Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Evalúa e identifica nuevos poliquétidos de la clase de compuestos de piranonaftoquinonas (PNQs), de las especies de Streptomyces, con potencial contra biopelículas de Staphylococcus aureus. Determina el potencial antimicrobiano de los compuestos contra las células planctónicas y biopelículas a través de la tinción de viabilidad con base de tinte redox. La eficacia anti-biopelícula es confirmada por el recuento de viabilidad (Logaritmo de reducción). La alnumicina D resulta ser el más potente poliquétido de PNQ anti-biopelícula dentro del grupo de las alnumicinas. Es importante resaltar que la alnumicina D es un compuesto derivado de la ruta biosintética de las PNQs y que el producto final, alnumicina A, no muestra actividad significativa anti-biopelícula; así también, se observa que la presencia de la poco frecuente unidad C-ribosil en la forma de piranosa es esencial para presentar elevado potencial en el grupo de las alnumicinas. Por otro lado, la medermicina, compuesto glicosilado con una unidad de aminoazúcar cargada y derivada de glucosa, no presenta elevada actividad anti-biopelícula en comparación con su unidad de aglicona kalafungina. La granaticina B exhibe similar potencial anti-biopelícula que la alnumicina D y además ambas comparten características estructurales como el de no poseer carga, ser glicosilados y mostrar similar patrón de oxigenación. En consecuencia, estos hallazgos resaltan la ruta biosintética de los antibióticos como potencial fuente de efectivos compuestos anti-biopelículas. / Tesis

[pt] Os modelos matemáticos de formação de opiniões vêm sendo estudados pelos físicos principalmente desde os anos 80 e atualmente fazem parte do novo ramo conhecido como Sociofísica. Esta área de pesquisa recente utiliza ferramentas e conceitos da física estatística e computacional. Os modelos deste tipo têm dado bons resultados para descrever certos aspectos do comportamento social e político, como a formação de opiniões, adoção de novas tecnologias ou atitudes extremas, que apresentam uma fenomenologia, a exemplo das transições ordem-desordem, análoga a alguns sistemas físicos. Dentro desse cenário, enquadra-se a presente dissertação, em que estudamos um modelo de formação de opiniões que pode ser associado a qualquer debate público com três opções (sim, não, indecisos). Consideramos uma população de indivíduos (ou agentes) totalmente conectados, que podem estar em três estados diferentes. As interações ocorrem aos pares e são competitivas, sendo negativas com probabilidade p ou positivas com probabilidade 1-p. Esta distribuição bimodal das interações produz um comportamento semelhante ao que resulta da introdução de contrários (no sentido de Galam) na população. Além disso, considera-se que uma certa fração d dos indivíduos são intransigentes ou obstinados, usualmente chamados de inflexíveis em dinâmica de opiniões, que conservam suas opiniões. Estudamos o impacto da concorrência entre contrários e inflexíveis sobre a opinião global, por meio de simulações computacionais. Os nossos resultados mostram que a presença de inflexíveis afeta o comportamento crítico da população só se tal desordem é temperada (em inglês quenched), ou seja, se os intransigentes não alteram as suas convicções com o tempo. Por outro lado, na versão recozida (em inglês annealed) do modelo, em que os inflexíveis são escolhidos em cada intervalo de tempo (isto é, a inflexibilidade é ocasional), a transição de fase de não-equilíbrio que ocorre na ausência de inflexveis permanece inalterada. Discutimos também a relevância do modelo para os sistemas sociais reais. / [en] Mathematical models of opinion formation have been studied by physicists mainly since the 80s and are now part of the new branch known as Sociophysics. This recent area of research borrows tools and concepts from statistical physics. Models of this kind are providing good results to describe certain aspects of the social and political behavior, such as the formation of opinions, adoption of new technologies or extreme attitudes, that present a phenomenology, e.g., order-disorder transitions, analogous to some physical systems. Within this scenario, fits this thesis. We study a model of opinions that can be associated to any public debate with three options (yes, no, undecided). We consider a fully connected population of individuals (or agents), which can be in three different states. Interactions occur by pairs and are competitive, being negative with probability p or positive with probability 1-p. This bimodal distribution of interactions produces a behavior similar to that resulting from the introduction of contrarians (in the sense of Galam) in the population. Furthermore, we consider that a certain fraction d of individuals are intransigent or stubborn, usally called inflexibles in opinion dynamics. These individuals keep their opinions unchanged. By means of computer simulations, we study the impact of competition between contrarians and inflexibles on the formation of the majority opinion. Our results show that the presence of inflexibles affects the critical behavior of the population only if such condition is quenched, that is, if the intransigents not change their beliefs with time. On the other hand, in the annealed version of the model, where the inflexibles are chosen at each time interval (that is, stubborness is occasional), the nonequilibrium phase transition which occurs in the absence of inflexibles is not affected. We also discuss the relevance of the model to real social systems.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Optimiza la producción de ramnolípidos a escala piloto con Pseudomonas aeruginosa 6K-11 en cultivos sumergidos por lotes. Con la finalidad de establecer los parámetros óptimos para la aireación, agitación y concentración de nitrógeno en la producción de ramnolipídos a escala piloto, se evaluaron dos niveles para cada factor: 0.25 vvm y 0.5 vvm (aireación), 50 RPM y 70 RPM (agitación) y 2.45 g/L y 4.89 g/L (concentración de NaNO3). Con estos tres factores y dos niveles para cada uno se evaluó la producción de ramnolípidos a escala piloto con el diseño experimental de Taguchi L4 [2]3 o arreglo L4. / Tesis

Orientador: Ederio Dino Bidoia / Banca: Marta Siviero Guilherme Pires / Banca: Dejanira de Franceschi de Angelis / Banca: Regina Teresa Rosim Monteiro / Banca: Carlos Renato Corso / Reumo: O herbicida Gesapax® (ingrediente ativo: ametrina) é utilizado em culturas de cana-de-açúcar para o combate a plantas daninhas. Devido as suas propriedades físico-químicas é encontrado com frequência nos corpos hídricos. Ao adicionar surfactantes químicos ao solo contaminado com compostos orgânico, ocorre uma diminuição da tensão superficial entre o contaminante e a fração solúvel do solo, favorecendo a degradação de compostos orgânicos, uma vez que o mesmo fica de maneira biodisponível à microbiota. Dessa forma, neste trabalho teve por objetivo avaliar a influência do herbicida Gesapax na atividade microbiana em amostras de solo, utilizando o surfactante químico Tween 80, como em forma de bioestimulação e adição de consórcio microbiano como forma de bioaumentação, a fim de atuarem como coadjuvantes no processo de metabolização do herbicida. Avaliou-se a atividade microbiana utilizando frascos respirométricos de Bartha e Pramer e utilizando a técnica de colorimetria com DCPIP. Fez-se a análise da biodegradação do herbicida por meio de ensaio de cromatografia (HPLC) em amostras retiradas dos respirometros. Também, avaliou-se a toxicidade do solo com o herbicida através dos organismos testes Saccharomyces cerevisiae, sementes de Lactuca sativa, Eruca sativa e Cucumis sativus, e a mutagenicidade em amostras de solo com a Tradescantia pallida (coração púrpura). Fez-se também a quantificação de bactérias e fungos do solo, finalizando com ensaio de biologia molecular, a fim de avaliar a perturbação da presença do herbicida no solo para a estrutura microbiana nos tratamentos. A adição de surfactante ao solo contaminado com herbicida, possibilitou grande aumento da atividade microbiana, em comparação ao solo controle. O mesmo ocorreu nos tratamentos com ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The herbicide Gesapax® (active ingredient: ametryne) is used in sugarcane crops to combat weeds. Due to its physico-chemical properties it is frequently found in water bodies. By adding chemical surfactants to the soil contaminated with organic compounds, there is a decrease in the surface tension between the contaminant and the soluble fraction of the soil, favoring the degradation of organic compounds, in a bio-available way. Thus, the objective of this work was to evaluate the influence of the Gesapax herbicide on microbial activity in soil samples, using the chemical surfactant Tween 80, as in the form of biostimulation and addition of microbial consortium as a form of bioaumentation, to act as adjuvants in the process of metabolizing the herbicide. Microbial activity was evaluated using Bartha and Pramer respirometric flasks and using the DCPIP colorimetric technique. The biodegradation of the molecule was analyzed by chromatography assay (HPLC) on samples taken from the respirometers. Soil toxicity with the herbicide was evaluated through the test organisms Saccharomyces cerevisiae, seeds of Lactuca sativa, Eruca sativa and Cucumis sativus, mutagenicity in soil samples with Tradescantia pallida (purple heart), quantification of bacteria and fungi soil, finishing with molecular biology assay, to evaluate the perturbation of the presence of the herbicide in the soil to the microbial structure in the treatments. The addition of surfactant to the soil contaminated with herbicide, allowed a great increase of the microbial activity, in comparison to the control soil. The same occurred in the treatments with herbicide and microbial consortium. The herbicide was metabolized in the presence of the surfactant and microbial consortium. There was also an increase in the quantification of the soil microbiota in the presence of these ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Valnice Boldrin Zanoni / Banca: Raquel Fernandes Pupo Nogueira / Banca: Marcos Roberto de Vasconcelos Lanza / Banca: Germano Tremiliosi Filho / Banca: Carlos Alberto Martinez Huitle / Resumo: O presente trabalho tem por objetivo explorar o uso de sistemas fotoeletroquímicos baseados em semicondutores bicomponentes nanoestruturados de Ti/TiO2/WO3 preparados por moldes de poliestireno (templates) e Si/TiO2/Pt preparado por junção metalica. A sintese desses materiais foi realizada por anodização e deposição eletroquímica e a presença do TiO2 na fase anatasio e WO3 monoclínico foi confirmada por difração de raios-X e EDS. Analises de espectroscopia de reflectancia difusa (DRS) mostraram que o material bicomponente possui absorção na região do visível pela observação do red shift. A caracterização eletroquímica foi realizada por medidas de voltametria linear sob irradiação UV e visível por diferentes lâmpadas: de vapor de mercúrio de alta pressão de 125 W e xenônio de 150 W com filtros que isolam a contribuição UV e visível. Maior fotocorrente foi obtida pela irradiação com a lâmpada de Hg de 11,0 mA cm-2 enquanto que na presença da lâmpada de Xe os valores obtidos foram de cerca de 0,4 mA cm-2. Posteriormente, os eletrodos de TiO2/WO3 foram aplicados na oxidação fotoeletrocatalítica do corante têxtil preto reativo 5 (RB5) e concomitante geração de hidrogênio em um reator de dois compartimentos. Seu desempenho foi comparado ao dos eletrodos de Ti/TiO2 e W/WO3. As melhores condições experimentais levaram a 100% de descoloração do corante para os eletrodos de Ti/TiO2, W/WO3 e Ti/TiO2/WO3 sob iluminação pela lâmpada de vapor de Hg, mineralização de 73, 80 e 85% e a produção de hidrogênio também revelou rendimentos estimados satisfatórios de 43, 34 e 46%, respectivamente. A natureza do gás H2 foi confirmada por cromatografia gasosa (CG-TCD). Completa remoção do corante RB5 também foi obtida para o fotoanodo de Si/TiO2/Pt e eficiencia estimada da geração de H2 foi de 30% com valores de fotocorrente da ordem de 0,5 mA cm-2 sob irradiação pela lâmpada de vapor de Hg nas melhores... / Abstract: The present project meets the challenge of exploring the use of photoelectrochemical devices based on Ti/TiO2/WO3 bicomponent nanostructured semiconductors prepared by templates and Si/TiO2/Pt prepared by microgrid heterojunction. The synthesis was performed by anodization and electrochemical deposition and the presence of anatese TiO2 and monoclinic WO3 was confirmed by X ray and EDS analysis. Difuse reflectance spectroscopy (DRS) analysis indicated Ti/TiO2/WO3 extension of optical absorption spectrum into the visible light region (red shift). Electrochemical characterisation was performed by linear sweep voltammetry under UV and visible light irradiation by two different lamp sources: 125 W high pressure mercury lamp and 150 W xenon lamp coupled to filters which isolte UV and visible light contribuition. Enhanced photocurrent response was obtained under high pressure mercury lamp 11,0 mA cm-2 and under xenon lamp irradiation the observed values are close to 0,4 mA cm-2. The Ti/TiO2/WO3 were used as photoanodes on the Reactive Black 5 (RB5) photoelectrochemical oxidation and simultaneous hydrogen generation in a two compartment PEC reactor. The photoanode's performance was compared to the pure Ti/TiO2 nanotubes and W/WO3 nanoporous electrodes. The best experimental conditions leaded to 100% dye discoloration in the presence of TiO2, WO3 e TiO2/WO3 under mercury lamp irradiation, 73, 80 and 85% mineralization and satisfactory hydrogen generation estimated efficiencies of 43, 34 and 46%, respectively. Hydrogen generation was confirmed by gas chromatography analysis (CG/TCD). Complete dye degradation was obtained under UV and visible light irradiation of Si/TiO2/Pt photanodes and 30% of estimated hydrogen generation efficiency and 0,5 mA cm-2 photocurrent response under mercury lamp irradiation under the best experimental conditions. Dye removal and by-products generation were confirmed by LC-MS/MS by the detection of m/z 137, 280, 210, 297... / Doutor

O objetivo deste estudo foi investigar longitudinalmente a transmissão de Streptococcus mutans em um grupo de famílias brasileiras de baixa renda. Um critério de inclusão importante foi o de todos os adultos conviverem na mesma casa com a criança. Participaram da pesquisa 14 mães, pais e crianças e 8 avós. Amostras de saliva das crianças foram coletadas em quatro visitas durante 22 meses, para pesquisa de S.mutans. Foram positivas apenas 8 crianças, que tiveram os seus isolados e os isolados de suas famílias identificados pelo método de hibridização DNA-DNA. Um total de 506 isolados de S.mutans foi genotipado pelo método de AP-PCR, usando o primer OPA-02. Foram detectados 20 genótipos diferentes nas 8 famílias, variando de 1 a 5 nos adultos e 1-2 nas crianças. Todas as mães e alguns pais e avós compartilharam genótipos com as crianças. Em todas as famílias foram encontrados genótipos homólogos nos adultos. Alguns genótipos foram estáveis, e outros, se perderam, mas o compartilhamento pode favorecer a contínua reinfecção. Três crianças desenvolveram cárie no período. O encontro de genótipos de cada membro da família na criança e o compartilhar de genótipos nos adultos, sugerem uma reavaliação de modelos preventivos antimicrobianos focalizados apenas na figura materna. / The objective of this study was to investigate in a longitudinal study the transmission of Streptococcus mutans in Brazilian families of a low socioeconomic status. An important entry criterion for the study was to include all members of a household in the study. The study cohort was comprised of 14 mothers, fathers and children and 8 grandmothers. Saliva samples were collected for S. mutans analysis in 4 visits during 22 months. Only eight children were positive for S. mutans by employing DNA-DNA hybridization that was also applied to household members. A total of 506 isolates of S. mutans were genotyped by AP-PCR with the primer OPA-02. Twenty genotypes were detected in 8 families ranging from 1 to 5 in the adults and 1-2 in the children. All mothers and some fathers and grandmothers shared similar genotypes with the children. In all families homologous genotypes were encountered among adults. Some genotypes were stable, and others were lost although sharing a similar environment may favor additional transmission episodes. Three children developed decay during the study period. The fact that children shared genotypes from all household members suggest that reevaluation of preventive methods aimed at suppressing S. mutans infections should include additional family members and not only the mothers.

Made available in DSpace on 2019-03-29T23:53:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-25 / Breast cancer remains is a malignant tumor caused by abnormal proliferation of breast cells. Primary care actions for the control of this neoplasm include Health Promotion and early detection that should be performed by healthcare professionals. This study aimed to analyze the work of Community Health Workers (CHW) in primary care for the Early Detection of Breast Cancer (EDBC) in Fortaleza, Ceará. A quantitative cross-sectional and analytical study was conducted in combination with qualitative data due to the possibility of complementation that both approaches allow. Quantitative data were collected using a structured questionnaire applied to 350 community health workers from 28 basic health units of the six regional executive secretariats of Fortaleza. The second stage consisted of six focus groups that included a total of 64 health workers from six health units. Data were collected from June to December 2014. Quantitative analysis was performed using SPSS 20.0 and applying Descriptive Statistics and tests of association. Qualitative analysis was performed based on Content Analysis, identifying themes and subthemes whose interpretation was founded on literature review, public policies and the concept of problem-solving capacity. Ethical precepts were respected according to Resolution 466/2012 under opinion No. 618.818. Socioeconomic and demographic characteristics revealed that 24% of CHW belong to Secretariat V and 37.7% were aged 36-45 years; 57.1% were married/common-law marriage; 59.7% had a complete high school education; 54.6% had a household monthly income from two to four minimum wages; 75.7% worked in primary care from one to nine years. Behavioral characteristics revealed that 72.3% of interviewees performed Breast Self-exam (BSE); 59.5% performed it sometimes; 54.3% never underwent mammography and 76.0% had no history of breast cancer in the family. Of the family cases, 70.2% were second-degree relatives and 48,8% of the individuals had no attitudes towards the case. CHW of the health secretariats of Fortaleza know the risk factors (86.6%); know the importance of early detection of breast cancer for fighting off the disease (97.1%); know the breast ultrasound (76.6%); the BSE (70.6%); the clinical breast exam (46%); the mammography (92.9%); know the best time to perform the BSE is from eight to ten days after the last period (57.1%); say the age recommended for mammography in women without risk factors (21.1%); and know where they should refer women with suspected breast cancer (94.6%). When asked whether they attended a course about breast cancer, 86.9% of them did not attend it; 70% said the Health Secretariat does not encourage them to attend it; 74.6% said there is a lack of qualification; 65.7% lack of knowledge; 53.7% lack of educational materials and 61.7% lack of practical training. CHW advise (88.5%) and teach (65.4%) how to perform BSE; had contact with suspected case of breast cancer (23.3%) and know what to do in case of a suspected breast cancer (24.3%). Regarding nurses who perform systematic meetings for discussing cases more often, Secretariat IV stuck out for having a higher percentage (90,6%) of have greater support from the service management to refer suspected cases of breast cancer (93.7%). Secretariat V units with educational materials (16,7%), allowing a more efficient development of Health Promotion actions. CHW from Secretariat VI The Content Analysis of focus groups favored the definition of four themes ("incipient knowledge", "workers' difficulties in the early detection of breast cancer", "actions" and "perceived needs for practice") and fifteen subthemes. These findings correlate and show CHW's view of their performance in the EDBC. According to CHW, there is a lack of knowledge, qualification, effective actions and support from the health service manager with a focus on the early detection of breast cancer. Thus, it is necessary to expand the coverage of these actions, allowing the EDBC to be systematized in primary care services. The study shows that CHW need educational strategies for the EDBC, minimizing the rates of late diagnosis. / O câncer de mama compreende-se como um tumor maligno em decorrência da multiplicação desordenada das células da mama. As ações de atenção primária para o controle dessa neoplasia abrangem a Promoção da Saúde e detecção precoce que devem ser desenvolvidas pelos profissionais de saúde. Este trabalho objetivou analisar a atuação dos Agentes Comunitários de Saúde (ACS) na atenção primária para Detecção Precoce do Câncer de Mama (DPCM) em Fortaleza-CE. Utilizou-se o estudo quantitativo, de natureza analítica e transversal, que se une aos dados qualitativos, em razão da possibilidade de complementação que as abordagens proporcionam. Para a coleta de dados quantitativos, aplicou-se um questionário estruturado a 350 agentes comunitários de saúde nas 28 unidades básicas de saúde das seis coordenações regionais de fortaleza. Na segunda etapa, foram realizados seis grupos focais, incluindo um total de 64 agentes de saúde, de seis unidades de saúde. Os dados foram coletados de junho a dezembro de 2014. A análise quantitativa realizou-se por meio do programa SPSS, versão 20.0, empregando-se Estatística Descritiva e testes de associação. A análise qualitativa foi feita à luz da Análise de Conteúdo, identificando-se as temáticas de análise e subtemáticas, cuja interpretação se fundou com a revisão de literatura, nas políticas de saúde e conceito de resolubilidade. Os preceitos éticos foram respeitados, segundo resolução 466/2012 com parecer de número 618.818. A caracterização sociodemográfica mostrou que a maioria dos ACS pertencem à "Regional" V (24%), com idade de 36 a 45 anos (37,7%); casado/união estável (57,1%); com ensino médio completo (59,7%); renda familiar de dois a quatro salários-mínimos (54,6%); com um a nove anos de tempo de serviço na atenção básica (75,7%). 72,3% dos ACS realizam o Autoexame da Mama (AEM); na frequência às vezes (59,5%); nunca fizeram mamografia (54,3%); não tiveram caso de câncer na família (76,0%); dos que tiveram (24%), 70,2% são parentes de 2° grau; a conduta do ACS diante do caso foi não ter nenhuma atitude (48,8%). As ACS das "regionais" de saúde de Fortaleza conhecem os fatores de risco (86,6%); sabem da importância da detecção precoce do câncer de mama para enfrentamento da doença (97,1%); conhecem o ultrassom de mamas (76,6%); o AEM (70,6%); o exame clínico das mamas (46%); a mamografia (92,9%); sabem identificar o melhor período para realização do AEM (57,1%); sabem a idade preconizada para realização da mamografia em mulheres sem fatores de risco (21,1%); e sabem para onde devem encaminhar mulheres suspeitas de câncer de mama (94,6%). Não fizeram curso sobre o câncer de mama (86,9%); 70% reportam que a Secretaria de Saúde não estimula a realização deste; falta capacitação (74,6%); falta conhecimento (65,7%); falta material educativo (53,7%) e falta treinamento prático (61,7%). Os ACS orientam (88,5%) e ensinam (65,4%) o AEM; tiveram contato com caso suspeito de câncer de mama (23,3%) e sabem o que fazer quando suspeitar de câncer de mama (24,3%). Na "Regional" IV encontra-se os enfermeiros que com maior frequência realizam reuniões sistemáticas para discussão de casos (90,6%), bem como, o ACS que tem mais apoio na gestão do serviço para direcionar os casos suspeitos de câncer de mama (93,7%). Na "Regional" V encontra-se mais material educativo (16,7%), na qual pode desenvolver com mais eficiência suas ações de Promoção da Saúde. A Análise de Conteúdo dos grupos focais favoreceu a definição de quatro temáticas, que se configuram ("conhecimento incipiente", "dificuldades dos agentes na detecção precoce do câncer de mama", "ações" e "necessidades sentidas para prática"). Estes dados correlacionam-se entre si e mostram a visão do ACS sobre sua atuação na DPCM. Na óptica dos ACS, faltam conhecimento, capacitação, ações efetivas e apoio do gestor no serviço de saúde com enfoque na detecção precoce do câncer de mama. Assim, faz-se necessário ampliar a abrangência dessas ações, permitindo que a DPCM seja sistematizada, adentrando os serviços de atenção primária. O estudo mostra que ACS necessita de estratégias de cunho educativo que possibilitem a DPCM, minimizando os índices de diagnóstico tardio.

Ainda que descrita pela primeira vez em 1893 por Emil Kraepelin, a esquizofrenia continua sendo uma doença mental extremamente debilitante e de difícil tratamento. A introdução dos antipsicóticos típicos na década de 50 e dos atípicos na década de 90 mudou consideravelmente a realidade dos esquizofrênicos, no entanto a baixa eficácia (principalmente quanto aos sintomas negativos e cognitivos) associada a alta incidência de efeitos adversos requer inovação na farmacodinâmica de antipsicóticos. Alstonina, um alcaloide indólico, é o componente majoritário de uma preparação utilizada para tratar pacientes esquizofrênicos identificada em 1993 durante uma expedição etnofarmacológica à Nigéria. Alstonina mostra em camundongos um perfil tipo antipsicótico atípico, mas aparentemente difere dos compostos conhecidos sugerindo possíveis diferenças no mecanismo de ação. O objetivo dessa tese foi dar continuidade ao esclarecimento do mecanismo de ação da alstonina, especialmente ao que se refere a sua modulação sobre sistema dopaminérgico e serotonérgico. Foram utilizados modelos comportamentais com antagonistas específicos, autoradiografia quantitativa e captação sinaptossomal de dopamina para avaliar o efeito de alstonina sobre os receptores 5HT2A, 5HT2C, D2 e transportador de dopamina. Os resultados mostraram que o efeito tipo antipsicóticos de alstonina é dependentes dos receptores 5HT2A, 5HT2C; além disso mostrou-se que alstonina liga-se diretamente a receptores 5HT2A mas modula indiretamente receptores 5HT2C. O efeito de alstonina sobre esses receptores pode representar uma estratégia peculiar para modular seletivamente a atividade dopaminérgica em regiões corticais e límbicas, compatível com o desequilíbrio alegado para a patofisiologia da esquizofrenia. Um achado digno de nota é que diferindo de todos os antipsicóticos em clínica, os nossos resultados mostram que alstonina não possui afinidade por receptores dopaminérgicos D2. Ainda que preliminares, os nossos dados mostram que a administração aguda de alstonina aumenta a captação de dopamina, um mecanismo possível para diminuir a ativação de receptores dopaminérgicos pós sinápticos responsáveis por sintomas positivos. Ainda que haja lacunas no conhecimento do mecanismo de ação de alstonina, este estudo reforça a hipótese de um mecanismo de ação inovador potencialmente útil como protótipo para novos antipsicóticos. / Although first described in 1893 by Emil Kraepelin, schizophrenia continues to be an extremely debilitating and difficult to treat mental illness. The introduction of typical antipsychotics in the 50s and atypical in the 90s has considerably changed the reality of schizophrenics, but the low efficacy (especially for the negative and cognitive symptoms) associated with the high incidence of adverse effects requires innovation in the pharmacodynamics of antipsychotics. Alstonine, an indole alkaloid, is the major component of a preparation used for treating mental patients identified in 1993 during and ethnopharmacology field study in Nigeria. In mice alstonine shows the profile of an atypical antipsychotic but, apparently, differs from known compounds suggesting possible differences in the mechanism of action. The aim of this thesis was to continue to clarify the mechanism of action of alstonine, especially with regard to its modulation of dopamine and serotonin system. Behavioral models, specific antagonists, quantitative autoradiography, and dopamine synaptosomal uptake assays were used to evaluate the effect of alstonine on the 5HT2A, 5HT2C, and D2 dopamine transporter. The results showed that the antipsychotic-like effects of alstonine depend on the 5HT2A and 5HT2C serotonin receptor subtypes; additionally, we showed that alstonine directly binds to 5HT2A receptors but indirectly modulates 5HT2C. The effects of alstonine on these receptors may represent a unique strategy to selectively modulate dopamine activity in limbic and cortical regions, consistent with the imbalance alleged for schizophrenia pathophysiology. Noteworthy is the finding that unlike all antipsychotics in clinical practice, our results show that alstonine has no affinity for dopamine D2 receptors. Though preliminary, our data indicate that acute administration of alstonine increases the uptake of dopamine, a possible mechanism for decreasing the activation of post synaptic dopamine receptors responsible for schizophrenia positive symptoms. In spite of the gaps in the knowledge of the alstonine antipsychotic mechanism of action, this study reinforces the hypothesis that it presents a novel mechanism of action potentially useful as a prototype for innovative antipsychotics.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-18Bitstream added on 2014-06-13T19:01:04Z : No. of bitstreams: 1 bannwart_cf_dr_botib.pdf: 1094046 bytes, checksum: 3e5c01fb3fd618a497a73f357427ec4d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Silibinin is the major active component of silymarin (Silybum marianum), a polyphenolic plant flavonoid that has anti-inflammatory, cytoprotective and anticarcinogenic effects. The modulatory effect of silibinin on monocyte function against Paracoccidioides brasiliensis (Pb18) has not yet been demonstrated. The present study investigated whether the effect of silibinin on NF-kB pathways may affects the production of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-10 (IL-10), Transforming growth factor beta (TGF-β1), prostaglandin E2 (PGE2) and nitric oxide (NO), as well as the fungicidal activity of human monocytes challenged in vitro with Pb18. Peripheral blood monocytes from healthy individuals were treated with or without 5 uM and 50 uM silibinin and challenged with Pb18 or were stimulated with lipopolissaccharide (LPS). After 18 h of culture TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 were determined by ELISA, while NO release was quantified by the accumulation of nitrite in the supernatants using the standard Griess assay. Fungicidal activity of monocytes against Pb18 was assessed after cell incubation with interferon-gamma, culture with or without silibinin for 18 h and challenge with Pb18 for 4h. NF-kB activation in the cultures was evaluated by flow cytometry and ELISA after monocyte stimulation with Pb18 or LPS for 30 min. Silibinin at 50uM concentration partially inhibited p65NF-kB activation as observed by reduction in the number of cells expressing this factor, that was confirmed by low concentration detection of p65NF-kB in the nucleus. This silibinin effects resulted in suppression of TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 and NO production, but did not affect fungicidal activity of monocytes against Pb18. The modulatory effect of silibinin on the monocytes inflammatory response against P. brasiliensis might be important to establish an efficient and beneficial immune response of the host against the fungus

Orientador: Benedito Barravieira / Coorientador: Rui Seabra Ferreira Junior / Banca: Lucilene Delazari dos Santos / Banca: Jean-Philippe Chippaux / Banca: Debora de Mello Gonçalves Sant Ana / Banca: Daniel C. Pimenta / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da melitina natural na infecção experimental por Leishmania (L.) infantum chagasi, bem como seu efeito sobre a produção de citocinas pró e antinflamatórias e metabólitos do oxigênio e do nitrogênio. O fracionamento do veneno foi realizado por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC-RP) usando-se colunas C8 e C18. As frações foram identificadas por sequenciamento peptídico pela química degradativa de Edman e espectrometria de massas do tipo eletrospray. A determinação da atividade anti-leishmania, contra formas promastigotas foi realizada de forma seriada partindo-se de uma concentração inicial de melitina de 100 μg/mL observando-se o valor de CE50 de 28,29 μg/mL. Foi realizado estudo de citotoxicidade em macrófagos peritoniais isolados de camundongos BALB/c, obtendo-se um valor de CE50 de 5,73 μg/mL. A viabilidade celular de ambos os ensaios foi avaliada por meio do estudo da atividade oxidativa mitocondrial (MTT). Os estudos em formas amastigotas intracelulares demostraram um valor de CE50 de 1,47 μg/mL. Quanto a produção de citocinas por celulas desafiadas com o parasita e tratados com a melitina observou-se que houve tendência de aumento para as citocinas inflamatórias IL12 e TNF-α nas concentrações utilizadas e nos respectivos períodos de tempo. A melitina não interferiu na produção de IFN-γ e TGF-β, porém observamos diminuição significativa nos níveis de IL-10, fato semelhante observado na produção de H2O2 e NO. Conclui-se que a melitina demonstrou eficácia in vitro contra a espécie Leishmania (L.) infantum chagasi, podendo ter atuado de forma direta contra o parasita intracelular e/ou por meio da modulação da resposta imune levando a ativação de macrófagos, em que estes produziram outras substâncias que não NO e H2O2, proporcionando uma redução da carga parasitária dentro do macrófago, ... / Abstract: The purpose of this research was to evaluate the effect of natural melittin extracted and purified from the venom of Apis mellifera over an in vitro infection with Leishmania (L.) infantum chagasi, well as their effects on the production of proinflammatory and anti-inflammatory, and metabolites of oxygen and nitrogen. The fractionation of the venom was accomplished by high-performance liquid chromatography system (RP-HPLC) using C18 and C8 columns. These fractions were determined by peptide sequence using a combination of Edman degradation sequence analysis and electrospray ionization (ESI) mass spectrometry. The ascertainment of anti-leishmania activity against promastigote forms was conducted in a seriate form, beginning with an initial melittin concentration of 100μg/mL, noting an EC50 value of 28.29 μg/mL. Cytotoxicity study was conducted in isolated peritoneal macrophages from BALB/c mice, obtaining an EC50 value of 5.73μg/mL. The cell viability of both trials was assessed by means of the study of mitochondrial oxidative activity (MTT). The studies demonstrated an EC50 value of 1.47μg/mL on intracellular amastigotes. As the cytokines production by cells challenged with parasite and treated with melittin, was observed that there was an increased tendency for inflammatory cytokines IL-12 and TNF-α at used concentrations and in the respective periods of time analyzed. The melittin did not interfered in the IFN-γ and TGF-β production, however were observed a significant decrease in the IL- 10 levels, which was similarly observed in the H2O2 and NO production. It is concluded that melittin has shown in vitro efficacy against Leishmania (L.) infantum chagasi and may have a directly behavior against the intracellular parasite and/or by the immune response modulation, leading to an macrophages activation, and after, a production of other substances than NO and H2O2, providing a reduction in ... / Doutor