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Atividade antimicrobiana in vitro do extrato etanólico de Caesalpinia ferrea Mart. (Leguminosae)

FARIAS, Eulina Tereza Nery 24 May 2013 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-05-25T12:29:49Z No. of bitstreams: 1 Eulina Tereza Nery Farias.pdf: 655813 bytes, checksum: 0ff12376ca924b2b3be76f15875d198f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-25T12:29:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eulina Tereza Nery Farias.pdf: 655813 bytes, checksum: 0ff12376ca924b2b3be76f15875d198f (MD5) Previous issue date: 2013-05-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conjunctivitis can compromise the integrity of the eye and produce significant tissue destruction. Knowledge of the causative agent and progression of the disease, including the establishment of an effective and consistent treatment will influence the prognosis and evolution of this disease. The usual treatment is antibiotic therapy, but long term use of topic antimicrobials can result in multidrug resistance of pathogenic bacteria and/or fungi. The aim of this study was to evaluate the "in vitro" antimicrobial activity of the raw ethanolic extract of Caesalpinia ferrea, and determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against bacterial agents collected from dogs with conjunctivitis from our routine ophthalmology ambulatory services, and evaluate the sensitivity profile of these strains to ciprofloxacine, a commonly used antimicrobial in veterinary medical clinic, and the plant extract. Phytochemical tests confirmed the presence of bioactive compounds (flavonoids and hydrolysable tannins), that demonstrated significant antimicrobial activity against Gram-positive Staphylococcus sp. and Streptococcus sp. Antibiogram evaluation by disc diffusion method confirmed that all strains were sensitive to the C. ferrea extract, with inhibition zones ranging 8 to 24 mm when compared to standard antibiotic with zones with 0 to 35 mm. This demonstrated the viability of ethanol extract the C. ferrea as a natural antimicrobial agent and the possibility of its use as a therapeutic option for biological tests in vivo and as a complementary treatment for conjunctivitis in dogs. / A conjuntivite pode ameaçar a integridade do olho e produzir destruição tecidual significativa. O conhecimento do agente causador do processo e progressão da doença, bem como estabelecimento de tratamento coerente eficaz, influencia na evolução e prognóstico da doença. O tratamento usual é a antibioticoterapia, porém o uso prolongado de antimicrobianos de uso tópico pode resultar em multirresistência de bactérias patógenas e/ou fungos. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana “in vitro” do extrato bruto etanólico de Caesalpinia ferrea (pau-ferro), frente a isolados clínicos de bactérias causadoras de conjuntivite em cães e a Concentração Inibitória Mínima (CIM) avaliando-se o perfil de sensibilidade dessas cepas frente à ciprofloxacina, antimicrobiano usado rotineiramente na clinica médica veterinária e o extrato da planta. Testes fitoquímicos comprovaram a presença de flavonoides e taninos hidrolisáveis, que apresentaram atividade antimicrobiana frente às bactérias Gram-positivas Staphylococcus sp. e Streptococcus sp.. O antibiograma foi avaliado pelo método de poço e disco-difusão, e todas as cepas mostraram-se sensíveis ao extrato de C. ferrea, com halos de inibição de 8 a 24 mm, quando comparados ao antibiótico padrão, o qual apresentou halos inibitórios de 0 a 35 mm, demonstrando a viabilidade do uso do extrato etanólico de C. ferrea como antimicrobiano natural, sendo uma possível opção terapêutica para ensaios biológicos in vivo, no tratamento complementar da conjuntivite em cães.
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Estudo morfológico e morfométrico de gônadas da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas a tratamentos hormonais com 17 metil testosterona e β – estradiol.

SOARES, Maria Goretti 28 February 2012 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-02T14:58:15Z No. of bitstreams: 1 Maria Goretti Soares.pdf: 1480730 bytes, checksum: 0e5f87ec90760f36d90872b5ba99c551 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T14:58:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Goretti Soares.pdf: 1480730 bytes, checksum: 0e5f87ec90760f36d90872b5ba99c551 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The global aquaculture is growing faster than any other activity of the primary sector. The Brazil has extremely favorable conditions for fish farming, in addition to the great market potential, the country has favorable climate, good availability of areas, large crops of grain and enviable water potential. Tilapia are native to Africa and Asia Minor. About 70 species are taxonomically classified. The tilapia is widely distributed throughout Brazil and is created in various production systems. The development and intensification of farming are dependent on the successful control and manipulation of some physiological functions, among them, playing. In recent years, research has focused on the demand for reliable methods of producing progeny of individuals of one sex. The most practical technique of obtaining populations monosex tilapia is handling the phenotypic sex of the fish by treatment with sex steroids. This study aimed to evaluate the performance of gonadal growth of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) in the first 30 days and final fattening phase; fed with added hormones  -17 methyl testosterone and β - estradiol, used to induce phenotypic sex reversal as well as perform morphological study of the gonads of male and female populations, not undergoing hormonal treatment. The experiment was conducted on the basis of the fish UFRPE and Laboratory of Histology DMFA / UFRPE. A total of 400 adults and 30 larvae of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). The larvae were divided into 03 distinct groups: Group T1: 100 animals fed with commercial feed with added β - estradiol (20 mg / kg). T2: 100 animals fed with commercial feed with added 17 -  - methyltestosterone (60 mg / kg) Control Group (CG): 200 animals fed with commercial diet free of additives. Mice from all groups were fed five times a day for 35 days. The adults were cultured for 24 weeks in tanks fed diet added network of hormones in the first 30 days and commercial diet free of additives and specific to each stage of cultivation in the later stages. The histological material was collected, processed and analyzed according to the usual methods for routine histology. Statistical analyzes were applied ANOVA Tukey.c / A aquicultura mundial está crescendo mais rápido do que qualquer outra atividade do setor primário. O Brasil reúne condições extremamente favoráveis à piscicultura, além do grande potencial de mercado, o país conta com clima favorável, boa disponibilidade de áreas, grandes safras de grãos e invejável potencial hídrico. As tilápias são nativas do continente africano e da Ásia menor. Cerca de 70 espécies estão taxonomicamente classificadas. A tilápia está amplamente distribuída pelo território brasileiro e é criada nos mais diversos sistemas de produção. O desenvolvimento e a intensificação da piscicultura são dependentes do sucesso no controle e manipulação de algumas funções fisiológicas e, dentre elas, a reprodução. Nos últimos anos, as pesquisas têm se voltado para a procura de métodos confiáveis de produção de progênies de indivíduos de um determinado sexo. A técnica mais prática de se obter populações monosexo de tilápias é a manipulação do sexo fenotípico do peixe, pelo tratamento com esteróides sexuais. O presente trabalho teve por objetivo, avaliar o desempenho do crescimento gonadal da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) nos primeiros 30 dias de vida e fase final de engorda; alimentadas com rações adicionadas dos hormônios -17 metil testosterona e β – estradiol, utilizados para indução da reversão sexual fenotípica, bem como realizar estudo morfológico das gônadas de populações de machos e fêmeas, não submetidos a tratamento hormonal. O experimento foi realizado na base de piscicultura da UFRPE e no Laboratório de Histologia do DMFA/UFRPE. Foram utilizadas 400 larvas e 30 adultos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). As larvas foram divididas em 03 grupos distinto :Grupo T1: 100 animais alimentados com ração comercial adicionada de β – estradiol (20 mg/kg). Grupo T2: 100 animais alimentados com ração comercial adicionada de 17 -  - metiltestosterona (60 mg/kg) Grupo Controle (GC): 200 animais alimentados com ração comercial livre de aditivos. Os animais de todos os grupos foram alimentados 5 vezes ao dia, durante 35 dias. Os adultos foram cultivados por 24 semanas em tanques rede recebendo ração adicionada de hormônios nos primeiros 30 dias e ração comercial livre de aditivos e específica para cada fase de cultivo nas fases seguintes. O material histológico foi, coletado, processado e analisado de acordo com os métodos usuais de rotina para histologia. Para análise estatística foram aplicados os testes de ANOVA de Tukey.
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Desenvolvimento e avaliação de um teste ELISA indireto para o diagnóstico sorológico do mormo em equídeos

TELES, José Andreey Almeida 13 February 2012 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-08T14:30:49Z No. of bitstreams: 1 Jose Andreey Almeida Teles.pdf: 1056555 bytes, checksum: 1cd9d8325b9ce830ca450c9fea318bad (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-08T14:30:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jose Andreey Almeida Teles.pdf: 1056555 bytes, checksum: 1cd9d8325b9ce830ca450c9fea318bad (MD5) Previous issue date: 2012-02-13 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Glanders is an infectious-contagious disease of acute or chronic character which principally affects horses, causing enormous losses in the productive chain of this animal. To control the disease, the Ministry of Agriculture, Husbandry and Supply instituted mandatory sanitation measures in the entire national territory which include an official diagnosis through the complement fixation (CF) test, maleinization and sacrifice of the animals that are positive. Nowadays the kits used for the diagnosis of the disease are imported, making their routine application difficult and more expensive. The objective of this study was to standardize an indirect ELISA test, using the proteic extract of Burkholderia mallei isolated from a carrier horse in the state of Pernambuco. The samples were cultivated in 10% blood agar and incubated for 48h at 37ºC; later, one of the isolated colonies was characterized phenotypically and genotypically and immediately cultivated in brain heart infusion (BHI) for enrichment; then it was peaked (repicada) for the Dor-set Henley medium which was incubated at 37ºC under 60rpm for eight weeks. To standardize the test the Protein G Peroxidase Sigma Conjugate was used in the dilution of 1:90.000, with serums diluted in 1:100 and the antigen in 1:400. Sixty serums were used as negative controls, tested before the CF to determine the cutting point which was 0.042nm. After establishing the standardization, 300 samples were tested, of which 99% (297) were in agreement with the results obtained in the CF. At the end, of assay presented 100% sensibility and 98.2% specificity, with predictive (preditivo) positive and negative values of 97.7% and 100% respectively. The Kappa concordance test was 0.98 and the intra and interplac repeatability were 8.8% and 10.3% respectively. From the results obtained, it is possible to affirm that the indirect ELISA test can be used as an efficient diagnosis tool. However, more essays must be carried out to consolidate the reliability of this test. / O mormo é uma enfermidade infecto-contagiosa de caráter agudo ou crônico que acomete principalmente os equídeos, causando enormes prejuízos na cadeia produtiva do cavalo. Para controlar a enfermidade, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento instituiu medidas sanitárias obrigatórias em todo território nacional que incluem o diagnóstico oficial pela fixação do complemento (FC), maleinização e sacrifício dos animais positivos. Os kits atuais utilizados no diagnóstico da doença são importados, dificultando e encarecendo sua aplicação na rotina. Objetivou-se com este estudo padronizar um teste de ELISA indireto utilizando o extrato protéico de Burkholderia mallei isolada a partir de equídeo portador no estado de Pernambuco. As amostras foram cultivadas em ágar sangue 10%, incubada por 48h a 37ºC; posteriormente caracterizou-se fenotípica e genotipicamente uma das colônias isoladas, e em seguida a cultivou em BHI para enriquecimento; logo após, esta foi repicada para o meio Dor-set Henley o qual foi incubado a 37ºC sob 60rpm por oito semanas. Para padronização do teste utilizouse o conjugado Proteína G Peroxidase Sigma na diluição de 1:90.000, com soros diluídos em 1:100 e o antígeno em 1:400. Utilizou-se 60 soros como controle negativo testados frente à FC para determinação do ponto de corte o qual ficou em 0,042nm. Feitas as padronizações, foram testadas 300 amostras, onde 99% (297) foram concordantes com os resultados obtidos na FC. Ao final, o ensaio apresentou 100% de sensibilidade e 98,2% de especificidade, com valores preditivo positivo e negativo de 97,7% e 100% respectivamente. O teste de concordância kappa foi 0,98 e a repetibilidade intra e interplaca ficaram em 8,8% e 10,3% respectivamente. Diante dos resultados obtidos durante os ensaios, atesta-se que o teste de ELISA indireto pode ser utilizado como uma ferramenta de diagnóstico eficiente. Entretanto, mais ensaios devem ser realizados visando consolidar a confiabilidade do referido teste.
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Análise epidemiológica da infecção pelo herpesvírus bovino tipo 1 (bhv-1) em bovinos da microrregião Garanhuns do estado de Pernambuco

SILVA, Fabrício dos Santos 19 December 2014 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-09T12:40:37Z No. of bitstreams: 1 Fabricio dos Santos Silva.pdf: 5404321 bytes, checksum: 1cb52acf4a035bbbb3ce94ef64c15f10 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T12:40:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabricio dos Santos Silva.pdf: 5404321 bytes, checksum: 1cb52acf4a035bbbb3ce94ef64c15f10 (MD5) Previous issue date: 2014-12-19 / The objective of this work was to determine the prevalence and risk factors associated with infection by bovine herpesvirus type 1 (BHV-1) in cattle herds, in Garanhuns microregion, State of Pernambuco. Three hundred eighty samples of blood serum from animals aged over 24 months from dairy herds not vaccinated against BHV-1 and from 20 properties, located in 19 municipalities were analyzed. For serological diagnosis of infection with BHV-1, serum neutralization test (SN) was used. In each farm, an epidemiological questionnaire was applied to analyze risk factors with objective questions about the characteristics of production and aspects of hygienic-sanitary and reproductive management. The prevalence was 79.5% (302/380; CI: 75.1% - 83.4%) of the 20 sampled properties, all had at least one positive animal, with prevalence in herds ranging from 46.2% to 100.0%. The variables considered risk factors for HBV-1 in the logistic regression analysis were: i) bulls used in the reproductive period in females with reproductive problems (OR = 3.84, CI = 2.19 to 6.72; p <0.000); ii) Consortium creating goats / sheep with cattle (OR = 2.90, CI = 1.00 to 8.37; p = 0.048); and iii) herd size <50 animals (OR = 3.62, CI = 1.66 to 7.85; p = 0.001). These results indicate that infection with BHV-1 is distributed in the studied area and that control measures should be adopted in the herds. The epidemiological data obtained will serve as a basis for planning control strategies, as the identified risk factors are related to the creation and hygienic-sanitary management system. / Objetivou-se com este trabalho determinar a prevalência e os fatores de risco associados à infecção pelo herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1) em rebanhos bovinos, na microrregião Garanhuns, do estado de Pernambuco. Foram analisadas 380 amostras de soros sanguíneos de animais com idade superior a 24 meses, de rebanhos leiteiros não vacinados contra BHV-1 e provenientes de 20 propriedades, localizadas em 19 municípios. Para o diagnóstico sorológico da infecção pelo BHV-1, foi utilizada a técnica de soroneutralização (SN). Em cada propriedade, foi aplicado um questionário epidemiológico para análise dos fatores de risco com questões objetivas sobre as características de produção e aspectos do manejo higiênico-sanitário e reprodutivo. A prevalência encontrada foi de 79,5% (302/380; IC: 75,1% - 83,4%), das 20 propriedades amostradas, todas apresentaram pelo menos um animal positivo, com prevalência nos rebanhos variando entre 46,2% a 100,0%. As variáveis consideradas fatores de risco para a infecção pelo HBV-1 na análise de regressão logística foram: i) touros utilizados na estação de monta em fêmeas com problemas reprodutivos (OR=3,84; IC=2,19-6,72; p<0,000); ii) Criação consorciada de caprinos/ovinos com bovinos (OR=2,90; IC=1,00-8,37; p=0,048); e iii) tamanho do rebanho < 50 animais (OR=3,62; IC=1,66-7,85; p=0,001). Estes resultados indicam que a infecção pelo BHV-1 está distribuída na região estudada e que medidas de controle devem ser adotadas nos rebanhos. Os dados epidemiológicos obtidos servirão como base para a planificação de estratégias de controle, visto que os fatores de risco identificados estão relacionados com sistema de criação e manejo higiênico-sanitário.
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Análise morfológica dos ovários e testículos de tubarões oceânicos capturados no Atlântico Sul e Equatorial

RÊGO, Mariana Gomes do 09 February 2010 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T13:14:18Z No. of bitstreams: 1 Mariana Gomes do Rego.pdf: 2243053 bytes, checksum: dd4824e30534d9ff3b2e42d85610b850 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T13:14:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariana Gomes do Rego.pdf: 2243053 bytes, checksum: dd4824e30534d9ff3b2e42d85610b850 (MD5) Previous issue date: 2010-02-09 / This study aimed to evaluate the ovaries morphology and testes from oceanic sharks caught in the South Atlantic and Equatorial. For both samples were collected between January 2008 and March 2010, through the tuna fleet the vessels, captured along the South and Equatorial Atlantic, where they were collected 17 females and 164 males. In the vessels was removed visceral animals tract. After screening, the ovaries and testes were weighed and measured (length and width), identified macroscopically their maturational state. To perform the histological analysis of the material, the ovaries were fixed in 10% formalin sea water for 48 hours and testes in Bouin's fixative for 48 hours too. Then they were passed through the protocol histology. The microscopic analysis of ovaries was found three distinct maturational stages: Stage I (Immature), stage II (maturing) and stage III (mature). The first stage was classified immature ovaries; the second one was in five ovarian maturation and the third was nine ovarian mature. Immature females were found in ovaries with small width between 1.0 and 3.1 centimeters, with internal gelatinous structure or granules in maturing females, the ovaries were slightly higher showing varying width of 5.2 and 6.0 centimeters and mature ovaries had a width varying between 6.5 and 7.8 centimeters, with a rounded shape with large and well developed oocytes. On microscopic examination was observed that the ovaries are covered by epithelial tissue simple plan in the early stages of development, ranging for simple cubic in the final stages of maturation. Below the epithelium is the albuginea composed of dense connective tissue and regions of muscle fibers. In the initial stage of maturation, the ovaries presented epigone organ, they were not different histologically of the ovary. Now in the mature ovaries was shown a simple cubic epithelium, below the epithelium is a layer of dense connective tissue and muscle layer with the presence of vitellogenic oocytes and fat cells. It also showed a thin membrane enclosing the yolk oocytes. It was observed separating the pellucida zone of the oocyte from the follicle wall and a basal lamina between layers and granular teak layer. For the testes, of the 164 individuals collected, 52 were Isurus oxyrinchus, Carcharhinus falciformis 17 and 95 Carcharhinus longimanus. For the three species it was observed that the variation in the three maturation stages proposed had no visible morphological change. To characterize microscopic, cellular development in the three maturation stages, it also showed the same for all three species. The first stage was characterized by the presence of organ epigone that this phase is undifferentiated testis, thus presenting the same histological composition. The second stage there is a decrease in body epigone and differentiation of the testis with the emergence of the first germ cells (spermatogonia). The third stage the national epigone only present as a thin layer lining the testis, this is well developed and large seminiferous and the tubules with large amounts of sperm. In the classification of morphological testis there was a difference, once the species Isurus there was and Radial, for Carcharhinus was named as diametric. / Este trabalho teve por objetivo avaliar a morfologia dos ovários e testículos de tubarões oceânicos capturados no Atlântico sul e Equatorial. Para tanto as amostras foram coletadas, entre janeiro de 2008 e março de 2010, através das embarcações da frota atuneira, capturadas ao longo do Atlântico Sul e Equatorial, onde foram coletadas 17 fêmeas e 164 machos. Nas embarcações foi retirado o trato visceral dos animais. Após a triagem, os ovários e testículos foram pesados e medidos (comprimento e largura), sendo identificados macroscopicamente o seu estado maturacional. Para a realização da análise histológica do material, os ovários foram fixados em formol a 10% com água do mar, por 48 horas e os testículos em fixador de Bouin também por 48 horas. Em seguida passaram pelo protocolo histológico. Na análise macroscópica dos ovários foram encontrados três estágios maturacionais distintos: estágio I (Imaturo), estágio II (em maturação) e estágio III (Maduro). No estágio I foram classificados 3 ovários imaturos, no estágio II 5 ovários em maturação e no estágio III 9 ovários maduros. Nas fêmeas imaturas foram encontrados ovários pequenos com largura entre 1,0 e 3,1 cm, com estrutura interna gelatinosa ou granular, nas fêmeas em maturação, os ovários se encontravam um pouco maiores apresentando largura variando de 5,2 e 6,0 cm e nos ovários maduros possuía largura variando entre 6,5 e 7,8 cm, apresentando um formato arredondado, com ovócitos grandes e bem desenvolvidos. Na análise microscópica foi observado que os ovários são revestidos por tecido epitelial simples plano, nos primeiros estágios de desenvolvimento, variando para simples cúbico nos estágios finais da maturação. Logo abaixo do epitélio se encontra a albugínea composta por tecido conjuntivo denso e regiões de fibras musculares. No estágio inicial de maturação os ovários apresentam o órgão epigonal, não diferenciando-se histologicamente do ovário. Já nos ovários maduros foi evidenciado o epitélio simples cúbico, logo abaixo do epitélio encontra-se uma camada de tecido conjuntivo denso e uma camada muscular com presença de ovócitos vitelogênicos e células adiposas. Evidenciou-se também uma fina membrana vitelínica delimitando os ovócitos. Foi observada a zona pelúcida separando os ovócitos da parede do folículo e uma lâmina basal entre as camadas granulosas e a camada da teca. Para os testículos, dos 164 indivíduos coletados, 52 foram Isurus oxyrinchus, 17 Carcharhinus falciformis e 95 Carcharhinus longimanus. Para a três espécies estudadas foi observada que a variação nos três estágios maturacionais proposto não tiveram alteração morfológica visível. Para a caracterização microscópica, o desenvolvimento celular nos três estágios maturacionais, também se apresentou o mesmo para as três espécies estudadas. No estágio I caracterizou-se pela presença do órgão epigonal que nessa fase é indiferenciado do testículo, apresentando assim a mesma constituição histológica. No estágio II há uma diminuição do órgão epigonal e a diferenciação do testículo com o surgimento das primeiras células germinativas (espermatogônias). No estágio III o órgão epigonal se apresenta apenas como uma fina camada revestindo o testículo,este encontra-se bastante desenvolvido com presença de túbulos seminíferos grandes e com grande quantidade de espermatozóides. Já na classificação da disposição morfológica dos testículos ocorreu diferença, uma vez que, na espécie Isurus, evidenciou-se Radial e para os Carcharhinus foi denominada como diamétrica.
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Produção, caracterização e purificação parcial de quitinase produzida por Streptomyces sp. DPUA1581

NASCIMENTO, Talita Camila Evaristo da Silva 27 July 2012 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-10T12:50:24Z No. of bitstreams: 1 Talita Camila Evaristo da Silva Nascimento.pdf: 924627 bytes, checksum: e31eef0acccfe262c282d8536f058023 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-10T12:50:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Talita Camila Evaristo da Silva Nascimento.pdf: 924627 bytes, checksum: e31eef0acccfe262c282d8536f058023 (MD5) Previous issue date: 2012-07-27 / Sustainability is a theme that has been raised steadily in recent years, the production and use of enzymes in an efficient alternative recycling of industrial and agricultural waste. The chitinase acts in the hydrolysis of chitin, the substance can be found in large quantities in the shells of crustaceans. The objective of this research was to select Streptomyces spp. with the greatest potential in the production of chitinase, to characterize the crude and partially purified. For selection we used 30 strains of Streptomyces spp. isolated from lichen in the Amazon region. Parameters such as pH and temperature optima, stability to pH and temperature from the crude enzymatic extract. Partial purification of the enzyme was performed by precipitation in ammonium sulfate in the range of 0-80% and the electrophoresis profile by SDS-PAGE. Streptomyces sp. DPUA1581 chitinase produced by submerged fermentation with 1% of chitin, agitation 150 rpm, at 28 °C for 96 hours. The enzyme characterization showed the best activity in sodium phosphate buffer 100 mM, pH 7.0 and was stable after 180 minutes in all pHs tested. The optimum temperature was 80 °C chitinase, remained stable between 30 and 100 °C for 180 minutes. The activity was enhanced in the presence of Fe2+ (134%), Mn2+ (71%) and the anionic surfactant SDS (59%), however, Pb2+ (99%) and EDTA (62%) inhibited the enzyme function. After fractionation with ammonium sulfate showed the enzymatic extract purification factor equal to 7 and 108% yield. The chitinase produced by Streptomyces sp. DPUA1581 under the conditions described in this work, has a great industrial viability, demonstrating catalytic activity even when subjected to high temperatures for prolonged periods. / Sustentabilidade é um tema abordado constantemente nos últimos anos, sendo a produção e utilização de enzimas uma eficiente alternativa na reciclagem de resíduos industriais e agrícolas. A quitinase atua na hidrólise da quitina, esta substância pode ser encontrada em grande quantidade na carapaça de crustáceos. O objetivo desta pesquisa foi selecionar Streptomyces spp. com maior potencial na produção da quitinase, caracterizar o extrato bruto e purificar parcialmente. Para seleção foram utilizadas 30 linhagens de Streptomyces spp. isoladas de líquens da região Amazônica. Foram avaliados parâmetros como pH e temperatura ótimos, estabilidade ao pH e a temperatura a partir do extrato bruto enzimático. A purificação parcial da enzima foi realizada por precipitação em sulfato de amônio na faixa de 0-80% e o perfil eletroforético em SDS-PAGE. Streptomyces sp. DPUA1581 produziu quitinase por fermentação submersa com 1% de quitina, agitação de 150 rpm, a 28 °C por 96h. A caracterização enzimática demonstrou melhor atividade no tampão fosfato de sódio 100 mM, no pH 7,0 e manteve-se estável após 180 minutos em todas as variações de pH testadas. A temperatura ótima da quitinase foi 80 °C, mantendo-se estável entre 30 e 100 °C durante 180 minutos. A atividade foi potencializada na presença de Fe2+ (134%), Mn2+ (71%) e do surfactante aniônico SDS (59%), entretanto, Pb2+ (99%), e EDTA (62%) inibiram a função da enzima. Após o fracionamento com sulfato de amônio o extrato enzimático apresentou fator de purificação igual a 7 e rendimento de 108%. A quitinase produzida por Streptomyces sp. DPUA1581 nas condições descritas neste trabalho, apresenta grande viabilidade industrial, demonstrando atividade catalítica mesmo quando submetida a altas temperaturas por período prolongado.
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Avaliação das lesões inflamatórias e da carga parasitária em órgãos do sistema genital masculino e feminino de cães com infecção natural por Leishmania (Leishmania) infantum (Nicolle, 1908)

OLIVEIRA, Vinícius Vasconcelos Gomes de 15 February 2013 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-10T13:04:08Z No. of bitstreams: 1 Vinicius Vasconcelos Gomes de Oliveira.pdf: 1683435 bytes, checksum: 381cdda471a76c366b0ca07846e16bb8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-10T13:04:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vinicius Vasconcelos Gomes de Oliveira.pdf: 1683435 bytes, checksum: 381cdda471a76c366b0ca07846e16bb8 (MD5) Previous issue date: 2013-02-15 / The canine visceral leishmaniasis is an important parasitic zoonosis endemic in Brazil, caused by protozoa Leishmania infantum. In urban areas, dogs are considered the main reservoir of this parasite, in which the inflammatory lesions observed in tissues and organs may be related with parasite presence, including the genital system. Therefore, the aim of this study was to evaluate the inflammatory lesions and parasite load in the genital tract of dogs naturally infected with L. infantum. Thus, tissue samples collected from 12 female dogs and 19 dogs naturally infected by L. infantum from the municipalities of Caruaru and Petrolina, Pernambuco, respectively. Fragments of vulva, vagina, cervix, uterine body and horns and ovaries of the females and testes, epididymis, prostate, glans penis, prepuce and scrotum of the males were collected for structural assessment, immunohistochemistry and molecular. In the present study, vulva and vagina were the major sites to inflammatory lesion development and L. infantum amastigotes immunostaining in the reproductive tract of female dogs. Moreover, in the reproductive tract of male dogs: epididymis, prostate, glans penis, prepuce and scrotum showed lympho-histio-plasmacytic inflammatory lesion. L. infantum amastigotes immunolabeling just was visualized in testes, epididymis, glans penis and scrotum. In both sexes, there is no correlation between parasite load and inflammatory lesion on the genitals. / A leishmaniose visceral canina é uma importante zoonose parasitária endêmica no Brasil, causada por Leishmania infantum. Em áreas urbanas, os cães são considerados os principais reservatórios deste parasito, no qual, diversos órgãos e tecidos podem apresentar lesões decorrentes do parasito, inclusive com o envolvimento do sistema genital. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar as lesões inflamatórias e carga parasitária em órgãos do sistema genital masculino e feminino de cães com infecção natural por Leishmania infantum. Para tanto, foram utilizados fragmentos de órgãos do sistema genital de 12 cadelas e 19 machos naturalmente infectados por L. infantum provenientes dos municípios de Caruaru e Petrolina, Pernambuco, respectivamente. Amostras de vulva, vagina, cérvix, corpo e cornos uterinos e ovários para as fêmeas e testículos, epidídimos, próstata, glande, prepúcio e escroto para os machos foram coletados para avaliação estrutural, imunohistoquímica e molecular. No presente estudo, pode-se observar que os principais locais de desenvolvimento de lesões e imunomarcação de formas amastigotas de L. infantum no trato reprodutor das fêmeas foram vulva e vagina, enquanto que nos machos as lesões inflamatórias foram observadas no epidídimo, próstata, glande, prepúcio e escroto. Imunomarcação de formas amastigotas de L. infantum foram observadas nos testículos, epidídimo, glande e escroto. Em ambos os sexos, não foi obervada correlação entre carga parasitária e lesão inflamatória nos órgãos genitais.
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Avaliação da carga parasitária em cães com infecção natural Leishmania (Leishmania) infantum chagasi submetidos a tratamento experimental / Parasite load evaluation in gogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) infantum chagasi submitted to experimental treatment

NASCIMENTO, Glaucia Grazielle 15 June 2015 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-13T11:58:04Z No. of bitstreams: 1 Glaucia Grazielle Nascimento.pdf: 1563273 bytes, checksum: 8be5176981c6636746920cd3e2419ba1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-13T11:58:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Glaucia Grazielle Nascimento.pdf: 1563273 bytes, checksum: 8be5176981c6636746920cd3e2419ba1 (MD5) Previous issue date: 2015-06-15 / The Canine Visceral Leishmaniasis is a disease whose etiological agent in Brazil is the species of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, endemic in several regions, transmitted by insect-vector Lutzomyia longipalpis. The domestic dog is considered the most important parasite reservoir. This study aimed to evaluate the parasite load in dogs naturally infected with Leishmania (L.) infantum chagasi submitted to experimental treatment. For this purpose we used 18 asymptomatic dogs naturally infected with Leishmania (L.) infantum chagasi of both sexes, various ages submitted to treatment protocol with allopurinol 10 mg / kg 12h hours, domperidone 1 mg / kg every 24 hours during twelve months, associated with inactivated vaccine, three doses at 21 days interval by the subcutaneous route at a dilution of lyophilized to two parts of a diluent. The animals were submitted to clinical evaluation, blood tests, biochemical, immunohistochemistry of skin and monitoring through the Polymerase Chain Reaction in moments zero (M0), six months (M6) and twelve months (12M). Were observed significant remission of clinical signs in 100% (18/18) of the dogs in the post-treatment times, as well as standardization and improvement of haematological and biochemical parameters. In immunohistochemistry the skin, there was a significant reduction and elimination of parasites in the skin between times. PCR detected DNA of the parasite in skin samples and bone marrow after twelve months of treatment, with significant reduction between the pre- and post-treatment. The results of this study conclude that the treatment with allopurinol and domperidone associated with inactivated vaccine, to promote remission of clinical signs and reduction of parasite burden in animals with visceral leishmaniasis. / A Leishmaniose Visceral Canina é uma doença que tem como agente etiológico no Brasil a espécie do protozoário Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, endêmica em várias regiões, transmitida pelo inseto-vetor Lutzomyia longipalpis. O cão doméstico é considerado o mais importante reservatório do parasita. O objetivo deste trabalho foi avaliar a carga parasitária em cães naturalmente infectados com Leishmania (L.) infantum chagasi submetidos a tratamento experimental. Para tanto utilizou-se 18 cães sintomáticos, naturalmente infectados por Leishmania (L.) infantum chagasi de ambos os sexos, idades variadas submetidos a protocolo de tratamento com alopurinol 10 mg/kg a cada 12h horas, domperidona 1 mg/kg a cada 24 horas, durante doze meses, associado com a vacina inativada, três doses com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na diluição de duas partes do liofilizado para uma do diluente. Os animais foram submetidos à avaliação clínica, testes hematológicos, bioquímicos, imuno-histoquímica de pele e monitoramento através da Reação em Cadeia da Polimerase, nos momentos zero (M0), seis meses (M6) e doze meses (12M). Houve remissão significativa dos sinais clínicos em 100% (18/18) dos cães nos momentos pós-tratamento, bem como normalização e melhora dos parâmetros hematológicos e bioquímicos. Na imuno-histoquímica da pele, houve redução significativa e eliminação dos parasitos na pele entre os momentos. Na PCR foi detectado DNA do parasita nas amostras de pele e medula óssea após doze meses de tratamento, embora com redução significativas entre os momentos pré e pós-tratamento. Os resultados deste trabalho concluem que o tratamento com alopurinol e domperidona associado com a vacina inativada, promove a remissão dos sinais clinicos e redução da carga parasitária em animais com leishmaniose visceral.
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Avaliação ultramorfológica de formas imaturas e adultas de Lutzomyia lonpipalpis Lutz e Neiva, 1912 (Diptera: Psichodidae) procedentes do campo e de colônias de laboratório

VALENÇA, Luiz Augusto França 26 February 2015 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-14T12:11:50Z No. of bitstreams: 1 Luiz Augusto Franca Valenca.pdf: 1117679 bytes, checksum: 30ea93220f042431662e6f7e13f59471 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-14T12:11:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luiz Augusto Franca Valenca.pdf: 1117679 bytes, checksum: 30ea93220f042431662e6f7e13f59471 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lutzomyia longipalpis has a great importance in public health to be transmitter of visceral leishmaniasis in the New World. This study aimed to observe, with the aid of scanning electron microscopy, the morphological and ultrastructural relevant aspects of the immature forms (eggs and larvae and pupae) and the laboratory adults species of L. longipalpis, comparing those from the field with those from laboratory colony. Eggs exochorion observations showed that the species L. longipalpis has unconnected crest ornaments and the presence of tubercles along its entire surface. In general, all larval stages of this species are similar. However, both morphological characteristics as distinct ultrastructural were observed. Morphology: size of the larvae in the different stages of growth had wormlike form, translucent white color, small and delicate caudal bristles developing along the larval growth, detailing the front wall of the first-stage larva, caudal segments. Ultrastructural characteristics as pseudo-feet, jaw, trichodea bristles, filiform bristles were observed. We can see in the larval exuvia pupae, body segments, forming the wings, antennae and legs. Regarding the analysis of adults both from field as those from colony in the laboratory, we can observe their morphological characteristics of male and female genitalia and sensilla. About the ultrastructural observations were seen: forms and distribution of setae and spines along the vector of the body, besides the sensilla escamiformes, trichodea and capamiformes. This study may provide a new basis for the taxonomy of this important vector in the search for more information in order to promote better knowledge about the biology and adaptability in regions with different soil and climatic characteristics. / Lutzomyia longipalpis tem grande importância na saúde publica por ser transmissor da leishmaniose visceral no Novo Mundo. O presente estudo teve como objetivo observar com o auxilio da Microscopia Eletrônica de Varredura os aspectos morfológicos e ultraestruturais relevantes das formas imaturas (ovos e larvas e pupa) e adultos de laboratório da espécie L. longipalpis, comparando os oriundos de campo com os oriundos em colônia de laboratório. Observações do exocório dos ovos mostraram que a espécie L. longipalpis possui ornamentações de cristas não conectadas e presença de tubérculos ao longo de toda sua superfície. Em geral, todas as fases larvais da espécie são similares. Contudo, tanto características morfológicas quanto ultraestruturais distintas foram observadas. Na morfologia: tamanhos das larvas nas diferentes fases de crescimento apresentavam forma vermiforme, coloração branca translucida, cerdas caudais pequenas e delicadas nas larvas de primeiro estágio desenvolvendo-se ao longo do crescimento larval, detalhamento da parede frontal da larva de primeiro estágio, segmentos caudais. Características ultraestruturais como pseudo-pés, mandíbula, cerdas tricóides, cerdas filiformes foram observadas. Podemos observar nas pupas exuvia larval, segmentos do corpo, formação das asas, antenas e pernas. Já em relação à análise dos adultos tanto de campo quanto dos oriundos de colônia em laboratório, podemos observar suas características morfológicas das genitálias masculina e feminina e sensilas. Sobre as observações ultraestruturais foram visibilizados: formas e distribuição de cerdas e espinhos ao longo do corpo do vetor, além das sensilas escamiformes, tricóides e capamiformes. Este estudo poderá estabelecer novas bases para a taxonomia desse importante vetor na busca de mais informações visando maior entendimento sobre biologia e capacidade de adaptação em regiões com diferentes características edafoclimáticas.
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Efeito da suplementação oral do óleo de arroz na congelabilidade do sêmen ovino

MONTEIRO, Juliana Arandas Borba 27 February 2015 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-14T12:47:57Z No. of bitstreams: 1 Juliana Arandas Borba Monteiro.pdf: 831567 bytes, checksum: 0515256d8d8121fa8eba5bbaa130cfe9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-14T12:47:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Arandas Borba Monteiro.pdf: 831567 bytes, checksum: 0515256d8d8121fa8eba5bbaa130cfe9 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / The aim was to carry out a bibliographic study about the sperm and the influence of reactive oxygen species (ROS) and antioxidant therapies on ram semen cryopreservation, as wel as evaluated experimentally the effects of supplementary feeding with commercial rice oil in ram semen freezability. For the latter purpose, were used 16 crossbred sheep, with a mean weight of 35 kg and average age of 15 months, previously evaluated clinical and andrologicaly. These animals were divided into two groups according to the quality of semen, where the control group included animals with approved seminal parameters, and the treatment group for individuals with lower semen quality. The animals from treatment group were supplemented daily, by oral way, with 100 mL per day commercial rice oil (Horse Range), during 63 days. In turn, animals in the control group received 100 mL of saline solution daily, by oral way, during the same period. Semen and blood samples were obtained by artificial vagina and jugular venipuncture, respectively, at wich 21 days, where the first sample was taken immediately before treatment start (day zero D0). Semen from each breeder was subjectively evaluated and individually processed for freezing (-196 oC), while from the blood was recovered the serum, which was stored under freezing (- 4 oC). After thawing, the semen was evaluated for sperm kinematics in the computerized system (CASA), as well as for plasma membrane and acrosomal integrity in a flow cytometry. The blood serum was used for testosterone determination by electrochemiluminescence. At D0, total (MT) and progressive (MP) motility, VCL, VAP and VSL were higher (P<0.05) in control than in the treatment group. On the other hand, after 21 days of treatment (D21), VCL, VAP and VSL from treatment group were higher (P<0.05) than the control group. Similarly, after 63 days of treatment the MP, VCL, VAP, VSL and total sperm with intact acrosome were higher (P<0.05) in the treatment than in the control group. Furthermore, according comparison of each group over time, was observed that while the seminal parameters from control group decrease throughout the study (P<0.05), those from treatment group are increase (P <0.05). There was no significant difference (P> 0.05 ) between the experimental groups with respect to serum testosterone concentration, regardless of evaluation time. Thus, it is concluded that oral administration of rice oil acts positively on the kinematics parameters and acrosomal integrity of ram semen subjected to cryopreservation, and that it not influence the plasma levels of testosterone. / Neste trabalho objetivou-se avaliar os efeitos da alimentação suplementar com óleo de arroz comercial na congelabilidade do sêmen ovino, onde foram utilizados 16 ovinos mestiços, com peso de 35 kg e idade de 15 meses, em média, previamente submetidos à avaliação clínico-andrológica. Os animais foram separados em dois grupos experimentais, de acordo com a qualidade do sêmen, onde o grupo controle foi formado por animais aprovados quanto aos parâmetros seminais e o grupo tratamento por indivíduos com qualidade de sêmen inferior. Os animais do grupo tratamento foram suplementados diariamente, por via oral, com 100 mL por dia de óleo de arroz comercial (Gama Horse), durante 63 dias. Os animais do grupo controle receberam diariamente 100 mL, por via oral, de soro fisiológico durante o mesmo período. Colheitas de sêmen e sangue foram realizadas por vagina artificial e venopunção da jugular, respectivamente, a cada 21 dias, tendo sido a primeira colheita realizada imediatamente antes do início do tratamento (dia zero: D0). O sêmen de cada reprodutor foi avaliado subjetivamente e processado individualmente para a congelação (-196 oC), enquanto que da amostra de sangue foi recuperado o soro, o qual foi armazenado sob congelação (- 4 oC). Após descongelação, o sêmen foi avaliado quanto à cinética espermática no sistema computadorizado (CASA), bem como a integridade de membrana acrossomal e plasmática com fluorocromos no citômetro de fluxo. O soro sanguíneo foi utilizado para a dosagem de testosterona por eletroquimioluminescência. No D0, as motilidades total (MT) e progressiva (MP), VCL, VAP e VSL foram maiores (P<0,05) no grupo controle do que no grupo tratamento. Por outro lado, aos 21 dias de tratamento (D21), os valores de VCL, VAP e VSL do grupo tratamento foram superiores (P<0,05) aos do grupo controle. Da mesma forma, aos 63 dias de tratamento a MP, VCL, VAP, VSL e total de espermatozoides com acrossoma íntegro foram maiores (P<0,05) no grupo tratamento do que no grupo controle. Além disso, por meio da comparação de cada grupo ao longo do tempo, pode-se constatar que, enquanto os parâmetros seminais do grupo controle diminuíram ao decorrer do estudo (P<0,05), os do grupo tratamento aumentaram (P<0,05). Não foi observada diferença (P>0,05) entre os grupos experimentais com relação à concentração sérica de testosterona, independente do tempo de avaliação. Assim, conclui-se que a administração oral de óleo de arroz age positivamente sobre os parâmetros cinéticos e de integridade do acrossoma de espermatozoides de carneiros submetidos à criopreservação, e que não influencia os níveis séricos de testosterona.

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