O presente estudo analisou os efeitos da radiação gama na sobrevivência de fungos em plantas medicinais embaladas, adquiridas do comércio atacadista e varejista, em diferentes períodos (0 e 30 dias) após o tratamento por irradiação. Cinco tipos de plantas medicinais [Peumus boldus, Cameilia sinensis, Maytenus ilicifolia, Pauilinia cupana and Cássia angustifolia), foram coletadas de diferentes municípios do Estado de São Paulo e submetidas ao tratamento por irradiação, utilizando-se uma fonte 60Co (tipo Gammacell 220), com doses de 5,0 kGy e 10 kGy e taxa de dose de 3,0 kGy/h. Amostras não irradiadas (grupo controle) foram usadas na contagem de fungos e diluições seriadas de 10-1 a 10-6 das amostras foram semeadas em duplicata e plaqueadas usando o método de cultura em superfície, em ágar Dicloran Glicerol 18% (DG18) e contadas após cinco dias a 25°C. O grupo controle revelou a presença dos gêneros Aspergilius e Penicillium, os quais são conhecidos como fungos toxigênicos e poucas amostras do grupo controle estavam dentro dos limites seguros, estabelecidos pela Organização Mundial de Saúde (OMS, 1998) para plantas medicinais. Em resposta a resistência do tratamento por ionização, na dose de 5 kGy, foi obsen/ado que os gêneros Aspergilius, Piioma e Syncephalastrum foram radiorresistentes, após o processo (dia 0 e 30° dia). O tratamento por radiação gama foi efetivo na descontaminação de todas as amostras de plantas medicinais, após 30 dias, com a dose de 10 kGy e mantidas em condições de vedação. Não foram detectadas aflatoxinas nas amostras do grupo controle, ainda que estas amostras estivessem intensamente contaminadas com Aspergilius flavus. / This present study evaluated the effect of gamma radiation on the fungal survival in packed medicinal plants, purchased from wholesale and retail market, in different period (0 and 30 days) after the treatment. Five kind of medicinal plants (Peurnus boldus, Camellia sinensis, Maytenus ilicifolia, Pauilinia cupana and Cassia angustifolia), were collected from different cities of São Paulo State, and submitted to irradiation treatment using a 60Co source (type Gammacell 220) with doses of 5,0 kGy and 10 kGy and at dose rate of 3.0 kGy/h. Non-irradiated samples (control group) were used for fungal counts and serial dilutions from 10-1 to 10-6 of the samples were seeded in duplicates and plated using the surface culture method in Dichloran 18% Glycerol Agar (DG 18) and were counted after five days at 25°C. The control group revealed the presence of genera Aspergillus and Penicillium, which are known as toxigenic fungi and a few samples of control group were within the safety limits of World Health Organization (WHO, 1998) to medicinal plants. In response to resistance of ionizing treatment, in the dose of 5 kGy, it was obsen/ed that the genera Aspergillus, Phoma and Syncephalastrum were radio-resistant after the process (day 0 and 30° day). The treatment by gamma radiation was effective in decontamination of all irradiated samples of medicinal plants, after 30 days, with the dose of 10 kGy and kept of veiled conditions. It was not detected aflatoxins in samples of control group, even though these samples were heavily contaminated with Aspergillus flavus.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2017-01-04T11:32:19Z No. of bitstreams: 1 2016 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1613295 bytes, checksum: 957f0b025def400e446f7c3176c76b4c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-04T11:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Felipe Machado Trombete.pdf: 1613295 bytes, checksum: 957f0b025def400e446f7c3176c76b4c (MD5) Previous issue date: 2016-03-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Mycotoxins are natural contaminants produced by filamentous fungi and they are widely present in food. In wheat grains, the presence of trichothecenes produced by Fusarium spp. and also aflatoxins, produced by Aspergillus spp. are a serious public health problem because they are toxic metabolites to man and animals that remain stable during the industrial processes to which wheat is subjected when manufacturing derived products. One way to reduce such contaminants is to use ozone (O3) in food processing. Due to its high potential as an oxidant, O3 may react with mycotoxins and reduce their toxicity due to molecular degradation. This research aimed to evaluate the effects of different conditions of ozonation on the i) reduction in mycotoxins levels (deoxynivalenol and total aflatoxins); ii): reduction in total fungal count; iii) the effects on chemical, mineral and technological profiles and; iv) the possible differences sensorial profile of the flour obtained from the ozonized grains. In a second phase of this project, a methodology for determination of D3G (deoxynivalenol-3-glucoside), a masked form of DON, using High Performance Liquid Chromatography with photodiode array detector (HPLC-PDA) was optimized and in-house validated. Results obtained from ozonation study showed that O3 reduced total fungal count in approximately 3.0 cycles log CFU/g of wheat grain and deoxynivalenol and total aflatoxins contamination up to 64.3% and 48.0%, respectively. The gaseous ozonation can be applied without negatively changing the chemical, technological and sensory characteristics of the grains and can be considered an excellent method for remediation of fungal and mycotoxin contaminations. Also, the method optimized and in-house validated for determination of D3G by HPLC-PDA showed adequate results and, it could be considered an alternative to mass spectrometry determination of D3G in wheat grains. / Micotoxinas s?o contaminantes naturais, produzidos por fungos filamentosos e, podem ocorrer em altos n?veis nos alimentos. Nos gr?os de trigo, a presen?a de tricotecenos, um grupo de micotoxinas produzidas por Fusarium spp. e, aflatoxinas, produzidas por Aspergillus spp., representam um importante problema de sa?de p?blica por serem t?xicas ao homem e animais e muito est?veis aos processos no qual o trigo ? submetido para obten??o de produtos industrializados. Uma forma de reduzir a contamina??o dos alimentos por micotoxinas ? atrav?s do uso do oz?nio (O3) no processamento do alimento. Devido ao alto potencial oxidante do O3, esse pode degradar as mol?culas das micotoxinas, tendo como consequ?ncia a elimina??o ou redu??o de seus efeitos t?xicos. Essa pesquisa teve como objetivos principais avaliar os efeitos de diferentes condi??es de ozoniza??o na i) redu??o de micotoxinas (desoxinivalenol e aflatoxinas) em gr?os de trigo; ii) redu??o nos n?veis de fungos filamentosos; iii) influ?ncia nos par?metros qu?micos, perfil de minerais e par?metros tecnol?gico dos gr?os e da farinha obtida ap?s o processamento e; iv) influ?ncia nas caracter?sticas sensoriais da farinha elaborada a partir dos gr?os ozonizados. Em uma segunda etapa do projeto, um m?todo para determina??o de uma forma modificada do desoxinivalenol (DON), o desoxinivalenol-3-glicos?deo (D3G) foi otimizada e validada intralaboratorialmente, utilizando cromatografia l?quida de alta efici?ncia com detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). Os resultados obtidos dos ensaios de ozoniza??o demonstraram que o O3, nas condi??es experimentais utilizadas, reduziu a contagem de fungos totais em cerca 3,0 logs UFC/g de gr?os e a contamina??o por desoxinivalenol e aflatoxinas totais em at? 64,3 % e 48,0 %, respectivamente. O processo de ozoniza??o n?o influenciou de modo negativo a qualidade qu?mica, tecnol?gica e sensorial dos gr?os de trigo, podendo ser utilizado como um excelente m?todo para remedia??o da contamina??o dos gr?os por fungos e micotoxinas. Resultados adequados tamb?m foram obtidos na valida??o do m?todo de determina??o de D3G por CLAE-DAD, demonstrando que o m?todo ? confi?vel para a determina??o dessa forma mascarada do DON em gr?os e trigo e, pode ser utilizado como um m?todo alternativo a espectrometria de massas para tal an?lise.

Made available in DSpace on 2017-05-12T14:47:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Talita C M _da Rosa.pdf: 1452058 bytes, checksum: 9e95c88d0d35eaed065618284fc8a393 (MD5) Previous issue date: 2014-07-01 / Aflatoxins are products of secondary metabolism of Aspergillus sp. that appear after the phase of exponential growth of fungi and contaminate a wide variety of foods, especially peanuts. Due to the carcinogenic, mutagenic and teratogenic effects, aflatoxins deserve special attention from the food industry, because they represent a risk to human health, thus it is necessary to develop control measures during the process of food production, as well as in farming, harvest, storage and transportation. Whereas peanuts and derivatives products are widely consumed, this study aimed to evaluate, in the city of Cascavel, state of Paraná, the occurrence of aflatoxins in peanuts and derivatives, the potential risk of human exposure to these mycotoxins, and the food safety and nutritional quality these products offer. First, a survey of consumption of peanuts and derivatives by the population of Cascavel PR was conducted through a structured questionnaire. 40 lots of peanut and peanut candy called paçoca were collected in five supermarkets, being half of the lots expiration date one month ahead, and the other half expiration date four or five months ahead. Physical, chemical, microbiological and determination analyzes of aflatoxins were performed. The results suggest that the shelf life of the peanut does not interfere in their nutritional quality; but it interferes in the peanut candy nutritional quality, as protein and lipid levels decrease. It was shown that all the samples of peanuts and peanut candy were contaminated with fungi, with an average of 7,24 and 3,13 UFC.g-1 x 103 to peanuts and peanut candy due to expire in one month, and 4,93 and 4,08 UFC.g-1 x 103 to new peanuts and peanut candy, respectively; especially the peanut near the expiration date was contaminated. The analysis showed high aflatoxin contamination in some lots of peanut and low contamination in peanut candy, with average of 36,15 and 0,21 μg.Kg-1 for peanuts and peanut candy due to expire in one month, and 32,74 and 0,28 μg.Kg-1 for new peanuts and peanut candy, respectively. Risk analysis indicated medium daily intake results for aflatoxins in peanuts and low daily intake for peanut candy. These two products offer a risk to population, as they are genotoxic substances that can cause harm to the consumer health. / Aflatoxinas são produtos do metabolismo secundário de Aspergillus sp., produzidas após a fase de crescimento exponencial dos fungos, podendo contaminar grande variedade de alimentos, principalmente o amendoim. Devido aos efeitos carcinogênicos, mutagênicos e teratogênicos, as aflatoxinas merecem especial atenção por parte da indústria de alimentos, pois representam um risco à saúde humana, sendo necessário o desenvolvimento de medidas de controle durante o processo de produção de alimentos, bem como no cultivo, colheita, armazenamento e transporte. Considerando que o amendoim e seus derivados são produtos amplamente consumidos pela população, este trabalho teve por objetivo avaliar a ocorrência de aflatoxinas em amendoins e produtos derivados, na cidade de Cascavel - PR, o potencial de risco da exposição humana a essas micotoxinas, a segurança alimentar e a qualidade nutricional que estes produtos oferecem. Primeiramente foi realizada uma pesquisa relativa ao consumo de amendoins e produtos derivados pela população de Cascavel - PR, através de questionário estruturado. Foram coletados 40 lotes de amendoim e paçoca em cinco supermercados do município, sendo metade dos lotes a um mês da data de validade e a outra metade de quatro a cinco meses da data de validade. Foram realizadas análises físico-químicas, microbiológicas e a determinação de aflatoxinas. Os resultados sugerem que a vida de prateleira do amendoim não interfere em sua qualidade nutricional, mas interfere na qualidade nutricional da paçoca, com diminuição de proteína e lipídio. Foi evidenciado que todas as amostras de amendoim e paçoca apresentaram contaminação por fungos, com média de 7,24 e 3,13 UFC.g-1 x 103 para amendoim e paçoca a vencer e 4,93 e 4,08 UFC.g-1 x 103 para amendoim e paçoca novo , respectivamente, principalmente o amendoim próximo a data final de validade. A análise de aflatoxinas demonstrou contaminação elevada em alguns lotes do amendoim e baixa contaminação para paçoca, com média de 36,15 e 0,21 μg.Kg-1 para amendoim e paçoca a vencer e 32,74 e 0,28 μg.Kg-1 para amendoim e paçoca novo , respectivamente. A análise de risco indicou resultados elevados de ingestão diária provável média para aflatoxinas no amendoim e baixa ingestão diária para a paçoca, porém estes dois produtos oferecem risco à população, pois são substâncias genotóxicas e podem ocasionar danos à saúde do consumidor.

Muitos equipamentos utilizados para quantificar substâncias, como toxinas em alimentos, freqüentemente apresentam deficiências para quantificar quantidades baixas. Em tais casos, geralmente indicam a ausência da substância quando esta existe, mas está abaixo de um valor pequeno \'ksi\' predeterminado, produzindo valores iguais a zero não necessariamente verdadeiros. Em outros casos, detectam a presença da substância, mas são incapazes de quantificá-la quando a quantidade da substância está entre \'ksai\' e um valor limiar \'tau\', conhecidos. Por outro lado, quantidades acima desse valor limiar são quantificadas de forma contínua, dando origem a uma variável aleatória contínua X cujo domínio pode ser escrito como a união dos intervalos, [ómicron, \"ksai\'), [\"ksai\', \'tau\' ] e (\'tau\', ?), sendo comum o excesso de valores iguais a zero. Neste trabalho, são propostos modelos que possibilitam discriminar a probabilidade de zeros verdadeiros, como o modelo de mistura com dois componentes, sendo um degenerado em zero e outro com distribuição contínua, sendo aqui consideradas as distribuições: exponencial, de Weibull e gama. Em seguida, para cada modelo, foram observadas suas características, propostos procedimentos para estimação de seus parâmetros e avaliados seus potenciais de ajuste por meio de métodos de simulação. Finalmente, a metodologia desenvolvida foi ilustrada por meio da modelagem de medidas de contaminação com aflatoxina B1, observadas em grãos de milho, de três subamostras de um lote de milho, analisados no Laboratório de Micotoxinas do Departamento de Agroindústria, Alimentos e Nutrição da ESALQ/USP. Como conclusões, na maioria dos casos, as simulações indicaram eficiência dos métodos propostos para as estimações dos parâmetros dos modelos, principalmente para a estimativa do parâmetro \'delta\' e do valor esperado, \'Epsilon\' (Y). A modelagem das medidas de aflatoxina, por sua vez, mostrou que os modelos propostos são adequados aos dados reais, sendo que o modelo de mistura com distribuição de Weibull, entretanto, ajustou-se melhor aos dados. / Much equipment used to quantify substances, such as toxins in foods, is unable to measure low amounts. In cases where the substance exists, but in an amount below a small fixed value \'ksi\' , the equipment usually indicates that the substance is not present, producing values equal to zero. In cases where the quantity is between \'\'ksi\' and a known threshold value \'tau\', it detects the presence of the substance but is unable to measure the amount. When the substance exists in amounts above the threshold value ?, it is measure continuously, giving rise to a continuous random variable X whose domain can be written as the union of intervals, [ómicron, \"ksai\'), [\"ksai\', \'tau\' ] and (\'tau\', ?), This random variable commonly has an excess of zero values. In this work we propose models that can detect the probability of true zero, such as the mixture model with two components, one being degenerate at zero and the other with continuous distribution, where we considered the distributions: exponential, Weibull and gamma. Then, for each model, its characteristics were observed, procedures for estimating its parameters were proposed and its potential for adjustment by simulation methods was evaluated. Finally, the methodology was illustrated by modeling measures of contamination with aflatoxin B1, detected in grains of corn from three sub-samples of a batch of corn analyzed at the laboratory of of Mycotoxins, Department of Agribusiness, Food and Nutrition ESALQ/USP. In conclusion, in the majority of cases the simulations indicated that the proposed methods are efficient in estimating the parameters of the models, in particular for estimating the parameter ? and the expected value, E(Y). The modeling of measures of aflatoxin, in turn, showed that the proposed models are appropriate for the actual data, however the mixture model with a Weibull distribution fits the data best.

Submitted by Glauber Assunção Moreira (glauber.a.moreira@gmail.com) on 2018-08-17T18:17:33Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO GENIVALDO SANTOS.pdf: 1925505 bytes, checksum: 14d884f698222cff066f3b6db24da095 (MD5) / Approved for entry into archive by Marly Santos (marly@ufba.br) on 2018-08-21T17:14:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO GENIVALDO SANTOS.pdf: 1925505 bytes, checksum: 14d884f698222cff066f3b6db24da095 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-21T17:14:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO GENIVALDO SANTOS.pdf: 1925505 bytes, checksum: 14d884f698222cff066f3b6db24da095 (MD5) / As micotoxinas são metabólitos secundários produzidos por fungos e representam um risco potencial para a saúde humana, quando presentes nos alimentos. Dentre as micotoxinas, as aflatoxinas são as mais importantes e mais estudadas. O milho e seus derivados, especialmente a farinha de milho estão entre os principais alimentos encontrados na dieta básica dos brasileiros, particularmente na Bahia. Existem poucos estudos no Estado voltados para a pesquisa de micotoxinas em alimentos derivados do milho. A presença de fungos toxígenos em farinha de milho não se configura necessariamente na presença de micotoxinas, mas representa um alerta para uma maior atenção às práticas agrícolas, tanto na escolha do grão para o plantio, na colheita do milho, no transporte, no processamento para formar a farinha, no armazenamento, como na comercialização deste produto. Os fungos mais freqüentemente isolados em derivados do milho são o Aspergillus spp, Penicillium spp e Fusarium spp. A aflatoxina B1 (AFB1) é um potente carcinógeno classificado como pertencente ao grupo 1 das substâncias potencialmente cancerígenas. O consumo de farinhas de milho flocada pré-cozida com características micotoxicológicas indesejáveis pode ser um perigo para a saúde humana. Tendo em vista a importância dos fungos toxígenos e das micotoxinas, este trabalho teve por objetivo verificar a ocorrência de fungos toxígenos e de aflatoxinas em 112 amostras de farinha de milho flocada pré-cozida comercializada em diferentes municípios do Estado da Bahia no período de junho de 2007 a junho de 2008. As amostras estudadas foram analisadas para isolamento e contagem de fungos em BDA com cloranfenicol. 32% das amostras foram positivas para fungos toxígenos, sendo 50% representados por fungos de armazenamento, 31% de campo e 17% de ambos. Os fungos do gênero Fusarium, Aspergillus e Penicillium foram encontrados com maior freqüência nas amostras que apresentaram atividade de água na faixa entre 0,520,60. 58% das amostras com contaminação fúngica estavam acondicionadas em embalagem de papel. Em relação à presença de aflatoxinas, 14% (16/112) das amostras foram positivas, onde 5% (6/112) apresentaram concentrações acima do limite máximo preconizado na Legislação (20µg/Kg). Os fungos do gênero Aspergillus encontravam-se presentes em 44,4% (16/36) das amostras analisadas. Deste gênero foram isoladas e identificadas três espécies: A. fumigatus 27,8% (10/36), A. flavus 22,2% (8/36) e A. terreus 2,8% (1/36). A análise do potencial toxígeno de 28 isolados de Aspergillus spp. revelou a presença de aflatoxinas em 50% (14/28) das cepas, numa concentração de 24,29 µg/Kg a 6.222 µg/Kg, demonstrando que tais cepas em condições favoráveis de umidade e temperatura no substrato eventualmente produzem aflatoxinas. / ABSTRACT The micotoxins are secondary metabolics produced by fungus and they represent a potential risk for the human health, when found in the foods. Among the micotoxins, the aflatoxins are the most important and more studied. The corn and its derived, especially the maize flour is among the main foods found in the basic diet of the Brazilians, particularly in Bahia. There are few studies in the State on the micotoxins research in foods derived from the corn. The presence of toxigens molds in maize flour is not necessarily configured in the presence of micotoxins, but it represents an alert for a larger attention to the agricultural practices, so much in the choice of the grain for the planting, in the harvest, in the transportation, in the processing, in the storage, as in the commercialization of this product. The molds more frequently isolated in derived of the corn they are the Aspergillus spp., Penicillium spp. and Fusarium spp. The aflatoxina B1 (AFB1) it is a potent carcinogen classified as belonging to the group 1 of the substances potentially cancerous. The consumption of flocked maize flour pre-cooked with characteristics undesirable micotoxicologics can be a danger for the human health. Foccus on the importance of the toxigens molds and the micotoxins, this work had for objective to verify the occurrence of toxigen molds and aflatoxins in 112 samples of maize flour pre-cooked flocked trade in different cities in the State of Bahia from June 2007 to June 2008. The studied samples were analyzed for isolation and counting of molds in BDA with chloranfenicol. 32% of the samples were positive for toxigen molds, being 50% acted by storage molds, 31% of field and 17% of both. The molds of the gender Fusarium, Aspergillus and Penicillium were found more frequently in the samples that presented water activity between 0,52-0,60. 58% of the samples with mold contamination were conditioned in packaging. In relation to the aflatoxins presence, 14% (16/112) of the samples they were positive, where 5% (6/112) they presented concentrations above the maximum limit recommened by the Legislation (20 g/Kg). The molds of the gender Aspergillus were presented in 44,4% (16/36) of the analyzed samples. From this gender were isolated and identified three species: A. fumigatus 27,8% (10/36), A. flavus 22,2% (8/36) and A. terreus 2,8% (1/36). The analysis of the potential toxigen of 28 isolated of Aspergillus spp. revealed the aflatoxins presence in 50% (14/28) of the stumps, in a concentration of 24,29 µg/Kg to 6.222 µg/Kg, demonstrating that such stumps in favorable conditions of humidity and temperature in the substratum eventually produce aflatoxins.

Made available in DSpace on 2017-07-10T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Talita C M _da Rosa.pdf: 1452058 bytes, checksum: 9e95c88d0d35eaed065618284fc8a393 (MD5) Previous issue date: 2014-07-01 / Aflatoxins are products of secondary metabolism of Aspergillus sp. that appear after the phase of exponential growth of fungi and contaminate a wide variety of foods, especially peanuts. Due to the carcinogenic, mutagenic and teratogenic effects, aflatoxins deserve special attention from the food industry, because they represent a risk to human health, thus it is necessary to develop control measures during the process of food production, as well as in farming, harvest, storage and transportation. Whereas peanuts and derivatives products are widely consumed, this study aimed to evaluate, in the city of Cascavel, state of Paraná, the occurrence of aflatoxins in peanuts and derivatives, the potential risk of human exposure to these mycotoxins, and the food safety and nutritional quality these products offer. First, a survey of consumption of peanuts and derivatives by the population of Cascavel PR was conducted through a structured questionnaire. 40 lots of peanut and peanut candy called paçoca were collected in five supermarkets, being half of the lots expiration date one month ahead, and the other half expiration date four or five months ahead. Physical, chemical, microbiological and determination analyzes of aflatoxins were performed. The results suggest that the shelf life of the peanut does not interfere in their nutritional quality; but it interferes in the peanut candy nutritional quality, as protein and lipid levels decrease. It was shown that all the samples of peanuts and peanut candy were contaminated with fungi, with an average of 7,24 and 3,13 UFC.g-1 x 103 to peanuts and peanut candy due to expire in one month, and 4,93 and 4,08 UFC.g-1 x 103 to new peanuts and peanut candy, respectively; especially the peanut near the expiration date was contaminated. The analysis showed high aflatoxin contamination in some lots of peanut and low contamination in peanut candy, with average of 36,15 and 0,21 μg.Kg-1 for peanuts and peanut candy due to expire in one month, and 32,74 and 0,28 μg.Kg-1 for new peanuts and peanut candy, respectively. Risk analysis indicated medium daily intake results for aflatoxins in peanuts and low daily intake for peanut candy. These two products offer a risk to population, as they are genotoxic substances that can cause harm to the consumer health. / Aflatoxinas são produtos do metabolismo secundário de Aspergillus sp., produzidas após a fase de crescimento exponencial dos fungos, podendo contaminar grande variedade de alimentos, principalmente o amendoim. Devido aos efeitos carcinogênicos, mutagênicos e teratogênicos, as aflatoxinas merecem especial atenção por parte da indústria de alimentos, pois representam um risco à saúde humana, sendo necessário o desenvolvimento de medidas de controle durante o processo de produção de alimentos, bem como no cultivo, colheita, armazenamento e transporte. Considerando que o amendoim e seus derivados são produtos amplamente consumidos pela população, este trabalho teve por objetivo avaliar a ocorrência de aflatoxinas em amendoins e produtos derivados, na cidade de Cascavel - PR, o potencial de risco da exposição humana a essas micotoxinas, a segurança alimentar e a qualidade nutricional que estes produtos oferecem. Primeiramente foi realizada uma pesquisa relativa ao consumo de amendoins e produtos derivados pela população de Cascavel - PR, através de questionário estruturado. Foram coletados 40 lotes de amendoim e paçoca em cinco supermercados do município, sendo metade dos lotes a um mês da data de validade e a outra metade de quatro a cinco meses da data de validade. Foram realizadas análises físico-químicas, microbiológicas e a determinação de aflatoxinas. Os resultados sugerem que a vida de prateleira do amendoim não interfere em sua qualidade nutricional, mas interfere na qualidade nutricional da paçoca, com diminuição de proteína e lipídio. Foi evidenciado que todas as amostras de amendoim e paçoca apresentaram contaminação por fungos, com média de 7,24 e 3,13 UFC.g-1 x 103 para amendoim e paçoca a vencer e 4,93 e 4,08 UFC.g-1 x 103 para amendoim e paçoca novo , respectivamente, principalmente o amendoim próximo a data final de validade. A análise de aflatoxinas demonstrou contaminação elevada em alguns lotes do amendoim e baixa contaminação para paçoca, com média de 36,15 e 0,21 μg.Kg-1 para amendoim e paçoca a vencer e 32,74 e 0,28 μg.Kg-1 para amendoim e paçoca novo , respectivamente. A análise de risco indicou resultados elevados de ingestão diária provável média para aflatoxinas no amendoim e baixa ingestão diária para a paçoca, porém estes dois produtos oferecem risco à população, pois são substâncias genotóxicas e podem ocasionar danos à saúde do consumidor.

Muitos equipamentos utilizados para quantificar substâncias, como toxinas em alimentos, freqüentemente apresentam deficiências para quantificar quantidades baixas. Em tais casos, geralmente indicam a ausência da substância quando esta existe, mas está abaixo de um valor pequeno \'ksi\' predeterminado, produzindo valores iguais a zero não necessariamente verdadeiros. Em outros casos, detectam a presença da substância, mas são incapazes de quantificá-la quando a quantidade da substância está entre \'ksai\' e um valor limiar \'tau\', conhecidos. Por outro lado, quantidades acima desse valor limiar são quantificadas de forma contínua, dando origem a uma variável aleatória contínua X cujo domínio pode ser escrito como a união dos intervalos, [ómicron, \"ksai\'), [\"ksai\', \'tau\' ] e (\'tau\', ?), sendo comum o excesso de valores iguais a zero. Neste trabalho, são propostos modelos que possibilitam discriminar a probabilidade de zeros verdadeiros, como o modelo de mistura com dois componentes, sendo um degenerado em zero e outro com distribuição contínua, sendo aqui consideradas as distribuições: exponencial, de Weibull e gama. Em seguida, para cada modelo, foram observadas suas características, propostos procedimentos para estimação de seus parâmetros e avaliados seus potenciais de ajuste por meio de métodos de simulação. Finalmente, a metodologia desenvolvida foi ilustrada por meio da modelagem de medidas de contaminação com aflatoxina B1, observadas em grãos de milho, de três subamostras de um lote de milho, analisados no Laboratório de Micotoxinas do Departamento de Agroindústria, Alimentos e Nutrição da ESALQ/USP. Como conclusões, na maioria dos casos, as simulações indicaram eficiência dos métodos propostos para as estimações dos parâmetros dos modelos, principalmente para a estimativa do parâmetro \'delta\' e do valor esperado, \'Epsilon\' (Y). A modelagem das medidas de aflatoxina, por sua vez, mostrou que os modelos propostos são adequados aos dados reais, sendo que o modelo de mistura com distribuição de Weibull, entretanto, ajustou-se melhor aos dados. / Much equipment used to quantify substances, such as toxins in foods, is unable to measure low amounts. In cases where the substance exists, but in an amount below a small fixed value \'ksi\' , the equipment usually indicates that the substance is not present, producing values equal to zero. In cases where the quantity is between \'\'ksi\' and a known threshold value \'tau\', it detects the presence of the substance but is unable to measure the amount. When the substance exists in amounts above the threshold value ?, it is measure continuously, giving rise to a continuous random variable X whose domain can be written as the union of intervals, [ómicron, \"ksai\'), [\"ksai\', \'tau\' ] and (\'tau\', ?), This random variable commonly has an excess of zero values. In this work we propose models that can detect the probability of true zero, such as the mixture model with two components, one being degenerate at zero and the other with continuous distribution, where we considered the distributions: exponential, Weibull and gamma. Then, for each model, its characteristics were observed, procedures for estimating its parameters were proposed and its potential for adjustment by simulation methods was evaluated. Finally, the methodology was illustrated by modeling measures of contamination with aflatoxin B1, detected in grains of corn from three sub-samples of a batch of corn analyzed at the laboratory of of Mycotoxins, Department of Agribusiness, Food and Nutrition ESALQ/USP. In conclusion, in the majority of cases the simulations indicated that the proposed methods are efficient in estimating the parameters of the models, in particular for estimating the parameter ? and the expected value, E(Y). The modeling of measures of aflatoxin, in turn, showed that the proposed models are appropriate for the actual data, however the mixture model with a Weibull distribution fits the data best.

O trabalho avaliou micobiota, contaminação por aflatoxinas (AFB), ácido ciclopiazônico (ACP) e fitoalexina (trans-resveratrol) nas variedades de amendoim Runner IAC 886 e IAC-Caiapó, no campo e armazenamento. Nas amostras de campo, na IAC 886 predominou Fusarium spp. nos grãos e cascas, contaminação por AFB em 30% dos grãos, ACP em 70% e trans-resveratrol em 5%. Na IAC-Caiapó prevaleceu Fusarium spp., em todas as amostras, AFB em 25% dos grãos, ACP em 55% e trans-resveratrol em 15%. Nas folhas, trans-reveratrol estava presente em 70%, nas variedades. No armazenamento, observou-se maior freqüência de A. flavus, A. parasiticus. Na IAC 886 AFB foi detectada em 20% nos grãos e 23% nas cascas e ACP em 80% dos grãos. Na IAC-Caiapó, AFB foi encontrada em 13% tanto nas amostras de grãos, como nas cascas e ACP em 70% dos grãos. Os resultados do potencial toxigênico de A. flavus revelaram 81% produtores de aflatoxinas, 95% de ACP e 75% de ambas. Todos A. flavus produtores de esclerócios pertenciam ao grupo L. / This study had assessed mycobiota, contamination by aflatoxins (AFB), cyclopiazonic acid (CPA) and phytoalexin (trans-resveratrol) in the peanuts varieties Runner IAC 886 and IAC-Caiapó, in the field and storage. In the Field samples, in IAC 886 it was predominated Fusarium spp. in grains and shells, contamination by AFB in 30% of the grains, CPA in 70% and trans-resveratrol in 5%. In IAC-Caiapó, it was prevailed Fusarium spp. in all samples, AFB in 25% of the grains, CPA in 55% and trans-resveratrol in 15%. In the leaves, trans-resveratrol was present in 70% in the varieties. In the storage, it was observed a higher frequency of A. flavus, A. parasiticus. In IAC 886, it was detected AFB in 20% of the grains and 23% in the shells, and CPA in 80% of the grains. In IAC-Caiapó, it was found AFB in 13% both in grains as in the shells samples, and CPA in 70% of the grains. The toxigenic potential results of A. flavus revealed 81% aflatoxins producers, 95% CPA producers and 75% both producers. All strains of A. flavus sclerotia producers belonged to the L group.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Aflatoxins are toxic metabolites produced by Aspergillus flavus, A. parasiticus and A. nominus genus fungi and can occur as natural contaminants of foods. Aflatoxins cause a variery of effects in poultry, including poor performance, liver pathology, immunosupression and changes in relative organ weights. Determination of biochemical toxic effects of aflatoxins is important for diagnosis of aflatoxicosis in broiler chickens. The aim of this research was to evaluate the serum mineral and the hepatic function of broiler chicken experimentally intoxicated using 3 ppm of aflatoxin and submitted to different concentrations of clay sodic montmorilonite on the diet. In this study were used 720 Cobb s broiler chickens that were divided in 6 treatments from 1º to 42º day of life: (T1) control: normal diet; (T2) diet with 3 ppm of aflatoxin; (T3) diet with 0,25% sodic montmorilonite; (T4) diet with 3 ppm of aflatoxin + 0,25% sodic montmorilonite; (T5) diet with 0,50% sodic montmorilonite; (T6) diet with 3 ppm of aflatoxin + 0,50% sodic montmorilonite. The treatment T2 showed significantly (P<0.05) decreased in serum concentrations of total protein, albumin, globulins and aspartate aminotransferase (AST); there was significant decreased on uric acid in treatment T4; in treatment T6 there was significant decrease in serum phosphorus levels; the serum calcium and magnesium were not affected by treatments. The aflatoxin in the diet (3ppm) causes changes in the hepatic function of broiler chickens. The use of sodic montmorilonite is effective in preventing the toxic effects of aflatoxins. However, addition of 0,50% sodic montmorilonite in the diet causes decrease in phosphorus levels. / Aflatoxinas são metabólitos tóxicos produzidos pelos fungos Aspergillus flavus, A. parasiticus e A. nominus, podendo ocorrer como contaminantes naturais dos alimentos. Esta toxina causa uma variedade de efeitos nas aves, incluindo diminuição da performance, doenças hepáticas, imunossupressão e mudanças no peso relativo dos órgãos. A determinação de seus efeitos bioquímicos tóxicos é importante para o diagnóstico de aflatoxicose em frangos de corte. Este estudo teve como objetivo avaliar os minerais séricos e a função hepática em frangos de corte submetidos à intoxicação experimental com 3 ppm de aflatoxina, e submetidos a diferentes concentrações da argila montmorilonita sódica na dieta. Foram utilizados 720 frangos de corte, da linhagem Cobb, divididos em 6 tratamentos do 1º ao 42º dia de vida: (T1) Controle: dieta normal; (T2) dieta com 3 ppm de aflatoxina; (T3) dieta com 0,25% de montmorilonita sódica; (T4) dieta com 3 ppm de aflatoxina + 0,25% de montmorilonita sódica; (T5) dieta com 0,50% de montmorilonita sódica; (T6) dieta com 3 ppm de aflatoxina + 0,50% de montmorilonita sódica. A dieta contendo somente aflatoxina (T2) resultou em uma significante (P<0.05) diminuição na concentração sérica de proteínas totais, albumina, globulinas e aspartato amino transferase (AST); a concentração sérica de ácido úrico diminuiu significativamente no tratamento T4; foi encontrada uma diminuição significante nos níveis séricos de fósforo no tratamento T6; os níveis séricos de cálcio e magnésio não foram afetados pelos tratamentos. A aflatoxina na concentração de 3 ppm na dieta causa alteração na função hepática de frangos de corte. O uso da montmorilonita sódica é eficaz na prevenção dos efeitos tóxicos da aflatoxina. No entanto, a adição de 0,5% de montmorilonita sódica na dieta com aflatoxina diminui os níveis séricos de fósforo.

Aquest estudi s’ha realitzat en el marc del projecte titulat: “Ecotoxicidad, micotoxinas y degradación de nonilfenoles en lodos de depuradora y suelos tratados” finançat pel Ministeri d’educació i ciència amb número de referència: CTM2006-14163-C02-02, en col•laboració amb el Centre de Recerca i Aplicacions Forestals. La present Tesi Doctoral aborda els aspectes de determinació analítica de la presència de micotoxines en compost i l’evolució del nonilfenol en sòls. En concret, s’ha estudiat la presència de les aflatoxines G2, G1, B2, B1 i l’ocratoxina A, en tres mostres de compost produït en dues EDAR de Catalunya. Per això s’ha desenvolupat un mètode per a l’anàlisi simultània de les aflatoxines G2, G1, B2, B1 i l’ocratoxina A en compost. En primer lloc s’ha adaptat per aquestes mostres un procediment per HPLC-MS desenvolupat anteriorment en el nostre equip per a la determinació de les aflatoxines G2, G1, B2 i B1 aplicat en matrius de tipus alimentari, que s’ha estès a la determinació conjunta de les quatre aflatoxines i l’ocratoxina A. Aquest procediment ha mostrat problemes pel que fa a la recuperació i precisió dels resultats. Vistes les dificultats, s’ha desenvolupat un nou procediment per UHPLC-Fluorescència que permet una preparació de mostra més ràpida i simple, així com una millor sensibilitat. Aquest nou mètode ha estat validat i permet millorar el temps d’anàlisi i aconseguint eliminar l’etapa de purificació de mostra amb cartutxos de reblert polimèric, utilitzats en el mètode emprat com a punt de partida. Els dos procediment han permès demostrar que, en les mostres de compost estudiades no hi ha quantitats significatives de cap de les cinc micotoxines estudiades. Pel que fa al nonilfenol, s’ha estudiat la seva evolució temporal, durant 32 setmanes, en mostres de sòl, mescles de sòl amb torba i mescles de sòl amb compost, a les que s’ha addicionat nonilfenol a dos nivells de concentració. De la mateixa manera, s’ha estudiat la concentració de nonilfenol en els lixiviats de les mostres de sòl i de les mescles de sòl amb torba. Per això, s’ha posat al punt un procediment analític per HRGC-MS tant per a les mostres de sòls com per a les mostres aquoses dels lixiviats. S’ha posat de manifest la ràpida eliminació del nonilfenol en les tres mostres estudiades i que el nivell de pèrdua per lixiviació és molt baix. En els mateixos lixiviats s’ha determinat la matèria orgànica total i la seva toxicitat a través de l’assaig de Microtox. Les dues determinacions mostren que aquests lixiviats no presenten problemes ja que, complirien les exigències per poder ser abocats a les xarxes públiques de clavegueram. Finalment, es pot afirmar que l’ús del compost en agricultura és una pràctica segura, tant pel que fa a l’absència de les micotoxines, com per la ràpida degradació del nonilfenol en el sòl. / Este estudio se llevó a cabo en el marco del proyecto titulado, "Ecotoxicidad, micotoxinas y degradación de nonilfenoles en lodos de depuradora y suelos tratados" financiado por el Ministerio de educación y ciencia con número de referencia: CTM2006-14163-C02-01, en colaboración con el “Centre de Recerca i Aplicacions Forestals”. La presente Tesis Doctoral aborda los aspectos de determinación analítica de la presencia de micotoxinas en compost y la evolución del nonilfenol en suelos. En concreto, se ha estudiado la presencia de las aflatoxinas B1, B2, G1, G2 y la ocratoxina A en tres muestras de compost producido en dos EDAR de Catalunya. Por lo tanto, se ha desarrollado un método de análisis simultáneos de aflatoxinas B1, B2, G1, G2 y la ocratoxina A en compost. En primer lugar se ha adaptado a estas muestras un procedimiento por HPLC-MS desarrollado previamente en nuestro equipo para la determinación de aflatoxinas B1, B2, G1 y G2 aplicado a matrices alimentarias y se ha extendido a la determinación conjunta de las cuatro aflatoxinas y la ocratoxina A. Este procedimiento ha revelado problemas relativos a la recuperación y la precisión de los resultados. Vistas las dificultades, se ha desarrollado un nuevo procedimiento por UHPLC-fluorescencia que permite una rápida y simple preparación de muestra, así como una mejor sensibilidad. Este nuevo método ha sido validado y puede mejorar el tiempo de análisis y eliminar la etapa con cartuchos de purificación de muestra con cartuchos poliméricos, utilizados en el método de partida. Ambos procedimientos han permitido mostrar que, en las muestras del compost estudiado no hay cantidades significativas de ninguna de las cinco micotoxinas estudiadas. En cuanto a nonilfenol, se ha estudiado su evolución temporal, durante 32 semanas, en muestras de suelo, mezclas de suelo con turba y mezclas de suelo con compost, donde se ha adicionado nonilfenol en dos niveles de concentración. Asimismo, se ha estudiado la concentración del nonilfenol en las muestras de lixiviados de los suelos y mezclas de suelo con turba. Por lo tanto, se ha puesto a punto un procedimiento analítico por HRGC-MS tanto para muestras de suelo como para muestras de lixiviados acuosa. Se ha demostrado la rápida eliminación del nonilfenol en las tres muestras estudiadas y que el nivel de pérdidas por lixiviación es muy baja. Finalmente, en los mismos lixiviados se ha determinado la materia orgánica total y su toxicidad mediante el ensayo de Microtox. Ambas determinaciones muestran que estos lixiviados no presentan problemas ya que cumplen las exigencias para poder ser enviados a las redes de alcantarillado público. Se puede afirmar que el uso de compost en la agricultura es una práctica segura, tanto en cuanto a la ausencia de micotoxinas, como la degradación rápida de nonilfenol en el suelo. / This work was carried out in the framework of the project: “Ecotoxicidad, micotoxinas y degradación de nonilfenoles en lodos de depuradora y suelos tratados". This project was performed in collaboration with "Centre de Recerca i Aplicacions Forestals" and it was supported by “Ministerio de Educación y Ciencia” (contract number CTM2006-14163-C02-01). The present work is referred to the analytical determination of mycotoxins and the degradation of the nonylphenol in soils. Aflatoxins B1, B2, G1, G2 and ochratoxin A in three different samples of compost, produced in two sewage wastewater in Catalonia, has been studied. Also, a method for simultaneous determination of aflatoxins B1, B2, G1, G2 and ochratoxin A in compost has been developed. An analytical method using HPLC-MS has been developed to determinate aflatoxins B1, B2, G1, G2 and ochratoxin A in compost matrices. This method is based on a previous work performed in the Chromatographic Methods Lab at IQS to determinate aflatoxins B1, B2, G1, and G2 in food matrices. It is important to mention that the HPLC-MS method showed low recovery factors and precision problems in the compost samples analyzed. In a second set of experiments a new method using UHPLC-fluorescence has been designed to analyze aflatoxins B1, B2, G1, G2 and ochratoxin A in compost samples. UHPLC-fluorescence allowed quick and simple sample preparation, high sensitivity, short analysis time and the elimination of the purification step using polymeric cartridges. Finally, this method using UHPLC-fluorescence was validated for aflatoxins B1, B2, G1, G2 and ochratoxin A in compost matrices. It is important to mention that HPLC-MS and UHPLC-fluorescence methods verify the absence of mycotoxins in all compost samples analyzed. In a third set of experiments the temporal evolution of nonylphenol has been studied in soil samples, mixtures of soil with peat and soil with compost. The experiments were performed during 32 weeks in which nonylphenol was added at two levels of concentration in the samples at the beginning of the assay. Also, the concentration of nonylphenol in samples of leachates from soil and mixtures of soils with peat has been studied. An analytical method to analyze nonylphenol using HRGC-MS for soil samples and leachates has been designed. Rapid nonylphenol degradation in the three samples analyzed (soil, soil + compost and soil + peat) has been observed and very low nonylphenol levels in samples of leachates from soil and mixtures of soils have been obtained. Finally, Total Organic Carbon (TOC) of the leachates has been measured and also toxicity assays by Microtox test have been performed. Both techniques showed that the leachates analyzed can be dumped in the public sewerage networks because it’s low TOC and toxicity levels. To summarize, it can be assured that the use of compost in agriculture is a safe practice because the absence of mycotoxins and the rapid degradation of nonylphenol in soil.