Municipal Park, in the east zone of São Paulo, during spring and autumn. Methodology: During six consecutive weeks of spring of 2014 and 2015 and the autumn of 2015 and 2016, oviposition traps were installed in three different areas of the park, delimited according to the distance of the inhabited region and degree of vegetation coverage: A (internal), B (intermediate ) and C (peripheral). In the laboratory, eggs hatched at room temperature and L4 larvae were identified by species. Temperature and rainfall data were obtained from the Emergency Management Center of the City of São Paulo (CGE/SP). Results: A total of 38.561 Aedes eggs were collected, 23.509 larvae were identified: 5.270 Ae. aegypti and 18.239 from Ae. albopictus. The highest number of eggs was collected in the spring (25.457; 66 per cent ) and the highest egg hatching rate was obtained in the autumn (68,3 per cent in 2015; 80,4 per cent in 2016). Using the Incidence Rate Ratio (IRR), the negative binomial regression models indicated an association between the oviposition of the vectors and the season, being this association explained by the maximum and minimum temperatures. The kriging maps showed the spatial distribution of Ae. aegypti concentrated in area C, which is strongly associated and Ae. albopictus was distributed throughout the three study areas, mainly A and B, without significant association. Conclusion: The presence of Ae. aeypti and Ae. albopictus has already been pointed out in the parks of the city of São Paulo, showing how much these mosquitoes are adapted to these urban green areas. The results of the study corroborate with data from the literature and show that the increase in one unit of the maximum and minimum temperature variables also affects the increase of oviposition of both species. The spatial distribution showed the spatial segregation pattern of the vectors with Ae. aegypti, strictly anthropophilic, concentrated where human contact is greatest (area C), while Ae. albopictus, with eclectic behavior and associated with areas with a certain degree of vegetation coverage, although it has concentrated its distribution between areas A and B, was also found in area C. Urban parks can serve as a refuge for these vectors species that find shelter and source of food in these places, being able establish cycles of arbovirus transmission, therefore, it is of great interest that epidemiological surveillance also act in these areas

Orientador: Marcelo da Costa Ferreira / Coorientador: Carlos Fernando Salgueirosa de Andrade / Banca: Casimiro Dias Gadanha Júnior / Banca: Maurício Vladimir Botti / Banca: Nilza Maria Martinelli / Banca: Júlio César Galli / Resumo: Objetivou-se avaliar o diâmetro e a uniformidade de gotas produzidas por pulverizadores, com concentrações de água e de óleo com e sem adjuvante para controle de Aedes aegypti. Os experimentos foram realizados no Depto. Fitossanidade, UNESP - Jaboticabal. Foram analisados diâmetros, uniformidades e porcentagem gotas 15 μm de aerossóis MULT, MAFÚ, SBP, DETEFON, RAID, RODA. (E.B), e RODA. (A.T) e de pulverizadores de bico rotativo e de bico pneumático, com as caldas água + malathion 500 CE (1mL/L) + óleo (0; 6,25; 12,5; 25; 50 e 100%). Mais tarde avaliou-se com e sem 1 mL do adjuvante Iharaguen-S/500 mL de calda e ainda água + malathion + 5, 10, 15 e 20% de óleo na calda. As médias foram comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05) em delineamento inteiramente casualizado. Noutro experimento, fez-se a aplicação numa sala, com mosquitos retidos em gaiolas. As avaliações foram realizadas logo após aplicação e 24 horas após. Os resultados de mortalidade foram comparados pelo teste de Tukey (p < 0,05) e a eficiência das misturas pela fórmula de Abbott. Os aerossóis DETEFON, RODA. (E.B), RAID e ROD. (A.T) apresentaram DMV adequados. Todos os aerossóis possuem porcentagem segura de gotas com diâmetro 15 μm. RAID apresentou menor uniformidade de gotas. O bico pneumático resultou em maior uniformidade de gotas. A concentração de 20% foi considerada adequada ao coeficiente de uniformidade. A adição do adjuvante aumentou a uniformidade de gotas do bico rotativo. Ambos os pulverizadores apresentaram DMV adequados. O equipamento pneumático apresentou, no geral, maior eficiência na mortalidade de A. aegypti em relação ao rotativo / Abstract: The objective was to assess the diameter and uniformity of droplets produced by sprays, with concentrations of water and oil with and without adjuvant for control of Aedes aegypti. The experiments were carried out on Department. Plant Health, UNESP - Jaboticabal. We analyzed diameters, uniformity and percentagen drop 15 μm of aerosol MULT, MAFÚ, SBP, DETEFON, RAID, RODA, (E.B), e RODA. (A.T) nozzle and spray nozzle and rotary pneumatic grout with water + Malathion 500 EC (1 ml / L) + Oil (0, 6.25, 12.5, 25, 50 and 100%). Later it was evaluated with and without 1 mL of the adjuvant Iharaguen-S/500 mL of syrup and still water + malathion + 5, 10, 15 and 20% of oil in the sauce. Means were compared by Tukey test (p <0.05) in a completely randomized design. In another experiment, application made to a room with mosquitoes held in cages. Evaluations were performed immediately after and 24 hours after application. The mortality outcomes were compared by Tukey test (p <0.05) and efficiency of mixing the formula of Abbott. Aerosols DETEFON, RODA. (E.B), RAID and RODA. (A.T) had adequate VMD. All aerosols are safe percentagen of droplets 15 micrometers. RAID showed less uniformity of drops. The pneumatic nozzle resulted in greater uniformity of drops. The concentration of 20% was considered appropriate to the coefficient of uniformity. The addition of the adjuvant increased the uniformity of droplets from the nozzle rotation. Both sprays had adequate VMD. The pneumatic presented, in general, greater efficiency in killing of A. aegypti in relation to the rotary / Doutor

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-12. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:15Z : No. of bitstreams: 1 000869614.pdf: 7034100 bytes, checksum: 68b8ee31f062952cc1cfe255a55cc99e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Aedes aegypti é considerado o principal vetor de arboviroses que acomentem os seres humanos. Até o momento a única medida disponível para erradicação da dengue, é o controle do vetor, Ae. aegypti. O conhecimento aprofundado sobre a estruturação genética e dinâmica populacional dessa espécie em diferentes ambientes é crucial, uma vez que populações geneticamente diferentes podem apresentar diferenças quanto à capacidade e competência vetorial. O Brasil possui regiões com diferentes características climáticas e geográficas, assim o conhecimento detalhado sobre populações de mosquitos que colonizam diferentes habitats, é pertinente. Este trabalho avaliou a estrutura populacional de mosquitos Ae. aegypti provenientes de cinco cidades do Brasil (i.e., Belo Horizonte, Botucatu, Campo Grande, Maringá e Rondonópolis) utilizando marcadores microssatélites. Ainda, empregouse esses marcadores para investigar a dinâmica de oviposição e consequente dispersão de mosquitos Ae. aegypti em Botucatu. Em macro-análises populacionais, utilizando DAPC, observamos agrupamento entre indivíduos de mesma localidade e estruturação populacional para mosquitos de Belo Horizonte. Análises de micro-estruturação populacional identificaram seis sub-populações de mosquitos Ae. aegypti entre as seis sub-regiões de Belo Horizonte, ainda foram sugeridas estruturação populacional intermediária para mosquitos das sub-regiões de Campo Grande e falta de estruturação genética entre mosquitos das subregiões de Botucatu. Com esses resultados acreditamos que estruturação genética ocorra em correlação com o tamanho da cidade - localidades maiores parecem proporcionar estruturação genética para populações de mosquitos Ae. aegypti. Análises de PCA em ovitrampas da cidade de Botucatu apontaram organização populacional de Ae. aegypti em famílias. Análises de Pedigree e coeficiente de inbreeding, indicaram que de 30 mosquitos... / Aedes aegypti is considered the main vector of arboviruses affecting humans. Nowadays, the only feasible measure to eradicate the dengue fever depends exclusively of vector control. The deep knowledge about the structure and dynamics of Ae. aegypti population in distinct environments is critical, since genetically different populations may present differences related to vector competence and capacity. Brazil has regions with different climatic and geographic characteristics, therefore, detailed knowledge about mosquito population that colonizes different habitats is extremely important. The present study evaluated the population structure of Ae. aegypti mosquitoes in five different Brazilian cities (i.e., Belo Horizonte, Botucatu, Campo Grande, Maringá and Rondonópolis) using a microsatellite markers. Those markers were also used to evaluate the oviposition dynamic and the consequences of Ae. aegypti mosquitoes dispersion, of the city of Botucatu. Population macro-analysis, using DAPC evidenced, genetic clusters among individuals of the same locality, and population structure in mosquitoes of Belo Horizonte. Population microstructure analysis identified six sub-populations of Ae. aegypti mosquitoes among six sub-regions of Belo Horizonte. In addition, the microstructure analysis suggested intermediate population structure in the sub-regions of Campo Grande, and lack of genetic structure among mosquitoes from the sub-regions of Botucatu. Therefore, these results indicate that genetic organization occurs in correlation with city size - where large towns seem to provide genetic structure to the populations of Ae. aegypti. PCA analysis of ovitraps obtained in Botucatu indicated population organization of Ae. aegypti mosquitoes in families. Pedigree analysis and inbreeding coefficient indicated that only for out of 30 mosquitoes analyzed in the same ovitrap, keep restricted familial relationships. These results suggest that Ae. aegypti...

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:10:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VivianeFM.pdf: 385619 bytes, checksum: 686c3c14624bf0efc41a4a22cc1f7b4b (MD5) Previous issue date: 2007-06-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / ?Dengue, amongst the virus illnesses one can get by vectorial transmission, is the one that causes more impact in the morbidity and mortality of world s population. The resistance to the insecticides has caused difficulties to control of vector insect (Aedes aegypti) and has stimulated a search for vegetables with larvicidal activity. The biodiversity of Caatinga is barely known and it is potential of use even less. Some plants of this biome are commercialized in free fairs northeast of Brazil, because of its phytotherapics properties. The vegetables in this study had been selected by means of a questionnaire applied between grass salesmen and natives of the Serido region from Rio Grande do Norte state; culicids eggs had been acquired with traps and placed in container with water for the larva birth. Thirty larvae had been used in each group (a group control and five experimental groups), with four repetitions four times. The vegetables had been submitted to the processes of decoction, infusion and maceration in the standard concentration of 100g of the vegetable of study in 1l of H2O and analyzed after ?, 1, 2, 4, 8, 12, 24 and 48 hours for verification of the average lethal dose (LD50) from the groups with thirty larva. The LD50 was analyzed in different concentrations (50g/l, 100g/l, 150g/l, 200g/l e 300g/l) of Aspidosperma pyrifolium Mart. 48 extracts of rind, leaf and stem of the seven vegetal species: Aspidosperma pyrifolium Mart., Mimosa verrucosa Benth, Mimosa hostilis (Mart.) ?Benth., Myracrodruon urundeuva Allem?o, Ximenia americana L, Bumelia sartorum Mart Zizyphus joazeiro Mart, had been analyzed. The extracts proceeding from the three methods were submitted to the freezedrying, to evaluate and to quantify substances extracted in each process. The results had shown that Aspidosperma pyrifolium Mart. and Myracrodruon urundeuva Allem?o are the species that are more distinguished as larvicidal after 24 hours of experiment, in all used processes of extraction in the assays. The Zizyphus joazeiro Mart species has not shown larvicidal activity in none of the assays. In relation to the extraction method, the decoction was the most efficient method in the mortality tax of the A. aegypti larvae / ?A Dengue, dentre as doen?as virais de transmiss?o vetorial, ? a que mais causa impacto na morbidade e mortalidade da popula??o mundial. O surgimento de resist?ncia aos inseticidas tem causado dificuldades no controle do inseto vetor (Aedes aegypti) e estimulado ? busca de vegetais com a??o larvicida. A biodiversidade da caatinga ? pobremente conhecida e o seu potencial de uso menos ainda. Algumas plantas desse bioma s?o comercializadas em feiras livres do Nordeste do Brasil, com base em suas propriedades fitoter?picas. Os vegetais usados neste estudo foram selecionados por meio de?um?question?rio?aplicado entre?vendedores?de?ervas?e?populares?da?regi?o?do?Serid? do Rio Grande do Norte; ovos de culic?deos foram adquiridos com armadilhas de postura, e colocados em recipiente com ?gua para eclos?o das larvas. Trinta larvas foram usadas em cada grupo (um grupo controle e cinco grupos experimentais), com quatro repeti??es. Os vegetais foram submetidos aos processos de decoc??o, infus?o e macera??o na concentra??o padr?o de 200g do vegetal de estudo em 1l de H2O e analisados ap?s ? , 1, 2, 4, 8, 12, 24 e 48 horas para verifica??o da dose letal m?dia (LD50) dos grupos com trinta larvas. A LD50 foi analisada em diferentes concentra??es (50g/l, 100g/l, 150g/l, 200g/l e 300g/l) de Aspidosperma pyrifolium Mart. Foram analisados 48 extratos de casca, folha e caule pertencentes a sete esp?cies vegetais Aspidosperma pyrifolium Mart. (Pereiro), Mimosa verrucosa Benth (Juremabranca), Mimosa hostilis (Mart.) Benth. (Juremapreta), Myracrodruon urundeuva Allem?o (Aroeira), Ximenia americana L (Ameixa), Bumelia sartorum Mart?(Quixabeira), Zizyphus joazeiro Mart?(Joazeiro).?Os extratos?provenientes?dos tr?s m?todos foram submetidos ? liofiliza??o, para avaliar e quantificar as subst?ncias ?extra?das em cada processo. Os resultados mostraram que Aspidosperma pyrifolium Mart. e Myracrodruon urundeuva Allem?o s?o as esp?cies que mais se destacam como larvicidas ap?s 24 horas de experimento, em todos os processos de extra??o usados nos bioensaios. A esp?cie Zizyphus joazeiro Mart n?o demonstrou atividade larvicida em nenhum dos ensaios. Em rela??o ao m?todo de extra??o, a decoc??o foi o m?todo mais eficaz?na?taxa?de?mortalidade?das?larvas?de A.?aegypti