Araucarea angustifolia (Bert.) O. Kuntze é uma espécie dioica, isto é, flores masculinas e femininas originam-se em árvores separadas. As flores femininas apresentam-se como estróbilo, mais conhecido como pinha. A pinha é constituída por sementes (pinhões) e brácteas (sementes não desenvolvidas), as quais apresentam elevada concentração de compostos fenólicos. Esses compostos são conhecidos por reduzir danos oxidativos a lípidos, proteínas e ácidos nucleicos, contribuindo para minimizar a incidência de doenças relacionadas com o estresse oxidativo, tais como doenças cardiovasculares, neurológicas e câncer. O objetivo deste estudo foi caracterizar quimicamente, avaliar a atividade antioxidante e antigenotóxica do extrato aquoso de brácteas de A. angustifolia. Neste trabalho, os polifenóis totais do extrato de A. angustifolia foram determinados pelo método de Folin- Ciocalteu e sua composição química foi confirmada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O potencial do extrato para neutralizar espécies reativas foi avaliado através do ensaio com 2,2-difenil 1-picrilhidrazil (DPPH●) e pelas atividades like das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). Em linhagem celular de fibroblasto de pulmão humano (MRC5), avaliou-se o efeito protetor do extrato na viabilidade celular através da redução de 3-(4,5-dimetiltiazol 2-il)-2,5difenil brometo de tetrazolina (MTT), na atividade das enzimas SOD e CAT, nos danos oxidativos a lípidos, proteínas e ácido desoxirribonucléico (DNA) (ensaio cometa alcalino e enzimático) induzidos pelo peróxido de hidrogênio (H2O2). O teor de fenólicos totais do extrato de A. angustifolia foi de 670,93 ± 17,79 mg catequina /100 g de brácteas, sendo a catequina, epicatequina, quercetina e apigenina os principais polifenóis encontrados. O extrato de A. angustifolia foi capaz de reduzir o radical DPPH● e apresentou atividade SOD e CAT-like. Além disso, o extrato de A. angustifolia nas concentrações estudadas (25 e 50 μg/mL) reduziu a mortalidade celular, danos oxidativos a lipídios, proteínas e DNA, e diminuiu a depleção das enzimas antioxidantes SOD e CAT induzida pelo H2O2 em células MRC5. Apesar de não ter sido observado correlação entre os polifenois e marcadores de danos oxidativos, verificou-se uma correlação negativa entre danos a lipídos, proteínas e ácidos nucleicos e a atividade das enzimas SOD e CAT, sugerindo que essas enzimas desempenham um importante papel na prevenção de danos ás biomoléculas. Esses resultados mostram que a A. angustifolia apresenta potencial como fonte de compostos fitoquímicos com atividade biológica relevante. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-11T13:43:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Marcia Denize Oliveira de Souza.pdf: 1692835 bytes, checksum: df8d66ab76d9a357820549d73b1c5332 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-11T13:43:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Marcia Denize Oliveira de Souza.pdf: 1692835 bytes, checksum: df8d66ab76d9a357820549d73b1c5332 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Araucaria angustifolia (Bert.) O. Kuntze is a dioecious species, with male and female flowers found on separate trees. The A. angustifolia female cone consists of fully developed edible seeds and non-developed seeds called bracts. These bracts have high concentration of phenolic compounds, which have the potential to prevent oxidative damage to lipids, proteins and nucleic acids, and decreasing the incidence of diseases related to oxidative stress, such as cardiovascular and neurological diseases, and cancer. The aim of the present study was to evaluate the chemical characterization and antioxidant and antigenotoxic activities of the extract of A. angustifolia bracts. In this work the polyphenols total of A. angustifolia extract was determinate by Folin-Ciocalteu reagent and its chemical composition was confirmed by high performance liquid chromatography (HPLC). The extract potential to neutralize reactive species was evaluated by 2,2- diphenyl 1-picrylhydrazyl (DPPH●) method and by the ability to mimic the activities of superoxide antioxidants like dismutase (SOD) and catalase (CAT). In human cell line of lung fibroblast (MRC5), we evaluated the protective effect of the extract on cell viability by reduction of 3 - (4,5 dimethylthiazol - 2 - yl ) -2,5 diphenyl tetrazolina bromide (MTT), in the activity of SOD and CAT enzymes in oxidative damage to lipids, proteins and the deoxyribonucleic acid (DNA) (enzymatic and alkaline comet assay) induced by hydrogen peroxide (H2O2). The total phenolic content of the A. angustifolia extract was 670.93 ± 17.79 mg catechin / 100 g bracts, and catechin, epicatechin, quercetin and apigenin the main polyphenol found. The A. angustifolia extract was able to reduce DPPH● and presented like activity of SOD and CAT enzymes. Furthermore, the A. angustifolia extract at the concentrations studied (25 and 50 mg/mL) reduced cell death , oxidative damage to lipids, proteins and DNA, and decreased depletion of antioxidant enzymes SOD and CAT induced by H2O2 in MRC5 cells . Although, no correlation between polyphenols and bookmarks of oxidative injury have been observed. There was a negative correlation between damage to lipids, proteins and DNA with enzymes SOD and CAT, suggesting that these enzymes play a role in the regulation of cellular redox metabolism. These results showed that the A. angustifolia has potential as a source of phytochemical compounds with relevant bioactivities.

Devido ao aumento do consumo de sucos de uva, o controle da qualidade é uma realidade em todos os países produtores e consumidores desse produto. A forma mais comum de adulteração é através da substituição por suco de maçã. As amostras adulteradas podem ser identificadas através de análises específicas, pois o suco de maçã possui alguns compostos que a uva não apresenta ou possui pequenas quantidades, como a florizina e o sorbitol. Portanto, métodos analíticos capazes de identificar a composição de sucos de uva e determinar sua autenticidade são necessários para garantir um controle eficaz da qualidade dos sucos de uva. Por esta razão, o presente trabalho teve como objetivo validar os métodos analíticos da florizina e do sorbitol para detectar adição de suco de maçã em suco de uva. Inicialmente, foram validados os métodos para análise de florizina e sorbitol, realizados em cromatografia líquida. Após a validação dos métodos, foram realizados testes de adições de suco de maçã das cultivares Gala e Fugi em sucos de uva das cultivares Concord, Isabel e Bordô, e, foram analisados sucos de uva e maçã comerciais. Todos os sucos de uva que apresentaram concentração elevada de sorbitol também apresentaram concentração elevada de florizina. Através dos resultados deste estudo, observou-se que os métodos da florizina e do sorbitol são eficazes para detectar a adição de suco de maçã em suco de uva. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-16T13:53:53Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernanda Rodrigues Spinelli.pdf: 1344721 bytes, checksum: 0bc678dfb56889bf18f2bec97cb8c74e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-16T13:53:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernanda Rodrigues Spinelli.pdf: 1344721 bytes, checksum: 0bc678dfb56889bf18f2bec97cb8c74e (MD5) / Due to the increased consumption of grape juice, quality control is a reality in every country producers and consumers of this product. The most common form of adulteration is by substitution with apple juice. The adulterated samples can be identified by specific analyzes, as apple juice has some compounds that the grape does not have or has in small amounts, as phlorizin and sorbitol. Therefore, analytical methods capable of identifying the composition of grape juices and determine its authenticity are needed to ensure effective control of the quality of the grape juices. For this reason, the present study aimed to validate the analytical methods of phlorizin and sorbitol to detect addition of apple juice in grape juice. Initially, the methods were validated for the analysis of phlorizin and sorbitol, carried out in liquid chromatography. After validation of the methods, tests were conducted additions of apple juice cultivars Gala and Fugi in grape juices from cultivars Concord, Isabel and Bordô, and were analyzed grape and apple commercial juices. All grape juices show that high concentrations of sorbitol also showed high concentration of phlorizin. Through this study, it was observed that the methods of phlorizin and sorbitol are effective to detect the addition of apple juice grape juice.

A vitivinicultura brasileira vem se transformando muito nos últimos 20 anos e a abertura da economia, na década de 90, trouxe incertezas para o setor vitivinícola, que foi induzido a criar novas estratégias de competitividade. O município de Farroupilha é o terceiro maior produtor de uvas do Rio Grande do Sul e o maior produtor de uvas moscatéis para processamento. Essa condição estimulou a criação da Associação Farroupilhense dos Produtores de Vinhos, Espumantes, Sucos e Derivados (AFAVIN), com foco e objetivo de divulgar e defender os produtos elaborados no município, para os quais foi definido como estratégia de inovação e competitividade o desenvolvimento de uma Indicação Geográfica de produtos de qualidade e identidade regional. Nesse contexto, a dissertação objetivou analisar a vitivinicultura vinculada à AFAVIN com o fim de propor estratégias de ação e transferência de tecnologias como subsídio para melhorar a qualidade dos produtos, agregar competitividade e sustentabilidade à cadeia produtiva da região e para consolidar o processo de desenvolvimento da IP Farroupilha, pois nem sempre as empresas e os produtores estão preparados para mudanças. Para o estudo foi criada metodologia para levantamento das informações de vinícolas e de propriedades fornecedoras de uvas, bem como sua análise, identificando os principais gargalos, as demandas de Transferência de Tecnologia, de Pesquisa e Desenvolvimento e de políticas institucionais (que não dependam somente de TT e/ou P&D), que possam contribuir para o desenvolvimento da IP Farroupilha. Este estudo é inovador e a análise dos resultados permitiu caracterizar as propriedades vitícolas e as vinícolas vinculadas à AFAVIN, propondo ações para consolidar o processo de desenvolvimento da IP Farroupilha, melhorando a qualidade dos produtos, agregando competitividade e sustentabilidade à cadeia produtiva da região. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-16T14:08:38Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Joao Carlos Taffarel.pdf: 5127415 bytes, checksum: 4b67e7d91229145fcc912536c9ab3c59 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-16T14:08:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Joao Carlos Taffarel.pdf: 5127415 bytes, checksum: 4b67e7d91229145fcc912536c9ab3c59 (MD5) / The brazilian viticulture faced a huge transformation in the last 20 years, especially after the economic changes in the in the 90’s decade. The new scenarios brought uncertainties to the viticulture sector that stimulated the adoption of competitiveness strategies. The city of Farroupilha is the third biggest grape producer of Rio Grande do Sul and the biggest muscat grape for processing producer. This condition stimulated the creation of Associação Farroupilhense dos Produtores de Vinhos, Espumantes, Sucos e Derivados (AFAVIN), focused on the promotion of innovation and competitiveness strategies for the development of a geographic indication of quality products and regional identity. Within this context, the dissertation analyzed the viticulturists linked to AFAVIN with the purpose to identify opportunities for technology transfer as a way to improve the quality of products and aggregate competitiveness and sustainability to the regional production chain and to consolidate the developing process of Farroupilha Geografical Indication (IG). For this study, wineries and grape producers were analysed in order to identify the main bottlenecks and demands for technology transfer, research and development and application of institutional policies that can contribute for the development of Farroupilha IP. This study the results allowed the characterization of the viticulture properties and the wineries linked to AFAVIN, proposing actions to consolidate the process of development of Farroupilha IP in order to improve the quality of products, aggregate competitiveness and sustainability to the regional production chain.

Protozoários do gênero Acanthamoeba estão entre os organismos de vida-livre mais abundantes sendo encontrados em uma ampla gama de ambientes naturais como água, solo, poeira, vegetais, hospitais, sistemas de ventilação e esgotos. Algumas espécies de Acanthamoeba são consideradas patógenos oportunistas e têm sido associadas a infecções cutâneas, queratite, encefalite granulomatosa amebiana (EGA) e a outras afecções em menor frequência. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a presença de Acanthamoeba em áreas comunitárias de unidades acadêmicas e hospitalares, assim como determinar o risco potencial dos isolados. Amostras foram coletadas em dois hospitais e duas universidades do Rio Grande do Sul, Brasil. As amebas foram isoladas e caracterizadas utilizando métodos morfológicos, fisiológicos e genéticos. Além disso, a variação e a especificidade de proteases extracelulares foram determinadas por análise de zimogramas. A detecção e isolamento de amebas em amostras clínicas e ambientais envolve a amostragem e cultura em meio ágar não nutriente. Apesar de eficiente, este sistema requer diversas passagens visando eliminar contaminantes e não é apropriado para o isolamento de amebas individuais de amostras biodiversas. Para solucionar este problema foi desenvolvido um método alternativo que envolve amostragem, enriquecimento, indução de encistamento e micromanipulação de cistos e cultura direta em placas de ágar não nutriente. Utilizando os métodos convencional e alternativo, 429 amostras de áreas comunitárias de hospitais e universidades foram avaliadas mostrando alta prevalência de Acanthamoeba tanto em ambientes secos (13,77%) como úmidos (19,29%). A maior parte dos isolados (77,4%) foram classificados dentro do grupo II, o qual inclui a maioria das espécies patogênicas. Os isolados apresentaram tolerância à temperatura e pH, assim como resistência a desinfetantes, características que devem contribuir para a sobrevivência e proliferação de Acanthamoeba em ambientes fechados, aumentado o risco de contaminação das pessoas. Como as proteases extracelulares são consideradas um dos mais importantes fatores de patogenicidade das amebas de vida-livre, dez isolados foram avaliados quanto à atividade, padrão e especificidade de proteases. Análise com azocaseina mostrou variação significativa na atividade proteolítica volumétrica e específica dos distintos isolados, independente do “status” patogênico e não patogênico das espécies. Zimogramas em géis copolimerizados com gelatina mostraram três padrões de bandas em isolados de A. castellanii, e perfis particulares para as outras espécies. Todas as proteases secretadas por A. castellanii, A. pearcei e A. healyi foram caracterizadas como serino proteases, enquanto apenas cisteino e metaloproteases foram identificadas em A. astronyxis. Algumas proteases extracelulares apresentaram importante atividade sobre gelatina, fibrinogênio e γ-globulina, e podem estar implicadas na patogenicidade de Acanthamoeba e na resposta do hospedeiro. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-17T12:28:43Z No. of bitstreams: 1 Tese Janice Zanella.pdf: 1619712 bytes, checksum: 484e08f82e76e04aeafee41542e1e2ac (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-17T12:28:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Janice Zanella.pdf: 1619712 bytes, checksum: 484e08f82e76e04aeafee41542e1e2ac (MD5) / Protozoa of the genera Acanthamoeba are one of the most abundant free-living organisms. This microrganisms are found in a wide variety of natural habitats including water, soil, dust, vegetables, hospital units, ventilation areas and sewage. Some species of Acanthamoeba are considered opportunistic pathogens, and have been associated with cutaneous infections, keratitis, granulomatous amoebic encephalitis (GAE), among other less frequent diseases. The aim of this study was to evaluate the presence of Acanthamoeba in community areas of academic and hospital units, and to determine their potential risk. Samples were collected from two hospitals and two universities of Rio Grande do Sul, Brazil. Amoebas were isolated and characterized using morphological, physiological and genetic methods. Additionally, extracellular proteases variation and specificity was determined by zymogram analysis. The conventional detection and isolation of amoeba from clinical and environmental samples involves sampling and culture on non-nutrient Agar medium. Although efficient, this system requires several transfers in order to eliminate contaminants, and is not appropriate for the isolation of individual amoeba from samples with a biodiverse community. To solve this problem we developed an alternative method that involves sampling, enrichment, encystment induction, and direct cysts micromanipulation and culture on Agar plates. Using the conventional and alternative method, 429 samples from community areas of hospitals and universities were evaluated showing high prevalence of Acanthamoeba in both dry (13.77%) and humid (19.29%) environments. Most of this isolates (77.4%) were classified within group II, which includes the great majority of pathogenic species. Isolates exhibited temperature and pH tolerance, as well as resistance to disinfectants. These characteristics may contribute for the maintenance and proliferation of Acanthamoeba in the indoor environments, increasing the risk of people contamination. As extracellular proteases are considered one of the most important pathogenic factors of free-living amoeba, ten isolates were evaluated to determined proteases activity, patterns and specificity. Azocasein assays showed significant variation on the overall and specific protease activity in Acanthamoeba-conditioned media, independently of the pathogenic or nonpathogenic status of the species. The zymographic assays on gelatin co-polymerized gels showed three banding patterns for A. castellanii isolates, and specific profiles for other species. All the proteases secreted by A. castellanii, A. pearcei, and A. healyi were characterized as serine proteases, but only cisteine and metalloproteases were identified in A. astronyxis. Some extracellular proteases exhibited important activity on gelatin, fibrinogen and γ-globulin, and may be implicated in Acanthamoeba pathogenicity and host response.

Apesar da existência de estudos sobre a atividade antioxidante de vinhos, pouco se sabe sobre a atividade antioxidante de sucos de uva, sejam brancos e tintos, orgânicos e convencionais. Neste sentido, um dos objetivos deste estudo foi avaliar a atividade antioxidante, empregando testes in vitro, in vivo (modelo da levedura S. cervesiae) e ex-vivo, de sucos de uva brancos e tintos, produzidos a pa1tir das cultivares Niágara e Bordo, respectivamente, ambas Vitis labmsca, convencionais e orgânicos. Entre outros objetivos propostos para este trabalho foram avaliadas a atividade antimutagênica e mutagênica destes sucos citados acima, utilizando o organismo eucariótico da levedura S. cerevisiae. Com base nos resultados, observou-se que os sucos são fontes ricas em substâncias antioxidantes, principalmente os polifenóis, e para tanto apresentam atividade antioxidante e antimutagenica impmtante. Sendo assim, ao consumo de suco de uva pode ser atribuída uma altemativa para minimizar o aparecimento de doenças geradas por radicais livres. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2015-09-22T19:31:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Caroline Dani.pdf: 15511071 bytes, checksum: d04d0b5398e75ea8872b48f378deeb3f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-09-22T19:31:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Caroline Dani.pdf: 15511071 bytes, checksum: d04d0b5398e75ea8872b48f378deeb3f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES.

A videira (Vitis spp.) é uma das frutíferas mais cultivadas no mundo, tendo grande importância sócio-econômica no Brasil, principalmente na Região Serrana do Rio Grande do Sul. Inúmeras doenças acometem a videira afetando a produção vitícola e gerando prejuízos econômicos nas regiões produtoras. Uma destas doenças é o amarelo da videira, que tem associação com fitoplasmas. Esses procariotos, desprovidos de parede celular habitam e se multiplicam nos vasos do floema das plantas e na hemolinfa dos insetos vetores. No Brasil, há relatos da presença de fitoplasmas infectando videiras nos estados de São Paulo e Paraná. No Rio Grande do Sul, já foi verificado infectando macieiras, bem como a presença de seus possíveis insetos vetores, cigarrinhas do grupo Cicadellidae como parte da entomofauna vitícola. Nos últimos ciclos de produção, videiras apresentando sintomas de fitoplasmose vem sendo observadas nos vinhedos da Serra Gaúcha. O objetivo do presente estudo foi confirmar a presença de fitoplasmas infectando videiras na Região Serrana do Rio Grande do Sul, bem como classificar os fitoplasmas encontrados quanto ao grupo e subgrupo ao qual pertencem. Foram coletados, nos anos de 2014 e 2015, ramos e raízes de plantas que apresentavam sintomas como avermelhamento ou clorose das folhas em videiras tintas e brancas, respectivamente, enrolamento dos bordos foliares, superbrotamento de ramos, encurtamento de entrenós, necrose de nervuras e definhamento. O DNA total foi extraído e utilizado para detecção de fitoplasmas por meio de Nested-PCR com os primers R16 mF2/R16 R1, P/P7 ou P1/Tint na primeira reação e R16 F2n /R16 R2 na segunda reação. Para identificação molecular os produtos da segunda reação, fragmentos correspondentes à região 16S rDNA, foram sequenciados e as sequências geradas foram alinhadas entre si. Uma seqüência representativa dos fitoplasmas encontrados foi utilizada para análise de RFLP in silico, com 17 enzimas de restrição, e análise filogenética. Fitoplasmas foram verificados em quatro amostras oriundas de três videiras sintomáticas. As sequências alinhadas apresentavam 99% de similaridade com sequencias de fitoplasmas depositadas no GeneBank. A partir da avaliação dos perfis de restrição gerados pelo RFLP in silico e a análise filogenética, pode-se concluir que os fitoplasmas encontrados pertencem ao grupo 16SrIII, e ao subgrupo 16SrIII-J. Dessa forma, o presente estudo confirma a presença de fitoplasmas infectando videiras na Região Serrana do Rio Grande do Sul, indicando a ocorrência do amarelo da videira, doença até então não diagnosticada na região. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2016-02-22T12:41:30Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Ronize Rohr dos Santos.pdf: 2096147 bytes, checksum: 52d3fdc210d2e34e4fcc1976c0c4920e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-22T12:41:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Ronize Rohr dos Santos.pdf: 2096147 bytes, checksum: 52d3fdc210d2e34e4fcc1976c0c4920e (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico. / The grapevine is one of the most cultivated fruit trees in the world, having great socio-economic importance in Brazil, particularly in the highlands of Rio Grande do Sul. Numerous diseases affect grapevine worldwide, interfering in grape production and generating economic losses. One of these diseases is the grapevine yellow, whose etiologic agent is a phytoplasma. These wall-less prokaryotes live and multiply in phloem vessels of plants and hemolymph of insect vectors. In Brazil, there are reports of the presence of phytoplasma infecting grapevines in the states of São Paulo and Paraná. In Rio Grande do Sul has been found infecting apple trees, causing the apple rubbery wood disease, as well as the presence of their possible insect vectors in vineyards, leafhoppers of the Cicadellidae group. In recent cycles of production, grapevines showing typical symptoms of phytoplasma infection had been observed in the vineyards of the highlands of Rio Grande do Sul. This study aimed to confirm the presence of phytoplasma infecting grapevines in vineyards of the highlands of Rio Grande do Sul and rank the phytoplasmas on the group and subgroup to which they belong. Branches and roots of plants showing symptoms such as, reddening or yellowing of leaves on red or white cultivars respectively, leaf downwards rolling, proliferation of axillary buds resulting in a witches’ broom behavior, abnormal internodes elongation, phloem necrosis and stunting, were sampled during the years 2014 and 2015 vintage. Total DNA was extracted and used for phytoplasmas detection by nested PCR with primers mF2 R16/R16 R1, P1/P7 and P1/Tint in the first reaction and F2n R16/R16 R2 in the second reaction. For molecular identification the second reaction product, corresponding to the region 16S rDNA fragments were sequenced and generated sequences were aligned. A representative sequence of grapevine phytoplasma was used for RFLP analysis in silico, with 17 restriction enzymes, and phylogenetic analysis. Phytoplasmas were detected in four samples deriving from three symptomatic vines. The aligned sequences showed 99% similarity with phytoplasma sequences deposited in GeneBank. The RFLP patters and the phylogenetic analysis, allowed concluding that the phytoplasmas found belongs to the group16SrIII, and 16SrIII- J subgroup. Thus, this study confirms the presence of phytoplasma infecting grapevines in the highlands of Rio Grande do Sul, indicating the occurrence of grapevine yellow disease hitherto none diagnosed in the region.

O aumento da produção e consumo de espumante é notório, são muitos países promissores na elaboração deste produto e o Brasil tem se destacado internacionalmente por apresentar espumantes de excelente qualidade. Neste trabalho foi validada e estabelecida uma metodologia para avaliar a origem do CO2 dos vinhos espumantes, através da determinação do 13C do CO2, por espectrometria de massa de razão isotópica, visando o controle da adição ilegal de dióxido de carbono (CO2) industrial. A caracterização do δ13C foi baseada na diferença isotópica do ciclo fotossintético da planta que originou o produto, levando em consideração o processo de elaboração do espumante. Foram analisadas 5 amostras de CO2 industrial, 6 amostras de água gaseificada artificialmente, 39 amostras de vinhos tranquilos (vinho sem CO2 aparente) e 59 amostras de espumantes comerciais. Além disso, foi realizado um experimento com uma amostra de vinho base Chardonnay para verificar a variação isotópica do δ13C inicial (vinho base) e final (espumante). Observou-se que o δ13C do CO2 é seletivo quanto ao método de elaboração do vinho espumante, apresentando diferença entre os métodos tradicional, tanque e Asti (Moscatel). Foram encontrados valores mais negativos para δ13C do CO2 industrial diferenciando do CO2 natural dos vinhos tranquilos, permitindo estabelecer um limite de controle entre -25‰ e -20‰ para os espumantes Moscatéis. Através do experimento realizado, com vinho e espumante da mesma cultivar (Chardonnay), foi verificada uma variação isotópica de aproximadamente 45% do δ13C do CO2 inicial (-22,2‰) para o final (-12,3‰) da fermentação. Com estes parâmetros foi possível estimar o limite de controle de -14‰ para espumantes elaborados pelo método tradicional, sendo que, valores abaixo do estimado sugerem carbonatação. Seis amostras de espumantes comerciais das 59 analisadas apresentaram indícios de adulteração, com adição de CO2 industrial e 3 espumantes Moscatéis apresentaram adição de açúcar de cana além do permitido em lei no Brasil. Desta forma, concluiu-se que o método é confiável e preciso para determinação de 13C do CO2 e foi possível caracterizar uma metodologia para avaliar a origem do CO2, com limites estimados para espumantes elaborados pelo método tradicional e Moscatel. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2016-04-27T18:44:33Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Susiane Leonardelli.pdf: 1375478 bytes, checksum: eb73665124b3b7070b6b7645a479f8cc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-27T18:44:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Susiane Leonardelli.pdf: 1375478 bytes, checksum: eb73665124b3b7070b6b7645a479f8cc (MD5) Previous issue date: 2016-04-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES / The increasing in sparkling wine production and consumption is visible, many countries are promising to make this product and the Brazil has been highlighted internationally by presenting excellent quality sparkling wine. In this study a method was validated and established to evaluate the CO2 origin from the sparkling wines, through the CO2 δ13C determination, by isotope ratio mass spectrometry, aiming the control adulteration with industrial carbon dioxide (CO2). The δ13C characterization was based in the isotopic difference from the photosynthetic cycles of the plant that originated the product. Five industrial CO2, six carbonated water, 39 still wine (wine without apparent CO2) and 59 commercial sparkling wine were analyzed. Furthermore, an experiment with a Chardonnay base wine was realized to verify the δ13C isotopic variation from the beginning (base wine) and the final (sparkling wine) after the second fermentation. It was observed that the CO2 δ13C is selective for the sparkling wine production method, presenting difference among the traditional, tank and Asti (Moscatel) sparkling wine. Values more negative for CO2 δ13C from industrial CO2 were found, distinguishing the natural CO2 from still wine, allowing establish a limit of control between -25‰ to -20‰ for the Moscatel sparkling. Through the experiment realized, with the wine and sparkling wine from the same grape, could be verified that occurred CO2 δ13C isotopic variation of approximately 45% from the beginning (-22,2‰) to the final (-12,3‰) of the fermentation. With this parameters it was possible to estimate the control limit of -14‰ for the sparkling wine produced by traditional method, values bellow suggest carbonation. Six commercial sparkling wine showed evidence of adulteration, with industrial CO2 addition, and three Moscatéis sparkling presented results out of the highest control limit, in this Moscateis was found the sugar cane addition beyond that permitted by the Brasilian law. Therefore it was concluded that the method is appropriate and accurate for CO2 13C determination and it was possible to establish a method to evaluate the CO2 origin with limits estimates to Moscatéis and sparkling wine elaborated by the traditional method.

elevação da expectativa de vida e a diminuição no índice de natalidade têm como consequência o envelhecimento da população mundial, com aumento da incidência de doenças neurodegenerativas. Pessoas acometidas por esses males dispõem atualmente de limitados recursos terapêuticos. Estes muitas vezes são só paliativos, com baixa ou nula perspectiva quanto à reversão dos danos instalados. Por isso, o estudo de substâncias possivelmente neuroprotetoras, que apresentam potencial aplicação como novas drogas, tem sido alvo de pesquisas. Estudos realizados a partir das toxinas produzidas por lagartas da mariposa Lonomia obliqua, as quais têm causado inúmeros acidentes na região Sul do Brasil, identificaram uma proteína presente na hemolinfa com atividade antiapoptótica. A mesma demonstrou provável atuação na manutenção do potencial elétrico de membrana mitocondrial elevado, evitando a morte celular por mecanismo apoptótico. Desta forma, este estudo tem como objetivo avaliar o perfil proteico e efeito da hemolinfa bruta e fração cromatográfica sobre a viabilidade celular de cultura primária de neurônios hipocampais de ratos após a indução de apoptose. Para avaliação do perfil proteico em amostras da hemolinfa bruta e frações de 3 lotes de lagartas de origens distintas, foi utilizada a abordagem proteômica shotgun, semi-quantitativa. Foram identificadas 76 proteínas totais, sendo 71 na hemolinfa e 40 nas frações. Na avaliação do extrato bruto da hemolinfa predominaram proteínas do tipo antiviral, serino proteases, hemolinas e inibidores de proteases. Já nas frações avaliadas, foram identificadas proteínas dos grupos hemolinas, serino proteases e inibidores de proteases. Os lotes apresentaram diferenças quali e quantitativas nas proteínas identificadas entre si. Em relação à viabilidade celular, não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas (p<0,05) nas células tratadas com hemolinfa ou frações e induzidas ao dano oxidativo. Porém o tratamento das células com a fração na concentração de 0,05 e 0,1% (v/v) por 24 h foi capaz de manter a viabilidade celular significativamente maior em relação ao controle positivo (p<0,05 e p<0,01 respectivamente). Estes resultados podem contribuir na identificação de proteínas com potencial aplicação como neuroprotetoras. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2016-08-09T18:20:58Z No. of bitstreams: 2 Dissertacao Silviane Maggi.pdf: 179220 bytes, checksum: e4fa7fa341a705b1bc92316316dcda37 (MD5) Dissertacao Silviane Maggi.pdf: 3436577 bytes, checksum: 8560e84ef586763d3a72494cdbda34da (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-09T18:20:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao Silviane Maggi.pdf: 179220 bytes, checksum: e4fa7fa341a705b1bc92316316dcda37 (MD5) Dissertacao Silviane Maggi.pdf: 3436577 bytes, checksum: 8560e84ef586763d3a72494cdbda34da (MD5) Previous issue date: 2016-08-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Increased life expectancy and the decline in births results in aging population, with increasing of neurodegenerative diseases incidence. The therapeutic is limited, often only palliative, with low or no prospect damage reversal. Study of substances with potentially neuroprotective has been the focus of research. Toxic proteins of Lonomia obliqua caterpillars, which have caused several accidents in southern Brazil, were identified in the hemolymph with anti-apoptotic activity. This protein had demonstrated the maintaining of high electric potential of mitochondrial membrane, preventing cell death by apoptosis mechanism. This study aims the evaluation of the protein profile and effect of hemolymph and fraction on cell viability of rats primary cultured hippocampal neurons after induction of apoptosis. Semi-quantitative shotgun proteomics approach was used to evaluate the protein profile of 3 lots of different origin, 71 in hemolymph and 40 in fractions, in a total of 76 proteins. Antiviral protein predominated in crude extract of hemolymph, following by serine proteases, hemolines and protease inhibitors. In fractions were identified hemolines, serine proteases and protease inhibitors. No statistics differences were found (p<0.05) in the cell viability induced of oxidative damage, which were treated with hemolymph or fractions. However, the treatment with the fraction at concentration of 0.05 and 0.1% (v/v) for 24 hours, was able to maintain cell viability significantly higher than positive control (p<0.05 and p<0.01 respectively). These results may contribute to the identification of proteins with potential use as neuroprotective in degenerative conditions.

Cogumelos comestíveis de Pleurotus sajor-caju PS-2001 e Lentinula edodes LE-01 foram cultivados em substratos constituídos de serragem de Pinus sp ( para P. sajor-caju) ou Eucalyptus sp (para L. edodes) adicionados de resíduos de bagaços de Vitis labrusca e Malus domestica. Foram avaliados os parâmetros de produção produtividade (P), eficiência biológica e rendimento (R), atividade das enzimas (lacases, VAO, MnP and LiP), proteína solúvel total e a N-acetil glicosamina liberada do micélio como uma estimativa indireta do crescimento da biomassa. Os testes foram realizados com os bagaços dos dois frutos separadamente e em serragem de Pinus sp. (para P. sajor-caju) e Eucalyptus sp.. Foram utilizadas três combinações de substratos (S) e um controle, sendo eles, S1: somente bagaço; S2: 75% bagaço e 25% serragem (3:1); S3: 50% bagaço e 50% serragem (1:1); S4: 25% bagaço e 75% serragem (1:3) e S5: somente serragem (controle). Os resultados mostraram que os bagaços de V. labrusca e M. domestica e serragem de Pinus sp. foram adequados à produção de cogumelos de P. sajor-caju quando utilizados isolados ou em combinações, destacando-se a combinação S4 com V. labrusca, onde foram obtidos os melhores resultados de produtividade (P), eficiência biológica (EB) e rendimento (R), de 0,59 g.dia-1, 33% e 11%, respectivamente. O substrato que possibilitou melhor atividade de lacases (Lac) foi S1 com M. domestica (81.995 U.g-1 no 30º dia), bem como a maior atividade de lignina peroxidase (LiP - 26 U.g-1) e oxidases do álcool veratrílico (OAV - 20,9 U.g-1). A maior concentração de proteínas totais (PT - 2.803 U.g-1) foi obtida em S4 com V. labrusca. Em S3, com bagaço de M. domestica, P. sajor-caju apresentou maior atividade de manganês peroxidase (MnP - 636,4 U.g-1) e a maior biomassa foi obtida em S3 com V. labrusca (8,47 mg de N-acetilglicosamina/g de substrato no 24º dia). Para L. edodes somente V. labrusca (S4) mostrou produção de cogumelos com R de 12,8%, EB de 38,5% e P de 0,25 g.dia-1. Já o bagaço de M. domestica possibilitou a produção de cogumelos nas combinações S3, S4 e controle S5. S4 com V. labrusca possibilitou a maior atividade de Lac por L. edodes (2.932 U.g-1 no 4º dia de cultivo) e a mais alta atividade de LiP (2.73 U g-1). Como a maior biomassa foi obtida empregando o substrato S1 com V. labrusca no 16º dia (17,42 mg de N-acetilglicosamina/g de substrato) e em S4 ocorreu a mais alta atividade de lacases, isto mostra que o crescimento fúngico não está associado ao aumento na produção de Lac. S1 com V. labrusca também apresentou maiores níveis de OAV (25,94 U.g-1). Mais alta concentração de proteínas solúveis PT (6.858 U.g-1) foi obtida empregando S1 com M. domestica. MnP e peroxidases totais de L. edodes não foram detectadas nos substratos V. labrusca ou M. domestica. O bagaço de V. labrusca demonstrou ser mais adequado à atividade de Lac por L. edodes do que M. domestica. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2016-12-09T15:57:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Jane Maria Finimundi.pdf: 2306012 bytes, checksum: 9b748065880a8d067aa4ca4e2d374bd9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-09T15:57:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Jane Maria Finimundi.pdf: 2306012 bytes, checksum: 9b748065880a8d067aa4ca4e2d374bd9 (MD5) Previous issue date: 2016-12-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Edible mushrooms Pleurotus sajor-caju PS-2001 and Lentinula edodes LE-01 were cultivated on substrates constituted of sawdust of Pinus sp. (for P. sajor-caju) or Eucalyptus sp. ( for L. edodes) added of Vitis labrusca and Malus domestica bagasse residues. The production parameters evaluated were: productivity (P), biological efficiency (BE) and yield (Y)), activities of enzymes (laccases, VAO, MnP and LiP), total soluble proteins and the N-acetyl glucosamine liberated from mycelia as a indirect estimative of biomass growth. There were three combinations of substrates (S) and a control, S1: only bagasse residues, S2: 75% bagasse residues and 25% sawdust (3:1), S3: 50% bagasse residues and 50% sawdust (1 : 1), S4: 25% bagasse residues and 75% sawdust (1:3) and S5: sawdust only (control). The results showed that bagasse residues of V. labrusca and M. domestica and sawdust of Pinus sp. were suitable for mushroom production of P. sajor-caju when used alone or in combinations, especially S4 with V. labrusca, which obtained the best results in productivity (P), biological efficiency (BE) and yield (Y) of 0.59 g day-1, 33% and 11% respectively. The substrate which showed the highest laccase activity (Lac) was S1 with M. domestica (81,995 U g-1) and the highest activity of lignin peroxidase (LiP - 26 U g-1) and also veratryl alcohol oxidase (VAO - 20.9 U g-1). The highest concentration of total protein (TP - 2803 mg g-1 of dry matter) was obtained in S4 with V. labrusca. In S3, with bagasse residues of M. domestica, P. sajor-caju showed higher activity of manganese peroxidase (MnP - 636.4 U g-1). The highest biomass was obtained in S3 with V. labrusca (8.47 mg N-acetyl glucosamine/g substrate on the 24 th day). To L. edodes, only V. labrusca ( S4) showed mushrooms production with a R of 12.8%, EB of 38.5% and Y of 0.25 g day-1. Only the bagasse M. domestica enabled the production of mushrooms in S3, S4 and S5. S4 with V. labrusca also showed the highest activity of Lac (2932 U g-1 on day 4 of culture) and the highest activity of LiP (2.73 U g-1). As the highest biomass was obtained in S1 with V. labrusca on the 16th day (17.42 mg N-acetyl glucosamine / g substrate) and S4 showed highest laccases secretion, this can show that fungal growth is not associated with increased production of Lac. S1 with V. labrusca also showed higher levels of VAO (25.94 U g-1). Higher concentration of TP (6858 mg g-1) was obtained from S1 with M. domestica. MnP and total peroxidases of L. edodes were not detected in V. labrusca or M. domestica. V. labrusca was more appropriate for laccase activity of L. edodes than M. domestica.

Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-02-24T13:45:52Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Caroline Menti.pdf: 287733 bytes, checksum: 1e558da754c143ffdcf1b15be9ec54fc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-24T13:45:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Caroline Menti.pdf: 287733 bytes, checksum: 1e558da754c143ffdcf1b15be9ec54fc (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul, FAPERGS.