Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RonaldoAA_TESE_parcial.pdf: 75168 bytes, checksum: a480f84f619eb88bf968f0a55bed0676 (MD5) Previous issue date: 2011-12-09 / An important unsolved problem in medical science concerns the physical origin of the sigmoidal shape of pressure volume curves of healthy (and some unhealthy) lungs. Such difficulties are expected because the lung, which is the most important structure in the respiratory system, is extremely complex. Its rheological properties are unknown and seem to depend on phenomena occurring from the alveolar scale up to the thoracic scale. Conventional wisdom holds that linear response, i.e., Hooke s law, together with alveolar overdistention, play a dominant role in respiration, but such assumptions cannot explainthe crucial empirical sigmoidal shape of the curves. In this doctorate thesis, we propose an alternative theory to solve this problem, based on the alveolar recruitment together with the nonlinear elasticity of the alveoli. This theory suggests that recruitment may be the predominant factor shaping these curves in the entire range of pressures normally employed in experiments. The proposed model correctly predicts the observed sigmoidal pressure volume curves, allowing us to discuss adequately the importance of this result, as well as its implications for medical practice / Um importante problema n?o resolvido na ci?ncia m?dica diz respeito ? origem f?sica da forma sigmoidal das curvas press?o-volume de pulm?es saud?veis (e de alguns n?o saud?veis). Tais dificuldades s?o esperadas tendo em vista que o pulm?o, a mais importante estrutura do sistema respirat?rio, ? extremamente complexo. Suas propriedades reol?gicas s?o desconhecidas, e parecem depender dos fen?menos que ocorrem a partir da escala alveolar at? a escala tor?cica. O modelo cl?ssico diz que a resposta linear, ou seja, a lei de Hooke, juntamente com a superdistens?o alveolar desempenha um papel predominante na formata??o dessas curvas, mas tais pressupostos n?o podem explicar a crucial forma emp?rica sigmoidal das curvas P-V respirat?rias est?ticas. Nesta tese de doutorado propomos uma teoria alternativa para resolver este problema, baseada no recrutamento alveolar, juntamente com a hip?tese do comportamento el?stico n?o-linear dos alv?olos. Esta teoria sugere o recrutamento alveolar como o fator predominante que modela as curvas press?o-volume em um completo intervalo de press?o normalmente utilizado nas experi?ncias. O modelo proposto prediz corretamente a forma sigmoidal observada nas curvas press?o-volume, nos permitindo discutir adequadamente a import?ncia deste resultado, assim como as suas implica??es para a pr?tica m?dica

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:14:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FabriciaLF_DISSERT.pdf: 3549779 bytes, checksum: 2364a7c4e80831b956545a9a31de3525 (MD5) Previous issue date: 2012-11-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / A meningite bacteriana (MB) ? uma doen?a infecto-contagiosa que apresenta altas taxas de mortalidade e morbidade, constituindo-se assim um grave problema de sa?de p?blica. ? caracterizada por uma intensa inflama??o granuloc?tica que leva a inj?ria neuronal e consequentemente surgimento de sequelas neurol?gicas. A resposta inflamat?ria determina tanto a susceptibilidade ? MB como sua consequ?ncia cl?nica. Essa resposta depende n?o s? do tipo e da intensidade do est?mulo, mas tamb?m de fatores gen?ticos do hospedeiro, tais como polimorfismos localizados em regi?es codificantes ou regulat?rias de genes importantes durante a infec??o, dentre os mais frequentes os polimorfismos de um ?nico nucleot?deo (SNPs). O objetivo desse estudo foi investigar a associa??o entre os polimorfismos em TNF -308G/A, TNF -857C/T, IL-8 -251A/T, AADAT+401C/T, que codificam prote?nas importantes durante a resposta inflamat?ria e APEX1 Asn148Glu, OGG1 Ser326Cys e PARP-1 Val762Ala, que codificam enzimas de reparo de DNA, com a ocorr?ncia da MB. O estudo foi realizado com um grupo de 54 pacientes, admitidos no Hospital Giselda Trigueiro, Natal-RN, Brasil, o qual ? refer?ncia para doen?as infecciosas no estado, e um grupo controle formado por 110 volunt?rios saud?veis. Todos os indiv?duos inclu?dos no estudo autorizaram o uso do material biol?gico para a pesquisa atrav?s de termo de consentimento. Os gen?tipos foram investigados por PIRA-PCR ou PCR-RFLP. As frequ?ncias al?licas e genot?picas tamb?m foram associados com os n?veis de cito/quimiocinas, medidas pelo m?todo xMAP, e com os n?veis de imunoglobulinas. N?o encontramos diferen?as significativas na distribui??o individual entre pacientes e controles saud?veis das variantes TNF -857C/T e IL8 -251A/T, no entanto, foi observada uma maior frequ?ncia do alelo polim?rfico TNF-308A (P= 0,0145, OR= 0,34) no grupo controle, sugerindo um poss?vel papel protetor contra a doen?a. Os portadores do SNP em TNF -308G/A tamb?m apresentaram aumento nos n?veis de TNF-α (P=0,0515) e IL- 6 (P=0,0135) no grupo MB e para MCP-1 (P=0,0381) e TNF-α (P=0,0547 borderline) no grupo controle. Al?m disso, a an?lise de combina??o entre os genes estudados mostrou associa??o significativa para as combina??es entre APEX1148Glu/_ com OGG1 326Cys/_ e com PARP-1 762Ala/_ (P= 0,0007, OR=5,35), e IL-8 -251T/ com APEX1148Glu/_ (P= 0,0003, OR= 2,90) que foram mais frequentes em pacientes com MB, os quais afetaram os n?veis de cito/quimiocinas e celularidade em amostras de LCR de pacientes com MB. Esse trabalho foi realizado com a contribui??o de uma equipe multidisciplinar que envolveu diversos profissionais das ci?ncias biol?gicas e da sa?de, como bi?logos, farmac?uticos e m?dicos. Os nossos dados indicam que a avalia??o extensiva da variabilidade gen?tica pode contribuir para uma melhor compreens?o da susceptibilidade ? MB como tamb?m para outras doen?as infecciosas que ativam os mesmos mecanismos de resposta imune

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / INCT - Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia / A tuberculose (Tb) é uma infecção heterogênea causada pelo Mycobacterium tuberculosis (Mtb), com altos índices de mortalidade. O principal método diagnóstico consiste em achados bacteriológicos, carecendo de alternativas mais eficazes. Acurácia, agilidade e acessibilidade no diagnóstico são cruciais para a contenção do fluxo infeccioso. Neste trabalho, objetivamos caracterizar o padrão de expressão de 27 citocinas na saliva e no soro de pacientes com Tb em associação com o tempo de tratamento, avaliar a aplicação de peptídeos sintéticos, TBC10 e TB2C10, em ensaios imunoenzimáticos e biossensor para o diagnóstico da Tb pela saliva e selecionar ácidos nucleicos ligantes de proteínas específicas. 27 citocinas, em soro e saliva de 86 indivíduos, foram dosadas simultaneamente por kit multiplex. Os indivíduos foram agrupados em TB (doentes sem tratamento), TBT (doentes em curso de tratamento), TBTDO (doentes ao término do tratamento), PPD+ (saudáveis reativos ao teste tuberculínico PPD) e C- (saudáveis não reativos ao PPD). Nove citocinas apresentaram maior expressão em TB que em C-. A expressão IL-2, IL-15 e IL-4 na saliva foi significativamente diferente entre doentes e PPD+. Todos os grupos positivos para Tb apresentaram maior expressão de IL-2, IL15, IL-8, IL-9 na saliva que indivíduos saudáveis. Os valores obtidos para IP-10 no soro permitiu distinguir os grupos positivos entre si e negativo, apresentando potencial pra monitoramento do tratamento de Tb. Seis citocinas, IL-13, IL-10, IL-6, IL-2, IL-15 e IL-8, foram significativamente mais expressas no soro dos grupos positivos que de saudáveis. O score associando as quatro citocinas com melhor representatividade na saliva e as seis no soro, permitiu predizer a infecção por Mtb com assertividade de 77% na saliva e 96% no soro. A quantificação de citocinas pode auxiliar no diagnóstico de Tb. Para validação dos peptídeos sintéticos, TBC10 e TB2C10 foram testados em imunoensaios pra detecção de IgA específica de tuberculose presente em saliva. Ambos foram capazes de discriminar doentes de saudáveis com sensibilidade de 94,12% e especificidades 76,92% e 84,62%, com valores de p<0,0001. Foi realizado um biopanning de anticorpo para caracterização molecular dos ligantes de IgA específica de Tb, a partir de um fago C10. Obteve-se um scFv (fragmento variável de cadeia única) capaz de se ligar a TBC10, TB2C10 e a proteínas de Mtb, o que permitiu delinear os prováveis epítopos de proteínas de Mtb reconhecidos pela IgA. SELEX foi utilizado para selecionar moléculas de DNA ligante de TBC10 e TB2C10. Quatro aptâmeros apresentaram capacidade de reconhecer os biomarcadores e também proteínas de Mtb. Tanto o scFv quanto os aptâmeros de DNA selecionados a partir dos biomarcadores puderam reconhecer proteínas de Mtb, confirmando a fidelidade dos epítopos das proteínas e dos biomarcadores. Os biomarcadores TBC10 e TB2C10 apresentaram alto potencial de aplicação para diagnóstico de Tb através da saliva, os aptâmeros, úteis para confirmação da identidade dos epítopos ligantes a IgA, apresentaram potencial para fins diagnósticos e terapêuticos, assim como os scores utilizados a partir da expressão de citocinas em soro e saliva permitem predizer a infecção ativa de tuberculose. / Tuberculosis (TB) is a heterogeneous infection caused by Mycobacterium tuberculosis (Mtb), with high mortality rates. The main diagnostic method consists of bacteriological findings, lacking more effective alternatives. Accuracy, agility and accessibility in diagnosis are crucial for the containment of infectious flow. In this work, we aimed to characterize the expression pattern of 27 cytokines in the saliva and serum of patients with Tb in association with the time of treatment, to evaluate the application of synthetic peptides, TBC10 and TB2C10, in immunoenzymatic and biosensor assays for the diagnosis of Tb by saliva and select specific protein binding nucleic acids. 27 cytokines, in serum and saliva of 86 individuals, were simultaneously dosed by multiplex kit. The individuals were grouped into TB (untreated patients), TBT (patients undergoing treatment), TBTDO (patients at the end of treatment), PPD + (healthy individuals reactive tuberculin test PPD) and C- (healthy non-reactive to PPD). Nine cytokines presented greater expression in TB than in C-. The expression IL-2, IL-15 and IL-4 in saliva was significantly different between patients and PPD +. All Tb-positive groups had higher expression of IL-2, IL-15, IL-8, IL-9 in saliva than healthy individuals. The values obtained for IP-10 in the serum allowed to distinguish the positive groups from each other and negative, presenting potential for monitoring the treatment of Tb. Six cytokines, IL-13, IL-10, IL-6, IL-2, IL-15 and IL-8 were significantly more expressed in serum than the positive groups. The score associated with the four cytokines with better representativeness in the saliva and the six in the serum allowed to predict Mtb infection with assertiveness of 77% in saliva and 96% in serum. Quantification of cytokines may aid in the diagnosis of Tb. For the validation of the synthetic peptides, TBC10 and TB2C10 were tested in immunoassays for the detection of specific IgA of tuberculosis present in saliva. Both were able to discriminate healthy patients with sensitivity of 94.12% and specificities 76.92% and 84.62%, with values of p <0.0001. An antibody biopanning was performed for molecular characterization of Tb-specific IgA ligands from a C10 phage. A scFv (single chain variable fragment) was obtained capable of binding to TBC10, TB2C10 and Mtb proteins, which allowed to delineate the likely epitopes of Mtb proteins recognized by IgA. SELEX was used to select TBC10 and TB2C10 binding DNA molecules. Four aptamers were able to recognize the biomarkers and also Mtb proteins. Both the scFv and the DNA aptamers selected from the biomarkers were able to recognize Mtb proteins, confirming the fidelity of protein epitopes and biomarkers. The biomarkers TBC10 and TB2C10 presented high potential of application for diagnosis of Tb through saliva, the aptamers, useful for confirming the identity of IgA binding epitopes, presented potential for diagnostic and therapeutic purposes, as well as the scores used from the expression of cytokines in serum and saliva allow prediction of active tuberculosis infection. / Tese (Doutorado)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Measurements of respiratory mechanics, very important to conduct the patient with mechanical ventilation, are obtained with the relaxation of respiratory muscle in sedated or paralyzed patients or through a brief period of hyperventilation (HV), which is possible to decrease the drive ventilation of patient. However, it´s known that the hyperventilation decreases the carbon dioxide arterial pressure (PaCO2) and can induce changes in the cerebral blood flow. Then, this study proposes to verify the effects of this brief period of HV on the gasometric parameters, cerebral and systemic hemodynamic in 15 mechanically ventilated patients, with ventilation drive and different pathologies, except cerebral pathology, admitted in Intensive Care Unit of Vita Hospital in Curitiba-PR; being 12 males (80%) and three females (20%), mean age of 61,29 (± 18,97), eight clinical and seven surgical diagnosis. The protocol consisted of a brief HV with increase by 50% from previous minute volume of patient for two minutes. The variables were recorded before, on the first minute of HV (HV1), on the second minute (HV2) and five minutes after the end of maneuver. The parameters recorded were mean blood flow velocity and pulsatility index through transcranial doppler of the middle cerebral arteries, blood gas parameters (pH, PaCO2, EtCO2, HCO3, BE, PaO2, SatO2 e SpO2), besides heart rate and mean arterial pressure. The data were averaged statistically by ANOVA, Newman-Keuls and Wilcoxon tests. The normality condition of data were averaged by Kolmogorov-Smirnov. Values of p<0,05, indicate statistically significant. The results show a decrease of mean blood flow velocity of the right (p=0,18888) and left (p=0,0071) middle cerebral arteries, mainly on the first minute of HV, estimating a decrease of cerebral blood flow (4,12% e 6,51%, of the right and left middle cerebral arteries, bespectively). Five minutes after HV, there was a return to baseline values. In relation to gasometric parameters, there were a significant variation of EtCO2 and PaCO2 during the HV, with smaller changes of PaCO2 in relation to EtCO2. The pulsatility index, another gasometric parameters, heart rate and mean arterial pressure remained stable during HV. Concluding, based on results of this study, that the maneuver of HV may be security applied and does not promote cerebral and systemic repercussion in studied patients. / Cálculos da mecânica respiratória, tão importantes para a condução do paciente sob ventilação mecânica (VM), são obtidos com o relaxamento da musculatura respiratória através de sedação, curarização ou breve período de hiperventilação (HV), em que é possível diminuir o drive ventilatório do paciente. Porém, sabe-se que a HV reduz a pressão arterial de dióxido de carbono (PaCO2) e pode levar a alterações do fluxo sanguíneo cerebral (FSC). Com isso, este trabalho se propôs a verificar os efeitos deste breve período de HV na hemodinâmica cerebral, sistêmica e variáveis gasométricas em 15 pacientes sob VM apresentando drive ventilatório, com patologias diversas, exceto patologias cerebrais, internados na Unidade de Terapia Intensiva do Hospital Vita na cidade de Curitiba-PR; sendo 12 pacientes do sexo masculino (80%) e três do sexo feminino (20%), com média de idade de 61,29 (±18,97), sendo oito diagnósticos cirúrgicos e sete clínicos. O protocolo consistia de uma HV breve com aumento de 50% do volume minuto prévio do paciente por dois minutos. A coleta dos dados foi feita antes, no primeiro minuto de HV (HV1), no segundo minuto (HV2) e cinco minutos após o final da manobra. Foram colhidos dados de Velocidade Média (Vm) do FSC e Índice de Pulsatilidade (IP) ao Doppler Transcraniano (DTC) das artérias cerebrais médias (ACMs), dados gasométricos (pH, PaCO2, EtCO2, HCO3, BE, PaO2, SatO2 e SpO2), bem como freqüência cardíaca (FC) e pressão arterial média (PAM). Os dados foram avaliados estatisticamente pelos testes ANOVA, Newman-Keuls e teste não-paramétrico de Wilcoxon. A condição de normalidade dos dados foi avaliada pelo teste de Kolmogorov-Smirnov. Valores de p<0,05 indicaram significância estatística. Como resultados, observou-se que houve uma diminuição da velocidade média (Vm) do FSC das ACMs direita (p=0,18888) e esquerda (p=0,0071), mais evidente no primeiro minuto de HV, estimando uma diminuição do FSC (4,12% e 6,51%, nas ACMs direita e esquerda, respectivamente). Após 5 minutos do final da manobra, encontrou-se retorno da Vm e do FSC aos valores iniciais. Quanto às variáveis gasométricas observou-se que o EtCO2 e PaCO2 alteram com a manobra de HV breve, porém com menores mudanças da PaCO2 em relação à EtCO2. O IP, as demais variáveis gasométricas, a FC e a PAM permaneceram estáveis durante a HV. Conclui-se, portanto, a partir dos dados obtidos neste estudo, que a manobra de HV pode ser realizada de forma segura, sem repercussão hemodinâmica cerebral e sistêmica dos pacientes estudados.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Different forms of isolated GH deficiency (IGHD) have an autosomal recessive mode of inheritance. The most common one (type IB) is often caused by bi-allelic mutations in the GHRH receptor (GHRHR) gene (GHRHR). Although heterozygous carriers of GHRHR mutations appear normal, the small size of most of the families and the fact that stature is a complex and polygenic trait prevented so far a careful analysis of their phenotype. To test the hypothesis that heterozygosity for a GHRHR mutation may be associated with a mild phenotype, we studied large Brazilian kindred with familial IGHD (Itabaianinha cohort). In this population, GHD is caused by a homozygous null mutation of the GHRHR. Adults and children with GHD have severe short stature, reduced lean mass, increased % fat mass, increased waist to hip (W/H) ratio, increased total and LDL-cholesterol and C-reactive protein (CRPus), increased systolic blood pressure, and increased insulin sensitivity. We studied 77 adult subjects (age 25-75) heterozygous for the mutation (WT/MT) and compared them with age and sex-matched controls homozygous for the wild-type allele (WT/WT) from the same population. Genotyping was performed by denaturing gradient gel electrophoresis from genomic DNA. We found no difference in adult height; blood pressure and standard deviation score for serum IGF-I between the two groups. Body weight, body mass index, skin folds, waist, hip, lean and fat mass were all reduced in WT/MT subjects. %FM and W/P ratio were similar in the two groups. Fasting insulin and in HOMAIR were lower in WT/M than in WT/WT. The other biochemical parameters (total and fractionated cholesterol, triglycerides, Lp (a), CRPus) were not different between the two groups. Our data shows that heterozygosity for a null GHRHR mutation is not associated with reduction in adult stature or reduction in serum IGF-I, but it causes a parallel decline in fat and lean mass, and an increase in insulin sensitivity. Heterozygosis for a null GHRHR mutation is not associated with reduction in adult stature or in serum IGF-I, but is causes changes in body composition and increase in HOMAIR. These effects do not seem to be modulated by changes circulating IGF-I. / Diferentes formas de Deficiência Isolada do Hormônio do Crescimento (DIGH) são de herança autossômica recessiva. A mais comum (tipo IB) é freqüentemente causada por mutações bi-alélicas no gene do receptor de GHRH (GHRHR). Embora portadores heterozigotos da mutação do gene do GHRHR pareçam normais, o tamanho pequeno da maior parte das famílias e o fato que a estatura é um complexo determinado por características poligênicas levaram-nos a analisar cuidadosamente a hipótese de um fenótipo para a heterozigose. Para testar a hipótese de que a heterozigose para uma mutação do GHRHR poderia estar associado a um fenótipo intermediário foi estudada uma extensa família com DIGH familial (Coorte de Itabaianinha/Sergipe). Nesta população a DIGH é causada por uma mutação nula em homozigose do gene do receptor do GHRHR. Os adultos e crianças com DIGH têm severa baixa estatura, massa magra reduzida e aumento de: percentagem (%) de massa gorda (% MG), cintura, relação cintura/quadril, Colesterol total, LDL Colesterol, Proteína C Reativa alta sensibilidade (PCRas) e a diminuição do Modelo Homeostático do Índice de Resistência à Insulina (HOMAIR). Nós estudamos 76 indivíduos adultos entre 25 e 75 anos de idade heterozigotos (WT/MT) para esta mutação e comparamos pareados para a idade e sexo com 77 indivíduos controles homozigotos para o alelo normal (WT/WT) da mesma população. O DNA genômico foi genotipado através da técnica de Eletroforese em gel com gradiente de desnaturação (DGGE). Não foi encontrada nenhuma diferença entre os indivíduos na altura dos adultos e níveis séricos de IGF-I entre os dois grupos. O peso, o índice de massa corpórea (IMC), dobras cutâneas, circunferência da cintura e quadril e massa magra (MM) estavam reduzidos no grupo de indivíduos WT/MT. A % de MG e a relação cintura/quadril foram semelhantes entre os dois grupos. A insulina e o HOMAIR foram mais baixos no grupo WT/MT. Os outros parâmetros bioquímicos (colesterol total e frações, Triglicérides, Lipoproteína (a) (LP (a)), Proteína C Reativa alta sensibilidade (PCRas) não foram diferentes entre os dois grupos. Em conclusão, a heterozigose para uma mutação nula no gene do receptor do GHRH não é associada com redução da estatura final nem nos níveis séricos de IGF-I, mas, causa alterações na composição corporal e aumento do HOMAIR. Estes efeitos parecem não ser modulados por alterações nas concentrações séricas de IGF-I).

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-02-17T22:41:57Z No. of bitstreams: 1 VitorLopesDosSantos_TESE.pdf: 14542830 bytes, checksum: 6152cf87bb56d50e13c1279c3841c19e (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-02-19T22:43:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 VitorLopesDosSantos_TESE.pdf: 14542830 bytes, checksum: 6152cf87bb56d50e13c1279c3841c19e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-19T22:43:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VitorLopesDosSantos_TESE.pdf: 14542830 bytes, checksum: 6152cf87bb56d50e13c1279c3841c19e (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Os recentes avan?os t?cnicos das duas ?ltimas d?cadas para o registro de sinais neuroeletrofisiol?gicos foram essenciais para que se testassem hip?teses h? muito propostas acerca de como c?lulas nervosas processam e armazenam informa??o. No entanto, ao permitir maior detalhamento dos dados coletados, as novas tecnologias levam inevitavelmente ao aumento de sua complexidade estat?stica e, consequentemente, ? necessidade de novas ferramentas matem?tico-computacionais para sua an?lise. Nesta tese, apresentamos novos m?todos para a an?lise de dois componentes fundamentais nas atuais teorias da codifica??o neural: (1) assembleias celulares, definidas pela co-ativa??o de subgrupos neuronais; e (2) o padr?o temporal de atividade de neur?nios individuais. Em rela??o a (1), desenvolvemos um m?todo baseado em an?lise de componentes independentes para identificar e rastrear padr?es de co-ativa??o significativos com alta resolu??o temporal. Superamos limita??es de m?todos anteriores, ao efetivamente isolar assembleias e abrir a possibilidade de analisar simultaneamente grandes popula??es neuronais. Em rela??o a (2), apresentamos uma nova t?cnica para a extra??o de padr?es de atividade em trens de disparo baseada na decomposi??o wavelet. Demonstramos, por meio de simula??es e de aplica??o a dados reais, que nossa ferramenta supera as mais utilizadas atualmente para decodificar respostas de neur?nios e estimar a informa??o de Shannon entre trens de disparos e est?mulos externos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:29:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SergioACO_TESE.pdf: 4589227 bytes, checksum: 062baf399b5377e444d02b747586f12b (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Desde os descobrimentos pioneiros de Hubel e Wiesel acumulou-se uma vasta literatura descrevendo as respostas neuronais do c?rtex visual prim?rio (V1) a diferentes est?mulos visuais. Estes est?mulos consistem principalmente em barras em movimento, pontos ou grades, que s?o ?teis para explorar as respostas dentro do campo receptivo cl?ssico (CRF do ingl?s classical receptive field) a caracter?sticas b?sicas dos est?mulos visuais como a orienta??o, dire??o de movimento, contraste, entre outras. Entretanto, nas ?ltimas duas d?cadas, tornou-se cada vez mais evidente que a atividade de neur?nios em V1 pode ser modulada por est?mulos fora do CRF. Desta forma, ?reas visuais prim?rias poderiam estar envolvidas em fun??es visuais mais complexas como, por exemplo, a separa??o de um objeto ou figura do seu fundo (segrega??o figura-fundo) e assume-se que as conex?es intr?nsecas de longo alcance em V1, assim como as conex?es de ?reas visuais superiores, est?o ativamente envolvidas neste processo. Sua poss?vel fun??o foi inferida a partir da an?lise das varia??es das respostas induzidas por um est?mulo localizado fora do CRF de neur?nios individuais. Mesmo sendo muito prov?vel que estas conex?es tenham tamb?m um impacto tanto na atividade conjunta de neur?nios envolvidos no processamento da figura quanto no potencial de campo, estas quest?es permanecem pouco estudadas. Visando examinar a modula??o do contexto visual nessas atividades, coletamos potenciais de a??o e potenciais de campo em paralelo de at? 48 eletrodos implantados na ?rea visual prim?ria de gatos anestesiados. Estimulamos com grades compostas e cenas naturais, focando-nos na atividade de neur?nios cujo CRF estava situado na figura. Da mesma forma, visando examinar a influ?ncia das conex?es laterais, o sinal proveniente da ?rea visual isot?pica e contralateral foi removido atrav?s da desativa??o revers?vel por resfriamento. Fizemos isso devido a: i) as conex?es laterais intr?nsecas n?o podem ser facilmente manipuladas sem afetar diretamente os sinais que est?o sendo medidos, ii) as conex?es inter-hemisf?ricas compartilham as principais caracter?sticas anat?micas com a rede lateral intr?nseca e podem ser vistas como uma continua??o funcional das mesmas entre os dois hemisf?rios e iii) o resfriamento desativa as conex?es de forma causal e revers?vel, silenciando temporariamente seu sinal, permitindo conclus?es diretas a respeito da sua contribui??o. Nossos resultados demonstram que o mecanismo de segmenta??o figurafundo se reflete nas taxas de disparo de neur?nios individuais, assim como na pot?ncia do potencial de campo e na rela??o entre sua fase e os padr?es de disparo produzidos pela popula??o. Al?m disso, as conex?es laterais inter-hemisf?ricas modulam estas vari?veis dependendo da estimula??o feita fora do CRF. Observamos tamb?m uma influ?ncia deste circuito lateral na coer?ncia entre potenciais de campo entre eletrodos distantes. Em conclus?o, nossos resultados d?o suporte ? ideia de um mecanismo complexo de segmenta??o figura-fundo atuando desde as ?reas visuais prim?rias em diferentes escalas de frequ?ncia. Esse mecanismo parece envolver grupos de neur?nios ativos sincronicamente e dependentes da fase do potencial de campo. Nossos resultados tamb?m s?o compat?veis com a hip?tese que conex?es laterais de longo alcance tamb?m fazem parte deste mecanismo / Since Hubel and Wiesel s pioneer finding a vast body of literature has accumulated describing neuronal responses in the primary visual cortex (V1) to different visual stimuli. These stimuli mainly consisted of moving bars, dots or gratings which served to explore the responses to basic visual features such as orientation, direction of motion or contrast, among others, within a classical receptive field (CRF). However, in the last two decades it became increasingly evident that the activity of V1 neurons can be modulated by stimulation outside their CRF. Thus, early visual areas might be already involved in more complex visual tasks like, for example, the segmentation of an object or a figure from its (back)-ground. It is assumed that intrinsic long-range horizontal connections within V1 as well as feedback connections from higher visual areas are actively involved in the figure-ground segmentation process. Their possible role has been inferred from the analysis of the spike rate variations induced by stimuli placed outside the CRF of single neurons. Although it is very likely that those connections also have an impact on the joined activity of neurons involved in processing the figure and on their local field potentials (LFP), these issues remain understudied. In order to examine the context-dependent modulation of those activities, we recorded spikes and LFPs in parallel from up to 48 electrodes in the primary visual cortex of anesthetized cats. We stimulated with composite grating and natural scene stimuli focusing on populations of neurons whose CRFs were situated on the foreground figure. In addition, in order to examine the influence of horizontal connections we removed the inter-hemispheric input of the isotopic contralateral visual areas by means of reversible cooling deactivation. We did so because i) the intrinsic horizontal connections cannot be easily manipulated without directly affecting the measured signals, ii) because inter-hemispheric connections share the major anatomical features with the intrinsic lateral network and can be seen as a functional continuation of the latter across the two hemispheres and iii) because cooling causally and reversibly deactivates input connections by temporarily silencing the sending neurons and thus enables direct conclusions on their contribution. Our results demonstrate that the figure-ground segmentation mechanism is reflected in the spike rate of single neurons, as well as in their LFP power and its phase-relationship to the spike patterns produced by the population. In addition "lateral" inter-hemispheric connections modulate spike rates and LFP power depending on the stimulation of the neurons CRF surround. Further, we observe an influence of this lateral circuit on field- field coherences between remote recording sites. In conclusion, our findings support the idea of complex figure-ground segmentation mechanism acting already in early visual areas on different time scales. This mechanism seems to involve groups of neurons firing synchronously and dependent on the LFP s phase. Our results are also compatible with the hypothesis that long-range lateral connections contribute to that mechanism

Introdução: Esofagite eosinofílica (EoE) é uma desordem clínico-patológica, caracterizada por sintomas de disfunção esofágica e alterações histopatológicas com inflamação composta principalmente por eosinófilos, sendo necessário, pelo último consenso, 15 ou mais eosinófilos/campo microscópico de grande aumento (cmga). Contudo, esse achado histopatológico geralmente está acompanhado de outras alterações morfológicas na mucosa esofágica que fazem parte do quadro de resposta inflamatória e que têm sido cada vez mais investigadas. Objetivos: Descrever achados histopatológicos em biópsias de pacientes pediátricos e adolescentes com EoE e compará-las aos de pacientes com quadro clínico de epigastralgia. Material e métodos: Foram analisadas biópsias esofágicas, sendo dezessete com diagnóstico de EoE e dezessete com epigastralgia. Analisaram-se aspectos histopatológicos e imuno-histoquímicos, como número máximo de eosinófilos, alongamento das papilas, hiperplasia de células da camada basal, espaços intercelulares, microabscessos e expressão de CD1a. Resultados: Entre os achados histopatológicos, alongamento das papilas e hiperplasia da camada basal foram observados em todos os participantes com EoE e em nenhuma amostra do grupo epigastralgia. Aumento do espaço intercelular foi encontrado em todos os pacientes com EoE e em 29,41% dos pacientes com epigastralgia. Conclusões: A quantidade de eosinófilos pode não mostrar por si só a complexidade da EoE. Estudos futuros devem ser realizados tentando definir se algum achado morfológico pode ajudar no diagnóstico diferencial entre EoE e eosinofilia esofágica responsiva ao inibidor de bomba de prótons e se poderiam ser utilizados para acompanhamento da eficácia do tratamento da EoE. / Introduction: Eosinophilic esophagitis (EoE) is a clinical-pathological disorder, characterized by symptoms related to esophageal dysfunction and histopathological alterations with inflammatory reactions primarily composed of eosinophils, being necessary, by the last consensus, 15 or more eosinófilos / high-power field (hpf). However, this histopathological finding is usually accompanied by other morphological changes in the esophageal mucosa that are part of an inflammatory response that has been increasingly investigated. Objective: To describe the histopathological findings from biopsies of pediatric and adolescent patients with EoE and to compare them with those from patients with clinical symptoms of epigastralgia. Material and methods: The results of esophageal cultures from biopsies were analyzed, seventeen with EoE diagnosis and seventeen with epigastralgia. The histopathological and immunohistochemical aspects, such as maximum number of eosinophils, papillary elongation, basal cell hyperplasia, dilatation of intercellular spaces, microabscesses, and CD1a expression were analyzed. Results: Among the histopathological findings, papillary elongation and basal cell layer hyperplasia were observed in all participants with EoE and in any of the sample of the epigastralgia group. Dilated intercellular space was found in all patients with EoE and in 29.41% of patients with epigastralgia. Conclusions: The amount of eosinophils may not by itself show the complexity of EoE. Future studies should be carried out in order to determine if any morphological findings may help in the differential diagnosis between EoE and proton-pump inhibitor-responsive esophageal eosinophilia, and whether they could be used to monitor the effectiveness of the EoE treatment. / Dissertação (Mestrado)

Há mais de uma década o Brasil é 2° país do mundo com maior número de pessoas doentes de hanseníase, com prevalência de 1,5 casos por 10.000 habitantes. Diagnóstico precoce, exame dos contatos e a eliminação do estigma são estratégias no enfrentamento da endemia. Apesar dos avanços científicos e tecnológicos acrescidos da organização da rede de serviços no SUS, persiste no século XXI, o estigma da lepra construído desde tempos remotos. As narrativas que expressam o impacto da doença consideram o processo histórico da segregação em leprosários adotado por dois séculos no Brasil. Este estudo tem como cenário o município de Uberlândia, no estado de Minas Gerais, considerado em situação de alta endemicidade para hanseníase. Focalizou o bairro Lagoinha, um dos clusters hiperendêmico no município, marcado nos anos 1970-1980 pelo processo de disciplinarização do doente no espaço urbano. O objetivo foi compreender os significados das narrativas relacionadas ao estigma, produzidas pelos moradores do território e suas implicações na manutenção da endemia hansênica. Trata- se de uma pesquisa qualitativa, tipo estudo de caso com triangulação de métodos. Os instrumentos e técnicas utilizados foram: encontros, visita domiciliar, entrevista em profundidade e semiestruturada, grupo focal, diários de campo e genograma. Os participantes, moradores do território, foram divididos em três grupos: grupo 1 (G1) aqueles que vivenciaram o adoecimento, casos notificados de 2005 a 2015, grupo 2 (G2) contatos familiares dos casos notificados; grupo 3 (G3) membros da comunidade, sadios e não contatos. A interpretação dos dados empregou a metodologia da Análise do Discurso que, segundo Foucault, é um conjunto de enunciados que se apoiam em formações discursivas que permitem ou não a sua realização. Foram identificadas três formações discursivas: a (in)certeza da cura, a persistência do medo e a atualidade do estigma na segregação. O estigma, vivenciado ou presumido, é uma barreira para comunicação do diagnóstico mesmo para aqueles que apoiam as recomendações para o exame dos contatos e impacta na decisão de revela-lo aos familiares, definindo critérios de seleção, muitas vezes divergentes dos critérios clínicos. A dor e o medo durante os exames na fase do diagnóstico são muito marcantes nas narrativas. Os marcadores moleculares e imunológicos são referenciados como uma possibilidade de diagnóstico precoce e a certeza da cura, motivada pelo tratamento, se contrapõe ao medo da transmissão, das reações hansênicas e da recidiva. A implantação do diagnóstico sorológico da infecção a partir do qPCR para identificação do DNA do bacilo seria um grande avanço no século XXI para o enfrentamento da endemia. O genograma de um núcleo familiar permitiu uma análise singular da “determinação hereditária” da doença. O estudo aponta para a importância de valorizar como os sujeitos compreendem as causas e efeitos da hanseníase e a influência nas decisões relacionadas a doença. As interpretações dos pacientes e da comunidade sobre o processo de adoecimento interferem no tratamento sendo necessário ampliar a perspectiva do cuidado porque o aspecto simbólico do adoecimento não tem sido reconhecido como importante na reprodução dos riscos, sendo negligenciado nas políticas públicas de saúde no Brasil. / For over a decade Brazil has had the world’s second highest number of Leprosy diagnoses, with 1.5 occurrences per 10,000 of population. Early diagnosis, examination of contacts and overcoming stigma are strategies deployed towards tackling this endemic. Despite scientific and technological advances and the existence of a care network within Brazilian’s Unified Health System (SUS), a long-held stigma lingered into the 21st century. The narratives deployed to express the impact of Leprosy derive from a historical process of segregation of the diseased for over two centuries in Brazil. The context for this project is the city of Uberlândia (state of Minas Gerais), regarded as highly endemic for Leprosy. The study was focused on one of the city’s hyperendemic clusters - the district of Lagoinha, outlined in the 1970’s and 80’s by a process of disciplinarisation of the diseased within the urban context. The objective is to understand the meanings derived from narratives regarding stigma, as produced by the region’s dwellers, and its implications on the maintenance of the endemic. This is a qualitative research in the form of case study with a triangulation of methods. Data collection tools were: meetings, home visits, in-depth and semi-structured interviews, focus groups, field diaries, and genograms. Participants were separated into three groups - G1: those who experienced the illness process, notified between 2005 and 2015 (index case); G2: family network of index cases; G3: healthy members of the community without exposure to the disease. Data was interpreted using discourse analysis, a method which according to Foucault raises a range of statements based on discursive formations, which in turn may or may not enable its achievement. Three formations were identified: (un)certainty of cure, persistence of fear, and up-to-dateness of stigma in the segregation. Stigma, be it experienced of presumed, surfaces as a barrier to the communication of diagnosis even amongst those who support the recommendation for examination of contacts. It influences the decision of disclosure to the family network, defining selection criteria often divergent from the clinical criteria. The pain and fear experienced during the diagnostic stage of examination are strongly present in the narratives. The molecular and immunological markers are referenced as a possibility for early diagnosis, and the certainty of cure stimulated by the treatment contrasts with the fear of transmission, of Leprosy reactions and relapse. The genogram of a family nucleus enabled a unique analysis of the “hereditary determination” of the disease. The study points to the importance of appreciating how people understand causes and effects of Leprosy and its influences on decisions related to the disease. The interpretations from patients and the community about the process of illness interfere with treatment, making it necessary to broaden the perspective of care given that the symbolic aspect has not been acknowledged as important for the reproduction of risks, thus being neglected by Brazilian public health policies. Finally, the application of serological diagnoses of the infection from qPCR to identify the DNA of the bacillus would be a great 21st century development in facing the endemic. / Tese (Doutorado)

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