Estudos recentes têm avaliado a presença de polimorfismos do gene multidroga resistente 1 (MDR1), que codifica o transportador de membrana de efluxo chamado de P-glicoproteína, seu potencial papel na suscetibilidade das doenças inflamatórias intestinais (DII) e suas possíveis correlações com aspectos clínicos das DII. Dados conflitantes podem resultar da análise genética de populações distintas. Investigamos se os polimorfismos do gene MDR1 estão associados com as DII em população do sudeste do Brasil e suas possíveis correlações com fenótipos, atividade de doença, resposta ao tratamento e efeitos colaterais. Como métodos, a presente pesquisa trabalhou com 146 pacientes com Doença de Crohn (DC) e 90 com Retocolite Ulcerativa Idiopática (RCUI), que foram recrutados através de critérios diagnósticos estabelecidos. Os polimorfismos do MDR1 mais comumente descritos na literatura, C1236T, G2677T e C3435T, foram avaliados por PCR. As frequências genotípicas de pacientes com RCUI e DC foram analisadas na população de estudo. Associações de genótipo-fenótipo com características clínicas foram estabelecidas e riscos estimados para as mutações foram calculados. Nenhuma diferença significativa foi observada nas freqüências genotípicas para os polimorfismos G2677T/A e C3435T do MDR1 na DC ou na RCUI. O polimorfismo C1236T foi significativamente mais comum na DC do que na RCUI (p = 0,036). Na RCUI foram encontrados mais homens nos polimorfismos C1236T e G2677T no grupo de heterozigotos. Foram encontradas associações significativas entre o polimorfismo C3435T do gene MDR1 em pacientes com fenótipo estenosante na DC (OR: 3,16, p = 0,036), em oposição ao comportamento penetrante (OR: 0,31, p = 0,076). Na DC, associações positivas também foram encontradas entre o polimorfismo C3435T, à atividade moderada/severa da doença (OR: 3,54, p = 0,046), e à resistência / refratariedade ao corticosteróide (OR: 3,29, p = 0,043) nos homozigotos polimórficos. Nenhuma associação significativa foi encontrada entre os polimorfismos do MDR1 e categorias fenotípicas, atividade de doença ou resposta ao tratamento da RCUI. Em conclusão, os resultados do presente estudo sugerem que os polimorfismos do gene MDR1 poderiam estar implicados na susceptibilidade a DC e no seu fenótipo estenosante, como também estarem associados com uma resposta inadequada ao tratamento em um grupo de pacientes com DC. A forte relação com a DC suporta a existência de papéis adicionais para o MDR1 em mecanismos específicos subjacentes na patogênese da DC, como o controle da microbiota intestinal, mediação e regulação da fibrose. Além disso, compreender os efeitos de vários fármacos associados a estas variantes do MDR1 pode contribuir para a prescrição personalizada de regimes terapêuticos.

Colonic stromal cells provide critical structural support but also regulate immunity, tolerance and inflammatory responses in the mucosa. Substantial variability and plasticity of mucosal stromal cells has been reported but a paucity of distinct marker genes exist to identify distinct cell states. Here single-cell RNA-sequencing is used to document heterogeneity and subtype specific markers of individual colonic stromal cells in human and mouse. Marker-free transcriptional clustering of fibroblast-like cells derived from healthy human tissue reveals distinct populations corresponding to myofibroblasts and three transcriptionally and functionally dissimilar populations of fibroblasts. A SOX6 high fibroblast subset occupies a position adjacent to the epithelial basement membrane and expresses multiple epithelial morphogens including WNT5A and BMP2. Additional fibroblast subtypes show specific enrichment for chemokine signalling and prostaglandin E₂ synthesis respectively. In ulcerative colitis, substantial remodelling occurs with depletion of the SOX6 high population and emergence of an immune enriched population expressing genes associated with fibroblastic reticular cells including CCL19, CCL21 and IL33. A large murine dataset comprising over 7,000 colonic mesenchymal cells from an acute colitis model and matched healthy controls reveals strong preservation of the SOX6 high and myofibroblast transcriptional signatures. Unsupervised pseudotemporal ordering is used to relate fibroblast subsets to one another producing a branched developmental hierarchy that includes a potential progenitor population with mesothelial characteristics at its origin. This work provides a molecular basis for re-classification of colonic stromal cells and identifies pathological changes in these cells underpinning inflammation in UC.

IgA is the dominant antibody isotype found at mucosal surfaces during homeostasis. However, genetic variation in Fcγ receptors (FcγRs), a family of receptors that mediate immune cell activation by IgG, influences susceptibility to inflammatory bowel disease (IBD), suggesting that IgG may be important during gut inflammation. IBD is a chronic relapsing condition with two major subtypes, Crohn’s disease (CD) and ulcerative colitis (UC), both driven by aberrant immune responses to commensals. In the first part of this thesis, we sought to investigate anti-commensal IgG responses in patients with UC and to determine the mechanism by which local IgG might contribute to intestinal inflammation. We found that UC and murine dextran sodium sulfate (DSS)-induced colitis are associated with a significant increase in anti-commensal IgG and local enrichment of FcγR signalling pathway genes. The genes most robustly correlated with FCGR2A, an activating FcγR associated with UC susceptibility, were IL1B andCXCL8. Ex vivo stimulation of human and murine lamina propria mononuclear cells with IgG immune complexes (IC) resulted in an increase in these cytokines/chemokines. In vivo manipulation of the macrophage FcγR A/I ratio in transgenic mice determined IL-1β and Th17 cell induction. Finally, IL-1β blockade in mice with a high FcγR A/I ratio reduced IL-17 and IL-22-producing T cells and the severity of colitis. Our data reveal that commensal-specific IgG contributes to intestinal inflammation via FcγR-dependent, IL-1β-mediated Th17 activation. In this thesis, we have also addressed the interplay between IgG and group 3 innate lymphoid cells (ILC3s). ILC3s are closely related to natural killer cells, which are known to express FcγRs, and are characterised by their production of Th17 cytokines. Here, we have shown that ILC3s express FcγRs, that ICs drive IL-22 production and MHC class II expression by ILC3s, and FcγR signalling induces a transcriptional programme that reinforces ILC3 maintenance and functionality. These results represent a new paradigm for ILC activation, with direct regulation by the adaptive immune response. Finally, we have begun to address the role played by ILC3-derived cytokines in the regulation of local tissue-resident immune cells. We have demonstrated that ILC depletion significantly alters the activation state of intestinal macrophages, resulting in detrimental bacterial outgrowth following C. rodentium infection but protection from overwhelming DSS-induced inflammation. We have shown that GM-CSF promotes macrophage IL-1β and IL-23 production, which in turn act to reinforce ILC3-derived GM-CSF and IL-22 secretion in vitro, respectively. Therefore, ILC3s are essential coordinators of the local inflammatory response within the gut through activation and possible recruitment of immune cells, and their modulation may be beneficial in the treatment of IBD.

Bakgrund: Irritable Bowel Syndrome (IBS) är en funktionell störning i mag-tarmkanalen. Idag uppskattas det att cirka 5–20% av jordens befolkning lever med IBS. Orsaker till uppkomsten av IBS är ännu oklar, men det finns misstankar om att IBS tros bero på en komplicerad samverkan mellan psykiska och fysiska förhållanden. Det finns inget botemedel för IBS, däremot finns det olika behandlingar för symtomen. Diagnosen ställs utifrån symtom, vilket kan anses som svårt med tanke på att det inte finns någon sjuk vävnad i tarmen. Det finns en bristande kunskap om hur det är att leva med IBS från samhället och sjukvården. Syfte: Syftet var att belysa hur det är att leva med Irritable Bowel Syndrom.  Metod: En litteraturöversikt har tillämpats utifrån Fribergs (2017) metod. Följande datatabaser har använts: CINAHL Complete, SwePub, Medline och PubMed. Elva vetenskapliga artiklar har valts ut, både kvalitativa, kvantitativa samt mixad metod inkluderades till resultatet. Resultat: Under analysen växte två huvudteman fram, Påverkan på det dagliga livet samt Oförståelse och förståelse från omvärlden. Det förstnämnda temat innehåller underteman som Isolering, Uppoffring, Anpassning och Opålitlig kropp. Det andra huvudtemat berör underteman som Skam, Skuld, Stigma, Rädsla och Bemötande i sjukvården. Diskussion: Resultatet diskuterades utifrån Katie Erikssons hälsokors och begreppet lidande. De delar från resultatet som författarna ansåg som viktigast att belysa diskuterades i resultatdiskussionen. Det handlade om mötet med vården, olika anpassningar i det dagliga livet och stigmatisering.

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-29. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:25Z : No. of bitstreams: 1 000849094.pdf: 851216 bytes, checksum: ca7d30725d25c90cdb2c08d992a287a1 (MD5) / As doenças inflamatórias intestinais vêm se tornando um importante problema de saúde pública no Brasil e no mundo. Embora sua incidência seja relativamente baixa, estudos mostram que pessoas jovens, em idade produtiva são acometidas por essa patologia caracterizada por períodos de atividade e remissão, que altera de forma impactante a qualidade de vida. O tratamento clínico convencional compreende o uso de agentes imunossupressores e imunorreguladores. Destaca-se dentre esses tratamentos a terapia biológica, representada pela classe de fármacos anti fator de necrose tumoral (anti- TNF α). Objetivo: Correlacionar a resposta clínica à qualidade de vida dos pacientes com doença inflamatória tratados com terapia biológica. Métodos: Estudo prospectivo longitudinal realizado no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu/UNESP, no qual foram avaliados 35 pacientes com doença inflamatória intestinal em uso de terapia biológica, através de questionários de qualidade de vida Inflammatory Bowel Disease Questionnaire (IBDQ) e índices de atividade da Doença de Crohn (DC) CDAI e Escore de Mayo para Retocolite Ulcerativa e Classificação de Montreal doença nas semanas 0, 14,30,54. Resultados: Da população estudada 42,8% eram mulheres, 57,2% homens, 94,3% brancos, 17,1% eram tabagistas, sendo que 77,1% eram acometidos por Doença de Crohn (DC) e 22,8% Retocolite Ulcerativa (RCU). Desses pacientes 65,7% fizeram uso do Infliximabe e 34,3% do Adalimumabe. O tempo médio de doença foi de 6,1 anos (±5,0). Remissão clínica com melhora dos sintomas e cicatrização da mucosa intestinal foi alcançada por 80%dos pacientes. Manifestações perianais foram observadas em 44,4%%, necessitaram de internação 25,7%, cirurgia 25,7%, evoluiu para óbito 2,9%. Nos pacientes respondedores houve melhora estatisticamente significativa em todos os índices de qualidade de vida aplicados. Conclusão: O presente estudo apontou que a... / Inflammatory bowel diseases are becoming a major public health problem in Brazil and worldwide. Although their incidence is relatively low, studies show that young people of working age are affected by this disease characterized by periods of activity and remission amending of impactful quality of life. The conventional medical treatment includes the use of immunosuppressive and immunoregulatory agents.It stands out among these treatments biological therapy, represented by the class of tumor necrosis drugs (anti-TNF α). Objective: To correlate the clinical response to the quality of life of patients with inflammatory disease treated with biologic therapy. Methods: A prospective longitudinal study conducted at the Hospital of the Botucatu School of Medicine / UNESP, which evaluated 35 patients with inflammatory bowel disease using biological therapy through Inflammatory quality of life questionnaires Bowel Disease Questionnaire(IBDQ) and Crohn's disease activity index (DC), and CDAI score of Mayo for Ulcerative Colitis and Montreal Rating disease at weeks 0, 14,30,54 Results: 42,8% of the study population were female, 57,2% male, 94,3% white, 17,1% were smokers, and 77,1% were affected by Crohn's disease (CD) and 22.8% Colitis Colitis (UC). Of these patients 65, 7% made use of Infliximab and 34,3% of Adalimumab. The mean disease duration was 6,1 years (± 5,0). Clinical remission with symptom improvement and healing of the intestinal mucosa was achieved by 80% of patients. Perianal manifestations were observed in 44,4 %%, 25,7% required hospitalization, surgery 25,7%, 2,9% progressed to death. In responding patients showed a statistically significant improvement in all the applied life quality scores

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:33Z : No. of bitstreams: 1 000849473.pdf: 1007236 bytes, checksum: 23165695d73b8f8c1907f9aab1263525 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Introdução: Modificações na massa muscular esquelética e a deficiência de vitamina D têm sido relatadas frequentemente na literatura em pacientes com doenças inflamatórias intestinais (DII). Entretanto, a associação entre vitamina D e alterações musculares na DII são desconhecidas. O objetivo do presente estudo foi verificar se as modificações na massa muscular esquelética são explicadas pelo estado nutricional de vitamina D em pacientes com doenças inflamatórias intestinais. Métodos: Foi conduzido estudo observacional em que foram avaliados 73 pacientes ambulatoriais, com Doença de Crohn e Retocolite Ulcerativa da Faculdade de Medicina de Botucatu, Brasil, que tiveram diagnóstico confirmado da doença por meio dos parâmetros clínicos, endoscópicos e histológicos. A composição corporal total e segmentar foi estimada por absortiometria por raios-X de dupla energia. Para a definição de sarcopenia foram utilizados critérios do European Working Group on Sarcopenia in Older People. Amostras sanguíneas foram coletadas para avaliação das concentrações de hemoglobina, hematócrito, velocidade de hemossedimentação, proteína C-reativa, albumina e 25-hidroxivitamina D sérica (25(OH)D). Para avaliação da capacidade física foi realizado o teste de caminhada de 6 minutos, com base nas diretrizes estabelecidas pela American Thoracic Society (2002). A força isométrica de preensão manual dos indivíduos foi obtida da mão não dominante dos indivíduos por um dinamômetro hidráulico manual. O Questionário Internacional de Atividade Física foi utilizado para avaliar o nível de atividade física. O estado nutricional de vitamina D foi avaliado por meio de recordatório alimentar de 24horas e questionário de exposição solar. Todos os participantes foram questionados quanto ao consumo de bebidas alcoólicas e fumo. Os resultados foram expressos em média ± DP ou mediana e quartil 1 e quartil 3 ou... / Background: Changes in skeletal muscle mass and vitamin D deficiency have been frequently reported in the literature in patients with inflammatory bowel disease. However, the association between vitamin D and muscle changes in patients with inflammatory bowel diaseases is unclear. This study aimed to verify if changes in skeletal muscle mass are explained by nutritional status of vitamin D in patients with inflammatory bowel diseases. Methods: This observational study assessed 73 outpatients with Crohn's Disease and Ulcerative Colitis from Botucatu Medical School, Brazil, who have confirmed the diagnosis of their disease trough the clinical, endoscopic and histological parameters. Whole body and regional body composition was obtained by dual-energy X-ray absorptiometry. Criteria of European Working Group on Sarcopenia in Older People were used to define sarcopenia. Peripheral blood samples were obtained for measurements of hemoglobin, hematocrit, erythrocyte sedimentation rate, C-reactive protein, albumin, and serum 25-hydroxyvitamin D (25(OH)D). The 6-minute walk test was performed for evaluation of physical capacity, based on the guidelines established by the American Thoracic Society (2002). Grip strength of the subject's non-dominant hand was assessed with a hydraulic hand dynamometer, which measures isometric grip force. The International Physical Activity Questionnaire was used to evaluate the physical activity. The nutritional status of vitamin D was assessed by 24hour dietary recall and sun exposure questionnaire. All participants were asked about their alcohol intake and smoking. Results were expressed as mean ± SD or median with quartile 1 and quartile 3 ranges or percentage. We used the Fisher exact test for the associations between categorical variables, the Student t-test or Mann-Whitney test for differences between patients with sarcopenia or not and Multiple Logistic Regression. We adopted a significance level of 5% ...

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:54Z : No. of bitstreams: 1 000849217_20170423.pdf: 276928 bytes, checksum: 79636ff7a59e31c6eeddad8e4996b224 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-04-24T11:16:43Z: 000849217_20170423.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-04-24T11:17:28Z : No. of bitstreams: 1 000849217.pdf: 1416249 bytes, checksum: 648c7aabd476cce027867a351856701e (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A retocolite ulcerativa e a Doença de Crohn, as principais formas de Doença Inflamatória Intestinal (DII), são doenças crônicas do intestino que causam dores abdominais, diarreia intensa e hemorragias. Até o momento, os tratamentos farmacológicos disponíveis, que incluem aminosalicilatos, glicocorticóides, imunossupressores e a terapia biológica com anticorpos monoclonais, não promovem a cura definitiva da doença e estão associados ao desenvolvimento de diversos efeitos colaterais. Recentes estudos mostraram que o derivado cumarínico 4-metilesculetina (4-ME) possui efeitos protetores no processo inflamatório colônico induzido por ácido 2,4,6-trinitrobenzenosulfônico (TNBS), os quais foram associados às suas atividades anti-inflamatória e antioxidante. Considerando-se que a encapsulação de fármacos e produtos ativos em nano e micropartículas poderiam aumentar seu tempo de retenção no cólon com consequente aumento da resposta farmacológica, os objetivos do presente trabalho foram elaborar nano e micropartículas de quitosana contendo 4-ME e avaliar se estas formulações melhoram a resposta anti-inflamatória intestinal da 4-ME em comparação à sua administração na forma livre. Para tal, foi realizada a padronização de micro e nanopartículas de quitosana contendo 4-ME, as quais foram administradas, por via oral em ratos, na dose de 5 mg/Kg e seus efeitos comparados com a administração da mesma dose de 4-ME na forma livre, usando o modelo de inflamação colônica induzida por TNBS em ratos. Neste contexto, foram avaliados parâmetros macroscópicos (escore da lesão, extensão da lesão, relação peso/comprimento do cólon e aderência) e bioquímicos (atividade da mieloperoxidase e da fosfatase alcalina e níveis colônicos de glutationa total). Os tratamentos com micro e nanopartículas não foram capazes de diminuir a inflamação induzidas pelo TNBS; contudo a administração de 4-ME em sua forma livre... / Ulcerative colitis and Crohn's disease, the main forms of Inflammatory Bowel Disease (IBD), are chronic diseases which cause abdominal pain, diarrhea and bleeding. Nowadays, the available treatments, such as aminosalicylates, glucocorticoids, immunosuppressants and biological therapy with monoclonal antibodies do not promote a definitive cure; furthermore, they are associated with several side effects. Recent studies showed protective effects of coumarin derivative 4-methylesculetin (4-ME) against colonic inflammation induced by 2,4,6-trinitrobenzenesulphonic acid (TNBS), which was associated to the anti-inflammatory and antioxidant properties of 4-ME. Since encapsulation of drugs and active products into nano and microparticles are able to increase the retention time in the colon and improve pharmacology activity; the present study aims to develop chitosan nano and microparticles containing 4-ME, and to evaluate if these pharmaceutical formulations improve intestinal anti-inflammatory activity 4-ME when compared to its free form. For this, nano and microparticles of chitosan with 4-ME encapsulated were standardized, which were administered, by oral route, at the dose of 5 mg/Kg, and its effects compared with same dose of free form of 4-ME, using the TNBS model of colonic inflammation in rats. In this context, macroscopic (score, lesion extension, weight/length ratio and adherence) and biochemical (myeloperoxidase and alkaline phosphatase activities and total glutathione content) parameters were analyzed. Treatments with nano and microparticles were not able to minimize TNBS-induced inflammation; however, free form 4-ME demonstrated anti-inflammatory activity evidenced by the significant inhibition of alkaline phosphatase activity and counteraction of glutathione depletion. In conclusion, 4-ME associated with nano and microparticles of chitosan did not represent an appropriated pharmacologic strategy for the controlled delivery of 4-ME ... / CNPq: 130554/2013-8 / FAPESP: 11/50512-2

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:13:52Z : No. of bitstreams: 1 chagas_as_me_botib_parcial.pdf: 147304 bytes, checksum: f84c21b758e3dbb707fc30cee5ecea6e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-04T11:39:28Z: chagas_as_me_botib_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-04T11:40:13Z : No. of bitstreams: 1 000722900.pdf: 359844 bytes, checksum: 2318a21c5548347f5c7493251309fe9e (MD5) / A Doença Inflamatória Intestinal (DII) é uma doença com etiologia desconhecida e sem terapêutica curativa disponível, englobando, fundamentalmente, duas doenças distintas: a Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU), ambas caracterizadas por uma inflamação crônica do intestino, com períodos de exacerbação seguidos de intervalos prolongados com remissão dos sintomas, cujo tratamento com os fármacos disponíveis apresentam sérios efeitos colaterais. Portanto, o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento que combinem eficácia e segurança é uma importante meta na terapia da DII. A espécie Baccharis dracunculifolia DC (família Asteraceae) é uma planta medicinal brasileira usada popularmente contra úlceras, inflamação e problemas hepáticos e tem sido amplamente reconhecida como a principal fonte botânica da resina e dos constituintes químicos da própolis brasileira (própolis verde), a qual tem sido incorporada em alimentos e bebidas para a melhora da saúde. Estudos mostram que as inúmeras atividades biológicas da própolis verde decorrem exclusivamente dos constituintes presentes em Baccharis dracunculifolia, a qual possui várias atividades biológicas, especialmente agindo como imunomoduladora, anti-inflamatória e anti-inflamatória intestinal, sequestradora de radicais livres, antiúlcera e analgésica. A atividade anti-inflamatória intestinal está associada à presença de diferentes ácidos fenólicos presentes na espécie, tais como ácidos cafeico, p-cumárico, 3-prenil-p-cumárico (drupanina), 3,5-diprenil-p-cumárico (artepilina C), bacarina e metil-éster de aromadendrina. Estes compostos possuem íntima associação biossintética com os derivados cumarínicos também ativos na doença inflamatória intestinal, justamente por fazerem parte de sua rota biossintética. Com base nestas... / The Inflammatory Bowel Disease (IBD) is a disease with unknown etiology and no curative treatment available, encompassing essentially two distinct diseases: Crohn's disease (CD) and ulcerative colitis (UC), both characterized by chronic inflammation of the intestine, with periods of exacerbation followed by long intervals with symptom remission whose treatment with available drugs have serious side effects. Therefore, the development of new treatment strategies that combine effectiveness and safety is an important goal in the treatment of IBD. The species Baccharis dracunculifolia DC (Asteraceae) is a Brazilian medicinal plant popularly used against ulcers, inflammation and liver problems and has been widely recognized as the main botanical source of the resin and the chemical constituents of Brazilian propolis (green-propolis), which has been incorporated in foods and beverages to improve health. Studies show that the numerous biological activities of green propolis derived exclusively from the constituents present in Baccharis dracunculifolia, which has several biological activities, especially acting as immunomodulatory, anti-inflammatory and anti-inflammatory intestinal free radical scavenging, antiulcer and analgesic. The intestinal anti-inflammatory activity is associated with the presence of different phenolic acids in this specie, such as caffeic acid, p-coumaric acid, 3-prenyl-p-coumaric (drupanina), 3,5-diprenyl-p-coumaric acid (C artepilina ) bacarina and methyl ester aromadendrin. These compounds have a close association with the biosynthetic coumarin derivatives also active in inflammatory bowel disease, just by being part of their biosynthetic pathway. Based on this information, the aim of this study was to identify potential pharmacological targets of anti-inflammatory action of the extract... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-10-13Bitstream added on 2014-06-13T20:03:06Z : No. of bitstreams: 1 luchini_ac_dr_botib.pdf: 2243081 bytes, checksum: a1465c64a552ee7a141136b663467ceb (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As cumarinas representam uma importante classe de compostos fenólicos com inúmeras propriedades farmacológicas que incluem inibição da peroxidação lipídica, da geração de ânion superóxido dependente de neutrófilos, da citotoxicidade induzida por hidroperóxido de ácido linoleíco, da atividade de lipooxigenases e ciclooxigenases, além de agirem como agentes imunossupressores e antiinflamatórios. Todas estas propriedades são essenciais para que um produto seja potencialmente ativo para o tratamento das doenças inflamatórias intestinais (DII). A sulfassalazina (primeira opção terapêutica no tratamento das DII) possui vários efeitos colaterais, especialmente quando usada em altas doses ou em períodos longos de tratamento. O objetivo do presente trabalho foi avaliar se cumarina e 4-hidroxi-cumarina possuem efeitos preventivos e/ou curativos no modelo de colite induzida por ácido trinitrobenzenosulfônico (TNBS) em ratos e também se as associações de cumarina ou 4-hidroxi-cumarina com doses menores de sulfassalazina produzem efeitos antiinflamatórios com menor incidência de efeitos colaterais decorrentes da administração da sulfassalazina. Além disso, foram feitos estudos complementares para verificar se tais cumarinas modulam a produção de citocinas próinflamatórias em cultivos celulares in vitro e ex vivo. Este estudo testou a atividade antiinflamatória dos compostos-testes cumarina (2,5 a 50mg/Kg) e 4-hidroxicumarina (5 a 50mg/Kg) e das associações de cumarina com a sulfassalazina (C5+S5; C5+S15 e C5+S25) ou da 4-hidroxi-cumarina com a sulfassalazina (4-OHC25+S5, 4-OHC25+S15 e 4-OHC25+S25) em duas condições experimentais distintas: quando a mucosa colônica está intacta (efeito preventivo); quando a mucosa colônica está afetada por um processo inflamatório intestinal (efeito curativo) assim como preventivo da recidiva do processo inflamatório... / Coumarins comprise an important class of phenolic compounds with many pharmacological properties that includes inhibition of membrane lipid peroxidation, inhibition on neutrophil-dependent superoxide anion generation, inhibition on the linoleic acid hydroperoxide-induced cytotoxicity, and inhibition on cyclooxygenase and lipoxygenase activities, which could result in antiinflammatory and immunosuppressant effect. Those are some desired features for a candidate compound in the treatment of inflammatory bowel diseases (IBD). On the other hand, the IBD are life persisting diseases with unpredictable episodic reactivations and difficult treatment in severe cases. Sulfasalazine, the first choice drug in the treatment of mild to moderately active IBD cases, presents serious side effects when used in high doses or in long-term treatment. Thus, the aim of this study was to evaluate the effects of coumarin and 4-hydroxy-coumarin in rat experimental intestinal inflammation. Additionally, we evaluated the possibility of coumarins association to sulfasalazine in rat intestinal inflammatory conditions. For this purpose, the antiinflammatory activity of test compounds, coumarin (2.5 to 50mg/kg) and 4-hydroxy-coumarin (5 to 50mg/kg) and associations of coumarin with sulfasalazine (C5 plus S5, C5 plus S15, C5 plus S25) or 4-hydroxy-coumarin with sulfasalazine (4-OHC25 plus S5, 4-OHC25 plus S15 and 4-OHC25 plus S25) were tested in the model of trinitrobenzenesulphonic acid (TNBS) induced rat colitis in two different experimental conditions: when the colonic mucosa is intact (preventive effect), and when a previous inflammatory damage is caused to the colonic mucosa (curative effect), additionally to a reactivation of the inflammatory process (relapse prevention). The colonic damage was evaluated macroscopically, histologically and biochemically. For cell cultures evaluation of cytokine ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2018-07-27T18:26:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-03. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:30:36Z : No. of bitstreams: 1 000873411.pdf: 2339919 bytes, checksum: 7129156182cf0eb33c4a8fd25783f307 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O metotrexato (MTX) é um fármaco com solubilidade pH dependente, utilizado no tratamento de doenças do trato gastrointestinal, como a doença de Crohn, retocolite ulcerativa e carcinomas colorretal. O desenvolvimento de micro/nanossuspensões podem ser uma estratégia promissora para incorporação de fármacos que possuem solubilidade pH dependente, oferecendo vantagens como a redução do tamanho da partícula do fármaco que pode levar ao aumento da taxa de dissolução e da permeabilidade. Adicionalmente, polímeros estímulo-responsivos podem sofrer transição de fase sol-gel in situ, promovendo a mucoadesão e uma maior retenção do sistema no local de ação. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi desenvolver micro/nanossuspensões contendo polímeros mucoadesivos para liberação cólon-específica do MTX. As partículas foram obtidas pelo método Bottom-up, utilizando reações de ácido-base e estabilizadas com hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) e poloxâmero 407 (P407), através de agitação em Ultra-turrax ou Sonicador. Foram incorporados polímeros derivados do ácido poliacrílico como, Carbopol® ETD 2020 e Ultrez 10NF, poloxâmero 407 e goma gelana, pois estes polímeros atuam por diferentes mecanismos na mucoadesão como pH, temperatura e concentração iônica. A caracterização fíquico-química das micro/nanossuspensões foi realizada por espalhamento de luz, medida do potencial zeta, microscopia eletrônica de varredura (MEV), análise de textura (TPA) e ensaios de mucoadesão ex vivo. No método Bottom-up foram otimizadas condições para alcançar a solubilização e principalmente a precipitação do fármaco. Essa variação nas condições de precipitação, demonstrou que o aumento da proporção de ácido, permite modular o tamanho da partícula para a escala micro/nanométrica, na ausência... / The methotrexate (MTX) is pH-dependent solubility drug used in the treatment of gastrintestinal diseases, such as Crohn's disease, ulcerative colitis and colorectal carcinomas. The micro/nanosuspensions development is a promising strategy to incorporate this type of drug, since it offers important advantages, such as particle size reducing of drug, which may lead to the increase of the dissolution and permeability rates of the drug. Additionaly, responsive-polymers can undergo in situ sol-gel phase transition, promoting mucoadhesion process followed by a greater retention of system in the action site. In this sense, the aim of this work was to develop micro and nanosuspensions associated to mucoadhesive polymers for colon specific release of MTX. The particles were obtained from Bottom-up method by acid-base reactions, employing the Ultra- Turrax or Sonicator and hydroxypropylmethylcellulose (HPMC) and poloxamer 407 (P407) as stabilizing. Polyacrylic acid (PAA), poloxamer 407 and gellan gum, which have different mucoadhesion mechanisms (pH, temperature and ionic concentration) were incorporated. The physic-chemical characterization of micro/nanosuspensions was realized by light scattering, measurement of zeta potential, scanning electron microscopy (SEM), texture profile analysis (TPA) and ex vivo mucoadhesion test. In the bottom-up method, the conditions were optimized to reach the solubilization and, mainly, the precipitation of drug. This variation in precipitation conditions showed that increasing the acid proportion is possible to modulate the particle size to the micro/nano-range, in the absence of stabilizer. The nanosuspensions exhibited pH above 5.0, while the microsuspensions below 4.0. For microsuspensions, analysis of the results showed that depending on the stirring process and type of stabilizer used it was possible ...