Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2601933 bytes, checksum: 9774a77bdb4923c6922bc2f4f25f4a68 (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Polyamines are aliphatic organic bases belonging to the group of bioactive amines that have important metabolic and physiological functions in animals, plants and microorganisms. Amongst the most important polyamines biologically are spermidine [N-(3-aminopropyl) -1,4-butane diamine or tetramethylene diamine-aminopropyl] (SPD) and spermine [N, N'-bis (3-aminopropyl) -1,4-butane diamine or diaminopropil-tetramethylethylenediamine] (SPM). Polyamines are intimately involved in the growth and replication of many cell types, and it has been demonstrated that they are found in high concentrations in rapid growing cells. It is possible that substances such as naphthoquinones, which can react with polyamines have the ability to block its function by depleting its concentration. The direct detection of polyamines by HPLC with UV detection is hampered because they lack structural groups with high molar absorptivity. Thus, the objective of this study was to develop and validate a chromatographic method using fluorescence detection that could be applied for quantifying the cellular levels of polyamines in cell cultures based on the following parameters: selectivity, linearity, precision and accuracy. The polyamines were derivatized pre-column with dansyl chloride and were detected by fluorescence (ex= 365 nm; em= 510 nm) using a chromatographic method using gradient elution with a mobile phase consisting of methanol: water (35-95 v/v), a reversed-phase C18 column (250 x 4.6 mm, 5μm) at a flow rate of 1.0 mL/min., in 35 minutes. The chromatographic method was validated according to Resolution 899 recommended by the National Sanitary Agency of Brazil (ANVISA), and was linear in the concentration range used for SPD (0.0097 to 0.97 pmol/mL) and SPM ( 0.074 to 0.74 pmol/mL), precise (≤ 15% for medium and high concentrations, ≤ 20% for the low concentration), exact for SPD (97-118%) and SPM (92-119%), It also showed selectivity (demonstrated by separation of polyamines and proteins present in cell culture medium). The developed method was also applied to the analysis of polyamines incubated with the naphtoquinones (lapachol and β-lapachone). The concentration of these polyamines was depleted when incubated for 17 hours at ambient temperature (decrease of 67% and 50% for SPD and SPM levels respectively when incubated with lapachol and a decrease of 44% and 37,5% for SPD eand SPM when incubated with β-lapachona). These results demonstrate that the developed method is adequate for the analysis of polyamines in cell culture and that a probable mechanism of antitumoral action for the naphtoquinones may involve the formation of adducts with polyamines / Poliaminas são bases orgânicas alifáticas pertencentes às aminas bioativas que desempenham importantes funções metabólicas e fisiológicas em animais, vegetais e microrganismos. As mais importantes biologicamente são a espermidina [N-(3-aminopropil)-1,4-butano diamina ou aminopropil-tetrametilenodiamina] (SPD) e a espermina [N,N -bis(3-aminopropil)-1,4-butano diamina ou diaminopropil-tetrametilenodiamina] (SPM). Estão intimamente envolvidas no crescimento e replicação de diversos tipos de células, e em especial encontra-se em altas concentrações em células exibindo crescimento rápido. É possível que substâncias tais como as naftoquinonas, que possam reagir com as poliaminas, tenham a capacidade de bloquear as suas funções pela depleção de sua concentração. A sua detecção direta é dificultada por não possuírem grupos que apresentam alta absortividade molar. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar um método cromatográfico, utilizando detecção por fluorescência que possa ser aplicado a quantificação do nível celular de poliaminas em cultura de células tumorais com base nos seguintes parâmetros: seletividade, linearidade, precisão e exatidão e investigar a formação de adutos com naftoquinonas. Para tanto derivatizou-se as poliaminas fora do sistema cromatográfico (pré-coluna) com cloreto de dansila, formando derivados dansilados que foram detectados por fluorescência (ex= 365 nm; em= 510 nm). A separação se deu por eluição em modo gradiente, utilizando como fase móvel metanol:água (35-95 v/v), uma coluna de fase reversa C-18 (250 x 4,6 mm, 5μm) a um fluxo de 1,0 mL/min, em 35 minutos. O método cromatográfico desenvolvido foi validado segundo o preconizado na Resolução 899 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), e mostrou-se sensível, linear na faixa de concentração utilizada para SPD (97-970 pmol/mL) e para SPM (74-740 pmoL/mL), preciso (≤ 15% para as concentrações média e alta; ≤ 20% para a concentração baixa), exato para SPD (91-112%) e para SPM (92-119%), mostrando-se também seletivo (frente a separação das poliaminas e as proteínas presentes no meio de cultivo celular). O método desenvolvido foi ainda aplicado à análise das poliaminas incubadas com as naftoquinonas (lapachol e β-lapachona), e observou-se que a concentração dessas aminas foi depletada quando incubadas por 17 horas a temperatura ambiente com as naftoquinonas (diminuição de 67% e 50% dos níveis de SPD e SPM respectivamente quando incubadas com o lapachol; e diminuição de 44% e 37,5% de SPD e SPM quando incubadas com β-lapachona). Esses resultados mostram que o método desenvolvido é adequado para análise de poliaminas em cultura de células tumorais e que um provável mecanismo de ação antitumoral das naftoquinonas pode envolver a formação de adutos entre estas e as poliaminas.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O praziquantel (PZQ) à um medicamento anti-helmÃntico de alto espectro utilizado no tratamento de todos os tipos de esquistossomose. No Brasil a mistura racÃmica à utilizada na fabricaÃÃo do medicamento. Sabe-se que a espÃcie enantiomÃrica R-PZQ à a que possui efeito anti-helmÃntico e que esta espÃcie possui sabor menos amargo. Sendo assim formulaÃÃes baseadas no R-PZQ somente teriam metade da dose necessÃria da formulaÃÃo sÃlida da mistura racÃmica e as formulaÃÃes lÃquidas teriam sabor menos amargo. Para obtenÃÃo de enantiÃmeros puros a cromatografia quiral à uma tÃcnica promissora por produzir enantiÃmeros com grau de pureza bastante elevada. Neste trabalho a separaÃÃo dos enantiÃmeros do fÃrmaco praziquantel foi realizada em uma fase estacionÃria quiral (FEQ) celulose tris(3-cloro-4- metilfenilcarbamato), comercialmente conhecida como Lux Celulose-2, por cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia (CLAE). Ensaios em soluÃÃo diluÃda (1 g/L) e soluÃÃes concentradas (5, 10, 15 e 20 g/L) foram realizados em laboratÃrio. Em todos estes experimentos foram estudados os efeitos da variaÃÃo da vazÃo da fase fluida (0,5, 1 e 2 mL/min) e do volume de injeÃÃo (20, 60 e 100ÂL). Nestes foram alcanÃadas separaÃÃes por linha de base indicando alta eficiÃncia da coluna para a separaÃÃo requerida. Experimentos com soluÃÃo de PZQ de 40 g/L e com vazÃo de fase fluida de 1 mL/min foram realizados objetivando encontrar as condiÃÃes em que ocorreria sobreposiÃÃo dos picos. Os enantiÃmeros foram separados satisfatoriamente nos volumes de injeÃÃo testados (100, 140 e 180 ÂL), com indicaÃÃo de sobreposiÃÃo no volume injetado de 250 ÂL obtendo-se uma produÃÃo de 533 mg/dia no limite de separaÃÃo por linha de base. Pelos resultados obtidos pode-se prever um comportamento nÃo linear da isoterma de equilÃbrio de adsorÃÃo. Foram estimados parÃmetros da isoterma de Langmuir competitivo a partir dos experimentos nas concentraÃÃes de 5 g/L a 20 g/L por um mÃtodo hÃbrido entre o mÃtodo dos tempos de retenÃÃo e o mÃtodo inverso a partir de uma soluÃÃo analÃtica do modelo ideal. Esses parÃmetros foram utilizados em um programa computacional desenvolvido no Fortran objetivando a simulaÃÃo para prediÃÃo dos perfis cromatogrÃficos pelo modelo do equilÃbrio dispersivo. Os perfis obtidos na simulaÃÃo representaram bem os dados experimentais quando comparados os tempos de retenÃÃo da frente de massa de ambos os enantiÃmeros. Os parÃmetros estimados tambÃm foram utilizados na prediÃÃo dos perfis cromatogrÃficos para as condiÃÃes de 40 g/L e apresentaram resultados satisfatÃrios quando os erros de prediÃÃo foram levados em consideraÃÃo. / Praziquantel is a high spectrum anthelmintic drug used in the treatment of all types of schistosomiasis. In Brazil, the racemic mixture is used on the drug manufacture. It is known that the R-PZQ enantiomeric species is the one which has the anthelmintic effect and a less bitter taste. Thus, the solid formulations based on R-PZQ only, would have half of the dosage and the liquid formulations would have a less bitter taste. To obtain pure enantiomers chiral chromatography is a promising technique which produces high purity enantiomers. In this work the praziquantel enantiomers separation was obtained on a cellulose tris(3-chlorine-4-methyl-phenyl-carbamate) chiral stationary phase (CSP), commercially known as Lux Cellulose-2, by high performance liquid chromatography (HPLC). Experiments with diluted solution (1 g/L) and concentrated solutions (5, 10, 15 and 20 g/L) were carried out. On these experiments the effects of the mobile phase flow rate variation (0,5, 1 e 2 mL/min) and the injection volume (20, 60 e 100ÂL) have been studied. On these baseline separations were achieved indicating high column efficiency for the required separation. Experiments with 40 g/L PZQ solution and a mobile phase flow rate of 1 mL/min were performed aiming to find conditions on which overlapping peaks occur. The enantiomers were well separated on the tested injection volumes (100, 140 and 180 ÂL), indicating an overlapping on the injection volume of 250 ÂL yielding a production of 533 mg per day at the limit of baseline separation. From the results one can predict a nonlinear adsorption equilibrium isotherm behavior. Parameters of the competitive Langmuir isotherm were estimated from experiments in the concentration range 5g/L to 20 g/L by a hybrid method between the retention time method and the inverse method by an analytical solution of the ideal model. These parameters were used on a computer program developed in Fortran aiming at the prediction of the chromatographic profiles by the Equilibrium Dispersive Model. The profiles obtained from the simulation represent well the experimental data when comparing the front mass retention times of both enantiomers. The estimated parameters were also used on the prediction of the chromatographic profiles obtained for 40 g/L conditions and showed satisfactory results when prediction errors were taken into account.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Nos Ãltimos anos o consumo de frutas tropicais tem aumentado, principalmente, devido aos seus benefÃcios para a saÃde, entre eles à baixa incidÃncia de doenÃas degenerativas. Esses benefÃcios sÃo atribuÃdos, em sua maioria, aos constituintes antioxidantes, como os compostos fenÃlicos e vitaminas. A rutina à um composto fenÃlico que possui vÃrias atividades biolÃgicas, tais como agentes antitumorais e propriedades antibacterianas. Com isso, o presente estudo objetivou avaliar a atividade antimicrobiana e antioxidante de extrato de rutina obtido de polpas e subprodutos de frutos tropicais encapsulado em matriz de goma do cajueiro. As frutas utilizadas foram: acerola, goiaba, manga e cajÃ-umbu. Elas foram despolpadas e caracterizadas fÃsico- e quimicamente. A polpa e o subproduto de acerola apresentaram maior atividade antioxidante total com 91,33 e 51,62 ÂM de Trolox. g-1, respectivamente. Sendo que os subprodutos de manga, goiaba e cajÃ-umbu obtiveram atividade antioxidante superior as suas respectivas polpas. A presenÃa de rutina foi observada em todas as polpas e subprodutos, sendo o subproduto de cajÃ-umbu o que obteve maior teor com 1852,40 Âg.g-1, seguido da polpa de acerola com 184,66 Âg.g-1. Esses extratos com maiores teores de rutina e rutina padrÃo (Sigma-Aldrich) foram encapsulados com goma do cajueiro. As nanopartÃculas formadas foram caracterizadas fisicamente e apresentaram tamanhos mÃdios variando de 174,20 nm a 907,60 nm. Ao avaliar o potencial antibacteriano, observou-se que a rutina e sua respectiva nanopartÃcula nÃo possuem essa propriedade contra as bactÃrias Eschechia coli, Salmonella Enteritidis, Staphylococcus aureus e Listeria monocytogenes na concentraÃÃo de atà 10 mg/mL. Os extratos de polpa de acerola (EPA) e subproduto de cajÃ-umbu (ESC) apresentaram atividade antibacteriana, sendo mais eficientes contra bactÃrias Gram-positivas. Os extratos nÃo encapsulados com goma do cajueiro foram mais efetivos do que os encapsulados. / In recent years the consumption of tropical fruits has increased, mainly due to its health benefits, including the low incidence of degenerative diseases. These benefits are awarded, mostly to the antioxidant constituents, such as phenolic compounds and vitamins. Rutin is a phenolic compound which possesses various biological activities such as antibacterial and antitumor agents. Thus, the present study aimed to evaluate the antimicrobial and antioxidant activities of extract rutin obtained from pulps and by-products of tropical fruits encapsulated array of cashew gum. The fruits used were: acerola, guava, mango and caja-umbu. They were pulped and characterized physico-chemically. The pulp and the by-product of acerola had higher total antioxidant activity with 91.33 and 51.62 mM Trolox. g-1, respectively. Since the by-products of mango, guava and caja-umbu had higher antioxidant activity their respective pulps. The presence of rutin was observed in all pulps and byproducts, and the byproduct of caja-umbu that obtained with higher content 1852.40 μg.g-1, followed of the pulp with 184.66 μg.g-1. These extracts with higher concentrations of rutin and standard rutin (Sigma-Aldrich) were encapsulated with cashew gum. The formed nanoparticles were characterized physically and showed average sizes ranging from 174.20 nm to 907.60 nm. In evaluating the antimicrobial activity, it was found that rutin and its respective nanoparticle do not have this property against bacteria Eschechia coli, Salmonella Enteritidis, Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes at a concentration of up to 10 mg / ml. The extracts of acerola pulp (EPA) and byproduct caja-umbu (ESC) showed antibacterial activity, being more effective against Gram-positive bacteria. Extracts not encapsulated with cashew gum were more effective than encapsulated.

Bauhinia forficata, Leguminosae, é conhecida popularmente como pata-devaca e seus principais constituintes químicos são flavonóides. Ë comumente usada como antidiabética, mas existem relatos a respeito de suas atividades antioxidante e antiedematogênica. A fim de avaliar-se o comportamento de seus constituintes químicos frente a variações de temperatura e umidade, realizou-se estudo de estabilidade acelerada (50 ºC ± 2 oC e 90% ± 5% U.R.), onde a substância química majoritária (SQM) serviu como marcador para os devidos cálculos e, portanto, o seu isolamento prévio tornou-se imprescindível. Um método devidamente validado por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) foi utilizado para as análises e através das mesmas pode-se predizer uma reação de segunda ordem e, por conseguinte, um tempo de vida útil de 2,63 dias e um tempo de meia-vida de 23,65 dias. Avaliou-se, ainda, as atividades antioxidante (DPPH), antiedematogênica (edema em pata de ratos induzido pela carragenina) e anticolinesterásica (autobiografia). Para a atividade antioxidante, dos extratos testados, o butanólico foi o que demonstrou maior ação (54,73 µl/ml) sendo, no entanto, inferior ao padrão Ginkgo biloba (42,51 µl/ml). Na avaliação da atividade antiedematogênica, o extrato aquoso testado demonstrou um máximo de inibição de 76,5%. Ao testar-se a atividade anticolinesterásica de produtos isolados obtidos a partir de B. forficata, nenhuma ação significativa foi observada exigindo estudos complementares.

O presente trabalho objetivou estudar as principais variáveis analíticas associadas aos métodos espectrofotométricos de quantificação do teor de taninos utilizando caseína e pó-de-pele, os reagentes de Folin-Denis e Folin-Ciocalteu, bem como a avaliação de diferentes tipos de PVPP (Divergan® F, Divergan® RS, Kollidon® CL e PVPP-P6755) na substituição dos substratos protéicos. Para tanto, dois métodos de análise, um espectrofotométrico e outro por CLAE foram desenvolvidos, utilizando os polifenóis catequina, ácido tânico, ácido gálico e pirogalol como substâncias de referência e rutina como flavonóide modelo. Para maiores inferências uma solução extrativa de folhas secas de Psidium guajava L também foi quantificada. A análise comparativa assinalou o uso vantajoso do reagente de Folin-Ciocalteu, em relação ao reagente de Folin-Denis. Em termos de reprodutibilidade, a caseína grau técnico (GT) mostrou-se superior à caseína purificada, embora essa última possua maior afinidade pelos polifenóis testados. Contudo, as análises por UV-VIS e por CLAE em comprimentos de onda de 280m e 352 nm, demonstraram que tanto a caseína GT quanto o pó-de-pele não são seletivos para complexar taninos, de acordo com as normas do ICH. Tanto o pó-de-pele quanto a caseína GT foram capazes de complexar polifenóis e rutina de maneira inespecífica. Isso foi evidenciado quando misturas de um único polifenol e rutina ou a fração flavonoídica de P. guajava foram testadas. A capacidade de complexação de polifenóis e rutina por parte da PVPP foi avaliada por UV-VIS, DSC e CLAE. Os melhores resultados foram observados para PVPP-P6755, no entanto com restrições. De maneira similar a caseína GT e pó-depele a PVPP-P6755 foram capazes de complexar de maneira inespecífica rutina e outros flavonóides do extrato de P. guajava. Uma validação plena para o caso específico de folhas de P. guajava é questionável. No entanto, o método baseado na utilização de PVPP mostrou-se passível de padronização utilizando 500,0 mg de pó de droga, 2,0 mL de reagente de Folin-Ciocalteu, tempo de leitura 30 min após adição desse reagente e quantificação em 760 nm. Sob essas condições, a análise comparativa demonstrou que 50,0 mg de PVPP foram, em termos analíticos, equivalentes a 100,0 mg de pó-de-pele ou a 750 mg de caseína GT.

Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2018-01-16T13:45:19Z No. of bitstreams: 1 GLAUCE CHRISTIAN ALVES DUARTE.PDF: 7412666 bytes, checksum: f0301da81bceac842c42e74f9d99cf80 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-16T13:45:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GLAUCE CHRISTIAN ALVES DUARTE.PDF: 7412666 bytes, checksum: f0301da81bceac842c42e74f9d99cf80 (MD5) / Santander Universidades / A Ipecacuanha é uma planta medicinal de grande interesse da indústria farmacêutica e representatividade econômica devido à atividade dos seus principais metabólitos emetina e cefalina. Considerando que esses metabólitos são encontrados nas raízes, sua colheita foi extrativista, colocando a espécie na lista de espécies ameaçadas de erosão genética e de extinção. Desse modo, o objetivo do presente estudo foi avaliar, por meio de técnicas de RMN, o efeito da sazonalidade associado a fatores agronômicos e climáticos sobre os teores de emetina e cefalina em indivíduos da espécie cultivados na região de Niterói. Os indivíduos foram cultivados sob 4 diferentes tipos de substrato e 3 diferentes graus de sombreamento. Foram realizadas 4 colheitas referentes às 4 estações do ano, no período de 1 ano. Os extratos brutos obtidos a partir das raízes foram submetidos à doseamento por CLAE-DAD e analisados por duas técnicas de RMN, a saber, RMN em solução e HRMAS. Nessa última técnica, foram realizadas análises dos extratos e das raízes pulverizadas. Os resultados de doseamento por CLAE-DAD mostraram que, no outono, os indivíduos cultivados em terra preta + areia + bokashi e 70% de sombreamento apresentaram os maiores teores de emetina e cefalina (0,63 e 1,84, respectivamente). Apesar de não ser possível quantificar os alcaloides por meio das técnicas de RMN, as análises quimiométricas vieram a corroborar com os resultados e mostraram uma tendência a agrupamento das amostras coletadas no inverno, o que sugere diferenças metabólicas nesta estação. Dessa forma, conclui-se que, tanto na técnica cromatográfica quanto na espectroscópica, a sazonalidade foi o principal fator determinante para a escolha do período ótimo de colheita na região onde o estudo foi conduzido / The Ipecac is a medicinal plant of great interest to the pharmaceutical and economic representativeness industry due to the activity of its main metabolites emetine and cephaeline. Considering that these metabolites are found in the roots, his crop was harvested by hand, placing the species on the list of species threatened by genetic erosion and extinction. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of seasonality associated with agronomic and climatic factors on the content of emetine and cephaeline in individuals grown in the Niteroi region by NMR techniques. Individuals were cultured in 4 different types of substrate and 3 degrees of shading. 4 samples were collected regarding the four seasons, in the period of 1 year. The crude extract obtained from roots were assayed by HPLC-DAD and analyzed by two NMR techniques, namely solution NMR and HRMAS. In the latter technique, analyzes were performed of extracts and powdered roots. The results of determination by HPLC-DAD showed that in the fall, the grown individuals in black soil + sand + Bokashi and 70% shading showed higher levels of emetine and cephalin (0.63 and 1.95, respectively). Although it is not possible to quantify the alkaloids by NMR techniques, chemometric analysis came to corroborate the results and showed a tendency to cluster the samples collected in winter, suggesting metabolic differences in this season. Thus, we concluded that both the chromatographic technique as in spectroscopy, seasonality was the main determining factor for choosing the optimal harvest period in the region where the study was conducted

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:31:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6049_1.pdf: 9661385 bytes, checksum: b6f80e4ca0d817f46550e8c8614f26ea (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / A introdução de novos agentes anti-retrovirais no mercado tem sido mais freqüente, fato este que evidencia a constante necessidade de obter agentes terapêuticos mais eficazes e com menores efeitos colaterais. Devido ao grande número de casos de portadores do HIV no mundo e à capacidade do vírus em sofrer mutação, nos meados da década de 90, uma nova classe de agentes anti-retrovirais foi desenvolvida, os inibidores da protease, dentre eles destacando-se o Sulfato de Indinavir. Este, tem como produto de referência no mercado o CRIXIVAN®, fabricado pela indústria farmacêutica Merck Sharp & Dohme® e disponibilizado para atender ao Programa de SIDA do Ministério da Saúde a um custo relativamente alto. Este estudo foi realizado em parceria com o Laboratório de Tecnologia dos Medicamentos do Departamento de Ciências Farmacêuticas da UFPE e o Laboratório Farmacêutico do Estado de Pernambuco (LAFEPE). Sendo assim, fez-se necessário o desenvolvimento farmacotécnico-industrial do Sulfato de Indinavir 400 mg cápsulas, o qual contemplou os estudos de pré-formulação qualitativa de excipientes, os testes de bancada e a transposição para escala industrial, buscando uma forma farmacêutica estável, produzida a baixo custo e com qualidade atendendo às Boas Práticas de Fabricação e, conseqüentemente permitindo um maior número de portadores do HIV acesso ao medicamento. Outro objetivo do estudo foi o desenvolvimento e a validação da metodologia analítica para quantificação da matéria-prima e produto acabado, por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), onde foram definidos os parâmetros analíticos para o método e as especificações para os produtos em análise. Dando continuidade, foi iniciado, para as cápsulas de Sulfato de Indinavir, o estudo de estabilidade, tomando-se como base a Resolução RE n° 560, publicada em 02 de abril de 2002 pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), que preconiza a utilização de parâmetros para realização da estabilidade acelerada e de longa duração. Também foi efetuado um estudo comparativo do produto desenvolvido Sulfato de Indinavir LAFEPE® e o de referência CRIXIVAN®. Os estudos realizados com as cápsulas desenvolvidas demonstraram que eles são equivalentes entre si, sendo esta a etapa que antecede o estudo de bioequivalência para permitir a disponibilização do Sulfato de Indinavir LAFEPE como Medicamento Genérico para o mercado nacional

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:31:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6051_1.pdf: 2108655 bytes, checksum: fef8a838f5b768e1f5a96c001928fe95 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / A -Lapachona (C15H14O3, MM 242,3), conhecida quimicamente por (3,4-dihidro-2,2-dimetil-2H-naftol[1,2-b]pirano-5,6-diona), é uma ortonaftoquinona de ocorrência natural isolada do ipê roxo ou pau d arco roxo (Tabebuia avellandae Lor), da família Bignoneaceae. Pesquisas recentes têm demonstrado seu excelente potencial antineoplásico, atuando por um mecanismo particular de apoptose contra diversos tipos de câncer humano, em especial neoplasias de ciclo celular muito lento como é o caso de algumas linhagens de próstata refratárias aos tratamentos convencionais. O desenvolvimento de uma forma farmacêutica que produza uma melhor disponibilidade do fármaco para a realização de ensaios clínicos em humanos e a comprovação da eficácia da -Lapachona em terapias antineoplásicas consiste em um passo de grande interesse para a oncologia clínica. Este estudo propôs o desenvolvimento da forma farmacêutica cápsula gelatinosa mole à base de -Lapachona, seguindo procedimentos e normas preconizadas pelas Boas Práticas de Fabricação e Controle, a partir de uma planificação qualitativa e quantitativa de excipientes, visando sua incorporação em protocolos de tratamentos quimioterápicos. A etapa inicial foi à caracterização físico-química e farmacotécnica do princípio ativo onde ficou comprovada a importância de se obter uma matéria-prima com alto grau de pureza, sem a presença de seu isômero -Lapachona. Neste trabalho foi desenvolvida e validada uma metodologia analítica por CLAE (coluna C18, fase móvel acetonitrila:ácido acético 0,25% (1:1), fluxo de 2mL/min, detector a  254nm), seguindo os parâmetros descritos na Resolução 899 da ANVISA, que permite quantificar a matéria-prima e o produto acabado, além de impurezas e produtos de degradação. Estudos de estabilidade do princípio ativo demonstraram que a -Lapachona sofre degradação física em presença de luz fluorescente. Lotes em escala semi-industrial estão sendo realizados para a otimização da formulação desenvolvida de cápsula mole e estabilidade do produto frente a diferentes constituintes de invólucros. Na seqüência será realizada a transposição para escala industrial

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:31:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6191_1.pdf: 1304520 bytes, checksum: a83bab1006e18b1f8f045ccd53a7eb36 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A política nacional de medicamentos genéricos (Lei n° 9.787 de 10 de fevereiro de 1999) é um instrumento que vem ampliando o acesso a medicamentos de qualidade (seguros e eficazes). Para tanto é necessário que métodos de análise em matrizes biológicas com uma maior seletividade e sensibilidade para quantificação de fármacos e/ou metabólitos sejam desenvolvidos e validados para posterior utilização em estudos de farmacocinética comparada (bioequivalência). No Brasil ainda é escasso o número de profissionais com formação acadêmica (Técnico-científica) para a condução de estudos de biodisponibilidade comparada, sobretudo na etapa analítica. Com o intuito de colaborar com a implementação desta política, o presente trabalho tem como objetivo desenvolver e validar métodos de análise de duas classes de antibióticos (Sulfonamidas e Fluoroquinolonas) em plasma humano e posterior aplicação na avaliação biofarmacêutica de diferentes formulações. Durante a formação foi realizado um aumento da complexidade das técnicas utilizadas desde a extração líquido-líquido (ELL) e utilização de cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por absorção no ultravioleta (CLAE-UV), extração em fase sólida (EFS) com auxílio de CLAE-UV e EFS seguida de cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por espectrometria de massas em tandem (CL-EM/EM). O desenvolvimento e validação de métodos bioanalíticos vai desde a seleção de sistemas cromatográficos e de detecção, técnica de extração e clean-up que gerem cromatogramas de qualidade, avaliação da estabilidade de fármacos na matriz biológica até o cumprimento dos critérios de aceitação das seqüências analíticas contendo amostras dos voluntários. Dentre as fluoroquinolonas o objeto de estudo foi o norfloxacino (NFX) comprimido de 400mg. Para extração e clean-up das amostras em plasma humano utilizou-se o método por ELL seguido de quantificação por CLAE-UV. Em meio às muitas sulfonamidas o objeto de estudo foi composto de duas formulações da associação de sulfametoxazol + trimetoprima (SMZ + TMP). Determinou-se simultaneamente a SMZ + TMP em plasma humano após administração da forma farmacêutica (FF) cápsula (400mg + 80mg) através de método de extração e clean-up em fase sólida off-line com posterior quantificação por CLAE-UV e após a administração da FF suspensão (400mg + 80mg / 10mL) por CL-EM/EM com ionização à pressão atmosférica através da técnica de eletronebulização ( Electrospray, ESI ) em modo positivo. A biodisponibilidade dos fármacos, a parir das formas farmacêuticas, foi avaliada através da análise estatística de parâmetros como Área sob a Curva (ASC), concentração plasmática máxima (Cmáx) segundo as normas (RE 898 de 29 de maio de 2003) da ANVISA. Os métodos analíticos foram desenvolvidos e validados segundo a RE 899 de 29 de maio de 2003 da ANVISA mostrando-se lineares, precisos, exatos e robustos frente ao elevado throughput de amostras. O método EFS-CL-MS/MS mostrou-se mais robusto pela maior limpeza dos interferentes da matriz plasmática e pelo menor tempo de análise (2.5 min) por amostra, diminuindo os resíduos de solventes da fase móvel bem como no procedimento de extração mostrando-se menos tóxico aos analistas e ao meio ambiente. Todos os métodos desenvolvidos se configuraram como ferramentas suficientemente capazes de discriminar a biodisponibilidade comparada dos medicamentos testados

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T20:06:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DanielaAlvesDeOliveira.pdf: 1704710 bytes, checksum: 2a7d863c9c37b44daa7f6af4648c5cd2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:06:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DanielaAlvesDeOliveira.pdf: 1704710 bytes, checksum: 2a7d863c9c37b44daa7f6af4648c5cd2 (MD5) Previous issue date: 2017-09-26 / Viticulture in Brazil has a great economic importance and an extension of approximately 80,000 hectares, generating employment and income for several families, however it is quite prone to infectious processes, which drastically reduces its productivity. Among these agents is Glomerella cingulata, which is controlled by fungicides, such as mancozeb. However, the use of this commercial product is related to contamination of the environment, in addition to a known toxic effect for humans. In this context the use of a naturally occurring substance, such as eugenol, could be a promising alternative. However, eugenol, which has an antimicrobial action, presents high volatilization and low solubility in water, thus impairing its administration and efficacy. One possibility to minimize toxicity of the fungicide, and the instability of eugenol, is nanoencapsulation. Therefore, the aim of this work was to verify the feasibility of co-encapsulation of mancozeb and eugenol in nanoemulsions and to evaluate the potential antifungal activity of nanoemulsions containing these compounds isolated and associated with Glomerella cingulata. Nanoemulsions containing eugenol (NE-E), mancozeb and eugenol (NE-ME), nanoemulsions with mancozeb (NE-M) and white nanoemulsions, without the active ones (NE-B) were prepared by the spontaneous emulsification method. The formulations were characterized according to mean diameter, polydispersity index (PDI), zeta potential, pH, content and morphology. The stability of the formulations for 30 days under different storage conditions and the antifungal activity against G. cingulata were also evaluated. The nanoemulsions had a mean diameter of approximately 200 nm, PDI of approximately 0.170, zeta potential of -11.0 mV, pH close to 5.0 and eugenol content, for NE-E and NE-ME, around 40%. Transmission electron microscopy showed spherical shape. The antifungal activity assay was performed by the macrodilution technique, and the active compounds were analyzed: free eugenol, mancozeb, mancozeb and eugenol and the same nanoencapsulated ones. The NE-M obtained a minimum inhibitory activity of 0.009 μg / mL, a satisfactory result, followed by NE-ME 0.02 μg / mL mancozeb + 2 μg/mL eugenol compared to its free forms. The best condition for storage of the formulations was under refrigeration and antifungal activity was potentiated after nanoencapsulation for all formulations. This study presents an innovative alternative for the treatment of G. cingulata through the use of nanotechnology. / A viticultura no Brasil apresenta uma grande importância econômica e uma extensão de aproximadamente 80.000 hectares, gerando emprego e renda para várias famílias, entretanto é bastante propensa a processos infecciosos, o que diminui drasticamente sua produtividade. Dentre estes agentes está a Glomerella cingulata, cujo controle é realizado por fungicidas, como o mancozebe. Entretanto o uso deste produto comercial está relacionado com contaminação do ambiente, além de conhecido efeito tóxico para os seres humanos. Neste contexto o uso de substância de origem natural, como o eugenol, poderia ser uma alternativa promissora. Entretanto, o eugenol, que possui ação antimicrobiana, apresenta alta volatilização e baixa solubilidade em água, prejudicando assim sua administração e eficácia. Uma possibilidade para minimizar a toxicidade do fungicida, e a instabilidade do eugenol, é a nanoencapsulação. Sendo assim, a proposta deste trabalho foi verificar a viabilidade de co-encapsulação do mancozebe e do eugenol em nanoemulsões e avaliar a potencial atividade antifúngica de nanoemulsões contendo estes compostos isolados e associados frente à Glomerella cingulata. Foram preparadas nanoemulsões contendo eugenol (NE-E), mancozebe e eugenol (NE- ME), nanoemulsões com mancozebe (NE-M) e nanoemulsões brancas, sem os ativos (NE-B) através do método emulsificação espontânea. As formulações, foram caracterizadas de acordo com diâmetro médio, índice de polidispersão (PDI), potencial zeta, pH, teor e morfologia. Também foi avaliada a estabilidade das formulações durante 30 dias em diferentes condições de armazenamento e a atividade antifúngica frente à G. cingulata. As nanoemulsões apresentaram diâmetro médio de aproximadamente 200 nm, PDI de aproximadamente 0,170, potencial zeta de -11,0 mV, pH próximo à 5,0 e teor de eugenol, para NE-E e NE-ME, em torno de 40%. A microscopia eletrônica de transmissão demonstrou formato esférico. O ensaio da atividade antifúngica foi realizado pela técnica de macrodiluição, sendo analisados os ativos: eugenol, mancozebe, mancozebe e eugenol livres e os mesmos nanoencapsulados. A NE-M, obteve uma atividade inibitória mínima de 0,009 μg/mL, resultado satisfatório, seguida da NE-ME 0,02 μg/mL de mancozebe e 2 μg/mL de eugenol, comparada a suas formas livres. A melhor condição para armazenamento das formulações foi sob refrigeração e a atividade antifúngica foi potencializada após nanoencapsulação para todas as formulações. Este estudo apresenta uma alternativa inovadora para o tratamento da G. cingulata através do emprego da nanotecnologia.