Orientadores : Vera Nisaka Solferini, João Semir / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T02:33:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jesus_FlaviaFuchsde_M.pdf: 2401675 bytes, checksum: ed542ab450a33a320e3068a87005a896 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador: Simone Liliane Kirszenzaft Shepherd / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:35:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kajiki_FatimaOdahara_D.pdf: 9625534 bytes, checksum: b759904477dc5eb6981456b7e7a086a2 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Várias espécies do gênero Baccharis têm sido usadas na medicina popular. Efeitos farmacológicos de muitas delas já foram comprovados, e, nos últimos anos, os compostos químicos de mais de 60 espécies foram identificados. No entanto, são raros os estudos biotecnológicos em espécies deste gênero. B. tridentata e B. dracunculifolia são plantas nativas, aromáticas e produzem óleo essencial, no qual os sesquiterpenos em maior concentração são: nerolidol, espatulenol e b-cadineno. Recentemente, foi comprovado o efeito inibitório do nerolidol no crescimento de Plasmodium falciparum, o mais perigoso agente causador da malária. Devido a alta mortalidade causada por esta doença e ao fato deste parasita estar se tomando resistente aos medicamentos convencionais, pesquisas com plantas que apresentam potencial terapêutico são importantes. Com a finalidade de obter rapidamente um grande número de plantas com as mesmas características da planta mãe, foram desenvolvidos protocolos de micropropagação para as duas espécies. A micropropagação de B. tridentata foi estabelecida através de ápices caulinares de uma única planta, permitindo a formação de um banco de plantas homogêneas (done) que foram utilizadas como fonte de explantes para os experimentos posteriores. Foi desenvolvido o protocolo de aclimatação para esta espécie, com 80% de sobrevivência das plantas deste done no ambiente ex-vitro. Já para B. dracunculifolia, devido a intensa oxidação dos explantes, a micropropagação foi possível somente através da germinação de sementes. A forte recalcitrância ao cultivo in vitro dificultou o prosseguimento dos experimentos com esta espécie. A espécie B. tridentata cresce em pequenas cavidades nas superficies rochosas do Planalto do ltatiaia. A peculiaridade deste habitat levou-nos a realizar alguns estudos fisiológicos in vitro, visando contribuir para a compreensão de alguns mecanismos de adaptação desta espécie, além de permitir o aperfeiçoamento do protocolo de micropropagação. Foram avaliados os efeitos da variação do pH inicial, da fonte preferencial de nitrogênio e da concentração de alguns macronutrientes no crescimento. Após 31 dias de cultivo, o crescimento das plantas resultou em acidificação do meio, com pH final de 3,5. Este clone apresentou maior crescimento (altura e massa de matéria seca) com fonte de nitrogênio constituída de mistura de NO3-+NH/, quando comparado com NO3- ou NH/ fornecidos isoladamente. O aumento do peso seco das raízes foi favorecido pela diminuição da concentração de magnésio no meio. Estudos recentes têm demonstrado que as culturas de partes aéreas podem constituir fonte viável de compostos secundários úteis, principalmente aqueles produzidos em estruturas altamente diferenciadas, como os tricomas glandulares (TG). Entretanto, plantas cultivadas in vitro apresentam, em geral, menor produção destes compostos, quando comparadas com aquelas cultivadas em campo. Esta baixa produção do cultivo in vitro tem sido relacionada com o menor grau de diferenciação. Este presente trabalho investigou os efeitos de alguns fatores microambientais, nutricionais e fitohormonais na diferenciação de algumas estruturas foliares, especialmente os TG, de um clone de B. tridentata cultivado in vitro. As plantas cultivadas in vitro apresentaram TG morfologicamente semelhantes aos da planta da casa de vegetação e do clone aclimatado. A utilização do tampão de algodão no frasco de cultura (em substituição ao PVC utilizado comumente como vedação) resultou em maior diferenciação das células paliçádicas do mesofilo. Neste tratamento, foi observado espaço subcuticular formado pela distensão da cutícula dos TG, sugerindo a secreção de material. O uso da vedação de algodão alterou o microambiente do frasco de cultura (diminuição da umidade e alteração das trocas gasosas) e provavelmente, favoreceu a diferenciação destas estruturas foliares. Outra alternativa para aumentar a produção de compostos acumulados nos TG é através do aumento da densidade destas estruturas (número de TG/mm2). Desta forma, investigamos o efeito dos mesmos fatores microambientais, nutricionais e fitohormonais, acima mencionados na densidade dos tricomas, em folhas adultas do clone de B. tridentata cultivado in vitro. Plantas cultivadas em casa de vegetação e clone aclimatado apresentaram maior densidade de TG do que o clone cultivado in vitro. Nos três casos a densidade dos TG foi maior na epiderme superior. Entre os tratamentos aplicados às plantas cultivadas in vitro, foi constatada interação altamente significativa da concentração de sacarose e fotoperiodo. A maior densidade foi favorecida pela luz contínua e 3% de sacarose. Embora o número de TG/mm2 (otimizado) obtido in vitro tenha sido menor do que o apresentado pelas plantas cultivadas em casa de vegetação e pelo done adimatado, ele foi significativo, principalmente se considerarmos o curto tempo de cultivo (31 dias). Portanto, há possibilidade de melhorar estes resultados, aumentando o tempo de exposição aos tratamentos / Abstract: Several species of the genus Baccharis have been used in folk medicine. Pharmacological effects of many of them were confirmed, and, in the last years more than 60 species have been investigated chemically. However, biotechnological studies are rare. B. tridentata Vahl. and B. dracunculifolia De. are native, aromatic plants and they produce essential oil, in which nerolidol, sphatulenol and b-cadinene are major sesquiterpenes. Recently, was demonstrated the inhibitory effect of nerolidol on the growth of Plasmodium falciparum, the most dangerous species that causes malaria. Due the high mortality caused by this disease and the fact of this parasite is becoming resistant to conventional drugs, researches with plants that present therapeutic potential are very important. With the purpose of obtaining a great number of plants with the same characteristics of parents plants, and quicky, micropropagation protocols were developed. The micropropagation of B. tridentata was stablished through shoot apex of a single plant, allowing the formation of homogeneous plant bank (done), with served as explant sources for later experiments. The acc1imatization of micropropagated plants was successful with 80 % of survival in the ex-vitro environrnent. For B. dracunculifolia, due to intense oxidation of explants, the micropropagation was only possible through the germination of seeds. The strong recalcitrant behaviour to the in vitro culture hindered to following the experiments ofthis species. Plants of B. tridentata grow in small cavities on the rocky surfaces of the Itatiaia Plateau. The peculiarity of this habitat took us to accomplish some in vitro physiological studies, seeking understanding adaptation mechanisms of this species, besides allowing the improvement of the micropropagation protocol. We verified the effects of the initial pH variation, the preferential nitrogen source and the concentration of some macronutrients on the growth. After 31 days of in vitro culture, the growth of done resulted in media acidification, with final pH as 3,5. The clone presented larger growth (heigth and dry matter) with NO3 +NH/ mixture, when compared with NO3- or NH4 -r supplied separately. The decrease of magnesium concentration in the culture media favoured the increment of dry matter by roots. Recent studies have demonstrated that shoot cultures can be a viable source of useful secondary compounds, mainly those produced in highly differentiated structures, as glandular trichomes (TG). However, in vUro cultured plants present, in general, smaller production compared with greenhouse grown plants. The lower production feature of in vitro cultured plants has been related with little differentiation degree. This present work investigated some microenvironrnentals, nutritional and phytohormonals factors in the differentiation of clone leaf structures, especially glandular trichomes. TG of tissue cultured plants were morphologically similar to that of greenhouse grown plants and acc1imated clone. The use of cotton lid in the culture vessel (in substitution to pvc closure) resulted in larger differentiation of palisade mesophyll cells. In this treatment, a subcuticular space formed by the detachment of cuticle were observed on the glandular trichomes, suggesting the production of secretory material. The use of cotton lid changes the vessel microenvironrnent (decrease of the humidity and increase of gaseous exchange) and probably, enhanced the leaf structures differentiation. Another altemative to increase the production of TG produced compounds is through the increase of the density of these structures (number of TG/mm2). This way, we investigated the effect of the same microenvironrnentaI, nutritional and phytohormonals factors, in the density of trichomes, in adult leaves of tissue cultured clone. Greenhouse grown plants and acc1imated clone presented larger density of TG than in vitro cultured plants. The density of TG was always larger in adaxial epidermis. Among the treatments applied to the in vitro cultured clone, there was highly significant interation of the sucrose concentration and photoperiod on the trichomes number. The largest density was favoured by the continuous light and 3% of sucrose. Although the best results of TG density obtained in the tissue cultured plants has been smaller than greenhouse grown plants and acclimated clone, the in vitro results were significant, mainly, if consider the short time of culture (31 days). Thus, there is possibility to improve these results increasing the time of exposure to the treatment / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientadores : Fernando Roberto Martins, Hermogenes de Freitas Leitão Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:51:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_TelmadeSouza_M.pdf: 11078148 bytes, checksum: 483645495a215441c926d896ce188147 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: (Flora fanerogâmica do município de Poços de Caldas, estado de Minas Gerais: família Compositae). Compositae é uma das famílias que apresentam o maior número de espécies na flora mundial. Suas espécies têm grande potencial econômico e as espécies usadas atualmente representam uma movimentação financeira muito grande no mundo. Este trabalho tem por objetivo levantar as espécies de Compositae ocorrentes no município de Poços de Caldas e oferecer chaves analíticas para sua identificação. Coletas foram feitas pela equipe do Departamento de Botânica do Instituto de Biologia da UNICAMP de 1980 a 1984, como parte do convênio estabelecido com a ALCOA Alumínio S.A.. Foram levantadas 131 espécies. Este trabalho apresenta chaves para gêneros e chaves para espécies, além de fornecer uma descrição detalhada de cada espécie e outras informações, como distribuição geográfica e uso popular / Abstract / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal

>Magister Scientiae - MSc / The tribe Anthemideae is a large tribe of the family Asteraceae comprising 111 genera and 1 800 species distributed in Africa, Europe, Asia, and the Northern temperate region, with southern Africa as one of its main centers of diversity, together with Central Asia and the Mediterranean. Ongoing studies have focused on analysing relationships among the southern African subtribes of Anthemideae and the most recent classification recognised fourteen subtribes in which there is a clear biogeographical gradient, with the six southern African subtribes comprising the earliest diverging lineages. The present study focuses on two of these southern African-centred lineages (viz. subtribes Athanasiinae and Phymasperminae). Previous phylogenetic studies of the tribe were based on nuclear nrDNA ITS and plastid cpDNA ndhF sequence data and included only a single representative from each of the genera within the subtribes Athanasiinae and Phymasperminae. The phylogenetic relationships and circumscriptions of the two subtribes have been uncertain and highlighted as being in need of re-assessment, as the monophyly of Athanasiinae is in question and the placement of Phymasperminae differed substantially between nuclear and plastid datasets. The present study aimed at expanding the datasets by including 78 of the 107 (73%) species for these two subtribes based on two nuclear (ITS and ETS) and two plastid (rpl32-trnL and 3’rps16-5’trnK) regions. The resultant nuclear and plastid data were analysed using Maximum Parsimony and Bayesian Inference and the phylogenetic trees used in the reconstruction of morphological characters to assess generic and subtribal relationships of Athanasiinae and Phymasperminae. The phylogenetic analyses of all datasets resolved the previous incongruent position of the subtribe Phymasperminae, consistently recovering the subtribe as sister to Athanasiinae to form a strongly supported monophyletic clade. This relationship between Athanasiinae and Phymasperminae was supported by the following synapomorphies: anthers with polarized endothecial tissues, leaves with secretory cavities and the presence of furanosesquiterpenes. While Phymasperminae could be circumscribed by the cypselas with more than ten ribs and the papillose pericarp, the circumscription of Athanasiinae would be problematic as there were no synapomorphies identified to circumscribe it. Phymasperminae is therefore here subsumed into an expanded Athanasiinae s.l. supported by the anthers with polarized endothecial tissues, leaves with secretory cavities and the presence of furanosesquiterpenes. Generic circumscriptions within the expanded Athanasiinae were also re-assessed and refined based on morphological and phylogenetic data. The circumscription of Phymaspermum Less. is here expanded to include the closely related Gymnopentzia Benth. and Eumorphia DC, while the monotypic genera Asaemia Harv. ex Benth. and Adenoglossa B.Nord. are subsumed within Athanasia L. and Leucoptera B.Nord., respectively. The expanded Phymaspermum s.l. can be recognized by the synapomorphic papillose fruit (either short or long and sometimes also with glandular trichomes) with multiple ribs (10 or more ribs). The previously unplaced genus Inulanthera Källersjö was shown to have a fairly isolated position in all analyses. The nuclear analyses recovered Inulanthera as sister to a broader Athanasiinae - Phymasperminae clade, while in the plastid analyses it was recovered with the Penztiinae - Ursiniinae clade.We therefore describe a new subtribe Inulantherinae S.Akimana, Boatwr. & Magee to accommodate the genus, which can be distinguished from the other subtribes by the tailed anthers, fruits lacking secretory cavities, elongated cells in the ribs and its pappus present as an extension of the cypselas ribs, with each rib extended as a small horn or as a scale. Several taxonomic and nomenclatural changes are implemented here based on the results of the expanded phylogenetic analyses and the morphological reconstructions. New combinations are provided for 9 taxa, two genera are reduced to sectional rank, one new subtribe described and the circumscription of one subtribe expanded.

Two fossil taxa Tubulifloridites antipodica and T. viteauensis recovered from the Eocene Knysna Lignite of South Africa were examined with scanning (SEM) and transmission electron microscopy (TEM). The details of their sculpturing and wall structure are similar to the same species of fossil dispersed pollen taxa recovered from southwestern Africa and South America. Fifteen species of the woody South African taxa, Brachylaena (9 species) and Tarchonanthus (6 species) were investigated with SEM and TEM. All of the taxa are tricolporate, spherical to slightly prolate, microechinate to echinate and have a bilayered columellate infrastructure, except B. ilicifolia, which has a single columellate infrastructural level with the "granularization" of the outer portion of the infrastructural layer or the inner layer of the tectum. There is a similar distribution of plesiomorphic and derived pollen characters in a number of aster subfamilies and tribes suggesting a similar evolutionary progression of pollen, and pollen wall character evolution was occurring synchronously in a variety of aster subfamilies during the middle Tertiary and that these unique pollen features may be important to the evolution and diversification of the Asteraceae.

Thesis (PhD)--Stellenbosch University, 2015. / ENGLISH ABSTRACT: How organisms respond to unpredictable environments is a fundamental question in evolutionary ecology. For example, plants may reduce the risk of reproductive failure by spreading their reproductive effort in space (dispersal) or in time (dormancy, iteroparity). Similarly, different plant breeding systems, (for example the ability to autonomously self-fertilise) may reduce the risk of reproductive failure in environments where pollination in particular is unreliable. Each of these strategies may be affected by selective pressures exerted by heterogeneous abiotic and biotic environments (e.g. unreliable rainfall patterns or range edge habitats). However, there is little theoretical or empirical consensus on how these strategies are related. In Chapter 2, I explore the association between dispersal and breeding system traits and range edge proximity. I show that annual daisies from Namaqualand, South Africa, are characterised by two discreet syndromes: high selfing ability associated with good dispersal and obligate outcrossing associated with lower dispersal, regardless of range position. This chapter illustrates that selection on both breeding system and dispersal traits may act consistently across distribution ranges. Because co-flowering plants often share pollinators, their fecundity is likely affected by changes in pollinator visitation rates or the transfer of conspecific relative to heterospecific pollen. In Chapter 3 I experimentally investigate the effects of con- and heterospecific density and spatial distribution pattern on pollination and fecundity in annual Namaqualand daisies. I show that increasing conspecific density and aggregation enhanced fecundity through increased mate availability and reduced heterospecific interference, independent of pollinator visitation rates. Moreover, I demonstrate the benefits of autonomous selfing when mates are limited and the potential for interspecific pollen transfer is high. In Chapter 4, I examine relative investment in dispersal vs. dormancy in seed heteromorphic Dimorphotheca (Asteraceae) species in relation to life history, rainfall unpredictability and range edge proximity. I show annuals and perennials differ significantly in the relative investment in different dispersal strategies. However, my findings provide little support for theoretical predictions of bet-hedging strategies in unpredictable or range edge habitats. This chapter emphasises the role of local environmental factors on fruit set that may obscure expected patterns across broad climatic gradients. Because of different costs and benefits of dispersal in space and time, we may expect negative patterns of covariation among dispersal and dormancy as alternative risk-reducing strategies. In Chapter 5, I provide evidence for a trade-off between these traits across 27 wind- dispersed daisy species from South Africa. This trade-off did not depend on life history effects, but was inconsistent at different levels of biological organisation. I also show that the effects of life history on spatial and temporal dispersal were inconsistent. Taken together, my research illustrates the importance of simultaneously investigating different risk-reducing strategies, because associations among them are clearly complex and often contradict theoretical expectations. Moreover I show that the effects of life history and phylogenetic relatedness cannot be disregarded. My findings underscore the importance of dispersal in space and time as well as autonomous selfing as risk-reducing responses to unreliable environments.

Neste trabalho estamos apresentando o estudo fitoquímico das partes totais da espécie Trichogonia menthaefolia Gardner (Asteraceae-Eupatorieae). O material vegetal foi coletado em Furnas ? MG e a partir do pó seco foram preparados os extratos em diclorometano e em metanol, em seqüência. Do extrato diclorometânico foram isolados: o sesquiterpeno 6?- angeloiloxi-eudesm-4(15)-eno, o triterpeno 3?-hidroxi-olean-12-eno, os triterpenos lupeol, taraxasterol, pseudotaraxasterol e 3?-hidroxi-olean-12-eno (identificados em mistura), os esteróides ?-sitosterol, estigmasterol, campesterol, estimast-7-en-3?-ol e espinasterol (identificados em mistura) e o flavonóide ramnocitrina. Do extrato metanólico foi isolado o flavonóide ramnocitrina 3-O-?-galactopiranosídeo. Estas substâncias, após isolamento e purificação por métodos cromatográficos, foram identificadas com o auxílio de várias técnicas espectroscópicas como: EM, EM-EM, RMN de 1H, 13C (PND; DEPT 135º) e a técnica bidimensional HMQC. Na identificação das misturas de triterpenos e esteróides a cromatografia de fase gasosa também foi utilizada.Neste trabalho estamos apresentando o estudo fitoquímico das partes totais da espécie Trichogonia menthaefolia Gardner (Asteraceae-Eupatorieae). O material vegetal foi coletado em Furnas ? MG e a partir do pó seco foram preparados os extratos em diclorometano e em metanol, em seqüência. Do extrato diclorometânico foram isolados: o sesquiterpeno 6?- angeloiloxi-eudesm-4(15)-eno, o triterpeno 3?-hidroxi-olean-12-eno, os triterpenos lupeol, taraxasterol, pseudotaraxasterol e 3?-hidroxi-olean-12-eno (identificados em mistura), os esteróides ?-sitosterol, estigmasterol, campesterol, estimast-7-en-3?-ol e espinasterol (identificados em mistura) e o flavonóide ramnocitrina. Do extrato metanólico foi isolado o flavonóide ramnocitrina 3-O-?-galactopiranosídeo. Estas substâncias, após isolamento e purificação por métodos cromatográficos, foram identificadas com o auxílio de várias técnicas espectroscópicas como: EM, EM-EM, RMN de 1H, 13C (PND; DEPT 135º) e a técnica bidimensional HMQC. Na identificação das misturas de triterpenos e esteróides a cromatografia de fase gasosa também foi utilizada. / In this study we are presenting the results of the phytochemical investigation of the Trichogonia menthaefoli Gardner (Asteraceae-Eupatorieae). This specie was collected in Furnas ? MG. Dicholorometanic and methanolic extracts were prepared from the dried powder plant material. These extracts were fractioned through chromatoghraphic methods. The dichloromethanic extract furnished the: sesquiterpene 6?-angeloyloxy-eudesm-4(15)-ene; triterpenes: 3?-hydroxy-olean-12-ene, lupeol, taraxasterol, pseudo-taraxasterol and 3?- hydroxy-olean-12-ene (identified in mixture) and the steroids: sitosterol, stigmasterol, stigmast-7-en-3?-ol, spinasterol and campesterol (identified in mixture) and the flavonóide rhamnocitrin. The methanolic extract afforded the flavonoid rhamnocitrin 3-O-?- galactopyranoside. Compound identification was performed by using a variety of spectroscopic methods, such as: MS, MS-MS, 1H and 13C NMR and HMQC bidimensional technique. The identification of mixtures (triterpenes and steroids) was also performed by gas chromatography in addition to other spectroscopic methods.

As análises dos voláteis por SPME/CG-EM das partes aéreas, flores e frutos de Bidens sulphurea e Bidens gardneri permitiram-nos constatar diferenças em suas composições químicas. Porém, em todas as frações analisadas os compostos majoritários foram os sequiterpenos b-cariofileno, germacreno D e biciclogermacreno. Apesar dos constituintes majoritários coincidirem nas frações analisadas das duas espécies, foi possível constatar a presença exclusiva de determinados metabólitos em cada fração. A partir das frações hexânicas, oriundas dos extratos etanólicos de B. sulphurea (partes aéreas e flores) e B. gardneri (partes aéreas), foram identificadas trinta e cinco, dezenove e vinte substâncias por CG-EM, respectivamente. Na fração hexânica das partes aéreas de B. sulphurea (BsfcEt/Hx) foram identificados, como constituintes majoritários, o óxido de cariofileno, espatulenol e _- cariofileno, enquanto que na fração hexânica de suas flores (BsflorEt/Hx) os principais constituintes identificados foram _-amirina e _-sitosterol e na fração hexânica das partes aéreas de B. gardneri (BgfcEt/Hx) foram os metabólitos _-estigmasterol e o trans-fitol. O estudo químico da espécie B. sulphurea (partes aéreas e flores) conduziu ao isolamento de um sesquiterpeno (1), 5 flavonas (2, 10, 13-15), 8 flavonóis (3-8, 11, 16), 1 aurona (9) e 2 chalconas (12, 17). Já o estudo de B. gardneri (partes aéreas) conduziu ao isolamento de 4 ácidos clorogênicos (21, 22, 27, 28), 3 poliacetilenos (18-20), 2 flavonas (25, 27), 3 flavanonas (23, 24, 30) e 2 chalconas (29, 31). Os metabólitos 3-O-_-glicopiranosil-tetradeca- 6(E),12(E)-dieno-8,10-diino-1,14-diol (18), 1-O-_-glicopiranosil-14-hidróxi-tetradeca-6(E), 12(E)-dieno-8,10-diino-3-ona (19), 4-metóxi-7-O-_-glicopiranosil-8,3-diidróxi-flavanona (23), 4-metóxi-7-O-_-(6-acetil)-glicopiranosil-8,3-diidróxi-flavanona (24) e 7-O-_-(6- trans-p-cumaroil)-glicopiranosil-8,34-triidróxi-flavanona (30) estão sendo descritos pela primeira vez na literatura. Enquanto que os flavonóides 3-O-_-xilopiranosil-quercetina (5), 3-O-a-arabinofuranosil-kaempferol (8) e 3-O-b-(6-trans-cafeoil)-galactopiranosil-quercetina (16) estão sendo relatados pela primeira vez na família Asteraceae e as substâncias 4(15)- eudesmeno-1_,6_-diol (1), 6-C-_-glicopiranosil-apigenina (2), 3-O-_-arabinofuranosilquercetina (6), 8-C-_-glicopiranosil-apigenina (13), 6-C-_-glicopiranosil-luteolina (14), 8-C- _-glicopiranosil-luteolina (15), ácido 1-metil-5-O-E-cafeoilquínico (22) e 7-O-_- glicopiranosil-apigenina (25) estão sendo relatadas pela primeira vez no gênero Bidens. Além disso, convém destacar que a partir das substâncias 2-O-_-glicopiranosil-trideca-3(E),11(E)- dieno-5,7,9-triino-1,13-diol (20), 4-metóxi-4-O-_-glicopiranosil-okanina (29) e 4-O-_-(6- trans-p-cumaroil)-glicopiranosil-okanina (31) há poucos relatos na literatura e ainda não foram descritos dados de suas propriedades biológicas. Na avaliação da atividade antialérgica das substâncias isoladas, os flavonóides causaram inibição da liberação de _-hexosaminidase de forma dose-dependente, sendo que as substâncias 11 e 31 foram as mais ativas e apresentaram CI50 de 5,1 ± 1,3 M e 5,8 ± 1,2 M, respectivamente. Dentre os extratos e frações avaliados biologicamente, observou-se que BsfcEt/Hx (maior teor de sesquiterpenos) causou um estímulo da liberação de _-hexosaminidase, enquanto que BsfcEt/Ac foi a fração mais ativa (CI50 = 1,3 ± 1,1g/mL). As análises desta última fração e de BsfcEt/DCM por CLAE-DAD-EM e CLAE-DAD-EM/EM revelaram que seus constituintes majoritários são os flavonóis 3, 4, 6 e 7. / The SPME/GC-MS analyses of aerial parts, flowers and fruits of Bidens sulphurea and Bidens gardneri showed the differences in their chemical compositions. However the sesquiterpenes _-caryophyllene, germacrene D and bicyclogermacrene were identified in all fractions analyzed as major compounds. It was observed the exclusive presence of metabolites in each fraction, in spite of major constituents were equal in fractions analyzed of two species. Thirty-five, nineteen and twenty substances were identified in the hexane fractions from ethanol extracts of B. sulphurea (aerial parts and flowers) and B. gardneri (aerial parts) by GC-MS. The major compounds were caryophyllene oxide, spathulenol and _-caryophyllene in the hexane fraction from aerial parts of B. sulphurea (BsfcEt/Hx), while _-amyrin and _- sitosterol were identified in the hexane fraction of its flowers and _-stigmasterol and transphytol were main constituents identified in the hexane fraction from aerial parts of B. gardneri. The chemical study of species B. sulphurea (aerial parts and flowers) led to the isolation of one sesquiterpene (1), five flavones (2, 10, 13-15), eight flavonols (3-8, 11, 16), one aurone (9) and two chalcones (12, 17). From B. gardneri (aerial parts), four chlorogenic acids (21, 22, 27, 28), three polyacetylenes (18-20), two flavones (25, 27), three flavanones (23, 24, 30) and two chalcones (29, 31) were isolated. The substances 3-O-_-glucopyranosyltetradeca-6(E),12(E)-dien-8,10-diin-1,14-diol(18), 1-O-_-glucopyranosyl-14-hydroxytetradeca-6(E),12(E)-dien-8,10-diin-3-one(19),4-methoxy-7-O_glucopyranosyl-8,3-dihydroxyflavanone (23), 4-methoxy-7-O-_-(6-acetyl)-glucopyranosyl-8,3-dihydroxyflavanone(24) and 7-O-_-(6-trans-p-coumaroyl)-glucopyranosyl-8,34-trihydroxyflavanone(30) are described for the first time in the literature. Whereas the flavonols 3-O-_-xylopyranosyl quercetin (5), 3-O-a-arabinofuranosyl kaempferol (8) and 3-O--(6-transcaffeoyl)-galactopyranosyl quercetin (16) are described for the first time in the Asteraceaeand 4(15)-eudesmene-1_,6_-diol (1), 6-C-_-glucopyranosyl apigenin (2), 3-O-_-arabinofuranosyl quercetin (6), 8-C-_-glucopyranosyl apigenin (13), 6-C-_-glucopyranosylluteolin (14), 8-C-_-glucopyranosyl luteolin (15), 1-methyl-5-O-E-caffeoylquinic acid (22)and 7-O-_-glucopyranosyl apigenin (25) for the first time in the genus Bidens. Moreover,there are few reports of the isolation and there are not studies of biological activities from 2-O-_-glucopyranosyl-trideca-3(E),11(E)-dien-5,7,9-triin-1,13-diol (20), 4-methoxy-4-O-_-glucopyranosyl okanin (29) and 4-O-_-(6-trans-p-coumaroyl)-glucopyranosyl okanin (31).The flavonoids showed inhibition of _-hexosaminidase released with dependent-doseresponse and the substances 11 (IC50 = 5,1 ± 1,3 M) and 31 (IC50 = 5,8 ± 1,2 M) were themost active. The BsfcEt/Hx fraction (highest concentration of sesquiterpenes) induced _-hexosaminidase released, while the BsfcEt/Ac fraction exhibited the lower IC50 (1,3 ±1,1g/mL). The flavonoids 3, 4, 6 and 7 were identified, by HPLC-DAD-MS and HPLCDAD-MS/MS, as major constituents in BsfcEt/Ac and BsfcEt/DCM fractions.

Cerca de 10% da flora mundial é representada pela família Asteraceae, uma das maiores famílias de Angiospermae, caracterizada não só pela diversidade morfológica e taxonômica, como também pela riqueza de metabólitos secundários apresentada pelas espécies estudadas dessa família. Lychnophora salicifolia Mart. é a espécie de maior distribuição geográfica do gênero (ocorrendo na Serra do Espinhaço na Bahia, em Minas Gerais e no sudeste de Goiás) e a mais polimórfica também. Entre seus usos etnobotânicos, destaca-se a ação anti-inflamatória e analgésica. Neste trabalho, realizamos o estudo da variação dos metabólitos polares dessa espécie, sendo que para isso foi utilizada a desreplicação do extrato bruto (metanol/água obtido a partir da folhas) através da análise por CLAE-DAD-EM, a qual permitiu a caracterização dos constituintes dessa mistura através da análise dos espectros de UV e dados de EM. Assim foi possível identificar 20 substâncias: ácido protecatecuico; ácido 3-O-E-cafeoilquínico; ácido 3-O-p-cumaroilquínico; ácido 4-O-E-cafeoilquínico; ácido 5-O-E-cafeoilquínico; ácido 4-O-p-cumaroilquínico; ácido 5-O-p-cumaroilquinico; ácido 5-O-feruloilquínico; vicenina-2 (6,8-di-C--glcosilapigenina); ácido 3,4-di-O-E-cafeoilquínico; ácido 3,5-di-O-E-cafeoilquínico; ácido 3-O-cumaroil 5-O-p-cafeoilquínico; ácido 3-O-cafeoil, 5-O-p-cumaroilquínico; ácido 4,5-di-O-E-cafeoilquínico; ácido 4-feruloil-5-O-E-cafeoilquínico; ácido 3,4 di-O-p-cumaroilquínico; ácido 3,5 di-O-p-cumaroilquínico; ácido 4,5 di-O-p-cumaroilquínico; ácido lychnofólico e o ácido 2-O-acetil lychnofólico. Para a validação da metodologia analítica foi utilizada uma substância pertencente a cada classe de compostos: ácido 5-O-E-cafeoilquínico, vicenina-2 e o ácido 2-O-acetil lychnofólico. Quanto à validação da metodologia analítica, esta garantiu a confiabilidade dos resultados e a credibilidade do método para os propósitos deste estudo, abrangendo a faixa de concentração necessária para as análises de variação populacional, além apresentar valores de limites de detecção e limites de quantificação, precisão e recuperação adequados. Na análise intrapopulacional, verificou-se uma variabilidade quantitativa entre indivíduos da mesma população, porém, em média os indivíduos pertencentes à mesma população são parecidos quimicamente. Já em relação ao estudo da variação populacional, pudemos verificar diferenças tanto quanti como qualitativas entre populações coletadas em regiões distintas do Brasil, sendo que a partir da análise estatística, verificamos que há uma correlação entre isolamento geográfico e diminuição da semelhança do perfil de metabólitos polares entre as plantas de populações diferentes indicando que o padrão encontrado para concentração dos metabólitos é influenciado pela distribuição geográfica das amostras. Todavia, não é possível determinar a localização das amostras unicamente pelas variáveis metabólicas estudadas. Assim, a concentração e presença dos metabólitos são influenciadas pela distribuição geográfica das amostras. / About 10% of the world flora is represented by the Asteraceae family, which has been extensively studied since it is one of the largest families of Angiospermae, characterized not only by morphological and taxonomic diversity but also the wealth of secondary metabolites produced by the species studied of this family. Lychnophora salicifolia Mart. is the most widely distributed species of the genus (occurring in the Serra do Espinhaço in Bahia, Minas Gerais and in the southeast of Goiás) and also is the most polymorphic. Its popular use is due to the anti-inflammatory and analgesic activity. In this work, we studied the variation of polar metabolites of this species using the dereplication of the crude extract (methanol/water obtained from the leaves) by the HPLC-DAD-MS analysis, which led us to identify the constituents of this mixture by analyzing the UV spectra and MS data. Thus it was possible to identify 20 substances: protocatechuic acid; 3-O-E-caffeoylquinic acid; 3-O-p-coumaroylquinic acid; 4-O-E-caffeoylquinic acid; 5-O-E-caffeoylquinic acid; 4-O-p-coumaroylquinic acid; 5-O-p-coumaroylquinic acid; 5-O-feruloylquinic acid; vicenin-2 (6,8-di-C--glucosylapigenin); 3,4-di-O-E-caffeoylquinic acid, 3,5-di-O-E-caffeoylquinic acid; 3-O-coumaroyl-5-O-p-caffeoylquinic acid; 3-O-caffeoyl acid, 5-O-p-coumaroylquinic acid; 4,5-di-O-E-caffeoylquinic acid, 4-feruloyl-5-O-E-caffeoylquinic acid; 3,4-di-O-p-coumaroylquinic acid; 3,5-di-O-p-coumaroylquinic acid; 4,5-di-O-p-coumaroylquinic acid; lychnofolic acid and 2-O-acetyl lychnofolic acid. To the validation of analytical methodology were used one substance belonging to each class of compounds: 5-O-E-caffeoylquinic acid, vicenin-2 and 2-O-acetyl lychnofolic acid. So, the validation of analytical method ensured the reliability and credibility of the results of the method for purposes of this study, covering the concentration range required for analysis of population variation and presents appropriates values of detection and quantification limits, precision and recovery. For intrapopulation analysis, there was a quantitative variability between individuals of the same population, but on average the individuals of the same population are similar chemically. In relation to the study of interpopulation variation, we could see quantitative and qualitative differences between populations collected from different regions of Brazil, and from the statistical analysis, we found that there is a correlation between geographic isolation and decrease of the similarity of the polar metabolites profile between plants of different populations. This indicated that the pattern found for the concentration of metabolites is influenced by the geographical distribution of samples. However, it is not possible to determine the location of the samples only by the metabolic variables studied. Thus, the presence and concentration of metabolites are influenced by the geographical distribution of samples.

O trabalho buscou investigar as variações sazonais de metabólitos secundários em Eremanthus glomerulatus Less (Asteraceae). Embora não ser utilizada para fins medicinais esta espécie contem substâncias biologicamente ativas. Para este estudo, foram selecionados dez indivíduos de uma mesma população localizada na região do município de Ibiraci - MG, que durante um período de aproximadamente dois anos (06/2000 a 04/2002) tiveram um de seus ramos coletados mensalmente. Visando a análise das folhas destes ramos uma metodologia para extração e análise de seus metabólitos secundários majoritários por CLAE-UV foi desenvolvida e utilizada para determinação de suas variações sazonais. A identificação destes metabólitos se deu principalmente pelas técnicas hifenadas CLAE-DAD-EM e CLAE-DAD-EM/EM. Os metabólitos que não puderam ser identificados por estas ferramentas foram isolados do extrato etanólico foliar desta espécie e identificados por RMN de 1H e 13C e EM. Durante este estudo foi verificado que o envelhecimento das folhas resulta em uma significativa redução no conteúdo de todos os seus metabólitos secundários. Também foi possível identificar nove metabólitos secundários pertencentes as classes dos ácidos cafeoilquínicos, derivados fenólicos e flavonóides, dos quais foram isolados três, sendo dois ainda não relatados na literatura. Quanto a variação sazonal pode-se verificar que os indivíduos apresentam perfis metabólicos bem semelhante com diferenças quantitativas mas praticamente não apresentando variações qualitativas entre os indivíduos. Pode-se observar também que há um metabolismo bem diversificado no qual nem sempre todos os indivíduos apresentam aumento de produção de um mesmo metabólito em determinada estação do ano. Apesar das variáveis é possível definir o outono e a primavera como as estações que durante o estudo apresentaram os melhores índices de produção de praticamente todos os metabólitos analisados. Por fim pode-se concluir que as variações sazonais em E. glomerutalus são significativas e que são determinantes para definir a época de futuras coletas para posteriores estudos químicos ou farmacológicos. / This study was performed to investigate the seasonal intrapopulational variations of the secondary metabolites in Eremanthus glomerulatus Less (Asteraceae). Although this species is not used for medicinal purposes, it contains biologically active substances. For this study, ten individuals from the same population located in the region of Ibirici city, Minas Gerais state, had one of their lbranches collected monthly for about two years (from 06/2000 to 04/2002). Aiming the analysis of the leaves from the branches, a methodology on UV-HPLC was developed and used for the extraction and analysis of major secondary metabolites to determine the seasonal variations. The identification of the metabolites has occurred mainly by the HPLC-DAD-MS and HPLC-DAD-MS/MS hyphenated techniques. The metabolites that could not be identified by these methods were isolated from ethanolic extract of leaves of these species and identified by NMR 1H and 13C and MS. During this study it was noticed that the aging of the leaves results in a significant reduction on the rate of all the secondary metabolites. It was also possible to identify nine secondary metabolites belonging to caffeoylquinic acids, phenolical derivatives and flavonoids, from which, three compounds were isolated, however two compounds wasnt described in the literature. Relating to the seasonal variation, it was possible to verify that the individuals present similar metabolic profiles with quantitative differences but practically without qualitative difference. It was also possible to observe that there is a diversified metabolism in which not all individuals present an increase in the production of the same metabolite on a specific season. Despite these variations, it is possible to define autumn and spring as the seasons that presented the best rates of production on practically all the analyzed metabolites. Finally, it is possible to conclude that the seasonal variation of E. glomerutalus is significant and decisive to define the right time for future collection for further chemical and pharmacological studies.