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La retina es un tejido sensible a la luz que recubre la superficie interna del ojo. La complejidad estructural y funcional de la retina hacen de este tejido uno de los más vulnerables a alteraciones provocadas por todo tipo de lesión o enfermedad. Las enfermedades del sistema visual conllevan para los sujetos afectados una mengua en la calidad de vida. Entre las enfermedades degenerativas de tipo genético del sistema visual, la retinosis pigmentaria (RP) es una de las más importantes por incidencia y porque al día de hoy no existe terapia curativa efectiva. La RP comprende un conjunto de enfermedades neurodegenerativas de la retina que afectan principalmente a los fotorreceptores, produciendo una pérdida gradual de la visión y desembocando paulatinamente en ceguera. Sin embargo, son varias las alternativas terapéuticas que se están investigando en la actualidad con el fin curar la enfermedad. La terapia génica, las células encapsuladas, la optogenética, el trasplante de células madre y, por último, los chips electrónicos, son estrategias con un futuro esperanzador en la curación de la enfermedad. Mientras tanto, con el objetivo de retardar la evolución de la enfermedad y la degeneración del sistema visual, se ha planteado estudiar otros posibles tratamientos que puedan retrasar la evolución de la RP y mejorar la calidad de vida de los sujetos afectados. La investigación en los últimos 20 años, gracias a las nuevas tecnologías disponibles, ha demostrado que las sustancias antiapoptóticas, antioxidantes, factores tróficos y neuroprotectores influencian la degeneración retiniana. El presente trabajo persigue estudiar 2 sustancias, una de origen natural y otra sintética, con el objetivo de encontrar agentes capaces de enlentecer el decurso degenerativo de la retina en el modelo murino de retinosis pigmentaria P23H, siempre teniendo en cuenta la inquietud de encontrar un tratamiento terapéutico aplicable a seres humanos en el futuro. El objetivo de este trabajo es determinar el posible potencial terapéutico, en tratamiento crónico, de las sustancias elegidas. El Cannabinoide sintético HU210 podría retrasar o prevenir la degeneración y la muerte de los fotorreceptores y del entramado sináptico de la retina. En anteriores estudios publicados, HU210 protege las células neuronales en varias enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson y el estrés isquémico. Además, se han descrito efectos sobre la reducción de la presión intraocular en relación con el glaucoma. La nicotina podría retrasar o prevenir la degeneración y la muerte de los fotorreceptores y otras neuronas de la retina, actuando sobre los receptores nicotínicos. En este caso la bibliografía es un poco más escasa y ambigua, pero quisimos comprobar si la suministración crónica de nicotina podría tener algún efecto positivo sobre el transcurso de la enfermedad retiniana. La eficacia de los tratamientos fue evaluada mediante registros electrorretinográficos, con objeto de medir la actividad funcional de la retina. También se utilizaron métodos de inmunohistoquímica con el objetivo de caracterizar los efectos de HU210 sobre la morfología y conectividad sináptica de la retina. A la vez, evaluamos eventuales efectos de HU210 sobre el peso, apetito y consumo de agua de los animales objeto de investigación. Se espera con estos estudios esclarecer el posible potencial terapéutico de estas sustancias. Este trabajo se ha realizado sobre ratas de la línea P23H-3, pero todos los resultados esperamos sean, con el tiempo necesario, aplicables a seres humanos afectados por la RP.

La obesidad infantil ha pasado a convertirse en las tres últimas décadas en una epidemia del siglo XXI, producto del desarrollo en los diferentes ámbitos sociales, lo que ha provocado un cambio en el nivel del comportamiento de los seres humanos que se ve reflejado en un nuevo estilo de vida. Este cambio de comportamiento que ha tenido la sociedad ha traído nuevos problemas de salud que son denominadas por algunos organismos como las enfermedades sociales no infecciosas entre ellas la obesidad. El objetivo de este trabajo ha sido analizar e interpretar las repercusiones e interrelaciones que el sobrepeso y la obesidad expresados a través del índice de masa corporal (IMC), tienen sobre las habilidades motrices básicas de un grupo de escolares del segundo y tercer ciclo de Educación Primaria Obligatoria de la ciudad de Alicante. La muestra estaba compuesta por 287 niños y niñas de edades comprendidas entre 8 y 12 años, pertenecientes a tres establecimientos educacionales. Para llevar a cabo el objetivo expuesto, se tomaron datos antropométricos para determinar el índice de masa corporal. Para la valoración de la motricidad de los escolares se utilizó la escala de habilidades motrices básicas de Fernández et al. (2007) y se recogieron datos sociodemográficos y de estilo de vida. De los resultados obtenidos podemos resaltar las siguientes conclusiones:1) En España se ha producido, en las últimas décadas, un crecimiento estatural y ponderal de los niños y niñas españoles, incluyendo los de nuestra muestra. A través del índice de masa corporal hemos constatado que tanto el sobrepeso como la obesidad han ido en aumento estos últimos años. 2) En cuanto al estilo de vida podemos decir que la televisión está fuertemente asociada a una conducta sedentaria y existe una estrecha relación entre las horas que ven televisión y los niveles de obesidad y sobrepeso. 3) Los alimentos consumidos con menor regularidad son las verduras tanto crudas como hervidas en porcentajes muy por debajo de los recomendados por los nutricionistas y organismos gubernamentales. 4) Los desplazamientos (carreras) tienen un nivel más alto de competencia motriz que otras habilidades motrices como el manejo de móviles o el giro. 5) En cuanto a la respuesta al objetivo general de este estudio sobre la posible interrelación entre el índice de masa corporal y el nivel de las habilidades motrices básicas, podemos decir que existe una relación significativa entre ambos, donde los niveles más bajos de las habilidades motrices se encuentran presentes en los niños con obesidad y sobrepeso.

El cáncer colorrectal (CCR) constituye en la actualidad la neoplasia más frecuente en España. Hasta un 30% de los casos de CCR se incluyen dentro del CCR familiar y alrededor de un 3-5% se deben a mutaciones en genes de elevada penetrancia que siguen una herencia mendeliana Éstos últimos incluyen al CCR hereditario no polipósico: principalmente el Síndrome de Lynch (SL), debido a mutaciones germinales en los genes de sistema reparador de errores (MMR) MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2; y varios síndromes polipósicos, como la poliposis adenomatosa familiar, asociada al gen APC y la poliposis asociada al gen MUTYH. En aproximadamente un 70% de los casos analizados de pacientes con sospecha de SL no se encuentran mutaciones germinales y en torno a un 10% de estos casos, con pérdida de expresión de MLH1 e hipermetilación del promotor de dicho gen en su tumor, se explican por epimutaciones constitucionales en MLH1. No obstante, la prevalencia de este fenómeno en la población general es desconocida. También existen casos de CCR con elevada carga familiar, pero sin alteración del sistema MMR, de los que se desconoce su origen genético (CCR familiar tipo X). Lo mismo ocurre para algunos casos de poliposis adenomatosa con agregación familiar, que no se explican por mutaciones en los genes APC o MUTYH. Recientemente se han descrito dos mutaciones recurrentes en los genes POLE y POLD1 (p.Leu424Val y p.Ser478Asn respectivamente) como responsables de un pequeño porcentaje de estos casos de CCR y poliposis no clasificados pero, debido a la escasez de casos descritos hasta la fecha, fenotipo clínico exacto no se ha definido. Así, los objetivos de este trabajo han sido: en primer lugar, determinar la prevalencia de las epimutaciones constitucionales en MLH1 como una causa de SL en una serie no seleccionada de CCR y compararla con la prevalencia de este fenómeno en una serie seleccionada; y en segundo lugar, analizar la prevalencia de las mutaciones recurrentes en los genes POLE y POLD1 en casos de CCR y poliposis familiar de aparición temprana, sin mutación en los genes responsables de los síndromes de sospecha, y así contribuir a definir el fenotipo clínico asociado a las mutaciones en dichos genes. Se evaluó la prevalencia de epimutaciones constitucionales de MLH1 en una cohorte de CCR no seleccionado, y se comparó con una cohorte de CCR familiar seleccionado. Así, no se detectaron epimutaciones constitucionales en MLH1 en la población no seleccionada. No obstante, el 15,6% de la serie seleccionada fueron positivos para epimutaciones en MLH1. Por otro lado, se realizó la búsqueda de mutaciones recurrentes en POLE y POLD1 en casos de CCR y/o poliposis familiar mediante ensayos de genotipado KASPar y/o secuenciación Sanger. Se identificó la mutación POLE_p.Leu424Val como mutación de novo, ningún caso presentó la mutación POLD1_p.Ser478Asn, pero se identificó una nueva mutación en POLD1: p.Leu474Pro, con patogenicidad sustentada mediante diversas aproximaciones, en una familia de CCR familiar tipo X con también casos de cáncer de endometrio. Así, estos resultados sugieren una prevalencia insignificante de epimutaciones constitucionales en MLH1 en cohortes no seleccionadas de CCR. Así, el análisis de epimutación constitucional en MLH1 debería dirigirse exclusivamente a pacientes que cumplen los criterios revisados de Bethesda y cuyo tumor presente pérdida de expresión y metilación de MLH1. Por otro lado, las mutaciones en POLE y POLD1 explican una pequeña proporción de casos de CCR y poliposis familiar. La secuenciación de al menos estas mutaciones recurrentes debería considerarse en el diagnóstico genético rutinario de los casos con sospecha de CCR o poliposis hereditarios, sin mutaciones en los genes de sospecha clásicos.

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Investiga la resistencia bacteriana al ión mercurio (Hg2+) en 55 cepas de Escherichia coli aisladas de diferentes ambientes marinos de la costa limeña: Bahía de Pucusana, Bahía de Miraflores y Bahía del Callao (Lima-Perú). Se determinan los diferentes serogrupos de las cepas, utilizando sueros polivalentes EPEC, EIEC y EHEC; la resistencia al mercurio es evaluada realizando pruebas de MIC a cloruro de mercurio: 30, 50, 80, 100, 200, 300 y 400 µM/mL disuelto en caldo LB. Se evalúa las cepas mercurio-resistentes frente a antibióticos clínicos por la técnica de difusión en placa usando los siguientes antibióticos en discos: Cloramfenicol (C), 30 µg; Norfloxacina (Nor),10 µg; Amikacina (Ak), 30 µg; Kanamicina (K), 30 µg; Ampicilina (A), 10 µg; Sulfaperazone (Sfp), 30 µg; Tetraciclina (Te), 30 µg; Aztreonam (Az), 30 µg; Ceftazidima (Caz), 30 µg; Gentamicina (Ge), 10 µg; Amoxicilina (Amx), 25 µg; Sulfametoxazol-trimetoprim (Sxt), 25 µg; Ácido Nalidíxico (W), 30 µg; Ciprofloxacina (Cip), 5 µg. El origen de la resistencia al mercurio mediada por plásmidos se comprueba mediante la técnica de curación con SDS (10 % p/v); se realiza la técnica de conjugación de plásmidos tomando la cepa receptora E. coli DH5α. Para la visualización de los plásmidos conjugativos se realiza la técnica de extracción de plásmidos con el método de Lisis Alcalina con SDS en las cepas receptoras mercurio-resistentes. Así mismo se evalúa la presencia del gen merA, que se encuentra en el operón mer, por el método del PCR tomando como DNA molde los plásmidos aislados. Del total de las cepas de E. coli (n=55) estudiadas, el 29,1 % (n=16) resultan ser positivas para los serogrupos EPEC, de éstas: 31,25 % EPEC poliA, 50 % EPEC poliB, 18,75 % EPEC poliC. El 74,54 % (n=41) son resistentes al mercurio en distintas concentraciones, de éstas el 34,15 % son resistentes a antibióticos; se observa la resistencia al mercurio mediada por plásmidos en el 80,5 %. De las cepas mercurio resistentes, el 14,63 % (n=6) muestran ser portadores de plásmidos conjugativos, observándose la presencia de estos en las cepas receptoras mercurio resistentes. Se observa la presencia truncada o aberrante del gen merA en los plásmidos aislados, confirmando la frecuencia del operón mer en el 14,63 % de las cepas mercurio resistentes. / Tesis

Señala que la contaminación microbiana de alimentos durante la cadena de producción es una de las principales causas de enfermedades transmitidas por alimentos (ETAS). Listeria monocytogenes, es un microorganismo patógeno causante de la listeriosis humana, una enfermedad con alta morbilidad, hospitalización y mortalidad, principalmente en poblaciones vulnerables. Su presencia en alimentos es favorecida por su resistencia a bajas temperaturas y amplio rango de pH; los brotes están vinculados a carnes frescas y procesadas, productos lácteos y alimentos listos para comer. En los últimos años los bacteriófagos han sido propuestos para su uso con fines terapéuticos y como una alternativa para el control biológico de Listeria monocytogenes y otros microorganismos patógenos en alimentos. Los bacteriófagos son virus que infectan a las bacterias, se componen de una cadena simple o una cadena doble de ADN o ARN cubiertos por una cápside proteica y están presentes casi en todos los ecosistemas. A partir de un filtrado de aguas servidas de camales de la ciudad de Lima, se seleccionó, aisló y caracterizó fisicoquímica y biológicamente un bacteriófago lítico para Listeria monocytogenes: el fago ASCF1. Este bacteriófago es estable a temperaturas entre 4°C y 45°C, es tolerante a un amplio rango de pH (desde 4 hasta 9), presenta un amplio rango de hospedero, infectando también cepas de Salmonella typhimurium y Vibrio cholerae. Tiene una multiplicidad de infección (MOI) óptima de 10, un periodo de latencia de 120 minutos y un tamaño de explosión promedio de 9.72 unidades formadoras de placa por célula infectada. Estos resultados indican que el bacteriófago ASCF1 puede ser aplicado para la descontaminación de alimentos y superficies. / Tesis

El envejecimiento produce la declinación de la capacidad funcional y morfológica de los sistemas endócrino, nervioso e inmune, asociada con el descenso de la habilidad para mantener la homeostasis. Durante este proceso se producen alteraciones sobre los diferentes tipos celulares de la adenohipófisis de la rata. El presente diseño experimental permite lograr un modelo equivalente al de una vida humana de 80 a 100 años y analiza los cambios ultraestructurales y cuantitativos de las poblaciones celulares secretoras de hormonas hipofisiarias. Se utilizaron ratas machos y hembras Sprague-Dawley. / Ageing determines a morphological-functional delay of the immunoendocrine system, together with a decrease of the ability to maintain homeostasis. During ageing, the different adenohypophysis type cells exibith alterations. The present experiment design allows the achievement of a model equivalent to that of a human life ranging from 80 to 100 years of age. It also permits the analysis of the quantitative and ultratructural changes of the diferent hormones secreting cell populations in the pituitary gland of the rat. / Este material se encuentra en la Biblioteca de la Facultad de Ciencias Veterinaris, UNLP