Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-27T11:50:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1098371 bytes, checksum: c10e5cfb5ddc01352ee2d610856b7265 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-27T11:50:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1098371 bytes, checksum: c10e5cfb5ddc01352ee2d610856b7265 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os flavivirus West Nile (WNV), Dengue (DENV) e Zika (ZIKV) são causadores de doenças de importância epidemiológica global. Cerca de 50-100 milhões de novas infecções por DENV são estimadas para ocorrer anualmente em mais de 100 países endêmicos, com uma maior propagação documentada para áreas anteriormente não afetadas. WNV é atualmente a causa mais comum de doença neurológica causada por um arbovírus no mundo. ZIKV está associado com um aumento significativo do número de crianças nascidas com microcefalia e distúrbios neurológicos, como a síndrome de Guillain-Barré. Apesar de alguns flavivirus já apresentarem vacinas disponíveis, DENV, WNV e ZIKV ainda não apresentam vacinação eficiente e global. Diante dos desafios para o desenvolvimento de uma vacina, pesquisas para terapias antivirais têm se tornado relevantes, principalmente para casos graves das três doenças. As proteínas virais NS3 e E são alvos moleculares particularmente interessante para compostos antiflavivirais devido aos seus papéis centrais no ciclo de vida viral. Neste trabalho, derivados da indan-1,3-diona foram testados contra esses alvos. Foi realizado ensaio enzimático com a protease de WNV; ensaios virucida, pré-tratamento e pós-tratamento em células Vero com os vírus DENV e ZIKV; além de estudo de docking para a proteína E do DENV e ZIKV e protease de WNV. A indan-1,3-diona (12) se destacou apresentando alta taxa de inibição viral e baixa toxicidade contra WNV, DENV e ZIKV, atuando como inibidor alostérico da protease de WNV e por neutralização direta do DENV e ZIKV. Sendo uma molécula obtida por um novo e mais eficiente processo sintético, é promissora e sua avaliação e aprimoramento devem ser continuadas na cadeia de etapas de validação para uma nova droga antiviral. / The flaviviruses West Nile (WNV), Dengue (DENV) and Zika (ZIKV) cause diseases of global epidemiological importance. About 50-100 million of new DENV infections are estimated for a yearly total of 100 endemic countries, with a further documented spread to previously unaffected areas. WNV is currently the most common cause of neurological disease caused by an arbovirus in the world. ZIKV is associated with a significant increase in the number of children born with microcephaly and neurological disorders, such as Guillain-Barré syndrome. Although some flaviviruses already have available vaccines, DENV, WNV and ZIKV still do not have efficient and global vaccination. Facing the challenges for the development of a vaccine, the trials for antiviral therapies has made relevant, especially for the severe cases of the three diseases. The NS3 and E viral proteins are interesting molecular target for antiflaviviral compounds due to their central roles on the viral life cycle. In this work, indan-1,3-dione derivatives were tested against these targets. An enzymatic assay was performed with a WNV protease; virucidal, pre-treatment and post-treatment assays in Vero cells with the DENV and ZIKV viruses was performed; in addition to molecular docking for an E protein of DENV and ZIKV and WNV protease. Indan-1,3-dione (12) has been shown to have high viral inhibition rate and low toxicity against WNV, DENV and ZIKV, acting as an allosteric inhibitor of WNV protease and by direct neutralization of DENV and ZIKV. Being a molecule obtained by a new and more efficient synthetic process, it is promising and its evaluation and improvement should be continued in the chain of validation steps for a new antiviral drug.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-09T12:59:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1598930 bytes, checksum: a71394c458a243aa0d62d135e71d642d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-09T12:59:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1598930 bytes, checksum: a71394c458a243aa0d62d135e71d642d (MD5) Previous issue date: 2017-05-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A mastite bovina ocasiona a inflamação da glândula mamária, podendo ser contagiosa ou ambiental. Antimicrobianos não convencionais, como o eugenol, pode ser uma alternativa para o controle desta enfermidade. Porém a elevada hidrofobicidade e volatilização do eugenol, dificultam sua utilização em sistemas aquosos. Visando minimizar estes aspectos negativos, foram obtidos nanocarreadores à base de Albumina Sérica Bovina (BSA) veiculando eugenol (E) em diferentes pH (3,5, 5,0 e 7,0) e avaliado sua ação antimicrobiana pela Concentração Mínima Inibitória (CMI), Concentração Mínima Bactericida (CMB), teste de difusão em ágar; viabilidade celular por citometria de fluxo (CMF), Microscopia eletrônica de varredura (MEV) e teste de imersão para remoção de células aderidas em cupons. A caracterização físico-química dos nanocarreadores foi realizada por tamanho, potencial zeta, estabilidade cinética e docking molecular. As amostras BSA-E apresentaram pela técnica de microdiluição, CMB iguais paraS. aureus e E. coli: de 0,27 μL· mL^-1 para BSA-E em pH 3,5 e 0,55 μL· mL^-1 em pH 5,0 e 7,0. Em contrapartida, as amostras com eugenol livre (E) apresentaram CMB com concentrações mais elevadas: 1,10 μL· mL^-1 em pH 3,5 e 2,20 μL· mL^-1 em pH 5,0 e 7,0. A partir da análise por CMF, foi verificado que as amostras com BSA-E independentemente do pH e da estrutura da parede celular, foram capazes de inativar mais de 99% das células de isolados bacterianos em menor tempo de imersão (5 min). Estes dados corroboram com as análises de MEV, que demostraram acentuada modificação na estrutura da membrana celular após imersão com BSA-E por 30 min. A partir do teste de imersão por 30 min, de cupons de aço inoxidável e borracha utilizada em teteiras de ordenhadeiras mecânicas com células aderidas de E. coli e S. aureus, foi possível verificar que somente as formulações BSA-E, independentemente do pH, atenderam às recomendações da Organização Mundial de Saúde (OMS) de até 50 UFC·cm^-2 de mesófilos aeróbios, para a superfície de aço-inoxidável, embora constatado, uma redução de 99,99% de células aderidas na superfície da borracha. As amostras BSA e BSA-E, em pH 3,5, apresentaram diâmetro hidrodinâmico de 10,66 ± 0,13 nm e 11, 03 ± 0,015 nm, respectivamente, superior ao pH 5,0 (7,39 ± 0,18 nm e 7,95 ± 0,014 nm) e pH 7,0 (8,12 ± 0,29 nm e 8,17 ± 0,13 nm). Em pH 3,5 o potencial zeta para BSA e BSA-E foram respectivamente de + 8,8 ± 0,14 mV e + 8,91 ± 0,15 mV. Para o pH 5,0 e 7,0 foram de -3,95 ± 0,09 mV e - 4,12 ± 0,12 Mv e -12,57 ± 0,18 mV e -12,39 ± 0,13 mV, para BSA e BSA-E, respectivamente. Os valores de diâmetro hidrodinâmico, potencial zeta e pH, mantiveram-se estáveis durante 15 dias. A técnica por docking molecular, foi capaz de predizer que a ligação eugenol com a BSA foi termodinamicamente favorável, e que eugenol está localizado no interior de um bolsão formado pela interação entre os três domínios (I, II e III) da BSA, sendo este bolsão composto principalmente de aminoácidos hidrofóbicos e básicos, que favoreceram a interação do ligante com a proteína. Neste contexto o eugenol nanocarreado por BSA demonstra ser uma alternativa viável para o controle e ou prevenção da mastite bovina ocasionada por E. coli e ou S. aureus. / Bovine mastitis causes inflammation of the mammary gland, and may be contagious or environmental. Unconventional antimicrobial agents, such as eugenol, may be an alternative for the control of this disease. However, the high hydrophobicity and volatilization of eugenol make it difficult to use in aqueous systems. In order to minimize these negative aspects, Bovine Sodium Albumin (BSA) nanocarriers were obtained by carrying eugenol (E) at different pH (3.5, 5.0 and 7.0) and evaluated its antimicrobial action by the Minimal Inhibitory Concentration), Minimum Bactericidal Concentration (CMB), agar diffusion test; Cell viability by flow cytometry (CMF), Scanning Electron Microscopy (SEM) and immersion test to remove adhered cells in coupons. The physico-chemical characterization of the nanocarreadores was performed by size, zeta potential, kinetic stability and molecular docking. The BSA-E samples showed the same microbial dilution for S. aureus and E. coli: 0.27 μL · mL^-1 for BSA-E at pH 3.5 and 0.55 μL · mL^-1 PH 5.0 and 7.0. In contrast, formulations with free eugenol (E) showed higher concentrations of CMB: 1.10 μL · mL ^-1 at pH 3.5 and 2.20 μL · mL^-1 at pH 5.0 and 7.0. From the CMF analysis, it was verified that BSA-E samples, regardless of pH and cell wall structure, were able to inactivate more than 99% of the cells of bacterial isolates in a shorter immersion time (5 min). The results corroborate the SEM analyzes, which demonstrated a marked change in the cell membrane structure after immersion with BSA-E for 30 min. From the 30 min immersion test of stainless steel coupons and rubber used in mechanical milking teats with adhered E. coli and S. aureus cells, it was possible to verify that only the BSA-E formulations, regardless of pH, Met the recommendations of the World Health Organization (WHO) of up to 50 CFU · cm -2 of aerobic mesophiles, for the stainless-steel surface, although found, a 99.99% reduction of adhered cells on the rubber surface. The BSA and BSA-E samples, at pH 3.5, had a hydrodynamic diameter of 10.66 ± 0.13 nm and 11.03 ± 0.015 nm, respectively, higher than pH 5.0 (7.39 ± 0.18 Nm and 7.95 ± 0.014 nm) and pH 7.0 (8.12 ± 0.29 nm and 8.17 ± 0.13 nm). At pH 3.5 the zeta potential for BSA and BSA-E were respectively 8.8 ± 0.14 Mv and + 8.91 ± 0.15 Mv respectively. For pH 5.0 and 7.0 were -3.95 ± 0.09 Mv and - 4.12 ± 0.12 Mv and -12.57 ± 0.18 Mv and -12.39 ± 0.13 Mv, for BSA and BSA- E, respectively. The values of hydrodynamic diameter, zeta potential and pH remained stable for 15 days. The molecular docking technique was able to predict that the eugenol binding with BSA was thermodynamically favorable, and that eugenol is located inside a pocket formed by the interaction between the three BSA domains (I, II and III), this being A pocket composed mainly of hydrophobic and basic amino acids that favored the interaction of the ligand with the protein. In this context, BSA nanoparenolated eugenol is a viable alternative for the control and / or prevention of bovine mastitis caused by E. coli and / or S. aureus.

THIAGO, Vinicius da Silva. Arquitetura multi-agentes para detecção de intrusão distribuida. 2012. 101 f. Dissertação (Mestrado em ciência da computação)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-07-12T18:46:20Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_vsthiago.pdf: 6549625 bytes, checksum: 57aa3af5bfc03f007d9bea048190cfb7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rocilda Sales (rocilda@ufc.br) on 2016-07-22T12:47:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_vsthiago.pdf: 6549625 bytes, checksum: 57aa3af5bfc03f007d9bea048190cfb7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-22T12:47:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_vsthiago.pdf: 6549625 bytes, checksum: 57aa3af5bfc03f007d9bea048190cfb7 (MD5) Previous issue date: 2012 / The growing concern about information security in computer networks is responsible for constantly producing new ways to defend them. Within this context, the development of new ways of intrusion detection plays an important role in protecting the information. Detection systems must be efficient and, at the same time, must not overload the network or the processing capabilities of the nodes within it. In order to be effective, a system must base its decisions on as many sources of information as possible and organize knowledge in a way that allows a functional communication between those sources. This dissertation describes the proposal for a Distributed Intrusion Detection System architecture that uses mobile agents and an ontology for information sharing. Mobile agents provide a convenient way to distribute the detection process, enabling peer to peer cooperation between network nodes without generating much additional traffic. The ontology provides an organized way of storing and sharing knowledge. The proposed architecture has been implemented using the Java programming language and JADE framework and a test laboratory has been assembled to verify the operation of the system. The tests results confirmed that a distributed multi-agent architecture that uses an ontology can be effective in detecting attacks on networks and systems. / A crescente preocupação com a segurança da informação em redes de computadores é responsável por produzir constantemente novas formas de defender as mesmas. Dentro desse contexto, o desenvolvimento de novas formas de detecção de intrusão assume um papel muito importante na proteção das informações. Os sistemas de detecção de intrusão precisam ser eficientes e ao mesmo tempo não devem sobrecarregar a rede ou a capacidade de processamento dos nós que a compõem. Com o objetivo de ser eficiente, um sistema deve basear as suas decisões em tantas fontes de informação quanto forem possíveis e organizar o conhecimento de forma que permita uma comunicação funcional entre essas fontes. Este trabalho descreve a proposta de uma arquitetura de um Sistema de Detecção de Intrusão Distribuído que utiliza agentes móveis e uma ontologia para o compartilhamento da informação. Os agentes móveis proporcionam uma maneira prática de distribuir o processo de detecção, possibilitando cooperação ponto a ponto entre os nós da rede sem gerar muito tráfego adicional. A ontologia fornece uma maneira organizada de armazenar e compartilhar o conhecimento. A arquitetura proposta foi implementada utilizando a linguagem de programação Java e o framework JADE e foi montado um laboratório de testes para verificar o funcionamento do sistema. Os resultados obtidos com os testes confirmaram que uma arquitetura distribuída multi-agentes que faz uso de uma ontologia pode ser eficiente na detecção de ataques a redes e sistemas.

Improvisação tem sido considerada uma característica importante para agentes que pretendem operar de maneira consistente com a situação do momento, exibindo um comportamento credível e interessante. A improvisação deve estar presente tanto nos agentes individuais quanto nas sociedades de agentes. Desta maneira, esta tese irá abordar estes dois aspectos da improvisação. Propomos a visão de que, agentes capazes de realizar improvisação, os agentes improvisacionais, são um tipo de agente deliberativo capaz de solucionar problemas por improvisação. Neste sentido, buscamos identificar dentro de uma arquitetura clássica de agentes deliberativos, a arquitetura BDI (belief-desire-intention), a existência e/ou a possibilidade da inclusão de componentes de improvisação nesta arquitetura. Para resolver problemas complexos, estes agentes precisam estar agrupados em sociedades e estas sociedades, por sua vez, precisam produzir comportamentos coerentes. A coordenação é a área da Inteligência Artificial responsável por este objetivo. Propomos que a coordenação de agentes que improvisam pode ser realizada por meio de um processo de direção improvisacional, no sentido usado no contexto do teatro improvisacional. Ao longo deste documento, iremos mostrar nosso entendimento sobre agentes improvisacionais como agentes deliberativos e coordenação como direção improvisacional. Com isto, defende-se nesta tese que o uso da improvisação em agentes improvisacionais possibilita que os agentes improvisem comportamentos interativos, de maneira coerente, melhorando seu desempenho como solucionadores de problemas, criando e mantendo uma ilusão de vida para os agentes interativos e contribuindo para o aperfeiçoamento dos sistemas multiagentes.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:43:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 322859.pdf: 10872382 bytes, checksum: 0d07f647eea3fea87dfac2b70b47a73f (MD5) Previous issue date: 2013

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:59:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326946.pdf: 2794275 bytes, checksum: d917eb608c08841e41db6fd6634a4bab (MD5) Previous issue date: 2014 / A Polygala molluginifolia é uma planta nativa do sul do Brasil popularmente chamada de cânfora. Plantas do gênero Polygala têm sido usadas na medicina tradicional para o tratamento de diferentes patologias, inclusive doenças inflamatórias. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito anti-inflamatório do extrato bruto, frações e compostos obtidos da espécie Polygala molluginifolia (Polygalaceae) no modelo da pleurisia induzida pela carragenina em camundongos. O material vegetal da Polygala molluginifolia foi submetido a extração por maceração com etanol 96% para a obtenção do extrato bruto (EB). O EB foi submetido a procedimentos cromatográficos em silica gel para a obtenção de diferentes frações, dentre elas as frações aquosa (Aq), acetato de etila (AcOEt) e hexano (Hex). O composto 1 (5,3',4'-trihidroxi-6",6"-dimetilpirano [2",3":7,6] isoflavona) (Iso), foi isolado da fração AcOEt e o composto 2 (Rutina) (Rut), foi isolado da fração Aq e foram identificados por meio de espectroscopia de 1H e 13C NMR e quantificados por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-UV). A avaliação do efeito anti-inflamatório foi realizada por meio da contagem de leucócitos, neutrófilos e concentrações de exsudato. Foram utilizadas técnicas padronizadas descritas na literatura para verificar a atividade das enzimas mieloperoxidase (MPO) e adenosina-desaminase (ADA) e concentrações de nitrito/nitrato (NOx). Neste estudo também foi investigado o efeito da Polygala molluginifolia sobre a concentração e expressão do RNA mensageiro das citocinas fator de necrose tumoral alfa (TNF-?) e interleucina-1 beta (IL-1?), utilizando as metodologias de enzima imunoensaio (ELISA) e a reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-qPCR) e sobre a via de sinalização do fator nuclear kappa B (NF-kB), mais especificamente sobre a fosforilação da subunidade p65. Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 4 horas após a indução da pleurisia. Para todos os experimentos, a dexametasona (Dex, 0,5 mg/kg, i.p.) foi utilizada como fármaco de referência anti-inflamatória. A análise estatística utilizada foi o teste de variância ANOVA, complementado pelo teste de Neuman-Keuls, e quando necessário, foram realizados teste t de Student e correlação de Pearson. Valores de p < 0,05 foram considerados significativos. O EB, as as frações Aq, AcOEt e Hex, além dos compostos Iso e Rutina, foram capazes de reduzir a migração de leucócitos, as custas de neutrófilos e a exsudação formada na cavidade pleural (p < 0,05), além das atividades de: MPO (p < 0,01), ADA (p < 0,001). As concentrações de NOx também foram inibidas (p < 0,001), exceto quando os animais foram tratados com a rutina. Além disso, houve redução na concentração da TNF-? (p < 0,01) e IL-1? (p < 0,001). Os compostos isolados (Iso e Rutina) foram capazes de inibir a transcrição do RNAm do TNF-? (p < 0,01) e IL-1? (p < 0,001) além de reduzir significamente a fosforilação da subunidade p65 do NF-kB (p < 0,001). Finalmente, foi verificada uma correlação positiva entre a inibição na migração celular e exsudação com a capacidade de ambos compostos em reduzir a fosforilação da p65. Os resultados demonstraram que a P. molluginifolia tem importante ação anti-inflamatória e este efeito é devido, pelo menos em parte, a presença de Iso e Rutina. Além disso, esse efeito parece estar relacionado a capacidade dos compostos isolados interferirem na via de sinalização do NF-kB.<br> / Abstract : The Polygala molluginifolia is a plant native to southern Brazil that is popularly called "canfora". This study was conducted to investigate the anti-inflammatory activity of Polygala molluginifolia (Polygalaceae) on the mouse pleurisy model induced by carrageenan. The whole Polygala molluginifolia plant material was extracted by maceration with 96% ethanol. The crude hydroalcoholic extract (CE) was subjected to chromatographic procedures to produce derivate fractions, including aqueous (Aq), ethyl acetate (AcOEt), and hexane (Hex) fractions. Compound 1 (5,3',4'-trihydroxy-6?,6?-dimethylpyrano [2?,3?:7,6] isoflavone) (Iso), which was isolated from the AcOEt fraction, and Compound 2 (Rutin) (Rut), which was isolated from the Aq fraction, were identified using 1H and 13C NMR spectroscopy and quantified using an HPLC apparatus. In this experimental protocol, swiss mice were used in the murine carrageenan-induced pleurisy model previously described by Saleh et al. (1996). The anti-inflammatory effect was evaluated by total leukocyte and neutrophil count, exsudate concentration, myeloperoxidase (MPO) and adenosine-deaminase (ADA) activities, nitrite/nitrate concentrations (NOx), concentrations and mRNA expression of tumor necrosis factor alpha (TNF-?? and interleukin 1-beta (IL-1). In addition, we studied the effect of Polygala molluginifolia isolated compounds on the nuclear factor kappa B (NF-?B). The inflammatory parameters were evaluated 4 hours after pleurisy induction. Dexamethasone (Dex, 0,5 mg/kg, i.p.) was used as reference anti-inflammatory drug. For statistical analysis were used the variance test (ANOVA), complemented by Newman-Keuls and when required, Student's t test and Pearson's coeficient. p < 0.05 was considered significant. The CE, Aq, AcOEt, and Hex fractions, and the isolated compounds Iso and Rut were able to reduce cell migration and exudation (p < 0.05). Furthermore, the plant material also decreased the MPO (p < 0.01) and ADA (p < 0.001) activities and the nitric oxide (NOx) (p < 0.001), TNF-a (p < 0.001), and IL-1ß (p < 0.001) levels. In addition, Iso and Rut reduced the TNF-a (p < 0.01) and IL-1ß (p < 0.001) mRNA expression levels and significantly decreased NF-?B p65 phosphorylation (p < 0.001). Finally, was observed a positive correlation on leukocyte migration and exudate levels with inhibition upon p65 phosphorilation. The results show that P. molluginifolia has a significant anti-inflammatory action and that this effect is due, at least in part, to the presence of Iso and Rut in large amounts. Moreover, this effect was found to be closely related to the inhibitory effects of the isolated compounds on the NF-kB pathway.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:18:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327701.pdf: 5636430 bytes, checksum: f6b32fbdb2d828adaa67c1e5abbc2f65 (MD5) Previous issue date: 2014 / O pré-condicionamento cerebral é caracterizado por um estado de tolerância transitória do tecido nervoso a um estímulo letal e/ou tóxico evocado por um dano moderado prévio. Estudos têm demonstrado que este estado de tolerância cerebral pode ser obtido através do pré-condicionamento químico com N-metil-D-aspartato (NMDA), o agonista sintético seletivo dos receptores NMDA e pode ser promovido in vivo pela administração de dose subtóxica deste agente. Contudo, as vias de sinalização e receptores ou canais iônicos associados ao processo de neuroproteção ativado pelo pré-condicionamento químico ainda precisam ser elucidados. Desta forma, investigou-se o envolvimento dos receptores de adenosina (A1R e A2AR) e as vias de sinalização celular no mecanismo de neuroproteção pelo pré-condicionamento com NMDA in vivo (em camundongos) e in vitro (em cultura primária de neurônios e em fatias hipocampais). Os resultados demonstraram que o pré-condicionamento com NMDA aumenta a afinidade de união do A1R ao ligante, sem alterar seus níveis proteicos no hipocampo de camundongos. Além disso, a ativação do A1R reverte o efeito antinociceptivo mediado pelo pré-condicionamento com NMDA, sugerindo que a pós-ativação do A1R pode interferir com o pré-condicionamento. Ainda o pré-condicionamento com NMDA não altera a funcionalidade do A1R no teste do condicionamento ao medo contextual em camundongos, mas parece promover uma dessensibilização de A2AR. E a ativação de ambos A1R e A2AR reverte o aumento da captação de glutamato em fatias de hipocampo, mediado pelo pré-condicionamento com NMDA. Em relação às vias de sinalização celular analisadas, observou-se o pré-condicionamento com NMDA depende da via da PI3K para a proteção contra as convulsões induzidas por ácido quinolínico (AQ) em camundongos, embora a inibição desta via não parece estar diretamente relacionada com a proteção contra a morte celular. Em estudos in vitro, o pré-condicionamento com NMDA também foi eficaz na proteção contra o dano induzido por AQ em cultura primária de neurônios hipocampais e em fatias hipocampais de camundongos contra o dano induzido por glutamato. Os mecanismos envolvidos na neuroproteção pelo pré-condicionamento em fatias, envolve a participação de A1R e parcialmente dos canais de potássio ativados por cálcio (BKCa). Além disso, o pré-condicionamento com NMDA é mais eficaz com a ativação de receptores que usam a glicina como co-agonista preferencial. Desta forma, este trabalho contribui para demonstrar alguns mecanismos celulares evocados por uma possível estratégia neuroprotetora, o pré-condicionamento químico.<br> / Abstract : Brain preconditioning is characterized by a state of transient tolerance in the nervous tissue to a lethal and/or toxic stimulus evoked by prior moderate damage. Studies have demonstrated that this state of brain tolerance can be obtained by chemical preconditioning with N-methyl-D-aspartate (NMDA), the synthetic selective agonist of NMDA receptors, and can be promoted by in vivo administration of subtoxic doses of this agent. However, the signaling pathways and receptors or ion channels associated with the neuroprotection process activated by chemical preconditioning remain to be elucidated. Thus, we investigated the involvement of adenosine receptors (A1R and A2AR) and cell signaling pathways in the mechanism of neuroprotection evoked by NMDA preconditioning in vivo (in mice) and in vitro (in primary cultured neurons and hippocampal slices). NMDA preconditioning increases binding affinity of the A1R to ligand, without changing its protein levels in hippocampus of mice. Furthermore, activation of A1R reverses the antinociceptive effect mediated by NMDA preconditioning, suggesting that post-activation of A1R can interfere with preconditioning. NMDA preconditioning does not alter the functionality of A1R in contextual fear conditioning test in mice, although it seems to promote a desensitization of A2AR response. The activation of both A1R and A2AR reversed the increase in glutamate uptake into hippocampal slices mediated by NMDA preconditioning. Regarding the signaling pathways analyzed, we observed that NMDA preconditioning is dependent on PI3K pathway for protection against quinolinic acid (QA)-induced seizures in mice, although inhibition of this signaling pathway is not directly related to protection against cell damage. In in vitro studies, NMDA preconditioning was also effective in protecting against QA-induced damage in primary cultured hippocampal neurons and against glutamate-induced damage in mice hippocampal slices. The mechanisms of neuroprotection exerted by preconditioning in slices, involve the participation of A1R and partially the calcium-activated potassium channels (BKCa). Moreover, NMDA preconditioning is more effective when glycine is used as the preferential co-agonist of NMDA receptor. Therefore, this study contributes to demonstrate cellular mechanisms evoked by a putative neuroprotective strategy, the chemical preconditioning.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Filosofia e Ciências Humanas, Programa de Pós-Graduação em Psicologia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-05-12T04:02:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333155.pdf: 1229779 bytes, checksum: 3393f9ea202fd71eac95bee3866176f3 (MD5) Previous issue date: 2014 / O sistema prisional brasileiro atravessa uma crise histórica, considerando sua baixa competência em cumprir com seu ideal: reintegrar o sujeito que cometeu um ato julgado como legalmente desviante. Neste sistema encontra-se o agente penitenciário que ocupa o espaço hierárquico entre a direção das instituições prisionais e seus detentos. O cotidiano de um agente penitenciário envolve situações interacionais peculiares em um ambiente permeado pela violência. Neste sentido, esta pesquisa objetivou investigar a condição psicossocial do agente penitenciário em exercício na Mesorregião da Grande Florianópolis. Para tal, foram entrevistados quinze agentes penitenciários de duas instituições prisionais, uma de mínima segurança e uma de máxima segurança. A coleta dos dados se deu a partir dos instrumentos WHOQOL-100 e SQR (SRQ-A e SRQ-20) e de uma entrevista semiestruturada.. Os resultados apontam para os fatores de risco no tocante à instituição - as relações institucionais, hierárquicas e condição física da unidade prisional; fatores de risco relacionados ao cotidiano - aquisição de comportamentos, salário, estigmas e opinião de familiares e amigos e por fim, os fatores de risco vinculados à violência - rebeliões de presos, morte e danos a integridade física. Tratando-se dos fatores de proteção, os resultados mostram fatores institucionais ? capacitação profissional, relacionamento interpessoal com colegas, forma de relacionar-se com presos e rotina, referindo-se ao tempo de carreira. Aos fatores de proteção de âmbito social, apontam-se o histórico de familiar ou amigo na carreira, a reação familiar positiva à carreira pública e a estabilidade profissional. O cuidado com a saúde e a moral surgem nos resultados como fatores de proteção de caráter subjetivo. Acerca das formas de enfrentamento, destaca-se as evitativas - não declarar a proteção, portar arma de fogo e evitar lugares e situações; também as de distração - atividades para se desligar da profissão, como o lazer e as práticas religiosas e, por fim, as previdentes ? julgar ambientes e pessoas e considerar deixar a profissão. O sistema prisional expõe todos à vulnerabilidade: presos, agentes penitenciários ea sociedade. Esta sociedade frequentemente nega a existência deste sistema, o invisibiliza. O agente penitenciário surge como um coadjuvante, secundariamente citado em pesquisas cientificas e estigmatizado socialmente. Os resultados dessa pesquisa indicam que pertencer a esta profissão constitui um fator de risco, gerador de impactos em todos os âmbitos de sua condição psicossocial.<br> / Abstract : The Brazilian prison system crosses a historical crisis, considering its low ability in fulfilling with its ideal: to reintegrate the citizen that committed an act considered as legally deviant. In this system, there is the penitentiary worker, who occupies the hierarchic space between the direction of the prison institutions and its prisoners. The daily routine of a penitentiary worker involves peculiar interactional situations in an environment permeated by violence. In this sense, the objective of this research is to investigate the psychosocial condition of the penitentiary worker acting in the Mesoregion of Great Florianópolis. Therefore, fifteen penitentiary workers of two prison institutions, one of minimum security and one of maximum security, have been interviewed. The collection of data was through the WHOQOL-100 and SQR (SRQ-A and SRQ-20) instruments and through a semi-structured interview. Results point to factors of risk related to the institution - the institutional and hierarchic relations and the physical condition of the prison unit; factors of risk related to daily life - acquisition of behaviors, wage, stigma, and family and friends' opinions; and, finally, factors of risk related to violence - prisoner rebellions, death, and damages to their physical integrity. Regarding the factors of protection, results point to institutional factors - professional qualification, interpersonal relationship with colleagues, formsof becoming related with prisoners, and routine (referring to time of career). Regarding the factors of protection of social scope, the history of family or friend in the career, the family positive reaction to the public career, and the professional stability are listed. The care with health and the moral appear in the results as factors of protection of subjective character. Concerning the forms of confrontation, the avoidance ones - not to declare the protection, to carry firearm and to avoid places and situations; the distraction ones - activities to disconnect from the profession, as leisure and religious practical; and, finally, the prospective ones - to judge environments and people and to consider leaving the profession are highlighted. The prison system exposes everyone to vulnerability: prisoners, penitentiary workers, and society. Our society frequently denies the existence of this system, making it invisible. The penitentiary worker appears as a coadjuvant, cited only secondarily in scientific researches and being socially stigmatized. The results of this researchindicate that belonging to this profession constitutes a factor of risk, affecting every sphere of one's psychosocial condition.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-06T04:08:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334742.pdf: 2139758 bytes, checksum: 252c0ce7b7663bca6d4cdbe999d2516f (MD5) Previous issue date: 2015 / A artrite reumatoide é uma doença inflamatória crônica de caráter autoimune que atinge cerca de 1% da população mundial. O desenvolvimento dos medicamentos inibidores do TNF-a na última década representou um grande avanço no tratamento das formas moderadas e severas da atrite reumatoide. O Etanercept é um medicamento que compete com o receptor do TNF-a pela ligação desta citocina. Este trabalho tem por objetivo avaliar o efeito anti-inflamatório do etanercept utilizando o modelo murino de inflamação induzida pela carragenina na bolsa de ar. Para isso foi realizada a contagem total de leucócitos no fluído da bolsa de ar utilizando-se contador celular automatizado (Auto Hematology Analyzer BC-2800 VET, henchen Mindray Bio-Medical electronic CO Ltda., Hamburger, Germany). A contagem diferencial celular foi realizada em esfregaços corados com May-grunwald-Giemsa em microscópio óptico comum. A exsudação foi avaliada pela quantificação de azul de Evans (25 mg/kg) administrado por via endovenosa e analisado no fluído da bolsa de ar por metodologia colorimétrica e em leitor de ELISA. As dosagens das atividades de MPO, ADA e da concentração de NO foram realizadas no fluído da bolsa de ar por metodologias colorimetricas. As citocinas também foram avaliadas no fluído da bolsa de ar por citometria de fluxo usando o kit comercial (Cytometric Bead Array CBA mouse Th1/Th2 Cytokine kit) e os resultados analisados utilizando o software FCAP array®. A fosofrilação da p-65-NF-kB foi realizada no tecido da bolsa de ar com a metodologia de ELISA utilizando-se anticorpos monoclonais. A análise da apoptose em neutrófilos foi realizada no fluído da bolsa de ar por citometria de fluxo utilizando-se os seguintes marcadores: anticorpos anti-CD11-b marcados com PEcy7 e anti-LY-6G marcado com PE para separar a população de neutrófilos ativados, e anexina V marcada com isotiocianato de fluoreceina (FITC) e 7-actinomicina (7-AAD) como marcadores de apoptose e necrose respectivamente. Todos os parâmetros inflamatórios foram avaliados 24h após a indução da inflamação na bolsa de ar. Em todos os experimentos utilizou-se como referência grupos de animais tratados com dexametasona e indometacina. A análise estatística foi realizada pelo teste paramétrico ANOVA, seguido de teste pos-hoc Newmann-Keuls. Para todas as análises foram considerados significativos os valores de P < 0,05. O Etanercept foi capaz de reduzir a concentração leucocitária no fluído da bolsa de ar (P < 0,01) principalmente reduzindo a concentração deneutrófilos (P < 0,01), e a exsudação (P < 0,01). Além disso, o etanercept inibiu a atividade das enzimas MPO (P < 0,01), ADA (P < 0,01) e as concentrações de NOx (P<0,01), também reduziu as concentrações das citocinas IFN-? (P < 0,05), TNF-a (P < 0,01) e IL-17 (P<0,05), também reduziu os níveis de fosforilação do NF-?B (P < 0,05). Por fim o etanercept apresentou um efeito indutor na apoptose em neutrófilos (P < 0,05). Os resultados deste estudo demonstraram que o etanercept apresentou atividade anti-inflamatória possivelmente pela redução da ativação da via do NF-?B, além disso, seu efeito sobre os neutrófilos pode indicar um possível mecanismo pelo qual o tratamento com este medicamento possa apresentar benefícios logo no início da artrite-reumatoide assim como no tratamento de outras doenças inflamatórias onde estas células estejam envolvidas.<br> / Abstract : Rheumatoid arthritis is a chronic, autoimmune inflammatory disease affecting 1% of world?s population. The development of the TNF-a inhibitors in the last decade represented a great advance in the treatment of the mild to severe forms of the rheumatoid arthritis. Etanercept is a drug that competes with the TNF-a receptor for the binding of this cytokine. This paper aimed to evaluate the anti-inflammatory effects or etanercept using the carrageenan induced air-pouch model in mice. To achieve this end the total leukocyte content was analyzed in the air-pouch fluid leakage through automated cell counter (Auto Hematology Analyzer BC-2800 VET, henchmen Mindray Bio-Medical electronic CO Ltda., Hamburger, Germany). The differential cell count was analyzed through observation of May-Grunwald-Giemsa colored smears in a common optic microscope. The exudate levels was evaluated through the injection of Evan?s blue dye (25 mg/kg) through intravenous route and the air pouch fluid leakage was analyzed by colorimetric methodology in an EIE plate reader. The analyses of the MPO, ADA activities and NOx concentration were realized in the air-pouch fluid leakage using colorimetric assays. The cytokine concentrations were analyzed in the air-pouch fluid leakage using the commercial kit (Cytometric Bead Array CBA mouse Th1/Th2 Cytokine kit) and the data was analyzed using the FCAP array® software. The p-65-NF-kB phosphorylation was analyzed in the tissue of the air-pouch by EIE methodology using monoclonal antibodies. The neutrophil apoptosis was realized in the air-pouch fluid leakage through flow cytometry using the following antibodies: anti-CD11-b-PEcy7, anti-Ly-6g-PE for the activated neutrophil gating and apoptosis and necrosis was analyzed through anexin V and 7-actinomycin respectively. All the inflammatory parameters were evaluated 24h after the induction of the inflammation in the air pouch. In all experiments groups of animals treated with dexamethasone and indomethacin were used as reference. The statistical analysis was realized by the ANOVA variation test followed by post-hoc Newmann-keuls. For all analyses values of P < 0.05 were considered significant. Etanercept was able to reduce the leukocyte concentration in the air pouch leakage (P < 0.01), mainly by the reduction of neutrophils (P < 0.01), and exudation (P < 0.01). Treatment with etanercept reduced MPO (P < 0.01) and ADA (P < 0.01) activities and NOx ( P < 0.01) concentration, also reduced the concentration of IFN-? (P < 0.05), TNF-a (P < 0.01) and IL-17 (P < 0.05) and reducedthe NF-?B phosphorylation levels (P < 0.05). Finally etanercept presented an apoptosis inducing effect in neutrophils ( P < 0.05). The results of this study showed that etanercept presented anti-inflammatory activity possibly through the reduction of the activation of NF-?B pathways, besides, it?s effect on neutrophils may indicate a possible mechanism through which the treatment with this drug may present benefits in the beginning of rheumatoid arthritis as well in the treatment of other inflammatory diseases with the involvement of these cells.

SILVA, G. C. Bioatividade de extratos de algas frente à bactérias com fatores de virulência, resistentes a antimicrobianos. 2012. 61 f. Dissertação (mestrado em Ciências Marinhas Tropicais) - Instituto de Ciências do Mar, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Nadsa Cid (nadsa@ufc.br) on 2015-04-20T19:31:37Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_gcsilva.pdf: 1478354 bytes, checksum: 59498a440456387052763c8870f84f49 (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid(nadsa@ufc.br) on 2015-04-20T19:31:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_gcsilva.pdf: 1478354 bytes, checksum: 59498a440456387052763c8870f84f49 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-20T19:31:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_gcsilva.pdf: 1478354 bytes, checksum: 59498a440456387052763c8870f84f49 (MD5) Previous issue date: 2012 / Infection of aquatic organisms by Vibrios can lead to serious economic losses for farmers and expose consumers to serious health risks. Some Vibrio species carry factors of virulence making them potentially pathogenic to humans. The consequent widepread use of antibiotics by farmers has led to the selection of resistant strains in the environment. Due to the increasing incidence of bacteria resistant to antibiotics, much effort is currently invested in identifying natural products with bioactive potential. Macroalgae have been studied for their ample spectrum of biological, antioxidant, antifungal and agglutinating activities. The purpose of this study was to evaluate the antibacterial activity of hexane, methanol, acetone and ethanol-based extracts of Chlorophyta, Phaeophyta and Rhodophyta macroalgae against virulent víbrio strains resistant to antibiotics. The microorganisms used in the study included víbrio strains isolated from wild oysters purchased at a fish market, strains from shrimp hemolymph and the standard strains ATCC and IOC. The strains were challenged with extracts using the disk diffusion method. Ethanol was the most efficient solvent. Padina gymnospora inhibited the largest number of Vibrio species (57%) and produced the largest inhibition halos, followed by Ulva fasciata (40%) and Hypnea musciformes (30%). The smallest minimum inhibitory concentration was observed for ethanolic extracts of Padina gymnospora (512 μg/mL against Vibrio alginolyticus). The results suggest extracts of marine macroalgae may represent a potential source of natural biologically active products for use in the industry. / Bactérias do gênero Vibrio acometem a saúde de organismos aquáticos causando sérios prejuízos econômicos a aquicultores e problemas na saúde dos consumidores. Determinadas espécies são consideradas potencialmente patogênicas por possuírem fatores de virulência. Em virtude dos problemas causados por vibrioses, o uso de antimicrobianos em cultivo aquático tornou-se constante, e determinante na seleção de cepas resistentes. Com o aparecimento cada vez maior de bactérias resistentes a antimicrobianos, surgiu o interesse pela busca de produtos naturais com potencial bioativo. As algas tornaram-se alvo de pesquisas por serem responsáveis por um amplo espectro de atividades biológicas, antioxidantes, antifúngicos, aglutinantes, além de antibacterianos. Deste modo, este trabalho objetivou investigar a atividade antibacteriana de extratos hexânicos, metanólicos, acetônicos e etanólicos de macroalgas das classes Chlorophyta, Phaeophyta e Rhodophyta frente a víbrios com fatores de virulência, resistentes a antimicrobianos. Esses víbrios foram isolados de ostras selvagens comercializadas em uma feira de pescado, e de hemolinfa de camarão, além de cepas padrões ATCC e IOC e foram testados através de antibiograma pelo método de difusão em disco. Concluiu-se que: o álcool etílico foi o solvente mais eficaz na extração do composto ativo capaz de inibir o crescimento bacteriano; a Padina gymnospora foi a macroalga que apresentou a maior capacidade inibitória das espécies de Vibrio (57%) e as maiores zonas de inibição, seguida pela Ulva fasciata (40%) e por último a Hypnea musciformes (30%); O menor valor de CIM encontrado foi com o extrato etanólico da Padina gymnospora com 512 μg/ mL contra V. alginolyticus.Os resultados apresentados neste trabalho sugerem que os extratos de macroalgas marinhas poderiam servir como uma fonte potencial de produtos naturais biologicamente ativos para aplicação na indústria.