Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-05-27Bitstream added on 2014-08-13T18:00:58Z : No. of bitstreams: 1 000749636.pdf: 644023 bytes, checksum: 4cc0b5b973664de374d7089a8baa2c9e (MD5) / O trabalho teve por objetivos avaliar cães submetidos à ostectomia unilateral da cabeça femoral, por meio de avaliação clínica padrão e locomovendo-se em plataforma de pressão. A hipótese é que esses animais tenham alterações cinéticas e têmporo-espaciais decorrentes do procedimento cirúrgico, que podem ser detectadas por índice de simetria. Foram utilizados 30 cães divididos em dois grupos equitativos: Grupo 1 - animais hígidos; Grupo 2 – animais submetidos à ostectomia unilateral da cabeça e colo femorais, por meio de acesso craniolateral e sem interposição muscular. A velocidade foi mantida entre 0,9 e 1,1 m/s e a aceleração entre -0,15 e 0,15 m/s2. Foram determinados o Pico de Força Vertical, Impulso Vertical, duração do ciclo de locomoção, duração da fase de apoio, duração da fase de balanço, comprimento do passo e porcentagem de distribuição de peso. O Índice de Simetria (IS) foi calculado entre os membros para cada variável dos grupos 1 e 2. Na sequência, os Índices de Simetrias foram comparados entre Grupos. O resultado funcional (Grupo 2) foi considerado excelente em 10 animais, bom em quatro e razoável em um caso. O membro operado estava encurtado e a medida da circunferência da coxa foi menor comparado ao membro contralateral. A extensão do quadril estava limitada. Ao exame radiográfico foi observado deslocamento proximal do fêmur em todos os membros operados. Diferenças estatisticamente significantes foram observadas para os Índices de Simetria entre G1 e G2 em diversos parâmetros têmporo-espaciais. O Impulso Vertical foi estatisticamente significativo comparando o IS de G1 membro pélvico/membro torácico com G2 membro pélvico operado/membro torácico ipsilateral e membro pélvico operado/membro torácico diagonal. Foi possível concluir que cães com ostectomia unilateral da cabeça e colo femorais apresentam mudanças principalmente nos parâmetros têmporo-espaciais, as quais ... / The aim of this study was to evaluate dogs with unilateral femoral head and neck ostectomy through standard clinical evaluation and using a pressure-sensitive walkway. The hypothesis was that these dogs exhibit changes in kinetic and temporospatial parameters due to the surgical procedure that may detected by Symmetry Index (SI). Thirty dogs divided into two groups were used: G1 had 15 clinically healthy dogs; G2 had 15 dogs that underwent unilateral femoral head and neck ostectomy performed through access craniolateral and without muscle interposition. The velocity was maintained from 0.9-1.1 m/s and acceleration from -0.15 to 0.15 m/s2. Five valid trials were analyzed for each dog. The peak vertical force, vertical impulse, gait cycle time, stance time, swing time, stride length, and the percentage body weight distribution among the four limbs were determined. The Symmetry Index was calculated between limbs for each variable in G1 and G2. After this, Symmetry Indices were compared between Groups. Limb function (G2) was considered excellent in 10 dogs, good in four, and fair in one case. The operated limb was shortened and circumferential measurement of the thigh was lesser compared to contralateral limb. Hip extension was limited. In radiographic examination, displacement of the proximal femur was observed in all operated limbs. Statistical differences were observed for the Symmetry indices between G1 and G2 in several temporospatial parameters. Impulse was statistically different comparing SI of the G1 hind limb/forelimb with G2 operated hind limb/ipsilateral forelimb and G2 operated hind limb/diagonal forelimb. In conclusion, dogs with unilateral femoral head and neck ostectomy have changes mostly in temporospatial parameters that may be detected by SI, despite good functional results

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-30Bitstream added on 2015-04-09T12:48:22Z : No. of bitstreams: 1 000814288.pdf: 1059495 bytes, checksum: 7e85c36cc1e87181094022dba382e03b (MD5) / A intoxicação por plantas invasoras de pastagens causa enormes prejuízos na pecuária brasileira, pois geralmente ocorre o consumo espontâneo da planta em pastagens de qualidade ruim, devido a seca, geada ou queimadas. Os animais também podem intoxicar-se acidentalmente, pela contaminação de grãos utilizados na dieta de animais de grande porte com sementes destas plantas. Plantas do gênero Crotalaria sp. possuem um princípio ativo que induz cirrose hepática em animais e suas sementes comumente misturam-se a grãos durante a colheita mecanizada. Existem várias pesquisas relacionando a proliferação das células estreladas hepáticas com fibrose hepática no homem. Nenhum estudo foi feito com animais de companhia relacionando a qualidade da ração oferecida aos mesmos e seus efeitos deletérios. Portanto, avaliar a susceptibilidade do cão como modelo experimental para um quadro de intoxicação por sementes de Crotalaria spectabilis, bem como, verificar se ocorre fibrose hepática e proliferação de células estreladas hepáticas em fígados de cães que receberam diferentes concentrações de sementes da planta (G1 - 0,2%, G2 - 0,4% e G3 - 0,6%), nos tempos zero (controle basal), T14 dias e T28 dias foram os objetivos deste estudo. As amostras de fígado foram colhidas por biopsia guiada por ultrassom, com os animais sob anestesia. A fibrose foi avaliada por métodos histoquímicos (Gordon e Sweet; Tricrômio de Masson e Picrosirius) e a densidade de células estreladas hepáticas foi avaliada por imuno-histoquímica. Os fígados de animais dos grupos G1 e G2 não apresentaram aumento de fibras reticulares ou de fibras colágenas em T14 e T28. No grupo G3 verificou-se discreta fibrose, predominantemente em T28. Conclui-se que na intoxicação experimental de cães por sementes de Crotalaria spectabilis ocorre uma proliferação de células estreladas hepáticas na fase inicial, seguida por ... / The poisoning of pasture weeds cause huge losses in Brazilian cattle, usually occurs because the spontaneous ingestion of the plant in pastures of poor quality due to drought, frost or fire. Animals can also become contaminated accidentally by contamination of grain used in the diet of large animals. Plants of the genus Crotalaria sp. have an active ingredient that induces liver cirrhosis in animals and their seeds commonly blend the grains during mechanical harvesting. No study has been done with pets relating the quality of feed offered to them. The susceptibility of experimental dog model as a framework to poisoning Crotalaria spectabilis seeds, as well as to verify whether proliferation of hepatic fibrosis and hepatic stellate cells in the liver of dogs receiving different concentrations of plant seeds (G1 - 0, 2 % , G2 - 0.4 % and G3 - 0.6 % ) , in zero time (baseline control ), T14 days and T28 days were the goals of these studies . The liver samples were obtained by biopsy guided by ultrasound, with the animals under anesthesia. Fibrosis was evaluated by histochemical methods (Gordon and Sweet, Masson Trichrome and Picrosirius) and the density of hepatic stellate cells was evaluated by immunohistochemistry. The livers of animals in groups G1 and G2 showed no increase in reticulin or collagen fibers in T14 and T28. In G3 showed mild fibrosis, predominantly in T28. We conclude that the experimental poisoning of dogs by Crotalaria spectabilis seeds a proliferation of hepatic stellate cells in the initial phase occurs, followed by fibrosis and reduction in this cell population, confirming the role of these cells in repair of liver tissue

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-24Bitstream added on 2015-04-09T12:48:22Z : No. of bitstreams: 1 000813863.pdf: 676198 bytes, checksum: 4b21e81c2e5a200fc033bd9c6d6cc0e4 (MD5) / A cinomose canina é uma importante afecção contagiosa, com elevada taxa de letalidade e comprometimento multissistêmico, incluindo o sistema nervoso central. A leucoencefalite desmielinizante é a principal alteração neuropatológica observada, sendo sua patogênese pouco conhecida. A quebra da barreira hematoencefálica (BHE) com penetração viral e infiltração leucocitária são aspectos cruciais no desenvolvimento da encefalite desmielinizante. Em seres humanos e animais com alterações semelhantes, as metaloproteinases da matriz (MMPs), principalmente 2 e 9, vem sendo apontadas como os agentes desestruturantes da integridade da BHE. Assim, buscou-se estabelecer o envolvimento das MMPs 2 e 9 na quebra da BHE de cães com cinomose em fase neurológica. O presente estudo teve como escopo principal determinar e quantificar tais enzimas, pela técnica de zimografia, no soro e no liquor de cães hígidos (Gcon, n=10) e cães com cinomose na fase neurológica (Gcin, n=10). Além disso, foram determinados os parâmetros físico-químicos do liquor para a obtenção de maiores informações acerca da integridade da BHE. A análise estatística multivariada exploratória mostrou padrões distintos segundo as variáveis estudadas, sendo estas comparadas entre os grupos com o teste t / Canine distemper is an important contagious disease with high mortality rate and multisystem involvement including the central nervous system. The demyelinating leukoencephalitis is the main neuropathological alteration observed and its pathogenesis is not well known. The rupture of the blood brain barrier (BBB) with viral penetration and leukocyte infiltration are crucial for the development of demyelinating encephalitis. In humans and animals with similar disorders, matrix metalloproteinases (MMPs) especially 2 and 9 have been pointed as the agents that destabilize the integrity of the BBB. Thus, we sought to establish the involvement of MMPs 2 and 9 in BBB rupture of dogs with distemper at the neurological phase. The present study aimed to determine and quantify these enzymes by the technique of zymography in serum and cerebrospinal fluid of healthy dogs (Gcon, n=10) and dogs with distemper at neurological stage (Gcin, n=10). Furthermore, we determined the physicochemical parameters of liquor to obtain more information about the integrity of the BBB. Exploratory multivariate analysis showed distinct patterns according to the variants studied, which were compared between groups with t test

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-02Bitstream added on 2015-04-09T12:48:09Z : No. of bitstreams: 1 000814106.pdf: 732963 bytes, checksum: 8b7a4ecacee61c02ff2c4e104577f4d9 (MD5) / O tratamento de cães com leishmaniose visceral no Brasil tem gerado polêmicas discussões entre os diversos segmentos de profissionais da saúde. De um lado os Médicos Veterinários pressionados pelos proprietários dos cães que querem ter o direito de decidir por um tratamento ou pela eutanásia de seus animais; de outro os Ministérios da Saúde e da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) que se mostram contrários a qualquer tratamento, motivados pelo risco de se criar cepas do parasita resistentes aos fármacos, os quais também podem ser empregados em pacientes humanos. Argumentos científicos que possam embasar essa polêmica devem ser explorados. Uma das possibilidades de se avaliar o desenvolvimento de resistência a fármacos pode ser conseguida por meio da pesquisa da expressão da glicoproteína-P (gp-P) e proteína de resistência a múltiplas drogas (MRP1), que atuam como bombas de efluxo expulsando xenobióticos de células, responsáveis pelo fenótipo MDR (resistência a múltiplas drogas). Avaliamos, pela técnica de imuno-histoquímica, a reatividade da gp-P e MRP1, clone C494 e ABCC1, respectivamente, na pele de 11 cães naturalmente infectados por Leishmania (L.) infantum chagasi antes e após serem submetidos a dois protocolos de tratamento: Alopurinol e vacina inativada (n=4) e Alopurinol, vacina inativada e domperidona (n=7) e quantificamos formas amastigotas na pele pela mesma técnica. Todos os animais após 3 e 6 meses de tratamento tiveram melhora clínica evidente e tiveram contagem negativa de formas amastigotas do parasita. Pele de cães com LV expressaram gp-P e MRP1, antes e após o tratamento, no entanto, este experimento permitiu concluir que a gp-P e MRP1 não foram bons marcadores para avaliar a eficácia terapêutica da LVC e para prever possíveis estados de resistência a fármacos. Todavia, o entendimento sobre a participação de marcadores de resistência a múltiplas drogas na pele de ... / The treatment of dogs with visceral leishmaniasis in Brazil has generated controversial debate among various segments of health professionals. On one side, veterinarians pressured by dog owners want to have the right to decide between treatment and euthanasia of their animals. On the other hand, the Ministry of Health and the Ministry of Agriculture, Livestock, and Supply (MAPA) are opposed to treatment because of the risk of creating strains of the parasite resistant to drugs that are also used for human patients. Scientific arguments that can support this controversy should be explored. One possibility for assessing the development of drug resistance can be achieved through research of the expression of Pglycoprotein (P-gp) and multidrug resistance-associated protein (MRP1). These proteins, which are responsible for the MDR phenotype (multiple drug resistance), act as efflux pumps which expel xenobiotics from cells. Using immunohistochemistry, the reactivity of P-gp (clone C494) and MRP1 (clone ABCC1) in the skin of 11 dogs naturally infected by Leishmania (L.) infantum chagasi was analyzed before and after undergoing two treatment protocols: Allopurinol and inactivated vaccine (n=4) and Allopurinol, inactivated vaccine, and domperidone (n=7). Quantification of Leishmania amastigotes in the skin was also achieved via immunohistochemistry. All of the animals after 3 and 6 months of treatment had clinical improvement and tested negative for amastigote forms of the parasite. Yet, the skin of dogs positive for CVL (canine visceral leishmaniasis) expressed P-gp and MRP1 before and after treatment, illustrating that P-gp and MRP1 were neither good markers for evaluating the therapeutic efficacy of CVL nor for predicting the possible states of drug resistance. However, an understanding of the participation of markers for multiple drug resistance in the skin of dogs under treatment for CVL can be of great importance for the development of an ...

Resumo: Sabendo-se da influência das mutações no gene TP53 no desenvolvimento das neoplasias e da discrepância entre os resultados obtidos pelas técnicas de sequenciamento e imunoistoquímica, esta pesquisa teve como objetivo avaliar a sequência do TP53 e a imunorreatividade da p53, relacionando-as com fatores clínicopatológicos em cães com linfoma. Foram avaliados 12 cães com linfoma e cinco cães sadios. Amostras de neoplasia/linfonodo e de bulbo piloso foram obtidas. O diagnóstico histopatológico foi determinado pela classificação de Kiel. O imunofenótipo e a imunomarcação da p53 foram determinados por imunoistoquímica. Para a imunomarcação com a p53, utilizou-se anticorpo policlonal anti-p53 (CM1) na diluição de 1:500. A região do gene TP53 compreendida entre os exons quatro e nove (incluindo íntrons) foi amplificada por PCR e submetida ao sequenciamento. A média da imunorreatividade da p53 nos cães com linfoma foi 27,33%±12,14%, diferente da média do grupo controle (0,75±0,5) (P<0,05). A ausência de marcação da p53 foi observada em apenas um caso de linfoma de baixo grau de malignidade, cujo cão apresentou um ano de sobrevida. O outro caso de linfoma de baixo grau de malignidade apresentou a menor marcação da p53 (14,12%). O linfoma com maior marcação da p53 (50,56%) consistiu em um linfoma alimentar cujo cão evoluiu para o óbito no dia da consulta. As maiores médias de marcação foram observadas nos linfomas cutâneos, estádio clínico V, subestádio "b", imunofenótipo B e tempo de sobrevida de até trinta dias, sem diferença estatística (P>0,05). Apesar dos resultados obtidos pela imunoistoquímica, nenhuma mutação foi encontrada nas sequências analisadas ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: TP53 mutations are usually involved in cancer, but sequencing and immunohistochemistry results are often controversial. Thus, the aim of this study was to analyse both TP53 sequence and p53 immunostaining and to associate their findings to clinical-pathological features in dogs with lymphoma. Twelve dogs with lymphoma and five healthy dogs were included in this study. Tumor and hair sample was collected. Histopathological diagnosis was performed according to Kiel classification. Immunohistochemistry was performed to identify immunophenotype as well as p53 expression. Polyclonal antibody anti-p53 (CM1) was used at a 1:500 dilution. The region that encompasses exons 4-9 was amplified by means of PCR reactions and sequencing was then performed. p53 immunolabeling mean was 27,33%±12,14 in canine lymphoma group. It was statistically different from control group mean (0,75±0,5) (P<0,05). Only one p53-negative case was observed in a dog with low grade lymphoma, which presented one-year survival. Other low grade lymphoma presented lowest p53 immunoreactivity (14,12%). Highest reactivity (50,56%) was observed in dog with alimentary lymphoma, which died in the day of diagnosis. The highest immunolabeling means were verified in cutaneous presentation, clinical stage V, substage "b", immunophenotype B and survival time up to 30 days, but there was no significant difference (P>0,05). Nevertheless, gene mutations were not observed in any sequence. In conclusion, p53 immunostaining is not essentially related to mutation in the gene TP53, particularly to the region between exons 4-9 / Orientador: Carlos Roberto Daleck / Coorientador: Janete Apparecida Desidério Sena / Banca: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: Julio Lopes Sequeira / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Manoel Victor Franco Lemos / Doutor

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-12-21T13:06:21Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Patrícia Oliveira Meira Santos.pdf: 1780569 bytes, checksum: 07577642b382657dbf6d08692335e772 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-21T13:06:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Patrícia Oliveira Meira Santos.pdf: 1780569 bytes, checksum: 07577642b382657dbf6d08692335e772 (MD5) / Visando contribuir para o desenvolvimento de uma vacina contra leishmaniose visceral canina, no presente trabalho, foi avaliada a resposta imune de cães após a imunização com dois antígenos recombinantes de L. chagasi/L. infantum (denominados Lc9 e Lc13) misturados a saponina em associação ou não com plasmídeo codificando IL-12 canina de cadeia única (pcDNA3.1-scca-IL-12). Os antígenos foram injetados por via subcutânea e o plasmídeo pcDNA3.1-scca-IL-12 foi administrado diretamente no linfonodo poplíteo drenante, nos dias 0, 21, 42 e 170 do experimento. Nos animais, a geração de anticorpos séricos da classe IgG anti-Leishmania, a proliferação e a produção de interferon gama (IFN-γ) por células mononucleares de sangue periférico, após estimulação específica in vitro, foram avaliadas. Os cães imunizados com Lc9 e Lc13, associados ou não a pcDNA3.1-scca-IL-12, produziram anticorpos específicos da classe IgG reativos com o extrato total de antígenos de L. chagasi/L. infantum e com cada antígeno recombinante separadamente. Contudo, tais animais, não apresentaram resposta proliferativa e tampouco revelaram produção de IFN-γ, após estimulação com extrato total de antígenos de L. chagasi/L. infantum, indicando que pcDNA3.1-scca-IL-12 falhou em induzir resposta imune do tipo TH1 a antígenos coadministrados. Por causa disso, experimentos adicionais foram realizados visando à definição, em caráter preliminar, de condições apropriadas para uso de plasmídeo codificando IL-12, capazes de promover resposta imune TH1 a antígenos co-administrados, na ausência de efeitos tóxicos. Para isso, camundongos da linhagem C3H/Hej e C57Bl/6 foram injetados duas vezes (50 μg / dose) com plasmídeo codificando IL-12 murina de cadeia única (pcDNA3.1-scmu- IL-12) e eletroporação local foi realizada. Os camundongos C3H/Hej revelaram aumento na concentração plasmática de IFN-γ, esplenomegalia, aumento do linfonodo inguinal e aumento do índice de proliferação dos esplenócitos frente a estímulo in vitro por concanavalina A. Além disso, os camundongos C3H/Hej apresentaram, histologicamente, expansão da polpa vermelha associada a grande pleomorfismo celular, aumento no número de macrófagos vacuolados, de megacariócitos e de células apoptóticas. Os camundongos C57Bl/6 exibiram aumento na concentração plasmática de IFN-γ, esplenomegalia e aumento dos linfonodos inguinal e poplíteo. Esses dados sugerem que as quantidades de pcDNA3.1-scmu-IL-12 utilizadas promovem efeitos tóxicos e menores doses do plasmídeo devem ser avaliadas em experimentos para modificação da resposta imune em camundongos.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-10-25T18:00:25Z No. of bitstreams: 1 Manuela da Silva Solcà. Uso do PCR...pdf: 11332317 bytes, checksum: 657938584a2c80bcdcc02a52c2d8fa4d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-25T18:00:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Manuela da Silva Solcà. Uso do PCR...pdf: 11332317 bytes, checksum: 657938584a2c80bcdcc02a52c2d8fa4d (MD5) Previous issue date: 2012 / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / No Brasil, os cães são considerados como o principal reservatório doméstico para Leishmania infantum (sin. L. chagasi). Desta forma, o diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) deve ser rápido e preciso. Este trabalho visa comparar a performance da reação em cadeia da polimerase (PCR) em detectar o DNA do parasito em diferentes tecidos para diagnóstico da LVC. Com este intuito, na primeira parte do estudo, foi padronizado um protocolo de PCR convencional (cPCR), para detecção do DNA do minicírculo do cinetoplasto (kDNA) de Leishmania sp., em 45 fragmentos esplênicos caninos. As mesmas amostras foram avaliadas utilizando-se um protocolo de PCR quantitativa (qPCR) tendo como alvo o gene da subunidade do RNA ribossomal (SSU rRNA) de Leishmania sp. Também foi comparada a eficácia do diagnóstico para LVC pelas técnicas moleculares e convencionais como a cultura e o ELISA. A cPCR apresentou sensibilidade mais elevada para detecção de DNA de Leishmania sp. (88,9%), comparada à qPCR (83,3%). Possivelmente o melhor desempenho da cPCR foi devido ao maior números de cópias do kDNA no genoma da Leishmania sp. Diante dos promissores resultados apresentados pela cPCR tendo o kDNA como alvo, na segunda parte do estudo foi padronizado um novo protocolo de qPCR com este mesmo alvo, objetivando-se aumentar a sensibilidade da técnica. Foram selecionados aleatoriamente 61 cães errantes e classificados de acordo com o número de sinais clínicos associados à LVC apresentados. Todos os cães foram eutanasiados, e durante a necropsia, foram coletados fragmentos de linfonodo, aspirado esplênico, medula óssea e sangue. Também foram realizadas culturas esplênicas e ELISA. A qPCR foi empregada para a avalição da taxa de detecção do DNA do parasito e carga parasitária nos diferentes tecidos. As diferenças entre a carga parasitária de cada tecido foram avaliadas pelo teste de Friedman (p ≤ 0,05). Para inclusão dos tecidos nas análises dos resultados de qPCR, foi avaliada a integridade do material genético de cada amostra. Desta forma, 52 animais apresentaram resultados que atendiam aos critérios de seleção para baço, sangue e linfonodo, e destes, 24 animais também atendiam aos critérios para medula óssea. Utilizando-se a qPCR e considerando pelo menos um dos tecidos avaliados, foi detectado o DNA do parasito em todos os cães. A qPCR detectou DNA do parasito em 98,1% dos aspirados esplênicos, 80,8% das amostras sanguíneas, 53,8% dos linfonodos e 41,7% dos aspirados de medula óssea. A carga parasitária foi melhor detectada nos aspirados esplênicos, em relação ao linfonodo, nos animais oligossintomáticos e polissintomáticos (p ≤ 0,05). O aspirado esplênico foi o tecido com maior taxa de detecção do DNA de Leishmania sp. pela qPCR. No entanto, não foi achada diferença estatística entre a carga parasitária do aspirado esplênico e do sangue. Desta forma, a amostra sanguínea, por ser a segunda amostra de melhor taxa de detecção, e por necessitar uma coleta menos invasiva, foi considerada como uma amostra alternativa válida para a detecção do DNA de Leishmania sp. em cães sintomáticos, utilizando a qPCR. / Because infected dogs are widely considered to be the main domestic reservoir for Leishmania infantum (syn. L. chagasi) parasites in Brazil, the diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) must be made both accurately and promptly. The aim of the present study was to compare the performance of the Polymerase Chain Reaction (PCR) to detect parasite DNA in different clinical sample for CVL diagnosis. For this purpose, in the first stage of the study, a conventional PCR (cPCR) protocol was standardize to detect the presence of Leishmania sp. kinetoplast minicircle DNA (kDNA) in 45 canine spleen fragments. The same samples were evaluated using a quantitative PCR (qPCR) technique targeting the Leishmania sp. sub-unit of the ribossomal RNA (SSU rRNA) gene. A comparison was made between the efficacies of these molecular diagnostic techniques and conventional parasitological and serological methods. The cPCR presented the highest sensitivity for Leishmania sp. DNA detection (88,9%), when compared to qPCR was (83.3%). Possibly the cPCR best performance was due to a higher copies number of the kDNA in the Leishmania sp. genome. Given the promising results presented by the cPCR targeting the kDNA, a new qPCR protocol with the same target was standardized in the second stage of the study, aiming increase the technique sensitivity. Sixty-one stray dogs were randomly selected and classified according to the number of clinical signs of CVL. All dogs were euthanized and lymph node fragments and splenic, bone marrow and blood aspirates were obtained during necropsies. ELISA and parasite culture of spleen aspirates were performed to confirm parasite infection. The qPCR was used to determine the parasite DNA detection rate and the parasite load in the clinical samples. Differences between parasite loads of each tissue were evaluated using Friedman test (p ≤ 0.05). In order to include the samples in the qPCR data analysis, the DNA integrity of each sample was analyzed. This way, 52 dogs fulfilled the selection criteria for DNA results for spleen, blood and lymph nodes, with 24 of these dogs also fulfilling the criteria for bone marrow results. Using qPCR, all the 52 dogs showed positivity, considering at least one of the tissues evaluated. Positivity in qPCR was detected in 98.1%8 of the splenic aspirates, 80.8% of blood samples, 53.8% of lymph node fragments and 41.7% of bone marrow samples. Using qPCR, parasite DNA was better detected in splenic aspirates in comparison with lymph node in both polysymptomatic and oligosymptomatic (p ≤ 0.05) dogs. Splenic aspirates have shown to be the tissue with highest Leishmania sp. DNA detection rate using qPCR, however no statistical difference was found between blood and splenic aspirate to detect. Thus, the blood sample, being the second sample with best DNA detection rate and requiring a less invasive collection, was considered a valid alternative sample for Leishmania sp. DNA detection in symptomatic dogs using the qPCR.

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, São José dos Pinhais, 2009 / Inclui bibliografias / Atualmente a sobrevida dos animais de companhia vem aumentando, também em relação ao número de pacientes geriátricos atendidos na rotina clínica-hospitalar veterinária. Devido a esta ascensão, torna-se necessário estabelecer novas condutas de abordagens c / Now the survival time of the company animals is increasing, also in relation to the number of patient geriatric assisted in the routine clinic-hospitalar veterinary. Due to this ascension, she becomes necessary to establish new conducts of clinical, labor

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-14T18:04:26Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2651263 bytes, checksum: 6590fc6244ef08d7d1a96918b5571ce8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-14T18:04:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2651263 bytes, checksum: 6590fc6244ef08d7d1a96918b5571ce8 (MD5) Previous issue date: 2016-10-21 / Sarcomas de tecidos moles (STM) caninos compreendem um grupo heterogêneo de neoplasias malignas, classificadas coletivamente por apresentarem alterações histopatológicas similares, baixa a moderada taxa de recorrência e baixo potencial metastático. Apesar disto, foram descritos padrões histopatológicos vasculares e neurais, específicos para tumor de parede perivascular e tumor de bainha de nervo periférico, respectivamente. Ademais, recentemente foram apontadas diferenças no comportamento biológico dos tumores de parede perivascular, em relação a outros STM. Em medicina humana, a expressão de receptor para estrógeno (RE) e receptor para progesterona (RP) nos sarcomas tem sido estudada, visando a busca de fatores prognósticos e novos alvos para tratamentos. Na medicina veterinária, ainda não foram realizados estudos similares. Os objetivos deste trabalho foram investigar por imuno-histoquímica a histogênese e a expressão de RE e RP em uma série de 80 sarcomas cutâneos e subcutâneos de cães, com características histopatológicas de tumor de bainha de nervo periférico e tumor de parede perivascular. Vinte e um casos (26.25%) apresentaram características morfológicas compatíveis com tumor de parede perivascular, 23 casos (28,75%) com tumor de bainha de nervo periférico, 27 casos (33,75%) compartilharam padrões neurais e vasculares e 9 casos (11,25%) foram indiferenciados. Por imuno-histoquímica, 65 casos (81,25%) apresentaram positividade apenas para marcadores neurais e os outros 15 casos (18,75%) positividade simultânea para marcadores neurais e musculares. A maioria mostrou ser tumor de bainha de nervo periférico. Os padrões histopatológicos tipo perivascular não refletiram a histogênese, que na maior parte das vezes foi negativa para os marcadores musculares e positiva para os marcadores neurais. Todos os casos foram positivos para RP e negativos para RE. Tumores de alto grau de malignidade (grau III) exibiram maior expressão deste receptor que os tumores de baixo grau (grau I). Esta diferença também foi observada para tumores com atividade mitótica maior que 9 figuras mitóticas/10 campos de grande aumento. Houve correlação positiva entre o índice de proliferação celular (Ki67) e a expressão de RP. Assim, a progesterona parece desempenhar um papel na patogênese desses tumores. Futuros trabalhos poderão explorar a ação dos moduladores seletivos de receptor de progesterona como agentes terapêuticos nos sarcomas caninos, além de avaliar a expressão do RP como preditiva de prognóstico. / Soft tissue sarcomas (STS) canines comprise a heterogeneous group of malignancies, collectively classified due to similar histopathological features, low to moderate recurrence rate and low metastatic potential. Nevertheless, vascular and neural histopathological pattern have been described as specific for perivascular wall tumor and nerve sheath tumor, respectively. Moreover, differences were recently identified in the biological behavior of perivascular wall tumor in comparison to other STM. In human medicine, the expression of estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) in sarcomas has been studied to search for prognostic factors and new targets for treatment. In veterinary medicine, similar studies have not yet been carried out. The objectives of this study were to investigate by immunohistochemistry the histogenesis and ER and PR expression in a series of 80 cutaneous and subcutaneous sarcomas in dogs with histopathological features of peripheral nerve sheath tumor and perivascular wall tumor. Twenty-one cases (26.25%) showed morphological characteristics compatible with perivascular wall tumor, 23 cases (28.75%) with peripheral nerve sheath tumor, 27 cases (33.75%) shared both neural and vascular patterns and 9 cases (11.25%) were undifferentiated. By immunohistochemistry, 65 cases (81.25%) were positive only for neural markers and the other 15 cases (18.75%) demonstrated simultaneous positivity for neural and muscle markers. Most tumors proved to be peripheral nerve sheath tumor. The perivascular histopathologic type did not reflect histogenesis, which in most cases was negative for muscle markers and positive for the neural markers. All cases were positive for PR and negative for ER. Tumors of high malignancy grade (grade III) exhibited higher PR expression than low-grade tumors (grade I). This difference was also observed for tumors with mitotic activity greater than 9 mitotic figures / 10 high power fields. There was a positive correlation between cell proliferation (Ki67) and PR expression. Thus, it is possible that progesterone play a greater role in the pathogenesis of these tumors. Future researches may explore the potential for selective progesterone receptor modulators as therapeutic agents in canine STS, as well as evaluating the PR expression as a predictor of prognosis.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T18:08:15Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 806356 bytes, checksum: b7d02489791a4fa3dd4e3553c938a388 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T18:08:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 806356 bytes, checksum: b7d02489791a4fa3dd4e3553c938a388 (MD5) Previous issue date: 2002-08-13 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A medida acurada da digestibilidade dos aminoácidos no intestino delgado é importante para permitir a formulação de rações que promovam uma ótima nutrição a um custo mínimo e sem haver desperdício. Ainda hoje, os métodos e conceitos para se estabelecerem as necessidades nutricionais para o homem e animais de produção têm sido aplicados ao cão, sem a devida validação científica. O objetivo deste trabalho foi descrever a técnica para implantação da cânula, em forma de T, no íleo terminal em cães, suas possíveis complicações pós-operatórias, bem como avaliar a biocompatibilidade de cânulas confeccionadas a partir do aço inoxidável, alumínio e náilon. Para tal, foram utilizados 12 cães adultos divididos em três grupos de quatro animais cada. Nos animais do grupo 1 foram implantadas as cânulas de aço inoxidável, nos do grupo 2 foram implantadas as cânulas de alumínio, e nos do grupo 3, as cânulas de náilon. Para a implantação da cânula foi feita uma incisão retro- umbilical na pele, subcutâneo e linha branca, na região abdominal ventral. Em seguida foram identificados o ceco e o íleo. Foi feita uma sutura em bolsa de fumo no intestino no íleo terminal. No centro desta, promoveu-se uma incisão até atingir o lúmen, por onde a cânula foi inserida. Imediatamente após, completaram-se os nós da sutura em bolsa de fumo. Como reforço, foram dados 4 pontos na serosa do intestino, em um ângulo de 90o entre eles. A peça foi posicionada no interior da cavidade, junto à parede abdominal, no local onde a mesma promovesse menor tensão no intestino depois de exteriorizada. Foi feita, então, uma pequena incisão de pele na região paralombar direita, previamente marcada, divulsionando os músculos até atingir a cavidade abdominal, por onde o cilindro central da cânula foi tracionado, exteriorizado e fechado por meio de uma tampa rosqueada. Os resultados revelaram edema no pós-operatório imediato e reação inflamatória nas bordas da incisão utilizada para exteriorização da haste da cânula nos três grupos. Sete animais apresentaram secreção sero-sanguinolenta ao redor da haste da cânula, nove apresentaram, no mesmo local, extravasamento de conteúdo ileal de forma intermitente. Dos dez animais nos quais houve presença de abscesso, seis evoluíram para fibrose intensa após sua cicatrização. Os resultados revelaram que a utilização de cânulas no íleo terminal para a coleta de amostras ileais, pode ser realizada, enfatizando, contudo, a necessidade de intensivos cuidados pós-operatório. Os materiais utilizados se mostraram biocompatíveis, sendo que o material que apresentou menor incidência de reações adversas foi o alumínio. / The accurate measurement of amino acids digestibility in the small intestine is important to allow the formulation of rations that promote a great nutrition at a minimum cost and without wastes. Still today, the methods and concepts to establish the nutritional needs for the man and production animals have been applied to the dog, without the scientific validation. The objective of this study was to describe the technique for implantation of T-shaped cannula in the terminal ileum in dogs, its possible postoperative complications, as well as to evaluate the biocompatibility of cannulas made of stainless steel, aluminum and nylon. For that, it was used 12 adult dogs divided in three groups of four animals each. Group 1 received the cannula of stainless steel, group 2 the aluminum cannula and group 3 the nylon cannula. For their implantation it was made an incision in the medium third of the midline in the skin, subcutaneous tissue and white line. After, the cecum and the ileum were identified. It was made a purse-string suture in the terminal ileum. In the center of it an incision was promoted until reaching the lumen, through where the cannula was inserted. Immediately after it, the knots of the purse-string suture were completed. As reinforcement, 4 points in the intestine serous membrane were made forming an angle of 90° among them. The cannula was positioned inside the cavity, close to the abdominal wall in the place where the smaller tension would be promoted in the intestine after exteriorization. Then, a small skin incision in the flank right area was made, promoting the divulsion of the muscles until reaching the abdominal cavity, through where the central cylinder of the cannula was tractionated, exteriorizated and closed by means of a threaded cover. The results revealed edema in the immediate xiipostoperative and inflammatory reaction in the borders of the incision used for exteriorization of the cannula in the three groups. Seven animals presented serosanguinary secretion around the cannula, nine presented, in the same place, overflow of ileal content in an intermittent way. Of the ten animals that the presence of abscess was observed, six developed intense fibrosis after its cicatrisation. The results revealed that the use of cannulas in the terminal ileum for the collection of ileal samples can be accomplished, emphasizing, however, the postoperative need of intensive care. The used materials showed biocompatibility, and the aluminum presented smaller incidence of adverse reactions.