Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present work aimed to evaluate two types of housing sows in late pregnancy in an individual cage and pen, for birth and during lactation, and placental efficiency, correlating it to the performance of post-natal piglets. And also the effect of supplementation of arginine and glutamine after 40 days of gestation of primiparous sows, we analyzed the productive performance and the evolution of litter until weaning. Was followed by 10 primiparous females that with 105 days of gestation, five were housed in conventional cages in the maternity ward and the other five in cages with environmental enrichment of hay. The births were followed, each individually collected placenta and their respective piglets, being weighed and measured the length and color, and accompanied the piglets until weaning. Another 80 primiparous females were subjected to a randomized block design and a factorial: supplementation with 1% arginine, 1% glutamine, 1% AminoGut ® and 05,% +0.5% of the Arginine AminoGut ®, and two gestational periods, from 40 to 85 days of gestation and 40 days of gestation until delivery. Was accompanied by the Parthians, and all production parameters. The type of accommodation during the birth and throughout lactation did not influence the postnatal performance of piglets, but there were positive correlations between placental efficiency and piglet weight at birth, the size of the piglet and the size, weight and color of the placenta. Supplementation of amino acids, arginine, glutamine and AminoGut ® did not influence the total number of births, live births, birth weight, stillbirth, weaning weight. But there was a beneficial effect on the number of mummified and placental efficiency was better in 40 days of supplementation of gestation until delivery in the use of 1% AminoGut ® and the combination of 0.5% Arginine and 0.5% AminoGut®. It was concluded that the managements adopted during pregnancy, be it nutritional or environmental, contribute to a better performance and piglet survival. / O presente trabalho teve como objetivos avaliar dois tipos de alojamento das fêmeas suínas no final da gestação, em baia e gaiola individual, para o parto e durante o período de lactação, e a eficiência placentária, correlacionando-a ao desempenho pós-natal dos leitões. E também o efeito da suplementação de arginina e glutamina a partir dos 40 dias de gestação de fêmeas suínas primíparas, analisou-se o desempenho produtivo e a evolução da leitegada até o desmame. Acompanhou-se 10 fêmeas primíparas que com 105 dias de gestação, cinco foram alojadas em gaiolas convencionais na maternidade e as outras cinco em baias com enriquecimento ambiental de feno. Os partos foram acompanhados, coletadas individualmente cada placenta e seu respectivo leitão, sendo pesados e medidos o comprimento e cor, e os leitões acompanhados até o desmame. Outras 80 fêmeas primíparas foram submetidas a um delineamento em blocos ao acaso e esquema fatorial: suplementação com 1% de Arginina, 1% de Glutamina, 1% de AminoGut® e 05,% de Arginina+0,5% de AminoGut®, e dois períodos gestacionais, dos 40 aos 85 dias de gestação e de 40 dias de gestação até o parto. Acompanhou-se os partos, e todos os parâmetros produtivos. O tipo de alojamento durante o parto e toda lactação não influenciou no desempenho pós natal dos leitões, mas houve correlações positivas entre a eficiência placentária e o peso do leitão ao nascer, ao tamanho do leitão e ao tamanho, peso e coloração da placenta. A suplementação de aminoácidos, Arginina, Glutamina e AminoGut® não influenciaram no número total de nascidos, nascidos vivos, peso ao nascer, natimortos, peso de desmame. Mas houve efeito benéfico no número de mumificados e a eficiência placentária se mostrou melhor em suplementações dos 40 dias de gestação até o parto na utilização de 1% de AminoGut® e na combinação de 0,5% de Arginina e 0,5% de AminoGut®. Concluiu-se que os manejos adotados na gestação, seja ele nutricional ou ambiental, contribuem para um melhor desempenho e sobrevivência do leitão. / Mestre em Ciências Veterinárias

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-03-31T14:22:09Z No. of bitstreams: 1 Cristiano da Silva Albuquerque.pdf: 1313726 bytes, checksum: d30b08dae69e0147c8f4ec6cee2c01bc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-31T14:22:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cristiano da Silva Albuquerque.pdf: 1313726 bytes, checksum: d30b08dae69e0147c8f4ec6cee2c01bc (MD5) Previous issue date: 2010-10-29 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The aim of this study was to determine the nutritional value and energy of corn germ (CG) as well as evaluating the effect of its use in feed for laying hens. Two experiments were conducted, one with metabolism and other performance. In the first experiment (metabolism) was determined initially the chemical composition, metabolizable energy and digestibility coefficients of nutrients from the corn germ for laying hens. First, There were determined the chemical composition of corn germ meal and then held a metabolism trial to determine the values of apparent metabolizable energy (AME) and corrected apparent (AMEn) and apparent metabolizable coefficients of dry matter (AMCDM) and gross energy (AMCDGE). The trial lasted eight days (four for adjustment and four for collection of excretes) were used 60 hens, Lohman LSL white with 29 weeks of age. The experiment was a completely randomized design with three treatments and five replicates of four birds. The treatments consisted of one reference and two tests diets with 20% and 30% inclusion of corn germ. The results were submitted to ANOVA and means compared using t test at 5% probability. In the second experiment (Performance) 200 laying hens with at 26 weeks of age were used . The birds were distributed in a completely randomized design with five treatments and five replicates of eight birds each. The treatments consisted of a reference diet (corn, oil and soybean meal based) and four diets with the following levels of inclusion of CG in the diets: 2.0, 4.0, 6.0 and 8.0%. The results were submitted to ANOVA and the means compared in the Dunnett test at 5% probability and regression analysis was used to verify the effect of inclusion of CG on the performance and egg quality. The corn germ showed the following chemical composition: 96.39% dry matter, 49.48% ether extract, 1.87% of ash, 7243 kcal / kg gross energy, 11.48% protein, 0,19% methionine, cystine, 0,21%, 0,48% lysine, 0,40% threonine, 0,72% arginine, 0,35% isoleucine, leucine 0,83%, 0,57% of valine and histidine 0.37%, as fed. The average values of AME, and AMEn AMCDM and AMCDGE of the germ determined were: 4,578 and 4,548 kcal/kg, 4,723 and 4,372 kcal / kg, 64.95 and 61.86% respectively. According to the results obtained in the performance,The levels of the CG didn´t effect on the variables: feed intake, egg production and egg mass. But, the egg weight and feed conversion were affected, but the inclusion of up to 6% did not affect the performance parameters of laying hens. Regarding the regression analysis there was a linear effect for both variables (weight eggs and feed conversion). The parameters studied in relation to eggs (percentage of the shell, albumen and yolk, albumen height, specific gravity and yolk color) were not affected by increasing levels of CG. The inclusion of CG in diets of laying hens in 2% did not influence the production performance and egg quality and that higher levels can increase the weight of the eggs, thus using levels of the 6% can maintain the feed conversion and in some cases may be recommended depending on their market price. / O objetivo deste trabalho foi determinar o valor nutricional e energético do gérmen integral de milho (GIM), bem como avaliar o efeito do seu uso na alimentação de galinhas de postura. Foram realizados dois experimentos, sendo um de metabolismo e outro de desempenho. No primeiro experimento (Metabolismo) determinou-se inicialmente a composição química do GIM e em seguida realizou-se um ensaio de metabolismo para determinação dos valores de energia metabolizável aparente (EMA) e aparente corrigida (EMAn) e coeficientes de metabolização aparente da matéria seca (CMAMS), energia bruta (CMAEB), extrato etéreo (CMAEE). O ensaio teve duração de oito dias (quatro para adaptação e quatro para coleta total) tendo sido utilizadas 60 galinhas, Lohmann LSL brancas com 29 semanas de idade. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com três tratamentos e cinco repetições de quatro aves. Os tratamentos consistiram de uma ração-referência e duas rações-testes com 20% e 30% de inclusão do gérmen integral de milho. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste t a 5% de probabilidade. No segundo experimento (Desempenho) foram utilizadas 200 poedeiras com 29 semanas de idade. As aves foram distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos e cinco repetições de oito aves por unidade experimental. Os tratamentos consistiram de uma ração referência a base milho, óleo e farelo de soja e mais quatro rações com os seguintes níveis de inclusão de GIM nas rações 2,0; 4,0; 6,0 e 8,0% de GIM. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias foram submetidas ao teste de Dunnet a 5% de probabilidade, comparando-se o tratamento referencia com os demais. Em seguida, efetuou-se a análise de regressão utilizando apenas os tratamentos experimentais em que incluídos o GIM. O GIM apresentou a seguinte composição química: 96,39% de matéria seca, 49,48% de extrato etéreo, 1,87% de matéria mineral, 7.243 kcal/kg de energia bruta, 11,48% de proteina, 0,19% de metionina, 0,21% de cistina, 0,48% de lisina, 0,40% de treonina, 0,72% de arginina, 0,35% de isoleucina, 0,83% de leucina, 0,57% de valina e 0,37% de histidina, na matéria natural. Os valores médios de EMA, EMAn e CMAMS e CMAEB do gérmen determinados foram: 4.578 e 4.548 kcal/kg, 4.723 e 4.372 kcal/kg, 64,95 e 61,86%, respectivamente. De acordo com os resultados obtidos no experimento de desempenho, não houve efeito dos níveis nas variáveis de consumo de ração, produção de ovos e massa de ovo. Para as variáveis, peso dos ovos e conversão alimentar houve efeito dos níveis entre as variáveis testadas e por meio de análise de regressão observouse efeito linear para ambas. As variáveis indicadoras da qualidade dos ovos não foram afetadas pelos níveis crescentes de GIM. A inclusão do gérmen integral de milho em rações de galinhas de postura em 2% não afeta os parâmetros de desempenho zootécnico e qualidade dos ovos sendo que níveis maiores podem aumentar o peso dos ovos. Por outro lado, utilizando níveis de até 6% pode-se manter a conversão alimentar e em alguns casos pode ser recomendado dependendo da viabilidade econômica.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-04-10T14:17:23Z No. of bitstreams: 1 Emanoela Nataly Ribeiro Barbosa.pdf: 763138 bytes, checksum: 6475c437fa0ca62009bc61780cc6c684 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T14:17:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Emanoela Nataly Ribeiro Barbosa.pdf: 763138 bytes, checksum: 6475c437fa0ca62009bc61780cc6c684 (MD5) Previous issue date: 2011-06-08 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Two studies were conducted in order to determine the different yeast sugar cane’s energetic and digestive values, as well as generate equations of prediction for broilers at different ages according to the chemical composition. Four yeasts were collected and analyzed regarding their physical and chemical composition, and then four digestibility assays in four experimental phases were realized: post-hatch, initial, growth I and growth II. The experimental designs were completely randomized with five treatments and six repetitions. The treatments were constituted of a reference diet (corn and soybean meal) and four test diets with the replacement of 30% of reference diet by the yeasts. The percentage composition of dry matter, crude protein, ether extract, ash, neutral detergent fiber, gross energy and yeast’s geometric mean diameter (μm) were, respectively: 90.71, 17.11, 0.37, 7.54, 6.86, and 661 to 4214 yeast 1; 88.84, 18.05, 0.44, 8.05, 7.65, and 695 to 4268 yeast 2; 89.99, 14.94, 0.49, 9.1, 3.02, and 933 to 4011 yeast 3; and 90.47, 21.12, 0.30, 9.0, 12.13, and 616 to 4095 yeast 4. The values of apparent and corrected apparent metabolizable energy (kcal / kg) were: yeast 1 (2090, 1953), yeast 2 (1764, 1537), yeast 3 (2223, 2069) and yeast 4 (1674, 1566) for the post-hatch period; yeast 1 (1229, 1070), yeast 2 (1802, 1670), yeast 3 (1285, 1197) and yeast 4 (1571, 1527) for the initial period; yeast 1 (924, 803), yeast 2 (961, 940), yeast 3 (879, 698) and yeast 4 (986, 944) for the growth I period; yeast 1 (800, 785), yeast 2 (1181, 1154), yeast 3 (1422, 1408), yeast 4 (779, 781) for the growth II period, respectively. The amino acids compositions and yeast protein digestibility were determined. There were variations in amino acid composition of the studied yeasts, however the 2 and 4 yeasts had a higher percentage of amino acids. The crude protein digestibility coefficients values and digestible protein values were: yeast 1 (72.59, 12.42), yeast 2 (81.22, 14.66), yeast 3 (76.74, 11.46), yeast 4 (78.46, 16.57) for the post-hatch period; yeast 1 (66.80, 11.43), yeast 2 (78.28, 14.13), yeast 3 (68.11, 10.17), yeast 4 (66.66, 14.07) for the initial phase period; yeast 1 (63.09, 10.79), yeast 2 (74.75, 13.49), yeast 3 (63.28, 9.45), yeast 4 (62.61, 13.22) for the growth I period; yeast 1 (61.40, 10.50), yeast 2 (71.21, 12.85), yeast 3 (62.64, 9.35), yeast 4 (61.89, 13.07) for the growth II period. There was an effect of age and chemical composition in the values of yeasts’ metabolizable energy and protein digestibility, thus it was generated 8 equations of prediction, with or without the use of intercept to estimate the energetic and digestive values for broilers. / Foram realizados dois estudos com o objetivo de determinar os valores energéticos e digestivos de diferentes leveduras de cana-de-açúcar, bem como gerar equações de predição para frangos de corte em diferentes idades em função da composição química. Quatro leveduras foram coletadas e analisadas quanto a sua composição físico-química, e em seguida foram realizados 4 ensaios de digestibilidade em 4 fases experimentais: pré-inicial, inicial, crescimento I e II. Os delineamentos experimentais foram inteiramente casualizado, com 5 tratamentos e 6 repetições. Os tratamentos foram constituídos de uma dieta referência (milho e farelo soja) e mais quatro dietas testes com a substituição de 30% da ração referência pelas leveduras. A composição em percentagem da matéria seca, proteína bruta, extrato etereo, cinzas, fibra em detergente neutro, energia bruta e o diametro geometrico médio (μm) das leveduras foram, respectivamente: 90,71; 17,11; 0,37; 7,54; 6,86; 4.214 e 661 para a lev. 1; 88,84; 18,05; 0,44; 8,05; 7,65; 4.268 e 695 para a lev. 2 ; 89,99; 14,94; 0,49; 9,1; 3,02; 4.011 e 933 para a lev. 3, e 90,47; 21,12; 0,30; 9,0; 12,13; 4095 e 616 para a lev. 4. Os valores de energia metabolizável aparente e aparente corrigida (kcal/kg) foram: Lev. 1 (2.090; 1.953), lev. 2 (1.764; 1.537), lev. 3 (2.223; 2.069) e lev.4 (1.674; 1.566) para o período pré-inicial; lev. 1 (1.229; 1.070), lev. 2 (1.802; 1.670), lev 3 (1.285; 1.197) e lev. 4 (1.571; 1.527) para o período inicial; lev.1 (924; 803), lev. 2 (961; 940), lev. 3 (879; 698) e lev. 4 (986; 944) para o período de crescimento I; lev. 1 (800; 785), lev. 2 (1.181; 1.154), lev. 3 (1.422; 1.408), lev. 4 (779; 781) para o período de crescimento II, respectivamente. Foram determinadas a composições aminoacídicas e a digestibilidade protéica das leveduras. Houve variabilidade na composição aminoacídica das leveduras estudadas, contudo as leveduras 2 e 4 apresentaram maiores percentagem de aminoácidos. Os valores dos coeficientes de digestibilidade da proteína bruta e valores de proteína digestível foram: lev. 1 (72,59; 12,42), lev. 2 (81,22; 14,66), lev. 3 (76,74; 11,46), lev. 4 (78,46; 16,57) para a fase pré-inicial; lev. 1 (66,80; 11,43), lev. 2 (78,28; 14,13), lev. 3 (68,11; 10,17), lev. 4 (66,66; 14,07) para a fase inicial; lev. 1 (63,09; 10,79), lev. 2 (74,75; 13,49), lev. 3 (63,28; 9,45), lev. 4 (62,61; 13,22) para a fase de crescimento I; lev. 1 (61,40; 10,50), lev. 2 (71,21; 12,85), lev. 3 (62,64; 9,35), lev. 4 (61,89; 13,07) para a fase de crescimento II. Houve efeito da idade e da composição química nos valores de energia metabolizável e da digestibilidade da proteína das leveduras, sendo assim gerados 8 equações de predição, com ou sem a utilização do intercepto para estimar os valores energéticos e digestivos para frangos de corte.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karina_Ludovico.pdf: 553803 bytes, checksum: 19a2e0b50507c2a65264aefc85cf8fb1 (MD5) Previous issue date: 2008-08-25 / The objective of this study was to evaluate the supplementation of glutamine in the diet on performance, digestibility of nutrients and integrity of the intestinal mucosa of broiler chicks. Were conducted three experiments at the Veterinary School of the University Federal of Goias, using broiler chicks, male, with one day of age. In Experiment I and II was evaluated the supplementation of glutamine for chicks subjected to challenges of different intensities with Eimeria acervulina or Eimeria ssp, and in Experiment III evaluated the effect of supplementation of glutamine on diets containing ingredients of animal origin. The performance was determinated by weight, weight gain, feed intake, feed conversion rate and viability. The digestibility of nutrients was assessed with determination of digestibility coefficients of dry matter, crude protein and ether extract. The intestinal integrity was assessed by the villus height, crypt depth and villus:crypt ratio of the small intestine. The data were submitted to the analysis of variance and for the levels of glutamine was used polynomial regression. In Experiment I after the challenge with Eimeria, were observed better digestibility coefficients for dry matter, crude protein and ether extract with glutamine supplementation on 1.0% (P<0.05). For the results of histomorphometry at 14 days of age it was beneficial effect with the supplementation on 1.0% of glutamine (P<0.05) in the villus height and crypt depth in the duodenum. When challenged, the birds presented better results for villus height and crypt depth in the duodenum at 21 days of age, and in the duodenum and ileum at 28 days of age, when fed 1.0% of glutamine in the ration. In Experiment II the glutamine supplementation did not increase the digestibility coefficient of dry matter and fat on the period of this study. Nevertheless there was significant regression for the digestibility for the second period. On 21 days and 28 days of age the challenged birds showed bigger villus height and crypt depth when the birds was supplemented with 1,0% of glutamine on diet. In Experiment III there was positive quadratic effect (P<0,05) for the crude protein coefficient of digestibility with the increasing levels of glutamine in the ration. The birds belonged to the supplemented groups with glutamine presented better results (P<0,05) for villus height and crypt depth in the duodenum compared to the non-supplemented group. The level of 1,0% of glutamine in the diet presented recovery in the integrity of the small intestine on challenged birds, improving the coefficient of crude protein digestibility of the diet. The utilization of ingredients from animal source in diets for broilers in the initial phase did not harm the performance of chicks / Objetivou-se com o presente trabalho avaliar a suplementação de glutamina na ração sobre o desempenho, digestibilidade de nutrientes e integridade da mucosa intestinal de frangos de corte na fase inicial. Foram realizados três experimentos no Aviário Experimental da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Goiás, utilizando pintos de corte, machos, com um dia de idade. No Experimento I e II foi avaliada a suplementação de glutamina para pintos de corte submetidos a desafios de diferentes intensidades com Eimeria acervulina, ou Eimeria ssp, e no Experimento III avaliou-se o efeito da suplementação da glutamina em rações contendo ingredientes de origem animal. As características de desempenho avaliadas foram peso, ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar e viabilidade. A digestibilidade dos nutrientes foi avaliada com a determinação dos coeficientes de digestibilidade da matéria seca, proteína bruta e extrato etéreo. A integridade intestinal foi avaliada através da determinação da altura de vilos, profundidade de cripta e relação vilo:cripta do intestino delgado. Os dados foram submetidos à análise de variância e para os níveis de glutamina foi aplicada a regressão polinomial. No Experimento I após o desafio com Eimeria, foram observados melhores coeficientes de digestibilidade para a matéria seca, proteína bruta e extrato etéreo com a suplementação de 1,0% de glutamina (P<0,05). Para os resultados de histomorfometria, aos 14 dias de idade foi observado efeito benéfico com a suplementação de 1,0% de glutamina (P<0,05) na altura do vilo e profundidade de cripta no duodeno. Quando desafiadas, as aves apresentaram melhores resultados para altura do vilo e profundidade de cripta no duodeno aos 21 dias, e melhor altura do vilo e profundidade de cripta no duodeno e íleo aos 28 dias, ao receber 1,0% de glutamina na ração. No Experimento II a suplementação de glutamina não melhorou os coeficientes de digestibilidade da matéria seca e do extrato etéreo nos períodos estudados, no entanto, houve regressão significativa (P<0,05) para o coeficiente de digestibilidade da proteína bruta no primeiro período estudado, e para o coeficiente de digestibilidade da proteína bruta e extrato etéreo no segundo período. Aos 21 e aos 28 dias de idade as aves desafiadas apresentaram maior altura de vilo e profundidade de cripta quando suplementadas com 1% de glutamina na ração (P<0,05). No Experimento III houve efeito quadrático positivo (P<0,05) para o coeficiente de digestibilidade da proteína bruta com o aumento dos níveis de glutamina na ração. As aves dos grupos suplementados com glutamina apresentaram melhores resultados (P<0,05) para altura do vilo e profundidade de cripta, no duodeno, em relação ao grupo não suplementado. Embora a suplementação de glutamina nos níveis estudados não tenha sido eficiente para amenizar os efeitos da coccidiose sobre o desempenho de frangos de corte, a suplementação com 1,0% de glutamina proporcionou recuperação na integridade da mucosa intestinal em aves desafiadas com Eimeria, melhorando o coeficiente de digestibilidade da proteína da ração. A utilização de produtos de origem animal em rações para pintos de corte na fase inicial não prejudica o desempenho das aves.

Os venenos de serpentes são ricos em proteínas, enzimas e peptídeos biologicamente ativos. Diversas enzimas tais como fosfolipases A2 (PLA2s), metaloproteases (MP), L-aminoácido oxidases (LAAOs) são responsáveis pelo quadro clínico do envenenamento ofídico. Atualmente, o isolamento e a caracterização funcional e estrutural destas enzimas têm auxiliado na compreensão do mecanismo de ação destas toxinas e nas formas alternativas de tratamento. Além disso, estas enzimas se tornaram valiosas ferramentas de aplicação biotecnológica, na busca de novos fármacos de interesse na clínica médica. O objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar bioquímica e funcionalmente a L-aminoácido oxidase do veneno de Bothrops atrox. O isolamento da LAAO de B. atrox (LAAOBatrox) envolveu três etapas cromatográficas: a exclusão molecular em Sephadex G-75, troca iônica em ES-502N utilizando CLAE e, por último, a cromatografia de afinidade com uso da Lentil-Lectina, conferindo um alto grau de pureza à proteína confirmado por SDS-PAGE. Após a caracterização bioquímica, a LAAOBatrox demonstrou ser uma glicoproteína com 12% de açúcar, massa molecular relativa de 67.000 e pI de 4,4 confirmando seu caráter ácido pela composição em aminoácidos, predominando Asx (Ácido aspártico ou asparagina) e Glx (Ácido glutâmico ou glutamina). LAAOBatrox apresentou especificidade de substrato para L-Met e L-Leu. Com o seqüenciamento dos peptídeos trípticos internos e em comparação com as LAAOs de outros venenos, a LAAOBatrox apresentou homologia de 100% com LAAOs isoladas de B. moojeni e B. jararacussu e apresentou sequenciamento N-terminal de ADDN-NPLEE-NIRRDD que é homólogo ao das LAAOs já descritas. A LAAOBatrox apresentou atividade edematogênica moderada quando comparada ao veneno bruto, atividade coagulante baixa sobre o plasma humano citratado, atividade de agregação plaquetária sendo que 25µg/mL foi capaz de agregar aproximadamente 100% de plaquetas, onde o efeito obtido pela proteína pode ser devido à liberação de H2O2, sendo que a catalase foi adicionada ao meio tratado com LAAOBatrox e o efeito de agregação plaquetária obtido foi próximo à 0%. LAAOBatrox apresentou efeito citotóxico sobre diferentes linhagens tumorais: B16F10 onde as células apresentaram 70% de morte por apoptose e PC12 que apresentaram uma viabilidade celular de 20% após o tratamento com a enzima. LAAOBatrox não apresentou efeito citotóxico significativo sobre células normais. Portanto, a LAAOBatrox consiste de uma enzima multifuncional que poderá servir como ferramenta para investigação dos processos celulares que estão envolvidos no envenenamento. / Snake venoms are rich in proteins, enzymes and biological active peptides. Many enzymes, like phospholipases A2, metalloproteinases, L-amino acid oxidases are responsible by clinical aspects of ophidian poisoning. Nowadays, isolation and the functional and structural characterizations of these enzymes have been useful to elucidate their mechanisms of action. Besides, these enzymes have great value for biotechnology on searching of new molecules for medicine development. The aim of this work was isolate Lamino acid oxidase from B. atrox venom (LAAOBatrox) and characterize biochemical and functionally LAAOBatrox. The isolation consisted of 3 chromatographic steps: molecular exclusion using a G-75 Sephadex column, ion exchange using ES-502N column in HPLC and affinity chromatography with Lentil-Lectin column. Afterward, LAAOBatrox was analyzed by SDS-PAGE to confirm an expected high purity level. Biochemical characterization showed LAAOBatrox is a glycoprotein of 12% sugar-containing with relative molecular weight of 67000, pI estimated in 4,4 pointing to acid character due to its amino acids composition, rich for Asx and Glx residues. LAAOBatrox displays high specificity to hydrophobic L-amino acids (best substrates: L-Met and L-Leu). The Nterminal amino acid sequence (ADDN-NPLEE-NIRRDD) and the internal peptide sequences showed close structural homology to other snake venom L-amino acid oxidades, presenting 100% homology to LAAO from B. moojeni and B. jararacussu. This enzyme induces moderate edema compared to crude venom, low coagulating activity in human plasma and 100% of in vitro platelet aggregation induction with 25 g/mL, but this can be due to H2O2 production by LAAOs once added catalase has inhibited aggregation induced by LAAOBatrox and the effect was close to 0%. LAAOBatrox presents citotoxicity effect for tumor cell lines: 70% of death by apoptosis in B16F10 and 20% cellular viability for PC12, after LAAOBatrox treatment. LAAOBatrox did not display citotoxicity effect in normal cells (peripheral blood mononuclear cells). Thus, LAAOBatrox is a multifunctional enzyme of huge potential for investigation of cellular processes involved on poisoning and also for developing new medicines.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:48:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Clauber_Polese.pdf: 813503 bytes, checksum: 9758d19e02cc0cc16f9b08a17526cdb1 (MD5) Previous issue date: 2011-06-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / With the objective of determining the requirement of digestible methionine+cystine for laying hens from 50 to 66 weeks of age and 75 to 90, two experiments were accomplished at the Center for Experimental Stations of Paraná Federal Technological University, Campus Dois Vizinhos. One hundred and fifty Shaver Brown hens were used in a completely randomized design, distributed in five treatments, six replicates and five birds per experimental unit. The hens were fed a basal diet containing 2,850 kcalME/kg, 16% CP supplemented with 0.132, 0.174, 0.215, 0.256 and 0.298% of DL-methionine (99%), in order to provide tested levels of 0.572, 0.613, 0.653, 0.693 and 0.734% of digestible methionine+cystine. From 75 to 91 weeks of age levels of 0.588, 0.628, 0.669, 0.709 and 0.750% of digestible methionine+cystine were tested. The following parameters were evaluated: feed intake, digestible methionine+cystine intake, feed conversion/dozen eggs, feed conversion/egg mass, egg weight, egg mass, percentage of egg components (yolk, shell, albumen, shell weight and shell weight per unit of area surface), internal egg quality (Haugh unit, yolk index and albumen index) and specific gravity. In experiment 1, the levels of digestible methionine+cystine did not affect feed intake, production, egg mass, specific gravity and internal egg quality, except the percentage of yolk and albumen, which showed linear increase in yolk percentage and linear decrease in the percentage of albumen. The lowest level of methionine+cystine (0.572%) gave better feed conversion (kg/dz) corresponding to 682mg of methionine+cystine/hen/day. In experiment 2, there was no effect of methionine+cystine levels on productive parameters, performance and egg quality. The level of 0.588% digestible methionine+cystine, corresponding to 634.73 mg, supplied the daily needs of birds from 75 to 91 weeks of age / Com o objetivo de determinar a exigência nutricional de metionina+cistina digestível para poedeiras semipesadas no período de 50 a 66 e 75 a 90 semanas de idade, dois experimentos foram conduzidos no Setor de Pequenos Animais da Universidade Tecnológica Federal do Paraná - UTFPR, Campus de Dois Vizinhos - PR. Utilizaram-se 150 poedeiras Shaver Brown semipesadas num delineamento inteiramente casualizado (DIC), distribuídas em cinco tratamentos, seis repetições e cinco aves por unidade experimental, alimentadas com uma ração basal contendo 2.850 Kcal EM/Kg, 16% de PB, suplementada com 0,132; 0,174; 0,215, 0,256 e 0,298% de DL-metionina (99%), obtendo-se os níveis testados de 0,572; 0,613; 0,653; 0,693 e 0,734% de metionina+cistina digestível. No período de 75 a 91 semanas de idade os níveis testados foram de 0,588; 0,628; 0,669; 0,709 e 0,750% de metionina+cistina digestível. Os parâmetros avaliados foram o consumo de ração, consumo de metionina+cistina digestível, conversão alimentar/dúzia de ovos, conversão alimentar/massa de ovos, peso de ovos, massa de ovos, porcentagem dos componentes dos ovos (gema, casca, albúmen, peso de casca e peso da casca por unidade de superfície de área - PCSA), qualidade interna dos ovos (unidade Haugh, índice de gema e índice de albúmen) e gravidade específica. No experimento 1, os níveis de metionina+cistina digestível não influenciaram o consumo de ração, produção, massa de ovos, gravidade específica e a qualidade internar dos ovos, com exceção da porcentagem de gema e albúmen, em que houve aumento linear na porcentagem de gema e redução linear na porcentagem de albúmen. O menor nível de metionina+cistina (0,572)% proporcionou melhor conversão alimentar (kg/dz) correspondendo a 682mg de metionina+cistina/ave/dia. No experimento 2, não houve efeito dos níveis de metionina+cistina sobre os parâmetros produtivos, de desempenho e de qualidade dos ovos. O nível de 0,588% de metionina+cistina digestível, correspondendo a 634,73 mg, supriu as necessidades diárias das aves no período de 75 a 91 semanas de idade

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In this trial the requirement of threonine for the jundiá (Rhamdia quelen) was studied during the initial growth phase. Therefore a dose response experiment with five threonine inclusion levels (1.6, 2.2, 2.8, 3.4, 4.0% crude protein (CP)) and four replications was performed. The mixed diets were isonitrogenous (37% CP) and isocaloric (3400 kcal / kg estimated digestible energy). Juvenile jundiás (initial weight 4.47 ± 0.39 g and 8.16 ± 0,49cm length) were subjected to 70 experimental days, fed three times a day until apparent satiation, and their consumption calculated on a daily basis. Water quality parameters levels were kept optimal for the specie. Every twenty one days biometry was performed to evaluate the parameters of weight, weight gain, specific growth rate and feed conversion ratio. Body composition, nutrients deposition, metabolic, and enzymatic parameters were evaluated at the beginning and end of the trial. The data were submitted to normality test, analysis of variance, polynomial regression, and segmented regression. Then was chosen the analysis that best fits the data by comparing the residual error. The parameters of hepatossomatic index, mineral matter, and CAA, were higher in treatment with 1.6% of threonine in the diet. Based on the biomass parameters, relative weight gain, specific growth rate, and total weight gain, the appropriate level of threonine for catfish in that weight stage is 2.45% of threonine of the gross protein in the diet. / Neste trabalho foi estudado o requerimento em treonina para o jundiá (Rhamdia quelen) na fase inicial de crescimento. Para tal foi realizado um experimento de dose-resposta com cinco níveis de inclusão de treonina (1,6; 2,2; 2,8; 3,4; 4,0% da proteína bruta (PB)) com quatro repetições. As dietas mistas eram isoprotéicas (37% PB) e isocalóricas (3400 kcal/kg de energia digestível estimada). Os juvenis de jundiá (peso inicial 4,47±0,39 g e comprimento 8,16±0,49cm) foram submetidos a 70 dias experimentais, alimentados três vezes ao dia até a saciedade aparente, e o consumo calculado diariamente. Os parâmetros de qualidade da água mantiveram-se dentro do ideal para a espécie. A cada vinte e um dias foi realizada biometria para avaliação dos parâmetros de peso, ganho de peso, taxa de crescimento específico e conversão alimentar aparente (CAA). A composição corporal, deposição de nutrientes, parâmetros metabólicos e enzimáticos foram avaliados ao início e ao final do período experimental. Os dados foram submetidos ao teste de normalidade, posteriormente a análise de variância, análise de regressão polinomial e regressão segmentada sendo escolhida a análise que melhor se ajusta aos dados através da comparação do erro residual. Os parâmetros de índice hepatossomático, matéria mineral e CAA, foram superiores no tratamento 1,6% de treonina na dieta. Baseando-se nos parâmetros de biomassa, ganho de peso relativo, taxa de crescimento específico e ganho de peso total o nível adequado de treonina para o jundiá nesta fase de peso é de 2,45% de treonina da proteína bruta da dieta.

Estudos demonstram que a indução do estresse oxidativo pelo peptídeo beta amiloide (A?) exerce um importante papel no desencadeamento da excitotoxicidade neuronal o que pode resultar no desenvolvimento de doenças neurodegenerativas. A formação do peptídeo A? se deve a alterações na proteína precursora de amiloide (APP) que é clivada para a formação do peptídeo A?. Por sua vez, os mecanismos de ação do A? no S.N.C. ocorrem através da sinalização do receptor NMDA (N-metil D-aspartato) receptor este que quando ativado pelo glutamato exerce importante papel fisiológico no S.N.C., visto que apresenta atividade ionotrópica que permite o influxo de Na+ e Ca2+ para as células neuronais, auxiliando nos processos de formação da memória e aprendizagem. Entretanto, apesar do seu papel fisiológico, a ativação excessiva do receptor NMDA é fortemente correlacionada com lesões no S.N.C. decorrente da excessiva permeabilidade do íon Ca2+ para o citosol das células neuronais. Com isso as concentrações de glutamato na fenda sináptica são estritamente controladas para que não haja ativação excessiva dos receptores com atividade glutamatérgica, como o receptor NMDA. Estudos indicam que o transporte de glutamina/glutamato através da barreira hematoencefálica é menor do que de outros aminoácidos, sendo que cerca de 25% a 30% do transporte de aminoácidos dos vasos sanguíneos para o cérebro através da barreira hematoencefálica é ocupado pelo aminoácido leucina, sendo este um grande responsável pela síntese de glutamato/glutamina no S.N.C. Com isso, estudos tem demonstrado que dietas enriquecidas com aminoácidos de cadeia ramificada, dentre eles a leucina, é responsável por alterar o metabolismo do glutamato e aumentar a susceptibilidade à excitotoxicidade de células neurais. A fim de testar esta hipótese utilizamos um modelo de cultura de células de neuroblastoma humano e realizamos o tratamento com diferentes concentrações de aminoácido leucina associado com o tratamento de peptídeo beta-amilóide. Realizamos as analises de citotoxicidade (LDH), viabilidade celular (MTT) e apoptose celular por citometria de fluxo (marcação com PE Anexina V e 7-AAD). Nossos resultados indicam que houve diferenças apenas entre o controle em relação aos demais grupos de tratamento / Studies demonstrate that induction of oxidative stress by beta amyloid peptide (A?) plays an important role in triggering neuronal excitotoxicity which can result in the development of neurodegenerative diseases. The formation of A? peptide are due to changes in the amyloid precursor protein (APP) which is cleaved to form the peptide A?. On the other hand, the mechanisms of action of A? in the C.N.S. occur through signaling of the NMDA (N-methyl-D-aspartate) receptor that when activated by glutamate plays an important physiological role in the C.N.S., as has inotropic activity that allows the influx of Na+ and Ca2+ into the neuronal cells, assisting in procedures of memory formation and learning. However, despite its physiological role, the excessive activation of the NMDA receptor is strongly correlated with C.N.S. lesions due to excess permeability of Ca2+ ions into the cytosol of neuronal cells. Thus the concentrations of glutamate in the synaptic cleft are strictly controlled so that there is excessive activation of receptors with glutamatergic activity, as the NMDA receptor. Studies indicate that the transport of glutamine/glutamate across the blood brain barrier is lower than that of other amino acids, of which about 25% to 30% of the amino acid transport blood vessels to the brain through the blood brain barrier is occupied by leucine this being one largely responsible for the synthesis of glutamate/glutamine in the C.N.S. Thus, studies have shown that diets enriched in branched chain amino acids, including leucine, are responsible for altering the metabolism of glutamate and excitotoxic increase susceptibility to neural cells. To test this hypothesis we used a cell culture model of human neuroblastoma and carry out the treatment with different concentrations of leucine associated with the processing of amyloid-beta peptide. We performed analysis of cytotoxicity (LDH), cell viability (MTT assay) and apoptosis using flow cytometry (Annexin V staining with PE and 7-AAD). Our results indicate that there were differences only between the control compared to the other treatment groups

Este estudo enfocou a mediação por íons metálicos divalentes da solvólise da ligação éster formada entre peptídeos e resinas, método desenvolvido por nós para a preparação de peptídeos C-modificados. Os objetivos foram: i) adaptá-lo para a estratégia Fmoc de síntese, ii) buscar resinas adequadas para tal propósito, iii) verificar qual íon metálico é mais eficiente para mediar tal reação; iv) investigar o possível mecanismo pelo qual os íons metálicos mediam as reações estudadas. Para isso, foram testadas as resinas derivadas do ácido p-hidroximetilbenzóico (HMBA-AM, HMBA-PEGA, HMBA-TG) e do álcool p-benziloxibenzílico (Wang), os mediadores metálicos Ca2+ e Zn2+, condições reacionais determinadas em estudos anteriores do nosso grupo de pesquisa (50% nucleófilo/ DMF) e os solventes nucleófilos metanol, etanol, propan-1-ol, propan-2-ol, butan-1-ol, álcool benzílico, butilamina e hexilamina. O desligamento de aminoácidos e peptídeos esterificados das resinas ocorreu com altos rendimentos (72 - 98%). A resina HMBA-AM e o íon Zn2+ demonstraram ser a combinação mais eficiente. Análises de espectroscopia de infravermelho na presença e ausência do íon metálico indicaram um mecanismo de reação no qual a coordenação do íon Zn2+ com o álcool facilita a formação do íon alcóxido, o qual é um nucleófilo melhor que o álcool e com capacidade de atacar o carbono da carbonila da ligação éster entre o peptídeo e a resina. / The present study was focused on divalent metal ions-mediated solvolysis of the ester linkage formed between peptides and resins, a method developed by us for the preparation of C-modified peptides. The aims were: i) to adapt it for the Fmoc synthesis strategy; ii) to search resins suitable for such purpose; iii) to determine which divalent metal ion is the most efficient reaction mediator; iv) to investigate the mechanism by which the metal ion mediates the solvolysis reactions studied. Therefore, we employed the resins p-hydroxymethylbenzoic acid (HMBA-AM, HMBA-PEGA, HMBA-TG) and p-benzyloxybenzyl (Wang) alcohol, the metal ions Ca2+ and Zn2+, the optimized solvolysis conditions found in our previous studies (50% nucleophile/DMF) and the nucleophilic solvents methanol, ethanol, propan-1-ol, propan-2-ol, butan-1-ol, benzyl alcohol, butylamine and cyclohexylamine. Detachment of esterified amino acids or peptides from resins gave high yields (72-98%). HMBA-AM resin and Zn2+ ion showed to be the most effective combination of resin and metal ion. Infrared spectroscopy analysis of the peptide-resins in absence and presence of such metal ion suggested a mechanism of reaction where the coordination of Zn2+ ion with the alcohol promotes its deprotonation to give the alkoxide ion, which is a better nucleophile and can attack the carbonyl carbon of the ester linkage formed between the amino acid and the resin.

Orientador: Luciano Hauschild / Resumo: Dois estudos foram conduzidos com objetivo de comparar a biodisponibilidade relativa de L-Met e DL-Met com base em ensaio de balanço de N e os efeitos promovidos por ambas as fontes na morfologia intestinal e no sistema antioxidante de suínos em fase inicial e final de creche. Em cada experimento foram utilizados 42 suínos machos castrados (Agroceres PIC, Rio Claro, SP, Brazil: CamboroughTM x AGPIC 337TM) com peso inicial de 10,7 ± 1,09 kg e 20,5 ± 1,55 kg, respectivamente para o experimento 1 e o experimento 2. Cada experimento foi dividido em dois períodos experimentais com 21 suínos. Cada período experimental correspondeu a um bloco. Três suínos foram distribuídos aleatoriamente em 7 dietas experimentais dentro de cada bloco, resultando em um total de 6 repetições por tratamento. As dietas basais (DB) foram formuladas com deficiência de 68% em metionina, porém adequadas para os demais aminoácidos. Três níveis graduados de DL-Met e L-Met (0,03, 0,06 e 0,09%) foram suplementados à dieta basal para criar as dietas 2-7 em ambos os estudos. No experimento 1, ambas as fontes de metionina reduziram linearmente o N excretado pela urina e aumentaram linearmente a retenção de N (% de absorvido) (P ≤ 0,03). A biodisponibilidade relativa estimada para L-Met em comparação a DL-Met foi de 106% (intervalo de confiança – IC de 95%: 39 a 173%) para retenção de N (% de absorvido) em uma base equi-molar. No experimento 2, a suplementação com ambas as fontes de Met diminuiu linearmente a excr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Two studies were conducted to compare the relative bioavailability of L-Met and DL-Met based on N balance assay and the effects promoted by both sources on intestinal morphology and antioxidant system of weaned and growing pigs. In each experiment were used 42 barrows (Agroceres PIC, Rio Claro, SP, Brazil: CamboroughTM x AGPIC 337TM) with initial body weight of 10.7 ± 1.09 kg and 20.5 ± 1.55 kg, respectively for Experiment 1 and Experiment 2. Each experiment was divided into two batches with 21 pigs. Each batch corresponded to a block. Three pigs were randomly assigned to 7 experimental diets within each block, resulting in a total of 6 replicates per treatment. Basal diets (BD) were formulated with 68% methionine deficiency, but adequate for the other amino acids. Three graded levels of DL-Met and L-Met (0.03, 0.06 and 0.09%) were supplemented to the basal diet to create diets 2-7 in both studies. In experiment 1, both sources of methionine linearly reduced N excreted in the urine and linearly increased N retention (% absorbed) (P ≤ 0.03). The estimated relative bioavailability for L-Met compared to DL-Met was 106% (95% CI - confidence interval: 39 to 173%) for N retention (% absorbed) on an equi-molar basis. In experiment 2, supplementation with both Met sources linearly decreased urinary N excretion and linearly increased total N retention, N retention (% ingested and% absorbed) (P ≤ 0.04). The estimated bioavailability of L-Met compared to DL-Met was 95% (95% CI: 13 to 17... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre