Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-07-13T16:32:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2878429 bytes, checksum: f47e247b860f8a5564344ee2ac1a7457 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T16:32:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2878429 bytes, checksum: f47e247b860f8a5564344ee2ac1a7457 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Avaliou-se o uso de diferentes protocolos de cultivo in vitro de fragmentos ovarianos de cadelas domésticas adultas em anestro, em casuística de programa de controle populacional de animais errantes no município de Viçosa MG. Após a colheita dos ovários, foram obtidos fragmentos da zona parenquimatosa de cada ovário, um dos quais foi incluído fresco como controle, e os demais incubados por 48 horas em atmosfera de 5 % de CO 2 , 95 % de umidade relativa e temperatura de 39 oC, em diferentes tratamentos: T1: cultivados em Meio Essencial Mínimo (MEM); T2: cultivados em MEM associado a Soro de Cadela prenhe (MEM + SCpre) e T3: cultivados em MEM associado a Soro de Cadela no pró-estro (MEM + SCpro). Todos os fragmentos foram fixados por imersão em solução de Karnowisky por até 24 horas e processados segundo rotina para confecção de lâminas histológicas. Estas foram avaliadas quanto ao desenvolvimento folicular, sob microscópio de luz, em aumento de 100 vezes. A análise estatística foi feita pelo teste paramétrico de comparação de médias T Student. Todos fragmentos cultivados apresentaram aumento na proporção de folículos em desenvolvimento, assim conclui-se que o meio de cultivo utilizado associado à técnica de cultivo in situ foi suficiente para promover o desenvolvimento folicular em ovários de cadelas, sendo que a suplementação hormonal com SCpro e SCpre não influenciaram na taxa de desenvolvimento. / This present study evaluated different protocols of in vitro culture from ovarian fragments of domestic female dog (Canis lupus familiaris) in anestrus. For the study, ovaries from female dogs were used, obtained from the neutering of the stray animal population control of the municipal kennel program/ Veterinary Department - Universidade Federal de Viçosa (UFV). After the ovaries were collected, random fragments of the ovary parenchymal were obtained, one of them were used fresh as control, and the rest were incubated for 48 hours in 5 % of CO2 atmosphere, 95 % of relative humidity and 39 oC temperature, in different treatments: T1 cultivated in Minimum Essential Medium (MEM); T2 cultivated in MEM associated with pregnant dog serum and T3 cultivated in MEM associated with proestrus dog serum. Those ovaries cultivated in treatments T1, T2 and T3, were fixed by Karnowisky immersion for up to 24 hours, and processed following the normal laboratorial procedures for making histological slides. They were then evaluated under light microscope, using the 100X objective lens. The statistical analysis was made by the Student T`s parametric comparison measures test. All fragments of assessed ovaries showed a proportional increase of developing follicles, concluding that the culture medium used, associated to the in situ culture technique, was enough to promote the follicle development in dog’s ovaries, being that the hormonal supplementation with proestrus serum and pregnant serum did not influence the development rate.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-11-27T17:22:07Z No. of bitstreams: 1 Andréa Mendes Pereira Ativação de celulas... 2006.pdf: 40276494 bytes, checksum: 9f4656b98e4c74bae9c81e7797e85988 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-27T17:22:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andréa Mendes Pereira Ativação de celulas... 2006.pdf: 40276494 bytes, checksum: 9f4656b98e4c74bae9c81e7797e85988 (MD5) Previous issue date: 2006 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Visando avaliar futuramente o potencial de citocinas na indução de resposta imune celular específica do tipo ThI quando associadas a antígeno(s) recombinante(s) de Leishmania chagasi/infantum no cão, a combinação de IL-2 e IL-12 caninas recombinantes é analisada no presente trabalho. Aqui, descrevemos a clonagem do DNA complementar (cDNA) e, pela primeira vez, a expressão de IL-2 canina recombinante biologicamente ativa em Escherichia coli e por células de mamífero. Para expressão em E. coli, utilizou-se a construção pRSET-calL- 2, anteriormente gerada por nosso grupo. Para expressão em células de mamíferos, foi realizada a clonagem do cDNA de IL-2, sintetizado por reação de transcrição reversa seguida de reação da polimerase em cadeia (RT-PCR) a partir do RNA total de células mononucleares do sangue periférico (CMSP) de cão estimuladas com concanavalina A (Con-A), no vetor pcDNAS.l, gerando a construção pcDNA3.1-caIL-2. O sucesso da clonagem em ambos os vetores de expressão foi confirmado a partir do sequenciamento de DNA e comparação dos resíduos de nucleotídeos com a seqüência de IL-2 canina previamente descrita por outro grupo de investigadores. A IL-2 canina recombinante (rcaIL-2) foi obtida como proteína de fiisão contendo cauda de histidina a partir da transformação de E. coli BL21(DE3)pLysS com pRSET- caIL-2, purificada por cromatografia de afinidade e renaturada por diálise. Além disso, a forma nativa de rcaIL-2 foi secretada no sobrenadante de cultura de células COS-7 transfectadas com a construção pcDNA3.1-caIL-2. A atividade proliferativa de rcaIL-2 sobre células CTLL-2 foi demonstrada em concentrações de até 220 pg/mL da citocina purificada a partir da expressão em E. coli e até a diluição de 1:256 do sobrenadante de COS-7 contendo rcaIL-2. A proteína biologicamente ativa foi capaz de manter a proliferação de CMSP de cães sadios por até 12 dias de cultivo quando as células foram tratadas com 50 ng/mL de IL-2 canina obtida de E. coli e por 10 dias com diluições de até 1:200 do sobrenadante de COS-7 contendo a citocina, na ausência de estímulo prévio ou concomitante. A proliferação foi dose-dependente, com ponto máximo ocorrendo no 8° dia de cultivo. A produção de interferon gama (IFN-y) por CMSP de cães sadios estimuladas com sobrenadante de COS-7 contendo IL-2 ou contendo IL-12 não foi significantemente maior que a produção basal. No entanto, um efeito sinérgico sobre a produção in vitro de IFN-y ocorreu quando concentrações subótimas de ambas as citocinas foram associadas. Diante dos resultados obtidos, a construção pcDNA3.1-caIL-2 e ambas as formas de IL-2 canina recombinante obtidas, assim como as condições experimentais aqui descritas, poderão ser utilizadas no futuro para o estudo do potencial de IL-2, associada ou não a IL-12, como modulador da resposta imune in vitro e in vivo de cães, durante o desenvolvimento de uma vacina ou imunoterapia para leishmaniose visceral canina. / Aiming to study in the fiiture the role of cytokines in inducing specific ThI cellular immune response when associated to Leishmania chagasi/infantum recombinant antigen(s) in dogs, the combination of recombinant canine IL-2 and IL-12 is analysed in the present study. Herein, we describe complementary DNA (cDNA) cloning and, for the first time, the expression of biologically active recombinant canine IL-2 in Escherichia coli and mammal cells. The construction pRSET-caIL-2, previously generated by our group, was used for E. coli expression. For mammalian expression, canine IL-2 cDNA was synthesized by reverse transcription followed by polymerase chain reaction (RT-PCR), using cDNA from a healthy dog’s peripheral blood mononuclear cells (PBMC) stimulated with concanavalin A (Con-A) and cloned into pcDNA3.1, generating the construction pcDNA3.1-caIL-2. Success in canine IL-2 cDNA cloning was accessed in both expression vectors by DNA sequencing and was confirmed by comparing nucleotides residues with canine IL-2 sequence previously described by other investigators. Recombinant canine IL-2 (rcaIL-2) was expressed as His-tag fiision protein after E. coli BL21(DE3)pLysS transformation with pRSET-caIL-2, purified by affinity chromatography and renatured through dialysis. In addition, the native form was secreted in culture supematants of pcDNA3.1-caIL-2 transfected COS-7 cells. A proliferative activity was demonstrated in CTLL-2 cells when the recombinant protein was diluted at 220 pg/mL of purified cytokine from E. coli expression or when COS-7 supernatant was diluted at 1:256. The biologically active protein was able to induce proliferation of PBMC of six healthy dogs until 12 days of culture when cells were treated with 50 ng/mL of E. coli expressed-IL-2 or until 10 days when treated with 1:200 COS-7 supernatant dilution containing the cytokine, without previous or concomitant stimulus. The proliferative effect was dose-dependent and maximum at 8th day of culture. Interferon-gamma (IFN-y) production by PBMC of eight healthy dogs induced by COS-7 IL-2 or IL-12-containing supematants was not significantly higher than the baseline production. However, the association of suboptimal concentrations of both cytokines induced synergistic effect upon in vitro IFN-y production by PBMC. Based on the presented results, the construction pcDNA3.1-caIL-2 or both recombinant protein forms obtained, as well as the experimental conditions described here, can be used in the future to evaluate the potential role of IL-2, associated or not to canine IL-12, as a modulator of in vitro and in vivo immune response of dogs during the development of a vaccine or immunotherapy for canine visceral leishmaniasis.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-05-10T16:21:40Z No. of bitstreams: 1 Jessica Mariane Ferreira Mendes Produção... 2016.pdf: 1965926 bytes, checksum: ac5119592b97390470f4914f6fcbddf0 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-05-10T16:21:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Jessica Mariane Ferreira Mendes Produção... 2016.pdf: 1965926 bytes, checksum: ac5119592b97390470f4914f6fcbddf0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-10T16:21:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jessica Mariane Ferreira Mendes Produção... 2016.pdf: 1965926 bytes, checksum: ac5119592b97390470f4914f6fcbddf0 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Uma vacina efetiva contra a leishmaniose visceral (LV) canina pode contribuir para o controle da doença no homem. Visando o desenvolvimento de uma vacina contra LV canina, antígenos recombinantes de L. infantum foram selecionados em nosso laboratório pelo uso de uma mistura de soros de seres humanos ou cães naturalmente infectados pela L. infantum. Alguns destes antígenos foram testados em diversos protocolos de imunização, incluindo uso de diferentes adjuvantes, em camundongos ou cães. A imunização de camundongos ou cães com um dos antígenos recombinantes (rLci2B) usado isoladamente ou em associação com saponina induziu resposta imune Th2 ou Th1/Th2, respectivamente, não protetoras contra a infecção experimental. Com a determinação da sequência deduzida de aminoácidos notou-se que a maioria dos antígenos selecionados apresenta um segmento com sequência de aminoácidos única (domínio não repetitivo) e segmentos com sequência de aminoácidos com motivos repetitivos (domínios repetitivos). Possivelmente a incapacidade dos antígenos recombinantes de induzir uma resposta imune predominantemente Th1, protetora contra a LV, seria por conta da presença de domínios repetitivos, que favorecem a apresentação antigênica por linfócitos B e, consequentemente, estimulam uma resposta imune Th2. Para avaliar o direcionamento da resposta imune pelos dois tipos de domínio, novas construções de DNA foram concebidas de modo a codificar apenas domínio(s) não repetitivo(s) ou domínio(s) não repetitivo(s) e domínios repetitivos. OBJETIVOS: Produzir quatro proteínas recombinantes com domínios não repetitivos (rLci2-NT-CT, rLci3-NT-CT, rLci10-NT e rLci12-NT-CT) e avaliar a capacidade desses polipeptídios de induzir resposta imune celular in vitro em cães assintomáticos inoculados por via dérmica com L. infantum. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram realizadas: a) a subclonagem de construções de DNA (Lci3-NT-CT, Lci10-NT e Lci12- NT-CT) em um plasmídeo apropriado para expressão em Escherichia coli, b) a determinação de condições apropriadas para produção das proteínas recombinantes (rLci2-NT-5R-CT, rLci2-NT-CT, rLci3-NT-2R-CT, rLci3-NT-CT, rLci10-NT-2R e rLci10- NT) c) a purificação das proteínas recombinantes por cromatografia de afinidade e d) avaliação da capacidade dos polipeptídios de induzir estimulação de células mononucleares sangue periférico (PBMC) de cães assintomáticos inoculados por via dérmica com L. infantum. RESULTADOS: Três (rLci2-NT-CT, rLci2-NT-5R-CT, rLci3- NT-CT, rLci3-NT-2R-CT, rLci10-NT e rLci10-NT-2R) dos quatro pares de polipeptídios recombinantes foram expressos, produzidos e purificados. Três antígenos recombinantes (rLci2-NT-5R-CT, rLci2-NT-CT e rLci3-NT-2R-CT) promoveram a linfoproliferação in vitro utilizando PBMC de cães assintomáticos inoculados por via dérmica com L. infantum CONCLUSÕES: Três das seis proteínas produzidas induziram a linfoproliferação, sendo a maior linfoproliferação encontrada para PBMC estimulado com a proteína sem domínios repetitivos (rLci2-NT-CT). Avaliações adicionais são necessárias para comprovar a utilidade destas moléculas em formulação de vacina contra leishmaniose visceral canina. / An effective vaccine against visceral leishmaniasis (VL) dog can help to control the disease in man. Aiming at development of a vaccine against canine VL, recombinant antigens of L. infantum were selected in our laboratory by using a mixture of sera from humans or dogs naturally infected with L. infantum. Some of these antigens were tested in different immunization protocols, including use of different adjuvants in mice or dogs. The immunization of mice or dogs with a recombinant antigens (rLci2B) used alone or in combination with saponin induced Th2 response or Th1 / Th2, respectively, did not protective against experimental infection. With the determination of the deduced amino acid sequence it was noted that most of the antigens selected segment has a unique amino acid sequence (non-repetitive domain) and segments of amino acid sequence with repetitive motifs (repetitive domains). Possibly the inability of recombinant antigens to induce an immune response predominantly Th1 protective against LV would be due to the presence of repetitive domains that promote antigen presentation by B cells and thus stimulate an immune response Th2. To assess the direction of the immune response by two types of domain, new DNA constructs were designed to encode only the domain (s) not repetitive (s) or domain (s) not repetitive (s) and repetitive fields. MATERIALS AND METHODS: Were performed: a) subcloning DNA constructs (rLci3-NT-CT, rLci10-NT and rLci12-NT-CT) into a suitable plasmid for expression in Escherichia coli, b) determining the appropriate conditions for the production of proteins recombinant (rLci2- NT-5R-CT, rLci2-NT-CT, rLci3-NT-2R-CT, rLci3-NT-CT, rLci10-NT-2R and rLci10-NT) c) purification of recombinant proteins by chromatography affinity d) evaluating the ability of polypeptides rLci2-NT-CT, rLci3-NT-CT and rLci10-NT to induce stimulation of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from healthy dogs inoculated dermal with L. infantum. RESULTS: Three (rLci2-NT-CT, rLci2-NT-5R-CT, rLci3-NT-CT, rLci3-NT-2R-CT, rLci10- NT and rLci10-NT-2R) of the four pairs of recombinant polypeptides are expressed, produced and purified. Three recombinant antigens (rLci2-NT-5R-CT, rLci2-NT-CT and rLci3-NT-2R-CT) promoted lymphocyte proliferation in vitro using asymptomatic dogs PBMC inoculated dermal L. infantum CONCLUSIONS: Three of the six proteins produced induced lymphoproliferation, most lymphoproliferation was found to PBMC stimulated with the protein without repetitive domains (rLci2-NT-CT). Additional evaluations are necessary to confirm the utility of these molecules against canine visceral leishmaniasis vaccine formulation

As gorduras são componentes importantes em dietas para carnívoros, porém o aproveitamento pelos animais sofre influência de fatores inerentes à composição das dietas, principalmente fibras e minerais, que precisam ser melhor estudados. Os trabalhos que avaliam as perdas endógenas de gordura nas fezes (PEGF) e os efeitos na digestibilidade aparente da gordura são escassos e divergentes. Desta forma, os objetivos destes estudos foram: determinar as PEGF em cães e mink; utilizar as PEGF para obtenção dos valores de digestibilidade verdadeira da gordura; além de avaliar os efeitos da composição de fibras dietéticas e a inclusão de emulsificantes no aproveitamento da gordura por cães. No primeiro estudo, as PEGF foram mensuradas em cães adultos. Dietas com níveis crescentes de gordura de frango foram utilizadas e as PEGF dos cães foram determinadas a partir de análises de regressão. As PEGF foram expressas em relação ao peso corporal (PC) dos animais, 155 mg/kg PV/dia, ou em relação ao consumo de gordura na matéria seca (MS), 7,9 g/kg MS consumida. A digestibilidade aparente total da gordura apresentou aumento conforme o consumo. A digestibilidade verdadeira total da gordura, corrigida para PEGF, não variou mediante o consumo de gordura. A relação entre PEGF e consumo de gordura foi maior em dietas com baixa gordura e explica o aumento na digestibilidade aparente da gordura quando concentrações maiores são consumidas. No segundo estudo, as PEGF foram determinadas em mink. Dietas com níveis crescente de óleo de soja foram formuladas e as PEGF avaliadas por regressão. Foi obtido o valor de 0,5 g/100g MS consumida, próximo ao relatado em cães. No terceiro estudo foi avaliada a influência das fibras dietéticas e da lecitina de soja na digestibilidade aparente da gordura em dietas para cães adultos. Foram avaliadas três fontes de carboidratos, amido de milho, celulose e polpa de beterraba, combinadas ou não à lecitina de soja. A polpa de beterraba reduziu a digestibilidade aparente e verdadeira da gordura em cães, aumentou o teor de umidade e elevou o escore fecal, porém ainda dentro da faixa considerada ideal. A lecitina de soja não apresentou efeito de melhora na digestibilidade dos macronutrientes e da energia das dietas. / Fats are important components of carnivores diets, however inherent factors of diets composition, mainly fibers and minerals, may affect its use by the animals, requiring further studies. Studies evaluating endogenous fat loss (EFL) and the effects on apparent total tract digestibility of fat are limited and divergent. The objectives of these studies were: to determine the EFL in dogs and mink; apply the EFL to calculated the true total tract digestibility of fats; and to evaluate the effects of dietary fiber composition and an emulsifying agent on fats digestibility in dogs. On the first study, the EFL was evaluated in adult dogs. Diets with increasing levels of poultry fat were used and the EFL was determined by regression analysis. The EFL was obtained according to the dogs’ body weight (BW) as 155 mg/kg BW/day, or according to dry matter (DM) fat intake, as 7.9 g/kg DM intake. The apparent total tract digestibility of fat increases according to the intake level. However, the true total tract digestibility of fat, EFL corrected, remained unaffected by fat intake. The relation between EFL and fat intake is higher for low fat diets and explains why the apparent digestibility increases according to intake. On the second study, the EFL was measured in mink. Diets with graded levels of soybean oil were offered and the EFL evaluated by regression. The value of 0.5 g/100 g DM intake was obtained, close to the reported with dogs. The third study assessed the influences of dietary fibers and soy lecithin on apparent total tract digestibility of fat in adult dog diets. Were evaluated three carbohydrate sources; corn starch, cellulose and beet pulp; combined or not with soy lecithin. The beet pulp decreased apparent and true total tract digestibility of fat in dogs, increased the moisture level of faeces and the faecal score, yet the faeces still had good quality. The soy lecithin did not improve digestibility of macronutrients and energy of diets.

A produção da farinha de penas hidrolisadas (FPH) está atrelada a produção de carne de frango. O processo da FPH é a hidrólise térmica, o que pode reduzir a disponibilidade de aminoácidos (aa) essências devido à alta temperatura e pressão que as penas são submetidas. O uso de micro-organismos (MIC) para hidrólise pode ser uma alternativa vantajosa por minimizar essas perdas. Foram conduzidos três experimentos com o objetivo de avaliar a capacidade de degradação das penas por MIC, o coeficiente de digestibilidade aparente (CDA) das classes nutricionais e energia. Também avaliar as características fecais e urinárias em cães alimentados com dietas contendo FPH por micro-organismo Bacillus subtilis (FPHm) ou maneira convencional (FPHc) e a palatabilidade da FPHm. No experimento 1, foram realizadas hidrólises in vitro de penas, utilizando quatro cepas de MIC diferentes e blend enzimático, foram determinados o fator de degradação, o teor de proteína solúvel, a digestibilidade in vitro e aa livres. No experimento 2, determinou-se CDA das dietas experimentais com inclusão por cobertura de 10% de FPHm ou FPHc sobre a dieta basal e a influência nas características fecais e urinárias, além da observação da resistência dos Bacillus subtilis ao passar pelo trato gastrointestinal (TGI) No terceiro experimento, foi realizado teste de palatabilidade, utilizando o método “two-pan” com as mesmas dietas testadas no experimento 2. Os resultados do experimento 1 indicaram que os MIC utilizados tiveram capacidade de degradar as penas e de melhorar a solubilidade proteica quando as penas foram adicionadas em concentrações de 5 e 8%. No experimento 2, os CDA da matéria seca (MS), PB e energia foram menores para a dieta contendo 10% de FPHm (P < 0,05). Apesar de não haver diferença entre os tratamentos para densidade urinária, pH urinário e fecal e escore fecal (P > 0,05), os animais que consumiram dietas com FPHm produziram maior quantidade de fezes (MS) diárias (P < 0,05). Os valores de energia digestível para FPHm e FPHc foram 2.198 e 4.443 kcal/kg, respectivamente. Foi possível verificar maior presença de Bacillus sp. nas fezes dos cães que receberam FPHm, demonstrando que os MIC sobreviveram ao TGI. No experimento 3, a inclusão da FPHm melhorou significativamente a palatabilidade nas dietas para cães adultos (P < 0,05). / The production of hydrolyzed feather meal (FPH) is linked to the production of chicken meat. The process of FPH is thermal hydrolysis, which may reduce the availability of amino acids (aa) essences due to the high temperature and pressure that the feathers are subjected to. The use of microorganisms (MIC) for hydrolysis may be an advantageous alternative to minimize such losses. Three experiments were carried out with the objective of evaluating feather degradability by MIC, the apparent digestibility coefficient (CDA) of the nutritional and energy classes, and to evaluate fecal and urinary traits in dogs fed diets containing FPH by microorganism Bacillus subtilis (FPHm) or conventional manner (FPHc) and the palatability of FPHm. In experiment 1, in vitro hydrolyses of feathers were performed, using four different MIC strains and enzymatic blend, and the degradation factor, soluble protein content, in vitro and free digestibility were determined. In Experiment 2, CDA was determined from the experimental diets with inclusion of 10% FPHm or FPHc on the basal diet and the influence on fecal and urinary traits, as well as the observation of Bacillus subtilis resistance when passing through the gastrointestinal tract (TGI) In the third experiment, a palatability test was performed using the two-pan method with the same diets tested in experiment 2. The results of experiment 1 indicated that the MICs used had the ability to degrade feathers and to improve protein solubility when the feathers were added in concentrations of 5 and 8%. In experiment 2, CDA of dry matter (DM), CP and energy were lower for the diet containing 10% FPHm (P <0.05). Although there was no difference between the treatments for urinary density, urinary and fecal pH and fecal score (P> 0.05), the animals that consumed diets with FPHm produced a greater amount of feces (P <0.05). The digestible energy values for FPHm and FPHc were 2,198 and 4,443 kcal / kg, respectively. It was possible to verify greater presence of Bacillus sp. in the faeces of the dogs that received FPHm, demonstrating that the MICs survived the TGI. In experiment 3, the inclusion of FPHm significantly improved palatability in diets for adult dogs (P <0.05)

Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2016-05-09T19:10:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Grasiele Bonadiman.pdf: 3637833 bytes, checksum: 9c919dca44b71050b2c6cbe78d9a59a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2016-06-06T12:34:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Grasiele Bonadiman.pdf: 3637833 bytes, checksum: 9c919dca44b71050b2c6cbe78d9a59a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-06T12:34:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Grasiele Bonadiman.pdf: 3637833 bytes, checksum: 9c919dca44b71050b2c6cbe78d9a59a6 (MD5) / Possíveis associações entre doença periodontal (DP) e alterações cardiovasculares em cães, como a endocardite infecciosa (EI), são relatadas na literatura, apesar de ainda não comprovadas. Fármacos anestésicos, utilizados para a tratamento periodontal (TP), podem levar à hipotensão, redução do fluxo sanguíneo coronariano e isquemia miocárdica. A determinação de biomarcadores, especialmente a troponina I cardíaca (TnIc), pode ser utilizada para a detecção de lesão miocárdica tanto em casos de EI, quanto por efeitos de fármacos anestésicos. Objetivou-se avaliar os níveis séricos de TnIc em cães com DP, como um indicador de EI, anestesiados para TP, com e sem o uso de antibióticos. Utilizou-se 24 cães com DP, sem evidências de outras doenças sistêmicas, selecionados por meio de avaliação física, laboratorial e cardiovascular. Formou-se três grupos de 8 cães cada: grupo I (controle) – cães anestesiados; grupo II - cães anestesiados submetidos a TP, não tratados com antibióticos; grupo III - cães anestesiados submetidos a TP, tratados com antibióticos. Os cães foram sedados com meperidina e acepromazina, induzidos com propofol e mantidos com isoflurano em oxigênio. Dosagens de TnIc foram realizadas imediatamente antes e 24 horas após o TP, com kit comercial pelo método de ELISA. A análise estatística foi realizada por meio do teste de "D'Agostino & Pearson", teste t para comparação de duas médias e teste post hoc de comparação múltipla de Tukey, após a análise de variância. Não houve diferença significativa nas dosagens de TnIc entre os grupos, nem entre os momentos avaliados (p>0,05). Conclui-se que não há aumento de TnIc em cães com DP após o TP, submetidos ou não a antibioticoterapia, podendo sugerir que não houve o desenvolvimento de EI; e não há aumento de TnIc em cães saudáveis submetidos ao protocolo anestésico estipulado. / Associations between periodontal disease (PD) and cardiovascular changes in dogs, such as infeccious endocarditis (IE), are reported by literature, although no evidences between them are verified. Anesthetic drugs, used for periodontal treatment (PT), can lead to hypotension, reduction of coronary blood flow and myocardial ischemia. Determination of biomarkers, especially cardiac troponin I (cTnI) can be used for the detection of myocardial injury in both cases: endocarditis and the effects of anesthetic drugs. This study aimed to evaluate canine cTnI in dogs with PD, as an indicator of IE, after PT, with and without using antibiotics. It was used 24 dogs with PD, with no evidence of any other systemic diseases. They were selected by physical examination, laboratory and cardiovascular evaluation and were divided into three groups: group I (n=8; control) - anesthetized dogs, group II (n=8) - anesthetized dogs submited to PT, not treated with antibiotics, group III (n=8) - anesthetized dogs submited to PT, treated with antibiotics. The dogs were sedated with acepromazine and meperidine, induced with propofol and maintained with isoflurane in oxygen. Canine cTnI dosages were taken immediately before and 24 hours after PT, using commercial kit (ELISA). Statistical analysis were performed by using "D'Agostino & Pearson" normality test, unpaired t test to compare two samples and Tukey´s post hoc test for multiple comparisons. All tests were performed at a level of significance of 0.05 No significant differences were found between groups or in different moments (p>0.05). It was concluded that there is no increased cTnI in dogs with PD after PT, treated or not with antibiotics, suggesting that there was no development of IE, and there is no increase in canine cTnI in healthy dogs anesthetized using this protocol.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-03-28T04:11:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 344594.pdf: 1940097 bytes, checksum: 444c6d2915733953b495dddb37f6fb71 (MD5) Previous issue date: 2016 / No contexto das doenças negligenciadas no Brasil, a Leishmaniose Visceral (LV) é responsável pela redução da expectativa de vida, especialmente em populações socialmente marginalizadas e imunologicamente comprometidas. O avanço da urbanização da LV e o aumento da coinfecção com HIV, tornou essa antropozoonose uma doença emergente. Com a confirmação dos primeiros casos autóctones de leishmaniose visceral canina (LVC) no distrito da Lagoa da Conceição em Florianópolis, Santa Catarina, em 2010, o município passou a integrar o mapa de transmissão da doença. Sendo assim, o presente trabalho objetivou um estudo soroepidemiológico de leishmaniose visceral na população canina de 6 localidades de Florianópolis (Itacorubi, Córrego Grande, Barra da Lagoa, Saco Grande, Ratones e Rio Tavares), adjacentes à área do foco inicial. O protocolo oficial TR-DPP®/ELISA Biomanguinhos/FIOCRUZ foi utilizado para detecção da infecção por Leishmania infantum em amostras de soro de 567 cães. A análise dos dados foi feita mediante estatística descritiva a partir das informações armazenadas em planilhas de Excel® e os dados gerados foram integrados ao banco de dados do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) e da Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC). A reatividade sorológica foi comprovada por ambas as técnicas em 3,35% dos cães (19/567). 42% (8/19) dos cães soropositivos foram eutanasiados e destes foi realizada a coleta de material biológico para isolamento do parasito em cultura e confirmação do diagnóstico parasitológico e/ou molecular. As amostras isoladas foram identificadas por meio de PCR-RFLP e hibridização com sondas espécie-específica. Dos 8 cães eutanasiados, 50% (4/8) eram assintomáticos do ponto de vista clínico. Todos os animais tiveram a confirmação do diagnóstico pelos métodos parasitológico e molecular, sendo identificado L. infantum como o agente infectante pela técnica de hibridização. A confirmação de casos autóctones de LVC em localidades que extrapolam as áreas anteriormente investigadas mostra a expansão da doença no município de Florianópolis e requer o desenvolvimento e adoção de políticas públicas mais ostensivas para a prevenção e controle da doença.<br> / Abstract : Among the neglected diseases in Brazil, Visceral Leishmaniasis (VL) is responsible for the reduction in life expectancy, especially for socially marginalized populations and immunologically compromised patients. The increasingly urbanization of VL and the co-infection with HIV turns this anthropozoonosis an emerging infectious disease. Upon the first autochthonous cases of canine visceral leishmaniasis (CVL) at Lagoa da Conceição district in the city of Florianopolis, Santa Catarina state, in 2010, the city was considered as a new area of transmission of the disease. The present study carried out a seroepidemiological survey of CVL in six districts of Florianópolis (Itacorubi, Córrego Grande, Barra da Lagoa, Saco Grande, Ratones and Rio Tavares), that are contiguous to Lagoa da Conceição. The official protocol using TR-DPP® and ELISA for detection of Leishmania infantum infection was applied to 567 serum samples. Data analysis was performed via descriptive statistics that was then integrated to the Zoonosis Control Center (CCZ) and Federal University of Santa Catarina (UFSC) databases. Positive reactions confirmed by both techniques were obtained for 3.35% of the dogs (19/567), among which, eight were euthanized and submitted to diagnostic confirmation via parasitological and/or molecular techniques. Molecular identification of isolated Leishmania sp. samples was performed by PCR-RFLP following hybridization with species-specific probes. Infection of all dogs by L. infantum was confirmed by parasitological and molecular methods, among which, four (50%) were clinically asymptomatic. The seroprevalence and the confirmation of these autochthonous cases of LVC in the studied districts indicates the spreading potential of the disease in the city of Florianópolis, indicating the needs to implement and adoption of effective public policies for the prevention and control of disease.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Ciência da Computação. / Made available in DSpace on 2012-10-20T00:28:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 184716.pdf: 774504 bytes, checksum: a74ea1df88e677529de5e6099f47ea3d (MD5) / Neste trabalho foi desenvolvido um Sistema Especialista para Primeiros Socorros para Cães (SEPRISCA) que servirá não só como um "especialista virtual" aos proprietários de cães, mas também, como uma "memória adicional" aos médicos veterinários, interagindo com o usuário numa linguagem natural de perguntas e respostas, auxiliando-os nos primeiros socorros, de forma a amenizar ou resolver o problema. Primeiramente serão abordados conceitos de Inteligência Artificial, incluindo Sistemas Especialistas (será conceituado de que se trata); Representação do Conhecimento, Mecanismos de Raciocínio. Após, sobre Sistemas Especialistas; serão apresentadas: Ferramentas de Implementação e o sistema SEPRISCA que foi desenvolvido desde a criação de regras até a consulta. Por fim, faz-se uma breve análise dos resultados obtidos como término desse trabalho, ressaltando os pontos mais significativos encontrados no decorrer de seu desenvolvimento. O médico veterinário em seu trabalho utiliza uma série de instrumentos indo desde o termômetro e estetoscópio até novos aparelhos de ultrasom sem lesar a sensível audição dos animais. Pretende-se que o presente trabalho seja o protótipo de um sistema computadorizado que possa ser útil à decisão médica veterinária e forneça aos proprietários uma impressão diagnóstica que os permita esperar a chegada do veterinário, eventualmente ocupado em outro atendimento.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Ciência da Computação. / Made available in DSpace on 2012-10-19T09:14:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T00:13:40Z : No. of bitstreams: 1 184277.pdf: 2005713 bytes, checksum: f94df82c9f3123b0842bf3382238dc38 (MD5) / A inteligência artificial é uma área da ciência da computação que estuda diversas maneiras de fazer a máquina trabalhar de forma inteligente. Falando em inteligência, logo nos vem a mente a capacidade de pensar, aprender, discernir, interpretar, coisas que até então só o homem tem o privilégio de fazer. Neste trabalho foi conceituada a área da Inteligência Artificial segundo o trabalho e concepção de vários autores. Também trabalhou-se de modo a entender sua história e evolução, as primeiras idéias em torno do tema; depois falou-se dos vários domínios de aplicação da Inteligência Artificial, tais como: Resolução de Problemas, Processamento Linguagem Natural, Sistemas Especialistas, Aprendizagem, Robótica e Visão. Após comparação das diferentes aplicações na Intelgência Artificial, suas características e campos de atuação deu-se mais ênfase ao desenvolvimento de software na IA, mas especificamente S.E que são softwares que atendem a um determinado domínio. Assim grande parte deste trabalho destina-se a entender o conceito, aplcação e desenvolvimento de S.E, desde a concepção até a implementação de um Sistema Especialista para primeiros socorros de animais domésticos (cães).

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:02:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-15. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:41Z : No. of bitstreams: 1 000849663.pdf: 1482863 bytes, checksum: 89948dbc8249f1e5c3c2b93390d4c7fe (MD5) / A doença mixomatosa da valva mitral (DMVM) é a enfermidade cardíaca mais frequente em cães. Embora as estratégias de tratamento mudem de acordo com o estágio da doença, programas de exercício não integram a terapia padrão da enfermidade. Em seres humanos já se demonstrou que o treinamento apropriado pode ser, inclusive, benéfico como adjuvante do tratamento de algumas enfermidades cardiovasculares. Nesse sentido, objetivou-se com este estudo avaliar os efeitos promovidos pelo condicionamento sistematizado em esteira em cães portadores de DMVM. Para tanto, 19 cães foram selecionados em quatro grupos conforme a severidade da enfermidade (fundamentada no tamanho da relação átrio esquerdo/aorta - Grupo A: controle; Grupo B: Ae/Ao<1,4; Grupo C: Ae/Ao1,4-1,8; e, Grupo D: Ae/Ao>1,8). O teste de esforço incremental foi realizado para detecção do limiar de lactato. Na sequência, foram realizadas oito semanas consecutivas de condicionamento, com base em 70% da velocidade do limiar de lactato. Os animais foram avaliados quanto à variabilidade da frequência cardíaca, além da dinâmica miocárdica, por meio de ecocardiografia convencional e tecidual. Foi empregado o teste de normalidade dos resíduos e análise de variância, seguida do teste de Tukey para comparação das médias dos diversos parâmetros estudados. As análises estatísticas foram realizadas com nível de significância de 5%. A análise estatística multivariada exploratória foi utilizada para a extração dos fatores, segundo critério de Kaiser. Os resultados de ecocardiografia demostraram aumento do diâmetro interno do ventrículo esquerdo em diástole, oito semanas após o condicionamento na comparação com avaliação inicial no grupo C, assim como, aumento do septo interventricular em sístole quatro semanas e oito semanas em relação ao valor basal no grupo A. Os valores da variabilidade da frequência cardíaca revelaram uma redução do desvio... / The myxomatous mitral valve disease (MMVD) is the most common heart disease in dogs. Although treatment strategies change according to the stage of the disease, exercise programs are not part of the standard therapy of the disease. In human beings, it has been demonstrated that proper training can be beneficial as adjunctive treatment of certain cardiovascular diseases. This study evaluated the effects of systematic training on a treadmill in dogs with MMVD. Nineteen dogs were selected and divided into four groups according to the severity of illness (based on the size of the left atrium-to-aorta ratio - Group A: control; Group B: LA/Ao<1.4; Group C: LA/Ao 1.4 to 1.8, and Group D: LA/Ao>1.8). The incremental exercise test was performed to detect the lactate threshold. Eight consecutive weeks of training were performed based on 70% of the lactate threshold velocity. The animals were evaluated for the heart rate variability, as well as myocardial dynamics, by standard and tissue Doppler echocardiography. Test for residual normality, analysis of variance, and Tukey's test were all used to compare the means of several parameters. Statistical analyses were performed at a level of significance of 5%. Exploratory multivariate statistical analysis was used for the extraction of factors, according to the Kaiser criteria. The echocardiography results showed increased left ventricular internal diameter in diastole eight weeks after training as compared to the baseline value in group C, as well as an increased interventricular septum in systole at four weeks and eight weeks as compared to the baseline value in group A. Heart rate variability data revealed a reduction in standard deviation of all RR intervals (SDNN) in C and D groups in comparison with group A at baseline. Also, after two and four weeks of training significant differences were found to exist between all groups compared to group A. From standard deviations of the mean values of ...