Apesar da perda econômica, representada pela contaminação por fungos toxigênicos em castanhas-do-Brasil, um importante produto extrativista da região Norte do Brasil, estudos realizados ainda são incipientes quanto ao controle da contaminação por fungos aflatoxigênicos utilizando métodos como radiação gama (R.G) e, sobretudo, feixe de elétrons (F.E). Esses fatos motivaram a presente pesquisa teve como objetivo avaliar os efeitos da radiação gama e da aplicação de feixe de elétrons em amostras de castanha-do-Brasil inoculadas artificialmente com Aspergillus flavus. Para atingir tal objetivo, foram estudadas 50 amostras de castanha-do-Brasil, previamente, inoculadas com suspensão de esporos de A. flavus e, posteriormente, incubadas a 30 ºC em ambiente com umidade relativa controlada a 93 %. Após 15 dias de incubação, as amostras foram divididas em 5 grupos que receberam as seguintes doses de radiação: controle (0 kGy), 5 e 10 kGy F.E, 5 e 10 kGy R.G. A micobiota foi realizada através de diluição seriada, com semeadura em superfície utilizando ágar batata. Os resultados demonstraram que o tratamento com F.E utilizando a dose de 5 kGy e 10 kGy resultou na redução de crescimento de A. flavus em 74% (37/50) e 94% (47/50) das amostras. Quanto às amostras tratadas com R.G na dose de 5 kGy e 10 kGy não ocorreu crescimento fúngico em 92% (46/50) e 100% (50/50) delas. A pesquisa de aflatoxinas mostrou que doses de F.E de 5 kGy e 10 k Gy reduziram os níveis de AFB1 em 53,32% e 65,66%, respectivamente. Por sua vez, a aplicação de raios gama nas doses de 5 e 10 kGy reduziu os níveis das toxinas em 70,61% e 84,15 % respectivamente. Tal resultado pode ser atribuído a maior penetrabilidade da radiação gama. Análise sensorial demonstrou maior aceitação das amostras irradiadas com F.E e R.G na dose de 10 kGy. Concluímos que, apesar de a análise sensorial ter demonstrado perda de algumas características organolépticas, ambos os processos de radiação foram eficazes na redução da contagem de A. flavus e dos níveis de aflatoxinas. / Despite the economic loss represented by contamination by toxigenic fungi in Brazil nuts, a major product of extractive Northern of Brazil, studies are still preliminary as the control of contamination aflatoxigenic fungal using methods such as gamma radiation (G.R) and mainly, electron beam (E.B). These facts motivated this research, which aimed to evaluate the effects of gamma radiation and application of electron beam in samples of Brazil nut artificially inoculated with Aspergillus flavus. This goal, we were studied 50 samples of the Brazil nut previously inoculated with spores of A. flavus and subsequently incubated at 30 °C in relative humidity controlled at 93%. After incubation, period of 15 days, the average water activity of the samples was 0.80, the samples were divided into 5 groups that received the following doses of radiation: control (0 kGy), 5 and 10 kGy 5 E.B and G.R. The mycobiota was performed by serial dilution, plated on surface using potato dextrose agar. The results demonstrated that treatment with E.B using a dose of 5 kGy and 10 kGy resulted in reduced growth of A. flavus in 74% (37/50) and 94% (47/50) of samples. The samples treated with G.R at the dose of 5 kGy and 10 kGy no fungal growth occurred in 92% (46/50) 100% (50/50) of. The study of aflatoxins showed that doses of E.B of 5 kGy and 10 kGy reduced levels of AFB1 at 53.32% and 65.66% respectively. The application of gamma rays at doses of 5 and 10 kGy reduced levels of toxins in 70.61% and 84.15% respectively. This result may be attributed to higher penetrability of gamma radiation. Sensory analysis showed greater acceptance of the judges for the samples irradiated with E.B and G.R at the dose of 10 kGy. We concluded that although sensory analysis have demonstrated some loss of organoleptic characteristics, both processes of radiation were effective in reducing the count of A. flavus and aflatoxin contamination.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-03-28T19:08:17Z No. of bitstreams: 1 2017 - Yuri Duarte Porto.pdf: 1910618 bytes, checksum: 969c177c9241195f2d92cb156f231abb (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-28T19:08:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Yuri Duarte Porto.pdf: 1910618 bytes, checksum: 969c177c9241195f2d92cb156f231abb (MD5) Previous issue date: 2017-04-06 / CAPES / Corn is one of the most cultivated cereals in Brazil and it is susceptible to contamination by mycotoxins that are toxic secondary metabolites produced by fungi. An adoption of quality management systems during a corn production chain is essential to ensure food safety concerning mycotoxin contamination. However, there is a possibility that these recognized carcinogenic metabolites may already be found in the matrix. Hence the search for alternative solutions capable of reducing contamination to safe levels by the application of emerging technologies has been intense. The methods of decontamination of foods must to obey some premises as: inactivate, destroy or remove the toxins; do not produce others toxic waste; maintain the nutritional value and acceptability of the product. Ozone, which meets almost all of these characteristics, is recognized by the Food and Drug Administration as a GRAS (Generally Recognized as Safe) product for use as a sanitizer in food processing. Since then its use has been investigated in several types of food, including cereals contaminated by mycotoxins. Corn canjiquinha is a cultural food easily accessible by Brazilian consumers at low prices, as well as posing a potential risk of exposure due to contamination with aflatoxins. In this study, aliquots of canjiquinha samples were inoculated with concentrations of 106 CFU/g conidia of Aspergillus spp. and Fusarium spp. previously isolated from this food. Other aliquots were contaminated with aflatoxins B1, B2, G1 and G2 at a concentration of 50 ?g/kg for each. The application of gaseous ozone was tested in different combinations of exposure time, ozone concentration and canjiquinha mass, being these independent variables investigated. After treatment by ozonation, to evaluate the effects on aflatoxin concentrations, the samples were analyzed by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FD system) with pre-column derivatization (C18) by trifluoroacetic acid (TFA). The analytical method used in this study was optimized and parameters such as accuracy, precision, linearity, selectivity, limits of detection and limits of quantification of the analytical method were previously evaluated. Additionally, aflatoxin quantification tests were carried out on commercial samples of corn kernels. The method was adequate and presented recovery values within the range of 80-110% with a coefficient of variation of less than 15%, with detection and quantification limits equal to 0.8 and 3.6 ?g/kg, respectively, for each of the aflatoxins. Isolation of fungi was carried out according to the criteria of the Brazilian Ministry of Agriculture. Thus, the efficacy of gaseous ozonation on aflatoxin levels B1, B2, G1 and G2 and on microbial contamination of canjiquinha grains showed reductions of up to 57% in aflatoxin levels. The total fungal count had a reduction of about 3.0 log cycles UFC/g and the total counts of mesophiles were reduced to undetectable levels. These results demonstrated that ozonation is an effective alternative to reduce microbial contamination and the concentration of aflatoxins in corn kernels and, consequently, can improves the safety of this product. / O milho ? um dos cereais mais cultivados no Brasil e est? exposto ? contamina??o por micotoxinas que s?o metab?litos t?xicos secund?rios produzidos por fungos. A ado??o de sistemas de gest?o da qualidade durante a cadeia de produ??o de milho ? essencial para garantir a seguran?a do alimento quanto ? contamina??o por micotoxinas. Contudo, h? possibilidade desses metab?licos reconhecidamente carcinog?nicos j? encontrarem-se na matriz. Da? a busca por solu??es alternativas capazes de reduzir a contamina??o para n?veis seguros pela aplica??o de tecnologias emergentes tem sido intensa. Os m?todos de descontamina??o de alimento devem obedecer algumas premissas como: inativar, destruir, ou remover as toxinas; n?o produzir res?duos t?xicos; manter o valor nutricional e a aceitabilidade do produto. O oz?nio atende quase todas estas caracter?sticas, ? reconhecido pelo United States Food and Drug Administration (FDA) como uma subst?ncia GRAS (Geralmente Reconhecido como Seguro) para uso como sanitizante no processamento de alimentos. Desde ent?o sua utiliza??o tem sido pesquisada em diversos tipos de alimentos, incluindo cereais contaminados por micotoxinas. A canjiquinha de milho ? um alimento cultural de f?cil aquisi??o pelo consumidor brasileiro pelo baixo pre?o, al?m de representar um potencial risco de exposi??o por contamina??o com aflatoxinas. Neste estudo, al?quotas de amostras de canjiquinha foram inoculadas concentra??es de 106 UFC/g de con?dios de Aspergillus spp. e Fusarium spp. previamente isolados do alimento. Outras al?quotas foram contaminadas com aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 na concentra??o de 50 ?g/kg para cada. A aplica??o de oz?nio gasoso foi testada em diferentes combina??es de tempo de exposi??o, concentra??o do oz?nio e massa de canjiquinha, sendo essas as vari?veis independentes pesquisadas. Ap?s tratamento por ozoniza??o, para avalia??o dos efeitos sobre as concentra??es de aflatoxinas, as amostras foram analisadas por cromatografia l?quida de alta efici?ncia com detec??o por fluoresc?ncia (sistema CLAE-DF) com derivatiza??o pr?-coluna (C18) por ?cido trifluoroac?tico (TFA). O m?todo anal?tico utilizado neste estudo foi otimizado e par?metros como a exatid?o, precis?o, linearidade da faixa de trabalho, seletividade, limites de detec??o e limites de quantifica??o do m?todo anal?tico foram previamente avaliados. Adicionalmente efetuaram-se ensaios para quantifica??o das aflatoxinas em amostras comerciais de canjiquinha de milho. O m?todo mostrou-se adequado e apresentando valores de recupera??o dentro da faixa de 80-110% com coeficiente de varia??o menor que 15%, sendo os limites de detec??o e quantifica??o iguais a 0,8 e 3,6 ?g/Kg, respectivamente, para cada uma das aflatoxinas. O isolamento de fungos foi realizado de acordo com as normas do Minist?rio da Agricultura. Assim a avalia??o da efic?cia da ozoniza??o gasoso sobre os n?veis de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 e sobre a contamina??o microbiana dos gr?os de canjiquinha apresentou redu??es de at? 57% nos n?veis de aflatoxinas. A contagem de fungos totais teve uma redu??o de cerca de 3,0 ciclos log UFC/g e a contagem total de mes?filos foram reduzidas a n?veis n?o detect?veis. Estes resultados demonstraram que a ozoniza??o ? uma alternativa eficaz para reduzir a contamina??o microbiana e a concentra??o de aflatoxinas em canjiquinha de milho e, consequentemente, melhora a seguran?a desse produto.

Made available in DSpace on 2017-05-12T14:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cristiane _Lurdes Paloschi.pdf: 1204212 bytes, checksum: 0429a0e71141d849cf2df342c98d4d01 (MD5) Previous issue date: 2014-07-15 / Fundação Araucária / This work aimed to study the effects of infestation of insects Sitophilus zeamais on the physicochemical and microbiological quality in corn kernels during storage. For the experiment, samples of hybrid maize (Zeamays) were collected from cultivar Dow 2B512Hx, grown in western Paraná, harvested in June / July 2013. For storage, the grains had water contents below 15% bs, and about 300g of them were stored in glass containers closed with tissue type Voil to facilitate gas exchange, with a total of 40 containers stored in a BOD incubator at a temperature of 27±1 °C for 180 days. From all the recipients, 20 were infested with 20 adult insects of Sitophilus zeamais and the other 20 were kept uninfested. Every 45 days, samples were taken and physical and chemical analyzes were carried out (grain weight loss, population variation of insects, classification of corn, mass of 1000 seeds, water content, ash, oil, protein and carbohydrates and dietary fiber total), as well microbiological analyzes (counting of filamentous fungi and identification of aflatoxin-producing fungi) and quantitation of aflatoxin (B1, B2, G1 and G2). Exploratory analysis of the response variables was done by use of the analysis of variance (ANOVA) and mean comparison test was performed by Tukey's test with a significance level of 0.05. The final grain weight in dry material with insects reduced in the course of time, what increased the losses in grain mass and showed statistically significant differences. The population of insects and the classification of maize also showed statistically significant differences. It was observed that when storage time increased, the population of insects also increased and the percentage of whole grains reduced for both storage conditions. The content of water, protein and filamentous fungi incidence increased in grains initially infested during storage, and the 1000 grains weight, the content of carbohydrates and total dietary fiber content in these grains decreased compared to uninfected grains. The incidence of aflatoxin was not detected in maize kernels during the studied storage period. Finally, from these results, it is possible to conclude that the longer the period of contact of insects with the largest grains, larger the damages and losses to producers are. However, S. zeamais did not behave as a mechanical vector of the fungus Aspergillus ssp., with no correlation between the incidence of filamentous fungi and the level of aflatoxins (B1, B2, G1 and G2). / Este trabalho teve como objetivo estudar os efeitos da infestação dos insetos Sitophilus zeamais sobre a qualidade físico-química e microbiológica em grãos de milho durante o armazenamento. Para a condução do experimento, foram coletadas amostras de grãos de milho (Zeamays) híbrido da cultivar Dow 2B512Hx, cultivados na região Oeste do Paraná, colhidas em junho/julho de 2013. Para o armazenamento, os grãos se encontravam com teores de água abaixo de 15% b.s sendo armazenados cerca de 300 g em recipientes de vidros fechados com tecido tipo Voil, a fim de facilitar as trocas gasosas, totalizando 40 recipientes armazenados em câmera incubadora B.O.D à temperatura de 27±1 °C durante 180 dias. Do total de recipientes, 20 foram infestados com 20 insetos adultos de Sitophilus zeamais e os outros 20 foram mantidos sem infestação. A cada 45 dias, foram retiradas as amostras e realizadas análises físico-químicas (perda de massa dos grãos, variação populacional dos insetos, classificação do milho, massa de 1000 grãos, teor de água, cinzas, óleo, proteína e carboidratos e fibra alimentar total), microbiológicas (contagem de fungos filamentosos e identificação dos fungos produtores de aflatoxinas) e de quantificação de aflatoxinas (B1, B2, G1 e G2). A análise exploratória das variáveis respostas foi analisada pelo emprego da análise de variância (ANOVA) e o teste de comparação de médias foi realizado pelo teste de Tukey com nível de significância de 0,05. O peso final dos grãos em matéria seca com insetos reduziu ao longo do tempo, aumentando as perdas na massa dos grãos, apresentando diferenças estatísticas significativas. A população de insetos e a classificação do milho também apresentaram diferenças estatísticas significativas. Observou-se que, conforme aumentava o tempo de armazenamento, aumentava a população de insetos e reduzia a percentagem de grãos inteiros para ambas as condições de armazenamento. O teor de água, proteína e a incidência de fungos filamentosos aumentaram nos grãos inicialmente infestados ao longo do armazenamento e o peso de 1000 grãos e o teor de carboidratos e fibra alimentar total dos grãos diminuiu nestes grãos em relação aos grãos que não infestados. A incidência de aflatoxinas não foi detectada nos grãos de milho durante o período de armazenamento analisado. Pode-se concluir, com base nesses resultados, que quanto maior o período de contato dos insetos com os grãos maiores são os danos causados e os prejuízos para os produtores, porém o S. zeamais não se comportou como um vetor mecânico do fungo Aspergillus ssp., não havendo correlação entre a incidência de fungos filamentosos e o nível de aflatoxinas (B1, B2, G1 e G2).

Os objetivos foram: identificar a microbiota fúngica e a ocorrência de aflatoxinas em cultivar de amendoim, identificar a microbiota fúngica do solo e correlacionar os resultados obtidos com os níveis de atividade de água encontrados. As amostras (solo e amendoim) foram provenientes de: Jaboticabal, Rosália, Tupã e Cafelândia (SP). A microbiota fúngica do solo revelou que o fungo do gênero Penicillium foi o mais frequente (52,1 %) nas quatro regiões durante as duas coletas (após a emergência das plantas e duas semanas antes do arranquio). Dentro do gênero Aspergillus, A. flavus foi a espécie mais frequente (13,5 %). A microbiota fúngica dos grãos e das cascas, das quatro regiões, nas duas coletas (duas semanas antes do arranquio e após o arranquio), demonstrou maior frequência de isolamento do fungo do gênero Fusarium (70,2 %). Do gênero Aspergillus, a espécie A. flavus foi a mais frequente (9,8 %). A análise de aflatoxinas revelou a presença de aflatoxinas em 5 % das amostras de grãos analisadas. Nas cascas, 13,75 % das amostras apresentaram contaminação por aflatoxinas. / The objectives were: to identify the mycoflora and the occurrence of aflatoxins in a peanut variety, identify the soil mycoflora and compare the acquired results with the levels of water activity found. The samples (peanut and soil) were collected from: Jaboticabal, Rosália, Tupã and Cafelândia (SP/Brazil). The mycoflora of the soil revealed that the genus Penicillium was the most frequent (52.1 %) in the four regions during the two trials (after the emergence of the plants and two weeks before the uprooting). Within the genus Aspergillus, A. flavus was the most frequent specie (13.5 %). The mycoflora of the kernels and peanut hulls, from the four regions in the two trials (two weeks before the uprooting and after the uprooting), demonstrated greater frequency of isolation of the genus Fusarium (70.2 %). Within the genus Aspergillus, A. flavus was the most frequent specie (9.8 %). The analysis of aflatoxins revealed the presence of aflatoxins in 5 % of the kernels samples analyzed. In peanut hulls, 13.75 % of the samples presented aflatoxin contamination.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this document was to realize two studies to evaluate the digestibility of diets and metabolism of pigs fed with diets containing mycotoxins and organoaluminosilicate. In the first study it evaluated the diets and metabolic balance of piglets fed with diets containing 800 μg kg-1 of aflatoxins (AFLs). The experimental design utilized was completely randomized whit two treatments (control diet and control + 800 μg kg-1 AFLs), with four replications each, the animal was the experimental unit. The experimental period was 10 days. The digestibility coefficient of dry matter, protein and crude energy were not affected (P>0.05) by inclusion of 800 μg kg-1AFLs. The energy metabolization decreased 6% (P<0.05) on animals fed with diet containing aflatoxins. In N balance the N losses in urine increased 52% and the retention in relation the absorption reduced in 31% on animals fed with diet containing aflatoxins. Concerning the energy balance, the gross energy intake was not influenced (P>0.05) by the addition of AFLs in the diet. Energy losses in urine increased (P<0.05) 52% in the pigs fed diets containing aflatoxins. The presence of 800 μg kg-1 of AFLs in the diet did not affect the digestibility, but it altered the protein and energy metabolism of weaned piglets. In the second study it evaluated the digestibility of diets and metabolism of piglets fed with diets containing zearalenone (ZEA) with or without addition of organoaluminosilicate (OA). A completely randomized design was utilized whit three treatments (control, control + 2 mg kg-1 ZEA and control + 2 mg kg-1 ZEA with addition of 0,3% OA in diet), and four replications, the animal was the experimental unit. The experimental period was 16 days. The ZEA and the OA did not affect (P>0.05) the dry matter intake, dry matter and gross energy digestibility, metabolizable energy, energy and protein digestible. The N balance was not modified (P>0.05) by ZEA and organoaluminosilicate. However, it influenced (P<0.05) the fecal excretion of phosphorus. In diets containing ZEA and ZEA+OA the fecal excretion of P decreased 15 and 10% than control group. The ZEA and the OA did not affect (P>0.05) the P absorption in relation to the ingestion. The intake of 2 mg kg-1 of ZEA with or without addition of 0,3% OA in diet does not affect the diets digestibility and the pigs metabolism. / O objetivo desta dissertação foi realizar dois estudos para avaliar a digestibilidade de dietas e metabolismo de suínos alimentados com dietas contendo micotoxinas e organoaluminosilicato. No primeiro foram avaliados a digestibilidade de dietas e balanços metabólicos de leitões alimentados com dietas contendo 800 μg kg-1 de aflatoxinas (AFLs). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com dois tratamentos (dieta controle e controle + 800 μg kg-1 de AFLs) e quatro repetições, sendo o animal a unidade experimental. O período experimental foi de 10 dias. Os coeficientes de digestibilidade da matéria seca, proteína e energia bruta não foram influenciados (P>0,05) pela adição de 800 μg kg-1 de AFLs na dieta. A metabolização da energia bruta reduziu 6% (P<0,05) nos animais alimentados com dietas contendo aflatoxinas. A excreção urinária de N aumentou (P<0,05) em 52% e a retenção relativa à absorção diminuiu (P<0,05) em 31% nos animais alimentados com a dieta contendo aflatoxinas. No balanço energético, a energia bruta ingerida não foi influenciada (P>0,05) pela adição de aflatoxinas. A excreção urinária de energia aumentou (P<0,05) 52% nos animais alimentados com a dieta contendo aflatoxinas. Conclui-se que a presença de 800 μg kg-1 de AFLs na dieta não afeta a digestibilidade, mas altera o metabolismo protéico e energético de leitões. No segundo estudo foram avaliados a digestibilidade de dietas e balanços metabólicos de leitoas alimentados com dietas contendo zearalenona (ZEA) com ou sem adição de organoaluminosilicato (OA). O delineamento foi inteiramente casualizado, com três tratamentos (controle, controle + 2 mg kg-1 de ZEA e controle + 2 mg kg-1 de ZEA com adição de 0,3% de OA na dieta) e quatro repetições, em que o animal foi a unidade experimental. O período experimental foi de 16 dias. A ZEA e o OA não influenciaram (P>0,05) o consumo de matéria seca, a digestibilidade da matéria seca e energia bruta, metabolização da energia, proteína digestível e energias digestível e metabolizável das dietas. O balanço do N não foi alterado (P>0,05) pela ZEA e o organoaluminosilicato. No entanto, modificaram (P>0,05) a excreção fecal de fósforo. Nas dietas contendo ZEA e ZEA+OA os animais excretaram 15 e 10% menos P nas fezes comparado ao grupo controle. A ZEA e o OA não alteraram (P>0,05) a absorção de P em função da ingestão. O consumo de 2 mg kg-1 de ZEA com ou sem adição de 0,3% de OA não interfere na digestibilidade das dietas e no metabolismo dos suínos.O objetivo desta dissertação foi realizar dois estudos para avaliar a digestibilidade de dietas e metabolismo de suínos alimentados com dietas contendo micotoxinas e organoaluminosilicato. No primeiro foram avaliados a digestibilidade de dietas e balanços metabólicos de leitões alimentados com dietas contendo 800 μg kg-1 de aflatoxinas (AFLs). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com dois tratamentos (dieta controle e controle + 800 μg kg-1 de AFLs) e quatro repetições, sendo o animal a unidade experimental. O período experimental foi de 10 dias. Os coeficientes de digestibilidade da matéria seca, proteína e energia bruta não foram influenciados (P>0,05) pela adição de 800 μg kg-1 de AFLs na dieta. A metabolização da energia bruta reduziu 6% (P<0,05) nos animais alimentados com dietas contendo aflatoxinas. A excreção urinária de N aumentou (P<0,05) em 52% e a retenção relativa à absorção diminuiu (P<0,05) em 31% nos animais alimentados com a dieta contendo aflatoxinas. No balanço energético, a energia bruta ingerida não foi influenciada (P>0,05) pela adição de aflatoxinas. A excreção urinária de energia aumentou (P<0,05) 52% nos animais alimentados com a dieta contendo aflatoxinas. Conclui-se que a presença de 800 μg kg-1 de AFLs na dieta não afeta a digestibilidade, mas altera o metabolismo protéico e energético de leitões. No segundo estudo foram avaliados a digestibilidade de dietas e balanços metabólicos de leitoas alimentados com dietas contendo zearalenona (ZEA) com ou sem adição de organoaluminosilicato (OA). O delineamento foi inteiramente casualizado, com três tratamentos (controle, controle + 2 mg kg-1 de ZEA e controle + 2 mg kg-1 de ZEA com adição de 0,3% de OA na dieta) e quatro repetições, em que o animal foi a unidade experimental. O período experimental foi de 16 dias. A ZEA e o OA não influenciaram (P>0,05) o consumo de matéria seca, a digestibilidade da matéria seca e energia bruta, metabolização da energia, proteína digestível e energias digestível e metabolizável das dietas. O balanço do N não foi alterado (P>0,05) pela ZEA e o organoaluminosilicato. No entanto, modificaram (P>0,05) a excreção fecal de fósforo. Nas dietas contendo ZEA e ZEA+OA os animais excretaram 15 e 10% menos P nas fezes comparado ao grupo controle. A ZEA e o OA não alteraram (P>0,05) a absorção de P em função da ingestão. O consumo de 2 mg kg-1 de ZEA com ou sem adição de 0,3% de OA não interfere na digestibilidade das dietas e no metabolismo dos suínos.

Aflatoxinas são metabólitos altamente tóxicos, com efeitos teratogênicos e carcinogênicos, produzidos predominantemente por fungos do gênero Aspergillus. Devido aos seus graves efeitos deletérios na produção animal, muitos estudos são conduzidos com o objetivo de encontrar métodos eficazes de minimizar seus prejuízos econômicos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficiência do efeito protetor de um aditivo antimicotoxinas a base de bentonita cálcica natural brasileira (BCM – Brazilian calcium montmorillonite) sobre os parâmetros de ganho de peso, consumo e conversão alimentar, índice de eficiência produtiva, peso ponderado do coração, fígado, moela e baço, proteínas plasmáticas totais, e concentração de minerais no soro (cálcio, fósforo, magnésio, ferro, sódio, cloro e potássio). O experimento consistiu em 1056 pintos de corte machos, de 1 dia de vida, Cobb, distribuídos em baias aleatoriamente, com 22 aves em cada baia, por 42 dias. Foram utilizados 6 tratamentos, sendo o grupo controle sem o adsorvente BCM e sem aflatoxina (AFL), um grupo contendo apenas AFL (3 mg/kg), dois grupos recebendo apenas BCM (0,25% e 0,5%) e dois grupos recebendo AFL+BCM em dois níveis (0,25% e 0,5%). Os resultados demonstraram que de todo o experimento, o grupo mais afetado foi o das aves que receberam apenas AFL. Os tratamentos que receberam AFL+BCM a 0,25% e a 0,5% tiveram seus pesos 13,3% e 22,7% maiores do que o grupo que recebeu apenas AFL, respectivamente, e também aumentaram seu índice produtivo em 53% e 66,5%, respectivamente. Os índices de peso ponderado dos órgãos foram todos melhorados com a inclusão de BCM, mas houve um decréscimo no nível de potássio sérico de 15,3% quando comparado com o grupo que recebeu apenas AFL. A argila bentonita cálcica pode ser utilizada como aditivo adsorvente de micotoxinas para tratamento e controle de rações contaminadas com aflatoxinas em frangos de corte. / Aflatoxins are a highly toxic metabolites, with carcinogenic and teratogenic effects, produced mainly by the genus Aspergillus. Due their negative impact in the animal production chain, several studies have been conducted intended to find efficient methods to minimize the economical losses. The present experiment aimed to evaluate the protective effect of a Brazilian natural calcium montmorillonite (BCM) on the parameters of body weight gain, feed consumption, feed conversion, productive efficiency index, hart, spleen, liver and gizzard’s weight, total plasmatic protein level, and serum minerals. One thousand and fifty-six 1 d-old Cobb male broilers were housed in experimental pens (22 chickens per pen) for 42 d. Two levels of aflatoxins (AFLs) (0 and 3 mg kg-1) and three levels of BCM (0, 2.5 and 5 g kg-1) were assayed. Each treatment had eight replicates of 22 broiler chickens each. Of all the chickens tested in the experiment, the ones treated with AFLs were the most adversely affected. The treatments that received AFLs and BCM (0.25% and 0.5%) had their weights 13.3% and 22.7% heavier than the group that received only aflatoxins, respectively. They also improved their productive efficiency index in 53% and 66.5%, respectively. The organs weight parameter were all improved with the inclusion of BCM, but a decrease in the serium potassium level of 15.3% was observed when compared with the group that did not received AFLs. BCM did not affect negatively those groups that did not received AFLs. The BCM could be used as a mycotoxin binder for aflatoxins in broilers feed.

Desenvolvimento de metodologia para a determinação de aflatoxinas em amostras de amendoim usando espectrofluorimetria e análise dos fatores paralelos (PARAFAC). 2012. 92 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química) - Instituto de Química, Universidade do Estado do Rio de Janeiro , Rio de Janeiro, 2012. Neste trabalho de pesquisa são descritos dois estudos de caso que se baseiam na determinação de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 em amostras de amendoim, utilizando a técnica de espectroscopia de fluorescência molecular. O primeiro estudo tem o objetivo de avaliar a metodologia empregada para a quantificação de aflatoxinas totais em amendoins, utilizando o método clássico de validação fazendo-se o uso da calibração univariada. Os principais parâmetros de desempenho foram avaliados visando certificar a possibilidade de implementação desta metodologia em laboratórios. O segundo estudo está focado na separação e quantificação destas aflatoxinas com a aplicação combinada da espectrofluorimetria e de um método quimiométrico de segunda ordem (PARAFAC) utilizando a calibração multivariada. Esta técnica pode ser empregada como uma alternativa viável para a determinação de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 isoladamente, tradicionalmente é feito por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de fluorescência. Porém, como estes analitos apresentam uma larga faixa de sobreposição espectral e as aflatoxinas (B1 e G1) possuem intensidade de sinal de fluorescência bem abaixo das demais, a separação e quantificação das quatro aflatoxinas foi inviável. O estudo foi retomado com a utilização das aflatoxinas B2 e G2 e os resultados alcançados foram satisfatórios. O método utilizado para a quantificação de aflatoxinas totais apresentou bons resultados, mostrando-se como uma importante ferramenta para a determinação destes analitos. Alem disso, comtempla perfeitamente o que é requerido pela legislação brasileira para a análise de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2, que tem como exigência em laudos finais de análise a declaração do somatório, em g/kg, destas aflatoxinas, ou seja, sem a necessidade de quantifica-las separadamente / This research describes two case studies that are based on the determination of aflatoxins B1, B2, G1 and G2 in peanut samples, using the technique of molecular fluorescence spectroscopy. The first study aims to evaluate the methodology used for the quantification of total aflatoxins in peanuts, using the classical validation method by employing univariate calibration. The main performance parameters were evaluated to assure the ability to ensure implementation of this methodology in laboratories. The second study focuses on the separation and quantification of these aflatoxins with the combined application spectrofluorimetry and a chemometric method of second order (PARAFAC) using the multivariate calibration. This technique can be used as a viable alternative for the determination of aflatoxins B1, B2, G1 and G2 alone, which traditionally is done by high performance liquid chromatography with fluorescence detection. However, as these analytes exhibit a wide range of spectral overlap and the aflatoxins (B1 and G1) have intensity of fluorescence signal well below the others, the separation and quantification of the four aflatoxins was not feasible. The study was resumed with the use of aflatoxins B2 and G2 and the results were satisfactory. The method used for quantification of total aflatoxins showed good results, showing itself as an important tool for the determination of these analytes. Furthermore, it contemplates exactly what is required by Brazilian legislation for the analysis of aflatoxins B1, B2, G1 and G2, which as a requirement in the final analysis reports is the statement of the sum, in g/kg, these aflatoxins, ie without the need to quantify them separately

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:26:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-05. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:45:56Z : No. of bitstreams: 1 000845960_20160805.pdf: 111196 bytes, checksum: 34ec99fe20088405bb5016c0b359dc54 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-08-05T12:20:20Z: 000845960_20160805.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-05T12:20:57Z : No. of bitstreams: 1 000845960.pdf: 2129547 bytes, checksum: 4e322d6b3cdce76f73367bf54d7be8b2 (MD5) / Este trabalho teve como objetivo geral avaliar a viabilidade técnica da aplicação de biofungicidas extraídos de plantas no processamento de amendoim (Arachis hypogaea L.), de modo a reduzir a infestação pelo fungo Aspergillus flavus L. e possível contaminação por aflatoxina. Foi realizado na primeira etapa o estudo da contaminação fúngica e de aflatoxina, nas Safras 2011/12, 2012/13 e 2013/14, nas etapas da colheita e pós-colheita das vagens de amendoim Runner IAC 886 na região de Jaboticabal - SP, e a proposta da Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle (APPCC). Os resultados da umidade das vagens mostraram uma redução, em média, de 65,65% base seca (b.s.) no arranquio, para 7,17% b.s. no armazenamento. A contaminação fúngica foi maior na Safra 2013/2014 e os índices de aflatoxinas estavam abaixo do exigido pela legislação vigente. O plano APPCC apresentou os pontos de controle (PC) nas etapas do arranquio, secagem ao sol, colheita mecânica e transportes; e os Pontos Críticos de Controle(PCC), nas etapas de recepção, secagem e armazenamento, concluindo-se que a melhor etapa para a aplicação do biofungicida é antes da secagem artificial. A segunda parte consistiu na obtenção de biofungicidas nas formas de extratos (aquoso e alcoólico) e de óleo essencial das plantas: canela (Cinnamomum zeylanicum), cravo (Syzygium aromaticum), cidreira (Cymbopogon citratus), oregano (Origanum vulgare) e manjericão (Ocimum basilicum), e na avaliação destes quanto à inibição do fungo Aspergillus flavus L. e sintetização de aflatoxina. A eficiência de inibição dos biofungicidas sobre o Aspergillus flavus L. foi avaliada em meio Agar Dextrose Batata (BDA), pela técnica de inibição do crescimento micelial (ICM), concentração inibitória mínima (CIM) e por aplicações dos óleos mais eficientes nas vagens de amendoim contaminadas e armazenadas em umidades... / This study aims to evaluate the technical feasibility of the application of biofungicides extracted from plants in the processing of peanut (Arachis hypogaea L.), with the objective of reducing infestation by fungus Aspergillus flavus L., and consequent contamination by aflatoxin, a chemical hazard. Firstly, we studied the fungal and aflatoxin contamination for the 2011/12, 2012/13, and 2013/14 crops, during the Runner IAC 886 peanut pods' harvesting and post-harvesting stages, in the region of Jaboticabal, Sao Paulo, Brazil, and proposed the Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP). The results of the pods' humidity showed a decrease, on average, of 65.65% d.b. on uprooting, to 7.17% d.b. on storage, and the fungal contamination was higher for 2013/2014 crops; the aflatoxin levels were below the required by current legislation. HACCP showed the control points (CP) during uprooting, sun drying, mechanical harvesting, and transportation; and the PCCs during stages of reception, drying, and storage proved the best stage for biofungicide application is before artificial drying. The second stage consisted of obtaining biofungicides as aqueous, alcoholic, and essential oil extracts from the plants: cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), cloves (Syzygium aromaticum), lemon grass (Cymbopogon citratus), oregano (Origanum vulgare), and basil (Ocimum basilicum); then, we evaluated those in inhibiting the fungus Aspergillus flavus L. and synthesizing aflatoxin. The biofungicides' inhibiting efficiency on Aspergillus flavus L. was evaluated in Potato Dextrose Agar medium (PDA), by mycelial growth inhibition technique (MGI), by minimum inhibitory concentration (MIC), and by applying the most efficient oils on the contaminated peanut pods, stored in controlled humidity and room temperature, thus determining colony-forming units (CFU/g) and aflatoxins. The extracts' MGI results showed that there was no...

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Two experiments were conducted to evaluate the dietary Aflatoxin (AFL) effects in broiler breeder hens on productive and reproductive aspects. This study evaluated the residual effect of dietary AFL on subsequent broiler chicks performance. These trials were conducted on Poultry Laboratory (LAVIC) of Animal Husbandry Department at Federal University of Santa Maria. The Micotoxins Research Laboratory (LAPEMI) was partnership and made all AFL in ingredients and diet as well as produced the AFL used in this research. In the first trial 500 broiler breeder hens and 60 males (COBB 500) were used, housed in floor pens with wood shave. This experiment was conducted from April to October of 2003 (48th to 54th weeks of age). Up to 49th weeks of age all birds were fed with basal diet free of AFL, according To LAPEMI. From 49 to 53 wk of age the birds were fed according to the treatments and after were submited to free AFL basal diet. The experimental design were a enteirelly randomized with 4 treatments with five replicates with 28 birds each. The treatments 1, 2, 3 and 4 were diets with 0, 250, 500 e 750 ppb of AFL in the diets. The levels of 250 and 750 ppb on broiler breeders diets had not significant effect (P>0.05) on egg production, body weight, specific gravity, percentage of shell and albumen of eggs. The progeny originating from broiler breeders hens fed with 250 and 500 ppb of AFL in the diets had baby chicks with poor quality. A second experiment was conducted to analyze the progeny performance of birds originated from broiler breeders of the first experiment. This experiment was conducted in three Petersime batteries in a temperature controlled room from 1 to 21 days of age. The experimental design was enteirelly with 4 treatments with 8 repicates with 8 birds each, only males were used. The data were submited to variance analysis and after, when the presented significant differences, Tukey Test 5% was applied. At 7 days of age an expressive negative effect was observed in birds originated from broiler breeder hens fed with dietary AFL. It was observed in this seven days that birds originated form hens fed with 250, 500 or 750 ppb of AFL in the diets had lower body weight and body weight gain than birds originated from breeders fed with a diet free of AFL. At 21 days of age the performance of birds was similar (P>0.05). The AFL levels in the broiler breeder diets affected significantly the broiler chicks mortality (P<0.05) and linear effect was observed at 7 and 21 days of age. / Foram conduzidos dois experimentos para determinar o efeito da intoxicação por aflatoxinas sobre aspectos produtivos e reprodutivos em matrizes de corte e estudar os efeitos residuais da intoxicação da matriz de corte com AFL sobre a progênie. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Avicultura (LAVIC) do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Santa Maria. Este experimento foi conduzido em parceria com Laboratório de Pesquisas Micológicas (LAPEMI), o qual produziu a AFL utilizada nesta pesquisa. No primeiro experimento foram utilizadas 500 fêmeas e 60 machos da linhagem comercial de matriz de corte Cobb 500. As matrizes foram alojadas em boxes experimentais. Esse experimento foi conduzido de Abril a Outubro de 2003 (48a a 54a semanas de idade). Antes da 49a semana de idade todas as aves foram alimentadas com dieta basal isenta de AFL, conforme análise do LAPEMI, sendo nas 4 semanas subseqüentes (49-52ª semanas) foram ofertadas dietas contaminadas de acordo com os trt em que as aves se encontravam. Durante a ultima semana do estudo (53-54ª semanas) foi oferecido novamente dieta basal livre de AFL a todos os trt. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso, com 4 trt com 5 repetições de 28 aves cada. Os tratamentos 1, 2, 3 e 4 foram dietas contendo 0, 250, 500 e 750 ppb de AFL na dieta. Intoxicações à níveis de 250 a 750 ppb não produziram efeitos significativos sobre a taxa de postura, peso corporal, gravidade específica, % de casca e % de albúmen de matrizes de corte Matrizes de corte submetidas à dieta contendo 250 e 500 ppb de AFL tiveram a qualidade de sua progênie afetada negativamente. O segundo experimento foi conduzido para analisar o desempenho da progênie oriundas de matrizes de corte do primeiro experimento. Este experimento foi conduzido em 3 baterias no período de 1 a 21 dias de idade. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 4 trt com 8 repetições de 8 aves cada. Após a obtenção dos dados esses foram submetidos a uma análise de variância e, quando apresentaram diferenças significativas, aplicou-se o Teste de Tukey. Verifica-se um marcante efeito residual da alimentação da matriz de corte na progênie, pois, aos 7 dias de idade, verificou-se que em todos os níveis avaliados os pintos provenientes de matrizes que ingeriram dietas com AFL tiveram um menor peso corporal (P<0,05), e ganho médio diário do que pintos oriundos de matrizes de corte não contaminadas. Com relação ao peso corporal aos 21 dias de idade e a conversão alimentar não foram observadas diferenças estatísticas entre os trt. Os níveis de AFL utilizados afetaram significativamente a mortalidade de frangos de corte (P<0,05), observando um efeito linear para mortalidade de 1-7 e 1-21 dias de idade.

O presente trabalho teve como objetivos avaliar a micobiota e a ocorrência de micotoxinas em grãos de milho provenientes de quatro regiões do Brasil; identificar os isolados de A. flavus pela técnica de AFLP (Amplified Fragment Length Plymorphism) e de Fusarium verticillioides, utilizando as técnicas de AFLP e sequenciamento parcial do gene do fator de elongação 1-&#945; comparar o potencial toxigênico das cepas com a expressão dos genes aflR e aflP (A. flavus) e FUM1 e FUM19 (F. verticillioides), através da técnica de real time RT-PCR. Demonstrou-se prevalência de Fusarium verticillioides e de fumonisinas nos grãos. Do total de isolados, 96 % foram identificados como F. verticillioides. A similaridade dos isolados de A. flavus com a cepa padrão variou de 79 % a 100 %, e não foi observado agrupamento origem geográfica específico entre os isolados de A. flavus e F. verticillioides. Observou-se elevada correlação positiva entre a expressão de FUM1 e FUM19 e a produção de toxinas por F. verticillioides, e baixa correlação positiva entre os transcritos de aflR e aflP em relação ao perfil de produção de aflatoxinas por A. flavus, demonstrando necessidade de estudos referentes a expressão de genes relacionados à produção de micotoxinas. / The present study aimed to verify the mycoflora and occurrence of mycotoxins in freshly harvested corn samples in four regions of Brazil; to identify Aspergillus flavus strains by AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism) technique and Fusarium verticillioides by AFLP and by the translation elongation factor 1-&#945 partial gene sequencing (TEF-1-&#945); to compare the toxigenic potential of the strains in relation to aflR and aflP gene expression (A. flavus) and FUM1 and FUM19 (F. verticillioides), using Real Time RT-PCR technique. Our data showed predominance of F. verticillioides and fumonisins in the corn samples. Of the total strains, 96 % were identified as F. verticillioides. The similarity of A. flavus isolates with the standard strain ranged from 79 % to 100 %, and the results of AFLP, demonstrated a lack of relationship between the groups of the phylogenetic tree and the different geographic origins, for both A. flavus and F. verticillioides. A high positive correlation was observed between the expression of FUM1 and FUM19 genes and fumonisin production, and a low positive correlation was observed between the expression of aflR and aflP genes and aflatoxin production. These data demonstrate the need for studies concerning gene expression related to mycotoxins production.