Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-23Bitstream added on 2014-06-13T18:48:23Z : No. of bitstreams: 1 figueiroa_fc_dr_botfmvz.pdf: 868542 bytes, checksum: 76abbb295655fa17bd152e2d78e90a3b (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Por ser a maior causa de morte entre as fêmeas caninas, o câncer de mama desperta o interesse da comunidade científica, pois sua apresentação e evolução clínica são muito semelhantes aos casos de câncer de mama na mulher. No intuito de permitir a continuação dos estudos comparativos entre os tumores de cadelas e os das mulheres, foram realizadas as marcações imunoistoquímicas para receptores de estrógeno (RE), HER-2, p63 e CK5, a fim de classificar os tumores de acordo com sua expressão, nos diferentes subtipos. Além disso, foram utilizados os marcadores para CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 por meio da imunoistoquímica em lâminas confeccionadas pela técnica de Tissue microarray (TMA) para avaliar a presença de células-tronco tumorais. A partir dos resultados da imunoistoquímica os tumores foram classificados em Luminal A (RE+ e HER-2- ) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), Superexpressão de HER-2 (RE- e HER-2 +) (14,29%) e Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Dos 112 tumores, 75 foram positivos para CD10 (66,96%), 81 positivos para BMI-1 (72,32%), para o CD44 apenas seis tumores (5,35%) foram positivos, 48 tumores positivos para CD24 (42,86%), 24 positivos para ESA (21,43%) e 23 tumores foram positivos para MUC-1 (20,54%). Desses tumores, quatro apresentaram o imunofenótipo CD44+CD24-, representando 3,57% dos tumores. Ao correlacionar as marcações para células-tronco tumorais com os diferentes subtipos, alguns marcadores apresentaram diferença estatística, sugerindo que os tumores com imunofenótipo mais agressivo (Superexpressão de HER-2 e Basal) foram positivos para a marcação de células-tronco tumorais. Além disso, houve uma maior marcação das células-tronco tumorais para os carcinomas classificados em complexo, o que desafia os dados de literatura, já que esses tumores eram considerados com melhor prognóstico do que os carcinomas simples. São necessários novos estudos... / For being the biggest cause of death among the canine females, mammary cancer arises the interest of the scientific community; therefore its presentation and clinical outcome are very similar to the cases of breast cancer in woman. In intention to allow the following of comparative studies between the tumors of dogs and women, immunohistochemical markers were performed to estrogen receptors (RE), HER-2, p63 e CK5, to classify the tumors according to their expression, in different subtypes. Beyond that, markers to CD10, BMI-1, CD44, CD24, ESA e MUC-1 were used through the immunohistochemical in slides made by Tissue microarray technique (TMA) to evaluate the presence of cancer stem cells. From the immunohistochemical results, tumors were classified in Luminal A (RE+ e HER-2-) (25,89%), Luminal B (RE+ e HER-2+) (33,93%), HER-2 Overexpression (RE- e HER-2 +) (14,29%) and Basal (RE-, HER-2- e p63 e/ou CK5 +) (25,89%). Among 112 tumors, 75 were positive to CD10 (66,96%), 81 positive to BMI-1 (72,32), to CD44 only six tumors (5,35%) were positive, 48 positive tumors to CD24 (42,86%), 24 positive to ESA (21,43%) and 23 tumors were positive to MUC-1 (20,54%). In these tumors, four presents CD44+CD24- immunophenotypes, performing 3,57% of tumors. To correlate cancer stem cells markers with the distinct subtypes, some markers presented statistical differences, suggesting that more aggressive tumors immunophenotypes (HER-2 Overexpression and Basal) were positive to cancer stem cells markers. Besides, there were higher cancer stem cell markers in complex carcinomas, which challenge literature data because this kind of tumor was considered with better prognosis when compared with simple carcinomas. More studies are necessary with new samples to confront this research results’ and determinate the more indicated markers. Still, the female dog must be considered to be used as experimental model for breast cancer ...

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-06Bitstream added on 2015-04-09T12:47:47Z : No. of bitstreams: 1 000814334.pdf: 366656 bytes, checksum: 2e7a4dc11292190294b6fa3b7e78b66a (MD5) / Considerando a relevância do linfoma canino na rotina veterinária e o curto período de sobrevida alcançado com os protocolos quimioterápicos empregados, novas alternativas de tratamento estão sendo estudadas. Nas últimas décadas, diversos estudos foram realizados correlacionando o desenvolvimento e progressão de alguns tipos de neoplasias com a superprodução de prostaglandinas nas células tumorais e inflamatórias locais, em consequência à maior produção de COX-2, que leva à proliferação celular, à supressão da apoptose, à indução da angiogênese e da metástase, ações estas que contam para sua função oncogênica. Uma das estratégias para a redução das concentrações de PGE2 é a utilização de inibidores de COX-2 no tratamento antineoplásico. No presente estudo foram avaliados 20 cães com diagnóstico de linfoma multicêntrico, divididos em dois grupos. Os animais do grupo 1 foram tratados com o protocolo quimioterápico de Madson-Wisconsin convencional, e os do grupo 2, com o protocolo modificado pela substituição da prednisona por um inibidor seletivo de COX-2. Antes da primeira (T1) e da quinta (T2) sessão de quimioterapia, foram realizados hemograma e dosagem de PGE2 plasmática por ELISA. Observou-se um maior número de animais fêmeas, das raças Rottweiler e sem raça definida, de meia idade, que apresentaram com maior freqüência, o linfoma multicêntrico em estádio IVa, de origem celular B, e difuso de grandes células. No leucograma, notou-se em alguns animais, no momento do diagnóstico, a presença de leucocitose por neutrofilia ou por linfocitose, e após o primeiro ciclo de quimioterapia, sete casos de linfopenia. Os cães com remissão dos sinais clínicos após o primeiro ciclo de quimioterapia, apresentam menores concentrações de PGE2 plasmática quando comparados com aqueles sem remissão. A associação do tratamento quimioterápico com um inibidor de COX-2 foi capaz de reduzir ... / Considering the relevance of canine lymphoma in veterinary medicine and the short survival achieved with chemotherapy protocols employed, new treatment options are being studied. In the last decades, various studies have been conducted to correlate the development and progression of certain types of cancer with the overproduction of prostaglandins in tumor sites and inflammatory cells, due to increased production of COX-2, leading to cell proliferation, the suppression of apoptosis , the induction of angiogenesis and metastasis, these actions that count toward their oncogenic function. One strategy for reducing the levels of PGE2 is the use of COX-2 in anticancer treatment. In this study 20 dogs with diagnosis of multicentric lymphoma, divided in two groups were evaluated. Animals in group 1 were treated with the standard Madison-Wisconsin chemotherapy protocol, and group 2, with this protocol modified by the replacement of prednisone for a selective inhibitor of COX-2. Before the first (T1) and fifth (T2) chemo, blood samples and measurement of plasma PGE2 by ELISA were performed. We observed a higher number of female animals, Rottweiler breeds and mixed breed, middle age animals, who presented with greater frequency, multicentric lymphoma in stage IVa, B cell origin, and diffuse large cell. Leukocytosis with neutrophilia or lymphocytosis was observed for some animals at the moment of diagnosis, and after the first cycle of chemotherapy, seven cases of lymphopenia. Dogs with clinical signs of remission after the first cycle of chemotherapy show lower plasma PGE2 when compared with those without remission. The association of chemotherapy treatment with a COX-2 was able to reduce concentrations of PGE2 in 50% of patients, while only 10% of those in group 1 decreased. However, it was not possible to confirme the role of PGE2 as a marker of prognosis and survival time for dogs with lymphoma

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-28Bitstream added on 2015-04-09T12:47:46Z : No. of bitstreams: 1 000813877.pdf: 1968360 bytes, checksum: ba893fb51a41ad4d26fafd388f7a43d2 (MD5) / A via PI3K/AKT/mTOR está relacionada com a proliferação, síntese proteica, sobrevivência e motilidade das células. Mutações nesta via tem sido associadas com o processo carcinogênico de diferentes tipos tumorais. Atualmente, inibidores específicos de proteínas como a PI3K, AKT, mTOR, vem sendo testados com o intuito de otimizar a terapia antitumoral em seres humanos e animais. Além de potenciais alvos terapêuticos, o aumento da expressão de algumas destas proteínas tem sido associado a tumores de pior prognóstico em seres humanos. Em cães, o mastocitoma (MCT) é um tumor cutâneo extremamente comum, de comportamento bastante variável e etiologia ainda não esclarecida. Diante disso, o objetivo deste estudo, foi avaliar a imunomarcação dos componentes proteicos da via PI3K/AKT/mTOR, por meio da técnica de imuno-histoquímica e em um segundo momento, associar esses resultados com os parâmetros clínicos dos pacientes, com as características morfológicas e biológicas dos tumores e com o tempo de sobrevida dos pacientes, visando determinar possíveis marcadores prognósticos para esta neoplasia. Para tal 46 MCTs caninos foram utilizados. Todos os tumores apresentaram positividade na avaliação imuno-histoquímica para as proteínas analisadas. As proteínas p-AKT Thr 308 e p-S6K1 apresentaram forte intensidade de imunomarcação, quando comparadas a parâmetros associados a piores prognósticos. Esses resultados indicam que a forte intensidade de imunomarcação de p- AKT Thr 308 e p-S6K1 está relacionada a um pior prognóstico para os cães acometidos pelo MCT cutâneo / The PI3K/AKT/mTOR pathway is related to proliferation, protein synthesis, cell motility and survival. Mutations in this pathway have been associated with the carcinogenic process in diferent tumor types. Currently, specific inhibitors of some proteins such as PI3K, AKT, mTOR, are being tested in order to optimize antitumor therapy in humans and animals. Apart from potential therapeutic targets, increased in immunostaining of some of these proteins have been associated with poorer prognostic in humans tumors. In dogs, mast cell tumor (MCT) is an extremely common skin tumor, which presents a highly variable behavior and unclear etiology. Therefore, the aim of this study was to evaluate the immunostaining of the protein components of PI3K/AKT/mTOR pathway, through the technique of immunohistochemistry, and in a second stage, correlate this results with clinical parameters of patients, with morphological and biological tumor characteristics and the survival time of patients to determine possible prognostic markers for this disease. For this, 46 canine MCTs were used. All tumors were positive in immunohistochemical analysis for the proteins analyzed. Proteins p-AKT Thr 308 and p-S6K1 showed increases in the intensity of immunostaining compared to parameters associated with worse prognosis. These results suggest that the increase in the intensity of immunostaining of p-AKT Thr 308 and p-S6K1 are related to a worse prognosis for dogs affected by cutaneous MCT

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-05Bitstream added on 2015-04-09T12:47:45Z : No. of bitstreams: 1 000814294_20150610.pdf: 154779 bytes, checksum: 51dd92acc01e4cdcca6fb139c344baff (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-12T11:19:03Z: 000814294_20150610.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-12T11:19:38Z : No. of bitstreams: 1 000814294.pdf: 481135 bytes, checksum: 6396c52973d54e22945046da7a3983f0 (MD5) / Em Medicina Veterinária o linfoma é uma neoplasia caracterizada por proliferação clonal de linfócitos malignos, sendo uma das mais comuns em cães. Há evidências que as Tregs inibem a função efetora contra tumores, resultando em disfunção de células T em humanos e cães com câncer. O aumento da expressão da enzima ciclooxigenase-2 (COX-2) pelas células do tumor e células inflamatórias locais, estimula o desenvolvimento das Tregs. Deste modo, o tratamento com inibidores de COX-2, como os anti-inflamatórios não esteroidais é mais uma estratégia para a supressão das Tregs. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar quantitativamente, por intermédio da citometria de fluxo, as Tregs em cães com linfoma, submetidos ao protocolo quimioterápico CHOP, associado ou não a um inibidor de COX-2 (Firocoxib). Foram utilizados 12 cães controles (hígidos), 12 cães com linfoma tratados com o protocolo CHOP e 12 cães com linfoma, tratados com o CHOP+Firocoxib. As Tregs formam avaliadas por citometria de fluxo, no momento do diagnóstico, após a indução da quimioterapia (5ª semana) e ao término do protocolo (20ª semana). Os resultados mostraram que os cães com linfoma apresentaram porcentagens maiores de Tregs (17,08±1,62) quando comparados ao grupo controle (5,67±1,62) (p<0,0001). Além disso, no grupo linfoma teve uma diminuição das porcentagens de Tregs ao final do protocolo quimioterápico, nos grupos tratados com o protocolo CHOP tradicional (GT1) (8,648±1,736) e no grupo tratado com CHOP associado a um firocoxib (GT2) (5,903±1,126) (p<0,0001). E que entre os grupos, GT1 (20,66±2,487) e GT2 (12,79±0,7673), apenas no momento do diagnóstico (M0), foi estatisticamente diferente (p<0,0114). Conclui-se que cães com linfoma multicêntrico possui um aumento das Tregs, e durante o protocolo quimioterápico, associado ou não a um firocoxib, essas células diminuem significativamente / In Veterinary Medicine lymphoma is a neoplasm characterized by clonal proliferation of malignant lymphocytes, one of the most common in dogs. There is evidence that Treg inhibit the effector function against tumors, resulting in T cell dysfunction in humans and dogs with cancer. Increased expression of cyclooxygenase-2 enzyme (COX-2) by tumor cells and local inflammatory cells, stimulates the development of Treg. Thus, treatment with COX-2 inhibitors such as nonsteroidal anti-inflammatory is a further strategy for the removal of Tregs. In this context, this work aimed to evaluate quantitatively, through flow cytometry, Tregs in dogs with lymphoma undergoing chemotherapy protocol CHOP, with or without a COX-2 inhibitor (Firocoxib). 12 dogs were used controls (healthy), 12 dogs with lymphoma treated with CHOP protocol and 12 dogs with lymphoma treated with CHOP + Firocoxib. Tregs form assessed by flow cytometry at diagnosis after induction chemotherapy (Week 5) and the protocol termination (20 weeks). The results showed that dogs with lymphoma had higher percentages of Tregs (17.08 ± 1.62) compared with the control group (5.67 ± 1.62) (p <0.0001). Moreover, in the lymphoma group had a decrease of Treg percentages at the end of chemotherapy protocol, the groups treated with the traditional CHOP protocol (GT1) (8.648 ± 1.736) and in the CHOP arm associated with a firocoxib (GT2) (5,903 ± 1.126) (p <0.0001). And that between the groups, GT1 (20.66 ± 2.487), and GT2 (12.79 ± 0.7673) only at the time of diagnosis (M0), was statistically different (p <0.0114). It was concluded that dogs with multicentric lymphoma has increased Tregs, and during the chemotherapy protocol, with or without a firocoxib, these cells decrease significantly

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:44Z : No. of bitstreams: 1 000836708.pdf: 1817578 bytes, checksum: 0849a32e5b604abb3d7dc4c68e0bc37a (MD5) / A criação comercial de cães é uma atividade econômica importante no Brasil e tem aumentado, em média, 20% ao ano. Tais empresas têm se preocupado cada vez mais no aprimoramento das raças, modernização e utilização de biotecnologias da reprodução. Contudo, a performance reprodutiva é desconsiderada neste tipo de criação, apesar de perdas expressivas em vista de transtornos reprodutivos, causados por manejo sanitário inadequado, culminando em abortamentos e perdas de neonatos. Em vista disto, objetivou-se com este estudo efetuar um levantamento epidemiológico do Herpesvírus canino tipo 1, Toxoplasma gondii, Neospora caninum, Brucella canis, Leptospira spp e Ehrlichia canis em canis comerciais e correlacionar os achados com a ocorrência de transtornos reprodutivos, idade, sexo e raça. Foram colhidas amostras de sangue de 400 cães adultos com idade média 29,1 ± 8,9 meses, de canis comerciais localizados na microrregião de Ribeirão Preto, SP, para realização de testes sorológicos e moleculares. Os dados sobre manejo sanitário e reprodutivo foram colhidos em forma de entrevistas aplicados ao proprietários dos canis. O estudo foi baseado na ocorrência de Brucella canis (imunocromatografia), Toxoplasma gondii (reação de imunofluorescência indireta), Neospora caninum (imunofluorescência indireta), Leptospira spp (soroaglutinação microscópica), Herpesvírus canino (PCR), Ehrlichia canis e Ehrlichia sp (PCR). A análise estatística empregada consistiu no tratamento descritivo geral dos resultados obtidos, avaliados pelo software Epi Info 7, com a determinação das estimativas de prevalência e cálculo do intervalo de confiança das taxas de doenças na microrregião de Ribeirão Preto. Essa análise investigou o efeito simultâneo de vários fatores (doenças) em uma variável resposta (abortamento e morte neonatal). A população canina estudada foi constituída de 108 machos (27,0%, IC95%: 22,65-31,35) e... / The commercial kennel breeding is an important economic activity in Brazil and has increased, in media, on 20% per year. The breeding has given importance to concern in the improvement of breeds, modernization and use of reproductive biotechnologies. Nevertheless, the reproductive performance is overlooked in breeding of dogs, though of significant losses due of reproductive disorders caused by inadequate sanitary management, culminating in abortions and neonatal/pup losses. Thus, the aim of this study was investigated the infectious causes of abortion and neonatal/pup deaths in commercial kennels. Blood samples from 400 dogs with an average age 29.1 ± 8.9 months were collected from kennels located in the microregion of Ribeirão Preto, SP, for serological and molecular. The data regarding to health and reproductive management were collected by a questionnaire. The studied was based on prevalence of Brucella canis (imunochromatography), Toxoplasma gondii (indirect immunofluorescence reaction), Neospora caninum (indirect immunofluorescence), Leptospira ssp (microscopic soroagglutination), canine Herpesvirus (PCR), Ehrlichia canis e Ehrlichia sp (PCR). The statistical analysis was descriptive, and we used the simple and multiple linear regressions to verify the interaction between dependent variables (abortion and neonatal/pup deaths) and percent positive cases. Canine population studied consisted of 108 males (27,0%, IC95%: 22,65-31,35) and 292 females (73,0%; IC95%: 68,65-77,35). The prevalence of diseases studied was B. canis (15,0%; IC95%: 11,50-18,50), T. gondii (17,3%; IC95%: 13,55-20,95), N. caninum (30,50%; IC95%: 26,19-35,18), Leptospira spp (34%; IC95%: 29,53-38,77), Ehrlichia sp (4,5%; IC95%: 2,87-7,00) and E. canis (15,5%; IC95%: 11,95-19,05), There was no positive case of canine herpesvirus. When the variable abortion was avaliable we can got one association with T. gondii (p = 0,004260) and B. canis (p = 0,0000012). When ...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-17Bitstream added on 2014-11-10T11:58:32Z : No. of bitstreams: 1 000790841.pdf: 1403465 bytes, checksum: 13018455b5c4c9f88bfd51854fffb6ec (MD5) / Afecções da superfície ocular são frequentes em cães braquicefálicos, pela maior exposição do bulbo do olho e por suas intercorrências. Dentre as raças comumente acometidas, tem-se a Shih Tzu, cujos parâmetros oftálmicos não são conhecidos em sua plenitude e foram, em parte, avaliados nesta pesquisa. Sob contenção física, empregou-se o teste lacrimal de Schirmer, o de ruptura do filme lacrimal, a estesiometria, a biomicroscopia com lâmpada em fenda, a microscopia especular de não contato, a flaremetria a “laser”, a tonometria de aplanação, a ecografia e a oftalmoscopia. Foram estudados 48 olhos em 24 indivíduos machos ou fêmeas, com idades variando entre dois a quatro anos e peso entre cinco a 10 Kg, provenientes de canil de criação. Aos dados aplicou-se a estatística descritiva. Relativamente às médias e aos erros padrão, encontraram-se, quanto ao teste lacrimal de Schirmer, 26,145±0,803 mm/min e à ruptura do filme lacrimal, 13,668±0,538 s. À estesiometria, encontraram-se 2,395±0,071 cm. À biomicroscopia, observaram-se 70,83% dos olhos com entrópio de canto medial, 42% apresentaram pelos em carúncula medial, 33% distiquíase, 27% mácula e 13% melanose corneal. Médias e erros padrão, no que concerne à densidade de células endoteliais, foram de 2221,591±20,161 céls/mm2. Quanto à hexagonalidade, foram de 63,770±1,805 %; quanto à área, foram de 451,895±4,179 mm2; e em relação à espessura corneal, de 0,490±0,007 mm. À flaremetria a “laser”, encontraram-se 1,720±0,216 PC/ms e à tonometria, 16,118±0,460 mmHg. As médias e os erros padrão, à ultrassonografia, foram de 20,255±0,134 mm para diâmetro axial horizontal, de 6,624±0,031 mm para espessura da lente, de 4,064±0,109 mm para profundidade da câmara anterior e de 9,565±0,054 mm para a da vítrea O padrão observado à oftalmoscopia não divergiu do já reportado em indivíduos de ... / Ocular surface diseases are often diagnosed in brachycephalic dogs, since their eyes are more exposed. Among the most commonly affected breeds, Shih Tzu dogs are part listed and this breed’s ophthalmic standards are not totally known. In this study ophthalmic standards of this breed were partly studied under physical restraint. Schirmer tear test, break up time test, aesthesiometry, biomicroscopy, non contact specular microscopy, laser flaremetry, applanation tonometry, ultrasonography and ophthalmoscopy were carried in 48 eyes of 24 male and female dogs, with ages from two to four years, weighing between five and 10 kg. All dogs were from a breeding kennel. Descriptive statistics was applied to the data. Mean and standard error for Schirmer tear test was 26.145±0.803 mm/min, for break up time test was 13.668±0.538 s, for aesthesiometry was 2.395±0.071 cm. When evaluated with biomicroscopy 70.83% of the eyes showed medial entropion, 42% showed caruncle trichiasis, 33% distichiasis, 27% corneal opacity and 13% corneal melanosis. Mean and standard error for endothelial cell density was 2221.591±20.161cells/mm2, for endothelial cell hexagonality was 63.770±1.805 %; for endothelial cell area was 451.895±4.179 mm2; for central corneal thickness was 0.490±0.007 mm, for laser flaremetry was 1.720±0.216 PC/ms, for applanation tonometry was 16.118±0.460 mmHg, for axial lenght was 20.255±0.134 mm, for lens thickness was 6.624±0.031 mm, for anterior chamber was 4.064±0.109 mm and for vitreous chamber was 9.565±0.054 mm. Ophthalmoscopy findings were not different from previous reports in other breeds. According to the results obtained, ophthalmic Shih Tzu standards did not differ from reports in other breeds, except for break up time and Cochet-Bonnet aesthesiometry

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2015. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2015-10-22T19:18:29Z No. of bitstreams: 1 2014_LucianadeMagalhãesLeite.pdf: 1270360 bytes, checksum: f9582b45977ddfcb93b63a0232a75246 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2015-10-23T13:57:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_LucianadeMagalhãesLeite.pdf: 1270360 bytes, checksum: f9582b45977ddfcb93b63a0232a75246 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-23T13:57:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_LucianadeMagalhãesLeite.pdf: 1270360 bytes, checksum: f9582b45977ddfcb93b63a0232a75246 (MD5) / As leishmanioses representam um complexo de doenças com uma importante diversidade clínica e epidemiológica. A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma zoonose endêmica no Brasil, anteriormente restrita a áreas rurais, mas, recentemente tem ocorrido expansão no processo de urbanização da Leishmaniose Visceral. A imunidade inata participa dos mecanismos de defesa contra a leishmânia e ainda está pouco compreendida na leishmaniose canina. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta imunitária inata dos fagócitos de cães naturalmente infectados por Leishmania spp. em comparação com cães normais, pela avaliação da fagocitose e capacidade de produzir moléculas microbicidas. Foram utilizados 30 cães, sem raça definida, maiores que um ano de idade, sendo 22 cães machos e 8 fêmeas, que foram distribuídos em dois grupos: 15 cães não infectados utilizados como controle normal e 15 cães naturalmente infectados pela Leishmania spp. Foram feitos o exame clínico, o hemograma e os testes bioquímicos. Foram avaliadas a fagocitose de Saccharomyces cerevisiae pelos neutrófilos e monócitos do sangue periférico, pelos receptores para padrões moleculares de patógenos e pelos receptores para opsoninas. A produção de ânions superóxido foi avaliada pelo teste do NBT, a produção de peróxido de hidrogênio pela oxidação do vermelho neutro na presença de peroxidase e a produção de óxido nítrico foi quantificada pela presença de nitrito no sobrenadante das culturas utilizando reagente de Griess, estimuladas ou não com LPS. Os cães com leishmaniose apresentaram os seguintes sinais clínicos característicos da doença: alopecia (33%), descamação (46%), úlcera na pele (20%), onicogrifose (26%), caquexia (46%), linfoadenomegalia (40%), ceratoconjuntivite (53%). Os cães com leishmaniose apresentaram anemia normocrômica e normocítica, plaquetopenia e leucopenia, com neutrofilia relativa e desvio à esquerda. Os cães com leishmaniose apresentaram diminuição da atividade sérica da alanina aminotransferase (ALT) em relação a cães normais. Não foram observadas diferenças na concentração sérica da creatinina. As proteínas totais (PT) mostraram-se aumentadas em cães com leishmaniose as custas do aumento das globulinas, sendo que não houve diferença na concentração sérica de albumina entre cães com leishmaniose e cães normais. Cães com leishmaniose apresentaram menor capacidade fagocitária pelos neutrófilos do que cães normais quando avaliados pelos r eceptores para padrões moleculares de patógenos. A fagocitose facilitada por opsoninas mostrou que o número de leveduras ingeridas por neutrófilo foi maior em cães com leishmaniose em relação aos controles normais. Não houve diferença entre a capacidade fagocitária pelos monócitos de cães com leishmaniose e cães controle normal quando avaliados pelos receptores para padrões moleculares de patógenos, nas proporções de 5 ou 20 leveduras não sensibilizadas por monócito. Monócitos de cães com leishmaniose apresentaram maior capacidade fagocitária em comparação aos de cães normais, quando avaliados pelos receptores para opsoninas, tanto na proporção de 5 quanto na proporção de 20 leveduras sensibilizadas por monócito. A porcentagem de redução do NBT basal pelos fagócitos de cães com leishmaniose foi menor do que a dos cães controle. Quando utilizamos a concentração de 5 μg/mL de LPS, observamos que cães controles normais apresentaram um aumento da produção de óxido nítrico em relação aos cães controles normais. Entretanto, nos cães com leishmaniose houve diminuição na produção de óxido nítrico quando estimulados com 5 μg/mL de LPS em relação a sua produção basal. Observamos maior produção basal de peróxido de hidrogênio pelos cães com leishmaniose. Nossos resultados mostraram que há uma deficiência dos neutrófilos de cães com leishmaniose tanto na fagocitose quanto na produção de moléculas microbicidas, como os ânions superóxido. Entretanto, os monócitos desses cães embora apresentem uma maior capacidade fagocitária do que os cães normais, mostram uma menor capacidade de produzir óxido nítrico, que é uma das principais moléculas microbicidas para as leishmânias. Estas alterações do sistema imunitário inato podem favorecer o escape do parasito do sistema imunitário do hospedeiro, assim perpetuando sua sobrevivência. Ademais, o aumento da produção de peróxido de hidrogênio pelos monócitos, pode estar contribuindo para restringir em parte a multiplicação do parasito, mas o seu excesso pode também estar contribuindo nos mecanismos de imunopatogenia. Nossos dados contribuem para uma maior compreensão dos mecanismos de defesa da imunidade inata e da imunopatogenia da leishmaniose em cães e podem contribuir para a busca de novos alvos para drogas imunomoduladoras que possam auxiliar no tratamento contra a leishmaniose. ______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Leishmaniasis represent a complex disease with a significant clinical and epidemiological diversity. The Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is a zoonosis endemic in Brazil, previously restricted to rural areas, but recently there has been expansion in the urbanization process of Visceral Leishmaniasis. Innate immunity participates in the defense mechanisms against Leishmania and is still poorly understood in canine leishmaniasis. The objective of this study was to evaluate the innate immune response of phagocytes of naturally infected dogs to Leishmania spp. compared to healthy dogs, and to evaluate phagocytosis and microbicide molecule production by phagocytes. Thirty dogs, mixed breed, higher than one year old, 22 males and 8 females, were separated into two groups: 15 uninfected dogs used as healthy control, 15 dogs naturally infected by Leishmania spp. The clinical examination, the blood cell count and biochemical tests were assessed. Phagocytosis of Saccharomyces cerevisiae by neutrophils and monocytes were assessed through pathogen-associated molecular pattern and opsonin receptors. The production of superoxide anions was assessed by the NBT test. Hydrogen peroxide production was evaluated by neutral red oxidation and nitric oxide production by the Griess reagent, with or without LPS. Leishmania infected-dogs showed the following clinical characteristics: alopecia (33%), peeling (46%), skin ulcers (20%), onychogryphosis (26%), cachexia (46%), lymphadenopathy (40%), keratoconjunctivitis (53%). Leishmania infected-dogs showed normochromic and normocytic anemia, thrombocytopenia and leukopenia with neutrophil relative increment and a left shift. Leishmania infected- dogs showed decreased serum activities of alanine aminotransferase (ALT) compared to healthy control. No differences were observed in serum creatinine. The total protein (TP) was increased in Leishmania infected-dogs due to an increase in globulins, and there was no difference in serum albumin concentration between dogs with leishmaniasis and healthy controls. Leishmania infected-dogs showed lower phagocytic capacity by neutrophils than healthy dogs when evaluated by pathogen-associated molecular pattern receptors. Phagocytosis facilitated by opsonins showed that the number of ingested yeast per neutrophil was higher in Leishmania infected-dogs when compared to healthy controls. There was no difference between the phagocytic capacity of monocytes by Leishmania infected-dogs and healthy control when evaluated by pathogen-associated molecular pattern receptors. Monocytes from leishmaniasis animals showed higher phagocytic capacity when compared with healthy dogs, as assessed by the opsonin receptors. NBT percent reduction was lower in leishmaniasis than control dogs. When the concentration of 5 mg / mL of LPS was use, it was observed that healthy control dogs showed an increase in nitric oxide production when compared to control dogs. However, in dogs with leishmaniasis decreased nitric oxide production was observed when monocytes were stimulated with 5 / ml LPS. Higher baseline production of hydrogen peroxide by dogs with leishmaniasis was observed. Our results showed that there is a deficiency in neutrophils of Leishmania infected-dogs, both to phagocytosis as production of microbicidal molecules, such as superoxide anions. However, monocytes from leishmaniasis animals showed a higher phagocytic capacity than healthy dogs, showed a decreased capability to produce nitric oxide, which is a major microbicides molecule to Leishmania. These changes in innate immune system may favor the parasite scape from host immune system, thus maintaining their survival. In addition, the increased production of hydrogen peroxide by monocytes may contribute to impair the growth of parasites, but its excessive production may contribute to the immunopathogenesis of the disease. Our data contribute to enhance the understanding of the defense mechanisms of innate immunity and the immunopathogenesis of the disease in dogs. This knowledge may contribute as new targets for immunomodulatory drugs improving treatment against leishmaniasis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-10-10Bitstream added on 2014-06-13T19:57:04Z : No. of bitstreams: 1 000735329.pdf: 2941475 bytes, checksum: c05397fe7f5f49eeb21cca723c619b7f (MD5) / As células dendríticas despertam atualmente um grande interesse de estudos, pois são alvos primários da atividade tumoral sobre o sistema imune. O objetivo principal deste estudo foi avaliar a relação entre o infiltrado inflamatório e as células dendríticas (DCs) nos carcinomas mamários do tipo simples em cadelas. Dois grupos de amostras foram formados, o primeiro composto por 18 amostras de tecido mamário sem alterações (grupo controle) e o segundo, de 26 carcinomas mamários do tipo simples (grupo tumor). Além disso, foram analisados 15 linfonodos provenientes das cadelas com tumor de mama e quatro linfonodos oriundos das cadelas sem tumor de mama. Foi realizada a imunodetecção de DCs mieloides imaturas e maduras, DCs plasmocitoides, linfócitos T, macrófagos e moléculas do complexo de histocompatibilidade maior classe II (MHC-II). Foram também identificados os mastócitos pela coloração especial de azul de toluidina. Para os linfonodos, realizou-se apenas a imunodetecção de DCs mieloides imaturas e maduras. A idade média das cadelas com tumor de mama foi de 9,3 anos (30%) e os cães sem raça definida (SRD) foram os mais afetados. Nenhum linfonodo apresentou focos de micrometástases. Das 17 cadelas acompanhadas para o estudo de seguimento, nove estão vivas e oito vieram a óbito. A causa de morte mais ocorrente foi a provocada por metástases (67%). Nas mamas com tumor, observou-se que os mastócitos e as DCs mieloides maduras apareciam nas regiões peritumorais. As DCs mieloides imaturas, as DCs plasmocitoides, os macrófagos e as células imunomarcadas para MHC-II foram visualizados somente no estroma tumoral. Já os linfócitos T foram encontrados nas porções tumoral e peritumoral. Nos linfonodos a marcação das DCs mieloides imaturas concentrou-se nos folículos linfoides e na zona paracortical; já as DCs maduras apareceram somente no centro dos folículos... / Dendritic cells currently represent a big focus of studies, because they’re primary targets of tumor activity on the immune system. The main objective of this study was to evaluate the relationship between the inflammatory infiltrate and dendritic cells (DCs) in mammary carcinomas simple type in female’s dogs. Two groups of mammary gland samples were formed, the first was composed of 18 mammary tissue samples unchanged (control group) and the second, with 26 mammary simple carcinomas (tumor group). In addition, 15 lymph nodes were analyzed from bitches with mammary gland tumor and four lymph nodes derived from bitches without mammary gland tumor. Immunodetection was performed to immature and mature myeloid DCs, plasmacytoid DCs, T cells, macrophages and molecules of the major histocompatibility complex class II (MHC -II). Mast cells have also been identified by the special staining toluidine blue. To lymph nodes, the immunodetection was performed only to immature and mature myeloid DCs. The average age of the bitches with mammary tumor was 9.3 years (30 %) and dogs without breed (SRD) were the most affected. No lymph node showed foci of micrometastases. From 17 bitches monitored for follow-up study, nine are alive and eight died. The cause of death more occurred was caused by metastasis (67%). In the mammary glands with tumor, it was observed that the mast cells and mature myeloid DCs appeared in peritumoral regions. The immature myeloid DCs, plasmacytoid DCs, macrophages and cells immunostained for MHC-II were seen only in the tumor stroma. The T cells were founded into the tumor and in peritumoral areas. Into the lymph nodes, the marking of immature myeloid DCs was concentrated in lymphoid follicles and paracortical zone; the mature DCs appeared only in the center of the lymphoid follicles. In mammary gland control, the number of inflammatory cells as well as DCs was minimal. Statistically ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-28Bitstream added on 2014-06-13T20:57:23Z : No. of bitstreams: 1 bariani_mh_me_botfmvz.pdf: 2706656 bytes, checksum: ad8c8dec4b880f364d61ead29ac9bf62 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / o carcinoma espontâneo de mama representa cerca de 50% de todas as neoplasias malignas que acometem a cadelas adultas e demonstram semelhanças ao câncer de mama em mulheres. A exposição humana e de outros animais a contaminantes ambientais podem estar associados ao desenvolvimento do câncer de mama. O objetivo foi identificar resíduos dos piretróides aletrina, lambda- cialotrina, cipermetrina, deltametrina e tetrametrina no tecido adiposo adjacente de tumores malignos em mama de cadelas com e sem tumor espontâneo, por Cromatografia Liquida de Alta Eficiência (HPLC) e correlacionar com a expressão morfológica e o grau de agressividade dos tumores por meio do exame histopatológico. Foram utilizadas 60 cadelas sem predileção por raça, de idade superior a cinco anos. Esses animais foram distribuídos em dois grupos de 30 animais. Grupo 1: cadelas com diagnóstico citopatológico e histopatológico de carcinoma espontâneo de mama; G2: cadelas sem diagnóstico de tumor de mama. Em ambos, foram colhidos 5 gramas de tecido adiposo adjacente ao tecido mamário, que permaneceu em refrigeração (-4°C) até o momento da análise pela técnica de HPLC. Para o diagnóstico e classificação das neoplasias utilizaram-se os critérios da Organização Mundial da Saúde. Não houve diferença significativa entre os grupos (P>O,05); entretanto quando comparado o nível de piretróides entre os carcinomas do Grupo 1, verificou-se a prevalência significativa (P<O,05) nos carcinomas complexo em relação aos simples. O presente resultado sugere a probabilidade dos resíduos de piretróides como contaminantes ambientais possam estar envolvidos no processo de desenvolvimento do carcinoma de mama em cadela / Spontaneous mammary carcinoma represents about 50% of ali the malignant neoplasias that assail adult female dogs and it demonstrates similarities to breast cancer in women. The exposure of humans and other animais to environmental pollutants can be associated to the development of breast cancer. The objective was to identify residues of the pyrethroids alethrin, lambda-cialothrin, cypermethrin, deltamethrin and tetramethrin in the adipose tissue adjacent to malignant tumors in the mammary gland of female dogs with and without spontaneous tumor by High Performance/Pressure Liquid Chromatography (HPLC) test; to correlate the results with the morphologic expression and the degree of aggressiveness of the tumors through the histopathology exam. Sixty female dogs were used without predilection of race, at or superior to five years of age. The animais were divided in two groups: G1- 30 female dogs with cytopathologic and histopathologic diagnosis of spontaneous mammary carcinoma and G2- 30 female dogs diagnosed without mammary tumors. In both, 5 grams of adipose tissue adjacent to the mammary gland was collected, and was refrigerated at (-4°C) until the moment it was analyzed by the HPLC technique. For the diagnosis and classification of the neoplasias the criteria from the World Organization of Health were used. There was no significant difference among the groups (P>0,05); however when compared the levei of pyrethroids among the carcinomas of Group 1, the significant prevalence was verified (P <0,05) in the compound carcinomas in relation to the simple. The present results suggest the probability that residues of the pyrethroids as environmental pollutants can be involved in the process of mammary development carcinoma in female dog's mammary gland

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-04-26Bitstream added on 2014-06-13T20:29:21Z : No. of bitstreams: 1 nascimento_mj_me_botib.pdf: 191009 bytes, checksum: 71de319624d5eb0910433d85ccd23062 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Foi realizada uma investigação epidemiológica na cidade de Presidente Prudente-SP, para avaliar a prevalência das infestações pelo ácaro Otodectes cynotis no ouvido de cães naturalmente infestados. Os animais utilizados neste estudo foram divididos em dois grupos: um grupo com animais criados em condições higiênico-sanitárias ruins e outro grupo com animais criados em boas condições higiênicas. Foram visitadas 170 casas onde em 85 casas os animais eram criados em boas condições higiênicosanitárias e em 85 casas os animais eram criados em condições higiênicas ruins. Foi examinado um total de 233 cães. Os ouvidos de todos os cães foram examinados com o uso de um otoscópio para verificar a presença do ácaro. Cento e trinta e nove cães criados em condição higiênico-sanitária ruim foram examinados e 81 deles (57,9%), estavam infestados pelo ácaro. O total de cães examinados que viviam em boas condições higiênicas, foi de 94 e apenas nove animais (9,6%) tinham o ácaro O. cynotis nos ouvidos. Os resultados mostraram que as condições higiênicas em que os cães são criados influenciam na prevalência do ácaro O. cynotis ( 0,0001). Foram realizados esfregaços do cerúmen coletado de ambos os ouvidos de todos os cães. As lâminas foram coradas e examinadas para verificar a quantidade de levedura de Malassezia pachydermatis por campo. Foi encontrada levedura de Malassezia no esfregaço de ouvido de 113 cães (48,5%), sendo que em 87 havia mais do que dez células por campo examinado. A quantidade de levedura presente nos esfregaços das amostras de cerúmen, coletadas dos ouvidos dos cães infestados pelo ácaro, foi comparada com as amostras de cerúmen dos cães sem infestação. Os esfregaços de cerúmen revelaram que há associação do ácaro com a infecção por M. pachydermatis, pois 74,4% dos animais que apresentaram infestação pelo ácaro... / An epidemiological investigation was done in dogs of Presidente Prudente, São Paulo to determine the prevalence of ear infestation by Otodects cynotis in dogs naturally infested. The animals used in the study were separated in two groups: in one group the animals were raised in bad sanitary hygienic conditions and in other group the animals were raised in good sanitary hygienic conditions. One hundred seventy houses were visited, in 85/170 of the houses the dogs were raised in good hygienic conditions and in other 85 houses the dogs were raised in bad hygienic conditions. A total of 233 dogs were examined with otoscopic. Otoscopic examination of both ears was carried out to assess the presence of mite. The presence of O. cynotis was meet in 81/139 (57.9%) of the dogs raised in bad hygienic conditions. In 9/94 (9.6%) of the dogs raised in good hygienic condition were positive for ear mites. There was a significant difference ( < 0.0001) in the average number of dogs positive for O. cynotis raised in different hygienic conditions. In the houses which animals lived in bad hygienic condition the number of dogs with ear mites was greater. Deep ear swab speciments were obtained from both ears from all dogs. Each swab was rolled on a clean glass slide and stained with Giemsa for microscopic examination. The number of Malassezia pachydermatis yeasts found in glass was assessed. Malassezia yeasts were found in 113 (48.5%) of dogs. Of 113 dogs positive on ear swab for M. pachydermatis yeast, 87 (77.0%) showed more than 10 cells per field. The amount of M. pachydermatis yeast present in the swabs obtained from ears from dogs infested with ear mite O. cynotis was compared with swabs obtained from ears from dogs without infestation. The results showed that there was association between the ear mite and the infection with M. pachydermatis. Of 67/90 (74.4%) of dogs were infested by O. cynotis and showed more than 10 cells per field.