Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-06-08T14:20:44Z No. of bitstreams: 1 Osniel Faria de Oliveira.pdf: 2285094 bytes, checksum: 41652662597fca2494db863b95a640d0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T14:20:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Osniel Faria de Oliveira.pdf: 2285094 bytes, checksum: 41652662597fca2494db863b95a640d0 (MD5) Previous issue date: 2016-07-04 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Forages undergo structural and qualitative changes as the climate, soil changes and forage allowance influence intake and animal performance. The selection of plants by animals are usually influenced by forage allowance. This study aimed to evaluate the vegetation structure, nutritive value and the biological activity of condensed tannins (CT) from forage plants under grazing and in different rangeland sites of Pernambuco State, as well as selectivity index of sheep in manipulated Caatinga. The experiment I was carried out in eight sites of Pernambuco, gathering natural plants during the rainy season of 2013 and 2014. In this trial were evaluated the botanical composition (BC), bare soil (BS) and plant height, as well as forages nutritive value including crude protein (CP), neutral detergent fiber (NDF) and acid (ADF), lignin (ADL), mineral matter (MM), ether extract (EE), digestibility (IVDMD), carbon/nitrogen ratio (C/N), phosphorus (P) and CT. I also estimated methane suppression (CH4), inhibition of larval migration (LMI), molecular weight (Mw) and Procyanidin:Prodelfinidin ratio (PC:PD). Grasses and legumes comprised 22.2 and 33.0% of BC, respectively. The BS was greater in Sertão (31.8%) than Agreste (14.2%) and Zona da Mata (10.8%). The herbaceous height was lower in Sertão (29 cm) than Agreste (69 cm) and Zona da Mata (104 cm). However, woody plants were greater in Sertão (160 cm) than Agreste (145 cm) and Zona da Mata (105 cm). The plants showed variation in nutritional value, averaging 198 g CP kg%1, 497 g NDF kg%1, 270 g ADF kg%1, 113 g ADL kg%1, 35 g EE kg%1, 458 g CT kg%1, 16.4 C:N, and 715 g IVDMD kg%1. The suppression of CH4 was greater (#≤0.05) in Sertão plants (5.5 mM) than Agreste (6.1 mM) and Zona da Mata (8.4 mM), with plants collected in Flores during 2013 and Pesqueira in 2014 with greater (#≤0.05) CH4 suppression, 2.8 and 2.5 mM, respectively. Plants CT were effective in LMI averaging 21.3 ± 9.3%, Flores had greater (#≤0.05) LMI (33.4%) in 2013 and Sertânia (35.7%) in 2014. The PC:PD was 74:26, greater (#≤0.05) in plants collected from Flores (100:0), Serra Talhada (93:7) and Pesqueira (85:15). Bezerros was the only site with lower PC:PD (48:52). The Mw in Sertão plants (1476 Da) was also greater (#≤0.05) than Agreste (1333 Da) and Zona da Mata (1099 Da), highlighting plants from Serra Talhada (1719 Da) and Sertânia (1753 Da). In the experiment II, sheep were submitted to four forage allowances [2.0, 2.5, 3.0 and 3.5 kg of dry matter (DM)/kg body weight (BW)], in Caatinga thinned, with mororó. The nutritive value and CT bioactivity from mororó were evaluated, as well as the selectivity index from BC of pasture and sheep diet, analyzed via microhistological examination of feaces. The BC of the pasture was influenced (#≤0.05) by forage allowance and year. In general, grasses contributed more (#≤0.05) to the pasture. In 2013, as forage allowance decreased, grasses increased (#≤0.05) their presence, while legumes decreased, and the reverse ocurring in 2014. Overall, the sheep consumed great proportion of dicots in all treatments. Grasses were selected 49.8% more (#≤0.05) in 2014 while dicots were more selected in 2013. The Mw and PC:PD ratio were 1158 Da and 95:5, respectively. The chemical composition of mororó shows potential for ruminant nutrition because it had up to 17.5 g CP kg%1 and its CT (0.3 to 167.1 g kg%1) can suppress CH4 (4.5 to 10.7 mM) and reduce larval motility (from 3.0 to 28.5%). Thus, the structural and qualitative characterization was diverse, in different physiographic zones with plants of forage potential that have adequate nutritional value and effective biological activity via CT. Different forage allowances levels in Caatinga promotes changes in BC of pasture as a result of sheep diet change. Mororó show promising nutritional value for ruminants, as well as effective biological activity of CT. Depending on the purpose for which mororó is used, whether as forage or as an environmental tool, forage allowance can be manipulated at different levels. / As plantas de interesse forrageiro apresentam, dentro das limitações genéticas, alterações estruturais e qualitativas conforme as variações de clima, solo e oferta de forragem, as quais podem influenciar no consumo e desempenho animal. A seleção de plantas pelos animais pode sofrer influência da oferta de forragem. Objetivou-se avaliar a estrutura da vegetação, o valor nutritivo de plantas e a atividade biológica dos taninos condensados (TC) de plantas de interesse forrageiro sob pastejo ou de ocorrência espontânea em diferentes sites ao longo das Zonas fisiográficas do estado de Pernambuco, bem como seletividade de ovinos em Caatinga manipulada. No experimento I, coletas de plantas de ocorrência natural foram realizadas em oito sites de Pernambuco, durante os anos de 2013 e 2014, no período chuvoso. Foram avaliadas a composição botânica da pastagem (CB), solo descoberto (SD) e altura das plantas, bem como teores de proteína bruta (PB), fibra em detergente neutro (FDN) e ácido (FDA), lignina (LDA), matéria mineral (MM), extrato etéreo (EE), digestibilidade (DIVMS), relação carbono/nitrogênio (C/N), fósforo (P) e TC. Também se estimou a supressão de metano (CH4), inibição da migração larval (LMI), massa molecular (Mw) e relação Procianidina:Prodelfinidina (PC:PD). Ao longo dos oito sites de coleta no estado de Pernambuco, as famílias que se destacaram foram as gramíneas e leguminosas, participando em 22,2 e 33,0% da CB, respectivamente. O SD foi maior no Sertão (31,8%) do que no Agreste (14,2%) e Zona da Mata (10,8%). A altura das plantas herbáceas foi menor no Sertão (29 cm) do que no Agreste (69 cm) e Zona da Mata (104 cm). Entretanto, as plantas lenhosas foram maiores no Sertão (160 cm) do que no Agreste (145 cm) e Zona da Mata (105 cm). As plantas apresentaram variação no valor nutritivo, com média de PB (19,8 g kg%1), FDN (49,7 g kg%1), FDA (27,0 g kg%1), LDA (11,3 g kg%1), EE (3,5 g kg%1), TC (45,8 g kg%1), C:N (16,4), DIVMS (71,5 g kg%1). A supressão de CH4 médio foi maior nas plantas do Sertão (5,5 mM) do que no Agreste (6,1 mM) e Zona da Mata (8,4 mM), sendo plantas coletadas em Flores em 2013 e Pesqueira em 2014 com maiores supressões de CH4, 2,8 e 2,5 mM, respectivamente. Os TC das plantas foram efetivos na LMI com média de 21,3 ± 9,3%, Flores com maior LMI (33,4%) em 2013 e Sertânia (35,7%) em 2014. A relação PC:PD média foi de 74:26, com maior em plantas coletadas em Flores (100:0), Serra Talhada (93:7) e Pesqueira (85:15). Bezerros foi o único site que apresentou maior PC:PD (48:52). A Mw de plantas do Sertão (1476 Da) também foi maior do que no Agreste (1333 Da) e Zona da Mata (1099 Da), destacando plantas em Serra Talhada (1719 Da) e Sertânia (1753 Da). No experimento II, ovinos foram submetidos a quatro ofertas de forragem (OF) [2,0; 2,5; 3,0 e 3,5 kg de matéria seca (MS)/kg de peso vivo (PV)], em Caatinga raleada com presença marcante de Mororó. Determinou-se o valor nutritivo e bioatividade dos TC de Mororó, bem como o índice de seletividade através da composição botânica da pastagem e da dieta de ovinos, a partir de técnica microhistológica das fezes. Com relação aos resultados do experimento sob pastejo, a composição botânica da pastagem foi influenciada (#≤0,05) pelas OF e pelo ano. De forma geral, gramíneas tiveram maior participação na pastagem. Em 2013, à medida que diminuiu a OF, gramíneas aumentaram sua participação, enquanto que leguminosas diminuíram, sendo o inverso em 2014. De forma geral, os ovinos consumiram mais dicotiledôneas em todos os tratamentos. Com referência ao índice de seletividade e aos anos estudados, as gramíneas foram 49,8% mais selecionadas em 2014, e as dicotiledóneas foram mais selecionadas em 2013. A Mw e relação PC:PD foram de 1158 Da e 95:5, respectivamente. A composição química do Mororó apresenta potencial para a nutrição de ruminantes, com até 17,5 g kg%1 de PB, bem como seus TC (de 0,3 a 167,1 g kg% 1) podem suprimir o CH4 (4,5 a 10,7 mM) e reduzir a motilidade larval (de 3,0 a 28,5%). Desta forma, a caracterização estrutural e qualitativa é diversa na vegetação, coletada nas diferentes Zonas fisiográficas, com plantas de potencial forrageiro que apresentam bom valor nutritivo, com efetiva atividade biológica dos TC. Diferentes níveis de OF em área de Caatinga promove mudanças na composição botânica da pastagem como consequência da mudança do hábito alimentar de ovinos. O Mororó apresenta bom valor nutritivo para animais ruminantes, bem como atividade biológica efetiva dos TC. Assim, dependendo da finalidade para o qual Mororó é utilizado, se como forragem apoiando a nutrição animal, ou como ferramenta ambiental apoiando a redução de helmintos e CH4, ofertas de forragens podem ser utilizadas em diferentes níveis.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-04-24T13:39:55Z No. of bitstreams: 1 Anna Carolina da Silva.pdf: 1843592 bytes, checksum: a022bfb48432bd5bc310e5596316e041 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-24T13:39:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Anna Carolina da Silva.pdf: 1843592 bytes, checksum: a022bfb48432bd5bc310e5596316e041 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Through the enzymatic hydrolysis of protein sources of food origin, it can be released with peptides with biological activities that benefit the body of those who consume them. In view of this, the present work was carried out with biological activities of protein hydrolysates obtained by hydrolysis of egg white hick by proteases produced by Aspergillus avenaceus URM 6706. For this, a protease was produced by submerged fermentation carried out according to legal statistical design. It was then purified by precipitation with ethanol and ion exchange chromatography, and partially characterized. The purified extract was used in the hydrolysis of the egg white hick, where an influence of the variation of the hydrolysis time was verified, under the degree of hydrolysis. The hydrolysates obtained were evaluated for antioxidant potential by capturing the ABTS+• and DPPH radicals and determining the chelating activity of Cu2+ and Fe2+, as well as the antihypertensive potential through the inhibition of the angiotensin converting enzyme, antidiabetic enzyme Inhibition of β- glucosidase and α-amylase enzymes, antibacterial against subclinical bovine mastitis isolates and antiviral against bovine herpes virus type 1 and viral bovine diarrhea virus. A protease produced by Aspergillus avenaceus URM 6706 had a temperature and pH of 50 °C and 10.0, respectively; parameters used in the hydrolysis of egg white hick. The degree of hydrolysis was directly proportional to the exposure time of the protease with the egg white hick. The studied hydrolysates presented all the biological activities evaluated, with antioxidant activity of 99 and 27% of elimination of the radicals ABTS•+ and DPPH, respectively; 62 and 55% of chelating activity of Cu2+ and Fe2+, respectively. About 80% of antihypertensive activity, 57% inhibition of α-glycosidase and 94% of α-amylase, antibacterial activity that reached up to 88% and antiviral up to 90%. The hydrolysates generated by the hydrolysis of egg white hick presented satisfactory biological activity, with possible applications in the formulation of functional foods and the development of drugs. / Por meio da hidrólise enzimática de fontes proteicas de origem alimentar, podem ser liberados peptídeos com atividades biológicas que beneficiam o organismo daqueles que os consomem. Diante disso, objetivou-se com o presente trabalho avaliar atividades biológicas de hidrolisados proteicos obtidos pela da hidrólise da clara de ovo de galinha de capoeira por proteases produzidas por Aspergillus avenaceus URM 6706. Para isto, a protease foi produzida por fermentação submersa realizada de acordo com planejamentos estatísticos; em seguida, foi purificada por precipitação com etanol e cromatografia de troca iônica, e caracterizada parcialmente. O extrato purificado foi utilizado na hidrólise da clara do ovo de galinha de capoeira, em que a influência da variação do tempo de hidrólise foi averiguada, sob o grau de hidrólise. Os hidrolisados obtidos foram avaliados quanto ao potencial antioxidante, por meio da captura dos radicais ABTS+• e DPPH, e da determinação da atividade quelante de Cu2+ e Fe2+, quanto ao potencial anti-hipertensivo por inibição da enzima conversora de angiotensina, antidiabético pela inibição das enzimas α-glicosidase e α-amilase, antibacteriano frente a isolados de mastite bovina subclínica e antiviral contra o Herpes vírus bovino tipo 1 e Vírus da diarreia viral bovina. A protease produzida por Aspergillus avenaceus URM 6706 teve como temperatura e pH ótimos 50 °C e 10,0, respectivamente; parâmetros empregados durante a hidrólise da clara do ovo de galinha de capoeira. O grau de hidrólise foi diretamente proporcional ao tempo de exposição da protease com a clara do ovo de galinha de capoeira. Os hidrolisados estudados apresentaram todas as atividades biológicas avaliadas, com atividade antioxidante de 99 e 27% de eliminação dos radicais ABTS•+ e DPPH, respectivamente; 62 e 55% de atividade quelantes de Cu2+ e Fe2+, respectivamente; por volta de 80% de atividade anti-hipertensiva, 57% de inibição da α-glicosidase e 94% da α-amilase, atividade antiestafilocócica que chegou até 88% e antiviral de até 90%. Os hidrolisados gerados pela hidrólise da clara de ovo de galinha de capoeira apresentaram atividade biológica satisfatória, com possíveis aplicações na formulação de alimentos funcionais e no desenvolvimento de fármacos.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-05-07T14:01:15Z No. of bitstreams: 1 Wellington Leal dos Santos.pdf: 1782649 bytes, checksum: a908ed132b6c98cca5dadf40a3923f48 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T14:01:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wellington Leal dos Santos.pdf: 1782649 bytes, checksum: a908ed132b6c98cca5dadf40a3923f48 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Bioactive peptides, mainly derived from the enzymatic hydrolysis of milk casein, antioxidants, antihypertensives, antidiabetics, ability to isolate metals and antimicrobial capacity. The milk, in general, presents in its composition casein an important source of protein fragments with expressive biological activity. Thus, the objective was to investigate the biological potential of peptides derived from bovine casein, buffalo and caprine submitted to the proteolytic action of bromelain, papain, neutrase and trypsin in order to select the hydrolyzate with the highest antioxidant potential; fractionating the selected hydrolyzate and evaluating the antioxidant and antidiabetic potential of the fractions. It was possible to observe significant differences (p <0.05) between caseinates presenting a minimum degree of hydrolysis of 2% (bovine) and maximum of 85% (buffalo). In relation to the antioxidant activities, it was observed a distinct behavior of the caseinates against the different enzymatic treatments over 480 minutes. Hydrolysates presented a potential for sequestration of hydroxyl radicals (between 0 and 100%), superoxide (greater than 80%), ABTS (greater than 85%), DPPH (between 20 and 95%) and chelate iron (between 10 and 100%) and copper (between 14 and 80%); Regarding the antioxidant activities of the fractions from the selected species (buffalo), the hydroxyl and DPPH tests had a higher elimination potential in fractions of 3-10 kDa and <3 kDa, varying according to the enzymatic specificity, whereas the higher ABTS radical sequestration potential was observed in the fraction containing the total hydrolyzate. For the chelating activity of iron, it was observed more than 70% chelation in all the fractions, emphasizing the fractions <3 kDa. For copper chelation, values higher than 60% were observed in fractions >10 kDa. The anti-diabetic activity had a variable potential in relation to the α-glycosidase inhibition between the fractions, whereas α-amylase was better inhibited by the fraction <3 kDa. Antibacterial activity was observed between 3.28 and 100% inhibition against the microorganisms tested, the fraction <3 kDa showed a greater inhibitory potential. The antihypertensive activity of the fractions remained between 39.35 and 89.58%, especially the peptide fraction H3. The proteases used in the hydrolysis of caseinates presented the potential to obtain hydrolysates with the three evaluated species of antioxidant protein fragments. In addition, they showed the capacity to produce fractions of hydrolysates with antioxidant potential, antidiabetic, antihypertensive and antimicrobial, therefore the ultrafiltration method proved effective in the fractionation of peptides with different molar masses. In this way, the total hydrolysates of the three species as well as the fractions of the selected species present potent antioxidant activity, which proves potential food application as a functional food, nutraceutical or as a natural food additive. / Os peptídeos bioativos, principalmente oriundos da hidrólise enzimática da caseína do leite, apresentam efeitos antioxidantes, anti-hipertensivos, antidiabéticos, capacidade de se ligar a metais e capacidade antimicrobiana. O leite, de modo geral apresenta em sua composição a caseína uma fonte importante de fragmentos proteicos com atividade biológica expressiva, sendo assim, objetivou-se investigar o potencial biológico de peptídeos derivados da caseína bovina, bubalina e caprina submetidos à ação proteolítica da bromelina, papaína, neutrase e tripsinaa a fim de selecionar o hidrolisado com maior potencial antioxidante; fracionar o hidrolisado selecionado e avaliar o potencial antioxidante e antidiabético das frações. Foi possível observar diferenças significativas (p<0,05) entre os caseinatos apresentando grau de hidrólise mínimo de 2% (bovino) e máximo de 85% (bubalino). Em relação as atividades antioxidantes observaram-se comportamento distintos dos caseinatos frente aos diferentes tratamentos enzimáticos ao longo de 480 minutos. Os hidrolisados apresentaram potencial para o sequestro dos radicais hidroxila (entre 0 e 100%), superóxido (superior a 80%), 2,2’- azinobis-3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico - ABTS (superior a 85%), 2,2-difenil-1-picrilidrasil - DPPH (entre 20 e 95%) e quelar ferro (entre 10 e 100%) e cobre (entre 14 e 80%). No que se referente as atividades antioxidantes dos fracionados provenientes da espécie selecionada (bubalina), os testes hidroxila e DPPH apresentaram maior potencial de eliminação nas frações de 3-10 kDa e <3 kDa, variando de acordo com a especificidade enzimática, enquanto que o maior potencial de sequestro do radical ABTS foi observado na fração contendo o hidrolisado total. Para a atividade quelante de ferro foi observado quelação superior a 70% em todas as frações destacando-se as frações < 3 kDa. Já para quelação de cobre foram observados valores superiores a 60% nas frações >10 kDa. A atividade antidiabética apresentou potencial variável em relação a inibição da α-glicosidase entre as frações, enquanto que a α-amilase foi melhor inibida pela fração <3 kDa. Observou-se atividade antibacteriana entre 3,28 e 100% de inibição contra os micro-organismos testados, a fração <3 kDa apresentou maior potencial inibitório. A atividade anti-hipertensiva das frações manteve-se entre 39,35 e 89,58%, destacando-se a fração peptídica H3. As proteases empregadas na hidrólise dos caseinatos apresentaram potencial para obtenção de hidrolisados com as três espécies avaliadas de fragmentos proteicos antioxidantes. Além disso, apresentaram a capacidade de produzir frações de hidrolisados com potencial antioxidante, antidiabético, anti-hipertensivo e antimicrobiano, portanto o método de ultrafiltração se mostrou eficaz no fracionamento de peptídeos com diferentes massas molares. Desta forma pode-se evidenciar que os hidrolisados totais das três espécies bem como as frações da espécie bubalina apresentam potente atividade antioxidante, o que indica potencial aplicação alimentar seja como alimento funcional, nutracêutico ou como aditivo alimentício natural.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-05-07T16:00:27Z No. of bitstreams: 1 Alana Emilia Soares de Franca Queiroz.pdf: 1707043 bytes, checksum: a39422a2af368896ba728e0695674283 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T16:00:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alana Emilia Soares de Franca Queiroz.pdf: 1707043 bytes, checksum: a39422a2af368896ba728e0695674283 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / With the increase in public debate on contemporary issues such as population aging and people-related illnesses, the general interest in food and its effects on human health has been increasingly aroused. One of the food products that can act to prevent and reduce some pathologies is the cheese, which presents bioactive peptides capable of modulating a series of reactions in an animal organism. Therefore, it was the objective of this study to obtain and apply Aspergillus tamarii URM6599 milk coagulant enzymes and commercial origin in the preparation of Minas Frescal goat cheeses and to evaluate the biological activities of their peptides. For that, it was necessary to produce and optimize the production of coagulant enzymes by means of the factorial statistical plans 2³ complete and central composite design; to evaluate the production of aflatoxins (B1, G1, B2 and G2) by the microorganism and the toxicity of the enzymatic extract by means of bioassay with Artemia salina and to characterize the obtained enzymatic extract for the optimum pH and temperature, thermal stability and pH, NaCl and CaCl2 and to the effects of ions and inhibitors on coagulant activity. After obtaining and analyzing the enzymatic extract, the cheeses were produced and their peptides extracted for evaluation of antioxidant, antihypertensive and antimicrobial activities. From the statistical planning, the enzymatic production was optimized for an activity of 289.16 U.mL-1; the microorganism did not produce aflatoxins in any of the tests carried out and the LD50 of the A. salina nauplii was 683 μg.mL-1, considered of low toxicity. The enzymes presented optimum performance at 70 ºC and pH at 5.5; activity above 50% at temperatures below 60 °C and activity above 60% at acid and alkaline pH values for 1 hour. The enzymes were inhibited by PMSF and pepstatin A, suggesting the existence of serine and aspartic proteases in the crude extract. The enzymes were also tolerant to metal ions, NaCl and CaCl2. The peptides of both cheeses presented antioxidant, antihypertensive and antimicrobial activities. In view of the above, it is observed that the coagulant enzymes produced in the study demonstrate potential use in the elaboration of Minas coolcal goat cheese. In addition, the results demonstrate that Minas Frescal type cheese produced with goat milk is an excellent source of bioactive peptides. / Com o aumento no debate público acerca de questões contemporâneas como o envelhecimento da população e as doenças relacionadas aos estilos de vida adotados pelas pessoas, têm-se cada vez mais despertado o interesse geral sobre a alimentação e seus efeitos sob a saúde humana. Um dos produtos alimentícios que pode atuar prevenindo e reduzindo algumas patologias é o queijo, que apresenta peptídeos bioativos capazes de modular uma série de reações em um organismo animal. Diante disso, foi objetivo desse estudo obter e aplicar enzimas coagulantes de leite de Aspergillus tamarii URM6599 e de origem comercial na elaboração de queijos caprinos Minas Frescal e avaliar as atividades biológicas de seus peptídeos. Para tanto, foi necessário produzir e otimizar a produção de enzimas coagulantes por meio dos planejamentos estatísticos fatorial completo 2³ e delineamento composto central; avaliar a produção de aflatoxinas (B1, G1, B2 e G2) pelo micro-organismo e a toxicidade do extrato enzimático por meio de bioensaio com Artemia salina e caracterizar o extrato enzimático obtido quanto ao pH e temperatura ótimos, estabilidade térmica e ao pH, a NaCl e CaCl2 e aos efeitos de íons e inibidores na atividade coagulante. Após obtenção e análise do extrato enzimático, os queijos foram produzidos e seus peptídeos extraídos para avaliação das atividades antioxidantes, anti-hipertensivas e antimicrobianas. A partir dos planejamentos estatísticos, a produção enzimática foi otimizada para uma atividade de 289,16 U.mL-1; o micro-organismo não produziu aflatoxinas em nenhum dos testes realizados e a DL50 dos náuplios de A. salina foi de 683 μg.mL-1, considerada de baixa toxicidade. As enzimas apresentaram atuação ótima aos 70 ºC e pH em 5,5; atividade acima dos 50% em temperaturas abaixo de 60 ºC e atividade acima dos 60% em valores de pH ácidos e alcalinos, por 1 hora. As enzimas foram inibidas por PMSF e pepstatina A, sugerindo a existência de serino e aspártico proteases no extrato bruto. As enzimas também foram tolerantes a íons metálicos, NaCl e CaCl2. Os peptídeos de ambos os queijos apresentaram atividades antioxidantes, anti-hipertensivas e antimicrobianas. Diante do exposto, observa-se que as enzimas coagulantes produzidas no estudo demonstram potencial de uso na elaboração de queijo Minas Frescal caprino funcional. Ademais, os resultados demonstram que o queijo tipo Minas Frescal produzido com leite caprino é uma excelente fonte de peptídeos bioativos.

Orientador: Yong Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-18T01:55:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Toreti_VivianeCristina_M.pdf: 2525794 bytes, checksum: ef95a1cd07713376ff14615e60664e12 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Própolis é o nome genérico dado ao produto vindo de substâncias resinosas, gomosas e balsâmicas que são coletadas pelas abelhas de flores, brotos e exsudatos de plantas, as quais são transformadas dentro da colméia com adição de cera e pólen (PARK et al., 1998). A própolis é usada pelas abelhas para vedar frestas na colméia, protegê-la e impedir a entrada de insetos invasores. Tem sido alvo de estudo de muitos pesquisadores devido aos seus efeitos antioxidantes, antiinflamatório e antimicrobiano. Essas propriedades biológicas estão ligadas a sua composição química, mais precisamente aos compostos fenólicos que variam em relação a sua estrutura e concentração dependendo da região de produção, disponibilidade de fontes vegetais para coleta de resinas, variabilidade genética da abelha rainha, técnica empregada para produção e época do ano. O Brasil é muito bem visto no mercado externo como produtor da própolis orgânica com características organolépticas de elevado padrão. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a composição química e algumas propriedades biológicas da própolis verde relacionando-as com a influência sazonal. Neste trabalho, as própolis de dois apiários distintos no Estado de São Paulo foram classificadas e avaliadas quanto ao teor de fenólicos totais, flavonóides totais e composição química por meio de CLAE-FR. Além disso, foi avaliada a atividade antimicrobiana e antioxidante em diferentes meses. O conteúdo de fenólicos totais variou de 82 a 155 mg/g da própolis para o apiário localizado em Mogi Mirim, e de 66 a 115 mg/g da própolis para o apiário localizado em Águas de São Pedro. O teor de flavonóides totais variou de 11 a 31 mg/g da própolis para o apiário localizado em Mogi Mirim e de 8 a 18 /g própolis para o apiário localizado em Águas de São Pedro. A maior atividade antibacteriana foi notada com os extratos etanólicos da própolis coletados em Janeiro de 2010, independente do apiário. Sobre a atividade antioxidante, as amostras de Mogi Mirim mostraram melhor capacidade de seqüestrar radicais livres quando comparadas com amostras coletadas em Águas de São Pedro. Foi observada a influência da sazonalidade sobre a composição química quantitativa e atividade biológica da própolis dos dois apiários diferentes localizados no Estado de São Paulo, sendo que a atividade antimicrobiana e antioxidante variou em função do período de coleta e da sazonalidade local. Como o melhor período de coleta da própolis é durante o verão, isso provavelmente influencia as alterações na concentração de compostos bioativos oriundos das fontes vegetais destas própolis / Abstract: Propolis is the generic name given to the product obtained from resinous substances, which is gummy and balsamic, and which is collected by bees from flowers, buds and exudates of plants. These substances are transformed by the addition of wax and pollen when into the hive (PARK et al., 1998). Propolis is used by bees to seal cracks in the hive in order to protect and prevent the entry of invasive insects. This substance has been studied by many researchers due to its antioxidant and antimicrobial properties. These biological properties are related to its chemical composition and more specifically to the phenolic compounds that vary in their structure and concentration depending on the region of production, availability of sources to collect plant resins, genetic variability of the queen bee, the technique used for production and the season in which propolis is produced. Brazil is well regarded in the international market as a producer of propolis with organic sensory characteristics of high standard. Therefore, the aim of this study was to evaluate the chemical composition and some biological properties of green propolis relating it to seasonal influence. In this research, the propolis from two different apiaries in the state of São Paulo were classified and evaluated for total phenolic content, total flavonoids and chemical composition by RP-HPLC. In addition, we evaluated the antimicrobial and antioxidant activities in different months. The total phenolic content ranged from 82 to 115 mg/g of propolis at the apiary in Mogi Mirim; and from 66 to 115 mg/g of propolis at the apiary in Águas de São Pedro. The total flavonoid content ranged from 11 to 31 mg/g of propolis at the apiary in Mogi Mirim and from 8 to 18 mg/g of propolis at the apiary in Águas de São Pedro. The highest antibacterial activity was noticed with the ethanol extracts of propolis collected in January 2010 regardless the apiary. Regarding the antioxidant activity, the samples from Mogi Mirim showed better ability to scavenge free radicals when compared to samples collected in Águas de São Pedro. The influence of seasonality on quantitative chemical composition and biological activity propolis from two different apiaries located in the State of São Paulo was observed, so that the antimicrobial and antioxidant activities varied depending on the sampling period and the local seasonality. Finally, since the best period for collection of propolis is during the summer, this will probably change the concentration of bioactive compounds from these plant sources of propolis / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Ronaldo Aloise Pilli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-15T02:38:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodriguesJunior_ManoelTrindade_D.pdf: 6880388 bytes, checksum: 75844f02fc6611249ca702661e63582a (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O núcleo b-carbolina encontra-se amplamente distribuído entre os produtos naturais, incluindo alcalóides ioimbina (ioimbina e aloioimbina), corinanteidina (corinanteidina), rauwolfia (reserpina) e vinca (vincamina). Além disso, essas substâncias também têm demonstrado um amplo espectro de propriedades farmacológicas, incluindo atividade antitumoral, ansiolítica, hipnótica, anticonvulsivante, antiviral, antiparasitária e antimicrobiana. Sínteses totais eficientes da (+)-tripargina (59), em 6 etapas e 46% de rendimento global (-)-tripargina (59), em 6 etapas e 38% de rendimento global, (+)-deplancheina (60), em 11 etapas e 47% de rendimento global, (+)-debromoarborescidina A (61), em 5 etapas e 73% de rendimento global, (+)-harmicina (62), em 5 etapas e 56% de rendimento global (-)-harmicina (62), em 5 etapas e 52% de rendimento global, catin-6-ona (64), em 8 etapas e 45% de rendimento global e 20-metoxi-cantin-6-ona (65), em 8 etapas e 35% de rendimento global, foram realizadas com base na construção do sistema b-carbolínico via reação de Bischler-Napieralski e redução enantiosseletiva do intermediário diidro-b-carbolínico via reação de transferência de hidrogênio assimétrica usando o protocolo de Noyori. Estes compostos foram avaliados como agentes antiproliferativos contra um painel de células cancerígenas. Apenas cantin-6-ona (64) mostrou atividade contra a linhagem de célula 786-0 (célula de câncer renal). Estes compostos foram avaliados em bioensaios in vitro contra Leishmania brasiliensis, Leishmania amazonesis e Leishmania major e novamente apenas a cantin-6-ona (64) apresentou atividade contra Leishmania major (IC50=16,9 mM) e um índice de segurança altamente promissor (Si=94,7).Testes preliminares de toxidade in vivo mostraram que a harmicina (62) e a tripargina (59) são substâncias com potencial efeito sobre o sistema nervoso central. / Abstract: The b-carboline skeleton is widely distributed among natural products incluiding yohimbine (yohimbine and alloyohimbine), corynantheidine (corynantheidine), rauwolfia (reserpine) and vinca (vincamine) alkaloids. Furthermore, these coumpounds have also demonstrated a broad spectrum of pharmacological properties including ansiolytic, hypnotic, anticonvulsant, antitumor, antiviral, antiparasitic as well as antimicrobial activities. Concise and efficient total syntheses of (+)-trypargine (59), in 6 steps and 46% overall yield, (-)- trypargine (59), in 6 steps and 38% overall yield, (+)-deplancheine (60), in 11 steps and 47% overall yield, (+)-debromoarborescidine A (61), in 5 steps and 73% overall yield, (+)-harmicine (62), in 5 steps and 56% overall yield, (-)-harmicine (62), in 5 steps and 52% overall yield, canthin-6-one (64), in 8 steps and 45% overall yield and 10-methoxy-canthin-6-one (65), in 8 steps and 35% overall yield, were developed based on the construction of the b-carboline moiety via Bischler- Napieralski reaction and the enantioselective reduction of the dihydro-b-carboline intermediate via an asymmetric transfer hydrogenation reaction using Noyori's protocol. These compounds were evaluated as antiproliferative agents against a panel of cancer cell lines. Only canthin-6-one (64) has shown promising activity against cell line 786-0 (renal cell carcinoma). These compounds were evaluated in vitro bioassays against Leishmania major, Leishmania brasiliensis and Leishmania amazonesis and again canthin-6-one (64) displayed promising activity against Leishmania major (IC50=16,9 mM) and a highly promising safety index (Si=94,7). Preliminary tests of in vivo toxicity showed that harmicine (62) and trypargine (59) are substances with potential effect on the central nervous system. / Doutorado / Quimica Organica / Doutor em Ciências

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T17:16:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Manoel Feitosa Jeffreys.pdf: 4154773 bytes, checksum: 90fd1c343f946032e9481145081f1652 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T17:17:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Manoel Feitosa Jeffreys.pdf: 4154773 bytes, checksum: 90fd1c343f946032e9481145081f1652 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T17:17:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Manoel Feitosa Jeffreys.pdf: 4154773 bytes, checksum: 90fd1c343f946032e9481145081f1652 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-23T17:17:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Manoel Feitosa Jeffreys.pdf: 4154773 bytes, checksum: 90fd1c343f946032e9481145081f1652 (MD5) Previous issue date: 2016-07-20 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / This work aimed to study the chemical extracts of Piranhea trifoliata and your endophytes (PICRODENDRACEAE) and its potential antimicrobial tests, antioxidant and antimalarial. The leves it was collected in Volta Grande of Xingú, Altamira, PA (collect 1) and Lake of Catalão, Manaus, AM (collect 2 e 3). The dried specimen’s it was deposited in the herbarium of the Federal Institute of Amazonas (IFAM) with record numbers 10653 and 10654. The collected material was dried and pulverized. The collect 1, was extracted by dichloromethane (DCM), methanol (MeOH) and water (H2O). The collect 2 and 3 was extracted by hexane, methanol and water. The preliminary phytochemical analysis of leaves and fungi showed that dichlorometane and hexane extracts contain terpenes and methanolic extracts contain phenolic compounds. The broths from fungi showed that diclorometânica phase (DCM) contain terpenes, and phase of Ethyl Acetate (AcOEt) contain terpene and phenolic compounds. The phytochemical study of the leves led to the isolation of: Friedelan-3-one (I), 30-hydroxy-friedelan-3-one (II), Lupeol (III), the mixture of β -Sitosterol and Stigmasterol steroids (IV and V), hydroxycoriatin (VI), the mixture of α and β-amyrin (VII and VIII ), 7- hydroxy-6-methoxy-coumarin (IX), 7,4 ''' dymethylamentoflavone (X), methyllonyflavna 3'-O-(XI) and purification of the 28-hydroxy-friedelan-3-one (XIV). The phytochemical study of the Diaporthe hongkongensis, fungi, led to the isolation of (3-oxociclobutil) 2-methyl-1- hydroxi metilciclopenta -2,4- diene carboxylate (XII) and 9-amino-7- (2,5,7-triazabicyclo [2.2.1] hept-3-yl)-2,3,6- trioxi-1-azabicyclo [3.2.2] nona-4,8-diene-4- carbaldehyde (XIII) both isollated of the first time. All compound were identified by 1H, 13C NMR, 2D and mass espectra data. The antioxidant activity, shoed the MeOH extract of leaves from collection 2, was equivalent with 1,15 and 1,13, the H2O phase showed 2,8 and 4.,51 (DPPH• and Fe3+) were considered significant. The antibacterial activity the DCM phase of leaves of collectes 2 and 3 and the EtOAc phase of collection 1, showed CIM and CMB found was 500/mL against Aeromonas hydrophila and Flavobacterium columnare. The aqueous phase of collection 1 showed CIM and CMB found was 1000 μg/ml against Flavobacterium columnare and Pseudomonas fluorescens. The mycelial extracts of fungi 4 and 6, tested with methodology to inhibition halo, showed medium activity, 1 cm, against Aeromonas hydrophila and Klebsiella pneumoniae. The DCM and EtOAc phases of metabolite broth of the fungu 4, showed activity with halo of 1 and 1,2 cm. The antimalical activity. The antimalarial activity showed that hexane and MeOH extracts of leves of the collection 3, showed IC50 of 1,51 and 1,77 mg/mL when compared to the standard. The MeOH extract of fungi 4, showed 6,89 of parasitaemia being significant. The activity by isolated compound sowed CIM of 73,58% to the compound X and 71,75% to the compound XI against Klebsiella pneumoniae . / O presente trabalho teve como objetivo realizar o estudo químico e biológico das folhas de Piranhea trifoliata e de seus fungos endofíticos (Picrodendraceae) e realizar a avaliação do seu potencial frente aos ensaios antimicrobiano, antioxidante e antimalárico. As folhas foram coletadas na Volta Grande do Xingú, Altamira, PA (coleta 1) e no lago do Catalão, Manaus, AM (coletas 2 e 3). A coleta 1 foi extraída com diclorometano, metanol e Água, e as coletas 2 e 3 foram extraídas com hexano, metanol e água. Parte do material das coletas 2 e 3 foi também processada para a obtenção dos fungos endofíticos e estes foram extraídos com diclorometano e acetato de etila. A análise fitoquímica preliminar das folhas e dos fungos mostrou que os extratos diclorometânicos e hexânico possuem terpenos e os extratos metanólicos apresentam substânciastos fenólicas. Os caldos metabólitos dos fungos mostraram que a fase diclorometânica (DCM) possui terpenos, e a fase de acetato de etila (AcOEt) possui indícios de terpenos e substâncias fenólicas. O estudo fitoquímico das folhas levou ao isolamento da Friedela-3-ona, 30-hidroxi-friedelan-3-ona, Lupeol, a mistura dos esteróides β-sitosterol e Estigmasterol, hidroxicoriatina, a mistura de α e β–amirina, 7-hidroxi-6-metoxi-cumarina, 7,4’’’ dimetilamentoflavona, 3’-O- metilloniflavna e a 28-hidroxi-friedelan-3-ona. Já o estudo fitoquímico do fungo Diaporthe hongkongensis, levou ao isolamento de (3-oxociclobutil) metil1-hydroxi-2 metilciclopenta-2,4-dieno carboxilato e 9-amino-7-(2,5,7-triazabiciclo[2.2.1]hept-3-il)-2,3,6-trioxi-1-azabiciclo [3.2.2] nona-4,8-dieno-4-carbaldeido ambas inéditas. Todas as substânciais foram identificadas por RMN de 1H e de 13C, mono e bidimensionais e espectrômetro de massas. Quanto à atividade antioxidante, o extrato MeOH das folhas da coleta 2, apresentou equivalência de 1,15 e 1,13, a fase H2O apresentou 2,8 e 4,51 (DPPH e Fe3+) sendo considerados significativos. A atividade antibacteriana mostrou que a fase DCM das folhas das coletas 2 e 3 e a fase AcOEt da coleta 1, apresentaram CIM e CMB de 500 μg/mL frente às bactérias Aeromonas hydrophila e Flavobacterium columnare. A fase aquosa da coleta 1, apresentou CIM e CMB de 1000 μg/mL frente às bactérias Flavobacterium columnare e Pseudomonas fluorescens. Os extratos miceliais dos fungos 4 e 6, testados pela a metodologia do halo de inibição, apresentaram média atividade, 1 cm frente às bactérias Aeromonas hydrophila e Klebsiella pneumoniae. As fases DCM e AcOEt do caldo metabólito do fungo 4 mostraram-se ativas com 1 e 1,2 cm de halo. A atividade antimalárica mostrou que os extratos hexânicos e MeOH das folhas da coleta 3 apresentaram IC50 de 1,51 e 1,77 μg/mL quando comparado com o padrão. O extrato MeOH do fungo 4 apresentou 6,89 de parasitemias sendo significativo. Ao testar as substâncias isoladas frente as bactérias, observou-se a CIM de 73,58% em X e 71,75% em XI frente a bactéria K. pneumoniae.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-06T15:39:14Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_ Armando C. Garcia.pdf: 2450304 bytes, checksum: adcfc8fa060149a887ed8f134e8e63ea (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-06T15:39:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação_ Armando C. Garcia.pdf: 2450304 bytes, checksum: adcfc8fa060149a887ed8f134e8e63ea (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-06T15:39:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação_ Armando C. Garcia.pdf: 2450304 bytes, checksum: adcfc8fa060149a887ed8f134e8e63ea (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T15:39:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_ Armando C. Garcia.pdf: 2450304 bytes, checksum: adcfc8fa060149a887ed8f134e8e63ea (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-12-13 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Endophytic fungi are microorganisms that live in interne tissues of plants, without causing them immediate damage. They are considered an important source to the production of secondary metabolites with antimicrobial, antitumor activities, among others. The present work describes the chemical and biological study of the secondary metabolites produced by the endophytic fungus Phomopsis sp. isolated from the plant Passovia stelis. For that, the fungus at hand was cultivated in large scale using the liquid medium of dextrose potato. The ethylacetat crude extract was obtained through extraction from the broth and then submitted to larvicide assay against larvae of the mosquito Aedes aegypti and antimicrobial against the pathogenic bacteria Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. It was also performed assays against the enzyme anticholinesterase, antioxidants and antifungal against Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum. In the selective larvicide, 3 fractions showed bioactivity (100 ppm) in 24h. In the dosing assay larvicide, the extract of the fungus Phomopsis sp. showed bioactivity with LD50 of 84.7, 81.6 and 79.5 ppm and LD90 de 147.8, 140.2 and 137.7 ppm after 24, 48 e 72 h, respectively. The crude extract was analyzed using TLC, HPLC and NMR and then purified through column chromatography and HLPC-DAD. From F4, the 3-nitropropionic acid was isolated, which is used in neurological research. Succinic acid, which is considered one of the construction blocks in chemical synthesis industry, was isolated from the fraction F7. Other 3 esterified substances, derivatives of tyrosol, were isolated of the fraction F1, and one of them unpublished. In the antioxidant assay, two fractions (F5, F6) showed positive results and in the assay against the enzyme anticholinesterase four fraction (F2, F5, F6, F7) presented bioactivity. These results demonstrate the expressive biopotency of the fungus Phomopsis sp. and open a new perspective for further studies. / Fungos endofíticos são fungos que vivem no tecido interno das plantas sem que lhes causem prejuízo imediato. Esses microrganismos são considerados uma fonte importante para a produção de metabólitos secundários com ação antimicrobiana, antitumoral, entre outras. Este trabalho descreve o estudo químico e biológico dos metabólitos secundários produzidos pelo fungo endofítico Phomopsis sp. isolado da planta Passovia stelis. Para tanto, o fungo em questão foi cultivado em escala ampliada, utilizando meio líquido de batata dextrose. O caldo obtido foi extraído com acetato de etila fornecendo o extrato bruto. Este foi submetido à ensaio larvicida, frente as larvas do mosquito Aedes aegypti, antimicrobiano frente às bactérias patogênicas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. Também foram realizados ensaios anticolinesterase, antioxidante e antifúngico frente aos fungos Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum. No ensaio larvicida de dose, o extrato do fungo Phomopsis sp. exibiu bioatividade com valores de DL50 de 84,7; 81,6 e 79,5 ppm e DL90 de 147,8; 140,2 e 137,7 ppm respectivamente, nas leituras realizadas após 24, 48 e 72 h. No ensaio larvicida seletivo, três frações obtiveram bioatividade em 100 ppm nas primeiras 24 horas. Após análise por CCD, CLAE e RMN, o extrato bruto foi fracionado por cromatografia em coluna e por CLAE-DAD. Da fração F4 foi isolado o ácido 3-nitropropiônico que é muito utilizado em pesquisas neurológicas. Da fração F7 foi isolado o ácido succínico tido como um dos principais blocos de construção na indústria da síntese química. Outras três substâncias da classe dos ésteres, derivados do tirosol foram isolados da fração F1 sendo uma delas inédita. No ensaio antioxidante duas frações (F5, F6) deram resultado positivo e no ensaio anticolinesterásico quatro frações (F2, F5, F6, F7) mostraram atividade. Estes resultados mostraram a expressiva biopotência do fungo Phomopsis sp, abrindo novas perspectivas atrativas para estudos futuros.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-06-01T11:24:15Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Murilo Machado dos Anjos - 2015.pdf: 3279307 bytes, checksum: dc7ced1aa57b2f7b3078d3d7c37e0ae1 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-06-01T11:26:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Murilo Machado dos Anjos - 2015.pdf: 3279307 bytes, checksum: dc7ced1aa57b2f7b3078d3d7c37e0ae1 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-01T11:26:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Murilo Machado dos Anjos - 2015.pdf: 3279307 bytes, checksum: dc7ced1aa57b2f7b3078d3d7c37e0ae1 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-06-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The world's population sees aging and some diseases that become more common. Alzheimer's disease (AD) is a dementia caused by loss of cognitive function of the individual and drugs used in their treatment is based on the inhibition of the enzyme acetylcholinesterase (AChE). Cancer is a group of diseases that develop due to the disorderly proliferation of cells may be related to genetic factors as well as dietary habits and exposure to radiation, the treatment being based on three main techniques: surgery, radiation and chemotherapy. In this work we synthesized 15 compounds (11 chalcones and 4 imines), based on the condensation of Claisen-Smth, and they are characterized by NMR (1H and 13C), IV These compounds were submitted to acetylcholinesterase activity by the modified method of Elman, using CCD and Martson, in addition to the evaluation of cytotoxic tumorias lines SF-295 (glioblastoma - human), HL-60 (acute leukemia promielítica) and HCT-116 (colon). The compounds showed no activity for the enzyme AChE front of the methods employed, and this cause investigated using molecular modeling methods, which sought in the literature active compounds for this enzyme, containing resemblance with the structures synthesized in this work. 80 descriptors were calculated being submitted to statistical analysis (Fisher's weight) where the number of variables is reduced to 24 and these have been selected GAP and bond angle where it was observed that the values of the synthesized compounds, mostly It was found out of range for the active compounds. The previous modeling studies are not sufficient to determine the causes of inactivity of the compounds, being necessary to the realization of a structure and reactivity studies. The evaluation of the antitumor compounds presented become more positive as the MCH-1 / A população mundial veem envelhecendo e com isto algumas doenças tornam-se mais comum. A doença de Alzheimer (DA) é uma demencia causada pela perda da função cognitiva do indivíduo e as drogas empregadas no seu tratamento tem como base a inibição da enzima acetilcolinesteráse (AChE). O cancer é um conjunto de doenças que se desenvolvem pela multiplicação desordenada de células, pode estar relacionado com fatores genéticos como também hábitos alimentares e exposição à radiação, sendo o tratamento baseado em três principais técnicas: cirurgia, radioterapia e quimioterapia. Neste trabalho foram sintetizados 15 compostos (11 chalconas e 4 iminas), baseando-se na condensação de Claisen-Smth, sendo os mesmos caracterizados por RMN (1H e 13C) e I.V. Estes compostos foram submetidos à atividade anticolinesterásica pelo método modificado de Elman, utilizando-se CCD, e Martson, além da avaliação citotóxica para as linhagens tumorias SF-295 (glioblastoma - humano), HL-60 (leucemia promielítica aguda) e HCT-116 (colón). Os compostos não apresentaram atividade para a enzima AChE frente aos métodos empregado, sendo esta causa investigada utilizando métodos de modelagem molecular, onde buscou-se na literatura compostos ativos para esta enzima, que continham similiaridades com as estruturas sintetizadas neste trabalho. Foram calculados 80 descritores sendo estes submetidos à uma análise estátistica (peso de fisher) onde o número de variáveis foi reduzido para 24 e destas foram selecionadas o GAP e ângulo de ligação, onde observou-se que os valores dos compostos sintetizados, em sua maioria, estavam fora da faixa encontrada para os compostos ativos. Os estudos prévios de modelagem não são suficientes para determinar as causas da inatividade dos compostos, sendo necessário a realização de um estudo de estrutura e reatividade. A avaliação antitumoral dos compostos apresentou-se mais positiva, sendo as chalconas Mch-1 e Mch-7 ativas para duas linhagens celulares tumorais (HCT-116 e SF-265).

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-05T19:30:57Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Afif Felix Monteiro - 2014.pdf: 8486450 bytes, checksum: 34a1a47b84a7dcbbf48150e8468d914b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-05T19:33:23Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Afif Felix Monteiro - 2014.pdf: 8486450 bytes, checksum: 34a1a47b84a7dcbbf48150e8468d914b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T19:33:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Afif Felix Monteiro - 2014.pdf: 8486450 bytes, checksum: 34a1a47b84a7dcbbf48150e8468d914b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Brazilian Savannah is rich in plant species, and that is why it is promising to study natural products (NPs) which can act as sources for the development of new drugs, such as chemotherapeutic and chemopreventive agents, and inhibitors of enzymes such as cathepsins, which are lysosomal proteases with beneficial functions but are also involved in pathological processes (cancer, arthritis, osteoporosis, immune disorders and viral infections). Although these enzymes have been studied as targets for drug development, few inhibitors based on NPs have been described in the literature. In this work the chemical-biological study of Hymenaea stigonocarpa was carried out in the search for potential secondary metabolites capable of inhibiting the activity of cathepsins K, L and V as well as the viability of tumor cells S-180 and Ehrlich. By means of chromatographic techniques, 5 substances were isolated from the leaf extract, which have not been previously reported to H. stigonocarpa: labd-7,13-dien-15-oic acid (I), labd-7-en-15-oic acid (II), ent-Δ13,14-labd-8-β-ol-15-oic acid (III), 4’,5,7-trihydroxy-3’,5-dimethoxyflavone (IV) and p-hydroxybenzoic acid (V), along with one substance obtained from the flower extract, which has not been described in the literature: 18-hydroxy-ent-halima-1(10),13-E-dien-15-oic acid (VI). Therefore, this study has contributed to enrich the knowledge of NPs produced by this species. The diterpenoids I and III were assayed for their cytotoxic potential, showing unsatisfactory IC50 values. However, studies have shown that labdane and halimane diterpenoids possess potent cytotoxic effect and that substance IV, isolated in this work, can be considered to have pronounced anticancer activity, making this species promising in the search for compounds capable of inhibiting tumor cells viability. Compounds I, III, III* (methyl ester of III), IV, V and VI were tested against cathepsins K, L and V. The most significant results were observed for compounds I, IV, V and VI against cathepsin V; I and V against the cathepsin L and I against cathepsin K. The inhibitory potency values of these compounds were determined and the most significant results were observed for compound IV (IC50 = 2.9 and 36.9 mM) against cathepsins V and L, respectively. Literature data have reported significant inhibitory activities for flavonoids against cathepsin K, indicating, together with the results obtained in this work, the need for further studies of H. stigonocarpa in the search for cysteine proteases inhibitors. / O Cerrado brasileiro, rico em espécies vegetais, torna-se promissor para estudos de produtos naturais (PNs) que possam atuar como fontes para o desenvolvimento de novos fármacos, como agentes quimioterapêuticos e quimiopreventivos, e inibidores de enzimas, tais como as catepsinas, proteases lisossomais com funções benéficas, porém atuando em processos patológicos (câncer, artrite, osteoporose, desordens imunológicas e infecções virais). Embora tais enzimas tenham sido estudadas como alvos para o desenvolvimento de fármacos, poucos inibidores baseados em PNs foram descritos na literatura. Assim, neste trabalho foi realizado o estudo químico-biológico de Hymenaea stigonocarpa, em busca de metabólitos secundários potenciais em inibir a atividade das catepsinas K, L e V, bem como a viabilidade celular das linhagens de células tumorais S-180 e Ehrlich. Através de técnicas cromatográficas, do extrato das folhas foram isoladas 5 substâncias, ainda não relatadas para H. stigonocarpa: ácido labd-7,13-dien-15-oico (I), ácido labd-7-en-15-oico (II), ácido Δ13,14-ent-labd-8-β-ol-15-oico (III), 4’,5,7-trihidroxi-3’,5-dimetoxiflavona (IV) e ácido p-hidroxibenzoico (V); e uma substância do extrato das flores, a qual ainda não está descrita na literatura: ácido 18-hidroxi-ent-halima-1(10),13-E-dien-15-oico (VI). Portanto, este estudo contribuiu para enriquecer o conhecimento sobre os PNs produzidos por esta espécie. Os diterpenoides I e III foram avaliados quanto aos seus potenciais citotóxicos, demonstrando valores de IC50 não satisfatórios. No entanto, estudos demonstraram que diterpenoides labdano e halimano possuem efeito citotóxico e consideraram a substância IV, isolada neste trabalho, como detentora de atividade anticâncer, tornando esta espécie promissora na busca por compostos capazes de inibir a viabilidade de células tumorais. Os compostos I, III, III* (éster de metila de III), IV, V e VI foram ensaiados frente às catepsinas K, L e V, sendo os resultados mais expressivos para os compostos I, IV, V e VI frente à catepsina V; I e V frente à catepsina L e I frente à catepsina K. Essas substâncias foram avaliadas quanto à potência inibitória, sendo os resultados mais significativos para o composto IV (IC50= 2,9 e 36,9 μM), frente às catepsinas V e L, respectivamente. Dados da literatura reportam atividades inibitórias para flavonoides frente à catepsina K, evidenciando, juntamente com os resultados obtidos, a necessidade de continuação dos estudos de H. stigonocarpa na busca por inibidores de cisteíno proteases.