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Estudo citolÃgico em urina de pacientes transplantados renais para pesquisa do poliomavirus humano tipo BKV / Study of urine cytology in kidney transplant patients in search of human kind polyomavirus BKV

TÃnia Maria Cavalcante Maia 08 August 2008 (has links)
nÃo hà / O poliomavirus tipo BK tem sido associado à nefropatia nos pacientes transplantados renais com uma incidÃncia variando entre 3 - 4% e em 60% dos casos podendo levar à perda do enxerto. Diversos estudos tÃm demonstrado a importÃncia do achado da cÃlula decoy na urina destes pacientes como primeira triagem para a replicaÃÃo viral fazendo o diagnÃstico diferencial entre a rejeiÃÃo celular aguda e a nefropatia pelo BK vÃrus. Neste contexto, o presente estudo objetivou detectar a presenÃa do BKV atravÃs da observaÃÃo da cÃlula decoy na urina dos transplantados renais, correlacionando este achado com os nÃveis sÃricos de urÃia e creatinina e o aspecto histopatolÃgico atravÃs da biÃpsia renal. Para tanto, a urina de 50 pacientes transplantados renais (28 homens e 22 mulheres) atendidos em dois hospitais de Fortaleza (Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio e Hospital Geral de Fortaleza) foram analisadas quanto à presenÃa de cÃlulas decoy detectadas atravÃs da citologia urinÃria pela coloraÃÃo de Papanicolau. As citologias foram analisadas e classificadas em negativa e positiva (&#8805; 1 cÃlula decoy). Resultado: Das 50 citologias urinÃrias analisadas 28 pacientes eram do sexo masculino e 22 do sexo feminino, receptores de doador vivo (n = 43) ou cadavÃrico (n = 7) com positividade para cÃlula decoy de 24% (12 pacientes). NÃveis de creatinina e urÃia aumentados, isoladamente, nÃo foram Ãteis para suspeitar da nefropatia pelo BKV ou rejeiÃÃo do transplante (p > 0,05). A correlaÃÃo dos nÃveis alterados de urÃia e creatinina, com a presenÃa ou ausÃncia das cÃlulas decoy, foi estatisticamente significativa (p < 0,05). A biÃpsia revelou nefropatia pelo BKV em cinco (20%) dos pacientes com cÃlulas decoy na urina e os achados histolÃgicos mais freqÃentes foram fibrose e infiltrado inflamatÃrio mononuclear. A imunossupressÃo mais empregada nos pacientes em estudo foi o esquema 1 (50%) (ciclosporina / azatioprina / zenapx), seguidos por esquemas 2 (16%) (MMF/FK 506 / zanapax) 1 esquema 3 (16%) (ciclosporina / prednizona / azatioprina). ConclusÃo: A positividade para cÃlulas decoy neste estudo (24%) à coincidente com a literatura (8 -26%) sugerindo infecÃÃo ativa. A presenÃa das cÃlulas decoy na urina foi Ãtil para definir os grupos de pacientes com possÃvel nefropatia pelo BKV daqueles com nefropatia por rejeiÃÃo, pois a negatividade para cÃlulas decoy na urina afasta em 100% dos casos a nefropatia pelo BKV, e a sua presenÃa serve de guia para avanÃar na investigaÃÃo de nefropatia pelo BKV. A biÃpsia confirmou em 5 dos 12 casos com cÃlulas decoy positivas na urina (20%) a nefropatia pelo poliomavirus sendo que um deles veio a perder o enxerto. O esquema de imunossupressÃo utilizado pelos pacientes em estudo e a presenÃa de nefropatia pelo BKV nÃo foi o que mais se relaciona na literatura. TambÃm os pacientes com nefropatia pelo BKV que utilizaram esquemas menos associados a esta condiÃÃo tiveram evoluÃÃo pior. Estes Ãltimos resultados indicam a necessidade de novos estudos com maior nÃmero de pacientes, tempo de acompanhamento maior e estudo das cepas virais. / The polyomavirus type BK has been associated to the nephropathy in the patients transplanted renal with an incidence varying among 3 - 4% and in 60% of the cases could take to the loss of the graft. Several studies have been demonstrating the importance of the discovery of the decoy cells in these patients' urine as first selection for the viral replication making it diagnose differential between the sharp cellular rejection and the nephropathy for the BK virus. In this context, the present study aimed at to detect the presence of BKV through the observation of the decoy cells in the urine of the transplanted renal, correlating this discovery with the serum urea levels and creatinine and the histopathology features through the renal biopsy. For so much, the 50 transplanted patients' urine renal (28 men and 22 women) assisted at two hospitals of Fortaleza (Academical Hospital Walter CantÃdio and General Hospital of Fortaleza) they were analyzed as for the presence of decoy cells detected through the urinary cytology by the coloration of Papanicolau. Were the cytology analyzed and done classify in negative and positive (&#8805; 1 decoy cell). Result: Of the 50 cytology analyzed urinary 28 patients they were male and 22 female, alive donor's receivers (n = 43) or cadaverous (n = 7) with assertiveness for decoy cells of 24% (12 patient). Creatinine levels and increased urea, separately, they were not useful to suspect of the nephropathy for BKV or rejection of the transplant (p > 0,05). The correlation of the altered levels of urea and creatinine, with the presence or absence of the decoy cells, was significant for the statistics (p < 0,05). The biopsy revealed nephropathy for BKV in five (20%) of the patients with cells decoy in the urine and the more frequent histological discoveries were fibrose and infiltrated inflammatory mononuclear. The most employed immune suppression in the patients in study was the outline 1 (50%) (ciclosporina / azatioprina / zenapx), following for outlines 2 (16%) (MMF/FK 506/zanapax) 1 outline 3 (16%) (ciclosporina / prednizona / azatioprina). Conclusion: The assertiveness for decoy cells in this study (24%) it is coincident with the literature (8 -26%) suggesting active infection. The presence of the decoy cells in the urine was useful to define the patients' groups with possible nephropathy for BKV of those with nephropathy for rejection, because the negativity for decoy cells in the urine moves away in 100% of the cases the nephropathy for BKV, and his/her presence serves as guide to move forward in the nephropathy investigation for BKV. The biopsy confirmed in 5 of the 12 cases with decoy cells positive in the urine (20%) the nephropathy for the polyomavirus and one of them vein to lose the graft. The immunosuppressive outline used by the patients in study and the nephropathy presence for BKV was not it that more it links in the literature. Also the patients with nephropathy for BKV that used less associated outlines this condition had worse evolution. These last results indicate the need of new studies with larger number of patients, time of larger attendance and study of the stumps turn.
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Estudo histopatolÃgico da esteatose na hepatite crÃnica pelo vÃrus C / Histological study of steatosis and non-alcoholic steatohepatitis in treatment-na hepatitis C virus-infected patients

HÃlio Ãngelo Donadi 12 December 2006 (has links)
O vÃrus da hepatite C (VHC) e a esteatose sÃo importantes causas de doenÃa hepÃtica crÃnica no mundo. Apesar de comum, a fisiopatologia da esteatose, e seu papel na progressÃo da fibrose em pacientes com VHC, permanece desconhecida. O objetivo deste trabalho foi quantificar esteatose macrovesicular e microvesicular e correlacionÃ-las com dados clÃnicos e histopatolÃgicos. O estudo analisou biÃpsias hepÃticas de pacientes portadores do VHC sem tratamento prÃvio. A fibrose e atividade necroinflamatÃria foram avaliadas segundo os escores de METAVIR e Ishak; as classificaÃÃes de Kleiner e Brunt foram utilizadas como suporte para o diagnÃstico de esteatohepatite realizado pelo patologista. Ademais, o nÃmero de hepatÃcitos com esteatose macrovesicular e esteatose microvesicular foram quantificados a partir do nÃmero total de hepatÃcitos. A fibrose e atividade necroinflamatÃria foram classificadas e semi-quantificadas. Foi encontrada associaÃÃo significante da fibrose avaliada pelo sistema de Ishak entre a esteatose macrogoticular e microgoticular (p= 0,017 e p= 0,0113, respectivamente). A atividade inflamatÃria global (classificaÃÃo Metavir ) apresentou correlaÃÃo linear com a piora da fibrose (< 0,001). A fibrose avaliada pelo sistema de Metavir se correlacionou com o IMC. A presenÃa de VHC associado à esteatohepatite apresentou correlaÃÃo significante com as mÃdias das AST/ALT, e com a fibrose de Ishak e Metavir, quando comparado aos dados dos pacientes com VHC, sem esteatohepatite (p = 0,006; p = 0,012; p = 0,0098 e p = 0,014, respectivamente). Em nosso trabalho, concluÃmos que a fibrose de Ishak esteve associado a esteatose macrogoticular e microgoticular. Igualmente, se demonstrou que a presenÃa da esteatohepatite esteve fortemente associado a fibrose. / The hepatitis C virus (HCV) and steatosis are important causes of chronic hepatic disease in the world. Although common, the pathofisiology of steatosis and its role in the progression of fibrosis in patients with HCV is uncertain. Our objective was to quantify the macrovacuolar and microvesicular steatosis and to correlate them with clinical and histophatologic data. The study included needle biopsy of the liver of patients with HCV without previous treatment. The fibrosis and necroinflammatory activity of hepatic damage by HCV were evaluated by METAVIR and Ishakâs scores; Kleinerâs and Bruntâs classification were used as a support for diagnosis of the steatohepatitis by the pathologist. Furthermore, the number of hepatocytes with the macrovacuolar and microvesicular steatosis was quantified in a total number of hepatocytes. Fibrosis and necroinflammatory activity were categorized and semi quantified. A significant association of the fibrosis was found and it was evaluated by the Ishak system between the macrogoticular and the microgoticular steatosis (p=0,017 e p= 0,0113, respectively). The global inflammatory activity (Metavir classification) has presented a linear correlation with the worsening of the fibrosis (< 0,001). The fibrosis which was evaluated by the Metavir system has been correlated with the BMI. The presence of HCV associated with the steatohepatitis has presented a significant correlation with the average of AST/ALT and with the Ishak and Metavir fibrosis, when compared to the data of the patients with HCV, without steatohepatitis (p= 0,006; p= 0,012; p= 0,0098 and p= 0,014, respectively) In our research we conclude that the Ishak fibrosis has been associated with the macrogoticular and microgoticular steatosis. Equally, it was demonstrated that the presence of the steatohepatitis was strongly associated to the fibrosis.
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Estudo de aspectos epidemiológicos, clínicos e imunológicos da hanseníase em município hiperendêmico / Study of epidemiological, clinical and immunological aspects of leprosy in hyperendemic municipality

Maria de Fátima Lires Paiva 27 May 2013 (has links)
A epidemiologia da hanseníase tem demonstrado a utilização de ferramentas clínicas, moleculares e imunológicas, para o mapeamento dos principais focos de ocorrência da doenças e de áreas de alto risco de adoecimento. Programas de controle da hanseníase, doença de longo período de incubação, em que os contatos são os principais grupos de risco, devem estabelecer todos os procedimentos disponíveis para o controle desse agravo. Objetiva-se estudar aspectos epidemiológicos clínicos e imunológicos da hanseníase em município hiperendêmico do Maranhão. Estudo de epidemiológico descritivo, realizado com 599 contatos, entre outubro de 2009 a outubro de 2011, no Serviço de Dermatologia no ambulatório do Hospital Universitário da Universidade Federal do Maranhão unidade Presidente Dutra São Luís - MA. Foi observado que a maioria dos contatos foi do gênero feminino com 57,17%, a faixa etária predominante acima de 15 anos, ou seja, (64,59%) com maior frequência na faixa de 20 a 59 anos, idade adulta e produtiva e o tipo de convívio predominante é o intradomiciliar com 74,95%, a forma clínica foi HT (30,00%), a classificação operacional mais frequente foi a MB com 61,90% do gênero feminino; a maioria apresentou somente uma cicatriz vacinal pela BCG, destacou-se o gênero masculino com 63,00%. O teste Elisa apresentou percentual de 63,50% e o ML-Flow 64,00%. Considerando o resultado dos testes Elisa e ML-FLOW sugere-se a utilização das técnicas imunológicas como ferramentas necessárias para o diagnóstico precoce, controle e vigilância dos contatos como forma de interromper a cadeia de transmissão da hanseníase na cidade pesquisada. / Leprosy epidemiology has demonstrated the usefulness of clinical, molecular and immunological tools for geographical identification of the main disease occurrence foci and also of high risk disease acquiring areas. Leprosy control programs must consider its long incubation period, during which nearby contacts are the main disease risk group, and should make use of all available procedures for disease control. This paper aims to study clinical, epidemiological end immunological aspects of leprosy in a hyper endemic county of Maranhão state. Its a descriptive epidemiological study made with 599 leprosy contacts from October 2009 to October 2011 in the clinic of the Dermatology service at the Presidente Dutra unit of Maranhão Federal University Hospital. Most contacts observed were female (57,17%), more than 15 years old (64,59%), mostly between ages 20-59, an adult and productive life span. Household contact was the most frequent (74,95%) as was tuberculoid leprosy (30,00%). MB operational classification was most frequent (61,90% of females), most presenting one BCG vaccine scar, with males amounting to 63,00%. ELISA test was positive in 63,5% and ML-flow in 64,00%. These two test results suggests the use of immunological techniques as necessary tools for precocious diagnosis, surveillance and control of leprosy contacts as a means of interrupting leprosy transmission chain in the analyzed county.
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Valor prognóstico e preditivo de genes candidatos selecionados após análise de oligoarrays em carcinomas mamários

Bueno, Renata Camargo [UNESP] 16 March 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-16Bitstream added on 2014-06-13T20:36:37Z : No. of bitstreams: 1 bueno_rc_me_botfm_parcial.pdf: 184986 bytes, checksum: b4cc84cead8ca822c1ea62e1786a52da (MD5) Bitstreams deleted on 2015-03-20T11:45:13Z: bueno_rc_me_botfm_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-03-20T11:45:48Z : No. of bitstreams: 1 000703048.pdf: 4139830 bytes, checksum: 4590a1be2f4cbb732b2d65f21b421cde (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Neste estudo foi proposto (1) validar a assinatura genética de metástase previamente identificada pelo grupo para cinco genes candidatos (POLR1B, IKBKB, TRIP10, PGM5 e ATM), identificados como centrais em redes biológicas e correlacionar os dados de expressão com os dados clínicos e histopatológicos das pacientes; (2) confirmar o valor prognóstico do gene ATM e o seu mecanismo de regulação pelo miR-203, miR-421, miR- 576-5p, miR-664, miR-26a, miR-26b e miR-18a. Foi utilizada a metodologia de RT-qPCR em 63 amostras de carcinomas mamários (CM) e 5 de tecido mamário normal. Foram observadas correlações positivas entre os níveis de expressão dos genes detectados pela técnica de microarray e RT-qPCR, embora sem significância estatística. Não foram observadas diferenças significativas na expressão destes genes nos CM quando comparados às amostras de mama normais. Nas comparações entre os níveis de expressão e as características clínicas e histopatológicas pode-se observar que os genes IKBKB, POLR1B e PGM5 apresentaram aumento significativo de expressão em tumores ER positivos. Foram observadas diminuições significativas dos transcritos de IKBKB, TRIP10, PGM5 e ATM em tumores HER2 positivos; para os genes PGM5 e ATM houve uma diminuição significativa de expressão nos tumores grau III. A análise da expressão proteica do ATM foi realizada por imunoistoquímica em 926 amostras de CM organizadas em quatro plataformas de microarranjos de tecidos. Foi verificada a diminuição da expressão da proteína ATM nos tumores quando comparados com a amostra de tecido mamário normal e sua diminuição estava associada a tumores de alto grau e metástase à distância. Pacientes com tumores ATM-negativos apresentaram diminuição do tempo de sobrevida livre de doença e de... / The present study aimed: 1) to validate the genetic signatures of metastasis previously detected by our group for five candidate genes (POLR1B, IKBKB, TRIP10, PGM5, and ATM), identified as central in biological networks, and to correlate the findings with clinical-histopathological data; 2) to confirm the prognostic value of the ATM gene and its mechanism of regulation by miR-203, miR-421, miR-576-5p, miR-664, miR-26a, miR- 26b and miR-18a. Sixty-three breast carcinomas (BC) samples and 5 normal breast tissue samples were evaluated by RT-qPCR. Positive correlations were observed between the gene expression levels detected by microarray and RT-qPCR, although not statistically significant. There was no significant difference between BC and normal samples. Overexpression of IKBKB, POLR1B, and PGM5 genes were significantly associated with ER positive tumours. Significant downexpression of IKBKB, TRIP10, PGM5 and ATM transcripts were observed in HER2-positive tumours. PGM5 and ATM downexpression were statistically associated with grade III tumours. ATM protein expression was evaluated by immunohistochemistry in 926 BC samples organized into four tissue microarray platforms. A decreased ATM protein expression was observed in tumours when compared to normal tissue as well as with high grade tumours and distant metastasis. Patients with ATM-negative tumours showed a decrease of diseasefree survival and overall survival. After multivariate analysis, ATM revealed to be an independent prognostic marker in BC and have been associated with lower risk of metastasis and death by disease (P<0.001, HR=0.535, and P<0.001, HR=0.534, respectively). A negative correlation between the transcript levels of ATM and the miR- 664 (P=0.035, r=-0.293), and miR-421 (P=0.075 e r=-0.249, respectively) was verified. The miR-26a... (Complete abstract click electronic access below)
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Expressão da p16INK4 em lesões precursoras de baixo grau do carcinoma escamoso do colo uterino : estudo prospectivo de seguimento

Godoy, Alessandra Eifler Guerra 23 June 2010 (has links)
O carcinoma escamoso do colo uterino é uma das neoplasias de maior incidência em todo o mundo, inclusive no Brasil, sendo responsável pela morte de milhares de mulheres a cada ano, grande parte delas ocorrendo em plena idade produtiva. Ao longo dos últimos cinqüenta anos, diversos pesquisadores têm estudado esta neoplasia. Sabe-se que a fase invasora do carcinoma escamoso do colo uterino é precedida por uma fase intra-epitelial, precursora (neoplasias intra-epiteliais cervicais/ NICs). As lesões precursoras podem ser divididas em dois grandes grupos: as de baixo grau e as de alto grau (Sistema de Bethesda). Se por um lado, o percentual de lesões de alto grau que evoluem para carcinoma escamoso invasor é grande, por outro lado, somente uma pequena parcela de mulheres que têm lesões precursoras de baixo grau vai desenvolver uma lesão invasora. Entretanto, ainda não somos capazes de identificar entre estas mulheres, quais são as que irão progredir para carcinoma escamoso do colo uterino. O presente estudo procurou avaliar a expressão da p16INK4 em pacientes com lesão de baixo grau do colo uterino, correlacionando com a presença de HPV-DNA e sua evolução ao longo do tempo. O estudo acompanhou 118 pacientes por um período máximo de 33 meses, examinando-as com intervalos de 6 meses. A conclusão foi que a p16INK4 se relacionada positivamente com infecção múltipla por HPV e que nestas pacientes a expressão da mesma chega a 100% de células neoplásicas coradas. Algumas pacientes evoluíram para lesão de alto em um período curto de tempo (alguns meses). / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-05-30T17:01:47Z No. of bitstreams: 1 Tese Alessandra Eifler Guerra Godoy.pdf: 1370166 bytes, checksum: 0965c1e23a9ee5918d5880f1bd52fb52 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-30T17:01:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Alessandra Eifler Guerra Godoy.pdf: 1370166 bytes, checksum: 0965c1e23a9ee5918d5880f1bd52fb52 (MD5) / The squamous carcinoma of the cervix uterine is one of the neoplasias of bigger incidence in the whole world, also in Brazil, being responsible for the death of thousand of women to each year, great part of them occurring in full productive age. Throughout last the fifty years, diverse researchers have studied this neoplasia. We know that the invading phase of the squamous carcinoma of the cervix uterine is preceded by an intra-epithelial phase, precursory (cervical intraepithelial neoplasia - CIN). The precursory injuries can be divided in two great groups: of low degree and of high degree (Bethesda System). If on the other hand, the percentage of injuries of high degree that evolve for invading squamous carcinoma is great, on the other hand, a small parcel of women whom they have precursory injuries of low degree only goes to develop an invading injury. However, not yet we are capable to identify between these women, which are the ones that will go to progress for squamous carcinoma of the cervix uterine. The present study it looked for to evaluate the expression of p16INK4 in patients with injury of low degree of the uterine col, correlating with the presence of HPV-DNA and its evolution throughout the time. The study it folloied 118 patients for a maximum period of 33 months, examining them with intervals of 6 months. The conclusion was that p16INK4 if related positively with multiple infection for HPV and that in these patients the expression of the same one arrives the 100% of neoplastic cells stained. Some patients developed high lesion in a short period of time (several months).
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Estudo de Resistência aos Antimicrobianos em Amostras de Pseudomonas Aeruginosa Isoladas em Hospitais da Cidade de Niteroi-RJ

Marcos Coelho Simões Travassos Soares 01 January 2005 (has links)
Foram estudadas 162 amostras de P. aeruginosa isoladas de pacientes atendidos em quatro hospitais localizados na cidade de Niterói, Rio de Janeiro; dois públicos: o Hospital Azevedo Lima e o Hospital Universitário Antônio Pedro, e dois privados, o Hospital Santa Cruz e a Casa de Saúde e Maternidade Santa Marta, no período de julho de 2002 até dezembro de 2003. As amostras foram isoladas a partir de diferentes espécimens clínicos: secreções (52,5%), urina (22,8%), sangue (8,6), ponta de cateter (6,2%), líquidos de punção (1,9%) e outras fontes (8%). Todas as amostras foram sensíveis a polimixina e mais da metade resistentes a cefotaxima (69,1%), ceftriaxona (65,5%), ciprofloxacina (54,9%), gentamicina (51,9%) e ticarcilina-ácido clavulânico (50,6%) e em menor proporção a imipenem (35,8 %), cefepima (33%), amicacina (32,1%), ceftazidima (30,9%), aztreonam (27,8%) e piperacilina-tazobactam (27,8%). A produção de metalo â-lactamase (M-bla) foi detectada em 9 (5,6%) amostras isoladas em três dos quatro hospitais avaliados. O estudo da diversidade genética foi efetuado analisando os perfis de fragmentação do DNA cromossômico, após tratamento com a enzima SpeI e eletroforese em campo pulsado (PFGE). De 19 amostras selecionadas, as 10 não produtoras de M-bla que apresentaram diferentes graus de multirresistência aos antimicrobianos, revelaram grande diversidade genética. Entretanto, as 9 amostras produtoras de M-bla, mostraram pertencer a um único clone, o mesmo detectado em amostras de P. aeruginosa com a mesma característica de resistência, isoladas nas cidades de Rio de Janeiro e São Paulo, sugerindo a disseminação interhospitalar do microorganismo, tanto no âmbito local como regional. / A total of 162 P. aeruginosa strains was studied. They were isolated from patients attended in four hospitals located in Niterói city, Rio de Janeiro state, two of them supported by public health system: Hospital Azevedo Lima and Hospital Universitário Antônio Pedro, and the others from privative service: Hospital Santa Cruz and Casa de Saúde Santa Marta, between July 2002 and December 2003. The isolates were recovered from different clinical sources, including: urine (22.8%); secretions (52.5%); catheter tips (6.2%); blood specimens (8.6%); fluids (1.9%) and others (8%). All strains were susceptible to polimixin B. More than half of them showed resistance to cefotaxime (69.1%); ceftriaxone (65.5%); ciprofloxacin (54.9%); gentamicin (51.9%) and ticarcillin-clavulanic acid (50.6%), and in lower percentages to imipenem (35.8%); cefepime (33%); amikacin (32.1%); ceftazidime (30.9%); aztreonam (27.8%)and piperacillin-tazobactam (27.8%). Metallo-â-lactamase (M-âla) production was detected in 9 (5.6%) strains recovered from three of the four hospitals evaluated. The genetic diversity study was performed by chromosomal DNA fragmentation, after SpeI enzymatic treatment using Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE). Among 19 strains selected from the study, 10 non M-âla producer multidrug-resistant strains showed a large variety of genetics profiles. However, the 9 M-âla producers were allocated in a single clonal group, the same genetic profile detected among P. aeruginosa M-âla producing strains, recovered in São Paulo city and Rio de Janeiro city, suggesting interhospital spread of strains at a local and regional level
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Estudo de aspectos epidemiológicos, clínicos e imunológicos da hanseníase em município hiperendêmico / Study of epidemiological, clinical and immunological aspects of leprosy in hyperendemic municipality

Maria de Fátima Lires Paiva 27 May 2013 (has links)
A epidemiologia da hanseníase tem demonstrado a utilização de ferramentas clínicas, moleculares e imunológicas, para o mapeamento dos principais focos de ocorrência da doenças e de áreas de alto risco de adoecimento. Programas de controle da hanseníase, doença de longo período de incubação, em que os contatos são os principais grupos de risco, devem estabelecer todos os procedimentos disponíveis para o controle desse agravo. Objetiva-se estudar aspectos epidemiológicos clínicos e imunológicos da hanseníase em município hiperendêmico do Maranhão. Estudo de epidemiológico descritivo, realizado com 599 contatos, entre outubro de 2009 a outubro de 2011, no Serviço de Dermatologia no ambulatório do Hospital Universitário da Universidade Federal do Maranhão unidade Presidente Dutra São Luís - MA. Foi observado que a maioria dos contatos foi do gênero feminino com 57,17%, a faixa etária predominante acima de 15 anos, ou seja, (64,59%) com maior frequência na faixa de 20 a 59 anos, idade adulta e produtiva e o tipo de convívio predominante é o intradomiciliar com 74,95%, a forma clínica foi HT (30,00%), a classificação operacional mais frequente foi a MB com 61,90% do gênero feminino; a maioria apresentou somente uma cicatriz vacinal pela BCG, destacou-se o gênero masculino com 63,00%. O teste Elisa apresentou percentual de 63,50% e o ML-Flow 64,00%. Considerando o resultado dos testes Elisa e ML-FLOW sugere-se a utilização das técnicas imunológicas como ferramentas necessárias para o diagnóstico precoce, controle e vigilância dos contatos como forma de interromper a cadeia de transmissão da hanseníase na cidade pesquisada. / Leprosy epidemiology has demonstrated the usefulness of clinical, molecular and immunological tools for geographical identification of the main disease occurrence foci and also of high risk disease acquiring areas. Leprosy control programs must consider its long incubation period, during which nearby contacts are the main disease risk group, and should make use of all available procedures for disease control. This paper aims to study clinical, epidemiological end immunological aspects of leprosy in a hyper endemic county of Maranhão state. Its a descriptive epidemiological study made with 599 leprosy contacts from October 2009 to October 2011 in the clinic of the Dermatology service at the Presidente Dutra unit of Maranhão Federal University Hospital. Most contacts observed were female (57,17%), more than 15 years old (64,59%), mostly between ages 20-59, an adult and productive life span. Household contact was the most frequent (74,95%) as was tuberculoid leprosy (30,00%). MB operational classification was most frequent (61,90% of females), most presenting one BCG vaccine scar, with males amounting to 63,00%. ELISA test was positive in 63,5% and ML-flow in 64,00%. These two test results suggests the use of immunological techniques as necessary tools for precocious diagnosis, surveillance and control of leprosy contacts as a means of interrupting leprosy transmission chain in the analyzed county.
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Estudo das subpopulaÃÃes linfocitÃrias em sangue perifÃrico de pacientes com hansenÃase / Study of lymphocyte subpopulations in peripheral blood of patients with leprosy

VitÃria RÃgia MagalhÃes Solon 15 May 2012 (has links)
A hansenÃase à uma doenÃa infecciosa crÃnica causada pelo Mycobacterium leprae, um bacilo Ãlcool-Ãcido resistente. Tem alta infectividade, porÃm baixa patogenicidade, e quando se manifesta, apresenta-se sob uma grande diversidade de formas clÃnicas. Essa diversidade depende, em grande parte, da resposta imunolÃgica do hospedeiro, sendo os linfÃcitos, em sua plasticidade, componentes essenciais no desenvolvimento da imunidade. Assim, este trabalho teve como objetivo descrever as subpopulaÃÃes linfocitÃrias: linfÃcitos T totais (CD3+), T auxiliares (CD4+), T citotÃxicos (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), Natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) e T Natural killers - NKT (CD3+ CD16+ CD56+) no sangue perifÃrico de pacientes portadores de hansenÃase, antes e apÃs uso da multidrogaterapia. Os pacientes foram selecionados no Centro de Dermatologia D. LibÃnia, Fortaleza-CE, Brasil. A determinaÃÃo de linfÃcitos em cada subpopulaÃÃo foi realizada por citÃmetria de fluxo e anÃlise estatÃstica pelo programa GraphPad Prism 5.0 para Windows. A significÃncia foi estabelecida para valores de p<0,05. Um total de 133 amostras foram utilizadas para as comparaÃÃes, sendo 79 (59,4%) do gÃnero masculino e 54 (40,6%) do gÃnero feminino. A mediana da idade dos pacientes foi de 43 anos no grupo prÃ-tratamento e de 46 anos no pÃs-tratamento. Nove pacientes foram incluÃdos na forma paucibacilar e 124, na multibacilar. As medianas das contagens (cÃlulas/mm3) de linfÃcitos NK (CD3-CD16+ CD56+) nos grupos antes e apÃs tratamento foram 142,0 [15,0â463,0] e 189,5 [18,0 â 1037,0], respectivamente (p=0,0484), enquanto nÃo houve diferenÃas quando foram comparados os grupos pauci e multibacilar. As contagens de linfÃcitos T totais (CD3+), T auxiliares (CD4+), T citotÃxicos (CD8+), T (CD4+CD8+), B (CD19+), e NKT(CD3+CD16+CD56+) mantiveram-se inalteradas nos grupos antes e pÃs-tratamento, assim como nos grupos pauci e multibacilar. Em conclusÃo, os resultados deste estudo apontam para uma reduÃÃo na populaÃÃo de cÃlulas NK (CD3-CD16+CD56+) em indivÃduos com hansenÃase antes de qualquer intervenÃÃo terapÃutica. ApÃs o tratamento, hà uma recuperaÃÃo na contagem desta populaÃÃo celular. / Leprosy is a chronic infectious disease caused by the Mycobacterium leprae, a resistant alcohol-acid bacillus. It has a high infectivity, although the pathogenicity is low. Clinical manifestations present a great diversity. Host immune response is an important determinant of this clinical diversity, whilst lymphocytes collaborate to it. Thus, the present study aimed to describe lymphocyte subpopulations: T lymphocytes (CD3+), T helper lymphocytes (CD4+), T cytotoxic (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), Natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) and T Natural killers - NKT (CD3+CD16+ CD56+) in peripheral blood samples from patients with leprosy, before and after the treatment with multidrugtherapy. Patients were selected at the Dona Libania Dermatology Center, at Fortaleza-CE, Brazil. The determination in each subpopulation of lymphocytes was done by flow-cytometer and statistical analysis by GraphPad Prism 5.0 for Windows. Significance was established at p values of <0.05. A total of 133 samples were studied, while 79 (59,4%) were males and 54 (40,6%)females. Median age of patients was 43 years old for the group before treatment and 46 years old for the group after treatment. Nine patients presented with paucibacillary and 124 with multibacillary form. NK (CD3-CD16+ CD56+) lymphocytes medians cells/mmÂ) were 142.0 [15,0â463,0] and 189,5 [18,0 â 1037,0], respectively for the groups before and after treatment, with a p value of 0.0484. On the other hand, no differences were observed when pauci and multibacillary groups were compared. T lymphocytes (CD3+), T helper lymphocytes (CD4+), T cytotoxic lymphocytes (CD8+), T (CD4+CD8+), B lymphocytes (CD19+) and NKT lymphocytes (CD3+CD16+CD56+)were similar at the groups before and after treatment and also at pauci and multibacillary. In conclusion, data from this study shows a reduction at NK lymphocytes (CD3-CD16+CD56+) populations in leprosy before any therapeutical intervention. After leprosy treatment, a recovery of this cell population occurs.
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Estudo da relaÃÃo do Infiltrado InflamatÃrio Mononuclear e ExpressÃo de Ki-67, ColÃgeno IV e Laminina em Cistos Radiculares / Study Of The Relationship of Mononuclear Inflammatory Infiltrade and Ki-67, Laminin And Colagem Type IV expression in radicular Cysts

Renata Veras Carvalho MourÃo 19 February 2013 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os cistos dos ossos maxilares sÃo classificados como odontogÃnicos e nÃo odontogÃnicos. Dentre os odontogÃnicos inflamatÃrios, destaca-se o cisto radicular, e entre os de desenvolvimento, o dentÃgero. Estes cistos e suas variantes apresentam etiopatogÃnese e comportamento biolÃgico diferentes, mas sÃo igualmente lÃticos. A atividade proliferativa do epitÃlio de revestimento, dos componentes da membrana basal e da matriz extracelular, possivelmente, interferem nos mecanismos de crescimento, constituindo alvos de pesquisas. Este trabalho teve por objetivo avaliar a relaÃÃo do infiltrado inflamatÃrio mononuclear com a expressÃo de marcadores de proliferaÃÃo (Ki 67) e das proteÃnas da membrana basal e matriz extracelular nos cistos radiculares. Trata-se de um estudo retrospectivo e observacional tendo sido realizado um levantamento dos casos catalogados no ServiÃo de Biopsia do Departamento de Patologia e Medicina Legal (FAMED) e no LaboratÃrio de Patologia Bucal (FFOE) (UFC). ApÃs a revisÃo histolÃgica, os grupos foram divididos em cisto radicular intensamente inflamado (CRII) (n=17), cisto radicular levemente inflamado(CRLI)(n=.9) e cisto dentÃgero (CD) (n= 9). A presenÃa e intensidade do infiltrado inflamatÃrio histiolinfoplasmocitÃrio e preservaÃÃo do epitÃlio de revestimento foram os parÃmetros utilizados para seleÃÃo dos casos. Os espÃcimes foram submetidos à reaÃÃo de imuno-histoquÃmica por estreptoavidina biotina, utilizando-se os anticorpos Ki 67 (DakoÂ, 1:50), anti-colÃgeno IV (DBSÂ, 1:40) e anti-laminina (DBSÂ, 1:20). A expressÃo de Ki 67 foi mais intensa no grupo CRLI, quando comparada ao grupo CRII e CD. A expressÃo de colÃgeno tipo IV na membrana basal foi significante no grupo CRLI, quando comparada com o grupo CRII e CD. Jà a imunomarcaÃÃo de matriz extracelular variou de ausente a fraca nos grupos CRII e CRLI, enquanto no CD se exibiu de forma fraca a moderada, sendo esta diferenÃa significativa. A expressÃo de laminina em membrana basal nos grupos CRII e CD foi negativa e no grupo dos CRLI foi fraca e pontual. Concluiu-se que a presenÃa e a intensidade do conteÃdo inflamatÃrio na parede dos cistos radiculares parecem modificar a expressÃo dos fatores de proliferaÃÃo no epitÃlio de revestimento, e colÃgeno tipo IV e laminina na membrana basal, mas nÃo interferem no comportamento do colÃgeno IV da matriz extracelular nos cistos radiculares. A expressÃo de componentes da membrana basal (laminina e colÃgeno tipo IV) à maior nos cistos radiculares com leve infiltrado inflamatÃrio. / Jawbone cysts are classified as odontogenic and non-odontogenic cysts. The radicular cyst is the most common odontogenic cyst of inflammatory origin, whereas the detigerous cyst is the most common type of developmental odontogenic cyst. These cysts and their variations have different etiopathogenesis and biological behavior, but are equally lytic. The proliferation activity of the epithelial lining and the components of the basement membrane and extracellular matrix constitute targets of research. The aim of this study was to evaluate the relation between mononuclear inflammatory infiltrate and the expression of proliferative immunomarkers (Ki 67), and proteins of basement membrane and extracellular matrix in radicular cysts. In this retrospective observational study, all cases of jawbone cysts that had been recorded in the files of the Department of Pathology and Legal Medicine (FAMED), and of the Laboratory of Oral Pathology (FFOE) of the Federal University of Cearà (UFC) and reviewed. After histological revision, the groups were divided into heavily inflamed radicular cysts (HIRC) (n=17), slightly inflamed radicular cysts (SIRC) (n=9) and dentigerous cysts (DC) (n=9). The presence and intensity of the lymphoplasmacytic inflammatory infiltrate and the preservation of the epithelial lining were the parameters used to select the cases. Immunohistochemical analyses were performed using the standard streptavidin-biotin-peroxidase method. The primary antibodies used in this study included Ki 67 (DakoÂ, 1:50), Anti-Collagen Type IV (DBSÂ, 1:40) and Anti- Laminin (DBSÂ, 1:20).The immunoexpression of Ki-67 was more intense in the SIRC group compared to the HIRC group and DC. Likewise, the immunoexpression of Anti-Collagem Type IV in the basement membrane of the SIRC group presented a statistically significant difference compared to the HIRC group and DC . The expression of laminin in the basement membrane and in group HIRC and DC was negative and the group of SIRC was weak and punctual. It was concluded that presence and severity of inflammatory content wall of radicular cysts appear to modify the expression of proliferation factors in the coating epithelium and collagen type IV and laminin in the basement membrane but not modific with the behavior of extracellular matrix in radicular cyst. The expression of basement membrane components (laminin and collage type IV) is higher in radicular cyst with mild inflammatory infiltrade.
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QuantificaÃÃo por PCR em tempo real de Mycobacterium leprae em amostras de secreÃÃo nasal e biÃpsias de pele em hansenianos / Real-time PCR quantification of Mycobacterium leprae in nasal and biopse skin samples from leprosy cases

LÃvia Ãrika Carlos Marques 18 February 2013 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O Mycobacterium leprae, agente etiolÃgico da hansenÃase, nÃo à cultivÃvel em meio axÃnico. A quantificaÃÃo do bacilo realizada pelo exame baciloscÃpico e histopatolÃgico à Ãtil para a classificaÃÃo da hansenÃase na escolha e monitoramento do tratamento. No entanto, esta metodologia produz resultados de especificidade e sensibilidade limitada. A PCR em tempo real (qPCR) à um ensaio sensÃvel e especÃfico que permite a quantificaÃÃo a partir de diversas amostras e pode ser utilizada no diagnÃstico diferencial de muitos patÃgenos. Atà o momento, nenhum estudo avaliou a sensibilidade e especificidade da qPCR para o diagnÃstico da hansenÃase utilizando amostras de secreÃÃo nasal. Portanto, este estudo teve como objetivo detectar e quantificar o DNA de M. leprae por qPCR em amostras de secreÃÃo nasal e biÃpsias de pacientes com hansenÃase, correlacionando com a avaliaÃÃo clÃnica e o Ãndice baciloscÃpico. Foram analisadas 61 amostras de muco nasal e 19 amostras de biÃpsia de lesÃo de pele (pareadas) de casos confirmados de hansenÃase atendidos no Centro de ReferÃncia Nacional em Dermatologia SanitÃria Dona LibÃnia. Todas as amostras foram submetidas à extraÃÃo e amplificaÃÃo de DNA por nested PCR da regiÃo de 238 pb da sequÃncia RLEP2. Posteriormente as amostras foram submetidas à quantificaÃÃo da regiÃo 16S rRNA do genoma de M. leprae pela qPCR, cuja especificidade foi verificada atravÃs da curva de dissociaÃÃo (Tm=79,5ÂC). O mÃtodo foi suficientemente sensÃvel para detectar 20 fg de DNA de M. leprae, o equivalente a quatro bacilos. Na anÃlise da secreÃÃo nasal, o ensaio foi capaz de confirmar o diagnÃstico em 89,7% dos casos multibacilares (MB), e 73,3% dos casos paucibacilares (PB). A sensibilidade foi de 100% na analise de biÃpsias de pacientes MB. O nÃmero de bacilos detectados nas amostras de secreÃÃo nasal de pacientes com hansenÃase se manteve no intervalo de 1,39 x 103 a 8,02 x 105 bacilos, enquanto a detecÃÃo em biÃpsia de pacientes MB variou de 1,87 x103 a 1,50 x 106. A PCR em tempo real à mais sensÃvel do que a PCR convencional e pode ser utilizada como uma ferramenta complementar para o diagnÃstico clÃnico e histopatolÃgico da hansenÃase. / Mycobacterium leprae, the etiologic agent of leprosy, is not cultivable in axenic medium. The quantification of bacilli performed by skin bacilloscopy and histopathology is useful for the clinical classification of leprosy and treatment monitoring. However, this methodology yields low results regards to sensitivity and specificity. On the other way, the real-time quantitative PCR (qPCR) is a sensitive and specific assay that allows quantification of a varied of samples and also can be used for differential diagnosis of many pathogens. To this date, no studies have evaluated the sensitivity and specificity of qPCR for the diagnosis of leprosy from nasal secretion samples. Therefore, this study aimed at detecting and quantifying DNA from M. leprae by qPCR from nasal secretion and biopsy samples from leprosy cases, correlating with clinical and bacteriological index. We analyzed 61 samples of nasal secretion and 19 biopsy specimens of skin lesion (paired) from confirmed leprosy cases seen at the National Reference Center for Sanitary Dermatology Dona LibÃnia. All samples were subjected to DNA extraction followed by amplification by nested PCR of a region of 238 bp which targets a RLEP2 repetitive sequence. The samples were subjected to quantification of 16S rRNA region of the genome of M. leprae by qPCR, which specificity was verified by amplicon melting temperature (Tm = 79.5  C). The method was able to detect amounts over to 20 fg of M. leprae DNA, equivalent to four bacilli units. Nasal secretion assay was able to confirm the diagnosis in 89.7% of the multibacillary cases (MB) and 73.3% of the paucibacillary cases (PB). In addition, MB patient biopsies sensitivity was 100%. The number of bacilli detected in nasal secretion samples from leprosy patients ranged from 1.39 x 10 to 8.02 x 105 bacilli, while detection in MB patient biopsy ranged from 1,87 x 103 to 1,50 x 106. The real-time PCR is more sensitive than conventional PCR and can be used as a complementary tool for the clinical and histopathological diagnosis of leprosy.

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