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Avaliação do efeito antimicrobiano e anti-inflamatório de derivados furoxânicos e benzofuroxânicos como alternativa para o tratamento da acne vulgar / Evaluation of antimicrobial and anti-inflammatory effects of furoxan and benzofuroxan derivatives as an alternative for acne vulgaris treatmentDelgado, Ivone Leila Lima [UNESP] 23 May 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-05-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A acne é uma doença autolimitada de componente multifatorial, caracterizada pela presença de inflamação e colonização bacteriana pelo microrganismo Propionibacterium acnes. Atualmente, o tratamento tópico e/ou oral, inclui fármacos com propriedades anti-inflamatórias, antimicrobianas e queratolíticas. Apesar dos efeitos benéficos no tratamento da acne, a terapia atual apresenta limitações que justificam a busca de novos fármacos. Furoxanos e benzofuroxanos são compostos heterocíclicos contendo a função N-óxido e que apresentam uma grande diversidade de propriedades farmacológicas, incluindo antimicrobiana. Neste trabalho investigouse o efeito antimicrobiano de compostos furoxanos e benzofuroxanos pertencentes à biblioteca de moléculas do laboratório de Química Farmacêutica e Medicinal da Faculdade de Ciências Farmacêuticas. Para fins de caracterização do espectro de ação, além do P. acnes foi realizado screening do perfil de atividade antimicrobiana frente às cepas fúngicas, bactérias Gram positivas e Gram negativas usando as técnicas de microdiluição. Os furoxanos e benzofuroxanos foram testados em concentrações que variaram de 0.03 a 100 μg/mL. Foram usados controles como a cefazolina (0.39 μg/mL) para P. acnes, o imipenen (<0.39 μg/mL) para as bactérias Gram positivas, aztreonan (<0.39 μg/mL) para as Gram-negativas, anfotericinaB (0.25 μg/mL) e o fluconazol (65 μg/mL) para as espécies de Candida e Cryptococcus, respectivamente. Após incubação, foram realizadas leituras visuais sem e com revelador resazurina (0.01%) para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM). Dos 20 compostos avaliados, 14 foram capazes de inibir o crescimento de, pelo menos, um microrganismo. O composto (E)-4-(3-((2-(3- hidroxibenzoil) hidrazona) metil) fenoxi)-3-(fenilsulfonil)-1, 2,5-oxadiazol-2-óxido (composto 15) se mostrou o mais ativo contra P. acnes apresentando CIM de 0.19 μg/mL. Estudos in vitro demonstraram para este composto capacidade de liberação de óxido nítrico, sendo este aumento de estresse oxidativo um dos possíveis mecanismos de ação. Esta molécula também foi capaz de inibir a produção do NO em macrófagos na concentração de 0.78 ug/mL. A avaliação in vitro da citotoxicidade em macrófagos e atividade anti-inflamatória por determinação quantitativa de IL1-β e a TNF-α foram realizadas. Determinou-se para o composto mais ativo contra P. acnes que a viabilidade em macrófagos é de 100% em concentrações inferiores a 0.09 μg/mL; entretanto, não foi possível observar capacidade de inibição destas citocinas nas concentrações usadas. Ensaio in vivo para o composto 15 não permitiram identificar redução da inflamação em modelo animal induzido por P. acnes. Em resumo, esses resultados permitem concluir que o composto (E)-4-(3-((2-(3-hidroxibenzoil) hidrazona) metil) fenoxi)-3-(fenilsulfonil)-1, 2,5-oxadiazol-2-óxido apresenta potente atividade antimicrobiana contra Propionibacterium acnes e pode se tornar uma alternativa terapêutica ao tratamento dessa doença. / Acne is a self-limiting disease of multifactorial component characterized by the presence of inflammation and bacterial colonization by Propionibacterium acnes. Currently, topical and oral treatments include drugs presenting anti-inflammatory, antimicrobial, exfoliating and keratolytics properties. The current treatment has shown adverse effects that justify the search for new anti-acne drugs.Furoxan and benzofuroxan are heterocyclic compounds containing the N-oxide function that exhibit a wide range of pharmacological properties, including antimicrobial. Here, we investigated the antimicrobial effect of furoxans and benzofuroxans derivatives from a library of compounds belonging to the Medicinal Chemistry Laboratory on the School of Pharmaceutical Sciences - UNESP. In order to characterize the spectrum of action not only P. acnes, but also fungal, Gram positive and Gram negative strains of bacteria were used. Minimum Inhibitory Concentration (MIC) was determinate by microdilution technique. Benzofuroxan and furoxans were tested at concentrations ranging from 0.03 to 100 μg/mL. It was used as controls:cefazolin (0.39 μg/mL) for P. acnes; imipenem (<0.39 μg/mL) for Gram positive bacteria; aztreonan (<0.39 μg/mL) to Gram-negative; amphotericin B (0.25 μg/ml) and fluconazole (>65 μg/mL) for species of Candida and Cryptococcus, respectively. After incubation, visual readings were performed with and without revealing reassuring (0.01%) to determine the MIC value. Over 20 compounds evaluated, 14 were able to inhibit the growth of at least one microorganism.The compound (E) -4- (3 - ((2- (3-hydroxybenzoyl) hydrazone) methyl) phenoxy) -3- (phenylsulfonyl) -1,2,5-oxadiazole-2-oxidewas the most active molecule against Propionobacterium acnes, presenting MIC value of 0.19 μg/mL. In vitro studies showed that this compound was able to release nitric oxide, which should be one of the modes of action for this compound. There was also inhibition of NO production in macrophage at the concentration of 0.78 ug/mL.The cellular viability against macrophage cells and the anti-inflammatory effect characterized by the inhibition of IL1-β e a TNF-α were performed. It was characterized in murine macrophages that the limit of 100% of viability is found at concentrations inferior to 0.09 μg/mL; however, it was not observed inhibition ability of these cytokines in the concentration used. The in vivo assay did not show anti-inflammatory activity of the tested compound. As conclusion, we identified the compound (E) -4- (3 - ((2- (3- hydroxybenzoyl) hydrazone) methyl) phenoxy) -3- (phenylsulfonyl) -1,2,5-oxadiazole- 2-oxideas a new drug antimicrobial active against Propionobacterium acnes. This compound could be used as a new alternative to treat acne.
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Avaliação in vitro da atividade antibacteriana de extratos de Byrsonima ssp E Alchornea ssp: estudo comparativo entre as técnicas de diluição em tubos e microplacasMoraes, Helen Pimenta de [UNESP] 28 July 2006 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2006-07-28Bitstream added on 2014-06-13T20:19:00Z : No. of bitstreams: 1
moraes_hp_me_arafcf.pdf: 1421590 bytes, checksum: 13ffb8dfe23f8d17e358dcedf26cd6c1 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O Brasil apresenta uma grande diversidade de plantas medicinais, cuja utilização pela população vem aumentando cada vez mais. Byrsonima (Malpighiaceae) e Alchornea (Euphorbiaceae) que são plantas do Bioma-Cerrado do estado de São Paulo apresentam compostos com grande potencial de atividade biológica, sendo entretanto, pouco estudadas. A atividade antimicrobiana é uma etapa de extrema importância na caracterização biológica de produtos naturais com potencial farmacológico. Nossos objetivos foram investigar a atividade antibacteriana de extratos metanólicos e clorofórmicos de Byrsonima spp. e Alchornea spp empregando as técnicas de diluição em tubos e em microplacas com leitura espectrofotométrica e visual utilizando resazurina como revelador. Foram utilizadas as bactérias: Escherechia coli, Staphylococcus aureus, Yersinia enterocolitica e Aeromonas hydrophila. Nos ensaios em microplacas e em tubos foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) dos extratos vegetais testados à concentração de 1000æg/mL a 31,25æg/mL. Objetivou-se também comparar a eficácia das metodologias empregadas. Nosso estudo demonstrou maior atividade antibacteriana dos extratos metanólicos tanto de Byrsonima quanto de Alchornea, ressaltando os dados obtidos com B. crassa (MeOH) e B. basiloba (MeOH) que apresentaram acentuada atividade antibacteriana frente aos diferentes microrganismos testados. As metodologias empregadas foram eficazes para essa finalidade sendo as de diluição em microplacas mais vantajosas, pelo emprego de pequenos volumes principalmente os de extratos vegetais que são obtidos em pequenas quantidades. Dentre os dois métodos de microdiluição, a que empregava leitura espectrofotométrica apresentou-se mais sensível, porém a de leitura visual mostrou-se mais prática na leitura final e na interpretação dos resultados. / Brazil presents a great diversity of medicinal plants, whose use by people increases more and more. Byrsonima (Malpighiaceae) and Alchornea (Euphorbiaceae) are plants of Bioma-Cerrado of the state of São Paulo and present composites with great potential of biological activity, but, however, they are little studied. The antimicrobial activity is a stage of extreme importance in the biological characterization of natural products with pharmacological potential. Our objectives were to investigate the antibacterial activity of methanolic and chlorophormic extracts of Byrsonima spp and Alchornea spp using the techniques of dilution in tubes and in microplates with spectrophotometric and visual readings using resazurin. Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Yersinia enterocolitica and Aeromonas hydrophila were tested. In the microplate and tubes assays, the minimum innhibitory concentration (MIC) of plant extracts were tested in concentrations between 1000æg/mL and 31.25æg/mL. It was also compared the effectiveness of the methodologies employed. Our study demonstrated greater antibacterial activity of methanolic extracts of both Byrsonima and Alchornea, standing out the data obtained for B. crassa (MeOH) and B. basiloba (MeOH), which presented accented antibacterial activity against the different tested microrganisms. The methodologies employed were efficient for this purpose and the microplate dilution assay is more advantageous, for the fact it uses smaller volumes, mainly for those vegetal extracts that normally are obtained in small amounts. Amongst the two methods of microdilution, the one that used spectrophotometric reading proved to be more sensitive, however, the visual reading procedure was shown to be more practical in the final reading and interpretation of the results.
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Comp?sitos de cimento ionom?rico modificados com fibras celul?sicas: caracteriza??o, comportamento mec?nico, atividade antimicrobiana e biocompatibilidade / Glass ionomer composites modified with cellulose fibers: characterization, mechanical behavior, antimicrobial activity and biocompatibilitySilva, Rafael Menezes 06 February 2013 (has links)
Submitted by Nivaldo Melo (nivaldo.melo@ufvjm.edu.br) on 2015-11-27T21:05:43Z
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Previous issue date: 2013 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (Capes) / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / O presente estudo foi dividido em tr?s partes, com os seguintes objetivos: Parte 1 - modificar o cimento de ion?mero de vidro (CIV) com duas concentra??es de fibras da celulose de eucalipto processadas mecanicamente (CIVMF), avaliando os comp?sitos desenvolvidos quanto ?s propriedades mec?nicas e caracterizando por microscopia eletr?nica de varredura (MEV) e espectroscopia de energia dispersiva de raios-X (EDS). Parte 2 - obter microfibras (mfC) e nanofibrilas (nfC) de celulose e modificar o CIV com tr?s concentra??es de mfC (CIVmfC) e cinco concentra??es de nfC (CIVnfC), avaliando novamente os comp?sitos obtidos quanto ?s suas propriedades mec?nicas, caracterizando por MEV/EDS, difra??o de raios-X (DRX), espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e analisando suas atividades antimicrobianas. Parte 3 ? avaliar a biocompatibilidade dos comp?sitos obtidos. Os grupos experimentais obtidos foram: G1- CIV - controle, G2- CIVMF1 e G3-CIVMF2 (parte 1); GC- CIV, G1- CIVmC 0,005g, G2- CIVmFC 0,010g e G3- CIVmFC 0,015g (parte 2); e GC- CIV, G01- CIVnfC 1%, G02- CIVnfC 0,8%, G03- CIVnfC 0,6%, G04- CIVnfC 0,4% e G05- CIVnfC 0,2% (parte 3). Os corpos de prova dos grupos foram submetidos aos ensaios mec?nicos e foram avaliados quanto ? morfologia, composi??o qu?mica elementar qualitativa, cristalinidade e estrutura qu?mica molecular. CIVMF1(G2) apresentou resist?ncia ? compress?o e tra??o diametral aumentada, quando comparado ao CIV. CIVMF2 (G3) apresentou melhores caracter?sticas de manipula??o, al?m de apresentar maior resist?ncia ? compress?o, tra??o diametral e m?dulo de elasticidade aceit?vel, devido ? adi??o de maior concentra??o de fibras ? constitui??o do material. Apesar de resultados n?o estatisticamente significativos, a adi??o de mfC no CIV aumentou suas propriedades mec?nicas, sendo que o acr?scimo de mFC no comp?sito CIVmfC (G3) aumentou seu m?dulo de elasticidade ? compress?o, significativamente. Nos comp?sitos CIVnfC a resist?ncia mec?nica tamb?m apresentou-se aumentada, sendo que CIVnfC 0,2% (G05) apresentou melhor resist?ncia ? tra??o diametral e CIVnfc 0,4% (G04) mostrou significativo aumento da resist?ncia ? compress?o e excelente performance quanto ao desgaste e resist?ncia ? tra??o. Os comp?sitos CIVmfC e CIVnfC n?o apresentaram halo de inibi??o frente aos microrganismos analisados, comparando-se ao comportamento do CIV. Os comp?sitos apresentaram-se est?veis, com morfologia, estrutura e composi??o qu?mica elementar semelhantes aos seus materiais precursores. N?o houve forma??o de nova fase cristalina ou novas liga??es qu?micas detect?veis neste estudo. Nos comp?sitos CIVnfC observou-se forma??o de uma trama envolvendo nanofibrilas, matriz ciment?cea e part?culas de carga, sendo que a distribui??o de nfC na massa de CIV mostrou-se mais homog?nea no comp?sito CIVnfC 0,4%. CIVmfC e CIVnfC foram biocompat?veis, apresentando a??o estimuladora celular e baixa irritabilidade tecidual, semelhante ao grupo controle (CIV). As nanofibrilas de celulose apresentaram-se como uma promissora op??o para refor?o do CIV, com melhoria das propriedades mec?nicas finais dos comp?sitos desenvolvidos, resultando em um novo e promissor biomaterial restaurador dent?rio. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Odontologia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2013. / ABSTRACT
The present study was divided in three parts, with the following objectives: Part 1 - modify the glass ionomer cement (CIV) with two concentrations of mechanically processed eucalyptus cellulosic fibers (CIVMF), evaluating the developed composites according to their mechanical properties and characterizing by scanning electron microscopy (SEM) and energy dispersive X-ray spectroscopy X (EDS). Part 2 ? to obtain cellulose microfibers (mfC) and celulose nanofibrils (nfC) and modify the CIV with three concentrations of mfC (CIVCmfC) and five concentrations of nfC (CIVnfC), evaluating the developed composites according to their mechanical properties, characterizing by SEM/EDS, X-ray diffraction (XRD), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and analyzing their antimicrobial activity. Part 3 ? to evaluate the biocompatibility of the composites. The experimental groups were: G1-CIV - control, G2 (CIVMF1) and G3 (CIVMF2) (part 1), GC-CIV, G1-CIVmfC 0.005 g, G2-CIVmfC 0.010 g and G3-CIVmfC 0.015 g (part 2), and GC-CIV, G01-CIVnfC 1%, G02- CIVnfC 0.8%, G03- CIVnfC 0.6%, G04- CIVnfC 0.4% and G05- CIVnfC 0.2% (part 3). Specimens from both groups were subjected to mechanical tests and were evaluated for morphology, qualitative chemical composition, crystallinity and molecular structure. CIVMF1 (G2) had compressive strength and diametral tensile increased when compared to the GIC. CIVMF2 (G3) showed better handling characteristics, besides higher compressive strength, tensile modulus and diametral acceptable due to the addition of higher concentration of fibers to the constitution of the material. Although not statistically significant, the addition of mfC in CIVmfC increased its mechanical properties; the addition of mfC in the composite CIVmfC (G3) increased their compressive modulus significantly. In the composite CIVnfC , the mechanical strength was also increased, with CIVnfC 0.2% (G05) showing better results in the diametral tensile and CIVnfC 0.4% (G04) showed significant increase in compressive strength and excellent performance for wear resistance and tensile strength. The composites CIVmfC and CIVnfC showed no zone of inhibition against the microorganisms analyzed compared to the CIV. The composites were stable, morphology; structure and chemical composition were similar to their precursor materials. In this study there was no formation of new crystallographic phase or new chemical bonds detectable. It was observed the formation of net involving nanofibrils, cementitious matrix and filler particles, and the distribution of nfC of the mass of CIV proved to be more homogeneous in the composite CIVnfC 0.4%. CIVmfC and CIVnfC were biocompatible presenting cell stimulatory action and low irritability to the tissue, similar to the control group (CIV). The cellulose nanofibers proved to be an excellent option for strengthening the CIV with improved mechanical properties of the final developed composites, resulting in a new and promising restorative dental biomaterial.
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Utilização de revestimento comestível contendo amido e nisina na conservação de salada de frutas minimamente processadas / Use of edible coating starch and nisin in the conservation of fresh cut fruit saladCouto, Hyrla Grazielle Silva de Araújo 29 February 2016 (has links)
The aim of this study was to evaluate the action of edible coating the corn starch-based embedded with the bacteriocin nisin in the conservation of fresh cut fruit salad. The salads were composed of mango, papaya and pineapple. After processing the minimum salads were submitted to the following treatments: uncoated fruit salad (control); Corn starch coating without Nisin; and corn starch coating with Nisin. All samples were packed in polyethylene terephthalate (PET) packages for 12 days at 5 ± 1 ° C and 80% RH. At 0, 3, 6, 9,12 physicochemical analysis of soluble solids content were held, pH, titratable acidity, ascorbic acid content, phenolic compounds, carotenoids, color, loss of weight and Polyphenol oxidase activity of enzymes. The microbiological analysis included aerobic mesophilic count, molds and yeasts, and survival analysis of Listeria monocytogenes inoculated in minimally processed fruit salads plus the added edible coating or not nisin. The fruit salads treated with edible coating nisin and showed significantly less mass loss, and increased vitamin C content when compared with control treatment samples. Coated fruits showed also significantly lower levels of soluble solids and lower activity of polyphenol oxidase. There was no significant variation in relation to the analysis of pH, acidity, carotenoids and color among treatments. It was observed increase in mesophilic aerobic count in all samples but, on samples coated with starch and nisin, it was found that the microbial population was statistically lower than the other treatments. Samples of fruit salad coated with corn starch, had significantly lower counts of yeasts and molds until the 6th day of storage. The presence of nisin resulted in significant reduction in the number of viable cells of the bacterium L. monocytogenes inoculated in output of fruit, unchecked behavior in samples of other treatments during the 12 days of storage at 5 ° C. The results of this study demonstrate that the use of corn starch coating and nisin combined with good processing practices and minimum control of storage conditions (temperature and humidity) was effective in preserving minimally processed fruit salads. Once a positive influence on the physical and chemical parameters evaluated, and obtained the best results in relation to maintaining the microbiological quality of salads for up to 12 days. / O objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação do revestimento comestível a base de amido de milho incorporado com a bacteriocina nisina, na conservação de salada de frutas minimamente processadas. As saladas foram compostas por manga, mamão e abacaxi. Após processamento o mínimo as saladas foram submetidas aos seguintes tratamentos: salada de frutas sem revestimento (controle); revestimento de amido de milho sem Nisina; e revestimento de amido de milho com nisina. Todos os produtos foram acondicionados em embalagens de tereftalato de polietileno (PET) por 12 dias a 5±1°C e 80% UR. Nos tempos 0, 3, 6, 9,12 foram realizadas análises físico-químicas de teor de sólidos solúveis, pH, acidez titulável, teor de ácido ascórbico, compostos fenólicos, carotenoides, cor, perda de massa fresca e atividade da enzima polifenol oxidase. As análises microbiológicas incluíram contagem de aeróbios mesófilos, bolores e leveduras, e a análise da sobrevivência de Listeria monocytogenes, previamente inoculadas nas saladas de frutas minimamente processadas acrescida do revestimento comestível adicionado ou não de nisina. As saladas de frutas tratadas com revestimento comestível e nisina apresentaram perda de massa significativamente menor, e maior teor de vitamina C quando comparadas com as amostras do tratamento controle. Frutos revestidos apresentaram também, teores significativamente menores de sólidos solúveis e menor atividade da enzima polifenol oxidase. Não foi observada variação significativa em relação às análises de de pH, acidez, carotenoides e cor entre os tratamentos estudados. Foi verificado aumento na contagem de microrganismos aeróbios mesófilos em todas as amostras porém, em amostras revestidas com amido e nisina, verificou-se que população microbiana foi estatisticamente menor que nos demais tratamentos. Amostras de salada de fruta revestidas com amido de milho, apresentaram contagens significativamente menores de bolores e leveduras até o 6º dia de armazenamento. A presença da nisina resultou em redução significativa no número de células viáveis da bactéria L. monocytogenes inoculada em salda de frutas, comportamento não verificado nas amostras dos demais tratamentos durante os 12 dias de estocagem a 5±1ºC. Os resultados obtidos neste estudo demonstram que a utilização de revestimento de amido de milho e nisina, associado a boas práticas de processamento mínimo e controle das condições de armazenamento (temperatura e umidade), foi eficiente na conservação de saladas de frutas minimamente processadas. Uma vez que interferiu positivamente nos parâmetros físico-químicos avaliados, e obteve os melhores resultados em relação a manutenção da qualidade microbiológica das saladas por até 12 dias.
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Avalia??o da atividade anti-Helicobacter pylori e citot?xica in vitro de extratos org?nicos obtidos das folhas de Encholirium spectabile e Syzygium cuminiAraujo, Gabriela Medeiros 26 March 2014 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2015-11-06T14:33:38Z
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Previous issue date: 2014-03-26 / A Helicobacter pylori ? uma bact?ria espiralada, Gram negativa, m?vel emicroaer?bia reconhecida como uma das principais causas de gastrite, ?lcera, c?ncerg?strico e do linfoma de c?lulas B de baixo grau de tecido linfoide associado ? mucosa(MALT), se constituindo um microrganismo em destaque na ?rea da microbiologiam?dica. Sua import?ncia se deve ? dificuldade de tratamento, devido ? necessidade douso concomitante de v?rios medicamentos al?m do crescente surgimento de cepasresistentes e multirresistentes aos antibi?ticos empregados na cl?nica. Com o intuito deampliar a gama de op??es terap?uticas eficazes e seguras, ultimamente, vem sendointensificados estudos qu?micos sobre plantas medicinais, seja atrav?s da obten??o deextratos, fra??es, compostos isolados ou ?leos essenciais que apresentem algum tipode atividade biol?gica. Diante do exposto, objetivouseavaliar a atividade inibit?ria deextratos vegetais oriundos do Syzygium cumini e Encholirium spectabile, plantas comhist?rico de a??o anti?lceras, e do ?leo essencial obtido do S. cumini frente a H. pylori(ATCC 43504) utilizando a t?cnica de difus?o em disco, para avalia??o qualitativa, e adetermina??o da concentra??o inibit?ria m?nima (CIM), atrav?s da t?cnica demicrodilui??o em caldo, para an?lise quantitativa. Tamb?m foi avaliada a toxicidade invitro dos extratos a partir de ensaio hemol?tico, utilizando eritr?citos de carneiro, e emcultura de c?lulas HeLa e VERO, pelo ensaio colorim?trico de viabilidade celularutilizando o MTT. Os extratos de ambos vegetais empregados nos ensaiosantimicrobianos n?o inibiram o crescimento bacteriano, em contrapartida o ?leoessencial do S. cumini (SCFO) mostrouseeficaz, exibindo CIM de 205 ?g/mL (dilui??oequivalente a 0,024% do ?leo bruto). Quanto ao ensaio hemol?tico, o mesmo ?leo aindaexibiu toxicidade intermedi?ria ao promover 25% de hem?lise a 1000 ?g/mL. Em rela??o? citotoxicidade em cultura de c?lulas, o SCFO, a 260 ?g/mL, comprometeu a viabilidadecelular de cerca de 80% das c?lulas HeLa e 50% das c?lulas VERO. Portanto o ?leoobtido das folhas do S. cumini apresenta potencial antibacteriano frente a H. pylori epotencial citot?xico, sugerindoseuma fonte de novas mol?culas candidatas a f?rmacos,desde que novas etapas de toxicidade in vitro e in vivo assim como caracteriza??oqu?mica sejam avaliadas. Al?m disso, o desenvolvimento de um sistema de libera??o def?rmacos pode resultar em um prot?tipo a ser utilizado em testes pr?cl?nicos. / Helicobacter pylori
is a spiral, Gram negative, mobile, and microaerophilic
bacteria recognized as a major cause of gastritis, ulcer, gastric cancer, and gastric low
grade, B
cell, mucosa
?
associated lymphoid tissue (MALT) lymphoma, constituting an
important microorganism in
medical microbiology. Its importance comes from the
difficulty of treatment because the requirement of multiple drugs use, besides the
increasing emergence of resistant and multiresistant strains to antibiotics used in th
e
clinic. In order to expand
safe and effective therapeutic options
,
chemical studies on
medicinal plants by obtaining extracts, fractions, isolated compounds or essential oils
with some biological activity
has been intensified
. Given the above, the objective was to
evaluate the inhi
bitory activity of organic extracts derived from
Syzygium cumini
and
Encholirium spectabile,
with antiulcer history, and the essential oil, obtained from
S.
cumini,
against
H. pylori
(ATCC 43504) by the disk diffusion method, for qualitative
evaluation, an
d determination of minimum inhibitory concentration (MIC) using the broth
microdilution method, for quantitative analysis. Also was evaluated the extracts
in vitro
toxicity by a hemolytic assay using sheep red blood cells, and VERO and HeLa cells
using the
MTT assay to analyze cell viability. The extracts of both plant used in
antimicrobial assays did not inhibit bacterial growth, however the essential oil of
S.
cumini
(SCFO) proved effective, showing MIC value of 205 ?g/mL (0.024 % dilution of
the original
oil). In the hemolytic assay, the same oil shows moderate toxicity, by promote
25% hemolysis at 1000 ?g/mL. Regarding the cytotoxicity in cell culture, the SCFO, at
260 ?g/mL, affected the cell viability around 80% of HeLa and 50% of VERO cells. So
the oi
l obtained from
S. cumini
leaves has antimicrobial activity against
H. pylori
and
cytotoxicity potential, suggesting a source of new molecule drug candidates, since new
stages of toxicity
in vitro
and
in vivo,
as well, chemical characterization be evaluate
d.
Moreover, the development of a prospective drug delivery system can result in a
prototype to be used in preclinical tests.
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Atividade antimicrobiana de materiais reparadores de uso endodôntico pelos testes de difusão em ágar e por contato direto / Antimicrobial activity of repair materials of endodontic use by the agar diffusion test and the direct contact testChristiane Mazurek da Cruz Ribeiro 29 February 2008 (has links)
O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana dos materiais reparadores de uso endodôntico MTA/Bio Angelus, cimento Portland branco, MTA Angelus branco e MTA ProRoot branco sobre os microorganismos Enterococcus faecalis, Escherichia coli e Staphylococcus aureus pelos os testes de difusão em ágar e de contato direto. Os dados experimentais foram obtidos através da mensuração do halo de inibição formado e pela contagem de unidades formadoras de colônia, respectivamente. Para análise dos dados empregaram-se os testes estatísticos de Análise de Variância (ANOVA) e de Comparações Múltiplas de Tukey. De posse dos resultados, foi possível verificar que o MTA/Bio Angelus apresentou atividade antimicrobiana sobre todas as espécies bacterianas testadas no teste de difusão em ágar e no teste por contato direto, o material reparador demonstrou atividade antimicrobiana superior aos demais materiais testados e que este último teste demonstrou ser uma metodologia segura, reproduzível e confiável. / The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of repair materials of endodontic use MTA/Bio Angelus, white Portland cement, white MTA Angelus and white MTA ProRooton Enterococcus faecalis, Escherichia coli and Staphylococcus aureus by the agar diffusion test and the direct contact test. Data was retrieved by measuring the zones of inhibiton and by counting colony-forming units, respectively. Statistical analysis was performed using the ANOVA test followed by Tukey Multiple Comparisons test. The results showed that MTA/Bio Angelus presented antimicrobial activity against all bacteria in the agar diffusion test and in the direct contact test, MTA/Bio Angelus presented superior antimicrobial activity. In addition, our results suggest that the use of the direct contact test is a safe, reproducible and trustable method.
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Constituintes químicos e atividade farmacológica de Erythroxylum pulchrum St. Hil. (Erythroxylaceae)Albuquerque, Camila Holanda de 25 February 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The natural products represent a rich source of bioactive compounds and are an
example of molecular diversity, with a well-known potential on the discovery and
development of new drugs. Erythroxylum pulchrum, (Erythroxylaceae) is an exclusive
species from the brazilian flora, distributed on the northeast and southeast regions of the
country; which can be found in Paraíba in a particular area of Pico do Jabre PB . A
voucher specimen is deposited at the Professor Lauro Pires Xavier (JPB) herbarium
with the code 4947. On this phytochemical study the dried powder of the aerial parts
was submitted to an extraction with methanol, followed by partition. The ethyl acetate
fraction was submitted to a Medium Pressure Liquid Chromatography. Therefore, it was
possible to identify four flavonoids: epicatechin, quercetin-3-O-α-Lrhamnoside,
ombuin-3-rutinosideand ombuin-3-rutinoside-5-glucoside. The hexanic
fraction was also submitted to a Medium Pressure Liquid Chromatography which led to
the identification of one terpenoid - lupeol and one steroid - β- sitosterol. These
substances were identified by analysis of data obtained from spectroscopic methods
such as infrared, mass spectrometry and NMR of 1H and 13C, with the aid of two
dimensional techniques, besides comparison with literature data. It was also evaluated
the antimicrobial activity from its crude extract against bacterial strains of clinical
matter by measuring the minimum inhibitory concentration for each bacterial strain
tested by the microdilution assay. So, the crude extract inhibited the growth of the
following bacterial strains: Bacillus subtilis CCT 0516, Escherichia coli ATCC 2536,
Pseudomonas aeruginosaA TCC 8027, Pseudomonas aeruginosa ATCC 25619,
Staphylococcus aureusATCC 6538, Staphylococcus aureusATCC 25925, Streptococcus
sanguíneos, Streptococcus salivares, Streptococcus mutansand Streptococcus ATCC.
However, the genus Staphylococcus aureus ATCC 25925 was the most sensible, but on
the other hand, the species Streptococcus sanguíneos e Streptococcus salivares was the
most resistant against the antimicrobial effect of the crude extract. The results obtained
on this research contributed to the phytochemical and pharmacology study of
Erythroxylum pulchrum and to the chemotaxonomic knowledge of the genus
Erythroxylum, as well as the Erythroxylaceae family. / Os produtos naturais representam uma rica fonte de compostos biologicamente
ativos e são um exemplo de diversidade molecular, com reconhecido potencial na
descoberta e desenvolvimento de novos medicamentos. Erythroxylum pulchrum,
(Erythroxylaceae) é exclusiva da flora brasileira, com distribuição no Nordeste e
Sudeste do país, só foi encontrada na Paraíba em uma área do Pico do Jabre PB. Uma
exsicata encontra-se depositada no Herbário Prof. Lauro Pires Xavier (JPB), sob o n°
4947. Neste estudo fitoquímico, as partes aéreas secas e pulverizadas foram submetidas
a uma extração com metanol e em seguida, particionados. A fase acetato de etila foi
submetida à cromatografia líquida de media pressão. Desta maneira, foi possível isolar
quatro flavonoides: epicatequina, quercetina-3-O-α-L-raminosídeo, ombuin-3-
rutinosídeo e ombuin-3-rutinosideo-5-glicosídeo. A fase hexânica também foi
submetida à cromatografia líquida de media pressão, em que foi possível isolar um
terpenoide lupeol e um esteróide β-sitosterol. Essas substâncias tiveram sua
identificação estrutural baseada na análise de dados espectrais de IV, EM, RMN 1H e
13C, incluindo técnicas bidimensionais homonucleares e heteronucleares, além de
comparação com dados da literatura. Foi avaliado também, o efeito antibacteriano do
extrato metanólico bruto de Erythroxylum pulchrum frente a cepas de bactérias de
importância clínica, determinando a concentração inibitória mínima do extrato
metanólico para cada linhagem de bactéria testada pela técnica de microdiluição. Assim,
o extrato inibiu o crescimento das linhagens bacterianas de Bacillus subtilis CCT 0516,
Escherichia coli ATCC 2536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 8027, Pseudomonas
aeruginosa ATCC 25619, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus aureus
ATCC 25925, Streptococcus sanguíneos, Streptococcus salivares, Streptococcus
mutans e Streptococcus ATCC. No entanto, a espécie Staphylococcus aureus ATCC
25925 foi a mais sensível, e espécies as Streptococcus sanguíneos e Streptococcus
salivares foram as mais resistentes á ação antibacteriana do extrato metanólico bruto.
Os resultados obtidos neste trabalho contribuíram para o conhecimento fitoquímico e
farmacológico de Erythroxylum pulchrum e para a o conhecimento quimiotaxonômico
do gênero Erythroxylum e da família Erythroxylaceae.
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Curativos biodegradáveis à base de poli (butileno adipato-co-tereftalato) com incorporação de gentamicinaScheibel, Jóice Maria January 2017 (has links)
Tradicionalmente, no tratamento de feridas graves o antimicrobiano tópico deve ser aplicado uma a duas vezes ao dia na área lesada para reduzir as infecções. No entanto, os pacientes geralmente sofrem desconforto com a aplicação de drogas tópicas e com a troca de curativos. Nesse contexto, o desenvolvimento de sistemas curativos biodegradáveis contendo fármaco antimicrobiano são fundamentais para a promoção de ações terapêuticas, reduzindo as infecções causadas por microrganismos e podendo substituir os curativos convencionas que não possuem polímeros biodegradáveis em sua composição. Para ir de encontro com essa necessidade, filmes de PBAT e PBAT/gentamicina foram preparados por meio de duas abordagens. Na primeira abordagem filmes de PBAT obtidos por casting foram funcionalizados por radiação UV durante 90 minutos na presença de O2 atmosférico para posterior inserção de gentamicina na superfície através de soluções tampões contendo EDC e gentamicina. A superfície das amostras foi analisada pelo WCA, FTIR-ATR e XPS. A análise antimicrobiana dos filmes também foi realizada. Os resultados para os filmes de PBAT por casting mostram que o tempo de irradiação produziu superfícies altamente hidrofílicas com grupos oxigenados enxertados na superfície do polímero (C=O e C-OH). A análise antimicrobiana indicou que a gentamicina não ligou covalentemente com o PBAT, porém observou-se a presença de nitrogênio na superfície das amostras pela análise de XPS Na segunda abordagem foram preparadas fibras de PBAT e PBAT/gentamicina a partir da eletrofiação. As soluções utilizadas no processo de eletrofiação foram preparadas com diferentes concentrações de gentamicina e passaram por análises de condutividade e viscosidade. As fibras de PBAT e PBAT/gentamicina foram caracterizadas quanto a suas propriedades físico-químicas, morfológicas, térmicas, antimicrobianas e biológicas. Nos resultados obtidos para as fibras de PBAT e PBAT/gentamicina observou-se que não houve mudança nos espectros após a mistura dos materiais, uma vez que as bandas de absorção foram preservadas e não houve o aparecimento de novos picos. A presença da gentamicina modificou a morfologia das amostras, diminuindo o diâmetro das fibras. O grau de intumescimento foi alterado com o acréscimo de gentamicina e houve modificação da morfologia das fibras após 48 horas de imersão em PBS, porém as fibras mantiveram-se presentes. A gentamicina aumentou o grau de molhabilidade das fibras PBAT. As fibras de PBAT/gentamicina possuem atividade antimicrobiana frente às cepas de E. coli e não apresentaram citotoxicidadede acordo com o padrão ISO 10993-5. Estes resultados reforçam que o PBAT pode ser usado como um sistema curativo com incorporação de fármaco, mostrando ser uma alternativa interessante de curativo/adesivo para uso tópico. / Traditionally in the treatment of serious wounds, topical antimicrobial should be applied 1–2 times daily to the injured area to reduce infections. However, patients often suffer from discomfort with the application of topical drugs and with the exchange of dressings. In this context, the development of biodegradable curative systems containing antimicrobial drug are fundamental for the promotion of therapeutic actions, reducing the infections caused by microorganisms and being able to substitute conventional dressings that there aren’t biodegradable polymers in their composition. To meet this need, PBAT and PBAT/gentamicin films were prepared using two approaches. In the first approach PBAT films obtained by casting were functionalized by UV radiation for 90 minutes in the presence of atmospheric O2 for subsequent insertion of gentamicin on the surface through buffer solutions containing EDC and gentamicin. The surface of the samples was analyzed by the WCA, FTIR-ATR and XPS. Antimicrobial analysis of the films was also performed. The results for the PBAT films by casting show that the irradiation time produced highly hydrophilic surfaces with oxygenated groups grafted onto the polymer surface (C=O and C-OH). Antimicrobial analysis indicated that gentamycin did not bind covalently with PBAT, but nitrogen was observed on the surface of the samples by XPS analysis In the second approach, PBAT and PBAT/gentamicin fibers were prepared from the electrospun. The solutions used in the electrospun process were prepared with different concentrations of gentamicin and underwent conductivity and viscosity analyzes. The PBAT and PBAT/gentamicin fibers were characterized as their physical-chemical, morphological, thermal, antimicrobial and biological properties. In the results obtained for the PBAT and PBAT/gentamicin fibers, it was observed that there was no change in the spectra after the materials were mixed, since the absorption bands were preserved and there were no new peaks. The presence of gentamicin modified the morphology of the samples, reducing the diameter of the fibers. The degree of swelling was altered with the addition of gentamicin and there was a change in the morphology of the fibers after 48 hours of immersion in PBS, but the fibers remained present. Gentamicin increased the degree of wettability of PBAT fibers. PBAT/gentamicin fibers have antimicrobial activity against E. coli strains and did not present cytotoxicity according to ISO 10993-5 standard. These results reinforce that PBAT can be used as a curative system with drug incorporation, proving to be an interesting dressing/adhesive alternative for topical use.
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Atividade antimicrobiana do óleo essencial de plantas condimentares/medicinais frente a diferentes sorovares de Salmonella enterica / Antimicrobial activity of the essential oil of medicinal plants against serovars of Salmonella entericaMajolo, Cláudia January 2013 (has links)
O estudo objetivou avaliar a atividade antibacteriana, in vitro, dos óleos essenciais de erva cidreira (Lippia alba (Mill) NEBr), hortelã-pimenta (Mentha x piperita L.), alfavaca-cravo (Ocimum gratissimum L.), açafrão (Curcuma longa L.) e gengibre (Zingiber officinale Roscoe) cultivados nas condições de Manaus/AM frente a 20 amostras de Salmonella enterica isoladas de frango resfriado, carne mecanicamente separada de frango, farinha de vísceras e farinha de carne e ossos. A concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) foram determinadas empregando-se o método de microdiluição. Os óleos foram analisados quanto a composição química através de cromatógrafo à gás acoplado ao espectrômetro de massa (CG-EM). Além da atividade dos óleos essenciais a resistência a antimicrobianos fármacos também foi avaliada através da técnica de disco-difusão. Os compostos majoritários foram: para o óleo de Lippia alba (Mill) NEBr) (carvona 61,7% e limoneno 17,5%), Mentha x piperita L. (mentol 27,5%, mentofurano 22,5%, pulegona 12,8%, acetato de metila 12,5% e mentona 11%), Ocimum gratissimum L. (eugenol 43,3% e 1,8-cineol 28,2%), Curcuma longa L. (ar-tumerona 17,9%, alfa-tumerona 14,6% e 1,8- cineol 14,2%) e para Zingiber officinale Roscoe (geranial 23,9%, neral 17,2%, 1,8- cineol 16,0% e canfeno 11,4%). Os resultados deste estudo permitiram evidenciar a superioridade da atividade dos óleos de Lippia alba (Mill) NEBr, Ocimum gratissimum L. e Zingiber officinale Roscoe (média das CIM´s de 4821 a 5750 μg/mL e média das CBM´s de 6190,5 a 6500,1 μg/mL) frente às salmonelas isoladas, em comparação aos óleos de Mentha x piperita L. e Curcuma longa L., demonstrando o potencial como agente antibacteriano natural destas três espécies frente a diferentes sorovares do patógeno avaliado. Todos os isolados apresentaram resistência a pelo menos dois agentes antimicrobianos. Os isolados foram frequentemente resistentes à estreptomicina (95%), ácido nalidixico (75%) e gentamicina (70%) e sensíveis à norfloxacina (45%), ciprofloxacina (20%) e cloranfenicol (20%). Entre as 20 amostras de Salmonella enterica foram identificados oito sorovares diferentes com predomínio da Salmonella Mbandaka, Salmonella Enteritidis, Salmonella Agona e Salmonella Schwarzengrund, sendo que os sorovares Mbandaka e Enteritidis foram os que apresentaram maior resistência aos fármacos antimicrobianos. A resistência antimicrobiana significativa verificada em diferentes sorovares de Salmonella enterica indica que estratégias de prevenção devem ser adotadas, como estudos epidemiológicos e uso consciente de antimicrobianos tanto na alimentação animal, quanto no tratamento de pacientes, visando minimizar o aparecimento de sorovares ainda mais resistentes ou resistentes a princípios ativos atualmente eficazes. Neste sentido, os óleos essenciais de Ocimum gratissimum L., Lippia alba (Mill) NEBr e Zingiber officinale Roscoe, representam uma alternativa para o controle de Salmonella enterica, entretanto, demais estudos abordando o sinergismo com carne de frango e farinhas de origem animal são indicados. / The study aimed to evaluate the antibacterial activity in vitro of the essential oils of cidreira (Lippia alba (Mil) NEBr), peppermint (Mentha x piperita L.), alfavaca-cravo (Ocimum gratissimum L.), turmeric (Curcuma longa L.) and ginger (Zingiber officinale Roscoe) grown under conditions of Manaus / AM front of 20 samples of Salmonella enterica isolates from chilled poultry, mechanically separated chicken meat, meat and bone meal and poultry viscera meal. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) were determined employing a microdilution method. The oils were analyzed for chemical composition by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS). Besides the activity of essential oils, the resistance to antimicrobial drugs was also assessed by disk diffusion technique. The major compounds were: for Lippia alba (Mil) NEBr oil (carvone 61,7% and limonene 17,5%), Mentha x piperita L. (menthol 27,5%, menthofuran 22,5 %, pulegone 12,8 %, methyl acetate 12,5% and menthone 11%) Ocimum gratissimum L. (eugenol 43,3% and 1,8-cineole 28,2%), Curcuma longa L. (ar tumerona 17,9%, alphatumerona 14,6% and 1,8-cineole 14,2%) and Zingiber officinale Roscoe (geranial 23,9%, neral 17,2%, 1,8-cineole 16,0% and camphene 11,4%). The results of this study showed the superiority activity of Lippia alba (Mil) NEBr, Ocimum gratissimum L. and Zingiber officinale Roscoe oil (CIM's average from 4821 to 5750 and CBM's average from 6190.5 to 6500.1 μg/mL) against Salmonella isolated compared to Mentha x piperita L. and Curcuma longa L. oils, demonstrating the potential as natural antibacterial agent of these three species against different serovars of the pathogen evaluated. All isolates were resistant to at least two antimicrobial agents. The isolates were often resistant to streptomycin (95%), nalidixic acid (75%) and gentamicin (70%) and sensitive to norfloxacin (45%), ciprofloxacin (20%) and chloramphenicol (20%). Among the 20 strains of Salmonella enterica serovars were identified eight different with a predominance of Salmonella Mbandaka, Salmonella Enteritidis, Salmonella Agona and Salmonella Schwarzengrund, and the Enteritidis and Mbandaka serovars showed the highest antimicrobial resistance. The significant antimicrobial resistance occurs in different serovars of Salmonella enterica indicates that prevention strategies should be adopted, such as epidemiological studies and conscious use of antimicrobials both in animal feed, as in the treatment of patients in order to minimize the emergence of even more resistant serovars or resistant tho currently effective active principles. In this sense, the essential oil of Ocimum gratissimum L., Lippia Alba (Mill) NEBr and Zingiber officinale Roscoe represent an alternative for the control of Salmonella enterica, however, other studies addressing the synergism with chicken meat and animal meal are indicated.
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Desenvolvimento de comprimidos com atividade antimicrobiana a partir de extrato de Ximenia americana L.Santana, Cleildo Pereira de 26 February 2016 (has links)
Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2017-03-07T13:20:54Z
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Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use of plants for medicinal purposes is a tradition in many cultures around the world, from ancient times. Although knowledge of traditional medicine is not as intensely widespread, the tradition of using medicinal plants persist in the population, which often makes use of herbal medicines, traditional or manufactured drugs. With the increase in the consumption of this type of product, the pharmaceutical industry has shown strong interest in the improvement of herbal production methods in various pharmaceutical forms. Thus, this study aimed to obtain a tablet formulation of Ximenia americana L. nebulized extract, and to evaluate this formulation as its quality parameters. The extract, obtained by drying of a water-alcohol extraction solution was characterized as to its phytochemical composition and compatibility with various pharmaceutical excipients, allowing the selection of excipients that integrated tablet formulations. The formulation that was considered most appropriate was used to obtain a batch of tablets, which was characterized with respect to its quality parameters. The formulations obtained demonstrated excellent flow and was used in the production of tablets with a mean weight of 302.20 mg, average hardness of 45.15 N, friability of 0.34% and average disintegration time of 6 minutes and 8 seconds. Furthermore, the tablets have been shown to be capable of releasing about 70% of its plant extract content by 30 minutes in medium around neutrality. Thus, it was possible to develop a pharmaceutical form to facilitate the medicinal use of this plant by the population, and to evaluate the quality characteristics of the formulation developed in order to establish ways to ensure its quality characteristics, safety and efficacy. / O uso de plantas para fins medicinais é uma tradição em diversas culturas, em todo o mundo, desde épocas remotas. Embora o conhecimento da medicina tradicional não seja mais tão intensamente difundido, a tradição do uso de plantas medicinais persiste na população, que frequentemente faz uso de medicamentos fitoterápicos, tradicionais ou industrializados. Diante do aumento do consumo deste tipo de produto, a indústria farmacêutica passou a demonstrar forte interesse no aperfeiçoamento dos métodos de produção de fitoterápicos em diversas formas farmacêuticas. Desta forma, este estudo se propôs a obter uma formulação do extrato nebulizado de Ximenia americana L., na forma de comprimido, e avaliar esta formulação quanto aos seus parâmetros de qualidade. O extrato, obtido pela secagem de uma solução extrativa hidroalcoólica, foi caracterizado quanto à sua composição fitoquímica e compatibilidade com diversos excipientes farmacêuticos, permitindo a seleção de excipientes que integraram formulações de comprimido. A formulação considerada mais adequada foi utilizada na obtenção de um lote de comprimidos, que foi caracterizado em relação aos seus parâmetros de qualidade. As formulações obtidas demonstraram fluxo excelente, sendo utilizadas na produção de comprimidos com peso médio de 302,20 mg, dureza média de 45,15 N, friabilidade de 0,34% e tempo de desintegração médio de 6 minutos e 8 segundos. Além disso, os comprimidos mostraram serem capazes de liberar cerca de 70% de seu conteúdo de extrato vegetal em 30 minutos, em meio próximo da neutralidade. Com isso, foi possível desenvolver uma forma farmacêutica para facilitar o uso medicinal desta planta pela população, além de avaliar as características de qualidade da formulação desenvolvida, no intuito de estabelecer maneiras de garantir a estas suas características de qualidade, segurança e eficácia.
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