Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The development of a method for As speciation in aqueous by-product of pyrolysis process of foliate bituminous is described in the present work. Arsenic species are separated by liquid chromatography (LC) coupled to inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). An anion exchange column was used to separated the As species. The analyzed liquid samples were centrifuged at 10000 rpm for 10 min, the supernatant filtered through a 0.45 mm pore size filter and then kept at 4 ºC until analysis. Before being inject in the chromatograph, the supernatant was filtered once more through a 0.2 mm pore size filter coupled to the syringe. In order to avoid memory effects, the supernatant was ten-fold diluted before filtration in the syringe. The separation column was of anion exchange type Dionex IonPac® AS14 (250mm x 4mm i.d., 9 mm particle size). A Dionex IonPac® AG14 (50mm x 4mm i.d., 9 mm particle size) was used as guard column. Ammonium carbonate ((NH4)2CO3) solution was used as mobile phase, according to the following program: 10 min, 0.0015 mol l-1 (NH4)2CO3; 10 min, 0.012 mol l-1 (NH4)2CO3 and 10 min, 0.02 mol l-1 (NH4)2CO3. Calibration curves of arsenobetaine (AsB), arsenite (As(III)), dimethylarsinic acid (DMA), p-arsanilic acid (p-ASA) and arsenate (As(V)) were obtained from serial dilution of standards and subsequent mixing. The retention time increased from AsB, As(III), DMA, p-ASA to As(V). Although 13 As species were separated and detected, quantification of only 3 species (As(III), DMA and As(V)) was possible. The concentrations found were 4.5, 6.9 and 808 mg l-1 of As(III), DMA and As(V), respectively. The method was validated by recovery tests, being the recoveries within 93 and 107%. The limits of detection (LODs) of AsB, As(III), DMA, p-ASA and As(V) were, 5, 4, 19, 11, 57 ng l-1, respectively, while the relative standard deviation (RSD) was typically bellow 6%. / Neste trabalho foi proposto o desenvolvimento de um método para a análise de especiação de As solúvel em subproduto aquoso do processo de pirólise do folhelho betuminoso, envolvendo a separação e determinação das espécies de As por cromatografia a líquido acoplada à espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (LC-ICPMS). A separação das espécies de As foi feita em uma coluna de troca aniônica. A amostra foi centrifugada a 10000 rpm por 10 min para separação do material particulado. O sobrenadante foi filtrado a 0,45 mm e armazenado sob refrigeração a 4 ºC até a análise. No momento da injeção no cromatógrafo, a amostra foi filtrada a 0,2 mm por um filtro acoplado na seringa. Foi verificado que a melhor condição de análise é quando a amostra é diluída 10 vezes (com a amostra concentrada foi verificado efeito de memória no sistema). Para a separação das espécies de As foi utilizada uma coluna de troca aniônica Dionex IonPacÒ AS14 (250 mm x 4 mm d.i., 9 mm de tamanho de partícula) e uma colunaguarda Dionex IonPacÒ AG14 (50 mm x 4 mm d.i., 9 mm de tamanho de partícula). Para a separação adequada das espécies de arsênio foi utilizado carbonato de amônio [(NH4)2CO3] como fase móvel, com o seguinte programa de eluição no modo isocrático: 10 min a 0,0015 mol l-1 de (NH4)2CO3; 10 min a 0,012 mol l-1 de (NH4)2CO3; 10 min a 0,02 mol l-1 de (NH4)2CO3. Para a obtenção das curvas de calibração, foram empregadas soluções mistas contendo as espécies arsenobetaína (AsB), arsenito (As(III)), ácido dimetilarsônico (DMA), ácido p-arsanílico (p-ASA) e arsenato (As(V)), as quais são eluídas nesta ordem. Utilizando essas condições, foi possível separar 13 espécies de arsênio na amostra, porém, apenas 3 espécies (As(III), DMA e As(V)) foram quantificadas. A concentração de As(III), DMA e As(V) determinada em uma amostra do efluente investigado foi de 4,5; 6,9 e 808 mg l-1, respectivamente. Tendo-se em vista que não havia material de referência certificado (CRM) disponível, o método foi validado através da recuperação dos analitos adicionados na amostra, sendo que as recuperações ficaram entre 93 e 107%. A precisão do método também é boa, sendo o desvio padrão relativo (RSD) geralmente inferior a 6%. Os limites de detecção (LD) do método para AsB, As(III), DMA, p-ASA e As(V) foram de 5, 4, 19, 11 e 57 ng l-1, respectivamente. Portanto, o método proposto é adequado para a análise de especiação de As, para as espécies investigadas, em subproduto aquoso do processo de pirólise do folhelho betuminoso, apresentando boa exatidão e robustez, apesar da complexidade da matriz da amostra.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Three new α, β- and γ-cyclodextrins derivatives were synthesized: hexakis-(2,6-di-O-pentyl)-α-cyclodextrin, heptakis-(2,6-di-O-pentyl)-β-cyclodextrin and octakis-(2,6-di-O-pentyl)-γ-cyclodextrin. The structures were elucidated using Nuclear Magnetic Resonance techniques such 1H, 13C, COSY 1H-1H and HMQC. Three new chiral chromatographic columns were prepared with the obtained chiral phases and the achiral phase OV 1701. All the columns were tested with various racemic compounds, showing efficiency in their chiral resolution such as: alcohols, acetylated alcohols, trifluoroacetylated alcohols, aminoacids, organic acids esters, monoterpenic hydrocarbons, ketones, lactones, drugs, sulphur compounds, selenium compounds and halogenated compounds. The column confeccionated with the stationary phase 2,6-Pe-3-PFP-α-CD/OV 1701 (1:1) showed better results on the separation of (+/-)-menthol-OAc and (+/-)-borneol. Many compounds were tested and separated by the chiral column 2,6-Pe-3-PFP-β-CD/ OV 1701 (1:1). Good results were obtained on the stereoselective separation of (+/-)-2-decanol-O-Ac, (+/-)-2-decanol-O-TFA, (+/-)-2-undecanol-O-Ac,(+/-)-2-undecanol-O-TFA, (+/-)-phenylethanol-O-Ac, (+/-)-phenylpropanol-O-Ac, (+/-)- borneol-O-Ac, (+/-)-borneol-O-TFA, (+/-)-menthol-O-Ac, (+/-)-2-phenyl-2-butanol-OAc, (+/-)-2-phenyl-2-pentanol-O-Ac, D,L-alanine-O-ethyl, R,S-(E)-ethyl-2-(4-oxopent- 2-en-2-ilamino)propanoate, (+/-)-2,3- bromopropionic acid, (+/-)-mandelic acid, (+/-)-α - pinene, (+/-)-camphor, (+/-)-carvone, (+/-)-α-ionone, (+/-)-amphetamine, (+/-)-cyclohexyl benzenesulfinate, (+/-)-1-(ethylsulfinyl)benzene, (+/-)-1- (methylsulfinyl)benzene, (+/-)-1-(methylsulfinyl)-4-methyl benzene and (+/-)-1- (ethylsulfinyl)-4-methyl benzene. The columns with 2,6-Pe-3-PFP-γ-CD/ OV 1701 (1:1) showed good results on the separations of (+/-)-borneol, (+/-)-borneol-O-Ac, (+/-)-borneol-O-TFA, (+/-)-neo-menthol, (+/-)-menthol-O-Ac, (+/-)-2-decanol-O-Ac, (+/-)-2-undecanol-O-Ac, D,L-leucine, (+/-)-β-hydroxy-leucine, (+/-)-α-pinene, (+/-)-camphor, (+/-)-carvone and (+/-)-α-ionone. / Três novos derivados de α-, β - e γ-ciclodextrinas foram sintetizados: Hexaquis-(2,6-di-O-pentil)-α-ciclodextrina, Heptaquis-(2,6-di-O-pentil)-β-ciclodextrina e Octaquis-(2,6-di-O-pentil)-γ-ciclodextrina. Suas estruturas foram elucidadas utilizando-se técnicas de Ressonância Magnética Nuclear de 1H, 13C, COSY 1H-1H e HMQC. Foram confeccionadas três novas colunas cromatográficas quirais com as fases obtidas e com a fase aquiral OV 1701. Todas as colunas foram testadas frente a vários analitos racêmicos, mostrando-se eficientes na sua resolução estereosseletiva: álcoois, álcoois acetilados e trifluoracetilados, aminoácidos, ésteres de ácidos orgânicos, hidrocarbonetos monoterpênicos, cetonas, lactonas, fármacos como a anfetamina, compostos com enxofre, compostos com selênio e compostos halogenados. A coluna confeccionada com a fase estacionária 2,6-Pe-3-PFP-α-CD/OV 1701 (1:1) apresentou os melhores resultados na separação enantiomérica do (+/-)-mentol-OAc e do (+/-)-borneol. Muitos compostos foram testados e separados na coluna quiral 2,6-Pe-3-PFP-β-CD/ OV 1701 (1:1). Os melhores resultados obtidos foram na separação estereosseletiva de: (+/-)-2-decanol-O-Ac, (+/-)-2-decanol-O-TFA, (+/-)-2-undecanol-O-Ac, (+/-)-2-undecanol-O-TFA, (+/-)-feniletanol-O-Ac, (+/-)-fenilpropanol-O-Ac, (+/-)-borneol-O-Ac, (+/-)-borneol-O-TFA, (+/-)-mentol-O-Ac, (+/-)-2-fenil-2-butanol-O-Ac, (+/-)-2-fenil-2-pentanol-O-Ac, D,L-alanina-O-etil, R,S-(E)-etil-2-(4-oxopent-2-en-2-ilamino)propanoate, (+/-)-ácido 2,3-bromopropiônico, (+/-)-ácido mandélico, (+/-)- α -pineno, (+/-)-cânfora, (+/-)-carvona, (+/-)-α-ionona, (+/-)-anfetamina, (+/-)-benzenosulfinato de ciclohexila, (+/-)-1-(etilsulfinil)benzeno, (+/-)-1-(metilsulfinil)benzeno, (+/-)-1-(metilsulfinil)-4-metil benzeno e (+/-)-1-(etilsulfinil)-4- metil benzeno. A coluna 2,6-Pe-3-PFP-γ-CD/ OV 1701 (1:1) apresentou bons resultados nas separações de: (+/-)-borneol, (+/-)-borneol-O-Ac, (+/-)-borneol-OTFA, (+/-)-neo-mentol, (+/-)-mentol-O-Ac, (+/-)-2-decanol-O-Ac, (+/-)-2-undecanol-OAc, D,L-leucina, (+/-)-β-hidroxi-leucina, (+/-)-α-pineno, (+/-)-cânfora, (+/-)-carvona e (+/-)-α-ionona.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Parenteral nutrition is the nutrients administration by intravenous mean in patients who cannot consume them for gastrointestinal way. Parenteral Nutrition Solutions are stored in glass and plastic containers, being the glass the most used due to its rigid structure, chemical resistance, sterilization easiness and transparency. Among glass constituents is the arsenic, in form of As2O3, used as refining agent to promote bubbles removal generated in the casting one. Arsenic is highly toxic. Its toxicity however is not dependent on its concentration only,but on its chemical form. Among inorganic species, arsine (AsH3) is more toxic than arsenite (As(III)) which is, more toxic than the arsenate (As(V)). Arsenic is methylated in the organism alternating the oxidation state of arsenic pentavalent the trivalent. The methilation is known as a detoxification mechanism, but studies have been shown that forms of MMA and DMA may be as mutagenic, carcinogenic and cytogenic as the forms of inorganic arsenic, or even more. Studies have been shown that most substances used in parenteral formulations, as: salts, amino acid, glucose and vitamins, can present Arsenic (As(III and As(V)) as contaminant. The species of Arsenic (As(III) and As(V)) can be present in the raw material or be leached from glass containers by different mechanisms, being the sterilization process the determinative factor for that this to occur. Despite toxicological implications around the presence of species of Arsenic in these formulations it important to investigate the possible transformation of the species of arsenic during the sterilization process of parenteral nutrition solutions. In this work, it was investigated the possibility of formation of organic arsenic species (DMA(V) and MMA(V)), due to methilation reaction of the arsenic inorganic species for reaction with the organic species of parenteral nutrition solutions. The arsenic species separation (DMA(V), MMA(V) and As(V)) was carried out by ionic chromatography, and the quantification by hydride generation atomic absorption spectrometry. Due to the complex nature of the matrix constituent the direct injection of the samples in the chromatographic system was not possible, being necessary, therefore, a "clean up" step was developed. The sterilization procedure was carried out with solutions of amino acids, glucose and vitamins, with addition of inorganic arsenic species. The comparison of the results between sterilized and not sterilized solutions showed that arsenic organic species (DMA(V) and MMA(V)) were not formed in solution. The arsenic speciation analysis (As(III), DMA(V), MMA(V) and As(V)) in commercial solutions of parenteral nutrition showed that if they contain organic arsenic, the concentration is very low, being lesser than the limit for arsenic allowed by pharmacopeias. / Nutrição Parenteral é a administração de nutrientes por meio intravenoso em pacientes que não podem consumi-los por via gastrointestinal. Soluções de Nutrição Parenteral são armazenadas em embalagens de plástico e de vidro, sendo o vidro o mais utilizado devido à sua estrutura rígida, resistência química, facilidade de esterilização e transparência. Entre os vários constituintes do vidro, está o arsênio, na forma de As2O3 usado como agente de refino para promover a remoção das bolhas geradas no fundido. O arsênio é altamente tóxico, contudo, sua toxicidade não é dependente apenas da sua concentração total, mas de suas formas químicas, pois das espécies inorgânicas, a arsina (AsH3) é mais tóxica que o arsenito (As(III)) e, este, mais tóxico que o arsenato (As(V)). O arsênio é metilado no organismo alternando de estado de oxidação de arsênio pentavalente a arsênio trivalente e adição do grupo metil através de S-adenosilmetionina. Glutationa, e outros tióis, servem como agentes redutores, formando primeiramente o ácido monometil arsênico (MMA) e logo a seguir o ácido dimetil arsínico (DMA). Por isso a metilação é conhecida como um mecanismo de desintoxicação, mas estudos mostram que o MMA e DMA podem ser tanto quanto ou mais mutagênicos, carcinogênicos e citogênicos que os arsênios inorgânicos. Estudos mostraram que quase todas as substâncias que fazem parte da constituição das formulações parenterais, como: soluções de aminoácidos, soluções salinas, glicose e heparinas, podem apresentar contaminação por arsênio (As(III e As(V)) sendo a embalagem de vidro a maior fonte de contaminação. As espécies de arsênio (As(III) e As(V)) podem ser lixiviados pela solução por diferentes mecanismos, sendo o processo de esterilização o fator determinante para que isso ocorra Devido às implicações toxicológicas em torno da presença de espécies de arsênio nos produtos é importante que se investigue possíveis transformações das espécies de arsênio durante o processo de esterilização das soluções de nutrição parenteral. Neste trabalho, investigou-se a possibilidade de formação de arsênio orgânico (DMA(V) e MMA(V)), devido à reação de metilação das espécies de arsênio inorgânico por reação com as espécies orgânicas dos constituintes de tais soluções. Para esta investigação foi necessária uma análise de especiação. A separação das espécies de arsênio (DMA(V), MMA(V) e As(V)) foi feita por cromatografia iônica, e a quantificação por espectrometria de absorção atômica com geração de hidretos. Devido à natureza complexa e à elevada concentração dos constituintes das matrizes a injeção direta das amostras no sistema cromatográfico não foi possível, sendo necessária, portanto, uma etapa prévia de clean up . Procedeu-se a esterilização em soluções de substâncias orgânicas que constituem as soluções de nutrição parenteral, como soluções de aminoácidos, glicose e vitaminas, com adição de arsênios inorgânicos e, através da comparação dos resultados entre as soluções esterilizadas e não esterilizadas não se observou a formação de espécies orgânicas de arsênio (DMA(V) e MMA(V)). Realizou-se, assim, a especiação das espécies de arsênio (As(III), DMA(V), MMA(V) e As(V)) em soluções comerciais constituintes das formulações parenterais e pode-se concluir que se há a formação de arsênio orgânico, as concentrações são muito baixas, sendo menores que os limites para arsênio permitidos pela farmacopéia.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This work presents the study of compounds obtained from interaction of sulfamethoxazole with copper, cadmium, mercury and nickel acetates, gold triphenilphosphine acetate / chloride and with silver chloride. The synthesis and the characterization of the new compounds were accomplished by the analyses of the reactivity, the coordinative behavior and to the comprehension of the interactions between the diferents metallic centers and the ligands. It has been done a structural study in the solid state for the characterization of the interactions occurring in the crystalline structures of the synthetized compounds and the used tool was X-ray diffraction in single crystal. The major goal was understanding of the relationship between the crystalline structures of the compounds and their supramolecular organization. Besides, for all compounds the results of elemental analysis and infrared spectroscopy are included. Antimicrobiological activity experiments were carried out by using the dilution technique in broth for evaluating of the sensibility to antimicrobial agents for aerobic growth of the bacterias. The lower concentration of the drug capable of inhibiting the growth of the microoganisms (MIC) was determined against Gram-positive strains (Staphylococcus aureus) and Gram-negative strains (Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa). / Este trabalho apresenta o estudo de compostos obtidos a partir da interação da sulfametoxazol com acetatos de cobre, cádmio, mercúrio e níquel, acetato e/ou cloreto de trifenilfosfina de ouro e com cloreto de prata. A síntese e a caracterização destes novos compostos estão relacionadas à exploração da reatividade, ao comportamento coordenativo e à compreensão das interações entre os diferentes centros metálicos e o ligante. Efetuou-se um estudo estrutural no estado sólido para a caracterização das interações presentes nas estruturas cristalinas dos compostos sintetizados e a ferramenta utilizada foi a difração de raios-X em monocristal. Desta forma, aprofundou-se na compreensão da relação entre a estrutura cristalina dos compostos e sua organização supramolecular. Além disso, para todos os compostos incluem-se os resultados de análise elementar e espectroscopia de infravermelho. Os testes in vitro da atividade antimicrobiana foram feitos usando a técnica da diluição em caldo para avaliar a sensibilidade a agentes antimicrobianos para bactérias de crescimento aeróbio. Bactérias Gram-positivas (Staphylococcus aureus) e Gram-negativas (Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa) conduziram a determinação da menor concentração (CIM) da droga capaz de inibir o crescimento do microrganismo.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Selenium is an essential micronutrient that plays an important role in many physiological processes. Its clinical significance is related to the action of selenocompounds as adjuvant in preventing diseases such as cancer and heart failure and also in improving the immunological defenses of the organism. Since the ability of selenium in acting as a protective agent depends on its form, it is important to investigate which form of selenium ingested promotes the best absorption and distribution in the organism. In this work, the methodology for selenium quantification in biological samples such as yeast, blood and tissues was evaluated. Graphite furnace atomic absorption spectrometry (GF AAS) and hydride generation atomic absorption spectrometry (HG AAS) were compared for total selenium quantification. The results showed that the HG AAS is more adequate for Se determination after acidic digestion procedure, since the interferences caused by the acids in the GF AAS measurements could not be minimized. Two different animals were used as model for studying the absorption and distribution of selenium in different organs, chicken and rabbit. Selenium was determined or in the fat extracted from the muscle of chicken meat and in the residue of this tissue after fat extraction. Fat was extracted with organic solvents (methanol:dichloromethane 1:3) and analysed by GF AAS. The muscle residue was digested with a HNO3/HClO4 mixture and the selenium reduction, before the HG measurement, carried out with NaBr/sulfamic acid. The limits of detection were 1 μg/L and 6 μg/L for GF AAS and HG AAS respectively. The results showed that selenium is distributed between fat (20%) and tissue residue (80%). The speciation of the selenoamino acids, selenomethionine (SeM) and selenocistine (SeC) was carried out by chromatography using the reagents 9-fluorenylmethyl chloroformate (FMOC) and o-phthaldehyde (OPA) with UV and fluorimetric detection, respectively. The High Performance Liquid Cromatography (HPLC) method was carried out with reversed phase and FMOC. The limits of detection were 0.50 and 0.20 mg/L for SeM and SeC respectively. In the HPLC-OPA method the amino acids were separated by ion-exchange and the limits of detection were 0.005 and 0.009 mg/L for SeM and SeC, respectively. The yeast used as selenium supplementation for the chicken analyzed in this work was characterized according to its selenium content. Total selenium, the fraction soluble in water and the selenium present in the proteins were determined by acid digestion, extraction with water, and separation of proteins by adsorption in a polyethylene powder column, respectively. The measurements were carried out by HG AAS (digested sample) and by GF AAS (aqueous extract and proteic fraction). The selenoamino acids were also determined in the aqueous extract and in the protein fraction after protein hydrolysis using the HPLC-OPA method. From the total selenium present in the aqueous extract, 6% was inorganic and 94% organic. Considering the organic part, 98% was present as SeM. Fifty eight per cent was bound to proteins, whereas 37% was found as free amino acid. Two groups of chicken were treated with selenium, one group with sodium selenite and the other with the above mentioned yeast. The animals treated with the yeast presented higher Se levels in the muscle and also in the fat. The mean value of selenium found in these chickens was 0.13 μg/g for the ones treated with sodium selenite and 0.32 μg/g for those treated with the yeast. It was also investigated the supplementation of selenium, using both forms, inorganic (sodium selenite) and organic selenium (SeM) through the parenteral via in rabbits. The administration was carried out in two different ways. In one experiment 0.2 mg/kg Se was administrated, and the species SeM and SeC were evaluated in the animal s blood after 15; 30; 60; and 120 min after the injection. In the other, both forms of selenium (0.1 mg/kg) were administrated for 6 weeks, in alternating days (sub-chronic treatment). In the fist experiment, significant changes were observed in the total Se in the serum of the animals treated with sodium selenite, whereas in the animals treated with SeM a high but constant Se level was observed. No changes were observed in the SeC level for both groups of animals after the administration of both Se forms. On the other hand, as could be expected, there was a peak of SeM just after the administration (15 min) in the group that received SeM. After the sub-chronic treatment, Se was increased in serum, urine, and also in the brain, heart, muscle, and splen of the animals treated with SeM. By contrast, Se was increased only in the liver of the animals treated with inorganic selenium. In the kidney no difference was observed either for SeM or selenite administration. The parameters for toxicological evaluation (measurement of ALA-D activity, TBARS, ascorbic acid, among others) did not show any difference between both administrated forms of selenium. / O selênio (Se) é um micronutriente essencial que atua em muitos processos fisiológicos importantes, participa da atividade de muitas enzimas. Sua significância clínica está relacionada à atuação de seus compostos como coadjuvante na prevenção e combate de diversas doenças entre elas o câncer, doenças cardíacas e doenças imunológicas. A atuação nas diversas funções vitais, no entanto, está relacionada à sua forma química. Vários estudos têm ressaltado a importância da suplementação do selênio na dieta, tanto na forma oral como parenteral, porém há uma incerteza sobre a melhor espécie de Se a ser utilizada. Neste trabalho, primeiramente, adequou-se a metodologia para quantificação do selênio total em amostras biológicas entre elas levedura e tecidos como músculo e pele. Fez-se um comparativo entre as técnicas de espectrometria de absorção atômica com forno de grafite e geração de hidretos para esta determinação. Os resultados demonstraram que a técnica de Espectrometria de Absorção Atômica por Geração de Hidretos (HG AAS) se mostrou mais adequada para quantificação do Se após o procedimento de digestão da amostra, uma vez que as interferências causadas pela técnica de Espectrometria de Absorção Atômica por Forno de Grafite (GF AAS) não puderam ser minimizadas. Para o estudo da absorção e distribuição do selênio utilizaram-se dois modelos animais, aves domésticas e coelhos. O Se foi determinado na gordura extraída do músculo de frango e no resíduo deste após a digestão. A gordura foi extraída com solventes orgânicos (metanol:diclorometano 1:3) e o Se determinado por GF AAS. O resíduo foi digerido com a mistura de ácidos nítrico e perclórico, e a redução do Se (VI) a Se (IV) realizada com NaBr/ácido sulfâmico, antes da medida por HG AAS. Os limites de detecção (LOD) encontrados foram 1 μg/L e 6 μg/L para as técnicas de GF AAS e HG AAS. Os resultados mostraram que ocorre a distribuição do selênio entre a gordura extraída (20%) e resíduo (80%). A análise de especiação dos selenoaminoácidos, selenometionina (SeM) e selenocistina (SeC), foi realizada utilizando os reagentes de derivação para aminoácidos 9-metilfluorenil clorofórmio (FMOC) e o-ftaldeído (OPA) com detecção ultravioleta (pré-coluna) e fluorescente (pós-coluna), respectivamente. O método cromatográfico foi a Cromatografia Liquida de Alta Eficiência (HPLC-FMOC) o qual utilizou separação em fase reversa, obtendo-se valores de LOD de 0,50 mg/L e 0,20 mg/L respectivamente para SeM e SeC. As curvas analíticas apresentaram linearidade entre 1,6 e 8,0 mg/L para SeM e 0,80 a 8,0 mg/L para SeC. O método HPLC-OPA baseou-se na cromatografia de troca aniônica, com coluna AminoPac PA1 para aminoácidos, obtendo-se valores de LOD de 0,005 e 0,009 mg/L para SeM e SeC, respectivamente. A caracterização da levedura (Experimento 1) que é utilizada como suplementação alimentar de aves foi realizada. O Se total, a fração solúvel em água e o Se presente nas proteínas foram determinadas através da digestão ácida, extração com água e separação das proteínas por adsorção em coluna de polietileno em pó, respectivamente. As medidas da concentração de Se foram realizadas por HG AAS (amostra digerida) e GF AAS (extratos aquosos e fração ligada à proteína). Adicionalmente, determinaram-se os selenoaminoácidos no extrato aquoso e na fração ligada à proteína, após a hidrólise, por HPLC-OPA. Verificou-se que no extrato aquoso 6% são Se inorgânico e 94% é orgânico. Considerando a parte orgânica 98% é SeM, 58% está ligado a proteína e 37% está na forma livre. O comparativo entre suplementação oral com Se inorgânico (selenito de sódio) e orgânico (levedura enriquecida com Se) em aves foi realizado (Experimento 2). O tratamento com levedura promoveu um aumento da concentração de Se total no músculo e na gordura. O valor médio da concentração de Se nas aves tratadas com selenito de sódio foi de 0,13 μg/g e de 0,32 μg/g após a suplementação com Se orgânico (levedura). Também foi investigado a avaliação da suplementação de Se inorgânico (selenito de sódio) e Se orgânico (SeM) através da via parenteral em coelhos. A administração realizou-se através de dois experimentos diferentes (4 e 5). O experimento 4 foi o estudo cinético, administrando 0,2 mg/kg de Se, e avaliando-se o Se total e as espécies SeM e SeC no soro após 15, 30, 60 e 120 minutos. O Se total teve uma concentração máxima de Se em 15 minutos após a administração de Se inorgânico. O grupo que recebeu SeM possui valores elevados neste mesmo tempo, porém não pronunciados, podendo evidenciar a sua mais rápida distribuição. Os resultados também mostram que não houve interconversão do Se (IV) em selenoaminoácidos, sendo as variações de concentração similares para os grupos após a administração do Se (IV). A administração de SeM mostrou redução gradual de concentração após 15 minutos, mas nenhuma alteração na concentração de SeC foi observada. O experimento 5 foi o estudo sub-crônico. A administração de Se orgânico aumentou significativamente o Se total no soro sanguíneo e na urina, bem como nos tecidos cérebro, coração, músculo e baço. Por outro lado, o fígado foi o tecido que mostrou maior acúmulo de Se com a administração de Se (IV). O rim não mostrou diferença significativa entre as formas de Se. Os parâmetros de avaliação toxicológica (medida dos níveis de ALA-D, TBARS, ácido ascórbico) não mostraram alterações significativas entre os tratamentos com as diferentes formas de Se. Os resultados obtidos com o tratamento oral das aves se mostraram similares ao tratamento parenteral, onde a forma orgânica produz uma disponibilidade maior de selênio em relação ao encontrado no músculo.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work describe the regiospecific synthesis of three novel series of 1-(2-thenoyl)-, 1-(2-furoyl)- and 1-(isonicotinoyl)-3-alkyl(aryl)[heteroaryl]-5-hydroxy-5-trihalomethyl-4,5-dihydro-1H-pyrazoles, in good yields (50 91 %), from the cyclocondensation reactions of 1,1,1-trifluoro(chloro)-4-alkoxy-4-alkyl(aryl)[heteroaryl]-3-alken-2-ones, where alkyl = H and Me; aryl = Ph, 4-MePh, 4-OMePh, 4-FPh, 4-ClPh, 4-BrPh, 4-NO2Ph; heteroaryl = 2-thienyl e 2-furyl with 2-thiophenecarboxylichydrazide, furoic hydrazide and isonicotinic acid hydrazide, respectively. Subsequently dehydration reaction of 1-(2-thenoyl)-, 1-(2-furoyl)- pyrazolines trihalomethyl substituted in chloroform / P2O5, depending of the trihalomethyl substituent, furnished the corresponding 1H-pyrazoles trichloromethylated in low yields (21 29 %), or 1Hpyrazoles trifluoromethylated as mixture of regioisomers and in yields (35 36 %). The 1-isonicotinoyl pyrazolines trihalomethyl substituted was extremely resistant to dehydration reactions with chloroform / P2O5 at reflux for 48 hours or with acetic acid at reflux for 4 hours. In both cases, the 2-pyrazolines were recovery without any structural modification. All compounds have been characterized by analytical and spectral data (1H and 13C-NMR, GC-MS, and elemental analyses). / Este trabalho descreve a síntese regioespecífica de três novas séries de 1-(2-tenoil)-, 1-(2-furanoil)- e 1-(isonicotinoil)-3-alquil(aril)[heteroaril]-5-hidroxi-5-trialometil-4,5-diidro-1H-pirazóis, em bons rendimentos (50 91%), a partir da reação de ciclocondensação de 1,1,1-trifluor(cloro)-4-alcoxi-4-alquil(aril)[2-heteroaril]-3-alquen-2-onas, onde alquil = H e Me; aril = Ph, 4-MePh, 4-OMePh, 4-FPh, 4-ClPh, 4-BrPh, 4-NO2Ph; heteroaril = 2-tienil e 2-furil com 2-tenoil-, 2-furanoil- e isonicotinoil-hidrazinas, respectivamente. Subseqüentemente, reações de desidratação de 1-(2-tenoil)-, 1-(2-furanoil)-pirazolinas trialometil substituídas em meio clorofórmio / P2O5, dependendo do substituinte trialometil, forneceram os correspondentes 1H-pirazóis triclorometilados em baixos rendimentos (21 29%), ou 1H-pirazóis trifluormetilados com mistura de regioisômeros e em rendimentos (35 36 %). As 1-isonicotinoil pirazolinas trialometil substituídas foram extremamente resistentes para reações de desidratação com clorofórmio / P2O5 a refluxo por 48 horas ou com ácido acético a refluxo por 4 horas. Em ambos os casos, as 2-pirazolinas foram recuperadas sem modificação estrutural. Todos os compostos foram caracterizados por dados espectrais e analíticos (RMN de 1H, 13C, CGMS e análise elementar).

One of the most fundamental problems in petroleum systems modeling, related to Oil Exploration, is to determine the limits of space and time of hydrocarbon generation in sedimentary basins. The aim of this study is to measure the kinetic parameters for cracking of lighter fractions of oil to gas, to identify the extreme geological conditions for its preservation. In order to achieve this it was developed a method using micropyrolysis MSSV (micro-scale sealed vessel) coupled with gas chromatography with flame ionization detector (GC-FID-MSSV) to assess the thermal degradation of n-octane, 2,3,4-trimethyl pentane, cyclohexane and o-xylene, pure substances that are known to be present in the oil, in order to calculate the kinetic parameters (Ea, the activation energy and frequency factor) of thermal degradation of these compounds through the Arrhenius equation. The temperature ranges used was 470 to 530 ° C and times up to 7 hours of pyrolysis. The results showed that this technique can be used to monitor the decrease of substances pyrolyzed, calculate the kinetic parameters and extrapolate to geological conditions.The kinetic parameters were obtained by two different ways, and Arrhenius Geokin. The geological conditions of temperature and time in which, according to calculations performed using the Arrhenius model, is expected to occur cracking of light fraction oil (C8) were: Initial cracking (10%) = 107 my / 126°C and final cracking (100%) = 183 my / 202°C. / Um dos problemas fundamentais em modelagem de sistemas petrolíferos relacionado à Exploração de Petróleo é estimar os limites de tempo e extensão da geração de petróleo em bacias sedimentares. O objetivo deste trabalho é medir os parâmetros cinéticos de craqueamento das frações mais leves do óleo (C8) para gás, visando identificar as condições geológicas extremas para sua preservação. Para isso foi desenvolvido um método utilizando a micropirólise em tubo de vidro selado, MSSV (micro-scale sealed vessel) acoplada à cromatografia gasosa com detector de ionização por chama (MSSV-GC-FID) para avaliar a degradação térmica do n-octano, 2,3,4-trimetil pentano, etil-ciclohexano e o-xileno, substâncias puras que sabidamente estão presentes no petróleo, a fim de calcular os parâmetros cinéticos (Ea, energia de ativação e Ao, fator de frequência) da degradação térmica destes compostos através da equação de Arrhenius. Foram utilizadas faixas de temperatura de 470 a 530°C e tempos de até 7 horas de pirólise. Os resultados mostraram que é possível utilizar esta técnica para o acompanhamento do decréscimo das substâncias pirolisadas, calcular os parâmetros cinéticos e extrapolá-los para as condições geológicas. Os parâmetros cinéticos foram obtidos por dois modos distintos, Arrhenius e Geokin. As condições geológicas de tempo e temperatura nas quais, segundo os cálculos realizados utilizando-se o modelo de Arrhenius, se espera que ocorra o craqueamento da fração leve de petróleo (C8) foram: Início do craqueamento (10%) = 107 Ma e 126°C e final do craqueamento (100%) = 183 Ma e 202°C.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / In this work we synthesized and determinates the crystaline/molecular structure of thre Ag(I) complexes, all of them use monocatenated triazenide ligands previously desprotonated. The complex [Ag(C6H4FNNNC6H4NO2)(C5H5N)]2 (1) crystallizes in triclinic system, space grup P1¯ with cell parameters = 9,6008(3), b = 12,1025(4), c = 16,4071(5) Å, α= 104,035(2)°, β= 105,209(2)°, γ = 103,897(2)°; V = 1688,13(9) Å; Z = 2. The refinement of this structure converge to the follow discordance indexes R₁ = 0,0624 e wR₂ = 0,0870. The sphere of coordination around the Ag atom is formed by two deprotonated triazene ligants and molecules of pyridine. The Ag Ag interaction expands the coordination geometry of Ag of T distorted for trigonal bipyramidal distorted. The molecules of complex (1) binding by non-classic hydrogen bonds intermolecular C(52)-H(52) O(22) [3,158(8) Å; 127°] e C(62)-H(62)···(O11) [3,156(8) Å; 128°] play a role in the formation of supramolecular arrangement. The complex [Ag(C6H4ClNNNC6H4NO2)(C5H5N)]2 (2) crystallizes in triclinic system, space grup P1¯ with cell parameters a = 7,4042(10), b = 11,3767(2), c = 12,1174(4) Å, α= 113,356(10)°, β= 97,402(10)°, γ = 101,498(2)°; V = 893,42(4) Å; Z = 1. The refinement of this structure converge to the follow discordance indexes R1 = 0,0271 e wR2 = 0,0782. The sphere of coordination around the Ag atom is formed by two deprotonated triazene ligants and molecules of pyridine. The Ag Ag interaction expands the coordination geometry of Ag of T distorted for trigonal bipyramidal distorted. The molecules of complex (2) binding by non-classic hydrogen bonds intramolecular C(32)-H(32) O(11) [3,500(3) Å; 170°] and binding by non-classic hydrogen bonds intermolecular C(33)-H(33) (O12) [3,376(4) Å; 152°] play a role in the formation of supramolecular arrangement. The complex [Ag(C6H4BrNNNC6H4NO2)(C5H5N)]2 (3) crystallizes in triclinic system, space grup P1¯ with cell parameters a = 7,502(10), b = 11,483(2), c = 12,060(4) Å, α= 113,42(10)°, β= 96,71(10)°, γ = 102,49(2)°; V = 906,60(4) Å; Z = 1. The refinement of this structure converge to the follow discordance indexes R1 = 0,0323 e wR2 = 0,0500. The sphere of coordination around the Ag atom is formed by two deprotonated triazene ligants and molecules of pyridine. The Ag Ag interaction expands the coordination geometry of Ag of T distorted for trigonal bipyramidal distorted . The molecules of complex (3) binding by non-classic hydrogen bonds intramolecular C(32)-H(32) O(11) [3,487(4) Å; 170°] and binding by non-classic hydrogen bonds intermolecular C(33)-H(33) (O12) [3,380(4) Å; 151°] play a role in the formation of supramolecular arrangement. / Neste trabalho sintetizou-se e determinou-se a estrutura cristalina/molecular de três complexos de prata, todos envolvendo ligantes triazenos previamente desprotonados. O complexo [Ag(C6H4FNNNC6H4NO2)(C5H5N)]2 (1) cristalina no meio triclínico, grupo espacial P1¯ com parâmetros de cela a = 9,6008(3), b = 12,1025(4), c = 16,4071(5) Å, α= 104,035(2)°, β= 105,209(2)°, γ= 103,897(2)°; V = 1688,13(9)Å; Z = 2. O refinamento dessa estrutura convergiu aos índices de discordância R₁ = 0,0624 e wR₂ = 0,0870. A esfera de coordenação do átomo de Ag é formada por dois ligantes triazenos desprotonados e moléculas de piridina. A interação Ag Ag e a interação Ag F expande a geometria de coordenação do átomo de Ag, de T para bipirâmide trigonal distorcida. As moléculas do complexo (1) associam-se através de ligações não-clássicas intermoleculares C(52)-H(52) O(22) [3,158(8) Å; 127°] e C(62)-H(62) (O11) [3,156(8) Å; 128°] contribuindo para a formação do arranjo supramolecular 1-D. O complexo [Ag(C6H4ClNNNC6H4NO2)(C5H5N)]2 (2) cristalina no meio triclínico, grupo espacial P1¯ com parâmetros de cela a = 7,4042(10), b = 11,3767(2), c = 12,1174(4) Å, α= 113,356(10)°, β= 97,402(10)°, γ = 101,498(2)°; V = 893,42(4) Å; Z = 1. O refinamento dessa estrutura convergiu aos índices de discordância R1 = 0,0271 e wR2 = 0,0782. A esfera de coordenação do átomo de Ag é formada por dois ligantes triazenos desprotonados e moléculas de piridina. A interação Ag Ag e a interação Ag Cl expandem a geometria de coordenação do átomo de Ag, de T para bipirâmide trigonal distorcida. As moléculas do complexo (2) associam-se através de ligações não-clássicas intramoleculares C(32)-H(32) O(11) [3,500(3) Å; 170°] e ligações não-clássicas intermoleculares C(33)-H(33) (O12) [3,376(4) Å; 152°] contribuindo para a formação do arranjo supramolecular 1-D. O complexo [Ag(C6H4BrNNNC6H4NO2)(C5H5N)]2 (3) cristalina no meio triclínico, grupo espacial P1¯ com parâmetros de cela a = 7,502(10), b = 11,483(2), c = 12,060(4) Å, α= 113,42(10)°, β= 96,71(10)°, γ = 102,49(2)°; V = 906,60(4) Å; Z = 1. O refinamento dessa estrutura convergiu aos índices de discordância R1 = 0,0323 e wR2 = 0,0500. A esfera de coordenação do átomo de Ag é formada por dois ligantes triazenos desprotonados e moléculas de piridina. A interação Ag Ag e a interação Ag Br expandem a geometria de coordenação do íon Ag+ de T para bipirâmide trigonal distorcida. As moléculas do complexo (3) associam-se através de ligações não-clássicas intramoleculares C(32)-H(32) O(11) [3,487(4) Å; 170°] e ligações não-clássicas intermoleculares C(33)-H(33) (O12) [3,380(4) Å; 151°] contribuindo para a formação do arranjo supramolecular 1-D.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study was carried out in three parts: At first, three methods for the bromination of 6-alkylsubstituted 2-phenyl-3H-pyrimidin-4-ones was developed for the synthesis of: (i) a new series of 6-alkylsubstituted 5-bromo-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-ones, (ii) a new series of 6-(1-bromoalkyl)-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-ones, and (iii) e new series of 5-bromo-6-(1-bromoalkyl)-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-ones. On the second part, the brominated pyrimidines obtained, were used to synthesize new 6-methylsubstituted 2-phenyl-3Hpyrimidin-4-ones from the reaction of the brominated pyrimidinones with primary and secondary amines, pyridine and sodium azide. On the third part, a new series of 5- e 6-substituted 4-trifluoromethyl-2-ureido pyrimidines was prepared, in good yields, from the cyclocondensation reaction of β- alkoxyvinyl-trifluoromethylketones substituted and dicyanodiamide. The products synthesized in this study were obtained in good yields and were characterized by GC-MS and 1H e 13C RMN spectroscopy. The purity of the products was assured by elemental analysis. Some compounds such as 5-bromo-2-phenyl-6-propyl-3H-pyrimidin-4-one, 5-bromo-6-(1- bromopropyl)-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-one, 5-bromo-6-(1-bromobutyl)-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-one, 6-(1-azidoethyl)-5-bromo-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-one, 6-(1-azidopropyl)-5-bromo-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-one, and 6-(1-azidobutyl)-5-bromo-2-phenyl-3H-pyrimidin-4-one, exhibited significant antimicrobial activity against some microorganisms, such as Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae, Staphylococcus aureus, Salmonela, Klebsiela pneumonie among others. / Este trabalho foi realizado em três etapas. Na primeira, foram desenvolvidos três métodos de bromação de 2-fenil-3H-pirimidin-4-onas 6-alquilsubstituídas para a obtenção de: (i) uma série inédita de 5-bromo-2-fenil-3H-pirimidin-4-onas 6-alquilsubstituídas, (ii) uma série inédita de 6-(1- bromoalquil)-2-fenil-3H-pirimidin-4-onas e (iii) uma série inédita de 5-bromo-6-(1-bromoalquil)-2-fenil-3H-pirimidin-4-onas. Na segunda etapa, as pirimidinas bromadas, obtidas na etapa anterior, foram utilizadas para sintetizar novas 2-fenil-3H-pirimidin-4-onas 6-metilsubstituídas através de reações das pirimidinonas bromadas com aminas primárias e secundárias, piridina e azida de sódio. Na terceira etapa, foi sintetizada uma nova série de 4-trifluormetil-2-ureído pirimidinas 5- e 6-substituídas a partir de reações de ciclocondensação entre -alcoxivinil-fluormetilcetonas substituídas e dicianodiamida. Os produtos sintetizados neste trabalho foram obtidos em bons rendimentos e foram caracterizados por CG-EM e RMN de 1H e 13C. A pureza dos produtos foi comprovada por análise elementar. Alguns compostos como 5-bromo-2-fenil-6-propil-3H-pirimidin-4-ona, 5-bromo-6-(1-bromopropil)-2-fenil-3H-pirimidin-4-ona, 5-bromo-6-(1-bromobutil)-2-fenil-3Hpirimidin-4-ona, 6-(1-azidoetil)-5-bromo-2-fenil-3H-pirimidin-4-ona, 6-(1- azidopropil)-5-bromo-2-fenil-3H-pirimidin-4-ona e 6-(1-azidobutil)-5-bromo-2-fenil-3H-pirimidin-4-ona, apresentaram atividade antimicrobiana significativa contra alguns microorganismos como Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae, Staphylococcus aureus, Salmonela, Klebsiela pneumonie e outras.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This work describes the synthesis and characterization of 2-trihaloacetylmetoxycycloalkenes series derived from cyclical ketones (cyclohexanone, cycloheptanone, cyclooctanone and cyclododecanone). The 2-trihaloacetyl-1-metoxycycloalkenes were obtained from the reaction of trihaloacetylation of 1.1-dimetoxycycloalkanes. Eight 2-trihaloacetyl-1-metoxycycloalkenes have been synthesized, and four of these trichloroacetyl compounds are unprecedented in the literature. The 2-trifluoroacetyl-1-metoxycycloalkenes were employed in the regiospecific synthesis of 3-hydroxy-3-trifluoromethyl-cycloalka[c]isoxazole, 3-trifluoromethyl-cycloalka[c]isoxazole, 3-trifluoromethyl-cycloalka[c]1H-pyrazole, 2-acetyl-3-hydroxy-3-trifluoromethyl-cycloalka[c]1H-pyrazole, 2-carboxyamide-3-hydroxy-3-trifluoromethyl-cycloalka[c]1H-pyrazole, 4-(3-hydroxy-3-trifluoromethyl-cycloalka[c] pyrazole-2-yl]-7-chloroquinoline. The reactions of cyclocondensation employed 2-trifluoroacetyl-1- metoxycycloalkenes and five different 1,2-dinucleofiles (hydroxylamine, hydrazine hydrochloride, acetic hydrazine, semicarbazide and 4-hydrazine-7-chloroquinoline), leading to yield between 34-85%. All compounds were characterized by spectral and analytical experiments, 1H's and 13C's NMR, and its purity was demostrated by CG/MS and elemental analyses. / Este trabalho descreve a síntese e caracterização de uma série de 2-trialoacetil-1-metoxicicloalquenos derivados de cetonas cíclicas (ciclopentanona, cicloexanona, cicloeptanona, ciclooctanona e ciclododecanona). Os 2-trialoacetil-1-metoxicicloalquenos foram sintetizados a partir da reação de trialoacetilação de 1,1-dimetoxicicloalcanos. Foram sintetizadas oito 2-trialoacetil-1-metoxicicloalquenos, sendo que quatro destes compostos tricloroacetilados são inéditos na literatura. Os 2-trifluoracetil-1-metoxicicloalquenos foram empregados na síntese regioespecífica de 3-hidróxi-3-trifluormetil-cicloalca[c]isoxazol, 3-trifluormetilcicloalca[ c]isoxazol, 3-trifluormetil-cicloalca[c]1H-pirazol, 2-acetil-3-hidróxi-3-trifluormetil-cicloalca[c]1H-pirazol, 2-carboxiamida-3-hidróxi-3-trifluormetilcicloalca[c]1H-pirazol, 4-{3-hidróxi-3-trifluormetil-cicloalca[c]pirazol-2-il]-7-cloroquinolina. As reações de ciclocondensação empregaram 2-trifluoracetil-1- metoxicicloalquenos e cinco diferentes 1,2-dinucleófilos, hidroxilamina, cloridrato de hidrazina, hidrazina acética, semicarbazida e 4-hidrazina-7-cloroquinolina, levando a rendimentos entre 34-85%. A análise estrutural de 2-trialoacetil-1-metoxicicloalquenos, bem como os cicloalca[c]azo compostos sintetizados foram caracterizados por experimentos de RMN de 1H, 13C, e sua pureza determinada via CGMS e análise elementar.