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Protéolyse de la poly(ADP-ribose) polymérase par les protéases apoptotiques /D'Amours, Damien. January 1997 (has links)
Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1997. / Bibliogr.: f. 128-151. Publié aussi en version électronique.
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Impacts des UV sur la peau humaine : l'implication des voies MAP kinases /Ruel, Guillaume. January 2002 (has links)
Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2002. / Bibliogr.: f. 175-184. Publié aussi en version électronique.
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Rôle de la poly(ADP-ribose) polymérase dans l'apoptose induite par les dommages à l'ADN et dans le contrôle du cycle cellulaire /Halappanavar, Sabina S. January 2003 (has links)
Thèse (Ph. D.)--Université Laval, 2003. / Bibliogr. Publié aussi en version électronique.
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Rôle de la poly(ADP-ribose) polymérase-I comme coordinateur de la transcription dans le contexte de la réponse cellulaire aux dommages à l'ADN et la mort cellulaire /Yung, Tetsu M. C. January 2003 (has links)
Thèse (Ph. D.)--Université Laval, 2003. / Bibliogr.: f. [166]-176. Publié aussi en version électronique.
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Apoptose, microinflamação e expressão de receptores de hidrocarboneto arílico nos folículos pilosos de pacientes com alopecia de padrão femininoRamos, Paulo Müller [UNESP] 19 February 2013 (has links) (PDF)
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000753338.pdf: 2037475 bytes, checksum: 09c98e7253f95199ab127c0e47acab87 (MD5) / Alopecia de padrão feminino, ou alopecia androgenética feminina, é a principal causa de queda de cabelos em mulheres adultas, e inflige importante impacto na qualidade de vida das pacientes. Decorre da progressiva miniaturização de folículos pilosos e posterior diminuição da densidade dos fios, originando um quadro de alopecia difusa não cicatricial, com padrão clínico, dermatoscópico e histológico característicos. Apesar da elevada frequência e da relevância quanto ao impacto psicológico, sua fisiopatogenia não é ainda totalmente esclarecida, sofrendo influência de elementos genéticos, hormonais e ambientais. Além disso, a resposta ao tratamento é inconstante. Os receptores de hidrocarboneto arílico (AhR) podem ser ativados por diversos ligantes ambientais como poluentes (p. ex. dioxinas), fumaça do tabaco, radiação ultravioleta e pela ação microbiana (p.ex. Malassezia sp.), podendo exercer atividade proinflamatória, proapopótica, hormonal e carcinogênica, de acordo com o fator ativador e tecido alvo. Sua ação no folículo piloso e na alopecia de padrão feminino não foi ainda estudada. Neste trabalho, os autores avaliam a apoptose, infiltrado inflamatório e expressão de receptores de hidrocarboneto arílico nos folículos pilosos de pacientes com alopecia de padrão feminino. Foi conduzido um estudo transversal envolvendo 17 mulheres com alopecia de padrão feminino e cinco controles. Avaliaram-se amostras de pele do couro cabeludo que foram processados para HE, técnica do TUNEL e imuno-histoquímica para receptor de hidrocarboneto arílico. As variáveis foram comparadas de acordo com o grupo de folículos (terminal versus miniaturizado) e os grupos de pacientes (alopecia versus controles). Houve maior índice de apoptose (TUNEL) entre os folículos miniaturizados e entre os casos, além de significativa interação entre a categoria folicular e casos (p<0,01). Folículos miniaturizados apresentaram maior ... / Female pattern alopecia, or female androgenetic alopecia, is the main cause of hair loss in adult women and causes major impact on patient´s quality of life. It evolves from the progressive miniaturization of follicles that lead to a subsequent decrease of the hair density, leading to a non-scarring diffuse alopecia, with characteristic clinical, dermoscopic and histological pattern. Despite the high frequency and relevance about the psychological impact, its pathogenesis is not yet fully understood, but is influenced by genetic, hormonal and environmental factors. In addition, response to treatment is incostant. In this article, authors discuss the main clinical, epidemiological and physiopathological aspects of female pattern hair loss
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Expressão de survivina em tumores do estroma gastrointestinalFerreira, Sheila Schuch January 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / Background: Gastrointestinal stromal tumors are the most common mesenchymal tumors of the gastrointestinal tract. The well-described prognostic factors are tumor size, digestive tract localization and mitotic index. Survivin is an apoptosis inhibitor involved in cell cycle regulation normally expressed in the nucleus of embryogenic and pluripotent stem cells, but is usually absent in normal tissues. Survivin is aberrantly expressed in epithelial neoplasms. The expression profile of survivin in GIST is unknown. Methods: Tissue samples of 43 gastrointestinal stromal tumors specimens were analyzed by immunohistochemistry using TMA method and monoclonal antibodies for survivin with the avidin-biotin-peroxidades technique. The purpose was to determine the prevalence of survivin expression and to define its association with clinical and pathologic features and the clinical outcome. Expression of survivin was considered positive when more than 10% of observed tumor cells in the microscopic field demostrated immunostaining. Results:Survivin was expressed in 31 ( 72%) of 43 samples. Immunostaining ocurred in cytoplasm and no nuclear expression was seen. The correlation between survivin expression and clinical or pathologic features was not demonstrated. There is a trend in favor of survivin expression and time to progression in our data. Conclusions: The prevalence of survivin in GIST is similar to others studies previously related. The results of present study suggest that the apoptosis inhibition mediated by survivin has the potential to become an independent prognostic factor in GIST. / Base Teórica:Os GIST são as neoplasias mesenquimais mais freqüentes do trato gastrointestinal. Os fatores de prognóstico relevantes dos GIST são: o tamanho do tumor, topografia e índice mitótico. Survivina é uma proteína inibidora da apoptose envolvida na regulação do ciclo celular, normalmente expressa no núcleo de células pluripotenciais e geralmente inexistente em tecido normais. Survivina possui alta expressividade em neoplasias epiteliais. A expressão de survivina em GIST é desconhecida. Métodos: Amostras teciduais de 43 GIST foram analisadas através de estudo imunoistoquímico com método TMA e utilizando anticorpo monoclonal para survivina com a técnica de avidina-biotina-peroxidase. O objetivo primário foi determinar a prevalência da expressão de survivina nos GIST e definir sua associação com achados patológicos e evolução clínica. A expressão de survivina foi considerada positiva quando mais de 10% das células tumorais observadas em cinco campos de grande aumento apresentavam imunoreatividade. Resultados: Survivina foi expressa em 31 (72%) das 43 amostras. A predominância da expressão ocorreu no citoplasma enquanto que nenhuma reatividade nuclear foi encontrada. Não houve associação entre a expressão de survivina e achados clínico-patológicos. Houve uma tendência em favor da expressão de survivina e diminuição para tempo para progressão. Conclusões:A prevalência de survivina em GIST é semelhante ao anteriormente demonstrado em neoplasias epiteliais e mesenquimais. Os resultados do presente estudo sugerem que a inibição da apoptose mediada por survivina pode se tornar um fator de prognóstico em GIST.
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Alterações nas proteínas de fissão e fusão mitocondriais, caspase 3 e sinaptofisina cerebrais induzidas pela sobrecarga de ferro neonatal: reversão pelo tratamento com canabidiolSilva, Vanessa Kappel da January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / Iron accumulation in the brain has been observed in both normal aging and in several neurodegenerative diseases. We have previously shown that brain iron loading results in persistent memory deficits, which are accompanied by oxidative stress. Due to the high metabolic rate of the nervous system, mitochondria are present in large numbers in nerve cells. It has been demonstrated that through fission and fusion of mitochondria, these organelles promote changes in their structure and this dynamic can affect mitochondrial function and vice-versa. Deficits in supplying energy to the synapses have been linked to neurodegenerative diseases and once the functionality of neural circuits is reduced, these cells may activate neuronal death cascades. Here, we analyzed the effects of neonatally iron treatment on the following targets: Dynamin-1-like protein (DNM1L) and Optic atrophy 1 (OPA1), proteins involved in regulating mitochondrial fission and fusion, respectively; Caspase 3, a key protease of the effector phase of apoptosis; and Synaptophysin, as a synaptic marker. Additionally, we investigated the effects of Cannabidiol (CBD), the main non-psychotropic component of Cannabis sativa, previously shown to improve memory in iron-treated rats, in reversing iron-induced effects on DNM1L, OPA1, caspase 3, and synaptophysin. Male rats received vehicle or iron carbonyl (30mg/kg) at postnatal days 12-14. At adulthood, they were treated with vehicle or CBD (10 mg/kg) for 14 days. Hippocampal and cortical protein levels and gene expression were quantified using western blotting analysis and RT-qPCR, respectively. Quantitative measurements of proteins were made using densities of individual proteins, normalized to the density of β-actin. On RT-qPCR, samples were normalized to three reference genes (GAPDH, HPRT1 and RPL13A). Western blotting results indicated that neonatal iron treatment induced a significant reduction of DNM1L in the hippocampus and OPA1 in the cortex. Iron was also shown to increase caspase 3 both in the hippocampus and cortex, which was accompanied by a significant reduction of synaptophysin levels in the hippocampus. CBD reversed iron-induced effects, bringing hippocampal DNM1L, caspase 3 and synaptophysin levels back to values comparable to the control group. The present results suggest that iron may affect mitochondrial dynamics, possibly trigging synaptic loss and apoptotic cell death. The reversion of these effects by CBD, indicates its potential neuroprotective effect. / O acúmulo de ferro no cérebro tem sido observado tanto no envelhecimento normal quanto em muitas doenças neurodegenerativas. Previamente, mostramos que a sobrecarga de ferro no cérebro resulta em déficits de memória persistentes, acompanhados por estresse oxidativo. Devido à elevada taxa metabólica do sistema nervoso, as mitocôndrias estão presentes em grande número em células nervosas. Tem sido demonstrado que, por meio da fissão e fusão, essas organelas promovem alterações na sua estrutura e essa dinâmica pode afetar a função mitocondrial e vice-versa. Déficits no fornecimento de energia para as sinapses têm sido associados a doenças neurodegenerativas e com a redução da funcionalidade de circuitos neurais essas células podem ativar cascatas de morte neuronal. No presente trabalho, foram analisados os efeitos do tratamento do ferro neonatal sobre os seguintes alvos: proteína 1 semelhante à dinamina (DNM1L) e proteína atrófica óptica 1 (OPA1), envolvidas na regulação de fissão e de fusão mitocondrial, respectivamente; caspase 3, uma protease essencial da fase efetora da apoptose; e sinaptofisina, um marcador sináptico. Além disso, nós investigamos os efeitos do canabidiol (CBD), principal componente não psicotrópico da Cannabis sativa, já mostrado capaz de melhorar a memória de ratos tratados com ferro, na reversão dos efeitos induzidos pelo ferro sobre as proteínas DNM1L, OPA1, caspase 3 e sinaptofisina. Ratos machos receberam veículo ou ferro carbonila (30mg/kg) do 12º ao 14º dia pós-natal. Na idade adulta, foram tratados com veículo ou CBD (10mg/kg) durante 14 dias. Os níveis proteicos e a expressão gênica no hipocampo e córtex foram quantificados através de Western blotting e RT-qPCR, respectivamente. A quantificação das proteínas foi realizada através da medida das densidades das bandas individuais, normalizadas pela densidade de β-actina. Para o RT-qPCR, as amostras foram normalizadas para 3 genes de referência (GAPDH, HPRT1 e RPL13A). Os resultados da análise protéica indicaram que o tratamento com ferro no período neonatal induziu redução de DNM1L no hipocampo e OPA1 no córtex. O ferro também aumentou os níveis de caspase 3 tanto no hipocampo quanto no córtex, acompanhado por redução dos níveis de sinaptofisina no hipocampo. O CBD reverteu os efeitos induzidos pelo ferro, trazendo os níveis hipocampais de DNM1L, caspase 3 e sinaptofisina de volta aos valores comparáveis ao grupo controle. Os resultados sugerem que o ferro pode afetar a dinâmica mitocondrial, possivelmente desencadeando perda sináptica e morte celular por apoptose. A reversão desses efeitos pelo CBD indica o seu potencial efeito neuroprotetor.
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Avaliação de Reparo de DNA e Atividade Antioxidante do Extrato Etanólico e Substâncias Isoladas de Casearia sylvestrisPrieto, Aline Miranda [UNESP] 28 November 2012 (has links) (PDF)
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prieto_am_dr_arafcf.pdf: 2994693 bytes, checksum: 4a5745efb3d1e4179f19e828a3811dc8 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Trabalhos demonstraram que derivados da planta Casearia sylvestris protegem o DNA de danos. Dessa forma, este trabalho visa avaliar por quais mecanismos essa proteção ocorre. Os produtos naturais avaliados foram o extrato etanólico das folhas de C. sylvestris e os diterpenos clerodânicos obtidos deste extrato: casearinas B, D e X e caseargrewiina F. Para a avaliação dos efeitos propostos foram utilizadas como modelo as linhagens celulares HepG2, MRC5, XP4PA e Hepa 1c1c7. Primeiramente, os produtos naturais foram avaliados com relação à sua atividade citotóxica pelo teste do MTT e ensaio de sobrevivência clonogênica nos tempos de 24 e 48 h, obtendo-se o IC50 e o IC20. Em seguida, foi realizado o ensaio de genotoxicidade do cometa no tempo de 24 h utilizando-se incubação com a enzima FPG nas linhagens HepG2, MRC5 e XP4PA. Os produtos naturais se mostraram genotóxicos mesmo em pequenas concentrações. Após este ensaio, foi avaliada a antigenotoxicidade dos produtos naturais já nas concentrações pouco genotóxicas e não citotóxicas por 24 h. Para tanto, as células HepG2 foram expostas ao mutágeno peróxido de hidrogênio (H2O2 - 1mM) e pré e pós-tratadas com os produtos naturais. E, as linhagens MRC5 e XP4PA foram expostas à radiação ultravioleta C (UVC) e pré e pós-tratadas com os produtos naturais. Para a linhagem HepG2, o extrato etanólico, as casearinas B e D apresentaram inibição de danos fortes nas maiores concentrações testadas. Já para a linhagem MRC5 somente a casearina B foi capaz de produzir inibição moderada na concentração de 0,04 µM. Adicionalmente, foi verificada a resposta antiapoptótica dos produtos naturais pelo método da anexina-V-FITC/PI nas linhagens submetidas aos mesmos mutágenos do ensaio do cometa, aplicando-se o protocolo... / Studies have shown that Casearia sylvestris derivatives protect DNA from damage. Thus, the aim of this study was to evaluate the mechanisms through which this protection occurs. The samples used in this study were the ethanolic extract of C. sylvestris leaves and the clerodane diterpenes obtained from this extract, including casearins B, D and X, and caseargrewiin F. The following cell lines were used: HepG2, MRC5, XP4PA and Hepa 1c1c7. First, all samples were assessed for their cytotoxic activity by using both the MTT assay and the clonogenic survival assay after 24 and 48 h of exposure, yielding the IC50 and IC20. Afterwards, the genotoxicity of the samples was assessed within 24 h following incubation with the samples using the FPG enzyme in the cell lines HepG2, MRC5 and XP4PA. The compounds proved to be genotoxic at all concentrations tested. Subsequently, the antigenotoxicity of the samples was assessed at concentrations that were at very low levels of cytotoxic or genotoxic after 24 h. HepG2 cells were exposed to the mutagen hydrogen peroxide (H2O2, 1 mM) and either pre or post-treated with the samples. Additionally, the cell lines MRC5 and XP4PA were exposed to ultraviolet C (UVC) and either pre or post-treated with the compounds. For the ethanolic extract in the HepG2 cell line, the casearins B and D showed strong inhibition of damage at the highest concentrations tested. In the MRC5 cell line, only casearin B was able to produce moderate inhibition (at 0.04 mM). Additionally, the anti-apoptotic response of the samples was assessed by an anexinV-FITC/PI assay in cell lines that were exposed to the same mutagens used in the comet assay, followed by post-treatment with the samples. The clerodane diterpenes, at high concentrations, increased the percentage of live cells and decreased... (Complete abstract click electronic access below)
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Interação de Paracoccidiodes brasiliensis com células epiteliais. Caracterização de prováveis fatores de virulênciaAndreotti, Patrícia Ferrari [UNESP] 19 June 2006 (has links) (PDF)
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andreotti_pf_dr_arafcf.pdf: 3700497 bytes, checksum: 44fed3a7c2ab7db1a4fba80fbe6c2c51 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Os mecanismos de virulência de Paracoccidioides brasiliensis não estão completamente esclarecidos. Há consenso que subcultivos sucessivos deste fungo acarretam a perda de sua patogenicidade que pode ser revertida pelo reisolamento do agente após passagem em animal, recuperando assim alguns fatores de virulência. No presente estudo, tivemos como objetivo clonar e sequenciar uma banda polimórfica de 300pb do DNA genômico do isolado de P. brasiliensis com alta virulência (após reisolamento de animal), e assim caracterizar um provável fator de virulência deste fungo. Os resultados mostraram que as adesinas são capazes de induzir apoptose nas células estudadas por diferentes mecanismos. Assim podemos concluir que P. brasiliensis dispõe, como outros patógenos, de adesinas que participam, não só da adesão deste fungo às células do hospedeiro, mas também de outros importantes mecanismos que possa estar contribuindo para a sua patogênese. / The Paracoccidioides brasiliensis virulence mechanisms are not completely clarified. There is a consensus that successive subculturing of this fungus causes the loss of its pathogenicity, which can be reversed by passage in animals, with recovery of some factors of virulence. In the present study, we cloned and sequenced a polymorphic band of 300bp from P. brasiliensis genomic DNA of the one isolate with high virulence (after reisolation of animal). Thus, we can conclude that P. brasiliensis use, as many other pathogens, the adhesins as virulence factors to participate, not only of the adhesion of this fungus to the host cells, but in other important mechanisms to its pathogenesis.
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Influência da amoxicilina na virulência do Helicobacter pyloriDonofrio, Fabiana Cristina [UNESP] 27 April 2012 (has links) (PDF)
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000729611.pdf: 1074120 bytes, checksum: 01a15f0dd4775f078dccbc81da271357 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Helicobacter pylori é o principal agente etiológico causador da gastrite crônica, úlcera péptica, adenocarcinoma e linfoma gástrico. Concentrações subinibitórias de antimicrobianos podem modificar os fatores de virulência da bactéria e, consequentemente, a relação micro-organismo/hospedeiro, podendo alterar a progressão da infecção. Este estudo avaliou fatores de virulência de H. pylori cultivados em ½ e ¼ da concentração inibitória mínima de amoxicilina que poderiam alterar a liberação de citocinas, indução de óxido nítrico e apoptose em macrófagos RAW 264.7 infectados. A análise proteômica foi realizada por eletroforese bidimensional e a identificação das proteínas diferencialmente expressas através da digestão por tripsina e espectrometria de massas A indução de óxido nítrico foi analisada através do reagente de Griess, as citocinas (interleucina - 1 beta, interleucina - 6, interleucina - 10, interleucina - 12, fator de necrose tumoral alfa e fator transformador de crescimento - beta) por ensaio imunoenzimático e apoptose por citometria, após 24 horas de infecção. Nossos resultados demonstraram que H. pylori previamente mantidos em sub-CIMs de amoxicilina apresentaram maior expressão de proteínas de choque térmico, enolase, argininosuccinato sintase, superóxido dismutase, ATP alfa sintase e proteína ativadora de neutrófilo, proteínas capazes de aumentar a indução de NO, IL – 1 β e IL - 12 e apoptose em relação à macrófagos infectados com H. pylori sem tratamento. Estes resultados sugerem que a amoxicilina em concentrações subinibitórias pode estimular a resposta imune no hospedeiro através da indução de alguns fator... / The infection caused by Helicobacter pylori is considered a major etiology agent in chronic gastritis, peptic ulcer, gastric carcinoma and gastric lymphomas. Sub-inhibitory concentrations of antibiotics have been shown to change virulent expression of microorganisms, which may change the progression of infection. This study assessed virulence factors of H. pylori after contact with ½ and ¼ the minimal inhibitory concentration of amoxicillin subinhibitory concentrations of amoxicillin that could modify the induction of cytokines, nitric oxide and apoptosis by infect RAW 264.7 macrophage-like cells. The proteomic analysis was realized by two dimensional electrophoresis and proteins differential expressions were characterized by tryptic digestion and mass spectroscopy. The induction of nitric oxide was assayed by Griess reagent, cytokines (interleukin – 1 beta, interleukin - 6, interleukin - 10, interleukin – 12, tumor necrosis factor alpha and transforming growth factor - beta) by Enzyme-Liked Immunoabsorbent Assay and apoptosis by annexin V - fluorescein isothiocyanate after 24 hours. Our results demonstrated that H. pylori previously maintained in sub - MICs of amoxicillin showed higher expression of virulence factors such as heat shock proteins, enolase, argininosuccinate synthetase, superoxide dismutase, ATP synthase alpha and neutrophil-activating protein inducing more oxide nitric, interleukin - 1β and interleukin – 12 and increased apoptosis than macrophages infected with H. pylori without treatment. These results suggest that amoxicillin, at sub-inhibitory concentrations, could contribute to the stimulation of immune response in the ...
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